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ZEITSCHRIFT 



FÜR 



WISSENSCHAFTLICHE 



MIKROSKOPIE 



UND FÜR 



MIKROSKOPISCHE TECHNIK 



BEGRÜNDET VON Vf. J. BEHRENS 



Unter besonderer Mitwirkung 



von 



Prof. Dr. Paul Schieflferdecker und Dr. E. Sommerfeldt 



in Bonn in Tübingen 



herausgegeben 



von 



Dr. ernst Küster 



in Halle a. S. 



Band XXII 



(Jahrgang 1905) 



Mit 3 LichtdrucktHteln, 1 Steindrucktafel und -44: Holzsclmitten 



LEIPZIG 



Verlag von S. Hirzel 



1905 




Alle Rechte vorbehalten. 



X^ 




I n h a 1 1 s Y e r z e i c h n i s. 



I. Abhandlungen. 



Seite 



Ambronn, H. , Über pleochroitiscbe Silberkristalle und die Färbung 



mit Metallen 349 



Arbeit, E., Der Leitzsche Universal-Projektions-Apparat 363 



Arndt, G,, Beiträge zur Technik und Methodik der mikroskopischen 



Doppelsäge 104 



Bödecker, C. F., Eine Entkalkungsmethode für Gewebe, welche wenig 



organische Substanz enthalten, in§be;^ondere Zahnschmelz . . 190 

 Cagnetto, G. , Per la colorazione delle cellule cromofile dell'Hypo- 



physis cerebri 539 



Cristina, Di, Kuovo metodo per attaccare i tagli fatti da pezzi inclusi 



in celloidina 99 



Fiorentini, P. , ed Siguer, M. , Su di un Metodo di Colorazione e 



Conservazione permanente del Sedimento urinario 187 



Fischer, Alfr., Eine Sperrvorrichtung für mikroskopische Demon- 

 strationen 100 



Hansen, F. C. C, Über Eisenhämatein, Chromalaunhämatem , Ton- 

 erdealaunhämatein , Hämateinlösungen und einige Cochenille- 



farblösuugen 45 



Heidenhain, M., Die Trichloressigsäure als Fixierungsmittel. . . . 321 

 — , — , Über die Färbung von Knochenknorpel zu Kurszwecken'' . . 325 

 — , — , Über die Massenfärbung mikroskopischer Schnitte auf Glimmer- 

 platten 330 



— , — , Über die Anwendung des Azokarmins und der Chromotrope . 337 



Henneberg, Neues Mikrotom von Leitz 125 



Konaschko, P., Zur Technik der Injektion feiner Gefäße .... 179 

 Melissinos, K., Vorrichtung zur gleichzeitigen schnellen Färbung der 



auf Deckgläsern oder Objektträgern aufgeklebten Serienschnitte 130 




IV Inhaltsverzeichnis. 



Seite 



Metz, C. , Die Leitzsche Dunkelfeldbeleuchtung bei Verwendung der 



homogenen Ölimmersion 114 



Neumayer, L., Objektträgergestell zur Massenfärbung von auf- 

 geklebten Paraffinschnitten 181 



Pauly, Ant., Über eine einfache Methode zur Bestimmung der Brechungs- 

 exponenten von Flüssigkeiten 344 



Pavlow, AV., Kreosot als wasserentziehendes Mittel bei der Einbettung 



in Paraffin 18ß 



Peter, K., Der Anstrich der liichtebene 530 



Richter, Osw. , Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie seit 



Zimmermanns „Botanischer Mikrotechnik" 194, 3G9 



Ruzicka, VI., Zur Theorie der vitalen Färbung 91 



Schneider, J., u. Just, J., Ultramikroskoi^ie der Uleosole .... 481 

 Schouten, S. L. , Reinkulturen aus einer unter dem Mikroskop iso- 

 lierten Zelle 10 



Siding, A., Ein Beitrag zur Paraffinschneidetechnik 177 



Sommerfeldt , E. , Die mikroskopische Achsenwinkelbestimmung bei 



sehr kleinen Kristallpräparaten 356 



Strehl, K., Mikroskopisches Experiment 192 



— , — , Beugungsbild und Absorptionsbild 1 



Triepel, H., Ein Zylinder -Rotations -Mikrotom 118 



II. Referate. 



Abbe, E., Gesammelte Abhandlungen. Bd. IL (Wissenschaftliche Ab- 

 handlungen aus verschiedenen Gebieten, Patentschriften, Ge- 

 dächtnisreden) 544 



Abrikossolf, A. J., Über die ersten anatomischen Veränderungen bei 



Lungenphthise 439 



Albanese, N., Ein neuer Fall von Endotropismus des Pollenschlauches 

 und abnormer Embryosackentwicklung bei Sibbaldia pro- 

 cumbens L 299 



Allen, Ch. E. , Nuclear division in the pollen mothercells of Lilium 



canadense 461 



Arnold, J., Über Bau und Sekretion der Drüsen der Froschhaut ; zu- 

 gleich ein Beitrag zur Plasmosomen-Granulalehre 286 



Bab, H., Die Colostrumbildung als physiologisches Analogon zu Ent- 

 zündungsvorgängen. Gleichzeitig ein Beitrag zur Lehre von 

 den Leukocyten und deren Granulationen. Mit historischen 

 Darlegungen 272 



Backmund, K., Entwicklung der Haare und .Schweißdrüsen der 



Katze 285 



Bäckström, H., Ein Kugelgranit von Spitzbergen 588 




Inhaltsverzeichnis. V 



Seite 



Ballowitz, E., Die Riechzelien des Flußneunauges [Petrouiyzon Hu- 



viatilis] 160 



Bartel, J.. u. Stein, R., Lymphdrüsenbau und Tuberkulose . . . 568 



Baudi u. Simouelli, Über die Anwesenheit der Spirochaete pallida 

 in sekundär syphilitischen Manifestationen und über die zu 

 ihrem Nachweis angewendeten Fiirbungsmethoden 579 



Beck V. Managetta, G., Über die Verwendung der Persio- Essigsäure 



zu mikroskopischen Tinktionen 166 



Backe, F., Optische Untersuchungsmethoden 306 



— , — , Messung des Winkels der optischen Achsen aus der Hyperbel- 

 krümmung 464 



Behrens, H. , Reaktionen für den mikrochemischen Nachweis organi- 

 scher Basen 305 



Berliner, K. , Beiträge zur Histologie und Entwicklungsgeschichte 

 des Kleinhirns, nebst Bemerkungen über die Entwicklung der 

 Funktionstüchtigkeit derselben 566 



Björkenlieim, C. G., Beiträge zur Kenntnis des Pilzes in den Wurzel- 

 anschwellungen von Alnus incana 300 



Blumsteiu- Judina, B. , Die Pneumatisation des Markes der Vogel- 

 knochen 560 



Böhmer, C, Anleitung zur Untersuchung landwirtschaftlich wichtiger 

 Stoffe. Zum Gebrauch in landwirtschaftlichen und agrikultur- 

 chemischen Laboratorien und für die Praxis zusammengestellt 

 und bearbeitet 545 



Bösenberg, H. , Beiträge zur Kenntnis der Spermatogenese bei den 



Arachnoiden 426 



Boit, H., Einfache und sichere Identifizierung des Typhusbacillus . . 572 



Bordiert, M,, Über Markscheidenfärbung bei niederen Wirbeltieren . 153 



Bürdet, J., Une methode de culture des microbes anaerobies . . . 454 



Brand, F., Über die sogenannten Gasvakuolen und die differenten 



Spitzenzellen der Cyanophyceen, sowie über Schnellfärbung . 458 



Braun, F., Einige Beobachtungen, die sich auf künstliche Doppel- 

 brechung beziehen 302 



— , — , Herstellung doppelt brechender Körper aus isotropen Bestand- 

 teilen . 302 



Über metallische Gitterpolarisation, insbesondere ihre Anwen- 

 dung zur Deutung mikroskopischer Präparate 306 



— , — , Der Hertz sehe Gitterversuch im Gebiete der sichtbaren 



Strahlung 306 



Brauns, R., Mineralogie 304 



Bredig, G., u. Schukowsky, G. v., Prüfung der Natur der flüssigen 



Kristalle mittels elektrischer Kataphorese 305 



Brunnee, R., Polarisations -Mikroskoppolymeter 586 



Bürker, K., Notiz über eine neue Form der Zählkammer .... 554 



Buutiug, P. L., The Histology of Lymphatic Glands: the general 



Structure, the Reticulum and the Germ Centres 287 



Cajal, S. R., Das Neurofibrillennetz der Retina 155 



1 




VI Inhaltsverzeichnis. 



Seite 



Cajal, S, R., siehe auch Ramön y Cajal, 



Cameron, J., The Development of the Retina in Amphibia, an Embryo- 



logical and Cytological Study 290 



Cavalie, M., Les ramifications nerveuses dans Torgane electrique de 

 la torpille (Torpedo Galvani) [Dispositif fibrillaire dans les 



gaines des fibres nerveuses et autour d'elles] 278 



Chamberlain, Ch. J., Methods in Plant Histology 585 



Claussen, P., Zur Entwicklung der Ascomyceten. Boudiera . . . 297 

 Courmont, J. , et Andre, Ch. , Technique histologique permettant 

 de deceler sur les coupes les substances du groupe de la 



Purine, notamment l'acide urique 417 



Degen, A., Untersuchungen über die kontraktile Vakuole und die 



Wabenstruktur des Protoplasmas 552 



Depdolla, Ph., Untersuchungen über die Spermatogenese vom Lum- 



bricus terrestris 265 



Doelter, C, Die Silikatschmelzen 463 



Doerr, R., Beobachtungen über bazilläre Dysenterie 294 



Dogiel, A. S., Der librilläre Bau der Nervenendapparate in der 

 Haut des Menschen und der Säugetiere und die Neuronen- 



theorie 5G5 



Donaggio, A., Colorazione positiva delle libre nervöse nella fase 

 iniziale della degenerazione primaria e secondaria, sistematica 



or dififusa del sistema nervoso centrale 563 



Donaldson, H. H., a. Hoke, G, W., On the Areas of the Axis Cilinder 

 and meduUary Slieath as seen in cross Sections of the Spinal 



Nerves of Vertebrates 446 



Donau, Über die Färbung der Boraxperle durch kolloidal gelöste 



Edelmetalle 304 



Dreuw, Exstirpations- und Operationsfelder 137 



Driesseu, L. F., Zur Glykogenfärbung 422 



Dschiinkowsky, E., u. Luhs, S., Apparat zum sterilen Blutentnehmen 



zwecks Untersuchung 295 



Dubreuil, G., Le Picro-Bleu, note sur l'emploi de ce reactif pour la 

 coloration specifique des fibrilles conjonctives. Application ä 



l'etude du tissu reticule du ganglion lymphatique 420 



Dworetzky, A. , Erfahrungen mit der Spengler sehen Formalin- 

 methode zur Reinzüclitung von Tuberkelbazillen aus Bakterien- 

 gemischen 450 



Edens, Über Amyloidfärbung und Amyloiddegeneration 558 



Ei'dely, A., Untersuchungen über die Eigenschaften und die Ent- 

 stehung der Lymphe. Fünfte Mitteilung. Über die Beziehung 

 zwischen Bau und Funktion des lymphatischen Apparates des 



Darmes 427 



Ernst, A., Zur Kenntnis des Zellinhaltes von Derbesia 299 



Ferguson, Margaret C. , Contributions to the knowledge of the life 

 liistory of Pinus with special reference to sporogenesis, the 

 development of the gametophytes and fertilization .... 583 




Inhaltsverzeichnis. VII 



Seite 



Fernandez, M., Zur mikroskopischen Anatomie des Blutgefäßsystems 

 der Tunikaten. Nebst Bemerkungen zur Phylogenese des 

 Blutgefäßsystems im allgemeinen 142 



Fichera, G. , Über die Verteilung des Glykogens in verschiedenen 



Arten experimenteller Glykosurie 288 



Fischer, A., Die Zelle der Cyanophyceen 455 



— , — , Eine neue Glykogenfärbung 421 



Fischer, H. , Über die kolloidale Natur der Stärkekörner und ihr 

 Verhalten gegen Farbstoffe. Ein Beitrag zur Theorie der 

 Färbung 458 



Fischler, F., Über die Unterscheidung von Neutralfetten, Fettsäuren 



und Seifen im Gewebe 262 



Fleischer, B. , Beiträge zur Histologie der Tränendrüsen und zur 



Lehre von den Sekretgranula 162 



Floyd, R., A contribution to tlie nervous cytology of Periplaneta 



Orientalis, the common cockroach 143 



Gadzikiewicz, W., Über den feineren Bau des Herzens bei Malako- 



straken 141 



Gaehtgens, W., Der Bacillus jasmino-cyaneus und der Bacillus flavo- 



aromaticus, zwei neue Farbstoff bildende Bakterien .... 293 



Galli, G., Ein verbesserter Mischer zur Zählung der Blutkörperchen 148 



Giemsa, G., Bemerkungen zur Färbung der Spirochaete pallida . . 576 



— , — , Erwiderung zu vorstehenden Bemerkungen 578 



— , — , Eine Vereinfachung und Vervollkommnung meiner Methylenazur- 

 Methylenblau -Eosin -Färbemethode zur Erzielung der Roma- 

 NOw^SKi-NocHT sehen Chromatinfärbung 449 



Glas, E., Über intraepitheliale Drüsen, Cysten und Leukocytenhäufchen 



der menschlichen Nasenschleimhaut 286 



— , — , Zur Frage der Sarkolyse. [Erste Mitteilung über quergestreifte 

 Muskeln und deren Zerfallsprodukte im follikulären Gewebe 

 der Tonsille] 427 



Goldsteiu, K. , Untersuchungen über das Vorderhirn und Zwischen- 

 hirn einiger Knochenfische [nebst einigen Beiträgen über 

 Mittelhirn und Kleinhirn derselben] 565 



Grabower, Die Verteilung und Zahl der Nervenfasern in den Kehl- 

 kopfmuskeln und die Hinfälligkeit des Erweiterers der Stimmritze 279 



Gräfe, V., Eine neue Reihe von Holzreaktionen 581 



Groot, J. G. de, Ein neuer Kitt zum Schließen von Gefäßen mit 



Alkoholpräparaten auch für den Versand 136 



Haane, G., Über die Cardiadrüsen und Cardiadrüsenzone des Magens 



der Haussäugetiere 567 



Haberlandt, G, , Über die Plasmahaut der Chloroplasten in den 



Assimilationszellen von Selaginella Martensii Spring .... 584 



Ralphen, G. , et Riche, A., Contribution k l'etude des teintures 



histologiques 546 



Hansen, F. C. C, Untersuchungen über die Gruppe der Bindesub- 

 stanzen. I. Der Hyalinknorpel 433 




VIII Inhaltsverzeichnis. 



Seite 



Hai'desty, I., On the Development and Nature of the Neuroglia . . 157 



Harz, C. O. , Amylum, Amj'lodextrin und Erythrodextrin in ihrem 



Verhalten gegen Chromsäure 459 



Heinemann , Pli. , Untersuchungen über die Entwicklung des Meso- 

 derms und den Bau des Ruderschwanzes bei den Ascidien- 

 larven 424 



Helber, E., Über die Zählung der Blutplättchen im Blute des Menschen 



und ihr Verhalten bei pathologischen Zuständen 150 



— , — , Über die Entstehung der Blutplättchen und ihre Beziehungen 



zu den Spindelzellen 268 



HeHer, O,, Die RoTHBERGERSche Neutralrotreaktion auf Gelatine 



bei 370 292 



Herxheimer, K. , u. Hühner, H. , Über Darstellungsweise und Be- 

 fund der bei Lues vorkommenden Spirochaete pallida . . . 575 



Hinden, F., Neue Reaktionen zur Unterscheidung von Calcit und 



Dolomit 303 



Hirschler, J., Weitere Regenerationsstudien an Lepidopterenpuppen 



[Regeneration des vorderen Körperendes] 265 



Hlawatsch, C, Bestimmung der Doppelbrechung für verschiedene 



Farben an einigen Mineralien 302 



Hoffendahl , K. , Beitrag zur Entwicklungsgeschichte und Anatomie 



von Poecilasma aurantium Daravin 144 



Hus, Henri T. A., Spindle Formation in the PoUen-Mother-Cells of 



Cassia tomentosa B 582 



Illing, G. , Vergleichende histologische Untersuchungen über die 



Leber der Haussäugetiere 436 



— , — , Vergleichende makroskopische und mikroskopische Unter- 

 suchungen über die submaxillaren Speicheldrüsen der Haus- 

 säugetiere 284 



— , — , Über einen eigenartigen Befund in den Glandulae vesiculares 



und den Glandulae ductus deferentis des Rindes 570 



Imliof, G., Anatomie und Entwicklungsgeschichte des Lumbaimarkes 



bei den Vögeln 283 



JoHy, J. , Recherches experimentales sur la Division indirecte des 



Globules rouges 148 



Joris, H., Histogenese du Neurone 279 



Kamou, K., Über die Geruchsknospen 161 



Karakacheif, K. Iv., Über das Verhalten der Langerhans sehen 



Inseln des Pankreas bei Diabetes meUitus 435 



Keinath, K. Th. , Über den mikroskopischen Nachweis von Fett in 



normalen Muskeln 145 



Koch, A., Jahresbericht über die Fortschritte in der Lehre von den 



Gärungsorganismen 448 



König, E., Über Badeplatten 413 



Koii'ansky, Eugenie, Über eigentümliche Gebilde in den Leberzellen 



der Amphibien 288 




Inhaltsverzeichnis. IX 



Seite 



Koi)sch, F., Über den Kern der Thrombocyten und über einige 

 Methoden zur Einführung in das Studium der Säugetier- 

 Thrombocyten 268 



Kozowsky, A. D. , Zur Färbungsmethodik der Nervenfasern des 



Zentralnervensystems 277 



Kral, F., Zur Difterenzierung und objektiven Darstellung des Zell- 

 inhaltes von Hefe- und Spaltpilzen 296 



— , — , Über einfache expeditive Geißelfärbungsmethoden 295 



Kraus, A., Zur Färbung der Hyphomyceten im Horngewebe . . . 572 



Krebs , P. , Die Nervenendigungen im Musculus stapedius mit be- 

 sonderer Berücksichtigung der bei der Färbung angewandten 

 Technik 280 



Lams, H. , Contribution ä l'Etude de la Genese du vitellus dans 



rOvule des Teleosteens 16(3 



Laß , M. , Beiträge zur Kenntnis des histologisch-anatomischen Baues 

 des weiblichen Hundeflohes [Pulex canis Duges s. Pulex 

 serraticeps Taschenbero] 425 



Leake, H, M., The localization of the indigo-producing substance in 



indigo-pielding plants 461 



Lehmann, 0., Flüssige Misch- und Schichtkristalle 303 



Lenhossek, M. v., Ramöx y Cajals neue Fibrillenmethode . . . . 264 



Lenzmann , R. , Über eine vereinfachte Methode der Färbung von 



Bluttrockenpräparaten 431 



Lesage, Culture de l'amibe de la dysenteris des pays chauds . . . 140 



Leyen, E. von der, Über die Schleimzone des menschlichen Magen- 



und Darmepithels vor und nach der Geburt 435 



Liebreich, O., Über Blutkörperchenzählung mit dem Thoma-Zeiss- 



schen Apparat 554 



Liudner,P., Mikroskopische Betriebskontrolle in den Gärungsgewerben 

 mit einer,Einführung in die technische Biologie, Hefenreinkultur 

 und Infektionslehre 135 



London, E. S., Zur Lehre von dem feineren Bau des Nervensystems 447 



Luczizky , W. , Über die Dispersion der optischen Achsen bei den 



rhombischen Pyroxenen 464 



Lugiato, L., Degenerazioni secondarie sperimentali [da strappo dello 

 sciatico] studiate col metodo di Donaggio per le degenerazioni 

 — prima e seconda note 563 



Mark, E. L., A paraffine bath heated by electricity 548 



Merck, E., Prüfung der chemischen Reagentien auf Reinheit . . . 413 



Meves, F., Zur Wirkung von Säure auf die roten Blutkörperchen 



der Amphibien 291 



— , — , Über die Wirkung von Ammoniakdämpfen auf die roten Blut- 

 körperchen von Amphibien 556 



— , — , Über die Wirkung gefärbter Jodsäure auf die roten Blut- 

 körperchen der Amphibien. Vorläufige Mitteilung 430 



Meyburg , H. , Beitrag zur Kenntnis des Stadiums der „primären in 



toto konzentrischen" Knochenbildung 153 




X Inhaltsverzeichnis. 



Seite 



Meyer, P., Ein Verfahren zur Erzielung haltbarer Amyloidpräparate 571 



Michaelis, L., Ultramikroskopische Untersuchungen 423 



Michniewicz, H. R., Über Plasmodesmen in den Kotyledonen von 



Lupinus-Arten und ihre Beziehung zum interzellularen Plasma 300 

 Miyake, K., Über Reduktionsteilung in den Pollenmutterzellen einiger 



Monokotylen 460 



Möller, J. , Mikroskopie der Nahrungs- und Genußmittel aus dem 



Pflanzenreich 412 



Molisch, H., Über amorphes und kristallisiertes Anthokyan .... 459 



Mulon, P., Action de l'acide osmique sur les graisses 138 



3Iyers, B. D., Fixation of tissues by injection into the arteries . . 555 

 Nabias , B. de , Nouvelle methode de coloration rapide du Systeme 



nerveux au chlorure d'or 139 



Nicolle, F., Suite d'experiences relatives au phenomene de l'agglutina- 



tion des microbes 454 



Noeggerath u. Staehelin, Zum Nachweis der Spirochaete pallida im 



Blut Syphilitischer 578 



Nowack, K., Über die Grenzen der Verwertbarkeit des Malachit- 



grünagars 453 



Ocker-Blom, M., Bestimmung der elektrischen Leitfähigkeit mit Bezug 



auf bakteriologische Zwecke 451 



Oppenheim, 31., u. Sachs, O. , Eine einfache und schnelle Methode 



zur deutlichen Darstellung der Spirochaete pallida .... 579 

 Overton, J. B., Über Reduktionsteilung in den Pollenmutterzellen 



einiger Dikotylen 460 



Pensa, A. , Osservazioni suUa distribuzione dei vasi sanguigni e dei 



nervi nel pancreas 438 



Petersen, O., Über sekretorische Änderungen im Epithel der ab- 

 leitenden Harn wege bei einigen Säugetieren 569 



Phillii)S, D. P. A., Comparative Study of the Cytology and Move- 



ments of the Cyanophyceae 168 



Pighinl, G., Sur l'origine et la formation des cellules nerveuses chez 



les embryons des Selaciens 441 



Pinkiis, F., Über Hautsinnesorgane neben dem menschlichen Haar 



(Haarscheiben) und ihre vergleichend-anatomische Bedeutung . 160 

 Pötzsch, O., Über die Entwicklung von Niere, Perikard und Herz 



bei Planorbis corneus 161 



Porcile, V., Untersuchungen über die Herkunft der Plasmazellen in 



der Leber 164 



Porta, A. , Ricerche anatomiche suU'apparecchio velenifero di alcuni 



pesci 567 



Preisich, K., u. Heim, P., Über die Abstammung der Blutplättchen 266 

 Prytz , K. , Mikroskopische Bestimmung der Lage einer spiegelnden 



Fläche. Optischer Kontakt 588 



Quincke, G., Über Ausbreitung und Extensionskraft 301 



— , — , Doppelbrechung der Gallerte beim Aufquellen und Schrumpfen 301 

 Ramön y Cajal, S., Neuroglia y neurofibrillas dei lumbricus . . . 444 




Inhaltsverzeichnis. XI 



Seite 



Ramön y Cajal, S. , La methode h l'iii-gent reduit associee ä la 

 methode embryonnaire poiir Tetiide des noyaux moteurs et 

 sensitifs 273 



— , — , siehe aiicli Cajal, S. 



Ramön y Cajal, S., y Garcia, D. D. , Las lesiones del reticulo de 



las celulas nerviosas en la rabia 443 



Regaud, Cl., et Dubreuil, G., 8ur un nouveau procede d'argentation 



des epitheliums au moyen du protargol 418 



Reitmann, K., Zur Färbung der Spirochaete pallida 577 



Richards, Th. W,, a Wells, R, CL, The Nephelometer, an Instru- 

 ment tbr Detecting and Estimating opalescent Precipitations 304 



Rosenbusch, H. , Mikroskopische Physiographie der Mineralien und 



Gesteine 586 



Rossi, E., L'intima struttura delle cellule nervöse umane 273 



Riibaschkin, W., Studien über Neuroglia 158 



Rufflni, A., Di una nuova guaina [guaina sussidiaria] nel tratto 



terminale delle fibre nervöse di senso nell'uomo 447 



Rullmann , W. , Über das Verhalten des im Erdboden eingesäten 



Typhusbazillus 292 



Rftzicka, V. , Über tinktorielle Differenzen zwischen lebendem und 



abgestorbenem Protoplasma 548 



Sala, G., Beitrag zum Studium der feineren Struktur der Netzhaut . 291 



Schalfer, K. , Neurofibrillenpräparate nach der Bielschowsky sehen 



Methode 564 



Schmidt, .T. E., Beiträge zur normalen und pathologischen Histologie 

 einiger Zellarten der Schleimhaut des menschlichen Darm- 

 kanales 439 



Schmorl, G., Die pathologisch-histologischen Untersuchungsmethoden 134 



Scholz, F., Über Aceton-Celloidin-Schnelleinbettung 415 



Schridde, H.,- Beiträge zur Lehre von den Zellkörnclungen. Die 



Körnelungen der Plasmazellen 550 



Schröder, O. , Beiträge zur Kenntnis der Bauchsinnesorgane [Bauch- 

 augen] von Eunice virides Gray sp. [Palolo] 424 



SchüUer, M. , Über die Chromatinkörper der Krebs- und Sarkom- 

 parasiten des Menschen 451 



Schwarz, G. , Studien über im großen Netz des Kaninchens vor- 

 kommende Zellformen 434 



Seddig, M., Über „Wachstums"-Erscheinungen an Quecksilbertropfen 465 



Seiter, Über Sporenbildung bei Milzbrand und andern sporenbilden- 

 den Bakterien 573 



Senft, E., Mikroskopische Untersuchung des Wassers mit bezug auf 

 die in Abwässern und Schrautzwässern vorkommenden Mikro- 

 organismen und Verunreinigungen 412 



— , — , Über den mikrochemischen Zuckernachweis durch essigsaures 



Phenylhydrazin 298 



Shattuck, Charles H., A morphological Study of Ulmus americana . 463 



Shoemaker, D. N., On the Development of Hamamelis virginiana . 462 




XII Inhaltsverzeichnis. 



Seite 



Skrobansky, Eine Methode der nachträglichen Färbung mit Bleu de 



Lyon und Pikrinsäure 138 



Sniidt, E. F., Bacteria in relation to plant diseases. Vol. 1. Methods 

 of werk and general literature of bacteriologj^ exclusive of 

 plant diseases 580 



Srdinko, O. V., Eine sichere Methode zur Differenzierung der Rinden- 

 und Markelemente der Nebenniere, besonders bei Säugetieren 

 und Menschen 437 



Stark, M., Zusammenhang des Brechungsexponenten natürlicher Gläser 



mit ihrem Chemismus 307 



Stead, J. E., Micro-Metallography with practical Demonstration . . 464 



— , — , Methods for Detecting the mere Highly Phosphorised Portions 



in Iron and Steel 465 



Stern, M., Histologische Beiträge zur Sekretion der Bürzeldrüse . . 569 



Sternberg, K. , Eine Schnittfärbung nach der Romanowski sehen 



Methode 416 



Stoeltzuer, W., Über Metallfärbungen verkalkter Gewebeteile . . . 545 



Strasbiirger, E., Typische und allotypische Kernteilung. Ergebnisse 



und Erörterungen 460 



Stroß , O. , Über das Wachstum der Gonokokken auf serumhaltigen 



Nährböden 294 



Takayama, M,, Beiträge zur Toxikologie und gerichtlichen Medizin, 



nebst einem Vorwort von Prof. Dr. R. Kobert 557 



Tellyesuiczky, K. v., Aufkleben der Celloidinschnitte 137 



Thesing, C, Ein Wort zu dem Aufsatze von Dr. Giemsa „Bemer- 

 kungen zur Färbung der Spirochaete pallida" 578 



Thiroiix, Recher ches morphologiques et experimentales sur Trypano- 



soma paddae 140 



Thomson, R. B., The Megaspore-membrane of the Gymnosperms . . 583 



Thugiitt, St. J., Fritz Hindens „Neue Reaktionen zur Unterschei- 

 dung von Calcit und Dolomit 303 



Tiberti, N. , Über die Sekretionserscheinungen in den Nebennieren 



der Amphibien 164 



— , — , Mikroskopische Untersuchungen über die Sekretion des Pankreas 



bei entmilzten Tieren 165 



Triollet, M., Dispositif pour steriHser le catgut h l'autoclave . . . 454 



Turban, Demonstration und Erläuterung mikroskopischer Präparate 



von Tuberkulose 574 



Valediusky, I. A., Zur Frage über die Nervenknoten im Herzventrikel 



einiger Säugetiere. Vorläufige Mitteilung 44'2 



Vanino, S., u. Hartl, F., Über neue Bildungsweisen kolloidaler Lö- 

 sungen und das Verhalten derselben gegen Baryumeulfat . . 305 



Varela de la Iglesia, R. , Contribuciön al estudio de la luedula 



espinal 445 



Weidenreich, F., Studien über das Blut und die blutbildenden und 

 -zerstörenden Organe. 2. Bau und morphologische Stellung 

 der Blutlymphdrüsen 146 




Inhaltsverzeichnis. XIII 



Seite 



Weinscheuk, E., Über die Skelettteile der Kalkschwämme .... 587 

 Winslow, Ch.-E. A., Elements of applied Microscopy. A text-book 



for beginners 135 



AVoyeicki, Z., Einige neue Beiträge zur Entwicklungsgeschichte von 



Basidiobolus Ranarum 300 



Wuttig, H. , Experimentelle Untersuchungen über Fettaufnahme und 



Fettablagerung 43(j 



York, Harlan H., The Agar-Agar and Paraffin Method for imbedding 



Plant Tissues 4G2 



Zacharias, E., Über die Cyanophyceen 297 



Ziegler, K., Histologische Untersuchungen über das Ödem der Haut 



und des Unterhautzellgewebes 145 



Zietzschmaun , O., Über die acidophilen Leukocyten (Körnerzellen) 



des Pferdes 429 



Zlatogoroff, S. J., Zur Mikrobiologie der Masern 450 



— , — , Zur Morphologie und Biologie des Mikroben der Bubonenpest 



und des Pseudotuberkulosebacillus der Nagetiere [Bac. pseudo- 



tuberculosis rodentium] 452 




Verzeichnis der Mitarbeiter 



an Band XXll. 



Dr. Gr. Arndt in München. 



Prof. Dr. H. Ambronn in Jena. 



E. Arbeit in Wetzlar. 



Dr. E. A. Bessey in Miami (Florida). 



C. F. Bödecker in Berlin. 



Dr. G. Cagnetto in Padua. 



Dr. Di Cristina in Berlin. 



Dr. P. Fiorentiui in Messina. 



Prof. Dr. Alfr. Fischer in Basel. 



H. Freund in Halle a. S. 



Prof. Dr. F. C. C. Hansen in Kopenhagen. 



Prof. Dr. M. Heidenhain in Tübingen. 



Dr. 0. Henker in Jena. 



Prof. Henneberg in Gießen. 



Dr. W. Hoftmann in Berlin. 



Dr. J. Just in Prag. 



P. Kouaschko in Kiew. 



Dr. E. Küster in Halle a. S, 



Dr. 0. Levy in Halle a. S. 



Dr. K. Melissinos in Athen. 




Verzeichnis der Mitarbeiter an Band XXII. XV 



Dr. C. Metz in Wetzlar. 



Dr. L. Neumayer in München. 



A. Paiily in Wien. 



Prof. W. Pavlow in Charkow. 



Prof. Dr. K. Peter in Greifswald. 



Dr. 0. Richter in Prag. 



Dr. VI. Rüzicka in Prag. 



Prof. Dr. P. Schiefferdecker in Bonn. 



Prof. Dr. H. Schmaus t in München. 



Dr. J. Schneider in Prag. 



Dr. E. Schoebel in Neapel. 



Dr. S. L. Schonten in Utrecht. 



Dr. G. Seliber in Paris -Charlottenburg. 



Dr. A. Siding in Wien. 



M. Signer in Messina. 



Dr. E. Sommerfeldt in Tübingen. 



Prof. Dr. K. Strehl in Erlangen. 



Prof. Dr. H. Triepel in Greifswald -Breslau. 



W. Wangerin in Halle a. S. 





Band XXIL Heft 1. 



Beugungsbild und Absorptionsbild. 



Von 



Karl Strehl 



in Erlangen. 



In meiner Abhandlung: „Theorie der allgemeinen mikrosko- 

 pischen Abbildung" (Erlangen, 1900), welche scheinbar fast un- 

 bemerkt geblieben ist, habe ich gezeigt, daß es nur eine Theorie 

 der optischen Instrumente gibt, die Beugungstheorie, und daß die 

 sogenannten Theorien von Abbe und Rayleigh nur formal, nicht 

 sachlich verschiedene Betrachtungsweisen vorstellen, so wie man z. B. 

 auf dem Gebiete der Geometrie eine analytische und eine synthe- 

 tische Methode der Behandlung kennt. Die Wirkungsweise des 

 Mikroskops ist so "wenig anders wie die des Fernrohrs, daß wenn 

 z. B. ein Planet - — etwa Mars — gitterförmiges Detail nach Art 

 einer Diatomee zeigen würde, dann annähernd die Abbe sehe „Theorie" 

 anwendbar wäre.-^ Der Unterschied ist nur der, daß die Art der 

 Beleuchtung des Planeten durch die Sonne eine Resultante aller 

 möglichen Phasen erzeugt, während bei der Diatomee die Beleuchtungs- 

 weise mit streng gleicher Phase möglich ist. Es .handelt sich mithin 

 nicht um dies, welche Anschauungsweise die richtige sei, nur um 

 das, welche in jedem einzelnen Fall leichter zum Resultat führt. 



Um so merkwürdiger mußte es mich berühren, als ich in 

 „Dr. A. Winkelmann: Handbuch der Physik 2. Aufl. VI. Bd. 

 1. Hälfte, Optik I" p. 380 das Werk: „Stefan Apathy: Die 

 Mikrotechuik der tierischen Morphologie 2. Abt." (Leipzig, 1901) 

 zitiert fand, von welchem es heißt, daß es „die Abbe sehe Theorie 



1) Vgl. Zentralz. f. Optik u. Mach. Bd. XXVI, 1905, No. 6. 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 1. 1 




2 Strehl: Beugimgsbild und Absorptionsbild. XXII, 1. 



der mikroskopischen Bilderzeugimg bestreitet". Es schien lohnens- 

 wert, das Werk kommen zu lassen, und ich bin für die Mühe der 

 Durchsicht einigermaßen auf meine Kosten gekommen mit dem Erfolg, 

 daß ich im nachstehenden eine kritische Würdigung der Anschauungen 

 Apathy's bieten will, in dem Sinne, daß ich nicht sowohl bei den 

 zahllosen Eiuzelsätzen und fortgesetzten Wiederholungen des Ver- 

 fassers jeden einzelnen Satz bestätigen oder bestreiten werde — 

 dies würde Bände geben — wie vielmehr die meiner Ansicht nach 

 wichtigsten Punkte herausgreifend gleich meine Meinung kundgeben 

 möchte, wobei in Klammer hinten die Seitenzahl bei Apathy bezw. 

 Abbe beigefügt wird. 



Zunächst kann ich feststellen: ApAthy leugnet nicht die Abbe sehe 

 Theorie, er schränkt sie nur ein (517). Er ist nämlich der Ansicht, 

 daß das gewöhnliche mikroskopische Bild gleichsam eine Übereinauder- 

 lagerung von drei der Art nach gänzlich verschiedenen Bildern sei, 

 einem Beuguugsbild im Sinne Abbes, einem Refraktionsbild und einem 

 Absorptionsbild, welch' letzterem ApÄthy den Vorzug gibt. 



I. Beiiguiigstheorie und geometrische Optik. 



Eine Erörterung der theoretischen Verhältnisse erscheint schon 

 um so mehr augebracht, als bis auf diesen Tag Mängel der Theorie, 

 Mißverständnisse und Vermischung von Beugungstheorie und geo- 

 metrischer Optik sich die Hand reichen. 



So hat z. B. der Begriff: „schmaler Lichtkegel" Verwirrung 

 erzeugt. In dem Werk: „Gesammelte Abhandlungen von Ernst Abbe" 

 dürfte der Satz (291): „. . . nun war aber ohne jede weitere Rechnung 

 sogleich einleuchtend, daß der immer anwachsende Beugungseffekt 

 bei fortschreitender Verringerung des einfallenden Lichtkegels . . . 

 jedenfalls bei solchen schmalen Beleuchtungskegeln das der vollen 

 Öffnung zugängliche Detail längst ausgelöscht haben mußte" Mißver- 

 ständnissen ausgesetzt gewesen sein. Hier muß ich gleich bemerken, 

 daß es eine Wirkung dieses „schmalen Lichtkegels" überhaupt nicht 

 geben kann, mithin auch keine Beugungswirkung (513), weil er nur 

 ein Phantom der geometrischen Optik ist, vergleichbar einem aus je 

 einem Soldaten aller Nationen der Erde zusammengewürfelten 

 Bataillon. Beugungstheoretisch dürfen stets nur solche Strahlen 

 zusammengefaßt werden, welche kohärent d. h. interferenzfähig sind 




XXII, 1. Strehl: Beugungsbild und Absorptionsbild. 3 



und erzeugen auch bei selbstleuchtenden Objekten nur kohärente von 

 einem Inchtpunkt ausgehende Strahlen den Bildpunkt (519). 



Es ist z. B. falsch, daß bei sphärischer Aberration je nach Ein- 

 stellung verschiedene Ordnungen von Beugungsspektren zur Wirkung 

 kommen (566). Stets kommen alle Beugungsspektra, jedoch in ver- 

 schiedener sich störender oder gar zerstörender Weise zur Wirkung. 



Mit Recht rügt Apathy, daß Abbe die Sehtiefe ohne Rücksicht 

 auf die Theorie der sekundären Abbildung d. h. eben die Beugungs- 

 theorie behandelt (530). In meiner eingangs erwähnten Schrift ist 

 dem Maugel abgeholfen. 



Am merkwürdigsten dürfte sein, daß man zwar seit Abbe eine 

 Erklärung der Wirkung von Mikroskopobjektiveu auf beugungs- 

 theoretischer Grundlage — freilich nur ganz allgemein — hatte, die 

 Konstruktion und Untersuchung derselben aber meines Wissens bis 

 vor kurzem nach den Anschauungen der geometrischen Optik geschah. 

 Hier sucht meine Studie: „Untersuchung eines Mikroskopobjektives" 

 (Zeitschr. f. Instrumentenkunde Bd. XXV^, 1905, p. 3) Wandel zu 

 schaffen. 



II. Beugungsbild. 



1. Existenz der „Öffnungsbeugung". 



Abbe scheint mit dem Satz (293): „. • . daß bei der Abbildung. . . 

 mittels durchfallender oder reflektierter Strahlen eine Öftnungs- 

 beugung . . . überhaupt nicht eintreten kann, daß eine solche viel- 

 mehr prinzipiell auf den Fall selbstleuchtender Objekte beschränkt 

 ist" die vom Fernrohrobjektiv her bekannte ÖÖnungsbeugung d. h. 

 nicht etwa mißverstandenerweise die Beugung der Strahlen am 

 materiellen Rand der Fassung, sondern den für die Größe des 

 Bildpunktes wichtigen Umstand, daß die Glasscheiben nicht un- 

 begrenzt groß sind, ausdrücklich geleugnet zu haben (504). 

 Rayleigh gründet seine „Theorie" auf diese Öffnungsbeugung. 

 Tatsächlich existiert diese auch beim Mikroskop; denn was ist der 

 Umstand, daß der die num. Ap. bestimmende Rand der Fassung in 

 der hinteren Brennebene des Objektives die Beugungsspektra höherer 

 Ordnung abschneidet, mithin nur der mehr oder minder große mittlere 

 Teil der ganzen Beugungsfigur zur Wirkung kommt, anders als eben 

 Öffnungsbeugung? Man darf nur nicht vergessen, daß es neben den 



1* 




4 • Strehl: Beugungsbild und Absorptionsbild. XXII, 1. 



Maxima 1. Ordnung — nicht zu verwechseln mit den Ordnungen 

 der Beugiingsspektra; dies sind lauter Max. 1. Ordnung — schon 

 im einfachsten Fall auch solche 2. Ordnung gibt, ja strenggenommen 

 die Beugungsfigur stets kontinuierlich ist (512). Je mehr von dieser 

 abgeschnitten wird, desto schlechter wird die Abbildung. Es tut 

 gar nichts zur Sache, ob ich statt der hinteren Brennebene des 

 Objektives die Austrittspupille des ganzen Mikroskops über dem 

 Okular zu Rate ziehe. Ich bitte nur zu beachten, ' daß dort die- 

 selben Beugungsspektra nur in kleinem Maßstab sich wieder finden (506). 

 Wenn man die Austrittspupille verkleinert, dann werden Beugungs- 

 spektra abgeschnitten (507). 



2. Beseitigung der „OflFnungsbeugung". 



Apäthy bemüht sich mit der Frage der Beseitigung der Öff- 

 nungsbeugung. Diese kann natürlich nicht beseitigt werden (521, 

 bezw. 490), denn sie hängt mit der Art der Bilderzeugung zu- 

 sammen : Objektive von unendlicher linearer Öffnung bei endlicher 

 Tubuslänge, bezw. unendlich kleine Wellenlängen gibt es eben nicht. 

 Apathy hält es für nützlich die Lichtquelle in die Objektivöffnung 

 zu projizieren (520). Allein auch in diesem Falle kann das Bild 

 nicht als ein Schattenbild nach geometrisch -optischen Gesetzen auf- 

 gefaßt werden, vielmehr wird jede Stelle des Präparates zu einem 

 sekundären Lichtpunkt; wo die Beleuchtungsstrahlen an und für sich 

 ihren Schnittpunkt haben , ändert an der Sache gar nichts. Der 

 ganze Unterschied wäre der : Bei Projektion der Lichtquelle in die 

 Objektivöffnung wird ein großer Teil des Präparats mit kohärentem 

 Licht von kontinuierlich sich ändernder Phase beleuchtet. Bei Pro- 

 jektion einer selbstleuchtenden Lichtquelle in die Präparatebene 

 leuchtet das Präparat Stelle für Stelle mit gegenseitig inkohärentem 

 Licht. Ob wirklich erstere Beleuchtungsart — vielleicht infolge 

 von der über das Präparat wandernden Phasenverschiebung — einen 

 nennenswerten Vorteil ergibt , möchte ich dahingestellt sein lassen : 

 Die Öffnungsbeugung wird weder so noch anders beseitigt. 




XXII, 1. Strehl: Beugungsbild und Absorptiunsbild. 5 



III. Refraktionsbild. 



1. Schiefe Beleuchtung. 



Hier möchte ich zeigen , daß wenn schiefe Beleuchtung- bei 

 dickem Präparat ganz seltsame Dinge zeigt , man dann nicht erst 

 auf das Refraktionsbild zurückkommen muß, dies vielmehr beugungs- 

 theoretisch so sein muß. 



a) Streifen lose Schichten. 



Setzen wir voraus, das Präparat bestehe aus strukturlosen durch- 

 scheinenden Schichten parallel zur Tischebene mit den Abständen X. 

 Wenn wir gerade Beleuchtung mit enger Blende verwenden , dann 

 erblicken wir ohne Okular nur ein weißes ungebeugtes Hauptmaximum 

 ohne jedes Beugungsspektrum — vorausgesetzt ist natürlich ein 

 Objektiv von der num. Ap. = 1, mit Okular ein gleichförmiges Ge- 

 sichtsfeld. Wenn wir hingegen äußerst schiefe, d. h. wagrechte 

 Beleuchtung verwenden , dann wirkt das Präparat als Gitter und 

 sendet neben dem jetzt am Rand zu liegen kommenden weißen un- 

 gebeugten Hauptmaximum mindestens noch ein hier in die Achse 

 fallendes Beugungsspektrum in das Objektiv : wir erblicken eine zur 

 Verbindungsstrecke senkrechte Streifung. 



b) S ch i cht en 1 se Streifen. 



Setzen wir als Präparat strukturlose Streifen (im Sinne von Papier- 

 „streifen") senkrecht zur Tischebene mit den Abständen X voraus. 

 Bei gerader Beleuchtung erblicken wir unter Verwendung eines Ob- 

 jektivs von der num. Ap. = 1 natürlich ohne Okular ein weißes 

 ungebeugtes Hauptmaximum in der Achse und beiderseits am Rand 

 je ein Beugungsspektrum , mit Okular ein Bild der Streifung. Bei 

 äußerst schiefer (wagrechter) Beleuchtung kann das Präparat nicht 

 als Beugungsgitter wirken, wir erblicken ohne Okular nur ein weißes 

 ungebeugtes Hauptmaximum am Rand, mit Okular ein gleichförmiges 

 Gesichtsfeld. Daß man in Wirklichkeit auch in diesem Fall die Strei- 

 fuug sieht , kommt davon her , daß die notwendigen Bedingungen 

 sich schwer rein verwirklichen lassen; daß man für gewöhnlich bei 

 sehr schiefer Beleuchtung Streuungen äußerst scharf sieht, hängt 

 mit andern Verhältnissen zusaiiimen, d. h. man sollte sie eigentlich 




6 Strehl: Beugungsbild und Absorptionsbild. XXII, 1. 



bei gerader Beleuclituug ebenso scharf sehen, wären nicht hindernde 

 Umstände vorhanden. 



Wir sehen, schiefe Beleuchtung neigt dazu, an Stelle der Struktur 

 parallel zur Tischebene beim dicken Präparat die Struktur senkrecht 

 zur Tischebene zu zeigen. Wenn es auch nicht dazu kommt, daß 

 erstere ausgelöscht wird, dann wird es doch vorkommen, daß letztere 

 sich störend einmischt, und dies selbst bei gerader Beleuchtung am 

 Rand dicker Präparate aus dem umgekehrten Grunde. Ich bin des- 

 halb mit Abbe entschieden der Ansicht, daß dünne Präparate und 

 gerade Beleuchtung die wissenschaftliche Normalbeobachtungsform ist. 



2. Refraktionsbild. 



Gleichwohl will ich Apathy nicht unrecht geben ; es gibt zweifels- 

 ohne Wirkungen der Absorption (Schatten) , Brechung , totalen und 

 partiellen Reflexion (Richtungsänderung) , Verzögerung (Phasenände- 

 rung) im Präparat (574). Nur darf man sich ja nicht vorstellen, 

 daß diese Prozesse im Gebiete der Größenordnung der Wellenlänge 

 auch durchaus so verlaufen müssen, wie an Objekten von endlicher 

 Größe. 



Die Experimente von Braun (Nachahmung der elektrischen Ver- 

 suche von Hertz mit Lichtwellen an mikroskopischen Gittern) haben 

 vielmehr ergeben , daß je nach der Größe der Gitterkonstante die 

 Polarisation bald senkrecht, bald parallel zu den Gitterstäben ver- 

 läuft. Theoretische Untersuchungen über die Polarisation des Lichtes 

 bei Spiegelung an Kugeln von der Größe X ergaben verschiedene 

 Resultate bezüglich des günstigsten Polarisationswinkels für Kugeln 

 aus Metall und Kugeln aus dielektrischen Stoff'en. Praktische Unter- 

 suchungen ergaben eine verschiedene Reflexions- bezw. Zerstreuungs- 

 fähigkeit an Kugeln von der Größe einer Wellenlänge und Kugeln, 

 welche klein gegen l sind (Rayleigh). Durch Moleküle geht das 

 Licht möglicherweise ohne Richtungsänderung, nur geschwächt und 

 freilich mit Phasenänderung, hindurch. 



Ich bin der Ansicht: Wie sich elektrische Wellen gegen Objekte 

 von gewöhnlicher Größe verhalten , so verhalten sich Lichtwellen 

 gegen mikroskopische Objekte. Die Durchleuchtung mikroskopischer 

 Präparate ist ein Abbild im kleinen der Telegraphie ohne Draht 

 durch Hindernisse. Aus letzterer wird man vielleicht noch bezw. 

 erst viel über erstere erfahren. 




XXII, 1. Strehl: Beugungsbild und Absorptionsbild. 



IV. Al)Sorptionsbil(l. 



Nach Apathy sind die beiden Bedingungen des reinen Absorp- 

 tionsbildes : 1) Die Lichtbrechimgeu im Objekt müssen ausgeglichen 

 werden. 2) Beleuchtung mit voller Apertur (572). 



1. Färbungsbild. 



Daß sich die Zwischen- und Querscheiben beim quergestreiften 

 Muskel färben lassen, halte auch ich für sehr wichtig (582). Nur 

 muß man berücksichtigen, daß verschiedene Färbbarkeit bezw. sogar 

 Färbung nicht immer Anzeiclien stofflicher Verschiedenheit, manchmal 

 nur von verschiedener Diclitigkeit sein wird. 



Abbes Unterscheidung zwischen Absorptionsbild und Struktur- 

 bild, die er später glücklich fallen ließ, denn beides sind Beugungs- 

 bilder, hat gar nichts zu tun mit Apathys Färbungsbild (508). 



2. Selbstleuchtendes Bild. 



Wenn man mit einem Kondensor von größerer Apertur als das 

 Objektiv das Bild einer selbstleuchtenden Lichtquelle in die Präparat- 

 ebene wirft, dann leuchtet jede noch auflösbare Stelle mit eigenem 

 (inkohärentem) Licht. Auch dies ist gleichsam ein Färbungsbild, 

 nur für gewöhnlich arm an Farben : hell und dunkel. Auf diese 

 Weise betrachtet man ja die Bakterien. Indem Apa'thy nach Mög- 

 lichkeit färbt, macht er sich von der Bedingung des Selbstleuchtens 

 frei ; denn z. B. ein rotes Korn und ein blaues Korn nebeneinander 

 leuchten auch mit gegenseitig interferenzunfähigem Licht. 



Durch die Aufhellung des Präparates (Beseitigung von allen 

 Lichtbrechungen) sucht Apathy Störungen fernzuhalten, durch Be- 

 leuchtung mit voller Apertur das leider durch die Aberrationen der 

 Objektive getrübte Maximum des Auflösungsvermögens zu erzielen. 

 Dieser Weg ist rationell. 



V. Vergleichuug (Mischbild). 



Für gewöhnlich hat man nun nach Apathy eine Mischung von 

 Beugung (im engeren Sinne) , Refraktion (im weitesten Sinne) und 




8 Strehl: Beugungsbild und Absorptionsbild. XXII, 1. 



Absorption. Diesen gestörten Durchgang des Lichtes durch ein 

 Präparat nannte ich in meiner Abhandlung „Beugung" schlechthin. 

 Je nachdem man Planspiegel, Hohlspiegel, direkte oder indirekte 

 Lichtquelle, Kondensor mit großer oder kleiner Öffnung und scharfer 

 oder unscharfer Einstellung verwendet, wird die Wirkung verschieden 

 (554) , indem bald mehr , bald weniger benachbarte Elemente mit 

 kohärentem Lichte von größerer oder kleinerer PhasendifFerenz be- 

 leuchtet werden. Rechnerisch ist nichts unmöglich, nur müßte man 

 stets die Bedingungen genau kennen und ist die Rechnung nicht 

 immer kurz. Helmiioltz , Abbe , Rayleigh behandelten in ihrer 

 „Theorie" ja nur die allereinfachsten Sonderfälle. Ich bin syste- 

 matisch weiter gegangen, soweit dies einen Sinn hat. Bei den kom- 

 plizierten Beobachtungsfällen heißt es eben : „Probieren geht über 

 Studieren." 



1. Auflösungsvermögen. 



Isolierte helle Objekte sind bei genügend intensiver Beleuchtung 

 bis fast zur Eiweißmolekülgröße herab sichtbar. 



Isolierte dunkle Objekte erfordern eine gewisse Größe, um sicht- 

 bar zu sein (vgl. meine demnächst in der Instrumentenkunde er- 

 scheinende „Astrophotometrie"). 



Etwas anders ist die Trennung mehrerer Objekte, und wieder 

 verschieden die von 2 oder oc vielen, beleuchteten oder selbstleuchten- 

 den, Punkten oder Geraden oder Flächen, hellen auf dunklem oder 

 dunklen auf hellem Grund. All diese Fälle habe ich längst berechnet. 

 Mikroskop oder Fernrohr macht hier keinen Unterschied. Sehr ver- 

 schieden sind die Werte im allgemeinen nicht (582). 



ApATHYS Absorptionsbild ergibt dem allgemeinen Auflösungs- 

 vermögen nach keine Verbesserung. Wenn ein rotes und ein grünes 

 Korn in nicht mehr auflösbarem Abstand nebeneinander liegen, dann 

 verschmelzen eben das runde rote und das runde grüne zu einem 

 links rot, in der Mitte weiß, rechts grün gefärbtem ovalen Beugungs- 

 scheibchen (553). Gewonnen wird hierdurch im wesentlichen nichts. 



2. Objektähnlichkeit. 



Die Erklärung der verschiedenen Pleurosigmabilder blieb nicht 

 etwa bei einem vergeblichen Versuch stehen (567) ; ich empfehle 




XXII, 1. S t r e h 1 : Beugungsbild und Absorptionsbild. 9 



diesbezüglich das Studium meiner Abhandlung : „Das Pleurosigma- 

 bild" fZeitschr. f. Instrumentenkunde XIX, p. 325, 1899). 



Daß das Beugnngsbild zu zahllosen Täuschungen Anlaß gibt, 

 ist nicht neu und längst erörtert, besonders der Begritf „Tiefenbild". 

 Es fand denn auch Apathy bei Triceratium und verschiedener Ein- 

 stellung nicht weniger als 15 Bilder, welche von der Lage der 

 Schale niclit abhängen , und 2 , welche bei Ümwendung derselben 

 umgekehrte Einstellung erfordern (514). 



Ich halte es für glaubhaft, daß Apathys Färbungsbild nach 

 der Seite der Objektähnlichkeit einen Fortschritt darstellt, und daß 

 er auf diese Weise neue und wichtige Resultate fand, ohne die letz- 

 teren selbst beurteilen zu können. 



Wenn Abbe sagt (291), „denn beim wirklichen Gebrauch stär- 

 kerer Objektive hatte ich, außer für ganz exzeptionelle Zwecke, nie- 

 mals eine andere (Beleuchtung) in Anwendung, oder auch nur mit 

 Vorteil anwendbar gefunden", dann möchte ich bemerken, daß Abbe 

 in erster Linie Physiker war, auch daß sich sein „schmaler Licht- 

 kegel" auf die Unterscheidung an dünnen Präparaten bezog (510). 



Tl. Beleuchtungsstärke. 



„Planspiegel" ist nichts anderes als „Lochblende" bei direkt 

 gegen eine Lichtquelle gehaltenem Tubus. 



„Hohlspiegel" ist nichts anderes als „Planspiegel -|- Linse". 



Der allgemeinste Fall ist theoretisch eine Linse vom Öffnuugs- 

 halbmesser r und der Brennweite /", im Abstand d vom Präparat, 

 das Mikroskop direkt auf eine (runde) Lichtquelle von der halben 

 Winkelöffnung 99 und dem spezitischen Leuchtvermögen e gerichtet. 



Die in 1 sec durch 1 qmm der Linsenöffnung gehende Licht- 

 menge ist proportional e sin' cp ; wäre keine Linse da , wäre dies 

 die Wirkung des Planspiegels auf die Präparatebene (vorausgesetzt, 

 daß vom Präparat aus die ganze Lichtquelle durch den Planspiegel 

 übersehbar ist; außerdem hätte man 99 eben zu reduzieren). 



Die durch die Linse eintretende Lichtmenge e sin- 99 • >■- n (wo- 

 bei alles in mm zu messen) wird konzentriert auf die Kreisfläche s-71 

 in der Präparatebene. Die Wirkung des Kondensors auf die Prä- 

 paratebene ist mithin e sin" 99 • V'^js^'^ um s zu berechnen, setze man 

 zunächst o = f- tan 99 = Radius des Bildes der Lichtquelle und hat 




10 Schouten: Reinkulturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII, 1. 



schließlich s = r — (r — 0) • djf-^ bei scharfer Einstellung des Kon- 

 densors ist die Wirkung auf die Präparatebene s sin'-^ 99 • r-/a-. 



Schließlich möchte ich noch erwähnen, daß der Kondensor den 

 Wolkenhimmel oder staubige Fenster mehr oder minder scharf in 

 der Präparatebene abbildet und aus diesem rein praktischen Grund 

 oft Anlaß zu schlechten Bildern gibt. 



[Eingegangen am 24. Februar 1905.] 



[Aus dem botanischen und dem hygienischen Institut der Universität 



in Utrecht.] 



Reinkulturen aus einer unter dem Mikroskop 



isolierten Zelle. 



Von 



Dr. S. L. Schouten 



in Utrecht. 



Hierzu dreizehn Holzschnitte. 



Einleitung. 



Kochs Plattenkulturmethode ist es zu danken, daß das Studium 

 der Mikroorganismen und speziell die Bakteriologie in der letzten 

 Zeit so außerordentliche Fortschritte gemacht haben. Aber dennoch 

 ist die Herstellung einer Reinkultur vieler Mikroorganismen noch 

 ein ungelöstes Rätsel. 



Viele Forscher v^^erden meinen, dieses sei nicht die Folge eines 

 Mangels, welchen diese Methode als solche hat, sondern es hänge 

 vielmehr damit zusammen , daß die richtige Zusammensetzung des 

 Nährbodens in solchen Fällen noch unbekannt ist. Sie denken, daß 

 die Herstellung einer Reinkultur vermittels der Plattenkulturmethode 

 sicherlich gelingen wird, wenn diese erst gefimden ist. 



Obgleich es mir selbstverständlich fern liegt, Kochs geniale 

 Erfindung auch nur im geringsten zu bekritteln , ich vielmehr ihren 




XXII, 1. Schonten: Reinkultureneiner unter d. Mikroskop isoliert. Zelle, n 



Wert voll anerkenne , glaube ich doch , daß obige Meinung falsch 

 ist , und daß im Verfahren selbst die Ursache dafür liegen kann, 

 daß es bisher bei vielen Mikroorganismen resultatlos verwendet, 

 wurde. 



Das ist z. B. der Fall bei verschiedenen größeren Organismen, 

 welche in Medien vorkommen, worin sich zugleich viel Bakterien 

 befinden, wie Amöben, Infusorien, große Sporen von Pilzen, von 

 Myxomyceten etc. Ich glaube, daß die Reinkultur solcher Organismen 

 oft deshalb mißglückt ist , weil es außerordentlich schwierig ist , sie 

 durch Schütteln (der Hauptfaktor der Plattenkulturmethode) von den 

 Bakterien zu befreien , die in ihrer unmittelbaren Nähe liegen oder 

 auf ihrer Außenseite festsitzen ; die Folge ist , daß wolil Kolonien 

 entstehen, aber daß nach kürzerer oder längerer Zeit sich doch die 

 Verunreinigungen durch Bakterien zeigen. 



Auch ist es möglich, daß die chemischen Eigenschaften der 

 Gelatine als solche schädlich auf die Entwicklung wirken. Das ist 

 z. B. durch Winogradsky bewiesen für die Nitrit- und Nitrat-bildenden 

 Bakterien in der Erde. Diese können auf Nährböden, welche reich 

 an organischen Nährstoffen sind , nicht gedeihen. Es ist durchaus 

 nicht gewagt , a priori anzunehmen , daß dies mit mehreren Arten 

 von Bakterien der Fall ist , welche man bisher noch nicht in Rein- 

 zucht hat gewinnen können. 



Endlich kann vielleicht die physische Natur der Gelatine, 

 nämlich die Tatsache , daß sie einen festen Nährboden liefert , der 

 Grund sein für die negativen Resultate , die man bisher bei einigen 

 Organismen erzielt hat. Wenn diese nämlich in der Natur nur in 

 flüssigen Medien vorkommen und auch ihr Bau (z. B. der Besitz von 

 Cilien) und ihre Lebensverrichtungen fz. B. schnelle Bewegung) ver- 

 raten, daß sie speziell für flüssige Medien geeignet sind, dann wird 

 man sich a priori nicht wundern, daß man unter ihnen einige findet, 

 die auf einem festen Nährboden weniger gut oder überhaupt nicht 

 wachsen können. Das kann z. B. zugleich mit den oben angegebenen 

 Gründen eine der Ursachen sein , daß Amöben und Myxomyceten, 

 die in ihrer Entwicklung ein Schwärmerstadium durchlaufen , sowie 

 Infusorien und viele Bakterien, die sehr beweglich sind, noch nicht 

 rein gezüchtet werden konnten. 



Doch, was auch die Gründe sein mögen , es ist eine Tatsache, 

 daß man von vielen Organismen auf keinerlei Weise , auch nicht 

 vermittels der Plattenkulturmethode , eine Reinkultur hat herstellen 

 können. 




12 Scheuten: Reinkulturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII, 1. 



Diese und andere Gründe ließen es mir als nicht überflüssig 

 erscheinen, auf dem Gebiete der Eeinknlturtechnik einmal einen ganz 

 neuen Weg zu versuchen und zu sehen, zu welchen Resultaten ich 

 damit kommen würde. 



Die Resultate sind in kurzen Worten folgende. Man kann mit 

 Hilfe von feinen Glasnadeln , deren Bewegung vermittels einer be- 

 stimmten Mechanik vollständig geregelt wird , aus einem Gemenge 

 verschiedener Mikroorganismen einen beliebigen isolieren und 

 auf einen Nährboden überführen. Zu diesem Zweck bringt man von 

 dem Material, aus dem man eine Zelle isolieren will, einen Tropfen 

 auf ein Deckglas und daneben in einigem Abstand einen Tropfen 

 von dem Nährboden, in welchem die Kultur entstehen soll. Das 

 Deckglas wird auf eine feuchte Kammer gelegt, die sich auf dem 

 Objekttisch des Mikroskops befindet, und durch deren Seitenwände 

 man die genannten Nadeln so gestochen hat , daß sie mit ihren 

 Spitzen das Deckglas berühren können. Vermittels der Nadeln kann 

 man nun mit der stärksten Vergrößerung eine Bakterie oder eine 

 andere Zelle aus dem Tropfen isolieren und in einen andern über- 

 führen. Danach wird das Deckglas auf eine einfache feuchte Kammer 

 gelegt, die, wenn nötig, in einen Brutschrank gesetzt werden kann. 

 Das Wachstum der Kolonie kann von Anfang an dann auch mit der 

 stärksten Vergrößerung beobachtet werden. 



Nicht nur für den oben beschriebenen Zweck , die Gewinnung 

 von Reinkulturen im allgemeinen, sondern auch für viele andere 

 Probleme , welche man nicht im voraus zu bestimmen imstande ist, 

 kann die neue Methode nützlich sein. Es muß doch im allgemeinen 

 von großem Interesse sein, daß mau jetzt eine Bakterie oder etwaige 

 andere Mikroorganismen ebensogut „aussäen" kann als eine höhere 

 Pflanze, daß man ilire Entwicklung von Anfang an beobachten, daß 

 man sie, mit einem Wort, individuell behandeln kann. 



Auf ein Problem, für welches ich die Methode besonders ge- 

 eignet halte, und worüber ich weiter unten einige Versuche mit- 

 teilen werde , will ich schon jetzt weisen. Ich meine das der 

 Variabilität und der Pleomorphie. Jedermann muß zugeben, daß 

 auf diesem Gebiete noch viel methodisch gearbeitet werden muß. 

 Wer nur ein wenig tiefer in die Bakteriologie und speziell in die 

 bakteriologische Systematik eindringt, wird zu dem traurigen Schluß 

 kommen, daß durch die unmethodischen Arbeiten vieler Forscher 

 der letzten .lahre das Material wie in einem Augiasställe aufgehäuft 

 ist. Es wäre wünschenswert, daß man endlich einmal ein Ende 




XXII, 1. Schouten: Reinkulturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. 13 



machte mit dem oft ganz unmotivierten Beschreiben „neuer" Arten. 

 Viele Forscher , welche jetzt irgendwo eine Bakterie finden , stellen 

 eine Kulturplatte dar, beobachten das Wachstum auf einigen der 

 gebräuchlichsten Nährböden und warten ab, ob sie eine Ähnlichkeit 

 mit einer schon bestehenden Art konstatieren können. Finden sie 

 diese nicht gleich bei ihren ersten Versuchen, dann glauben sie der 

 Wissenschaft wunders einen Dienst zu erweisen, wenn sie die „neue" 

 Art, begleitet von einer Diagnose, die in gar vieler Beziehung dunkel 

 ist oder größtenteils sich in allgemeinen Ausdrücken bewegt, in die 

 Welt schicken. Darum aber bekümmern sie sich nicht , welchen 

 ändernden Einfluß etwa frühere Lebensumstände auf die gefundene 

 Bakterie gehabt haben können, oder welche Modifikationen die von 

 ihnen verwendeten Nährböden imstande sind noch zu verursachen. 

 Und das sind doch, neben vielen andern, immerhin sehr belangreiche 

 Faktoren. Daher kommt es, daß man viele Arten, die man anfäng- 

 lich als verschieden ansah, später doch als gleich beurteilen lernte, 

 daß man es mit andern Worten mit pleomorphen Formen zu tun 

 gehabt hatte , und daß man anderseits Arten , die man früher für 

 gleich angesehen hatte, scheiden mußte. 



Wie dem auch sei, es herrscht eine entsetzliche Verwirrung 

 auf dem Gebiete der bakteriologischen Systematik, einmal infolge 

 der großen Schwierigkeiten, die das zu bearbeitende Material selbst 

 für den kundigsten Forscher hat, dann infolge des unachtsamen und 

 flüchtigen Arbeitens anderer. Will man dieser Verwirrung so viel 

 als möglich Einhalt tun, dann muß vor allem die Variabilität und 

 der Pleomorphismus gründlich studiert werden. Und für ein solches 

 Studium ist es notwendig, darüber durchaus sicher zu sein, daß man 

 bei der Herstellung der Reinkultur auch wirklich von nur einer Zelle 

 ausgegangen ist. 



Ferner muß man unbedingt jede folgende Generation für sich 

 imtersuchen können, wenn man einen Mikroorganismus sich unter 

 veränderten äußeren Umständen teilen läßt, ebensogut wie man bei 

 höheren Pflanzen alle aufeinander folgenden Generationen auf diesen 

 Punkt untersuchen kann. Wenn man z. B. dem nachgehen will, was 

 für einen verändernden Einfluß eine sauere Nährflüssigkeit auf einen 

 bestimmten einzelligen Organismus a hat, dann muß man a sich in 

 der saueren Flüssigkeit in zwei Zellen a^ -\- a^ teilen lassen können, 

 die eine Zelle a^ sofort auf einen gewöhnlichen Nährboden bringen, 

 die andere sich wiederum in a.^ -(- «3 teilen lassen können. Danach 

 muß man wieder die eine Zelle «„ ^nf denselben gewöhnlichen Nähr- 




14 Schonten: Reinkultureneinerunterd. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII. 1. 



bodeu bringen, und die andere sich wiederum zu a.^-\-a^ teilen 

 lassen, etc. Auf solche Weise erhält man Kulturen der aufeinander 

 folgenden Generationen a^^ a.^j a.^ etc., und kann studieren, inwie- 

 weit die veränderten P^ormen allmälilich ineinander übergehen 

 oder auch sprungweise durch Mutation auseinander ent- 

 standen sind. 



Ich bilde mir durchaus niclit ein, daß diese meine Methode ein 

 Mittel ist, mit der man alle möglichen Reinkulturen herstellen kann 

 (denn welche Methode ist überhaupt unbegrenzt brauchbar!), oder 

 daß sie gar die schon bestehende Reinkulturmethode, die in so 

 vieler Beziehung ausgezeichnete Plattenkulturmethode verdrängen wird. 

 Ich kann mir sehr gut Fälle vorstellen, in denen sie nicht bequem, 

 vielleicht gar nicht anwendbar ist, z. B. wenn die Bakterien sich 

 zwischen sehr feinen, aus Stäbchen und kleineu Partikelchen be- 

 stehenden Detritus befinden. Mein Ziel ist nur, sie anzuwenden, 

 solange man auf keinem andern einfacheren Wege zum Ziele kommt. 



Zum Schlüsse noch die kurze Bemerkung: die Gruudleger der 

 Mykologie (de Bary, Brefeld n. a.) sind bei der Herstellung ihrer 

 Pilzkultureu immer nur von einer Zelle in einem hängenden Tropfen 

 ausgegangen. Bekanntlich war ihre Methode, eine Masse Sporen 

 und Conidieu in einer sterilisierten Flüssigkeit zu verteilen, auf ver- 

 schiedeneu Deckgläsern dann eine Menge hängender Tropfen anzu- 

 bringen und solange zu suchen, bis sie einen Tropfen fanden, in 

 dem sich eine Spore oder Conidie befand. Die Kulturflüssigkeiten 

 wurden ein wenig sauer genommen, um Bakterienentwicklung zu 

 verhindern. Für morphologische Studien sind solche Kulturen sehr 

 geeignet, aber als Ausgangspunkt für physiologische Untersuchungen 

 nicht, denn für die Reinheit kann man durchaus nicht garantieren. 

 Ihre Methode ist aber nicht brauchbar für kleinere Zellen, und durch- 

 aus nicht für Bakterien. 



Beschreibung des Isolierapparates. 



Figur 1 gibt eine schematische Darstellung des Instrumentes, 

 das zur Isolierung dient. Die Zeichnung stellt einen 1 : 4 ver- 

 kleinerten vertikalen Durchschnitt durch die Mitte des Apparates dar. 



Ä ist eine eiserne Platte, die aitf vier Füßchen steht. Das 

 Mikroskop ist vermittels eines Bügels auf einer viereckigen kupfernen 

 Platte B befestigt. Durch Drehung einer Schraube kann man das 




XXll, 1. Schonten: Reinkultureneiner unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. 15 



Mikroskop mit B nach links und rechts bewegen, vermittels einer 

 anderen Schraube vorwärts und rückwärts. 



Von dem Mikroskop ist gezeichnet der Objekttisch jF, der Be- 

 leuchtungsapparat von Abbe G^ die Irisblende H^ der Spiegel /, 

 der Fuß J und ein Objektiv K. Auf dem Objekttisch befindet sich 

 eine feuchte Kammer, die „Isolierkammer" Z, die eine besondere 

 Konstruktion liat. Ihre linke und rechte Seitenwand nämlich sind 

 mit einem horizontalen Spalt versehen, der mit dickem Öl ver- 

 schlossen werden kann. Durch diese sind zwei Glasnadeln M ge- 

 stochen, deren Form unten beschrieben werden soll. Zwei Glasstücke, 

 die sich oben an den Spalten befinden, können M^eggenommen wer- 

 den, wenn man die Nadeln herausnehmen oder wieder an ihren Platz 

 bringen will. Wenn man sie zu diesem Zwecke jedesmal wieder 

 durch den Spalt stecken müßte, so würde man Gefahr laufen, die 

 feinen Spitzen, auf die alles ankommt, abzubrechen. 



Auf die feuchte Kammer , die vermittels eines beweglichen 

 Objekttisches (ich gebrauche den von Leitz, No. 99 aus Katalog 

 Xo. 39) verschoben werden kann, bringt man das Deckglas, an dessen 

 Unterseite die Isolierung vorgenommen werden soll. 



Die Nadeln sind jede in einem Halter N befestigt, der sich auf 

 einem Kupferstab befindet, der um einen Punkt P drehbar ist. 

 Am Ende des Stabes befindet sich ein rundes Stahlplättchen, ver- 

 mittels dessen er auf einem vertikalen Stab R ruht. R kann ver- 

 mittels des Triebes S auf und nieder geschraubt werden. 



Es versteht sich von selbst, daß die Spitze von M in die feuchte 

 Kammer nach unten geht, wenn R nach oben geschraubt wird, und 

 umgekehrt. Die Scliraiibe an R hat eine ziemlich feine Ganghöhe, 

 und der Hebelarm ist ungefähr doppelt so lang als der Abstand 

 von P bis zur Spitze der Glasnadel. Man kann somit sehr geringe 

 Veränderungen zustande bringen. Der Drehpunkt P wird durch 

 eine Kupferstange V getragen, welche an den Säulen T befestigt ist. 



Die Halter N kann man mit den Glasnadeln bequem von dem 

 Instrumente nehmen, wenn die Glasstückchen, welche die Seitenspalten 

 bedecken, weggenommen sind. 



Da die Nadeln M in verschiedener Höhe in den Nadelhaltern 

 N befestigt werden können, kann man bei dem Apparat auch ver- 

 schiedene Mikroskope benutzen, z. B. Zeiss Stativ /«, Leitz Stativ 

 /, /ft, Ib etc. Auf kleine Stative ist nicht gerechnet, weil diese 

 bei der bakteriologischen Untersuchung im allgemeinen nicht wohl 

 anwendbar sind. 




16 Schouten: Reinkulturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII, 1. 



Der Abstand zwischen den Stützpunkten P ist so weit ge- 

 nommen, daß Objekttische der größten Stative, und also selbstver- 

 ständlich auch kleinere, dazwischen passen. 



Mit Absicht ist an beiden Seiten zwischen V und dem Mikro- 

 skop ein großer Raum offen gelassen, durch Avelchen man die Hände 

 stecken kann, falls das für eine Versetzung des Spiegels oder der 

 Irisblende nötig wird. 



Es war eine zeitraubende Arbeit, die brauchbarste Form für die 

 Glasnadeln auszuprobieren und eine Methode für die Anfertigung zu 

 finden. Viele technische Schwierigkeiten kreuzten hierbei den Weg. 



Nach längeren Untersuchungen in dieser Richtung halte ich es 

 für das beste, bei der Isolierung aller Organismen Glasnadeln zu 

 gebrauchen, die an der Spitze zu einem Auge umgebogen sind. 



Jede Nadel ist an dem Teil, welcher sich über dem Stab 

 befindet, 3 bis 4 mm dick; ungefähr über dem Drehpunkt P ver- 

 jüngt sie sich zu + -^/.^ mm Dicke. Das letzte Ende aber, aus 

 welchem das Auge geformt ist, hat eine bestimmte Dicke, die im 

 Verhältnis zu der Größe des Auges steht, das daraus geformt ist. 



Für die kleinsten Mikroorganismen, z. B. stab-, kommaförmige 

 und runde Bakterien, wird (Fig. 2j ein Auge (No. 2) verwandt mit 

 einem äußeren Durchmesser von 9^t und einer Drahtdicke von 2"5^. 

 Für die größten Zellen, z. B. einzellige Algen, Schwärmsporen von 

 Algen und Pilzen , große Sporen und Conidien , Saccharomyceten, 

 Infusorien etc., wird ein Auge (No. 4) angewandt mit einem äußeren 

 Durchmesser von 50 jji und einer Drahtdicke von 10 ^a, für Mikro- 

 organismen dazwischenliegender Größen ein Auge von 30 ^a äußeren 

 Durchmessers bei einer Drahtdicke von 5 ^ (No. 3). Endlich wird 

 noch bei der Isolation von Bakterien außer dem genannten kleinen 

 Auge eine einfache spitz zulaufende Glasnadel gebraucht von 10 /^ 

 Dicke (No. 1). 



Die Nadeln sind an dem Ende, welches in der Isolierkammer 

 steckt, in einer Länge von + 3 mm etwas nach oben umgebogen. 



Die Befestigung der Isoliernadeln in dem Apparat geschieht auf 

 folgende Weise. ^ 



Man setzt das Mikroskop auf den Isolierapparat, und zwar in 

 seinen mittleren Stand , d. h. so , daß es vermittels der Schiebvor- 



') Wer sich einen Isolierapparat anscbafl't, empfängt diesen mit Nadeln, 

 die in den Nadelhaltern befestigt sind. Ich teüe hier absichtlich mit, wie 

 dies geschieht. Man kann also, falls eine bricht, eine neue besonders be- 

 stellen und selbst an dem Apparat befestigen. 



I 




XXII, 1. Schonten: Reinkulturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. 1 7 



richtung ungefähr ebenso weit nach rechts als nach links, nach vorne 

 als nach hinten verschoben werden kann. Ebenso ist die Isolier- 

 kammer mitten unter das Objektiv gestellt ; die losen Stücke, welche 

 die Seitenspalten bedecken, sind abgenommen. 



Nun bringt man in die Nadellialter N Glaserkitt und legt darauf 

 die Nadeln so, daß die umgebogenen Enden nach oben weisen, sich 



|Kj/L 



1. 



beinahe mitten unter dem Objektiv berühren und sich etwas tiefer 

 als der obere Rand der Isolierkammer befinden. Dann legt mau 

 die losen Stücke wieder auf die Seitenspalten und ein Deckglas auf 

 die Isolierkammer. Nun drückt man die Nadeln so tief in den 

 Glaserkitt, daß die Enden bei einem ungefähr horizontalen Stand 

 durch Bewegung der Triebe S (Fig. 1) die Unterseite des Deck- 



N^l 



©^ 



N5 2 



glases berühren können, aber auch mindestens 2 mm nach unten 

 bewegt werden können. Man muß diese Bewegungen nicht allein 

 vornehmen können , wenn die Isolierkammer sich mitten unter dem 

 Tubus des Mikroskops befindet, sondern auch, w^enn sie so weit nach 

 links oder rechts verschoben ist, wie dies für das Isolieren notwendig 

 wird. Weiter dürfen die Enden, wenn sie das Deckglas berühren, 

 nicht zu weit auseinander stehen, z. ß. auf eine Distanzweite von 

 300 ju, und sich nicht genau gegenüber stehen. Im letzten Fall be- 

 stünde nämlich die Möglichkeit, daß sie bei einer gleichzeitigen 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 1. 2 




18 Schonten: Reinkulturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII, 1. 



ober- und unterwärtsigen Bewegung ineinander greifen und breclien 

 würden. 



Zum Schluß noch ein Hauptfaktor, auf den geachtet werden muß. 

 Das Auge muß solch einen Stand haben , daß es , wenn es gegen 

 das Deckglas angebracht ist, mit seinem ganzen Umriß das 

 Deckglas berührt. Man kontrolliert dies in einem hängenden Tropfen, 

 den man auf das Deckglas der Isolierkammer angebracht hat , mit 

 der stärksten Vergrößerung. Wenn man das Auge in trockenem 

 Zustande gegen das Deckglas bringt, kann man sicli unmöglich dar- 

 über Sicherheit verschaifen. 



Befinden sich die Nadeln nun an der gewünschten Stelle, dann 

 kann man, falls man vorsichtig zu Werke geht und sie nicht berührt, 

 schon sofort mit der Isolierung beginnen. Wenn nach einiger Zeit 

 der Glaserkitt hart geworden ist, ist selbstverständlich eine Ver- 

 schiebung immöglich. 



Wir wir oben gesehen haben , braucht man beim Apparat 

 4 Nadeln und somit 4 Nadelhalter iV. Man tut gut, diese zu nume- 

 rieren ; No. 1 und No. 4 werden rechts, No. 2 und No. 3 links im 

 Apparat angebracht. 



Daß die Nadeln mit großer Vorsicht behandelt werden müssen, 

 ist selbstverständlich. Ein Andrücken gegen das Deckglas können 

 sie aber, da sie sehr elastisch sind, gut vertragen. 



Leider kann ich jetzt noch nicht den festgesetzten Preis des 

 ganzen Apparates oder der besondern Nadeln mitteilen, und auch 

 nicht die Verfertigungsweise der letzteren. Hoifentlich wird jedoch 

 bald diese Lücke ausgefüllt werden. Eventuelle Anfragen werde 

 ich indessen vorläufig gern entgegennehmen. 



Mit diesem Apparat ist man also imstande, sehr feine Bewegungen 

 unter dem Mikroskop auszuführen. Bis jetzt noch sind die Versuche 

 allein auf das Isolieren von Mikroorganismen beschränkt. Ich bin 

 aber überzeugt, daß man mit dieser Methode vielerlei andere Ar- 

 beiten wird verrichten oder doch bequemer machen können, z. B. 

 das Sortieren von feinem Planktonmaterial, das Verfertigen von 

 Dauerpräparaten solcher Mikroorganismen etc. Sind mir die schwie- 

 rigsten Experimente (das Isolieren von Bakterien) geglückt, dann 

 darf ich wohl erwarten , daß auch leichtere Versuche nicht miß- 

 glücken werden. ^ 



^) Als ich meine Methode schon ganz ausgearbeitet und bereits viele 

 Versuche mit ihr angestellt hatte, bemerkte ich aus den historischen An- 




XXII, 1. Schouten: Reinkulturen einer untere!. Mikroskop isoliert. Zelle. 1 9 



Das Isolieren. 



Die Deckgläser, welche hierzu gebraucht werden, sind 18x18 mm 

 groß. Peinliche Sauberkeit ist selbstverständlich. Am besten bringt 

 man sie zunächst einige Zeit in die bekannte Mischung von Bichromat- 

 kalium und Schwefelsäure ; wenn es nötig ist, kocht man sie in dieser 

 Mischung oder in heißem Seifenwasser auf. Nach tüchtigem Ab- 

 spülen werden sie in Alkohol aufbewahrt. 



Will man nun isolieren, so beginnt man damit, einige Deck- 

 gläser mit einem feinen Leinentuch, Avelches man mit ganz wenig 

 Vaseline versehen hat, einzureiben. Mit einem andern reinen Tuch 

 reibt man die Vaseline wieder so weit ab, daß das Deckgiäschen 

 nur noch eben leicht beschlagen aussieht. Auch sorgt man für eine 

 genügende Anzahl feuchter Kammern. Man verwendet hierzu nicht 

 die gebräuclüichste Form, nämlich einen Ring auf einem Objektglas, 

 sondern einen viereckigen Glasrahmen auf einem Objektglas. Die 

 Seitenwände der Kammer sind 2 bis .3 mm hoch, 5 mm breit ; der 

 Innenraum ist 14X14 mm. Man kann diese Kammern bequem 

 selbst anfertigen, wenn man den Glasrahmen aus 4 losen Stücken 

 macht. Man reibt sie ebenso wie die Isolierkammer von innen ein 

 mit Vaseline, welches die Stäubchen, die hereinfallen könnten, fest- 

 halten soll. 



Ebenso werden sowohl die Seitenwände der feuchten Kammer 

 als die Isolierkammer vorher an der Oberseite mit Vaseline ver- 

 sehen, die zur Abschließung mit den Deckgläschen notwendig ist. 



merkungen, die Apäthy in seinem Buch: Die Mikrotechnik der tierischen 

 Morphologie Bd. I, Brannschweig (Bruhn) 189(j gibt, daß man schon in 

 früheren Jahren allerlei Versuche gemacht hatte, um kleine Organismen 

 (Diatomeen, kleine Crustaceen etc.) auf bequemere Weise unter dem 

 Mikroskop bewegen und isoHeren zu können. Übrigens hat keine dieser 

 Methoden den Erwartungen entsprochen, weil ihr Gebrauch zu viele Be- 

 schwerden mit sich brachte und allein bei schwacher Vergrößerung an- 

 wendbar war. Als ein Kuriosum sei hier allein die beste dieser Einrich- 

 tungen genannt, die Hanks im Jahre 1877 konstruierte. Sie bestand aus 

 einem Stück Bürstenhaar, dessen Spitze sich in der Mitte des Gesichts- 

 feldes befand. Durch horizontale Bewegungen des Objekttisches wurden 

 die Objekte in horizontaler Richtung, durch Auf- und Abwärtsbewegen 

 des Beleuchtungsapparates in vertikaler Richtung transponiert. Man konnte 

 einen Organismus dadurch isoheren, daß man ihn an der feuchten Spitze 

 des Haares anklebte und ihn, wenn das Haar trocken geworden war, auf 

 einem Gläschen auffing. 



9* 




20 Scheuten: Reinkultureneinerunterd. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII, 1. 



Jetzt nntersuclit mau erst , wie viel mau vou dem Material, 

 woraus isoliert werdeu soll, in einen Tropfen einer ^/^prozeutigeu 

 Kochsalzlösung- bringen muß , so daß nicht zu viel Zellen sich am 

 Rand des Tropfens befinden. Es muß nämlich möglich sein, wie wir 

 bald sehen werden, eine Zelle in einem ganz kleinen Tröpfchen aus 

 dem großen Tropfen zu ziehen, ohne daß andere Zellen, wenigstens 

 nicht in zu großer Zahl, mitgehen. 



Man zieht darum ein mit Vaseline eingeriebenes Deckgläschen 

 dreimal durch die Flamme. Hierauf legt mau es auf die „Wechsel- 

 kammer" (s. p. 32) so nieder, daß die Seite des Deckglases, die 

 beim Ziehen durch die Flamme nach unten gekehrt war, sich auf 

 der Unterseite befindet. Nun setzt man 4 Tropfen einer '^/^^prozen- 

 tigen Kochsalzlösung auf das Deckglas, und bringt in jeden Tropfen 

 mittels einer Platinnadel oder einer ganz feinen Platinöse verschiedene 

 mit dem bloßen Auge kontrollierte Quantitäten des Materials (das 

 man zu diesem Zweck in Bouillon oder auf einem festen Nährboden 

 gezüchtet hat), und verteilt durch vorsichtiges Rühren die Zellen so 

 gut wie möglich im Tropfen. Dann wird das Deckglas auf eine 

 feuchte Kammer gelegt , auf deren Boden man , gegen die Vorder- 

 oder gegen die Hinterseite (nicht in die Mitte, denn das könnte die 

 Beobachtung hindern) ein Tröpfchen Wasser gelegt hat, und unter- 

 sucht man, in welchem der 4 Tropfen das Material am besten ver- 

 dünnt ist. 



Hierauf wird das Gläschen, auf welchem man isolieren will, 

 zugerichtet. Man zieht es auch dreimal durch die Flamme, und legt 

 es auf die Wechselkammer wie das vorige. Nun sterilisiert man 

 eine Platinöse und setzt untereinander, gleich nahe der Mitte des 

 Deckglases, und zwar an der linken Seite, 3 Tröpfchen der sterili- 

 sierten Flüssigkeit, in der die Kultur entstehen soll. (Diese Tropfen 

 nenne ich von jetzt ab einfach „Kulturtropfen".) Daneben, also 

 rechts von der Mitte, setzt man auf + 2 mm Abstand von jedem 

 Tropfen, auch untereinander, 2 Tropfen einer ^/^prozentigen Koch- 

 salzlösung (weiterhin „Materialtropfen" genannt) und darunter einen 

 Tropfen einer sterilisierten '^/^prozentigen Kochsalzlösung (Fig. 3).^ 



Man bringt immer zuerst die Kulturtropfen auf das Grläschen 

 und dann die Materialtropfen, weil so am wenigsten Gefahr ist, daß 

 das Gläschen noch nicht genügend abgekühlt ist. Schließlich bringt 

 man in die Materialtropfen eine genügende Quantität des Materials, 



^) Der Diameter der Tröpfchen darf nicht größer sein als + 1"5 mm. 




XXII, 1. Schonten: Reinkultureneinerunterd. Mikroskop isoliert. Zelle. 21 



und legt das Deckgläseben auf eine der zugerichteten feuchten Kam- 

 mern, ziir Verhütung einer Infektion, und zugleich um es an den 

 Rändern mit Vaseline zu versehen. 



Nun legt man auf den Boden der Isolierkammer gegen die 

 Vorder- oder gegen die Hinterseite (nicht in die Mitte!) ein Tröpfchen 

 Wasser und geht dann zum Sterilisieren der Nadeln über. Für 

 Bakterien gebraucht man links die Isoliernadel mit dem kleinsten 

 Auge (No. 2), rechts die spitz zulaufende gerade Nadel (No. 1). 

 Um diese zu sterilisieren, nimmt man die losen Seitenstücke, die die 

 Spalten bedecken, von der Isolierkammer ab. Indem man nun die 

 Schrauben, womit die Stäbe JV in befestigt sind, losdreht, holt 



3 — 12. 



man N vorsichtig aus dem Apparat und hält die Spitzen der Glasnadeln 

 zunächst in ein Fläschchen mit starker Schwefelsäure und dann etwas 

 tiefer in ein Fläschchen mit Ammoniak. Man taucht die Spitze immer 

 etwas tiefer in das Ammoniak als in die Schwefelsäure, da es sonst 

 möglich ist, daß ein Teil der Schwefelsäure nicht genügend neutra- 

 lisiert wird und dann nachher zu der Spitze der Nadel hin diffundiert. 

 Dadurch könnte die zu isolierende Zelle beschädigt werden, was mir 

 im Beginn meiner Versuche, als ich auf diese Einzelheit nicht achtete, 

 oft vorkam. Dann bringt man die Nadeln wieder auf ihren Platz 

 und legt die losen Seitenstücke auf die Spalten. Bevor man diese 

 schließt, legt man das Deckgläschen, auf dem isoliert werden soll 

 („Isolierdeckgläschen"), schon wieder auf die Isolierkammer (wobei 

 man wohl darauf zu achten hat, daß nicht eine der Nadeln einen 




22 Schonten: lleinkulturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII, 1. 



Materialtropfen berührt). Je eher nämlich die Nadeln vor Lnft- 

 infektiou (s. p. 36) geschützt werden, desto besser. Das Schließen 

 selbst geschieht mit Olivenöl, welches durch Diapalm so dickflüssig 

 gemacht ist, daß es nach z. B. zwei Tagen noch nicht aus den 

 Spalten herausgeflossen sein darf. Es wird vor dem Gebrauch um- 

 gerührt; man läßt es von einem platten Spatel in den Spalt fließen. 

 Nun geht man zum eigentlichen Isolieren über. Man wartet 

 noch eben, bis das Deckglas ganz beschlagen ist mit kleinen ab- 

 gerundeten Tröpfchen.^ In der Figur 4 (u. fi".) sind diese Konden- 

 sierungströpfchen deutlichkeitshalber weggelassen. Ist man so weit, 

 und ist also die Isolierkammer mit Wasserdampf gesättigt, dann 

 taucht man die Spitzen der Nadeln bei schwacher Vergrößerung 

 einige Male in den Tropfen steriler '^^prozentiger NaCl-Lösung. Das 

 geschieht um sie von Ammoniaksulfat zu befreien, obgleich ich nicht 

 glanbe, daß dies schädlich auf die zu isolierende Zelle einwirken 

 kann,'- und um das Auge der linken Nadel mit NaCl-Lösung zu füllen. 

 Hierauf stellt man vermittels der Schiebebewegung von B (Fig. 1) 

 das Mikroskop so, daß das Auge der linken Nadel, während es das 

 Deckglas beinahe berührt, bei stärkster Vergrößerung genau in die 

 Mitte des Gesichtsfeldes kommt. Die rechte Nadel wird um drei 

 Schraubgänge nach unten gedreht. Hierauf stellt man vermittels 

 der beweglichen Objekttafel bei schwacher Vergrößerung die Isolier- 

 kammer so, daß das Auge beinahe den Rand eines Materialtropfens 

 berührt, und zwar den Rand, der dem gegenüberliegenden Kultur- 

 tropfen zugekehrt ist (Fig. 4). Natürlich muß man dafür sorgen, 

 daß bei diesen Verschiebungen die linke Nadel nicht mit einem der 

 Tropfen in Berührung kommt. Bei der rechten Nadel ist das un- 



\) Daß die größeren Material- und Kulturtropfen und die kleinen 

 Kondensierungstroixfen alle abgerundet sind , ist eine Folge von dem Ge- 

 brauch der Vaseline. Auf gewöhnlichen Deckgläsern würden alle diese 

 Tropfen unregelmäßige Konturen haben und mehr oder weniger ausfließen 

 und untereinander zusammenfließen, wodurch das ganze Isolationsverfahren 

 unmöglich sein würde. Indessen darf nur sehr wenig Vaseline auf dem 

 Deckglas nach dem Ausreiben zurückbleiben , da sonst beim Schieben des 

 Auges gegen das Deckglas die überflüssige Vaseline leicht in Form kleiner 

 Stäbchen in die isolierten Tropfen hineingelangt, was zu Verwechslung mit 

 Bakterien Anlaß geben könnte. 



-) Nach MiyUEL, Les organismes vivants de l'atmosphere, sind nicht 

 weniger als 250 g Ammonium sulf. nötig, um auf 1 1 Bouillon entwick- 

 lungshemmend einzuwirken; er rechnet es demnach unter die sehr schwach 

 antiseptischen Körper. 




XXII, 1. Scliüuten: Reinkultureneiner unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. 23 



möglich, weil sie ganz nach unten gedreht ist. Nun gebraucht man 

 die stärkste Vergrößerung; um alles an den richtigen Platz (Fig. 5) 

 im Gesichtsfeld zu bekommen, wird bisweilen noch eine kleine Ver- 

 schiebung des Mikroskops oder der Nadel, die man, weil sie das 

 Deckglas nicht berührt, nur so eben sieht, notwendig sein. Man 

 sucht nun am Rand des Tropfens entlang, bis man eine Bakterie, 

 die man isolieren will, sieht. Wir nehmen au, daß wir diese in 

 einem Teile des Tropfenrandes finden, wo sich nicht viel andere 

 Bakterien aufhalten. Können wir solch einen Teil nicht in dem 

 einen Materialtropfen finden , so suchen wir in dem anderen. Dann 

 bringt man das äußerste Ende des Auges der Nadel (in Fig. 4 bis 7 

 durch eine kleine halbkreisförmige Linie wiedergegeben) gegen das 

 Deckglas und berührt damit eben den Tropfenrand. Dadurch wird 

 ein wenig Flüssigkeit aus dem Tropfen gezogen (Fig. 6). Sieht man, 

 daß die betretfende Bakterie mitgegangen ist, dann verschiebt man 

 die Isolierkammer ein wenig, wodurch ein kleines Tröpfchen mit 

 der Bakterie darin sich vom großen Tropfen loslöst (Fig. 7). Hierzu 

 sind sehr kleine Bewegungen notwendig; man kann diese noch 

 besser als durch Verschiebung der Isolierkammer bekommen, 

 wenn man seitlich gegen die Mikrometerschraube des 

 Mikroskops drückt. 



Nun bewegt man die linke Nadel ein Avenig nach unten und 

 untersucht, ob man die eine Bakterie, und nicht mehr als sie, in 

 dem Tröpfchen liegen sieht. Ist das so, dann bringt man das Auge 

 der linken Nadel eben gegen das Deckglas auf einen Platz dicht 

 bei dem Tröpfchen mit der isolierten Bakterie. Dadurch soll das 

 Auge einen Teil seines Inhalts auf das Deckglas absetzen (Fig. 8j, 

 und folglich weniger Flüssigkeit enthalten (sei es auch nur eine 

 Zeitlang, denn allgemach zieht es wieder Wasserdampf an sich, mit 

 dem die Isolierkammer gesättigt ist). Wenn man dann das Auge 

 wieder in den Tropfen mit der isolierten Bakterie' bringt, und darauf 

 wieder nach unten bewegt, wird die Bakterie meistens aus dem 

 Tröpfchen verschwunden und in das Auge übergegangen sein. Scheint 

 das noch nicht geschehen zu sein, dann muß die beschriebene Be- 

 wegung wiederholt werden. 



Diese Bakterie muß nun in eines der Kulturtröpfchen gebracht 

 werden. Zu diesem Zweck nimmt man statt der starken Vergrößerung 

 die schwache und verschiebt die Isolierkammer so weit nach rechts, 

 daß das Auge der linken Nadel, wenn diese nach oben bewegt wird, 

 zwischen zwei Kulturtröpfchen, und zwar ganz nahe am Rand des 




24 Schonten: lieinkulturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII, 1. 



einen der beiden, ankommt. Man versucht dies dadurch, daß man 

 das Auge bis dicht an das Deckglas bringt. Erst wenn man die 

 schwache Vergrößerung wieder mit der starken gewechselt hat, bringt 

 man das Auge gegen das Deckglas. Dieses setzt dadurch ein Tröpf- 

 chen ab (Fig. 9), in dem sich wahrscheinlich die isolierte Bakterie 

 befindet. Ist das nicht der Fall, dann setzt man mit dem Auge 

 neben das erste Tröpfchen ein zweites, und wenn notwendig, mehrere, 

 bis man in einem derselben die bewußte Bakterie liegen sieht. 



Auf dieselbe Weise isoliert man zwei andere Bakterien, die man 

 ebenso jede neben ihrem Kulturtropfen deponiert. 



Nun bringt man die isolierten Bakterien in die Kulturtropfen, 

 Dies geschieht nicht vermittels der augförmigen linken Nadel, welche 

 man bisher gebraucht hat, sondern mit der spitzen rechten Nadel. 

 Man dreht bei schwacher Vergrößerung die linke Nadel um drei 

 Schraubgänge ^ nach unten, die rechte Nadel in die Höhe, und bringt 

 diese, vermittels der Schiebevorrichtung B genau unter eines der 

 Tröpfchen, worin sich eine isolierte Bakterie befindet. Jetzt vertauscht 

 man die schwache Vergrößerung mit der stärksten, imd bringt die 

 Spitze der rechten Nadel bis zur Berührung des Deckglases in das 

 Tröpfchen. Dann verschiebt mau die Isolierkammer, oder besser 

 noch man drückt gegen die Mikrometerschraube des Mikroskops, so 

 daß die Spitze der Nadel das Tröpfchen mit der Bakterie in den 

 Kulturtropfen zieht. Während dies geschieht, muß man die Bakterie 

 gut im Auge behalten. Das ist möglich, weil die rechte Nadel in 

 eine Spitze ausläuft, die die Bakterie nicht so leicht dem Auge ent- 

 zieht als ein augförmig umgebogenes Ende, das mehr Platz einnimmt. 

 Im Moment des Zusammenfließens (Fig. 10) der beiden Tropfen ist 

 man also sicher, daß die isolierte Bakterie wirklich in den Kultur- 

 tropfen gelangt ist. Meistens kann man sie darin liegen sehen. 

 Macht man von einem festen Kulturtropfen, z. B. Gelatine, Gebrauch, 

 dann sieht man das Tröpfchen mit der Bakterie an der Gelatine 

 liegen (Fig. 11). 



Auf dieselbe Weise werden die anderen isolierten Bakterien in 

 ihre Kulturtropfen gebracht. 



Wir haben oben die Annahme gemacht, daß die isolierte Bakterie 

 bei ihrer Entfernung aus dem Materialtropfen sich in einem Teil des 



^) Drei Schraubgänge genügen, um zu verhindern, daß die Spitze der 

 Nadel während der Verschiebungen der Isolierkammer die Unterseiten der 

 Tropfen berühren kann. 




XXII, 1. Schouten: Reinkultureneiner unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. 25 



Tropfenrandes befand, wo nicht viel andere Bakterien sich aufhielten. 

 Allein in diesem Falle darf man auf die beschriebene AVeise 7AI 

 Werke gehen, und also, sobald man gesehen hat, daß man eine 

 Bakterie aus dem Materialtropfen geholt hat, diese sofort in dem 

 Auge der linken Nadel auffangen und in nächster Nähe des Kultur- 

 tropfens deponieren. 



Vorausgesetzt nun aber, daß die Bakterie sich in ihrem Material- 

 tropfen in einem Teil befand, wo auch viele andere Bakterien in 

 nächster Nähe waren (hierfür besteht z. B. große Möglichkeit, wenn 

 die ursprüngliche Flüssigkeit nicht gut verdünnt ist), dann ist es 

 sehr leicht möglich, daß sich in dem isolierten Tröpfchen zwar nur 

 eine Bakterie befindet, aber daß im Auge der Nadel auch eine oder 

 gar mehrere Bakterien vorkommen. In diesem Falle kann es daher auch 

 passieren, daß in dem Tröpfchen, welches man neben dem Kultur- 

 tropfen absetzt, nicht eine, sondern mehrere Bakterien sich befinden. 

 Nun könnte man meinen, daß das so schlimm nicht sei, da man 

 dann ja einfach das Tröpfchen mit den Bakterien neben dem Kultur- 

 tropfen liegen lassen kann, um darauf eine andere Bakterie zu 

 isolieren. Man tut aber gut, im Auge zu behalten, daß ein Tropfen 

 auf dem Deckglas oft im Verlauf der folgenden Stunden ein M^enig 

 auseinander fließt, so daß die verschiedenen Bakterien dann in den 

 Kulturtropfen gelangen würden. Es ist darum besser, in solch einem 

 Fall vorsichtiger zu arbeiten. Wenn mit der linken Nadel eine 

 Bakterie aus dem Materialtropfen isoliert ist, und man Grund hat zu ver- 

 muten, daß in dem Auge der Nadel noch andere Bakterien sitzen, 

 so bringt man einfach in der Nähe des isolierten Tropfens das Auge 

 so oft gegen das Deckglas , bis alle Flüssigkeit mit den eventuell 

 darin befindlichen Bakterien auf dem Deckglas abgesetzt ist (Fig. 12). 

 Darauf bringt man mit schwacher Vergrößerung das Auge in den 

 Tropfen ^/^ prozentiger Kochsalzlösung, um es noch einmal abzuspülen 

 und sogleich wieder mit Flüssigkeit zu füllen, und dann erst bringt 

 man die isolierte Bakterie auf die oben beschriebene Weise in ihren 

 Kulturtropfen. 



Es ist wohl unnötig zu sagen, daß jeder, der mit dieser Methode 

 arbeitet, von selbst allerlei kleine Einzelheiten durch die Praxis lernt. 

 Hat man z. B. mit einem Tropfen zu tun, in dem sich am Rand ent- 

 lang entweder durch ungenügende Verdünnung oder durch zufällige 

 Umstände so viel Bakterien befinden, daß es beinahe unmöglich ist 

 eine zu isolieren, und hat man dann weiter aus dem Materialtropfen 

 ein Tröpfchen isoliert, worin sich nicht eine, sondern zwei oder mehr 




26 Bchouten: Reinkultureneinerunterd. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII, 1. 



Bakterien befinden, von denen eine die gesuchte ist, dann kann man 

 das Auge der linken Nadel erst in dem Tropfen '^j^ prozentiger Koch- 

 salzlösung abspülen und es dann, nachdem man es auf die bekannte 

 Weise von ein wenig Flüssigkeit entlastet hat, in das Tröpfchen 

 mit jenen Bakterien bringen. Dadurch werden einzelne Bakterien 

 in die Flüssigkeit des Auges übergehen und vielleicht bleibt gerade 

 die eine gesuchte zurück; ist das nicht der Fall, dann kann man 

 die Flüssigkeit aus dem Auge in Tropfen auf das Deckglas absetzen, 

 und dabei geschieht es leicht, daß sich die Bakterien scheiden, 

 indem sie in verschiedene Tröpfchen gelangen. Sobald man die 

 gewünschte Bakterie in einem Tropfen abgesondert liegen sieht, 

 spült man das Auge in dem Kochsalztropfen ab, und transportiert 

 die Bakterie. 



Dergleichen besondere Fälle könnte man natürlich noch mehr 

 beschreiben; wir wollen es aber hierbei bewenden lassen, weil die 

 Praxis in dieser Beziehung die beste Lehrmeisterin ist. 



Durch einige Übung bringt man es recht bald so weit, daß, 

 wenn das Material ungefähr die richtige Verdünnung hat (ist das 

 nicht der Fall, dann kann man Avohl auch isolieren, aber nicht so 

 bequem), man in ungefähr 5 Minuten eine Bakterie aus dem Material- 

 tropfen isoliert und in den Kulturtropfen bringt. 



Es ist natürlicli nicht nötig, die Nadeln nach dem Isolieren 

 jeder Zelle aufs neue zu sterilisieren; das muß allein geschehen, 

 wenn man sie einige Zeitlang nicht gebraucht hat, und ebenso wenn 

 man beim Isolieren einen Fehler gemacht hat, der es als wahr- 

 scheinlich erscheinen läßt, daß sie durch Bakterien verunreinigt sind 

 (z. B. wenn die rechte Nadel, auf die schließlich alles ankommt, 

 durch Unglück in den Materialtropfen gekommen ist). 



Sind drei Bakterien transponiert, dann läßt man, wenn man 

 noch mehrere isolieren will , das Deckglas noch auf der Isolier- 

 kammer liegen, bis man ein zweites Deckgläschen in Bereitschaft 

 gestellt hat. 



Wenn man ein Deckgläscheu von der Isolierkammer wegnimmt, 

 tut man gut, mit Vorsicht zu Werke zu gehen. Hebt man es zu 

 schnell auf, dann wird das Öl, das die Seitenspalten abschließt, in 

 die Isolierkammer gesogen und die Unterseite des Deckglases ver- 

 unreinigt. Man steckt darum eine platte , feinspitzige Pinzette 

 zwischen das Deckglas und die Wand der Kammer und macht erst 

 eine Öffnung in die Vaseline, die zur Abschließung dient. Erst darauf 

 hebt man das Deckglas vorsichtig auf. 




XXII, 1. Schonten: Reinkulturen einer unter d. Mikroskop Isoliert. Zelle. 2 7 



Jedes Deckglas, auf dem man isoliert hat, wird auf eine feuchte 

 Kammer gelegt. Man kann, um Verdunstung der Kulturtropfen zu 

 verhüten, auf den Boden einen kleinen Wassertropfen bringen, aber 

 immer gegen die Wand, welche sich bei den Materialtropfen befindet. 

 Der Wasserdampf, welcher sich aus diesem Tröpfchen, besonders in 

 einem Brutschranke, entwickelt, wird nämlich meistens im stärksten 

 Maße kondensiert auf dem Teil des Deckglases, welcher sich darüber 

 befindet, hier also zwischen den Materialtropfen. Geschähe das 

 zwischen den Kulturtropfen, dann könnten diese zerfließen und die 

 Kultur also mißglücken. 



Da ich indessen während meiner Versuche bemerkte, daß 

 hängende Tropfen, sei es von Bouillon, Nährgelatine oder anderen 

 Flüssigkeiten, nach einiger Zeit mehr oder weniger sauer werden 

 (eine Tatsache, die, soweit ich weiß, noch nicht beobachtet ist, 

 und worüber ich bald eine Mitteilung veröffentlichen will), ist es 

 weit besser, auf den Boden der feuchten Kammer ein kleines Stück- 

 chen Filtrierpapier (etwa 3X8 mm groß), getränkt mit einer 

 2prozentigen KOII-Lösung, zu legen. Dadurch wird das Sauerwerden, 

 das meistens eine entwicklungsliemmende oder gar tödliche AVirkung 

 auf die isolierten Bakterien hat, verhütet. Ein Tropfen KOH- 

 Lösnng leistet keine Dienste, da er zwischen dem Boden und den 

 Seitenwänden der feuchten Kammer zerfließt. Nach dem Gebrauch 

 werden die Kammern gut gereinigt und vom überschüssigen KOH 

 befreit, da sonst bei fortwährendem Gebrauch die Konzentration zu 

 hoch werden würde, und ein Austrocknen der hängenden Tropfen 

 zu fürchten wäre. 



Die benutzten feuchten Kammern werden in eine gehörige 

 Temperatur gebracht. Wenn diese Temperatur höher ist als 25*^ C, 

 muß das Deckgläschen, das schon vermittelst V^aseline auf der 

 feuchten Kammer befestigt ist, außerdem noch an zwei Seiten mit 

 Paraffin bestrichen werden, was man am bequemsten so macht, daß 

 man sie aus einem gläsernen Tropfgläschen ausfließen läßt. Beim 

 Gebrauch von Vaseline allein gleitet das Gläschen, wenn dieses 

 flüssig wird, ganz von seinem Platz. Wenn als Kulturtropfen ein 

 fester Boden angewandt wurde, kann die Entwicklung der Kolonie 

 mit starker Vergrößerung beobachtet werden, weil dieselbe sich am 

 Rande vollzieht. 



Untersuchen wir nun die Isolierung größerer Organismen. 



Ehe man mit der Isolierung beginnt, mißt man die Größe der 

 Zellen, um zu bestimmen, mit welcher Nadel isoliert werden muß. 




28 Schonten: Reinkulturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII, 1. 



Haben die Zellen eine solche Größe , daß sie am besten mit Nadel 

 No. 3 transportiert werden, dann setzt man alle Tropfen auf das 

 Deckglas , wie es oben für Bakterien beschrieben worden ist. 

 Werden aber die Zellen am besten mit Nadel No. 4 transportiert, 

 dann setzt man, da diese Nadel rechts im Apparat angebracht ist, 

 die Kulturtropfen an die rechte , die anderen Tropfen an die linke 

 Seite, so daß die Zellen mit No. 4 isoliert und transportiert, mit 

 No. o in die Kulturtropfen geschoben werden. 



Wir wollen die Isolierung einer großen Zelle nun nicht mehr 

 ausführlich beschreiben. Die Methode ist in der Hauptsache dieselbe 

 wie die, welche wir oben in extenso für Bakterien mitgeteilt haben; 

 die Änderungen lernt jeder selbständig bei der Ausführung. Auf 

 einige bedeutungsvolle Sachen wollen wir aber noch weisen. 



Zunächst auf den besonderen Nutzen des sterilen Kochsalz- 

 tropfens. Dieser kann uns hier einen besonderen Dienst erweisen, wenn 

 die ursprüngliche Flüssigkeit nicht genügend verdünnt ist, oder wenn 

 an der zu isolierenden Zelle (Hefezelle, Scliimmelspore etc.) eine 

 Bakterie fest zu sitzen scheint. In solchen Fällen kann man den 

 Inhalt des Auges der Nadel, in dem sich die zu isolierende Zelle 

 befindet, gleichsam darin abspülen, wobei die festsitzende Bakterie 

 vielleicht abgelöst wird , und die überflüssigen Bakterien zurück- 

 bleiben. 



Auch machen wir darauf aufmerksam, daß bei der Isolierung 

 großer Zellen im allgemeinen mit anderen Vergrößerungen gearbeitet 

 wird, als bei der Isolierung von Bakterien. Es ist z. B. anzu- 

 raten, die Arbeiten, die wir in Figur 5 bis 7 dargestellt haben, 

 besonders wenn die zu isolierenden Zellen sehr groß sind, und also 

 die Nadel mit dem größten Auge angewandt wird, nicht mit einer 

 Immersionslinse , sondern mit einem mehr oder weniger starken 

 Trockensystem zu verrichten, z. B. Leitz 6 bis 8, Zeiss E oder F. 

 Man kann selbst noch schwächere Vergrößerungen gebrauchen, wenn 

 man sicher ist, daß der Materialtropfen von Bakterien nicht, oder 

 doch sehr wenig, verunreinigt ist, und man also sehr wenig Möglich- 

 keit hat, außer der zu isolierenden Zelle noch andere Zellen, z. B. 

 Bakterien aus dem Tropfen herauszuziehen. Das Immersionssystem 

 gebraucht man hier nur, um zu kontrollieren, ob man nicht mehr 

 als die eine gewünschte Zelle isoliert hat, und es ist wohl ratsam, 

 bei dieser Kontrolle die isolierte Zelle in dem Tröpfchen gut hin 

 und her zu bewegen, so daß sie von allen Seiten gut beobachtet 

 werden kann. Schimmelsporen und Conidien deponiert man immer 




XXII, 1. Schonten: ßeinkultureneinerunterd. Mikroskop isoliert. Zelle. 29 



bei schwacher Vergrößerung in die Mitte des Kultiirtropfens ; bei 

 dem Keimen kann das Mycelium sich dann nach allen Seiten aus- 

 breiten, ohne aus dem Tropfen herauszutreten, was natürUch ge- 

 schehen würde, wenn die keimende Zelle am Rande läge. 



Jetzt eine Bemerkung, die soAvohl für die Isolierung größerer 

 Zellen als auch Bakterien gilt. Man kann die zu isolierende Zelle 

 noch auf eine andere, als iu Figur 5 und 6 beschriebene Weise aus 

 dem Materialtropfen herausbringen, wenigstens .in einzelnen Fällen. 

 Wenn man ein gut verdünntes Bakterienmaterial hat, kann man 

 auch eine Bakterie isolieren, welche etwas vom Rande des Tropfens 

 entfernt liegt, indem man nämlich das Auge nicht an den Rand, 

 sondern sofort in den Tropfen an den Platz der bewußten Bakterie 

 bringt. In vielen Fällen wird es glücken, diese dann aufzufangen. 



Das geht jedoch nicht bei einer Bakterie, die sich weit vom 

 Rand entfernt befindet, also in einem dickeren Teil des Tropfens, 

 denn in solchem Fall ist die Möglichkeit zu groß, andere Bakterien 

 in das Auge der Nadel zu bekommen, die sich in tieferen Schichten 

 des Tropfens befinden und die man nicht mit dem Immersionssystem 

 sehen kann. Sehr gut geht aber dieses Auffangen, selbst mitten 

 aus dem Tropfen, bei großen Zellen mit schwacher Vergrößerung. 

 In diesem Falle darf die Flüssigkeit nicht zu stark mit Bakterien 

 verunreinigt sein. 



Nicht geringe Schwierigkeit bereiten Zellen , die sich an dem 

 Deckglas mehr oder weniger festkleben, was ja Bakterien (wahr- 

 scheinlich vermittels ihrer Cilien) wohl gelegentlich tun. Man kann 

 sie oft nicht aits dem Tropfen herausbringen. 



Am bequemsten sind die Bakterien zu isolieren, welche in Be- 

 wegung sind , was man a priori gewiß nicht erwarten würde. Man 

 sucht einfach einen Platz am Rand des Tropfens auf, wo die Bakterie 

 nach ihrer Bewegung vermutlich entlang kommt, um in dem Moment 

 die Bewegung zu vollziehen , die in Figur 6 gezeichnet ist. Fast 

 immer wird es glücken, die Bakterie in dem gelegten „Hinterhalt" 

 zu packen. 



Sehr bequem sind auch Bakteriensporen zu isolieren, wenigstens 

 wenn man einen einfachen Kunstgriff anwendet, der darin besteht, 

 daß man das Ende der Nadel mit einer sehr dünneu Paraffinschicht 

 überzieht, und zwar dadurch, daß man es in eine lüprozentige 

 Lösung von Paraffin in Petroleumäther taucht. Dann bleiben die 

 Bakteriensporen außerordentlich gut an der Nadel haften ; man kann 

 sie sogar mit der punktförmigen Nadel No. 1 isolieren. Die Er- 




30 Schonten: Reinkultureneiner unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII, 1. 



klärung dieser Tatsaclie ist natürlich in einer besonderen Adhäsion 

 zwischen der Paraffin und der Sporenwand , die eine besondere 

 chemische Struktur hat, zu suchen. — 



Wir liaben gesehen , daß das Material , woraus isoliert wurde, 

 immer in physiologischer Kochsalzlösung verteilt war. Aus zwei Ur- 

 sachen habe ich diese Flüssigkeit gewählt : zunächst wegen seiner 

 geringen Viskosität. Aus Figur 6 und 7 ist es ersichtlich, daß die 

 kleine Flüssigkeitsmenge mit der isolierten Zelle , wenn sie aus den 

 größeren Materialtropfen gezogen ist , sich als ein selbständiges 

 Tröpfchen loslöst. Das würde nicht möglich sein , wenn man es 

 mit einer viskosen Flüssigkeit zu tun hätte. ^ Zweitens liegt ein 

 großer Vorteil darin, daß Tröpfchen einer Kochsalzlösung nicht ver- 

 dampfen 5 man kann diese, mit den darin sich befindenden Bakterien, 

 z. B. 24 Stunden auf der Isolationskammer lassen , und dann haben 

 sie noch dieselbe Größe. Tröpfchen einer anderen Flüssigkeit werden 

 während der Beobachtung kleiner, um nach sehr kurzer Zeit beinahe 

 ganz zu verschwinden. Eine vollkommene Erklärung dieses Phäno- 

 mens wage ich noch nicht zu geben ; sicherlich spielen hier aber, 

 wie zahlreiche Versuche mir lehrten , die wasseranziehende Kraft 

 des Kochsalzes und die Temperatur des Apparates selbst und der 

 Umgebung eine Hauptrolle. 



Man isoliere, wenn möglich, aus frisch hergestelltem Material, 

 z. B. aus Kulturen, welche nicht älter sind als 24 Stunden, ins- 

 besondere wenn man es mit Bakterien zu tun hat. Es ist mir näm- 

 lich wahrscheinlich , daß oft ein ziemlich großer Prozentsatz der 

 Bakterien in einer Kultur tot oder beinahe tot, jedenfalls nicht mehr 

 entwicklungsfähig ist. Das kann jedoch nicht von allen Bakterien 

 gesagt werden ; ich habe gearbeitet mit Arten (z. B. die Fäces- 

 bakterien von Kohlbrugge , worüber später gehandelt werden soll), 

 wobei alle isolierten Bakterien sofort Kolonien gaben, und mit 

 andern Arten, bei denen die Isolation einer ziemlich großen Anzahl 

 Zellen kein Resultat ergab. Bei Hefezellen und selbstverständlich 

 auch bei Pilzsporen tritt diese Schwierigkeit nicht zutage. 



Man untersuche immer, ehe man mit dem eigentlichen Isolieren 



^) Es kann aber auch vorkommen, daß gewisse Flüssigkeiten zu 

 wenig viskos sind, so daß sie sich über die Unterseite des Deckglases 

 ausbreiten. Das ist z. B. der Fall mit gewöhnlichem Serum. Wenn man 

 davon Kulturtropfen nimmt, findet man diese nach einiger Zeit untereinander 

 zerflossen. Man verdünnt es daher mit Wasser oder mischt es mit ein 

 wenig Gelatine. 




XXII, 1. Schouten: Reinkulturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. 31 



anfängt , in welcher Nährflüssigkeit der Organismus , der isoliert 

 werden soll , am besten wächst. Zu diesem Zweck richtet man 

 mehrere Deckgläschen, jedes mit einem Materialtropfen und mit 

 z. B, 5 Kulturtropfen verschiedener Nährlösungen , und bringt in 

 dem Isolierapparat , vermittels einer der augförmigen Nadeln , bei 

 schwacher Vergrößerung, ein ganzes Auge, gefüllt mit Zellen, 

 in jeden Kulturtropfen. Die Deckgläschen werden dann auf ge- 

 wöhnliche feuchte Kammern gelegt, wenn nötig in den Brutschrank 

 gestellt, und am folgenden Tage kontrolliert. Diese vorläufigen Ver- 

 suche sind bequem auszuführen , und kosten nicht viel Zeit. Be- 

 ginnt man aber sofort mit dem Isolieren, dann tut man oft viel 

 Arbeit umsonst. 



Die Gründe für den Gebrauch zweier Nadeln sind folgende. 



Irgendwelche Umstände könnten Veranlassung sein, daß sich in 

 dem Auge der Nadel , mit der eine Zelle isoliert wurde , noch eine 

 Bakterie festsetzte, obgleich es sehr selten vorkommt, wenn man mit 

 reinen , gut sterilisierten Nadeln arbeitet , wenn das Material ge- 

 nügend verdünnt ist , und man nur dafür sorgt , daß die Nadel 

 niemals zu tief im Materialtropfen steckt. Dann könnte die Bakterie 

 wohl einmal mit der isolierten Zelle zusammen in dem Kulturtropfen 

 landen, und es würde keine Keinkultur entstehen. Wenn man eine 

 große Zelle, z. B. von Hefe, isolierte, würde man den Fehler später 

 wohl bemerken , aber bei Bakterien könnte große Verwirrung ent 

 stehen. 



Darum haben wir lieber mit zwei Nadeln arbeiten wolleii. 

 Hat man wirklich beobachtet, daß man nur eine Zelle isoliert hat 

 und neben dem Kulturtropfen deponiert , dann wird diese weiter in 

 den Kulturtropfen mit der zweiten Nadel transponiert, über deren 

 vollkommene Reinheit man sieher sein kann. 



Wenn man nach einiger Zeit sieht, daß die isolierte Zelle sich 

 in dem Kulturtropfen vermehrt hat, muß in ein gewöhnliches Röhr- 

 chen übergeimpft werden. Hat man einen festen Kulturtropfen ge- 

 braucht, so wartet man, bis die Kolonie mit bloßem Auge sichtbar 

 ist. Für die Übertragung kann man von einem einfachen kleinen 

 Apparat, der „Wechselkammer", Gebrauch machen, die schematisch 

 und im Durchschnitt in Figur 13 abgebildet ist. 



Auf einem Fuß Ä, der mit Blei beschwert ist, stehen zwei 

 Säulchen i?, von 10 cm Höhe. Auf diesen ist ein Objektglas C mit 

 einer feuchten Kammer vermittels Siegellack befestigt. In der Mitte 

 ist eine Öffnung D, deren Durchmesser 15 mm beträgt. Die Öff- 




32 Schonten: Reinkultureneineruntercl. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII, 1. 



nimg kann durch ein Glasplättchen jE", das ganz mit Vaseline be- 

 strichen ist, abgeschlossen werden, wenn man es darunter schiebt. 

 Dieses Plättchen hat in der Mitte eine Öffnung, worunter ein hohler 

 kupferner Knopf O befestigt ist. In diesen Knopf bringt man einen 

 Tropfen Wasser, so daß nach Abschließung der Kammer von unten 

 der Raum mit Wasserdampf gesättigt ist. Auf die feuchte Kammer, 

 welche ebenfalls von innen mit Vaseline bestrichen ist , um von 

 Infektion durch Stoffteilchen nicht belästigt zu werden, legt man das 

 Deckglas F ^ auf dem isoliert ist. Man kann nun sehr bequem, 

 wenn man E weggeschoben hat, von unten, durch die Öffnung hin, 



B 



D 



G 



E 



C 



B 



A 

 13. 



V 



mit einer Platiunadel aus dem Kulturtropfen in ein Röhrchen über- 

 impfen. Dieser kleine Apparat hat den Vorteil, daß das Deckgläschen 

 vollkommen festsitzt, daß Infektion von außen während dieser Mani- 

 pulation beseitigt wird , und daß das Verdampfen der Tropfen auf 

 dem Deckgläschen mehr verhindert wird , was nicht der Fall ist, 

 wenn mau es einfach in eine Deckglaspinzette klemmt. 



Der Apparat findet auch , wie wir oben sahen , bei der Ver 

 dünnung des Materials und der Herstellung der Isolierdeckgiäschen 

 Verwendung. 



Sollte es vielleicht für einige Mikroorganismen aus dem einen oder 

 andern Grunde erwünscht sein, daß sie nach der Isolation sich nicht 

 in einer feuchten Kammer , sondern direkt in einem Röhrchen oder 




XXII, 1. Schonten: Reinkultureneinerunterd. Mikroskop isoliert. Zelle. ;i3 



Kolben weiter entwickeln, so kann man folgendermaßen zu Werke 

 gehen. Man isoliert in einem flüssigen Knlturtropfen und bringt 

 sofort das Gläschen anf die Wechselkammer. In einem sterilisierten 

 Kapillarglasröhrchen (+ 1 cm lang, Lumenweite + ^j^ mm), oder 

 in einem sterilisierten Stückchen Filtrierpapier (+ 3X6 mm) , von 

 dem man immer Vorrat haben muß , wird dann vermittels einer 

 sterilisierten Pinzette der Kulturtropfen aufgesogen und sofort in das 

 Röhrchen oder den Kolben gebracht. 



Anwendungen. 



Natürlich bestanden die ersten Anwendungen darin , daß ich 

 Reinkulturen von allerlei Mikroorganismen züchtete, auch von solchen, 

 bei denen das Isolieren nach der Koch sehen Methode mit mehr oder 

 weniger Schwierigkeiten verbunden ist. Von den letzteren nenne 

 ich die Saprolegniaceen, die, wie bekannt , meistens in Wasser vor- 

 kommen, welches von Bakterien wimmelt, was zur Folge hat, daß 

 Kulturplatten oft so stark durch überwuchernde Bakterien verun- 

 reinigt sind, daß ein Isolieren des langsam wachsenden Pilzes un- 

 möglich gemacht wird. Es kostete jedoch nicht viel Mühe, um nach 

 der beschriebenen Methode aus sporenhaltigem Material (besonders 

 wenn die Sporen noch nicht lange aus dem Sporangium heraus- 

 getreten waren) eine Spore zu isolieren, die nicht mit Bakterien ver- 

 unreinigt war, und daraus eine Reinkultur zu züchten. 



Zwei Anwe'ndungen möchte ich noch ausführlich beschreiben, 

 und zwar weil dabei meine Methode in der Tat die einzige war, 

 die zu einem Resultate führte. Beide betretfen die Frage der 

 Pleomorphie. 



Eine Auseinandersetzung von dem, was über diese belangreiche 

 Frage geschrieben ist, und eine Aufzählung der verschiedenen Beob- 

 achtungen, die damit zusammenhängen, würde Stotf genug geben für 

 ein ganzes Buch. Ich will mich darum in diesem engen Rahmen 

 einer ausführlichen Besprechung dieser Frage enthalten, und nur zu 

 zeigen versuchen, daß für ein abschließendes Studium dieses Problems, 

 die bisher gebrauchten technischen Hilfsmittel unzureichend sind, und 

 eine Methode wie die oben beschriebene unbedingt notwendig ist. 

 Dabei ist die Benennung „Pleomorphie" als ein Kollektivbegritf 

 aufzufassen, unter den alle beobachteten Variationen von Bakte- 

 rien fallen. 



Zeitsclir. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 1. 3 




34 Schonten: Reinkultureneiner unter cl. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII, 1. 



Bei den Untersuchungen von Nägeli, Zopf u. a., welche die 

 gewaltigsten Übergänge zwischen allen möglichen Formen wahr- 

 nahmen, brauchen wir nicht stehen zu bleiben, da sie nicht mit 

 Reinkulturen angestellt und also in gewissem Sinne wertlos sind. 

 Ganz richtig sagt darum Migula^, mit Bezug auf die Versuche von 

 Zopf, wo er über Arten spricht, die in Reinkulturen gezüchtet sind: 

 „Eine so weitgehende Vielgestaltigkeit ist niemals beobachtet worden." 



Aber zwischen Pleomorphie in diesem Sinn und einem absoluten 

 Konstantsein der Form besteht ein großer Unterschied. Zahllos sind 

 die Versuche, welche ernste und tüchtige Forscher mit Hilfe von 

 Reinkulturen gemacht haben, bei denen die Formen der Bakterien 

 doch ineinander übergingen. Man hat Kokken sich in Stäbchen ver- 

 ändern sehen, Stäbchen in Vibrionen, diese wieder in Kokken etc., 

 und das alles unter veränderten Umständen, die nicht so abnormal 

 waren, daß sie nicht auch in der Natur hätten vorkommen können. 

 Was hat man von solchen Versuchen zu halten? Viele Forscher 

 nehmen sie als wahr an und schrecken doch vor einer konsequenten 

 Anwendung der Resultate zurück, die darin bestehen muß, daß man 

 die ganze Einteihmg der Bakterien in Kokken, Stäbchen etc. fahren 

 läßt. Aber damit würde ein großer Teil des Gebäudes der Bak- 

 teriologie fallen. 



Eine Folge ist, daß man in den meisten Handbüchern einer 

 gewissen Unsicherheit über diese Frage begegnet. Mau fürchtet sie 

 anzufassen, redet um die Dinge herum und kommt zu dem billigen 

 Schluß, daß die Wahrheit wohl so etwa in der Mitte liegen müsse. 

 Aber mit diesem Ausweg ist wenig getan. 



Doch gibt es einzelne Forscher, die wohl zu sagen wagen, was 

 sie von den Dingen halten, und die in scharf umrissenen Zügen an- 

 geben , inwieweit sie die Pleomorphie annehmen oder verwerfen. 

 Zu ihnen gehören u. a. Migula und Duclaux. Der erstere, ein 

 Gegner der Pleomorphie, erkennt z. B. in bezug auf die Mikrospora 

 comma- an, daß diese als echte typische Koramaformen vorkommen 

 können, die ungefähr dreimal so lang als breit sind, und eine deut- 

 liche Krümmung anzeigen ; weiter in kürzeren Längen , wobei die 

 Krümmung stärker oder schwächer sein kann, und endlich als sehr 

 lange Formen, sechs- bis achtmal so lang als dick, mit einer sehr 

 starken oder kaum bemerkbaren Krümmung. Er nimmt also, wie 



^) Migula, W., System der Bakterien Bd. I, p. 221. 

 2) 1. c, p. 234. 




XXII, 1. Schonten: Reinkulturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. 35 



jeder Bakteriologe beute tut, an, daß die Größe der Zellen sich 

 verändern kann, und auch, daß Unterschiede in der Form vorhanden 

 sein können, letzteres jedoch innerhalb gewisser Grenzen, die der 

 Charakter der Art bestimmt. Die Grenzen zieht er mit Bestimmt- 

 heit wenn er sagt : „Indessen so verschiedenartig auch die einzelnen 

 Formen einer Art sein mögen, sie halten sich dennoch immer inner- 

 halb der Grenzen, welche ihnen durch den Charakter der Gattung- 

 gezogen sind ; niemals wird aus einer Microspora ein 

 Spirillum oder ein Bacillus." 



Einen entgegengesetzten Standpunkt nimmt mit eben so viel 

 Bestimmtheit Duclaux ein. Nachdem er verschiedene Versuche an- 

 geführt hat, bei denen die Formen der Bakterien auf alle mögliche 

 Weise ineinander übergehen, sagt er^: „Une Classification est im- 

 possible k faire; il est impossible de trouver pour chaque microbe 

 un petit nombre de proprietes assez nettes et assez constantes pour 

 pouvoir assurer sa diagnose." Unter „Art" versteht darum Duclaux 

 einen Bazillus von typischer Form, mit all den abweichenden Ba- 

 zillen , die auf experimentellem Wege daraus gezüchtet werden 

 können. 



Bei einem methodischen Studium der Frage von der Pleomorphie 

 wird ja doch immer wohl eine Schwierigkeit bleiben, die man nicht 

 ganz auflösen kann. 



Es ist diese: welche der veränderten Umstände, unter denen 

 man die Form der Bakterien variieren sieht, sind abnormal, d. h. 

 so, daß sie in der Natur nicht vorkommen, und welche sind normal. 

 Einige Autoren ' z. B. wollen durchaus niclit leugnen , daß eine 

 Bakterie in der Form eines Stäbchens, Vibrios und Kokkus vor- 

 kommen kann, wenn man nur die Kultur abnormalen Umständen 

 aussetzt. Mace" sagt über den Proteus von Hauser: „Mais pour 

 obtenir des variations de formes , il faut placer la Bacterie dans 

 des conditions defavorables, en particulier l'a faire vivre dans 

 un milieu acide." 



Es ist wahr, daß viele Fälle von Pleomorphie, die bekannt ge- 

 worden sind, gerade die Folge abnormaler Lebensbedingungen waren 

 (cf. z. B. die bekannten Versuche von Guignard und Charnix mit 

 Bac. pyocyaneus , von Schottelius mit Bac. prodigiosus etc.). In 

 allen diesen Fällen konnten die Forscher die ursprünglichen Formen 



^) Duclaux, Traite de microbiologie. I, 1898, p. 260. 

 -) Traite pratique de Bacteriulogie. 3°ie ed. 1897. p. 329. 



3* 




• 



36 Schouten: Reinkulturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII, 1. 



wieder erlangen, Avenn sie die Bakterien aueli wieder in ilirc ur- 

 sprüug-licbe Umgebung brachten. 



Andere Untersuchungen — zu zahlreich um aufgezählt zu wer- 

 den — hat man angestellt, bei denen Veränderungen erschienen 

 unter modifizierten Umständen, die man nur in blindem Vorurteil 

 abnormal nennen kann. 



In solchen Fällen nehmen die Gegner der Pleomorphie ihre 

 Zuflucht zu einer anderen Waffe. Die Forscher sind dann bei ihrer 

 vermeintlichen Reinkultur entweder nicht von einer Zelle ausge- 

 gangen, oder die Kultur ist später durch Luftinfektion verunreinigt 

 worden. 



Es ist nicht zu leugnen, daß beide Fälle vorkommen können. 

 Die Möglichkeit einer Luftinfektion ist aber bekanntlich äußerst 

 gering. Wenn man weiter mit der nötigen Vorsicht arbeitet und 

 die Versuche, wo es darauf ankommt (wie bei den hier folgenden 

 über Pleomorphie), nicht nur einmal ausführt, sondern gleichzeitig 

 in verschiedenen Serien, und sie darauf noch einmal wieder- 

 holt, dann hat mau Sicherheit, daß Luftinfektion nicht die Ursache 

 fehlerhafter Resultate gewesen ist.' 



Der andere Einwand, daß man bei der Reinkultur, die man 

 mit der Koch scheu Methode bekommen hat, nicht von einer Zelle 

 ausgegangen ist, halte ich für bedeutungsvoller. Von verschiedenen 

 Seiten hat man darauf gewiesen, daß der Plattenkulturmethode nicht 

 zu trauen ist, wenn man nur einmal eine Platte ausgießt, und 

 aus den daraus entstandenen Kolonien Kulturen anlegt, — eine üble 

 Angewohnheit, die viele Forscher haben. Aber ich glaube nicht, 

 daß alle Forscher Kochs Methode in dieser Weise in Anwenduna' 

 bringen, ^'iele werden zweifellos nicht aus den zuerst entstandenen 

 Kolonien direkt ihre Kulturen angelegt haben, sondern aus den 

 Kolonien zuerst noch einmal eine Platte gegossen, und dies einige 

 Male wiederholt haben, bevor sie ihre eigentlichen Versuche an- 

 stellten. Und nun darf Pleomorphie, die man bei solchen Versuchen 

 gefunden hat, nicht so einfach geleugnet werden. Ich für meinen Teil 

 glaube nämlich, daß unter solchen Vorsichtsmaßregeln die Methode 



^) Die Möglichkeit einer Luftinfektion haben beide Methoden. Sie ist 

 aber bei meinem Isolationsvorfaliren mindestens ebenso gering wie bei der 

 Plattenkulturmethode. Während meiner sechsjährigen Versuchszeit ist mir 

 noch nicht ein Fall vorgekommen. 




XXII, 1. Seh outen: Reinkulturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. ;^ 7 



von Koch nahezu vollkommene Zuverlässigkeit gil)t\ und dies ist 

 auch die Absicht des Erfinders gewesen, dessen Methode nicht an 

 Wert verlieren darf, weil andere sie verkehrt anwandten. 



Aber absolute Zuverlässigkeit k a n n sie nicht geben. 

 .JöRGENSKN ■^ sagt darum auch: „Wenn man auch die Plattenkulturen 

 mehrere Male wiederholt, so weiß man doch in Wirklichkeit nie, 

 ob das Ziel erreicht ist oder nicht." Darum hat Hansen"^ Kochs 

 Methode auf die Weise für Hefezellen verbessert, daß er auf 

 einem großen Deckglas eine Gelatineplatte ausgießt, die so dünn ist, 

 daß man unter dem Mikroskop kontrollieren kann, ob die Zellen 

 geschieden sind und wo sie liegen. Die Stellen werden angedeutet, 

 und man kann die Entwicklung der Kolonien vom ersten Augenblick 

 an verfolgen. 



Für Bakterien ist dieses Prinzip natürlich undurchführbar, da 

 man sie in einer noch so dünnen Gelatineschicht doch nicht liegen 

 sehen und noch weniger von festen kleinen Partikelchen unterscheiden 

 kann, die immer in kolossaler Menge darin vorkommen. 



Ich meine darum, daß meine Isolierungsmethode für eine ab- 

 schließende Untersuchung über die Veränderlichkeitserscheiuungen bei 

 Mikroorganismen' notwendig ist, und zwar vor allem, weil man hier- 

 bei sicher ist , daß der Ausgangspunkt der Kultur eine Zelle ist, 

 weiter, weil man die Variation schon bei den ersten Zellen der 

 Kolonie kontrollieren kann, und nicht zum wenigsten, weil sie den 

 Weg zu einem vergleichenden Versuch aller aufeinanderfolgenden 

 Generationen bahnen kann (vergl. p. 13). 



Die Versuche, die ich gemacht habe, sind geringer, als man 

 nach dieser langen Einleitung erwarten sollte. Der Grund hierfür 

 ist, daß ich noch keine Gelegenheit hatte, sie weiter fortzusetzen. 

 Was ich aber gefunden habe, halte ich für nicht zu unwesentlich, 

 um es hier mitzuteilen. 



^) Dieses gilt natürlich nur, wenn man es mit kleinen Zellen zu tun 

 hat, auf denen sich nicht leicht andere festsetzen. Für große Zellen, die 

 aus einem stark verunreinigten Medium kommen, die oft mit Bakterien 

 besetzt sind, bleibt (wie ich schon in der Einleitung sagte) der Ein- 

 wand bestehen, daß sie durch Schütteln nicht isoliert werden kimnen. 

 selbst nicht, wenn man die Plattenkulturmethode mehrere Male an- 

 wendet. 



-) Die Mikroorganismen der Gärungsindustrie. Berlin (Parey) 

 1898, p. 37. 



^) ibid., p. 35. 




38 Schonten: Reinkvilturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII, 1. 



I. 



Dr, KoHLBRUGGE^ hatte, während er an dem hiesigen hygieni- 

 schen Institut Untersuchungen anstellte, für eine Untersuchung von 

 Fäces Gelatineplatten angelegt und aus den Kolonien in Röhrchen 

 mit Fleischgelatine übergeimpft. Nach einiger Zeit fand er in zwei 

 Eöhrchen eine Mischung von Stäbchen und Vibrionen, und weil er 

 gerade mit einer Untersuchimg über Vibrionen beschäftigt war, wollte 

 er diese letzteren isolieren. Er goß zum zweiten Male eine Platte, 

 diesmal von Fleischagar. Von den entstandenen Kolonien zeigte 

 jedoch keine einzige Vibrioneu, sondern alle bestanden aus kurzen 

 Stäbchen. Er impfte auf Glyzeringelatine, und das Resultat war 

 wieder: nur sehr kurze Stäbchen. Nach einiger Zeit aber, als die 

 Gelatine flüssig geworden war, untersuchte er sie wieder, und mm 

 kamen neben den Stäbchen wieder Vibrionen vor. Aus der flüssig 

 gewordenen Gelatine goß er mm wiederum eine Agarplatte, und die 

 Folge war, daß er wiederum nichts als kurze Stäbchen fand. Aus 

 derselben Gelatine goß er auch eine Gelatineplatte und machte eine 

 Stichkultur in Fleischgelatine. Im Anfang traf er nur kurze Stäb- 

 chen an, aber später, als die Gelatine flüssig geworden war, neben 

 den Stäbchen auch Vibrionen. Auf keine Weise war es ihm möglich, 

 eine Reinkultur von Vibrioneu zu gewinnen; wohl von Stäbchen, 

 wenn er nämlich eine Kultur in Bouillon, worin beide vorkamen, bei 

 37^ setzte. Darin schienen die Vibrionen abzusterben, während die 

 Stäbchen übrig blieben. 



KoHLBRUGGE teilte mir endlich, nachdem alle Versuche, um die 

 Sache aufzulösen, mißglückt waren, den rätselhaften Fall mit, und 

 ersuchte mich, doch einmal einen Vibrio aus einer flüssigen Kultur 

 für ihn zu isolieren. 



Ich isolierte einige. Die Kulturtropfen bestanden aus Fleisch- 

 gelatine. Die Deckgläschen, auf denen isoliert wurde, lagen auf 

 feuchten Kammern, auf deren Boden ich noch ein Tröpfchen Wasser 

 brachte. Am folgenden Morgen waren die Kolonien schon da, und 

 wir konnten mit der stärksten Vergrößerung das Gewimmel der Vi- 

 brionen prachtvoll sehen. Am darauffolgenden Tage hatten die 

 Kolonien an Größe stark zugenommen ; sie nahmen ungefähr ein 



^) Symbiose zweier pleomorpher Fäces -Bakterien (Arch. f. pathol. 

 Anat. u. Phys. u. f. klin. Med. Bd. CLXIII, H. 3, p. 365). 




XXII, 1. Schouten: Keinkultureneiner unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. 39 



Viertel von der Größe der Kulturtropfen eiu. In allen sahen wir 

 stark bewegliche Vibrionen. Wir machten auch gefärbte Präparate 

 davon und sahen wieder nichts als Vibrionen, Darauf wurde aus 

 den Kolonien auf drei verschiedene Nährböden geimpft, nämlich auf 

 gewöhnliche Fleischgelatine, auf dieselbe zehnmal verdünnt, welche 

 also flüssig war, und auf Peptonwasser (1 Prozent Pepton). Nach 

 zwei Tagen machten wir farbige Präparate von diesen Kulturen. In 

 den Kulturen auf gewöhnlicher Gelatine waren lebende Vibrionen, 

 auch Stäbchen zu sehen, von beiden ungefähr gleichviel. Die Kul- 

 turen in flüssigen Nährböden zeigten beinahe nur Vibrionen. 



Auch isoliei'te ich zwei Vibrionen in Fleischgelatine, und legte 

 das Deckgläschen auf eine feuchte Kammer, auf deren Boden ich 

 keinen Wassertropfen brachte. Die Oberfläche der Kulturtropfen 

 war hier also trocken. 



In Verbindung hiermit war auch ein Unterschied zu beobachten 

 in der Gestalt der Bakterien aus den Kolonien. Während in den 

 vorigen Kolonien, welche in einem mit Wasserdampf gesättigten 

 Kaum entstanden waren, alle Bakterien nach einigen Tagen noch 

 als stark bewegliche Vibrionen in dem Kondeusationswasser, welches 

 auf den Kulturtropfen sich niedergeschlagen hatte, durcheinander 

 wimmelten, entstanden hier aus der isolierten Vibrio schon im Anfang 

 dicke Vibrionen, die unbeweglich waren (wahrscheinlich, weil sie 

 vollständig trocken lagen), während eine Untersuchung der Kolonien, 

 als sie drei Tage alt Avaren, neben den dicken Vibrionen schon 

 Stäbchen sehen ließ. 



Es ergab sich also auf jeden Fall mit vollkommener Sicherheit 

 aus allen diesen Untersuchungen, daß eine Vibrio Stäbchen hervor- 

 bringen kann. Es war sehr wahrscheinlich , daß die physikalische 

 Natur des Nährbodens hierbei eine große Rolle spielt, und zwar 

 so, daß auf einem festen Nährboden Stäbchen, auf einem flüssigen 

 Vibrionen entstehen. 



Wa r u m in flüssigen Nährböden im Anfang noch einige Stäbchen 

 neben den Vibrionen vorkommen, wage ich nicht zu entscheiden. 

 Aber bei Cholerakulturen ist dieses auch eine gewöhnliche Er- 

 scheinung. 



Aus den Kulturen mit Vibrionen kann man wieder die Stäbchen 

 zurückerhalten, wenn man auf feste Nährböden impft, imd aus Kul- 

 turen mit Stäbchen erhält man die Vibrionen wieder, wenn man sie 

 in flüssige Medien bringt. Wir haben hier also eine Erscheinung 

 einer nicht erblichen Variation. Dieser Fall ist analog demjenigen, 




40 Schonten: Reinkulturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII. 1. 



dem BoxNiER bei höheren Pflanzen nachgegangen ist. Dieser For- 

 scher^ brachte Pflanzen aus der Ebene anf die Berge, sah dort 

 Veränderungen auftreten, brachte sie darauf wieder in die Ebene, 

 und fand, daß sie ihre vorige Gestalt wieder annahmen. 



Obgleich diese Experimente wohl einigen Anspruch auf Ge- 

 nauigkeit macheu konuten, weil ich sie nicht mit einer, sondern mit 

 mehreren Vibrionen gemacht hatte, beschloß ich doch, derselben Frage 

 noch einmal nachzugehen. Insonderheit wollte ich noch einmal sehen, 

 binnen wieviel Zeit man aus einem Vibrio ein Stäbchen, und aus 

 einem Stäbchen wieder einen Vibrio machen könne. 



Ich isolierte vier Vibrionen in Kulturtropfen von Fleischgelatine. 

 Zwei davon ließ ich sich in einer feuchten Kammer, ohne Wasser 

 auf dem Boden, entwickeln; die anderen mit einem Wassertropfen. 

 Nach zwei Tagen kontrollierte ich die Kolonien. Die ersteren be- 

 standen aus dicken, unbeweglichen, die letzteren aus dünneren, stark 

 beweglichen Vibrionen. Von den Kolonien impfte ich auf Fleisch- 

 agar, aus jeder Kolonie in ein Röhrchen. Nach zwei Tagen schien 

 es bei Untersuchung der lebenden Zellen, wie der gefärbten Prä- 

 parate , daß in allen Röhrchen nichts als sehr kleine bewegliche 

 Stäbchen , höchstens 1 /tt lang , vorkamen , einige so kurz , daß es 

 beinahe Kokken waren. Aus jedem dieser Agarröhrchen impfte ich 

 in Bouillon, gewöhnliche und zehnmal verdünnte Bouillongelatine. 

 Nach zwei Tagen schienen alle flüssigen Nährböden nichts als große, 

 stark bewegliche und stark gekrümmte Vibrionen zu enthalten, wäh- 

 rend auf der Fleischgelatine nur kleine, bewegliche Stäbchen vor- 

 kamen. Innerhalb 6 Tagen war also der Übergang vom Vibrio 

 zum Stäbchen, und vom Stäbchen Avieder zurück zum Vibrio ab- 

 gelaufen. 



Noch ein kurzes Wort will ich beifügen nacli Anleitung einer 

 Bemerkung, die Kohlbrugge in der oben genannten Abhandlung 

 (pag. 375) macht. 



Er sagt darin, daß das Stäbchen aus dem Gemenge von Vi- 

 brionen und Stäbchen, das icli auch für ihn isolierte, nach der Iso- 

 lierimg die Gelatine nicht mehr verflüssigte, aber vorher wohl. Das 

 war vollkommen richtig. Der Grund für diese Erscheinung war, daß 

 ich bei meinen ersten Experimenten die Nadeln beim Sterilisieren 

 zuweilen tiefer in die Schwefelsäure als ins Ammoniak eintauchte. Da- 



^) Recherches sur Tanatomie experimentale des vegetaux. G. Bonnier. 

 Ed. Crete. Corbeil (S. et 0.) 189G. 




XXII, 1. Scliouten: Reinkultureneinerunterd. Mikroskop isoliert. Zelle. 41 



diircli diffundierte, worauf ich oben (p. 21) schon verwiesen habe, die 

 überflüssige Säure nach der Spitze der Nadel, zum Nachteile natürlich 

 der isolierten Bakterien. Als ich unter Vermeidung' dieses Fehlers 

 das Stäbchen nochmals isolierte, schien sein Verflüssigungsvermögen 

 nach der Isolierung ebenso stark zu sein. 



II. 



Bei einer Untersuchung über „Raggi", die ich in „'s Lands 

 Plantentuin" zu Buitenzorg machte , wurde ich schon im Anfang 

 durch eine Erscheinung, die meine Aufmerksamkeit erregte, auf einen 

 Seitenweg geführt, den betreten zu haben ich mich aber nicht zu 

 beklagen brauche. 



Ich nahm nämlich wahr , daß die Sporangien von Rhizopus 

 Oryzae, einem der beiden Pilze, die stets im Raggi gefunden werden, 

 Sporen enthalten von sehr verschiedener Größe und Gestalt. Die 

 kleinen waren meistens elliptisch, + 6x5/* groß ; daneben waren 

 langgedehnte Sporen darunter, z. B. von .32 X 8 /^ und dazwischen 

 allerlei Übergänge. Unter dem Eindruck der Untersuchungen von 

 DE Vries über Mutation, fragte ich mich unwillkürlich, ob die ver- 

 schiedenen Sporen unter denselben Bedingungen ausgesäet , immer 

 einen Pilz von derselben Form geben würden. 



Bei meinen Experimenten ging ich immer von eine m Sporan- 

 gium aus , aus dem ich dann nach meiner Reinkulturmethode drei 

 Sporen, eine kleme, eine mittelgroße und eine große aussuchte, und 

 diese in Tropfen von derselben Nährflüssigkeit brachte (5 Prozent 

 Glukose, ^/.i Prozent Pepton, ^/^^ Prozent Mouokaliumphosphat, Yoo ^^^' 

 zent Magnesiumsulfat). Dies alles geschah unter einem Deckgläs- 

 chen, so daß die Bedingungen für alle drei dieselben waren. Als 

 das Mycelium sich in einem Tropfen genügend entwickelt hatte, wurde 

 es in ein Röhrchen mit Glukose-Pepton-Agar (obengenannte Mischung 

 -j- 2 Prozent Agar) gebracht. Auch hierbei sorgte ich für voll- 

 ständige Gleichheit des Nährbodens. 



Zunächst schien es mir, daß die Entwicklung während der ersten 

 24 Stunden in gleichem Verhältnis zu der Größe der Spore war ; 

 später fiel der Unterschied weg oder war doch nicht mehr wahr- 

 nehmbar. Die mittelgroßen und die großen Sporen gaben stets den 

 normalen Pilz. Die kleinen entwickelten sich in den ersten 3 Tagen 

 nur bis zu einem gewissen Stadium (zu einem so kleinen Mycelium, 




42 Schonten: Reinkulturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII, 1, 



daß es noch bequem in dem Tröpfchen , in dem die Spore isoliert 

 war , Platz hatte) , blieben darauf einige Tage stehen und gingen 

 dann in den meisten Fällen zugrunde. Doch waren auch solche 

 darunter, die das kritische Stadium überwanden und dann sofort 

 eine Zwergrasse gaben , die sich als erblich konstant erwies ; sah 

 ich doch während der vielen Impfungen^ die ich gut 3 Jahre lang 

 anstellte , keine Veränderungen. Wir haben hier also einen 

 Fall von Mutation bei Pilzen. 



Wenn man den normalen Pilz und die Zwergrasse (beide also 

 von einem Sporangium herrührend) nebeneinander setzt, sieht mau 

 makroskopisch folgende Unterschiede : 



Normal: Füllt nach 2 Tagen die untere Hälfte des Röhrchens 

 ganz mit seinen langen Öporangienträgern , auf denen die ziemlich 

 großen Sporangien sitzen. 



Z w e r g r a s s e : Bildet nur eine filzartige Schicht auf der Ober- 

 Hache des Nährbodens ; diese Schicht wird einige Millimeter dick ; 

 die Sporangienträger werden höchstens 4 mm lang. 



Mikroskopisch findet man folgende Einzelheiten : 



Normal: Diameter der Sporangien + 180 ,a, Dicke der 

 Sporangienträger + 16 /i. Die Sporen ungefähr 8x6 /t. 



Zwergrasse: Diameter der Sporangien + 70 /^, Dicke der 

 Sporangienträger + 8 f-i. Mittlere Größe der Sporen 6x4 /t. 

 Sehr dünne Sporangiumwand , was auch daraus deutlich wird , daß 

 man mit einer Impfnadel niemals ganze Sporangien überimpfen kann, 

 da sie beim Berühren sofort zertrümmert Averden. Das ist bei der 

 normalen Form absolut nicht der Fall. 



p]s ist mir noch nicht klar, welche Faktoren das Absterben 

 des Myceliums von einer kleinen Spore bewirken, und welche Fak- 

 toren es dieses Stadium überleben lassen, um dann eine Zwergrasse 

 zu formen. 



Zusammenfassung. 



1) Die neue Methode zur Herstellung von Reinkulturen läßt 

 sich kurz hierin zusammenfassen : Unter dem Mikroskop wird, wenn 

 nötig bei stärkster Vergrößerung , mit Hilfe von feineu Glasösen, 

 eine Zelle aus einem Tropfen mit verschiedenen Mikroorganismen 

 isoliert und in einen sterilen Tropfen gebracht, worin sie sich zu 

 einer Reinkultur entwickelt. 




XXII, 1. Schonten: Reinkultureneiner unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. 43 



2) Der Nachteil dieser Methode (wenn ich das einen Nachteil 

 nennen darf) besteht hierin , daß sie an die , welche sie anwenden, 

 höhere Forderungen stellt als die von Koch. Ich vermute darum, 

 daß ganz unpraktische Menschen sie nicht immer mit Befriedigung 

 anwenden werden. Auch fordert sie wohl mehr Zeitaufwand. 



3) Der allgemeine Vorteil besteht darin, daß man mit ihr Mikro- 

 organismen sozusagen individuell beliandeln kann. Wenn mau 

 sie bei Reinkulturen anwendet, hat man vollkommene Sicherheit, daß 

 die einzelne Kultur aus nicht mehr als einer Zelle entstanden ist. 

 Weiter kann man die Zelle, die man isolieren will, auswählen, ^ und 

 nach der Isolierung genau kontrollieren , was mit der Zelle vor- 

 gegangen ist. Die Entwicklung der Reinkultur kann man dann auch 

 vom ersten Augenblick an mit starker Vergrößerung beobachten, 

 besonders wenn der Nährboden fest ist. 



Dieses sind Vorteile , welche die Plattenkulturmethode nicht 

 darbietet , da sie niemals vollkommen Sicherheit zu geben ver- 

 mag, daß alle Kolonien aus einer Zelle entstanden sind ; da ferner 

 beim Gießen einer Platte stets uns unbekannt bleibt, welche Zellen 

 sterben, welche sich weiter entwickeln, und was anfänglich mit diesen 

 letzteren passiert, - und endlich , weil man bei einer Plattenkultur 

 niemals die EntAvicklung der Kolonien mit der stärksten Vergrößerung 

 kontrollieren kann. 



4) Diese Methode kann für eine endgültige Untersuchung aller 

 möglichen Fragen, die Pleomorphie betreffen, dienen. Man geht hier 

 nämlich von einer Zelle aus und kann sofort sehen, welche die Form 

 der Zellen ist , ' die daraus entstehen. Ich zweifle nicht , daß man 

 auch alle aufeinander folgenden Generationen wird untersuchen 

 können. 



Gilt das Gesagte speziell für die Herstellung von Reinkulturen, 

 so sind doch auch noch andere Anwendungen luöglich. Man wird 

 mit Hilfe dieser Methode allerlei Mikroorganismen miteinander in 

 Berührung bringen oder verschiedenen Experimenten unterwerfen 

 können. Man wird also z. B. : 



^) Das ist besonders von Bedeutung, wenn man mit einem Ma- 

 terial zu tun hat, bei dem ein großer Teil der Zellen mit Bakterien 

 besetzt ist. 



^) Es können denn auch beim Gießen von Plattenkulturen oft sehr 

 rätselhafte Fälle sich einstellen, in denen die Koch sehe Methode, auch bei 

 wiederholter Anwendung uns im Stiche läßt (cf. oben die Vibrionen von 

 Kohlbrugge). 




44 Schüuten: Reinkulturen einer unter d. Mikroskop isoliert. Zelle. XXII, 1. 



5) die Frage der Kopulation mit ihr untersuchen können. Es 

 gibt im Tier- wie im Pflanzenreich viele Fälle, wo man nicht weiß, 

 ob man es mit Kopulation zu tun hat. Das ist natürlich kaum aus- 

 zumachen, wenn solche Zellen, die oft beweglich sind, sich in großen 

 Tropfen zugleich mit anderen Organismen befinden. Jetzt ist man 

 imstande auf einem Deckglas in verschiedenen kleinen Tropfen zwei 

 Zellen zusammen zu bringen ; man kann also viel bequemer vmter- 

 suchen, ob Kopulation stattfindet. Konnte man dieses früher nur 

 zufälHg sehen, so hat man jetzt eine sichere Methode. 



6) ^an wird vielleicht unter dem Mikroskop verschiedene Ex- 

 perimente über Symbiose und Parasitismus niederer Organismen 

 machen und diese von Anfang an kontrollieren können. 



7) Schließlich will ich noch darauf weisen, daß für rein tech- 

 nische Zwecke der Isolierungsapparat nützlich sein kann. Das 

 Sortieren von sehr feinem Planktonmaterial und die Anfertigung von 

 Dauerpräparaten davon (besonders einzelner Orgaue), wird bequemer 

 und mit größerer Exaktheit vorgenommen werden können als unter 

 der Lupe oder dem Präpariermikroskop aus freier Hand. Die Unter- 

 suchung oder das Zeichnen lebender Mikroorganismen, die stark be- 

 weglich sind (z. B. Infusorien, Schwärmsporen), ist oft nicht möglich, 

 da sie fortwährend aus dem Gesichtsfelde des Mikroskops ver- 

 schwinden. Mit Hilfe des Isolierungsapparates kann man sie aber 

 in ein kleines Tröpfchen überführen, wenn nötig so klein, daß sie 

 genau hineinpassen und sich also nicht drehen können. 



8) Um den Wert der Methode zu bestimmen, speziell was die 

 Anfertigung von Reinkulturen betrifft, sind mit ihr Reinkulturen von 

 einer großen Anzahl Mikroorganismen (Bakterien , Hefe- und Pilz- 

 arten) angefertigt , auch von solchen , bei denen die Züchtung 

 bisher nach der Platteukulturmethode mehr oder weniger Nach- 

 teile hatte. 



9) Die Methode ist angewendet für die Untersuchung der Frage 

 nach der Pleomorphie ; mit vollkommener Sicherheit ist bewiesen, 

 daß ein Vibrio sich in ein Stäbchen und ein Stäbchen sich in ein 

 Vibrio verändern kann. 



10) Der Bacillus , der zu diesen Experimenten diente , zeigte 

 die Form eines großen Vibrios auf einem gewöhnlichen , flüssigen 

 Nährboden und die Form eines kurzen Stäbchens auf demselben 

 Nährboden, wenn dieser mit Gelatine festgemacht war. 



11) Der Übergang vom Vibrio zum Stäbchen und vom Stäbchen 

 wieder zum Vibrio kann in G Tagen sich vollziehen. 




XXII, 1. Hansen: Über HJimateinKjsungen und Cochenillefarblösungen. 45 



12) Mit Hilfe dieser Methode ist es geglückt, durch Mutation 

 eine Zwergrasse aus einem Pilz (Rhizopiis Oryzae) entstehen zu lassen. 

 Während der vielen Impfungen, jetzt 3 Jahre lang ausgeführt, er- 

 wies sich diese Zwergrasse als konstant. 



Am Ende dieser Arbeit ist es mir eine angenehme Pflicht, 

 Herrn Prof. F. A. F. C. Went, Direktor des botanischen Instituts, 

 und Herrn Prof. C. Eykman , Direktor des hygienischen Instituts, 

 meinen herzlichen Dank auszusprechen für das freundliche Interesse, 

 das sie meiner Arbeit entgegengebracht haben. 



[Eingegangen am 16. Februar 1905.] 



Über Eisenbämatein, Chromalaunhämatem, 



Tonerdealaunhämatem, Hämateinlösungen und 



einige Cochenillefarblösungen. 



Von 



F. C. C. Hausen, 



am Normalanatomischen Institut der Universität Kopenhagen. 



I. Die Eisenhämateine. 



In seiner großen Arbeit : „Neue Untersuchungen über Zentral- 

 körper" ( Arch. f. mikr. Anat. Bd. XLIII, 1894), sagt Martin Heidek- 

 HAiN bei Besprechung seiner Eisenhämatosylinmethode folgendes : 

 „Natürlich habe ich auch versucht in Analogie des Böhmer sehen 

 Prinzipes (Hämatoxylin-Aluminium-Farben) das Eiseuhämatoxylin in 

 Lösung zu erhalten, die Farbe somit, wie Benda sich trefl'end aus- 

 drückt, als ^Tinte' zu verwerten, allein hierbei erhielt ich nur minder- 

 wertige Tiuktiouen." 



Später hat Fr. A. Janssens und A. Leblanc (Zeitschr. f. wiss. 

 Mikrosk. Bd. XV, p. 264) den Ammoniakalaun in Delafields Ge- 

 misch durch Eiseualaun ersetzt und zur Färbung der Kerne der 




46 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



Hefezellen benutzt ; jüngst hat Karl Weigert (Zeitsclir. f. wiss. 

 Mikrosk. Bd. XXI, 1904, p. 1 — 5) ein Eisenhämatoxylin angegeben, 

 nämlich: A) 1 g Hämatoxylin in 100 cc 96prozentigem Alkohol ge- 

 löst. B) 4 cc Liqu. ferri sesquichlorati (Ph. G. IV. enthält ca. 10 Proz. 

 Eisenchlorid) -|- 1 cc offizin. Salzsäure (enthält ca. 25 Proz. HCl) 

 und 95 cc Aqu. destill. 



Von A und B werden gleiche Teile gemischt, man erhält keine 

 Fällungen, sondern eine schwarze Lösung, welche wiederholt benutzt 

 werden kann, aber am besten jedesmal frisch bereitet wird (Färbe- 

 dauer wenige Minuten). Die Färbung wird als Keruvorfärbung für 

 „VAN Gieson"- Färbung benutzt. 



Selbst hatte ich auch seit 1899 vielfach eine schnelle Eisen- 

 hämatoxylinmethode benutzt , die im wesentlichen eine modifizierte 

 BENDASche war: Kurze Beizung der Schnitte mit Eisenchloridlösung 

 (4 Prozent) — aber in der Wärme, und hernach Behandlung, ebenfalls 

 in der Wärme, mit stark oxydierter, ^ wässerig alkoholischer Hämatein- 

 lösung, Diflterenzierung in der Eisenchloridlösung. Es war also etwas 

 ähnliches, wie das von Gurwitsch angegebene Schnellverfahren. 



Verschiedene Umstände veranlaßten mich im vorigen Jahre ein- 

 mal wieder mit Hämatoxylin- und Hämateinfarben mich genauer zu 

 beschäftigen, und die für jeden Mikrotechniker naheliegende Idee, 

 über welche sich Martin Heidenhain (wie ich später fand) loc. cit. 

 1894 so unzweideutig geäußert hat, versuchte ich weiter auszuarbeiten. 

 Meine Resultate sind so befriedigend gewesen , daß ich glaube , die 

 nachstehenden Farblösungen für den weiteren Gebrauch empfehlen 

 zu können ; wir haben dieselben hier im Institute vielfach benutzt. 

 Daß sie die altbewährten Eisenhämatoxylinmethoden von Benda und 

 Heidenhain überall ersetzen sollen, ist nicht von mir beabsichtigt. 



Durch die grundlegenden Untersuchungen Otto Linne Erdmann s^ 

 im Jahre 1842 über das Hämatoxylin, wurde definitiv gezeigt, daß 

 die eigentlich färbenden Eigenschaften nicht dem Hämatoxylin, son- 

 dern dem von Erdmann zuerst chemisch rein dargestellten und genau 

 untersuchten Hämatein zukommen; das Hämatoxylin färbt nur, 



^) Mit der berechneten Menge Kaliumpermanganat nach meiner Me- 

 thode; siehe später. 



-) Erdmann, 0. L. , Über das Hämatoxylin (Journ. f. prakt. Chemie 

 Bd. XXVI, 1842, p. 193—216). 




XXII, 1. Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblüsungcn. 47 



wenn es durch Oxydation in Hämatei'n, resp. Häraateinverbindungen 

 oder in noch höhere Oxydationsstufen überführt wird. — Durch die 

 Arbeiten von Gerhardt, Erdmann und Hesse wurde die Elementar- 

 formel des Hämatoxylins genau bestimmt, sie ist bekanntlich : C-^^H^^Og 

 und kristallisiert mit 1 H^O (rhombisch) oder mit 3 H.,0 (tetragonal). 

 Letztere Verbindung dürfte infolge der Darstellungsmethode des 

 Hämatoxylins die gewöhnlich im Handel vorkommende sein. Alle 

 Angaben im folgenden beziehen sich daher auf das mit ,3 H.^O 

 kristallisierende Hämatoxylin. Das Molekulargewicht 

 desselben ist: 302 -f 54 = 356. 



Das Hä matein entsteht aus dem Hämatoxylin, indem zunächst 

 2 Atome Wasserstoff wegoxydiert werden , dagegen tritt , wie Erd- 

 mann -^ zuerst meinte, kein Sauerstoff in das Molekül ein. Die Reak- 

 tion ist also : 



Cto^^o + = c^r^e + H,0. 



Hämatoxylin Hämatein 



D a s M 1 e k n 1 a r g e w i c h t d e s H ä m a t e 1 n s ist also 300. Die 

 für analytische Zwecke angegebene Darstellungsweise des Hämateins 

 wurde ursprünglich von 0. L. Erdmann 1842 genau angegeben und 

 ist mit geringen Modifikationen- die noch gebräuchlichste (sie steht 

 beschrieben loc. cit. 1842, p. 205 — 207). 



Hämatoxylin wird in nicht zu kleiner Quantität in heißem Wasser, 

 worin es leicht löslich ist, gelöst, ein kleiner Überschuß von Ammoniak 

 wird zugesetzt, -die also alkalische purpurne Lösung in eine flache 

 Schale gegossen und lose zugedeckt der Oxjalation des Luftsauer- 

 stoffs überlassen. Ammoniak muß immer im Überschuß zugegen sein, 

 und die Oxydation muß bei immer vorhandenem Überschuß von 

 Hämatoxylin verlaufen, sonst erhält man leicht höhere Oxydations- 

 produkte als Hämatein."^ Ich kann Erdmann nicht in extenso zitieren, 

 aber jeder mit Hämatoxylin arbeitende Mikrotechniker sollte diese 



1) loc. cit. 1842. 



-) Siehe auch meinen Artikel: Über Oxydationsmittel für Hämatoxylin ; 

 vgl. 0. L. Erdmann, loc. cit., Hesse, loc. cit. (p. 338) 1859, E. Erdmann, 

 Schultz, loc. cit. 1883, p. 23G u. a. 



^) Die Unkenntnis mit diesen und andern schon 1842 von Erdmann 

 angegebenen Verhältnissen hat sicherlich die Mißerfolge vieler Mikrotech- 

 niker mit dem (ähnlichen) Paul Mayer schem Eezepte (1891) zur Dar- 

 stellung des Hämatemammoniaks verursacht. 




48 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



und die andern Originalarbeiten lesen, „überflüssige Entdeckungen" 

 würde es dann weniger geben. 



Nun läßt sich natürlich die Oxydation des Häraatoxylins in das 

 färbende Hämatein auch durch viele andere Oxydationsmittel vor- 

 nehmen, und viele chemische Stoffe, welche leicht Sauerstoff abgeben, 

 sind dazu geeignet.-^ 



Auch in der Mikrotechnik des Hämatoxylins tut man gut 

 daran, quantitativ zu verfahren, Avie ich- es 1895 angegeben 

 habe. Die Bedingung ist nur die , daß man die Reaktions- 

 gleichung für die Einwirkung des S a u e r s t o f f s p e n d e r s 

 auf das H ä m a t o x y 1 i n kennt. Wünscht mau die zur Über- 

 führung in Hämatein (oder noch höhere Oxydationsprodukte) pro 

 1 g Hämatoxylin (tetragonal) nötige Menge eines be- 

 liebigen Sauer Stoff sp end er s zu kennen, so läßt sich diese 

 Größe dann aus den chemischen Formeln leicht berechnen. Ein 

 Molekül Hämatoxylin braucht zur Überführung in Hämatein 1 Atom 

 Sauerstoff; setzt man das Grammolekül Hämatoxylin als 356, und 

 ist n die Anzahl Sauerstoffatome , welche ein Grammol (GM.) des 

 Sauerstoffspenders zur Oxydation des Hämatoxylins in Hämatein der 

 Reaktionsgleichung gemäß abzugeben vermag , so gibt folgende 

 Gleichung die pro 1 g Hämatoxylin nötige Menge eines 

 beliebigen Sauerstoffspenders mit einer für unsere Zwecke 

 allgemein genügenden Genauigkeit : 



_ 0-0028 • GM. 

 n 



1 g Hämatoxylin braucht zur Überführung in Hämatein 

 folgende Mengen der unten beispielsweise aufgezählten Stoffe : 



von Kaliump ermanganat 0'177 g 



Kaliumbichrouiat 0'276 ., 



n 



Kaliumchlorat'^ 0114 



)) 



^) Siehe meinen Artikel über Oxydationsmittel für Hämatoxylin. 



-) Eine schnelle Methode zur Darstellimg des Böhmer sehen (Alaun-) 

 Hämatoxylins (Zool. Anz. No. 375, Febr. 1895). 



^) Bei der Anwendung von Chloraten und Perchloraten muß die 

 Reaktion in saurer Lösung geschehen, und es muß als Sauerstoff Über- 

 führer eine ganz geringe Menge von Kupfer-, Chrom-, Eisen- oder, wie 

 ich iramer anwende, 1 bis 2 mg Vanadinsalz zugegen sein; die Demon- 

 strationsversuche ohne Säure und mit Säure, ohne „Transferrer" und 

 mit Transferrer sind sehr instruktiv (s. meinen Artikel „Über Oxydations- 

 mittel" etc.). 




XXII, 1. Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. 49 



von K a 1 i u m p e r c h 1 r a t 0*097 g 



„ Kaliumjodat 0*200 „ 



„ Kaliumbij odat 0-182 „ 



„ Na tri umj odat (Paul Mayer 1904). . 0*187 „ etc. 



Bei Erdmann (1842) steht u. a. p. 205: „Eisenalaun^ erzeugt 

 (mit Hämatoxylin) erst nach einiger Zeit einen geringen schwarz- 

 violetten Niederschlag." p. 212 steht: „Das Hämatein- Ammoniak 

 gibt mit den meisten Metallsalzen gefärbte Niederschläge. Mit essig- 

 saurem Bleioxyd einen dunkelblauen Niederschlag, mit schwefel- 

 saurem Kupferoxd bildet sich ein blauer ins violette geneigter 

 Niederschlag. Mit salpetersaurem Wismutoxyd prachtvoll vio- 

 letter Niederschlag. Mit Eisenalaun schwarzer Niederschlag. Mit 

 Eisenchlorür [!] violetter Niederschlag." Ähnliche Angaben finden 

 sich in allen Chemien die Farbstoffe betreffend. 



In der praktischen Färberei werden diese Eigenschaften be- 

 kanntlich schon lange ausgenützt. 



Was speziell die Eisenhämatoxylinfärbung betrifft , haben wir 

 es bekanntlich"'^ mit folgenden Verhältnissen zu tun. Die Eisenbeize 

 muß am besten eine Eisenoxydverbindung sein. Verwendet 

 man z. B. den Eisenalaun, so geschieht folgendes : 



1) Es fixieren sich auf dem mikroskopischen Schnitt (oder den 

 Geweben) basische unlösliche oder schwerlösliche Eisenoxydver- 

 bindungen, z. B. basische Salze. 



2) Dieselben bilden mit verschiedenen Farbstoffen schwer-, resp. 

 unlösliche gefärbte Verbindungen — Lacke. Wird z. B. Häma- 

 toxylin verwendet, ist die Wirkung eine doppelte; einerseits 

 wird das Hämatoxylin in Hämatein (oder in noch höhere Oxydations- 

 stufen, darüber später) von einem Teil des Eisenoxydsalzes über- 

 führt,^ wobei sich Eisenoxydulverbindung bildet. 



^) Dies trifft, wie meine Angaben unten zeigen, nicht ohne weiteres zu ; 

 man muß dann nämlicli eine nicht zu konzentrierte Hiimatoxylinlösung, welche 

 einige Zeit (wohl verschlossen) gestanden hat, nehmen, ferner muß diese 

 Lösung, sowie die Eisenalaunlösung kalt und letztere Lösung nicht zu 

 verdünnt sein, sonst geschieht die Oxydation in Hämatein und „Ferro- 

 lackbildung", wie ich angeführt habe. 



') Den Chemikern vom Fach ist dies lange bekannt und von ihnen 

 habe ich es meinerseits wieder gelernt. 



«) Vgl. P. Mayer im Anat. Anz. Bd. XIII, 1899, p. 319 (die Note!). 

 Dieser, um die Mikrotechnik so verdiente Forscher, hat diejenigen Mikro- 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 1. 4 




50 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



Anderseits verbindet sich der Rest des basischen Eisen- 

 salzes oder Oxydes mit dem gebildeten Hämatein; die färberischen 

 Eigenschaften dieses Eisenlackes haben Benda und M. Heidenhain 

 mit so großem Erfolge in der Mikrotechnik verwertet. — Wird 

 Hä mateinlösung gebraucht, könnte jedenfalls die oxydierende 

 Wirkung des Eisenoxyds wegfallen (gewöhnlich tut sie es aber nicht, 

 darüber später ; vgl. auch P. Mayer, loc. cit.), und könnte man statt 

 der Eisenoxydverbindung auch Eisenoxydulverbindungen als Beizen 

 verwenden, was ich auch tatsächlich mit Erfolg getan habe. 



Man kann also zweifach verfahren : Entweder getrennt beizen 

 und färben oder beides gleichzeitig tun(BENDA, Heidenhain, Weigert). 

 Beizende Eigenschaften kommen im hohen Grade solchen Stotfen zu, 

 welche teils leicht basische Salze , teils oder zugleich Verbindungen 

 von mehreren Oxydationsstufen bilden (auf andere Beizen gehe ich 

 hier natürlich nicht ein). Daher die allgemein übliche Verwendung 

 von Aluminium-, Eisen-, Chrom- (und Kupfer-) Verbindungen, welche 

 uns in der Mikrotechnik überwiegend interessieren. 



Betrachten wir zunächst die E i s e n v e r b i n d u n g e u. Gewöhn- 

 lich verwendet man den Eis enalaun-F erriamm oniumsulfat 



VI 



Fe^CSOJg, (NHJ2 SO, + 24H2O. 



Mol. = 965. Löst man diesen Stoff in (ausgekochtem) Wasser, so wird, 

 was wichtig ist, eine teilweise Hydrolyse des Eisenoxydsulfates 

 eintreten , die Lösung färbt sich gelb , gelbbraun und enthält außer 

 unzersetztem Eisenoxydsulfat ^ freie Schwefelsäure und kolloidal ge- 

 löstes Ferrihydroxyd, Mit steigender Temperatur wird die Hydro- 

 lyse stärker und daher auch die Braunfärbung der Lösung; eben 

 diese hydrolytische Spaltung ist für die beizenden Eigenschaften der 

 Lösung wichtig , ebenso erhellt sich hieraus das Faktum , daß die 

 Beizung- in der Wärme schneller geht. Es lassen sich diese Ver- 

 hältnisse durch Versuche leicht demonstrieren; die gebildete freie 



techniker, welche dieses Verhalten des Hämatoxylins vorher nicht kannten, 

 darauf aufmerksam gemacht und auch hierhergehörige Experimente an- 

 gegeben. 



V) Von der Ionisation sehe ich hier ab. 



'^) Die Ablagerung von basischen Verbindungen in dem Gewebe — 

 also auch die Färbung. 




XXII, 1 . Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen, ö 1 



Säure (auch z. B. aus einer Eisenchloridlösung) kann man beispiels- 

 weise teilweise wegdittundieren lassen , wodurch der Gehalt der 

 Eisenbeizlösung an kolloidalem Ferrihydroxyd zunimmt. Eine solche 

 Eiseulösung beizt auch in der Kälte weit schneller und stärker als 

 eine gewöhnliche Lösung des Eisensalzes. 



Eine größere Verdünnung der Eisensalzlösung vermehrt die 

 Hydrolyse , begünstigt somit die Ablagerung von Eisenoxyd , resp. 

 von basischen Salzen in den Geweben, aber zugleich setzen auch 

 solche Salze sich im Gefäß nach einiger Zeit ab. Der Konzentrations- 

 abnahme entsprechend wird aber von einer gewissen Grenze ab die 

 Beizung absolut schwächer. 



Daß die Abspülung der gebeizten Schnitte in Brunnenwasser 

 (alkalisch, kohlensäurehaltig !) ebenfalls die Bildung von Eisenhydroxyd, 

 resp. basischen Salzen begünstigt, ist ohne weiteres klar. 



Umgekehrt verringert ein Zusatz von freier Säure zur Eisen- 

 salzlösung deren Beizwirkung entsprechend der Massenwirkung. Soll 

 daher die Eisenalaunlösung beim Stehen keine unlösliche basische Ver- 

 bindungen in der Flasche absetzen, so nehme man eine etwas stärkere 

 Lösung als l-^/^ Prozent, z. B. 5 Prozent, in der die Hydrolyse relativ 

 geringer ist. Auch kann man der Lösung eine entsprechende Menge 

 Schwefelsäure zusetzen , dadurch wird die Hydrolyse ebenfalls ver- 

 mindert ; bei größerem Überschuß an freier Säure wird die Hydrolyse 

 ganz aufgehoben erscheinen , statt der braunen , braungelben Farbe, 

 hat man eine ganz schwach gelblich gefärbte oder ungefärbte Flüssig- 

 keit. Was die 'oxydierende Wirkung der Ferrisalze (Ferri- 

 sulfat , Eisenalaun , Eiseuchlorid etc.) betrifft , so verläuft die 

 Reaktion in den einfachen Fällen (in saurer Lösung) folgendermaßen : 



VI II 



Fe, (SOJ. + HoO = 2 Fe SO^ + H, SO^ + 

 Ferrisulfat Ferrosulfat 



also 1 g Mol. Ferrisalz vermag 1 g Mol. Hämatoxylin 

 in H ä m a t e 1 n zu überführen. 



Nimmt man Eisenalaun, Ferriammoniumsulfat, so 

 braucht man davon 2*7.1 g um 1 g Hämatoxylin in 

 Hämatein zu oxydieren, unter der Voraussetzung , daß die 

 Reaktion quantitativ verläuft, und dies dürfen wir der Hauptsache 

 nach annehmen. Die Reaktionsgleichung ist: 



4* 




52 Hansen: Über Hämateinlösung'en und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



VI II 



I : Fe, (SO J. ; (NH J^ >S0^ + H,0 =- Fe SO^ ; (NHJ, SO, 



Ferriammoniuiüsulfat Ferroammoniumsulfat 



II 

 + Fe SO^ + H, SO, + Ol 



und II: C,,H,,0, + 0, = C,,H,,0, + H,0. 

 Hämatoxylin Hämatein 



F;S tritt also Ferroammoniumsulfat (Mohrs Salz), Ferrosulfat^ 

 und freie Schwefelsäure auf, wenn in einer Eisenalaunlösung Häma- 

 toxylin zu Hämatein oxydiert wird, und es läßt sieb leicht zeigen, 

 daß Hämatein sowohl mit dem Ferrosulfat als auch 

 mit dem Ferroammoniumsulfat" dunkelviolette bis 

 schwarzviolette Verbindungen eingeht. (Conf, Erdmann 

 1842'^ und später.) Und dasselbe tritt natürlich ein mit dem bei der 

 Oxydationsreaktion entstandeneu Ferrosalze, wie der Versuch leicht 

 zeigt. Eine der „blauen" Methode Martin Heidenhains ganz ähn- 

 liche Färbung läßt sich mit „Ferrohämatein" folgendermaßen aus- 

 führen. 



1*355 g Eisenalaun wird kalt in 50 g (sauerstoff freiem und 

 kohlensäurefreiem) ausgekochtem Wasser gelöst; 0*50g Hämatoxylin 

 wird ebenso in 50 g ausgekochtem heißem Wasser gelöst und her- 

 nach abgekühlt, wobei das Hämatoxylin bekanntlich nicht wieder aus- 

 fällt. Die angegebene Menge Eisenalaun reicht gerade hin, um alles 

 Hämatoxylin in Hämatein zu überführen. Dies beginnt gewöhnlich 

 auch in der Kälte, sobald man die eine Lösung in die andere gießt; 

 am besten werde die Eisenlösung langsam unter stetem Umrühren 

 in die Hämatoxylinlösung gegossen. Die Hämatoxylinlösung wird bei 

 Erwärmung sehr schnell in Hämatein überführt, höhere Oxydations- 

 stufen kommen zunächst nicht vor, weil einerseits niemals Überschuß 

 an Sauerstoff vorhanden ist, und auch die gebildeten Ferrosulfate eine 

 andersweitige Oxydation vorläufig verhindern. 



Man erhält eine dunkelviolette Lösung, welche reichlich schwarze 

 Ausfällung enthält. Diese Lösung enthält die Verbindung von Häma- 



^) P. Mayer hat 1899 das Auftreten, von Ferrosulfat besprochen (siehe 

 loc. cit.). 



^) Durch vorheriges Hinzufügen der berechneten Menge Ammonium- 

 sulfat läßt sich das gebildete Ferrosulfat in der Form des stabileren Ferro- 

 ammoniumsulfats erhalten. 



3) loc. cit. p. 219. 




XXII, 1. Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. 53 



tein lind Ferrosalz (Hämatoxylin und Ferrosalz verhält sich ganz an- 

 anders, ist nicht gefärbt). Die Lösung, welche, um die Luftoxydation 

 möglichst zu vermeiden, nicht filtriert wird, färbt beim Versuch so- 

 gleich sehr schnell die Schnitte mit schwarzvioletten oder fast ganz 

 schwarzen Kernen, Plasma mehr violett, glatte Muskeln und Binde- 

 gewebe ebenso; Kittleisten, Centrosomen lassen sich bei passender 

 Anwendung auch färben. Die Färbung ist gegen starke Essigsäure 

 sehr resistent. Um seiner Sache ganz sicher zu sein, mag man mit 

 Ferrosulfat (konz. Lösung) nachbehandeln (eventuell mit einer Spur 

 von Oxalsäurezusatz). Auch kann man die Farblösung mit einer 

 reinen Lösung von Ferroammoniumsulfat vermischen (dieselbe löst 

 nicht unbedeutend die schwarzviolette Lackverbindung) imd hernach 

 färben (Schnitte vorher mit sauerstoflffreiem Wasser behandelt). Es 

 kann kaum ein Zweifel darüber bestehen, daß wir hier die Erd- 

 mann sehe F e r r h ä m a t e i n V e r b i n d u n g auf die Gewebe fixiert 

 haben. ^ Natürlich läßt sich auch Eisensulfat (Ferrosulfat) verwenden, 

 wobei man der Lösung eine Spur von Oxalsäure zusetzt, um sicher 

 alles Eisenoxydsulfat zu reduzieren;^ und zur Abwechslung kann man 

 also die von mir unten angegebene^ (frisch bereitete) Hämatei'n- 

 lösung verwenden. Die Resultate sind auch auf diese Weise ganz 

 ähnlich, nur werden die Töne mehr schwarzgrau.* Ferrohämatein 

 löst sich in nicht unbedeutender Menge in Eisensulfatlösung, freie 

 Schwefelsäure begünstigt die Lösung, 



Auch in Ferroammoniumsulfat kann man die Hämatein- 

 lösung oder die Hämatoxylinlösung in diese Oxydulsalzlösung gießen 

 und nachträglich mit der berechneten Menge Sauerstolfspender (Kalium- 

 permanganat, F erria mm oniumsulf a t) oxydieren. 



Die Resultate sind ähnlich. Verwendet man statt Hämateinlösung 

 d i e fnach meiner Angabe unten) 2 bis .3 f a c h x y d i e r t e ,. a 1 s die 

 Oxy h ä m at eine , so werden die Färbtöne viel schwärzer, resp. 

 ganz: schwarz, auch mit Eisenoxydulsalzen. Es läßt sich zeigen, daß 



^) Doch mögen bei der „blauen" Farbe Heidenhains die Kalksalze 

 des Leitungswassers etwas mitwirkend sein. Bei dem kürzeren Beizen bei 

 der Heidenhain sehen blauen Methode fixiert sich weniger Ferrioxyd auf 

 das Gewebe, so daß die disponible Sauerstoffmenge nur zur Bildung von 

 Hämatein, jedenfalls nicht zur Bildung von so großen Mengen der höiieren 

 Uxydationsprodukte hinreicht, daß die Färbung schwarz würde. 



-) Rhodankaliumprobe. 



^) Mit Kaliumpermanganat quantitativ oxydiert. 



^) Ob sieh wohl mehr Eisensalz an das HämateVnmolekül anlagert? 




54 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



eine Oxydation der Eisenoxydulverbindungen seitens der Hämateine 

 und Oxyhämateine gewöhnlich nicht vorkommt; darüber später. 



Wichtig für die Färbung mit Eisenhämatein und besonders für 

 die Elektion ist natürlich die aus den Ferriverbiudungen abgespaltete 

 Schwefelsäure. 



Ist dagegen Überschuß an Eisenoxydverbindungeu vorhanden, 

 so ist teils Sauerstoff zur höheren Oxydation des Hämateins disponibel, 

 teils treten die Eisenoxydlacke auf. Die genaue Untersuchung dieser 

 Verhältnisse muß natürlich quantitativ vorgehen und läßt sich auch 

 nicht allzuschwer ausführen. 



Die Bedeutung der Oxydationsstufe des Hämateins habe ich 

 untersucht, dagegen nicht, wie viele Eisenatome mit dem Hämatein- 

 molekül verbunden sind, dazu fehlten mir die Gelegenheit und die 

 Mittel. 



Als ich zur Ausprüfung einer Eisenhämateinlösung ging, ent- 

 schied ich mich nach vielen Versuchen für das von M. Heidenhaix 

 gebrauchte Ferriammoniumsulfat, welches entschieden mehrere 

 Vorzüge den übrigen, auch leichtzqgänglichen Eisenoxydsalzen gegen- 

 über besitzt. Ferner waren mehrere Punkte zu berücksichtigen. 



Es mußte genügend Eisen oxydsalz vorhanden sein, 

 wenigstens genug, um das H ä m a t o x y 1 i n in H ä m a t e i n 

 zu überführen. Die dazu erforderliche Menge beträgt per 1 g 

 Hämatoxylin 2*71 g Ferriammoniumsulfat.^ 



Der Eisenhämateinlack ist bekanntlich sowohl in Säuren als aucli 

 in den sauer reagierenden Eisensalzlösungen'' löslich, was ja Bexda 

 und M. Heidenhaix zur Differenzierung der Färbungen benutzten. 



Diese Verhältnisse benutzte ich analog dem (Tonerde-) ALinn- 

 hämatein, wo ja auch der Farblack in Überschuß des sauer n 

 renden Salzes löslich ist. Aus Gründen, die sich für den Kun^ tgej 

 leicht aus den vorhergehenden Auseinandersetzungen ergeben, isi 

 Farbwirkung der Lösung bei Verwendung des Eisenalauns als Lösungs- 

 mittel entschieden günstiger, als wenn man Säuren verwendet. 



') Der Einfachheit halber lasse ich den Eisenalaun den Sauerstoff 

 liefern, aber auch andere Sauerstoffspender habe ich mit Erfolg angewandt. 

 Man kann auch, wie ich getan habe, mittels Kaliumpermanganat das Häma- 

 toxylin quantitativ oxydieren, so hoch man will. 



'-) Nicht bloß in Oxydsalzen, sondern auch in Eisenoxydulsalzen, auch 

 in andern, z. B. Tonerdealaun, ist der Eisenlack löslich. 




XXII, 1. Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. 55 



Die Ausprüfung der besten Farblösungen bat viele variierende 

 Versuche mit Farblösungen und Probefärbungen erfordert, die ich 

 aber hier übergehe, und es hat sich herausgestellt, daß die von mir 

 färberisch ausgeprüfte Lösung einer ganz bestimmten Oxydationsstufe 

 des Hämateins entspricht. 



Als für allgemeine Zwecke am meisten geeignet empfehle ich 

 folgende Lösung: 



1) 10 g reines Eisenalaun (Ferriammoniumsulfat) wird in 

 der Wärme gelöst in 150 g destillierten Wassers; 



2) 1*6 g Hämatoxylin wird in 75 g destillierten Wassers 

 in der Wärme gelöst, diese Menge braucht zur Oxydation in Hämatein 

 4-34 = (2-71 + 1-63) g Eisenalaun. 



Das Hämatoxylin fällt nach der Auflösung nicht wieder aus 

 beim Erkalten. Die beiden ganz kalten Lösungen werden vermischt, 

 indem die Eiseualaunlösung in die Hämatoxylinlösung unter stetem 

 Umrühren gegossen wird. Die Oxydation geht in der Kälte allmählich 

 vor sich, die Farbe wird erst braun, dann blau, dann dunkelviolett; 

 man erhitzt allmählich zum Kochen, um die Reaktion zu beschleu- 

 nigen. Das Erhitzen nehme man in einer Porzellanschale oder in 

 einem Kolben oder Becherglase vor, eventuell in dem Sandbade, man 

 rühre nur mäßig um, damit die Luftoxydation nicht unkontrollierbar 

 groß werde, wodurch die Farbe der Lösung olivengrün wird; wie 

 man die zuweit gegangene Oxydation redressieren kann, darüber später. 



Es bildet sich so zuerst das Hämatein, hernach die höheren 

 Oxydationsprodukte, und da gleichzeitig Lackbildung eintritt, ist in 

 kurzer Zeit die Reaktion sicher beendigt; mau läßt nur kurze Zeit 

 (^/o bis 1 Min.) sieden und hernach erkalten. Wünscht man das ge- 

 bildete Ferrosulfat als Ferroammoniumsulfat in der Lösung zu haben, 

 füge man 1*40 g Ammoniumsulf at hinzu, -wodurch die na6h- 

 folgende Oxydation des Ferrosulfats in Ferrisulfat an der Luft nicht 

 so rasch geht. — 



Die Farblösung soll eine dunkelbraune^ Farbe 



^) Ist die Farbe versehentlich durch zu langes Kochen an der Luft 

 zu oHvengrün geworden (Gegenwart von Ferrisalzen) , füge man der er- 

 hitzten Lösung tropfenweise 10 Prozent Oxalsäure zu unter Umrühren, bis 

 die Lösung den richtigen braunen Farbton erhalten hat (es ist nicht (ixal- 

 saures Eisenoxydul), gleichzeitig wird dann der Niederschlag zuiu^p^wmi 

 Teü aufgelöst worden sein. 




56 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



haben, sauer reagieren und die größte Menge des gebildeten 

 Eisentrioxybämateinlacks in Lösung halten. 



Ein geringerer Teil des Farbstofles ist nicht aufgelöst und 

 in der folgenden Zeit fallen auch immer kleine Mengen aus. Ich 

 habe gefunden , daß dieser Überschuß des Farbstoffes wichtig ist, 

 die Farblösung färbt so besser , als wenn man z. B. durch Zusatz 

 von Schwefelsäure die ganze Lackmenge in Lösung halten würde. 

 In der Wärme löst sich der Niederschlag teilweise wieder auf, wel- 

 ches Verhalten man gelegentlich benutzen kann, um intensiver zu 

 färben. Fügt man der Lösung etwas Alkohol 10 bis 20 bis 30 cc 

 hinzu, so bildet sich mit der Zeit etwas Aldehyd, und dies, ebenso 

 wie der Alkohol, verlangsamt die Luftoxydation; gewöhnlich pflege 

 ich es nicht zu tun. 



Nimmt man wesentlich mehr Eisenalaun, so erhält man dunkel- 

 olivengrüne Lösungen , welche sich ziemlich klar halten , wenigstens 

 nicht so viel absetzen. Eine solche Lösung enthält z. B. : 



13 g Eisenalaun, 

 200 g destilliertes Wasser, 

 1 g Hämatoxylin. 



Sie färbt auch ganz brauchbar, aber lange nicht so gut wie die 

 Lösungen, welche den dunkelbraunen Ton zeigen. Außer dem hier 

 angegebenen habe ich systematisch viele andere aus den chemischen 

 Verhältnissen sich ergebenden Kombinationen versucht, auch solche 

 mit relativ mehr Hämatoxylin; für einige Zwecke sind diese mit viel 

 Hämatoxylin intensiv diffus färbende Lösungen ganz wertvoll, aber ich 

 führe sie für den allgemeinen Gebrauch nicht an. 



Die empfohlene Farblösung ist gut haltbar, ^ — mehrere Monate. 

 Ein Bodensatz schadet wie gesagt gar nicht, aber vor dem Gebrauche 



^) Obwohl die Farblüsung- sehr leicht herzustellen ist, und die Er- 

 zielung der besten F a r b w i r k u n g immer das Hauptaugenmerk , die 

 größere Haltbarkeit nur eine Nebenbedingung sein soll, will ich doch nicht 

 unterlassen, eine theoretisch ganz interessante R e g e n e r a t i o n s m e t h o d e 

 der Farblösung zu beschreiben. Wenn die Farblösung viel Bodensatz 

 abgesetzt hat, und wenn die Farbwirkung bedeutend langsamer und 

 schwächer wird (z. B. nach einigen Monaten) , beruht das auf einer durch 

 die Luft bewirkten Oxydation des Ferrosalzes in Ferrisalz. Man schütte 

 dann das Ganze in eine Porzellanschale, erwärme, und füge jetzt tropfen- 

 weise ein wenig lOprozentige Oxalsäure hinzu unter ständigem Umrühren ; 




XXII, 1. Hansen: Über Hämatei'nlösungen und Cochenillefarblösungen. 57 



filtriere man immer, sie setzt dann selbst bei der Färbung in Cuvetten 

 in 24 Stunden keinen Farbstolfniederschlag ab. Aufbewahrt werde sie 

 aber immer am besten über einem Überschuß des Farblackes und 

 gut verschlossen. 



Die Farblösung läßt sich sehr vielseitig verwenden. Besonders 

 schön ist die tief schwarze Ker n -(Chromatin-) färb uug, aber 

 auch die scharfe Darstellung mancher Plasmastrukturen (des 

 Trophospongium z.B.), der Kittleisten, Bürstensäume etc. ist vorzüglich. 



Es ist wesentlich eine S c h u i 1 1 f ä r b u n g , sie geht gewöhnlich auch 

 in der Kälte sehr schnell vor sich. Man kann kurz, Minuten, oder 

 länger. Stunden, bis 24 Stunden färben; in letzterem Falle wird 

 sehr stark überfärbt, aber nicht alle Elemente gleichstark (so daß 

 ich gelegentlich gar nicht die (tagelange) Färbung habe differenzieren 

 brauchen), hernach kann man in der üblichen Weise differenzieren, 

 am besten mittelst verdünnter Säuren (Schwefelsäure , Essigsäure- 

 Benda). 



Gewöhnlich genügt die kurze Färbung ohne nach- 

 trägliche Differenzierung. Zweckmäßig ist es dann oft, 

 die Schnitte in der Farbtlüssigkeit kurz zu erwärmen (bis 40 oder 

 50°); gutfixiertes Material, gut aufgeklebt, verträgt in den meisten 

 Fällen ohne den geringsten Schaden eine etwas höhere kurzdauernde 

 P>wärmung, wie ich vielfach beobachtet habe. Nach der Färbung 

 wird in destilliertem Wasser abgespült und ausgewaschen, 

 nach Belieben, 5 bis 10 Minuten, nachher wie gewöhnlich in Leitungs- 

 wasser ausgewaschen und dann, wie üblich, in Balsam übergeführt. 

 Gewöhnlich ist auch nach dieser kurzen Färbung die Differenzie- 

 rung der Schnitte und die Nuancierung eine vorzüg- 

 liche. Auch die Centrosomen lassen sich durch diese Farblösung 

 darstellen , doch bekommt man sie so nicht elektiv isoliert gefärbt. 

 Wünscht man sie besonders darzustellen, so verfahre man ent- 

 weder nach der Heidenhain sehen oder ßENDASclren Methode, oder 

 man überfärbe in meiner Farblösung stundenlang (eventuell 24 Stunden) 

 und differenziere nachher wie allgemein üblich. 



sobald alles Ferrisulfat durch die Oxalsäure in Ferrosulfat wieder reduziert 

 worden ist, ist der Bodensatz fast wieder aufgelöst, die Farbe der Lösung 

 ist tief kaffeebraun geworden und sie färbt jetzt wieder kräftig und gut, 

 anscheinend ein bißchen brauner als ursprünglich, aber durch Abspülung 

 der Schnitte mit destilliertem Wasser (und nachher Leitungswasser) wird 

 alles wieder schwarz im Ton. 




58 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



Die Färbung mittelst dieses Eisenhämateins läßt sich sehr wohl 

 mit den meisten anderen Färbungen kombinieren. Die Kernfärbung 

 ist sehr resistent, verträgt z. B. Säurefuchsin- Pikrin (nach meiner 

 Methode) etc. anstandslos , natürlich auch Eosin , Erythrosin , Licht- 

 grün etc. 



Wünscht man mehr r e i n e K e r n f ä r b u n g oder n u r eine 

 solche, so setze man bestimmte kleine Quantitäten freier Schwefelsäure 

 zu. Folgende Mischungen kann ich empfehlen: 



A. Eisenhämateinlösung 4 cc 



1 Prozent Schwefelsäure 1 „ 



also ein Zusatz von 2<>/oo H2SO4. 



Man erhält so weniger Plasmafärbung, doch gleich intensive und 

 rfe K 

 Mischung;: 



scharfe Kernfärbung. Noch mehr isolierte Kernfärbung gibt folgende 



B. Eisenhämateinlösung 4 cc 



1 Prozent Schwefelsäure 2 „ 



(ca. 3-30/00 H,3 SO,). 



Man färbt am schnellsten, wenn man die Farblösung erwärmt; 

 durch Behandlung mit dünner, 2 bis 3 pro Mille Schwefelsäure läßt 

 sich jeder Grad von isolierter Kernfärbung erhalten. 



In den meisten Fällen ziehe ich die Hauptfärbung allein mit 

 ihren reichen Nuancierungen der reinen Kernfärbung absolut vor. 



Auch als gewöhnliche Arbeitsmethode ist sie ihrer 

 Leichtigkeit und Haltbarkeit und sonstigen guten Eigen- 

 schaften wegen aufs wärmste zu empfehlen. 



Detaillierte Angaben über die Anwendung auf verschiedenes 

 Material, bei verschiedener Fixierung etc. zu machen, halte ich für 

 überflüssig, doch besonders hervorheben will ich, daß auch sonst 

 schwierig färbbares Material damit oft gut gefärbt werden kann. 



Über die chemischen Vorgänge bei der Bereitung dieser P^isen- 

 hämateinfarblösung habe ich schon oben einige Angaben gemacht. 

 Um Genaueres darüber zu erfahren, habe ich systematisch viele quan- 

 titative Versuche angestellt. Die wichtigsten Resultate werde ich 

 hier kurz mitteilen. 



Ich halte mich aber nur an die gröberen chemischen Verhält- 

 nisse, die gefundenen Resultate gelten in dieser Beziehung auch für 

 andere analoge Eisenverbindungen als den Eisenalaun. 




XXII, 1. Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. 59 



Da ich nicht in der Lage war, Elementaranalysen der ver- 

 schiedenen Lacke zu machen, griff ich zur Untersuchung- der Oxyda- 

 tionsprodiikte des Hämateins mittels der stufen weisen Oxy- 

 dation. Ich behandelte eine abgewogene Menge Hämatoxylin (resp. 

 Hämatein) mit bestimmten Mengen von Ferrisalz und oxydierte 

 vorsichtig so weit (eventuell in der Wärme), bis sich kein 

 Ferrisalz mit der Rhodankaliumreaktion in der wässe- 

 rigen Lösung mehr nachweisen ließ. Die Lösung enthielt 

 dann nur Ferrosalze und die freigewordene Schwefelsäure (siehe die 

 Oxydationsgleichung oben) , und mit den also gewonnenen Lösungen 

 von bestimmter Zusammensetzung wurden Probefärbungen auf gleich- 

 artigem Material gemacht. Ich betrachte vorläufig die Sache so, als 

 ob ich mit jedem disponiblen Sauerstoffatom zwei der disponiblen 

 Wasserstoffatome des Hämatoxylins resp. Hämateins oxydiere , und 

 diese hypothetischen Oxydationsstufen benenne ich einfach so: 



Hämatoxylin -^ H., = Hämatein. 

 Hämatein ^ Hg = Dioxyhäiuatei'n. 

 Hämatein -i- Hg = Trioxyhämatein. 

 Hämatein — H^ = Tetraoxyhämatein etc. 



Mit der fortschreitenden Oxydation des Hämateins stellten sich 

 gesetzmäßige Farbenänderungen ^ ein, welche sich in analoger Weise 

 und noch deutlicher bei den Chromlacken ^ zeigen; darüber später. 



Allein maßgebend ist hier die Oxydationsstufe des Hämatoxylins ; 

 man erhält nämlich ganz analoge Resultate , wenn mau das Häma- 

 toxylin in Lösung mit einer berechneten Menge. Schwefelsäure (um 

 neutrale Salze zu bilden) und mit anderen Oxydationsmitteln quan- 

 titativ oxydiert und dann mittels Ferrosalzen (Eisensulfat, Mohrs Salz) 

 oder mittels Chromidsalzen die Farblacke bildet. 



Um ein G r a m m ^ Hämatoxylin i n H ä m a t e i n zu oxy- 

 dieren , braucht man 2'7 1 g F e r r i a m m n i um s u 1 f a t ; damit 

 werden bekanntlich zwei Wasserstoffatome wegoxydiert, für jedes 

 folgende Wasserstoffatom braucht man 1"355 g Eisenalaun. 



Zur Auflösung der Substanzen wird nur ausgekochtes, sauerstoft- 



') In der technischen Färberei ist es eine altbekannte Tatsache, daß 

 mit steigender Oxydation an der Luft die Eisenhämatoxj'linlacke erst 

 bläulich, dann schwarz und zuletzt bräunlich und minderwertig werden. 



^) Auch bei Tonerdelacken. 



^) Die Gewichtsmengen sind mit einer Genauigkeit von + 2-5 mg an- 

 gegeben, was hier völlig genügt. 




60 Hansen: Über Hcämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



freies, destilliertes Wasser benutzt. Es läßt sich zeigen, daß Hämatein 

 in schwach saurer Lösung mittels also bestimmter Mengen Kalium- 

 permanganats (oder titrierten Wasserstoffsuperoxyd) oxydiert , in 

 diese hölieren Oxydationsprodukte übergeführt wird ^ ; bringt man dann 

 solche höher oxydierte Lösungen (in sauerstofffreiem Wasser) mit 

 J'errosalzen zusammen, so werden sie nicht reduziert, so daß sich 

 kein F e r r i s a 1 z bildet. Es läßt sich also bestimmt schließen, 

 daß, wenn (bei der Oxydation des Hämatoxylins mittels Ferrisalzen) 

 bei der Rhodankaliumreaktion kein Ferrisalz mehr nachgewiesen 

 werden kann, dasselbe all seinen disponiblen Sauerstoff an das Häma- 

 toxyliu abgegeben hat, wenigstens werde ich dies so lange annehmen, 

 bis ich widerlegt werde. 



Von den vielen Versuchen führe ich hier einige an, wobei man 

 mir eine kleine Wiederholung des Ferrohämateins gestatte. 



1. F e r r oh ämat ein (cf. auch oben) = Hämatoxylin -^ H._,. 



1*355 g Eisenalaun werden in 40 cc Wasser, und 0'50 g 

 Hämatoxylin in 10 g Wasser gelöst ; beide Lösungen vorsichtig ver- 

 mischt, geben folgende Oxydationsphasen. Zuerst bildet sich Häma- 

 tein, welches die Lösung tiefbraun färbt, aber schnell fängt sie an 

 violett zu werden, indem nun die Ferrolackbildung anfängt und gleich- 

 zeitig ein Teil des gebildeten Lackes als ein schwarzer amorpher 

 Niederschlag sich absetzt, auch an der Oberfläche zeigt sich eine 

 glänzende Haut. Die Lösung färbt jetzt sogleich, wie oben angegeben, 

 Kerne schwarz bis schwarzviolett, Plasma mehr violett. Die Färbung 

 wird durch Ferrosulfat nicht verändert. Fügt man 10 g Ferro- 

 ammoniumsulfat in 50 g sauerstofffreiem Wasser hinzu , erhält man 

 eine dunkelviolette Lösung, indem der Niederschlag darin größten- 

 teils aufgelöst wird. In dieser Lösung läßt sich keine 

 Spur von Ferrisalzen nachweisen; sie färbt wie oben an- 

 gegeben. 



Wir haben also hier eine Verbindung (Lack) des gebildeten Häma- 

 teins mit dem Ferrosalz, welche schwarzviolett ist. Es erhellt hieraus, 

 daß Ferroh ä matein die eigentliche Farbe ist und nicht 

 ein Ferrihämatein. Und ich habe die besten Gründe, anzunelimen, 

 daß die Ferrolacke liier die eigentümlichen, wertvollen Farblacke sind. 



^) Die Reaktion muß ganz abgelaufen sein, eventuell durch Erhitzen 



der Lösung. 




XXII, 1. Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen, gl 



daß dagegen die Lacke, welche Fernverbindungen enthalten, minder- 

 wertige Farben sind. Das geht auch aus den Prozessen der tech- 

 nischen Färberei hervor. 



Bestätigt wird diese Ansicht durch das Verhalten der Ferro- 

 lacke der höheren Oxydationsstufen. 



Nehmen wir einstweilen meine willkürliche vorläufige Nomen- 

 klatur an, und bezeichnen wir ein Hämatein, welches mit 1 Atom 

 Sauerstoff weiter oxydiert wird (also möglicherweise 2 Atome Wasser- 

 stoff verliert), als D ioxy hämatein , so können wir eine solche 

 Lösung folgendermaßen bereiten. 



2. F e rr odioxy h am at e in. 



a) 1 g Hämatoxylin in 50 g Wasser gelöst; 



b) 5*42 g Eisenalaun in 100 g Wasser gelöst. 



Die Lösungen werden gut abgekühlt , eventuell zur Zurück- 

 drängung der Hydrolyse in der Eisenalaunlösung wird derselben 

 ca. 0*8 g Schwefelsäure^ zugefügt. Die Eisenalaunlösung wird in 

 die Hämatoxylinlösuug unter stetem Umrühren gegossen. Die Lösung 

 färbt sich zuerst vorübergehend braun (Bildung von gelöstem Häma- 

 tein!), hiernach dunkelviolett, wie oben beim Ferrohämatein. 



Es lassen sich in diesem Stadium" noch reiclilich 

 F e r r i s a 1 z e nachweisen, und erst nach und nach in der Kälte 

 geht die Oxydation in Dioxyhämatein (Lack) vor sich. 



Durch Probefärbung in diesem Stadium erhält man immer einen 

 mehr violetten Ton. Erhitzt mau aber, geht die Reaktion weit schneller, 

 und nach kurzem Kochen ist die Oxydation in Dioxyhämatein voll- 

 ständig, wenn sich kein Ferrisalz mehr nachweisen läßt.^ (NB. 

 Verwendung von sauerstofffreiem Wasser. Die Oxydation au der 

 Luft kommt beim kurzen Kochen in den Kolben nicht in Betracht.) 



^) Also z.B. 8 cc von 10 Proz. H2SO4 Lösung; man kann dasselbe 

 unterlassen oder die Schwefelsäure der Hämatoxylinlösung vorher zufügen ; 

 das ändert an dem Resultate nichts. Nur hält sich der Lack viel reich- 

 licher in der Lösung mit mehr Schwefelsäure aufgelöst. 



■^) Auch Probefärbungen (kalt!) wurden gemacht, wir haben hier noch 

 mit dem Ferrohämatein zu tun. 



^) Sind die zwei Lösungen vor dem Vermischen nicht genügend ab- 

 gekühlt, bekommt man sofort Lackbildung und Oxydation zu Dioxyhäma- 

 tein, so daß man das Stadium der braunen Hämateinfarbe und die violette 

 Ferrohämateinlackbildung gewöhnlich nicht sieht. Für die Praxis ist dies 

 natürlich gleichgültig. 




62 Hansen: Über Hämatei'nlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



Die Lösung ist dunkelbraun von dem richtigen Ton und enthält ge- 

 wöhnlich noch etwas ungelösten Lack (so daß man vor dem Gebrauche 

 filtrieren muß) , welchen man eventuell durch etwas Schwefelsäure- 

 zusatz auflösen kann. 



Die Lösung enthält nur Ferosalze. Die Probefärbung 

 (sauerstofiYreies Wasser) gibt tiefschwarze Kerne , Plasma ebenso 

 weit schwärzer als bei Ferrohämatein, aber doch immer mehr violett 

 als die folgende Oxydationsstufe. — 



Wünscht man alles bei der Reaktion auftretende Ferrosulfat in 

 das haltbarere Mohr sehe Salz zu überführen, so setze mau vor oder 

 nach der Reaktion die berechnete Menge Ammoniumsulfat hinzu (bei 

 den angegebenen Mengen also: 0"73 g (NH^jg SO^), auch scheint 

 hierdurch etwas mehr Lack in Lösung zu gehen , die Farbe der 

 Lösung wird brauner. — 



Eine rein schwarze, resp. grauschwarze Färbung des Plasmas er- 

 hält man nur an einer noch höheren Oxydationsstufe. Oxydiert man 

 im Sinne des oben Gesagten fünf Wasserstotfatome des Hämatoxylins 

 — also drei des Hämateins, so erhält man 



3. das Tri oxy h ä ma t e in. 



Diese Oxydationsstufe ist von mir als die zweck- 

 mäßigste empfohlen; die oben angegebene „ Eisen - 

 liäm at einlösung" enthält diese Stufe, und zwar so, daß kleine 

 Abweichungen von den genauen Quantitäten in der Zusammensetzung 

 durchaus nicht schaden. ^ Man bildet sie folgendermaßen : 



1 g Hämatoxylin in 50 g Wasser, 6'78 g Eisenalaun in 100 g 

 Wasser gelöst (dazu 0*6 bis 0'8 g Schwefelsäure). Die Lösungen 

 werden wie oben vermischt, man erhitzt, bis die Proben kein Ferri- 

 salz mehr bei Rhodankalium zeigen, hiernach kühlt man ab und fügt 

 0*93 g Ammoniumsulfat hinzu. Die Lösung enthält nun Trioxy- 

 hämateinferrolack, Ferrosalze und freie Schwefelsäure. 



Sie färbt sehr intensiv , ganz analog der empfohlenen Lösung 

 und absolut schwärzer als das D i o x y h ä m a t e i" n. 



^) Da die nächsten höheren Oxydationsstufen auch schwarz färben, 

 obwohl je höher um so minder kräftig, sieht man, daß das Färbvermögen 

 der angegebenen Lösung vorerst nicht besonders von der unvermeidlichen 

 nachträglichen Luftoxydation beeinflußt wird, je kälter um so haltbarer, je 

 mehr in der Flasche ist, ebenso. 




XXII, 1. Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. 63 



Höher mit der Oxydation zu gehen , hat keinen Vorteil. Ich 

 habe sowohl die Tetraoxy-, Pentaoxy- und Hexaoxyhäma- 

 te in eisenlacke geprüft. Sehr brauchbar ist noch das Tetra- 

 oxyhämatein , es hat aber keinen Vorteil vor dem Trioxyhämatein. 

 Mit noch höherer Oxydation wird die Färbekraft geringer und die 

 Töne minderwertig, oliven, bräunlich etc. 



Der in der Lösung gebildete Eisenlack wird , wie gesagt , zum 

 Teil von der bei der Oxydation des Hämatoxylins freigewordenen 

 Schwefelsäure in Lösung gehalten und extra Schwefelsäurezusatz ^ löst 

 den Niederschlag mehr und mehr auf, über eine gewisse Grenze 

 hinaus erhält man dann, wie oben gesagt, mehr reine Kernfärbung. 

 Nicht allein in der also besprochenen Weise lassen sich diese Ver- 

 hältnisse dokumentieren. Ich habe beispielsweise auch das 

 H ä m a 1 X y 1 i n gesondert in Lösung in die verschie- 

 denen Oxydationsstufen überführt,^ und hernach die 

 Lösung mit einer entsprechenden Menge Ferrosalz vermischt und 

 eventuell die angegebene Menge Schwefelsäure zugefügt. Man erhält 

 bei diesem Verfahren ganz dieselben Resultate wie mit Eisenalaun- 

 oxydation. 



Sehr schön beobachtet man die L a c k b i 1 d u n g , wenn man 

 eine Lösung von Dioxy- oder Trioxyhämatein in Wasser bereitet und 

 dann in vollgefüllter , gutverschlossener Flasche aufbewahrt (so daß 

 nachträgliche Luftoxydation ausgeschlossen ist). Nach einigen Tagen 

 mischt man die Lösung mit einer entsprechenden Ferrosalzlösung. 

 Sind die Lösungen kalt, tritt die Lackbildung oft sehr langsam ein, 

 so daß man energisch kochen muß , um die Lacke völlig zu bilden. 

 Weit leichter zu beobachten als beim Eisenhämatein ist dies Verhalten 

 bei den Chromalaunhämateinen und auch bei den Thonerdelacken, 

 sowie bei Chromcochenillen. 



Fasse ich meine Ergebnisse zusammen, die auch zum Teil 

 in noch auffälligererWeise für Chromalaun- und Thon- 

 erdealaunlacke gelten, sind es folgende: 



^) Es ist vorteilhafter die vermehrte Lösung des Lackes durch einen 

 Schwefelsäurezusatz zu erreichen als durch einen größeren Gehalt an Eisen- 

 alaun, wodurch die Färbungen, wie leicht verständlich, ungünstig be- 

 einflußt werden. 



2) Mit den berechneten Mengen von Kaliumpermanganat in saurer 

 Lösung, oder mit andern Oxydationsmitteln. 




64 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



Hämatosylin bildet schwach gefärbte oder farblose Lacke. Häma- 

 tein bildet die für die respektiven Metalle b 1 a u e s t e n Lacke. 



Mit zunehmender Oxydation werden die Nuancen immer dunkler, 

 resp. violett oder schwarzblau, schwarz, zuletzt bräunlich. 



Hämateiuferrolack ist dunkelviolett. Dioxyhämatein- und Trioxy- 

 hämatein- sowie Tetraoxyhämatei'n-Eiseulack ist schwarz, hernach be- 

 kommen die Farben einen bräunlicheren Stich. 



Die für die Mikrotechnik wertvollen Eisenhäma- 

 teine müssen hier als Ferro verbin düngen^ aufgefaßt 

 werden. Ferriverbindungen sind minderwertig. 



Zuletzt mag nicht unerwähnt bleiben , daß der Schleim oft 

 eine Metachromasie mit purpurviolettem Ton zeigt bei der Färbung 

 mit Eisendioxy- und Trioxyhämatein. Die Metachromasie 

 zeigt sich am ausgesprochensten im Wasser , wird aber durch die 

 Alkoholbehandlung größtenteils zerstört und ist praktisch ohne Be- 

 lang. Auch bei den Chrom ala unhä mateinen findet man ähn- 

 liche Verhältnisse. 



Für Stückfärbung habe ich diese Eisenhämateine nicht em- 

 pfohlen , sie werden sich aber gewiß bei passendem 

 Schwefelsäurezusatz sehr wohl verwenden lassen 

 können. Je nach Fixation und Material und den gewünschten Resul- 

 taten (reine Kernfärbung oder auch diffuse Färbung) muß der Schwefel- 

 säurezusatz ein leicht auszuprüfender sein (s. oben). 



Zum Auswaschen muß am besten Sauerstoff freies, ausgekochtes 

 Wasser verwendet werden , ebenso fülle mau die Gläser ganz voll, 

 um Luftoxydation zu vermeiden, oder absorbiere den Sauerstoff durch 

 einen mit Pyrogalluslösuug befeuchteten Wattebausch , der durch 

 eine Zwischenlage von hydrophober Watte am Heruutergleiten ver- 

 hindert wird. 



n. Die Chromhämateine. 



Die Chromlacke des Hämatoxylins oder richtiger der Hämateine 

 und Oxyhämateine sind technisch sehr wichtig , weil sie so wider- 

 standsfähig sind. In der Mikrotechnik spielen sie (abgesehen von 

 den Färbungen des Nervensystems) wenigstens keine so große Rolle, 

 wie sie verdienen. 



II 

 ^) d. h. sie enthalten das zweiwertige Eisenatom Fe. 




XXII, 1. Hansen: Über Hämatei'nlösungen und Cochenillefarblösungen. 05 



Ihre bekannteste bewußte Anwendung ist die R. Heidenhain sehe 

 Chromhämatoxylinfärbung-. Die nicht wenigen Rezepte hierzu brauche 

 ich hier nicht zu wiederholen. Beizung der Gewebsstücke (oder 

 Schnitte) mit Lösung von Chromaten oder Bichromaten und darauf- 

 folgende Behandlung mit Hämatoxylinlösungeu (auch umgekehrt) ist 

 das Wesentlichste. 



Dagegen ist die Anwendung von Chromidsalzen^ meines Wissens 

 nicht gebräuchlich, — • z. B. Chromalaun oder Chromisulfat in Ver- 

 bindung mit liämatoxylin analog dem Tonerdealaunhämatoxylin wird 

 nicht augewandt. 



Tatsächlich gibt auch ein analog konstruiertes Chromalaunhäma- 

 toxylin zunächst ganz schlechte oder minderwertige Resultate. 



Trotzdem ist es mir durch einfache Mittel gelungen , Chrom- 

 alaunhämateine von vorzüglicher Brauchbarkeit und 

 Färbekraft herzustellen. Die Verwendbarkeit derselben wird sehr 

 allgemein werden können, weil sie vielfach weit besser als die 

 gewöhnlichen Tonerdehämateine wirken und weit widerstands- 

 fähiger sind. 



Zunächst nur ein paar orientierende Bemerkungen über die Chrom- 

 lacke und Chrombeizen. 



Es ist bekannt, daß Chromidoxyhydrate oder alle Chromidsalze (z.B. 

 Chromidsulfat, Chromalaun) die relativ stabilsten Chromverbindungen 

 sind. Durch viele Reduktionsprozesse erhält man aus Chromsäure^ 

 Bichromsäure und deren Verbindungen zuletzt Chromoxyd-(Chromid-) 

 Verbindungen. Fixiert man beispielsweise in der Mikrotechnik die Ge- 

 webe in Chromsäure , Chromaten oder Bichromaten, erhält man zu- 

 erst gelbliche Verbindungen dieser Oxydationsstufe , hernach tritt 

 in den Geweben eine braune Verbindung, welche größtenteils Chrom- 

 dioxyd (CrO.,) oder Chromi Chromat (Cr^Og'CrOg) ist, auf. Die- 

 selbe bildet sich auch bei Belichtung von „Chromgelatine" in der 

 Photographie, wodurch die Gelatine unlöslich wird, ferner zuerst durch 

 Reduktion von Chromaten, besonders Bichromaten (Müllers Flüssig- 

 keit etc. !) in den Geweben (und auch mit Alkohol im Lichte als ein 

 brauner amorpher Niederschlag) , welche durch langes Auswässern 

 weiter zersetzt wird. Es ist klar, daß diese Verbindung, welche noch 

 imstande ist, Sauerstoif abzugeben (und dabei in Chromoxyd über- 



*) Abgesehen von den Weigert sehen Gliafiirbungen als Beize. 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 1. 5 




66 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



geht), auch Hämatoxylin in Hämatein und Oxyhämateiu zu oxydieren 

 vermag. Auf diesem Verhalten beruht die gewöhnliche schwarze oder 

 blaue „Chromhämatoxylin"-Stückfärbung. 



Nach genügend langer Zeit und besonders beim Verweilen des 

 chromfixierten Gewebes in Alkohol geht die Reduktion des Chromi- 

 chromats weiter, und zuletzt ist alles in Chromoxyd übergeführt, wir 

 haben dann die bekannten grünen resp. graugrün gefärbten Gewebs- 

 stücke, in welchen jetzt alles Chrom als Chromoxyd -(Chromid-) 

 Verbindungen gebunden ist. Solches Material vermag nicht mehr 

 Hämatoxylin zu oxydieren. 



Genauer auf die möglichen Formen einzugehen , in denen die 

 Chromidverbindungen vorkommen könnten, halte ich für überflüssig; 

 jeder einigermaßen chemisch Geschulte weiß, daß die Oxydationsstufe 

 dem Chromoxyd entspricht, aber zugleich, daß wahrscheinlich sehr 

 komplexe Verbindungen vorliegen, mau mag dieselben in rein quanti- 

 tativer Hinsicht wohl größtenteils als basische Verbindungen — 

 Salze , Hydroxysalze — auffassen , aber molekular ist die Sache so 

 einfach nicht. Ich brauche nur auf das höchst eigentümliche Ver- 

 halten der grünen Chromisulfatlösungen hinzuweisen oder auf die sehr 

 verschiedenen Löslichkeitsverhältnisse des Chromidhydroxyd.^ 



Mikrotechnisch wichtig ist die Tatsache, daß „gut fixiertes Ge- 

 webe" sich vorzüglich färbt; und das sind eben solche Gewebe, in 

 welchen bei genügend langer Einwirkung der Chromsalze sich 

 Chromid-Chromate oder basische Chromidverbindungen genug gebildet 

 haben, worauf die Farbstoffe sich fixieren können. Die gute Färb- 

 barkeit der Formol-Bichromatmischungen beruht ebenfalls auf der in 

 gleichem Sinne, aber schneller sich zeigenden Reduktionswirkung des 

 Formaldehyds auf die Bichromate. 



Verwendet man Tonerdealaunhämateiue (z. B. die von mir 1895 

 angegebene voll oxydierte Lösung) , so färben sich die auf diese 

 AVeise gut chromierten Gewebe besonders kräftig. 



Ebenso werden die meisten Mikroskopiker erfahren haben, daß 

 solche Präparate besonders haltbar sind. Mir wenigstens ist immer 

 die weit größere Widerstandsfähigkeit der gleichen Präparate (auch 

 gegen Licht) aufgefallen. 



Diese Sache verhält sich , wie ich aus meinen Untersuchungen 

 entnehme, sehr wahrscheinlich so, daß sich das Hämatein, der Ton- 



^) Auf die wichtige Rolle, welche das Licht bei den Beizprozessen 

 mit Chromverbindungen spielt, brauche ich nur hinzuweisen. 




XXII, 1. Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. 67 



erdelack zum Teil , mit dem Chromoxyd des fixierten Gewebes ver- 

 bindet, so daß wir nicht reinen Touerdehämateiulack , sondern in 

 verschiedenem Grade Chromoxydhiimateinlack gleichzeitig erhalten; 

 und die Chromhämateiulacke sind weit widerstandsfähiger und auch 

 dunkler als die Tonerdelacke. 



Als Ausgangspunkt für die Chromhämateine wählte ich den 

 Chromalaun: Cr.-, (80^)3, K., 80^ -(- 24 H^O, der mir die meisten 

 Vorteile zu bieten scheint; erstens weil er, wie der Versuch lehrt, 

 sich relativ leicht mit den Geweben vereinigt (energisch beizt), zwei- 

 tens mit den Oxydationsprodukten des Hämateins intensiv gefärbte 

 Lacke von hohem Färbevermögen bildet. 



Durch Kochen geht bekanntlich das violette Salz in das grüne 

 über, und ich habe prinzipiell immer die grüne Modifikation 

 verwendet, indem ich die Lösungen kochte. Übrigens ist die 

 Lösung immer etwas hydrolysiert, was für die Beizung und Färbung 

 wichtig ist. Bei genügend langer Einwirkung werden die Gewebe 

 stark gebeizt (besonders bei 30 bis 35 Grad), darüber später. Wünscht 

 man stärkeres Beizen, verwendet man am besten Lösungen von soge- 

 nannten basischen Chromisulfaten. 



Mau erhält z. B. ein Salz : Cr^ (80^)3 (OH)g , wenn die Lösung 

 von Chromalaun mit frischgefälltem Chromoxydhydrat behandelt wird. 



Auch mittels Ammoniumhydrat oder kohlensauren Alkalien er- 

 hält mau ein basisches Salz , Cr., SO^ (OH)^ . Es bildet sich zuerst 

 ein Niederschlag (von Chromihydrat) , welcher sich wieder auflöst 

 unter Bildung von „basischen"^ Salzen. Solche Lösungen halten sich 

 bei passender Zusammensetzung sehr lange und vertragen auch das 

 Kochen, ohne daß sich die basischen Salze ausscheiden. 



Um eine gut färbende Chromalaunhämateinlösung 

 herzustellen, habe ich gefunden, daß die Lösung am 

 besten etwas (nicht besonders viel) basische Chromver- 

 bindungen enthalten soll, und daß sich die höheren 

 Oxydationsprodukte des Hämateins vorteilhafter als 

 das Hä matein selbst anwenden lassen. 



*) Das wenigstens bei der Ammoniakbehandlung sich sehr komplizierte 

 Verbindungen bilden, ist bekannt; für unsere Zwecke dürfen wir aber die 

 Verhältnisse zunächst so auffassen, als ob einfach basische Verbindungen 



wirklich in der Lösung wären. 




68 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



Hämatoxylin und Chromalaun geben keine Farblösung- ; das tun 

 erst die Oxydationsprodukte von dem Hämatein aufwärts (cf. früher). 

 Zur Oxydation des Hämatoxylins kann man, wie ich andernorts be- 

 sprochen habe, viele verschiedene Oxydationsmittel anwenden, sobald 

 man bewußt quantitativ verfährt, wie in der Mikrotechnik^ 

 des Hämatoxylins ich es 1895 zuerst empfohlen und getan habe. 



Beispielsweise kann man die berechnete Menge übermangan- 

 sauren Kalis verwenden, aber am besten gebraucht man hier 

 das Kaliumbichromat in der berechneten Menge. 



Also wird eine bestimmte Menge Chromalaun in Wasser gelöst 

 und gekocht, bis die Lösung ganz grün wird, hiernach löst man das 

 Hämatoxylin entweder direkt in der warmen Chromalaunlösung, was 

 sehr schnell geht, oder das Hämatoxylin wird gesondert in destilliertem 

 Wasser gelöst und der Chromalaunlösung zugefügt. Man läßt er- 

 kalten" und setzt hiernach die berechnete Menge Bichromas kalicus 

 (gelöst) hinzu unter stetem Umrühren. 



Die Oxydation beginnt sogleich , es ist aber notwendig zum 

 Kochen zu erwärmen , um die Oxydation schnell durchzuführen und 

 besonders um die Chromlackbildung zu beschleunigen. Es wird das 

 Bichromat durch das Hämatoxylin in Chromidverbindungen reduziert, 

 indem es seinen disponiblen Sauerstoff abgibt. Die Reaktion, welche 

 in saurer Lösung verläuft, ist bekanntlich folgende : 



K, Cr, 0, -f 4 H, SO^ = K, SO,, Cr, (SOJ.^ + 4 H,0 -f 0. 



3- 



Kaliumbichromat Chromalaun 



Die Schwefelsäure wird von dem vorhandenen Chromalaun ge- 

 liefert, d. h. es bilden sich eben durch die Oxydation des 

 Hämatoxylins die für die Färbekraft der Lösung wichtigen 

 basischen Salze. Ganz ähnlich basische Salze bilden wird das 

 übermangansaure Kali, wie ich 1895 im Zoologischen Anzeiger 

 No. 473 gezeigt habe, und dasselbe gilt von andern ähnlichen Sauer- 

 stoifspendern. 



Verhindert man durch einen berechneten Schwefelsäurezusatz 

 die Bildung von basischen Salzen , so ist die Lösung zwar selbst 

 gleich intensiv gefärbt , aber sie färbt die Gewebe schlecht oder 

 gar nicht. 



1) Zool. Anz. No. 473, 1895. 



-) Indem man die Schale oder den Kolben in kaltes Wasser stellt. 




XXII, 1. Hansen: Über Hämate'mlösungen und Cochenillefarblösungen. 69 



Dadurch ist uns ein ausgezeichnetes Mittel in die 

 Hände gegeben, die Färbung zu modifizieren. Ohne Säure- 

 zusatz färbt das Chromalaunhämatein die Kerne intensiv, und außer- 

 dem sehr stark auch die Zwischensubstanzen und das Plasma (also 

 mehr diffus). Bei geeignetem (s. unten) Schwefelsäurezusatz 

 kann man aber z. B. eine sehr intensiv reine Kernfärbung er- 

 zielen. Die Chromalaunlösung ist immer etwas hydrolysiert, sie ent- 

 hält, um rein quantitativ zu reden, gelöstes Chromhydroxyd ^ und 

 etwas hydrolytisch abgespaltene Schwefelsäure. Nun ist aber die 

 Beizwirkuug (also auch die Fixierung des Farbstoffes auf dem Ge- 

 webe) eng mit dem Vorhandensein von disponiblem Chromhydroxyd 

 verknüpft. Drängt man also die Hydrolyse durch Schwefelsäure- 

 zusatz zurück, ward die Färbung auch zurückgehen, die Verbindung 

 des Farblackes mit dem Gewebe wird dissoziiert nach dem Gesetze 

 der Massenwirkung ; " zuerst natürlich in den lockeren Verbindungen, 

 zuletzt in den Kernen. Es ergibt sich ferner hieraus, daß man durch 

 geeignet gewählte Verhältnisse zwischen dem Farblack, der Chrom- 

 alaunmenge und dem Schwefelsäurezusatz Stückfärbungen erhalten 

 kann , wobei man fast beliebig lange die Färbung ausdehnen kann, 

 ohne daß störende Überfärbung eintritt, es läßt sich eben dadurch 

 der gewünschte Punkt der Färbung, wo die färbenden und ent- 

 färbenden Kräfte der Lösung im Gleichgewicht miteinander sind, im 

 voraus genau bestimmen. 



Ich habe das praktisch bestätigt gefunden. Da die Hydrolyse 

 ebenso wie die Reaktionsgeschwindigkeit mit zunehmender Temperatur 

 wächst, wird die Färbung der Gewebe ungemein durch Er- 

 wärmung beschleunigt. Daher ist Brütofentemperatur oft sehr 

 geeignet und die meisten gut fixierten Gewebe vertragen allgemein 

 ohne Schaden kürzere Temperatursteigerungeu der Farblösung von 

 50 bis 60^, ja bisweilen noch höhere, wie ich vielfach konsta- 

 tiert habe. 



Ich hebe nochmals hervor, daß ganz wie hier auseinander ge- 

 setzt die Verhältnisse beim Eisenalaunhämatein liegen, bei dem 

 Ton er dealaunhä matein, sowie b'fci dem später zu erwähnenden 

 M a n g a n h ä m a t e in. 



^) Daß die Verhältnisse aber molekular weit koiupHzierter sind, ist 

 oben gesagt. 



-) Vgl. „Den Hyaline Bruskgrundsubst." 1900 und „Der Hyalinknorpel" 

 I, Anat. Hefte, H. 83, 1905. 




70 Hansen: Über Hämatei'nlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



Es gelten ferner ähnliche Überlegungen für Eisenalaun Cochenille, 

 Tonerdealaimcochenille und Chromalauncochenille (resp. Karmin) etc. 



Über die Oxydationsstufen des Hämatoxylins ist noch 

 zu sprechen ; ähnlich dem vorher beim Eisenalaunhämatein Gesagten 

 kann man außer dem Hämatein auch die von mir provisorisch so 

 genannten Oxyhämateiue verwenden. Es bestehen hier ja ganz gesetz- 

 mäßige Verhältnisse. ^ 



Chromalaun hämatein gibt eine rein himmelblaue Färbung. 



Chromalaundioxy hämatein gibt eine intensiv dunkelblaue, 

 resp. schwarzblaue Färbung und ist für den allgemeinen Gebrauch 

 am meisten zu empfehlen. 



Noch mehr schwarzblau färbt Trioxyhämatein. 



Wünscht man ganz schwarze Färbungen (der Kerne z. B.) , so 

 verwende man Tetraoxy- oder Pentaoxyhämatein. Bei noch 

 höherer Oxydation verliert die Farbe an Kraft und wird mehr 

 bräunlich. 



Die P"'arblösungen lassen sich auch so herstellen , daß mau das 

 Hämatoxylin in wässeriger Lösung für sich oxydiert, z. B. mit Kalium- 

 bichromat oder übermangansaurem Kali (s. später), die Lösung muß 

 alsdann die berechneten Mengen Schwefelsäure enthalten, damit sich 

 neutrales Mangansulfat bildet, resp. Chromidsulfat. Dann gieße man 

 die kalte Chromalaunlösung und die Hämateinlösung zusammen und 

 erwärme bis zur Lackbildung. Um so gut färbende Lösungen daraus 

 zu erhalten, muß man entsprechend dem oben Gesagten soviel Alkali 

 oder frisch gefälltes Chromhydroxyd zu der kalten Lösung setzen, 

 daß die der Hämateinlösung extra zugefügte Schwefelsäure neutrali- 

 siert wird , d. h. daß die Farblösung genügend basische Salze ent- 

 hält. — 



Je frischer die Hämatein- oder Oxyhämateinlösungeu bereitet 



^) Siehe auch oben über die Nomenklatur ; Hämatein = Hämatoxylin -^ H.,. 



Werden in Hämatein weitere 2 H oxydiert erhält man Dioxyhämatein. 

 „ „ „ „ 3 H ,, n n Trioxyhämatein. 



., „ „ ., 4 H „ ,, „ Tetraoxyhämatei'n. 



., ., „ „ 5H ,, „ ., Pentaoxj^hämatein. 



„ „ „ „ 6 H „ 77 n Hexaoxyhämatein. 



Diese Namen sind nur für die Beschreibung der bei der stufenweisen Oxy- 

 dation erhaltenen Produkte rein provisorisch gewählt, sonst prätendieren 

 sie nichts. 




XXII, 1. Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. 7 1 



sind, um so schneller tritt die Lackbildung ein. Je höher das Häma- 

 tein oxydiert ist, um so langsamer die Lackbildung. 



L<äßt man die wässerigen Hämatein-, resp. Oxyhämateinlösungen 

 längere Zeit in ganz vollgefüllten Flaschen gut verschlossen stehen, 

 so daß jede nachträgliche Oxydation ausgeschlossen ist, so erfolgt die 

 Lackbildung um so schwieriger und langsamer, je älter die Lösung, 

 so daß man gelegentlich sehr energisch kochen muß, damit sie ein- 

 tritt. Vielleicht haben sich die Hämateinmoleküle miteinander ver- 

 kettet , polymerisiert , kondensiert , so daß diese Bindungen erst ge- 

 sprengt werden müssen, ehe die Lackbilduug eintreten kann, welche 

 bei frischer Lösung durch keine solche Verkettungen verzögert wird. 

 Auch bei Tonerdealaunlacken begegnet man den hier mitgeteilten 

 Unregelmäßigkeiten bei Anwendung älterer Lösungen von Hämatein. 



Praktisch nehme ich immer die Oxydation des Hämatoxylins 

 in der Chromalaunlösung vor, ebenso wie ich in der von mir 1895 

 angegebenen Tonerdealaunhämateinlösung gemacht habe , ein Ver- 

 fahren, das entschieden besser ist als das Hämatein oder Hämatein- 

 ammoniak vorher darzustellen und nachträglich in Alaunlösung auf- 

 zulösen.^ Man wird auch hier bei den verschiedenen Cliromalaun- 

 hämateinen und Oxyhämatei'neu die zwei Prozesse auseinander zu 

 halten haben (s. oben): 1) die Oxydation des Hämatoxylins, 

 die relativ leicht vor sich geht, und 2) die Lackbildung zwischen 

 dem Hämatein, resp. den Oxyhämateinen und dem Chromsalz. 



Man arbeite, um dies wahrzunehmen, mit gut gekühlten Lösungen. 

 Nach Zufügen des gelösten Bichromats zur Chromalaunhämatoxylin- 

 lösung (mit oder ohne Schwefelsäurezusatz) beobachtet man zunächst 

 das Auftreten der brauneu Farbe der Hämateine resp. Oxyhämateine. 



^) Ganz neulich hat ja auch Paul Mayer sein älteres Verfahren ver- 

 lassen und vollführt die Oxydation des Hämatoxylins in der kalten Alaun- 

 lösung, er gebrauclit jodsaures Natrium als Oxydans ; aber' — was wichtig ist — 

 er verfährt jetzt ebenso, wie ich es 1895 zuerst empfohlen habe, und ge- 

 braucht die quantitativ nötige Menge Oxydans, um das Hämatoxylin in 

 Hämatein überzuführen. Wie ich im Jahre 1895 die berechnete, eben 

 nötige Menge Kaliumpermanganat angab, um 1 g Hämatoxylin in der 

 Alaunlösung in Hämatein zu überführen und die Menge auf das gewöhn- 

 hch vorkoiumende tetragonale Hämatoxylin bezog, ebenso hat P. Mayer 

 jetzt (Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XX, p. -409 ff.) zwei Qnanta Natrium- 

 jodat angegeben, welche wie die Berechnung zeigt, einfach auf das rhom- 

 bische und das tetragonale Hämatoxylin sich beziehen. Er hat sich also 

 in der Hauptsache meinem vor 10 Jahren angegebenen Prinzip an- 

 geschlossen. 




72 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



Erwärmt man, so tritt kurz oder lang, resp. erst beim Kochen die 

 intensiv blaue, schwarzblaue, resp. schwarze Lackbildung ein. Am 

 leichtesten geschieht die Lackbildung beim Hämatein (nur kurzes 

 Kochen , bisweilen schon in der Kälte) ; schon beim Oxyhämatein 

 muß man länger kochen, ehe die Lackbildung beendet ist, und beim 

 Tetra oxy- und Pentaoxy hämatein beobachtet man am deutlichsten 

 die Oxydation getrennt von der Lackbildung. Selbst nach ein paar 

 Minuten Kochen ist wohl die Oxydation des Hämatoxylins,^ aber 

 nicht die Lackbildung erfolgt , die Lösung färbt in diesem Zustande 

 schlecht, in der Eigenfarbe der Oxyhämateine bräunlich, oder schwach 

 schmutzigviolett; erst wenn mau mehrere Minuten kocht, bis die 

 Lackbildung eintritt, erhält man die sattgefärbte Lacklösung. — 



Die Reaktionsgleichungen, nach welchen die Oxydation mittels 

 Kaliumchromats und Kaliumbichroraats in saurer Lösung ver- 

 läuft, sind der Hauptsache nach die folgenden: 



Für Kaliumchromat (K^ CrO^ ; Mol. = 194-4): 

 2 (K, Cr OJ + 5 H, SO^ = 2 K. 80^ + Cr, (SO^). + 5 H^O -f O3. 



Für Kaliumbichromat (K.^ Cr, 0, ; Mol. = 294*5): 

 K, Cr, 0, -^ 4 H, SO^ = K, SO,, Cr, (SOJ3 -f 4 H,0 -f- O3. 



Aus diesen Gleichungen berechnet man leicht die per 1 g Häma- 

 toxylin nötige Menge Chromats, resp. Bichromats, um die erwünschten 

 Oxydationsstufen des Hämatoxylins zu erhalten. 



Wenn die Oxydation in der Chromalaunlösung vor sich geht, 

 liefert diese die notwendige Schwefelsäure, resp. es bilden sich, wie 

 oben angegeben, der Oxydationsmenge entsprechende Mengen basischer 

 Salze. Wünscht man (quantitativ) die Bildung der neutralen Salze, 

 so füge man der Chromalaunlösung vor oder nach der Oxydation des 

 Farbstoffes soviel freie Säure (Schwefelsäure) hinzu, daß sie eben ge- 

 nügt zur (theoretischen) Bildung der neutralen Salze. 



Wie man aus den Reaktionsgleichungen sieht, braucht Kalium- 

 monochromat 1 Mol. Schwefelsäure mehr (5 Mol.), als das Bichromat 



') Vielleicht infolge Ringbildung, Kondensation etc. unter den Oxy- 

 hämateinmolekülen ; über die nicht wenigen, tatsächlich vorhandenen Mög- 

 lichkeiten siehe die chemische Literatur über die Konstitution und den 

 Abbau des Hämatoxylins und des Brasilins. 




XXII, 1. Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. 73 



(4 Mol.) bei Abgabe gleicher Sauerstoffmengen, d. li. wird keine 

 freie Schwefelsäure hinzugefügt, so bilden sich beim Monochromat 

 entsprechend mehr basische Chromsalze als beim Bichromat. Auf 

 diesen Verhältnissen dürfte es zum Teil beruhen, daß die Anwendung 

 des Monochromates (gelb) bei der alten (R. Heidenhain sehen) Chrom- 

 hämatoxylinstückfärbung bevorzugt wird , während das Bichromat 

 leichter überoxydiert, — der säurebiudenden Wirkung des gebildeten 

 neutralen 2 K., SO^ beim Monochromat nicht zu vergessen. Bei der 

 Chromhämatoxylinstückfärbung nach Apathy sowie bei anderen , wo 

 alkoholische Lösungen angewendet werden, geht im Dunklen und 

 bei Zimnrertemperatur die Oxydation und die Lackbildung (u. a. ent- 

 sprechend der geringen Ionisation) langsamer vor sich und geht auch 

 nicht so leicht zu weit, ist daher besser zu überwachen. Da ich 

 immer quantitativ verfahre, bevorzuge ich aus leicht begreiflichen 

 Gründen das K a li u mb i c h r m a t als x y d a n s. 



Die Menge freier Schwefelsäure , welche man der Farblösung 

 hinzufügen muß, wenn man das neutrale Chromidsulfat, resp. den 

 Chromalaun als Endprodukt bei der Oxydation mittels Kali um- 

 bi Chromats wünscht, anwenden muß, berechnet sich zu: 1"333 g 

 H2 SO^ pro lg Kaliumbichromat, also braucht 0*276 g^ 

 Kalium bichromat 0-368 g H., SO^ . 



Die Mengen von Kaliumbichromat, welche nötig sind, um nach 

 dem oben Gesagten 1 g Hämatoxylin in die verschiedenen Oxydations- 

 stufen zu oxydieren, habe ich hier berechnet (und praktisch geprüft). 

 Die Zahlen sind, entsprechend dem praktischen Gebrauche, ein wenig 

 abgerundet, was prinzipiell bedeutungslos ist. 



Zur Bildung von 



a) Chromalaun-Hämatein braucht 1 g Hämatoxylin 0"28 g Kaliumbichromat 



b) „ -Dioxyhämatein ., 1 „ „ 0'55 „ „ 



c) ., -Trioxyhämatein .. 1 ,, „ 0*69 „ „ 



d) „ -Tetraoxyhämatei'n ., 1 „ „ 0-83 '„ ,, 



e) „ -Pentaoxyhämatein ,, 1 „ „ 0*96 ., ,, 



f) „ -Hexaoxyhämatein ,, 1 „ „ 1-10 „ „ 



Es lassen sich hiernach eine große Menge von Farblösungen kon- 

 struieren, welche innerhalb ziemlich weiter Grenzen gruppenweise die 

 besprochenen gesetzmäßig abgestuften Farbtöne geben , sowie ent- 

 sprechend dem Gehalt an basischen Chromsalzverbindungeu , resp. 



^) Diese Menge genügt, um zwei Wasserstoffatome in 1 g Hämatoxylin 

 zu oxydieren. 




74 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



nach dem verschiedenen Säurezusatz beliebig variiert werden können, 

 mit Rücksicht auf Kernfärbung, Plasmafärbung, diffuse Färbung etc., 

 wie ich oben auseinandergesetzt liabe. Ganz entsprechende Varia- 

 tionen lassen sich bezüglich der Farblacke mit anderen Metallsalzen 

 erreichen , wie ich wiederholt hervorgehoben und praktisch vielfach 

 geprüft habe. 



Die Chromalaunhämateinrezepte, welche ich hier empfehle, sind 

 aus einer großen Menge, praktisch geprüften, ausgewählt, als die 

 mir zweckmäßigst erscheinenden; möge ein anderer nach seinem 

 Ermessen andere Rezepte bevorzugen, das Prinzip einmal aufgestellt 

 wird dadurch nicht verändert. 



Mein C h r o m a 1 a u n d i o x y h ä m a t e i n hat folgende Zusammen- 

 setzung : 



1) Chroma laun (chemisch rein) 10 g, wird gelöst in destil- 

 liertem Wasser 250 g, die Lösung wird gekocht, bis sie ganz 

 grün wird. 



2) H ä m a 1 X y 1 i n (pur. krist.) 1 g wird in lieißem destil- 

 liertem Wasser 10 bis 15 g gelöst, die beiden Lösungen werden 

 vermischt , oder es werden die Hämatoxylinkristalle direkt in die 

 heiße Chromalaunlösuug unter Umrühren gelöst. Man läßt die nur 

 schwach gefärbte Lösung erkalten, dann füge man : 



3) 0'5 g H2 SO^ (ca. 5 cc einer lOprozentigen Schwefelsäurelösung) 

 hinzu und hernach 



4) oxydiert man. Kali u m b i c h r m a t 0*55 g wird in ca. 20 cc 

 warmem Wasser gelöst, und nachdem diese Lösung auch abgekühlt 

 (durch Eintauchen des Reagensglases im Wasser), gießt man sie 

 tropfenweise unter stetem Umrühren in die Chrom- 

 a 1 a u n h ä m a t o x y 1 i n 1 ö s u n g. 



Man erwärmt die Mischung bis zum Kochen und läßt unter 

 stetem Umrühren einige Minuten lang sieden, bis die Lackbildung 

 vollendet ist, was oft nur 1 bis 2 Minuten dauert. 



Durch den Schwefelsäurezusatz hält sich der Lack fast ganz 

 in Lösung , ein geringer ungelöster Überschuß des Lackes schadet 

 durchaus nicht, ist eher erwünscht. 



Vor dem Gebrauche wird immer filtriert. Die Lösung 

 liält sich sehr lange. Schnitte werden damit ^/^ bis 2 bis 5 Minuten 




XXII, 1. Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. 75 



und länger gefärbt ; o h u e daß lu a n d a Über f ä r b e n zu f ü r e li - 

 ten braucht, kann mau stundenlang färben. Bei mäßiger Erwär- 

 mung (40 bis 50 ^) färbt sie auch noch schneller. Ich färbe ent- 

 weder ö bis 10 Minuten, erwärme gelegentlich kurz, ich habe nie 

 einen Nachteil von der Erwärmung gesehen. 



Die Farbe ist eine tief blauschwarze, äußerst 

 präzise und scharfe K e r n f ä r b u n g (Chromatin) , auch das 

 Plasma färbt sich schwach , aber bei der angegebenen Zusammen- 

 setzung ist die Kernfärbung dominierend.^ Die Farbe ist gegen 

 Säuren etc. äußerst widerstandsfähig und hält sich auch im 

 Lichte vorzüglich. Sie läßt sich mit bestem Erfolge mit Säurefuchsin- 

 Pikrinfärbung verwenden, sowie mit den roten und orangen Plasma- 

 farben etc. 



Indem der Chromalaun die Gewebe verschieden stark beizt, 

 werden die Gegenfärbuugen oft feiner abgestuft in ihren Tönen er- 

 scheinen, als bei der Tonerde-Häraatoxylinfärbung. 



Ich empfehle diese Farbe und die folgenden als 

 besser als Tonerdealaunhämatein für den gewöhn- 

 lichen Gebrauch,^ weil eben die Chromoxyhämateine sehr echte 

 Farben sind. 



Für die M i k r p h 1 o g- r a p h i e haben sich diese Chromalaun- 

 hämateine , ebenso wie meine Eisenhämateinfärbung , sehr geeignet 

 erwiesen. 



Die Farbeverteilung ist so bestimmt , daß ich dieses saure 

 Chromalaunhämatein unverändert als Stückfärbung habe benutzen 

 können. Man färbt dann bei kleinen Stücken 3 bis 4 bis 5 Tage laug- 

 (bei größeren länger), wäscht gut in destilliertem Wasser aus, welches 

 oft gewechselt und am besten vorher durch Auskochen von Sauerstotf 

 befreit wird,'^ ebenso wie man das Glas ganz vollfüllt l)is an den 

 Stöpsel. Das Auswaschen dauert am besten nicht zu kurz {',> bis 4 bis 

 5 Tage), aber selbst wenn das Wasser sich noch ganz schwach färbt, 

 kann man ruhig mit Alkohol in steigender Konzentrierung weitergehen 

 und dann einschmelzen. 



Die Stückfärbung ist ebenso vorwiegend Kernfärbung, aber auch 

 Plasma , Bindegewebe , Muskeln etc. haben einen schönen Ton er- 



^) Der Schlehn wird in der wässerigen Lösung oft metachromatisch 

 rotviolett gefärbt, jedoch hält sich diese Metachromasie nicht in Alkohol. 



^) Die Strukturen vertragen infolge der schwärzeren Farbe weit 

 stärkere Vergrößerungen als beim Tonerdehämatem. 



^) Kann in vielen Fällen unterbleiben. 




76 Hansen: Über Hämate'inlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1, 



halten. Die glatten Muskeln färben sich gewöhnlich etwas grauer 

 im Ton. 



Durch vermehrten Schwefelsäuregehalt (z. B. 0*6 bis 0*7 g) läßt 

 sich reine Kernfärbung erzielen , doch das muß je nach dem Mate- 

 rial ausprobiert werden , gewöhnlich ziehe ich etwas Plasmafärbung 



mit vor. 



* * 



Ist stärkere Plasmafärbung erwünscht, als die angegebene Farb- 

 lösung gibt, so nehme man einfach O'IO bis 0*25 bis O'BO g 

 Schwefelsäure statt 0*50 g. 



Ohne Schwefelsäurezusatz färbt die Farblösung Kerne sehr 

 intensiv, dann aber auch Plasma, Strukturen, Muskeln,^ Zwischen- 

 substanzen etc. stark, aber sehr „difterenziert", nur muß die Färbe- 

 dauer sich etwas nach dem Material, der Fixation u. dergl. richten; 

 gewöhnlich darf die Färbung nicht zu lange dauern, weil sie sonst 

 zu intensiv wird. Das beste läßt sich doch sehr leicht ausprobieren. 

 Für gewöhnlich verwende ich zwei Lösungen, mit resp. 0*25 g und 

 0*50 g Schwefelsäure, sowie eine Lösung ohne Schwefelsäure. 



Geht mau von der schwefelsauren , rein kernfärbenden Lösung 

 aus, so ist dieselbe aber sehr leicht in eine sicher plasmafärbende zu 

 verwandeln, man braucht nur die Farblösung mit ein wenig am besten 

 frisch gefälltemChromoxydhydrat(Cr(OH)3) zu versetzen, gut schütteln, 

 eventuell etwas zu erwärmen (nicht kochen!) und dann zu iiltrieren. 

 Auch mit entsprechend geringem Alkalizusatz bewirkt man dasselbe, 

 und kann man sich so leicht die zur Neutralisation des Schwefel- 

 säurezusatzes nötige Menge einer dünnen kohlensauren Alkalilösung 

 berechnen und einem beliebigen Quantum der Farblösung zusetzen."-^ 



Mit dem Tetraoxyhämatein bis dem Hexaoxyhämatein liefert der 

 Chromalaun ja schwarze Färbungen. Wünsclit man solche , so ver- 

 wende man einfach: 250 g Wasser, 12 g Chromalaun, 1 g Häma- 

 toxylin und (statt 0*55 g) 0*83 g Bichromas kalicus, man erhält 

 so das Tetraoxyhämatein, welches ich als das zweckmäßigste be- 

 trachte, oder man verwende 0*96 g Bichromas kalicus, womit man 

 Pentaoxyhämatein bekommt. Der Schwefelsäurezusatz sei dann 



^) Man beachte die starke Färbung der glatten Muskeltibrillen, sowie 

 die Membranellen vom Bindegewebe um die glatten Miiskelzellen etc. 



'-) Durch Zusatz von kohlensaurem Alkali zur Tonerdehämateinlösung 

 (Alaunhämatoxylin) habe ich die gewöhnliche Lösung in eine stark schleim- 

 färbende verwandeln können (darüber werde ich später berichten). 




XXII, 1. Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. 7 7 



uiclit größer als 0'3 bis 0*4 g, weil die Färbekraft der höheren 

 Oxydationsprodukte geringer ist. Man koche energisch, bis sich die 

 intensiv schwarzvioletten Lacke bilden, denn anfangs erhält man nur 

 die braune Färbung des Oxyhämateins. Ein Bodensatz schadet nicht; 

 vor dem Gebrauche wird filtriert. Die Färbung ist eine Schnittfär- 

 bung, am besten mit Erwärmung, wie früher gesagt. 



Auch als Stlickfarben lassen sich die Lösungen verwenden, man 

 setze aber dann etwas mehr Schwefelsäure hinzu, je nach dem Ma- 

 terial; doch verfüge ich in dieser Beziehung nur über beschränkte 

 Erfahrung. 



Dagegen kann man mit Chromalaundioxyhämatein^ als Ausgangs- 

 punkt sehr leicht schwarze Schnittfärbuugen extemporieren. Man ver- 

 mische am besten 10 Teile der Färbelösung mit 1 Teil einprozeutiger 

 Bichromaskalicuslösung" in der Kälte und färbe z. B. unter mittlerer 

 Erwärmung. 



Alsdann bekommt man rein schwarze Kernfärbungen; auch an- 

 dere Verhältnisse der Mischung lassen sich brauchen, nimmt man 

 aber wesentlich mehr Bichromat, wird die Farbe nicht so intensiv 

 und auch bräunlicher im Ton; bei entsprechender Variation der 

 Mischungsverhältnisse lassen sich alle Töne von blauschwarz, schwarz 

 bis zu braungelb und gelblich erzielen. (Die verschiedenen Mißfär- 

 bungen, welche gelegentlich bei der R. Heidenhain sehen Chromhäma- 

 toxylin-Stückfärbuug eintreten, erklären sich aus dem hier Mitgeteilten, 

 ebenfalls, daß die Beizung der Gewebe gelegentlich geringer ausfällt, 

 indem die Reduktion in Chromidverbindungen ungenügend vor sich 

 geht.) 



Beizt man beliebig fixiertes Material mit einer Chromalaunlösung, 

 und behandelt man hernach die Stücke mit einer Lösung von Häma- 

 tein oder besser Dioxyhämatein , so erzielt man seTir gute Stückfär- 

 bungen; auch für Schnitte zu verwenden. 



Die Fixierung des Chromoxyds (aus dem Chromalaun) auf den 

 Geweben läßt sich sehr augenfällig so demonstrieren. Man beizt drei 

 Stücke desselben Materials (z. B. in Alkohol oder Formolalkohol 

 fixiertes) in 



1) Mit 0-5 g Schwefelsäure. 



^) Auch einprozentige Chromaskalicuslösung läßt sich in der Kälte 

 verwenden. 




78 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



a) 5 Prozent ueutr. Chromalaun in Wasser (grün gekocht); 



b) in derselben Lösung mit 1 bis 2 Prozent Hg SO^ Zusatz; 



c) in einer Lösung, in welcher durch Zusatz von einigen Tropfen 

 konz. (25 Prozent) Ammoniak oder 10 Prozent Nag CO3 ein 

 Mehrgehalt an löslichen basischen Salzen gebildet sind (siehe 

 oben).-^ 



Am besten beizt man bei Brütofentemperatur (30 bis 35 ^ C.) 

 ein paar Tage; die Lösungen dringen sehr gut ein, und dann sind 

 die Stücke, welche in der neutralen (a) und der basischen (c) Lösung 

 behandelt worden sind, ganz grün, graugrün; die in der sauren Lösung 

 (b) dagegen sehr wenig resp. gar nicht graugrün. Durch diese Mittel, 

 Schwefelsäurezusatz oder Alkalizusatz, hat man es in seiner Hand, 

 die Litensität der Beizung zu variieren, je nach dem Material, natür- 

 lich auch durch die Dauer und die Temperatur. 



Mit der basischen Beizung erhält man außer Kernfärbung mehr 

 diffuse Färbung, welche sich besonders für dünne Schnitte und Plasma- 

 strukturen eignen. 



Nach derBeizuug, durchweiche unlösliche Chromoxydverbindungen 

 (conf. oben) auf dem Gewebe befestigt worden sind, wird abgespült 

 oder auch ausgewaschen (ist nicht so sehr von Belang) und hernach 

 werden die Stücke (bei 30 bis 35 Grad) in dem 10 fachen Volum von 

 0*5 Prozent Dioxyhämatein- in Wasser oder auch mit 25 bis 

 50 Prozent Alkoholzusatz einige Tage (2 bis 5) gefärbt, je nach der 

 Größe der Stücke. 



Es bilden sich gewöhnlich keine Niederschläge, die Farbflüssig- 

 keit wird nötigenfalls einmal erneuert , und jetzt bildet sich im Ge- 

 webe der tief schwarzblaue Lack , natürlich nur an den Stellen ge- 

 bunden, wo die Beize gebunden war, während die Farbflüssigkeit zwar 

 dunkler gefärbt, aber klar bleibt. 



^) Z. B. 5 bis 10 Tropfen Ammoniak auf 250 g 5prozentiger grüner 

 Chromalaunlösung; der entstehende Niederschlag muß sich in der kalten 

 Lösung glatt wieder auflösen beim Schütteln ; die Lösungen müssen sich 

 auch nach dem Kochen klar halten. 



^) 1 g Hämatoxylin wird in 150 g Wasser gelöst, es werden 0-31 g 

 H., SO4 zugefügt; dann löst man 0"355 g Kaliumpermanganat in 50 g Wasser 

 und vermische die kalten Lösungen. Man erwärmt, kocht ein paar Mi- 

 nuten und erhält eine tief braune Lösung von Dioxyhämatein, welche sich 

 sehr gut hält. Man kann das Hämatoxylin in entsprechend weniger Wasser 

 lösen und nach der Oxydation mit der entsprechenden Alkoholmenge ver- 

 mischen, z. B. 1 g Hämatoxylin in 50 g Wasser oxydieren, dann 50 g 

 Alkohol zugefügt. 




XXII, 1. Ilunsen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. 79 



Nach passendem Auswaschen in destilliertem Wasser überführe 

 man in Alkoliol in steigender Konzentration, und da das Hämatein 

 oder Dioxyhämatein in Alkohol etwas löslich ist, braucht man Nieder- 

 schläge in den Stücken niclit zu fürchten ; Paraftineinbettung oder 

 Celloidin. Gewöhnlich habe ich so verfahren : 



Beizung in grüner Chromalaunlösung bei 30 bis 35*' 2 bis 

 5 Tage, Auswaschung eventuell '^j.-^ bis 1 Tag; Färbung in 0'5pro- 

 zentigen Dioxyhämatein ebenso lange. 



Nur bei sehr schwierigem Material bilde ich in der Beizflüssig- 

 keit ein wenig basische Salze. 



Bei passendem Schwefelsäuregehalt der Beizflüssigkeit, 1 bis 

 2 pro Mille, erhält man mehr reine Kernfärbung. 



Vergleichsweise habe ich auch eine Manganhämatein- 

 1 ö s u n g versucht ; am besten verwendet man hier auch Dioxyhäma- 

 tein. Mit einer starken Lösung von Manganosulfat (MnSO^) bildet 

 eine einprozentige Lösung von Dioxyhämatein einen violettbraunen 

 Lack , welcher in der Wärme dissoziiert wird ; in einer verdünnten 

 Lösung von Manganosulfat tritt die Lackbildung nicht ein. 

 Das Mauganhämatein wird folgendermaßen bereitet: 

 Manganosulfat 5 g, destilliertes Wasser 200 g, Hämatoxylin 1 g 

 werden gelöst. Man oxydiert mit Kaliumpermanganat 0"18 bis 

 0"19 g in 10 cc Wasser gelöst. Wünscht man Mangandioxy- 

 hämatein, so verwende man einfach 0*36 g Kaliumpermanganat. 

 — Beim Kochen erhält man erst einen intensiv schwarzvioletten 

 Niederschlag und eine braune Lösung; setzt man aber eine ganz 

 geringe Schwefelsäuremenge hinzu (1 bis r2 cc einer lOprozentigen 

 Ho SO^- Lösung -\- 200 g Farblösung), so ist der Niederschlag darin 

 außerordentlich leicht löslich, und man erhält eine tief orangebraune 

 Lösung, welche schön tiefbraune Kerne, braunes Plasma (auch braune 

 Centrosomen) färbt. Anwendung ganz wie bei einer Alaunhämatein- 

 lösung. 



in. 



Betreuend der gewöhnlichen Tonerdealaunhämateinlösung 

 habe ich gefunden, daß man, wenn man das von mir 1895^ an- 



^) Zool. Anz. No. 473. 




80 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösimgen. XXII, 1. 



gegebene quantitative Vorgehen bei der Herstellung des volloxydierten 

 „Alaunh.äraatoxylins" befolgt, man durchaus nicht ängstlich zu sein 

 braucht, etwas zu hoch zu oxydieren, wenn man nur das Dioxy- 

 hämatein nicht überschreitet , auch muß genügend Alaun vorhanden 

 sein. Eine passende kleine Menge Schwefelsäure dazu mit Rück- 

 sicht auf das zu bildende neutrale Manganosulfat bewirkt, wenn ge- 

 wünscht, reinere Kernfärbung. Um neutrales Manganosulfat bei der 

 Oxydation mit Kaliumpermanganat in der Alaunlösung zu bilden, 

 braucht 1 g Kaliumpermanganat 0*93 g Schwefelsäure; die pro 1 g 

 Hämatoxylin zur Überführung in Hämatein nötige Menge (0'177 g) 

 Kaliumpermanganat braucht also 0*157 g H, SO^. Eine Tonerde- 

 alaunhämateinlösung nach meinen Angaben im Jahre 1895 (Zool. 

 Anz. No. 473) läßt sich jetzt auch so zusammensetzen, indem ich 

 nur den geringen und praktisch bedeutungslosen Alkoholgehalt weg- 

 gelassen habe. 



a) 20 g Kalialaun gelöst in 200 g destilliertem Wasser in der 

 Wärme. — lg Hämatoxylin wird ebenso in der warmen Alaunlösung 

 leicht aufgelöst, eventuell durch Kochen. 



Man oxydiere mit einem der vielen geeigneten SauerstofFsiJender, 

 am besten, wie ich es empfohlen habe, b) mit (0*177) 0*18 g 

 Kaliumpermanganat,^ welches in einer kleinen Menge Wasser 

 gelöst wird. Indem a und b kalt vermischt werden, beginnt sogleich 

 die Hämateinbildung und die Lackbildung. Ich erhitze aber die 

 Mischung zum Kochen, weil so die Hämateinbildung und die Lack- 

 bildung in kürzester Zeit beendet wird ; in der Kälte dauert es etwas 

 länger, bis der Prozeß abgelaufen ist. 



Viele Histiologen arbeiten, um reine Kernfärbung zu er- 

 halten, mit Vorliebe mit einer dünneren Tonerdealauuhämateinlösung, 

 wie mit dem P. MAYERSchen Hämalaun. 



Eine dem Hämalaun in allen den Eigenschaften, worauf es 

 ankommt, ähnliche Hämateinalaunlösung stellt man sich aus 

 meinem Tonerdealaunhämatein leicht dar durch einfache 

 Verdünnung mit Alaunwasser. Man nehme einfach 220 g 

 meiner Lösung,'-^ dem neuen oder dem alten Rezepte nach, und 



^) 3 CO einer bei 16*^ konzentrierter wässeriger Lösung von Kalium- 

 permanganat, wie ich seinerzeit für die Praxis angab, entspricht mit ge- 

 nügender Genauigkeit dem hier angegebenen Quantum. 



-) Ob dieselbe die 10 cc Alkoliol, welche früher zur Auflösung des 

 Hämatoxylins gebraucht wurden, enthält oder nicht, ist praktisch ganz be- 

 deutungslos; ebenso ist der Manganosulfatgehalt ganz gleichgültig, von 




XXII, 1. Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen, g 1 



vermische sie mit 800 g Wasser und 30 g Alaun. Das Re- 

 sultat ist, wie leicht ersichtlicli, „Hämalaun". 



IV. 



Ein paar einfache Methoden zur Darstellung von Häraatein- 

 lösungen dürften hier angezeigt sein. 



A. Wässerige Hämateinlösung. 



1) 1 g Hämatoxylin (pur.) wird in der Wärme in .50 g destil- 

 liertem Wasser gelöst, dazu O'lö? g HgSO^^ (0-16 g). 



2) 0-177 g (0-18) Kaliumpermanganat in .50 g destilliertem 

 Wasser gelöst. 



1 und 2 werden vermischt (kalt), die Reaktion beginnt sogleich. 

 Man erwärmt kurz zum Kochen , und läßt nach der sehr schnellen 

 Beendigung der Reaktion wieder erkalten, indem man das Gefäß 

 in kaltes Wasser stellt. 



Man hat alsdann eine dunkel orangebraune Lösung von Häma- 

 tein erhalten, welche sich fortwährend fast klar hält. Ein ganz ge- 

 ringfügiger Niederschlag mit der Zeit schadet nicht, wird aber auch 

 teils durch beliebigen Alkoholzusatz, teils durch Verdünnung bis auf 

 ^/^ Prozent vermindert. Die geringen Spuren von Kaliumsulfat und 

 Manganosulfat sind praktisch ohne jede Bedeutung für unsere Zwecke. 



keinerlei Einfluß auf die Farbe. Es ist eine theoretische Prüderei, an 

 dem gebildeten Manganosulfat Anstoß zu nehmen und nicht auch den 

 verwendeten Kalialaun auf Verunreinigungen zuerst chemisch zu unter- 

 suchen, was gewiß kein Mikrotechniker tut. Die Methode von Harris 

 (1898), statt Kaliumpermanganat Quecksilberoxyd zur Oxydation des Häma- 

 toxylins in der warmen Alaunlösung zu verwenden, ist von autoritativer 

 Seite als „theoretisch richtiger" als die meinige (1895) bezeichnet worden, 

 wahrscheinlich hat man erstens nicht kontrolliert, ob die Reaktion auch 

 quantitativ verläuft, wie wir dies beim Kaliumpermanganat z. B. wissen, 

 zweitens ist auch die Richtigkeit nur eine „theoretische", denn praktisch 

 enthält die Hämateinalaunlösung nach dem Kochen mit Quecksilberoxyd 

 aufgelüste Quecksilbersalze, wie leicht nachweisbar; vielleicht rührt die 

 „bessere Haltbarkeit" der Harris sehen Lösung (Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. 

 1901) gegenül>er der Mayer sehen Lösung nicht vom Klima, sondern von 

 dieser praktisch sonst gewiß unwichtigen Verunreinigung mit Quecksilbersulfat 

 lier. Natürlich haben all diese ganz kleinen Mengen von Nebenprodukten 

 ebensowenig zu bedeuten wie das Jodnatrium in Paul Mayers neuestem 

 Hämalaun. 



^j Man scheue die kleine Mühe nicht, diese Menge titrimetriscli bei- 

 zufügen, wenn man ganz genau arbeiten will. 



Zeitschr. f. wiss. :Mikroskopie. XXII, 1. (j 




82 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



Ein Alkoliolzusatz , z. B. von 10 bis 25 Prozent, kann empfohlen 

 werden. 



Nach ganz derselben Methode lassen sich beliebig hochoxydierte 

 Oxyhämateinlösuugeu darstellen (s. oben). Eine Dioxyhämätein- 

 lösung vQu ^/g Prozent habe ich mehrmals mit gutem Erfolge 

 verwendet. 



1 g Hämatoxylin in 150 g Wasser gelöst, dazu 0'32-^ g Ho SO^ 

 wird mit 0'36'- g Kaliumpermanganat in 50 g Wasser gelöst, 

 oxydiert ; man erhält eine tief braunrote Lösung ; eventuell Alkohol- 

 ersatz eines Teiles des Wassers. 



Ich habe im vorhergehenden die Oxydationsprodukte des Häma- 

 teius rein praktisch als Di-, Tri-, Tetra- etc. Oxyhämateine benannt 

 und, wie gesagt, vorläufig ganz willkürlich die Sache so betrachtet, 

 als ob 2 bis 6 Wasser stoifatome des Hämateins oxydiert würden, 

 indem die 1 bis 3 Sauerstoffatome verbraucht würden, gleichviel ob 

 wirklich 2 Wasserstoffatome als Wasser wegoxydiert würden (wie 

 das bei der Hämateinbildung aus dem Hämatoxylin geschieht), oder 

 ob vielleicht Hydroxylierung eines Wasserstoffatoms durch Einführung 

 des Sauerstoflatoms erfolgte. Sobald wir nämlich über das Häma- 

 tein hinausgehen , wußten wir , bisher wenigstens , nichts genaueres 

 über die Natur und Konstitution der Oxydationsprodukte anzu- 

 geben. In den letzten Jahren sind wir aber durch die Arbeiten 

 von Perkin und Yates,'^ welche mir nicht zugänglich waren, und 

 durch die Arbeiten von St. v. Kostanecki und Lampe , sowie von 

 BoLEiNA, V. KosTANECKi uud J. Tambor u. a. Über die Konstitution 

 und den Abbau des Brasilins und des mit demselben so eng ver- 

 wandten Hämatoxylins sehr viel genauer unterrichtet worden. Wer 

 die hierher gehörige fachchemische Literatur studiert, wird an 

 der Hand der da angegebenen Daten leicht sehen , daß es mehrere 

 tatsächlich vorhandene Möglichkeiten zum Unterbringen , resp. zum 

 Verbrauche von 3 (und auch mehr) Sauerstoffatomen gibt, wie ich 

 es oben angenommen hatte. Sei es nun Hydroxylierung oder Weg- 

 oxydation von Wasserstoff", eventuell mit Doppelbindung oder Ring- 

 schließung, sowie auch Kondensation oder Verkettung von zwei oder 



1) Eigentlich 0-314. 



2) Eigentlich 0-355 g. 



*) Proced. ehem. Soc. vol. XVI, 1900. 




XXII, 1. Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. 83 



mehreren Farbstoffmolekülen, mit oder ohne Beteiligung- von Metallsalz- 

 molekülen. Was speziell die höheren Oxydationsprodukte betrifft, 

 würde es mich nicht überraschen, wenn Ringbildung oder Verkettung 

 von mehreren Farbstoffmolekülen gefunden werden sollte. 



Die eigentümlich verlangsamte Lackbildung , welche besonders 

 bei Farbstofflösungen auftritt, welche einige Zeit (ohne Nachoxyda- 

 tion) gestanden hatten, könnte auf eine also temporär verminderte 

 Reaktionsfähigkeit hindeuten. Ebenso ist die Möglichkeit der Kon- 

 densation bei der Lackbildung in der Lösung und insbesondere bei 

 der Fixierung des Farblackes in den Geweben zu denken ; auch das 

 mit der Zeit selbst in ganz gefüllten , wohl verschlossenen (aus- 

 gedampften) Flaschen auftretende Unlöslichwerden eines Teiles des 

 Farblackes ^ könnte dafür sprechen. Besonders mache ich auf das 

 Phänomen aufmerksam, daß alle Chromalaunhämatein- und Oxyhäma- 

 teinlacke in der Lösung blauviolett , resp. tiefblau erscheinen , im 

 Gewebe fixiert vielfach ganz schwarz färben. 



Weiter sich in Vermutungen zu ergehen, hat vorläufig (für mich) 

 keinen Zweck; der Möglichkeiten sind eben viele. Eine Diskussion 

 an der Hand der Konstitutionsformeln hat imr Wert für das Auf- 

 suchen von Direktiven für eine genaue quantitative chemische Unter- 

 suchung der besprochenen Verhältnisse. Von großem Wert wäre 

 jedenfalls die Elementaranalyse, u. a. die Bestimmung der Anzahl 

 Metallatome in den Farblacken der Eisen- und Chromverbindungen 

 im Verhältnis zur Anzahl der Hämatoxylin- resp. Hämatei'nmoleküle. 

 Man bekäme dann etwas festeren Boden unter den Füßen für theore- 

 tische Deduktionen. Es ist natürlich sehr wohl möglich , daß schon 

 in der technischen Literatur derartige, mir nicht auffindbare Angaben 

 vorliegen, in der mir zugänglichen chemischen Literatur habe ich 

 solche nicht gefunden, auch wird ja selbst in den speziell farbchemi- 

 schen Lehrbüchern aus der neuesten Zeit angegeben, daß die höheren 

 Oxydationsprodukte des Hämatoxylins nicht genau untersucht wor- 

 den sind. 



Es ist für einen Chemiker selbstverständlich, daß das meiste 

 des hier Mitgeteilten nicht bloß auf das Hämatoxylin und dessen 

 Oxydationsprodukte, sondern auch auf das so eng und gleichartig 

 konstituierte Brasilin und dessen Oxyderivate angewendet werden 

 kann , wie mir auch einige hierher gehörige Versuche bestätigt 

 haben. 



Wh-d durch die Ansäuerung (Salzbildung) verhindert. 




84 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



Durchgehend aber sind die Hämatoxylinfarben den Brasilinfarben 

 für mikroskopische Zwecke vorzuziehen, u. a. weil die Hämatoxyline 

 mehr blau resp. blauschwarz sind, und daher optisch den mehr roten 

 Brasilinderivaten vorzuziehen sind. Durch Berücksichtigung der Diffe- 

 renz im Molekulargewicht (und der Anzahl der Hydroxylgruppen) 

 lassen sich sehr leicht die oben angegebenen Rezepte auf das Bra- 

 silin und Brasilein umrechnen. 



Es war (und ist noch) meine Absicht , die methylierten 

 Hämatoxyline auf ihr färberisches und lackbildendes Vermögen 

 zu untersuchen , weil ich aber zu spät die dazu nötigen Materialien 

 bekommen habe, muß ich diese Versuche von der vorliegenden Publi- 

 kation ausschließen. 



Für die Ausarbeitung der in dieser Arbeit mitgeteilten Unter- 

 suchungen habe ich , soweit möglich, die wichtigsten fachchemischen 

 Originalarbeiten über das Hämatoxylin studiert und den größten 

 Nutzen, wenigstens für meine eigene Auffassung der hierhergehörigen 

 Verhältnisse, davon gehabt. Hatte ich doch selbst vor Jahren das 

 Hämatoxylin sowie das Hämatein und dessen Farblacke zuerst aus 

 den chemischen Lehrbüchern kennen gelernt, und ist doch die Dar- 

 stellung des Hämateins und des Hämateinammoniaks schon im Jahre 

 1842 von 0. L. Erdmamn so sorgfältig beschrieben worden, wie noch 

 nicht in der histologisch-mikrotechnischen Literatur, so da:ß Erdmanns 

 Methode der Darstellung^ seitdem in den größeren chemischen Hand- 

 büchern steht, von den späteren Origiualabhandlungen nicht zu reden. 



V. Über Ferricochenillelösung. 



Daß Cochenille mit Eisenverbindungen graue resp. schwarze 

 Farbtöne gibt , ist den Färbern ja längst bekannt , daher auch die 

 Warnung vor eisenhaltigem Wasser bei der Cochenillefärberei. In der 

 Mikrotechnik sind diese schwarzen Cochenilleeisenlacke von A. Spuler '^ 

 verwertet, welcher besonders eine Stückfärbung in zwei Stufen an- 



^) Oxydation einer ammoniakalischen Hämatoxylinlösung an dem 

 Luftsauerstoif in einer flachen Schale. 



-) Enzyklopädie der mikroskopischen Technik. I. Artikel Coche- 

 nille (1903), p. 153—154. 




XXII, 1. Hansen: Über Hämateinlösung-en und Cochenillefarblösungen. 85 



gegeben hat , indem erst mit einem Cochenilleauszug durchgefärbt 

 und dann in Eiseualauulösung gebeizt und umgefärbt wird. Auch 

 für Schnitte läßt sich diese Methode natürlich verwenden. Später 

 hat K. Peter^ eine abgeänderte Spui.ERSche Methode benutzt, um 

 bei sonst schwarzer Farbe der Kerne etc. die Dotterkörner rot- 

 gefärbt zu erhalten. 



Nun habe ich nach Analogie der von mir oben beschriebenen 

 Eisenalaunhämateinlösung und Chromalaunhämatei'nlösung ein paar 

 Farblösungeu hergestellt, welche ich u. a. des theoretischen Ver- 

 gleiches wegen neben der Hämateinfärbung besprechen werde. 



Wässeriger Cochenilleauszug gibt bekanntlich mit Eisenchlorid 

 sowie mit Eisenalaun schwarze Fällungen. In Säuren lösen sich diese 

 schwarzen Ausfällungen wieder auf. 



Es läßt sich nun ziemlich leicht eine Ferricochenille- 

 lösung ausprobieren, welche Kerne intensiv schwarz färbt, ebenso, 

 aber schwächer, die übrigen Bestandteile in schwarzer bis grauer 

 Farbe. 



Ich benutze seit längerer Zeit mit Erfolg unten beschriebene 

 Lösung: 



Ferriammonium Sulfat (Eisenalaun) 8 g wird aufgelöst in 

 destill. Wasser 250 g, Cochenillepulver 5 bis 10 g wird darin 

 sorgfältig verteilt (es färbt sich die Cochenille sogleich ganz schwarz), 

 und 15 cc einer lOprozentigen Schwefelsäurelösung werden zugesetzt; 

 man erhitze unter Umrühren zum Kochen und lasse cirka 15 bis 

 20 Minuten sieden, indem man das abgedampfte Wasser von Zeit 

 zu Zeit ersetzt; nach 10 Minuten Kochen werden wieder 10 cc der 

 lOprozentigen Schwefelsäure zugesetzt, so daß im ganzen 25 cc 

 lOprozentige Schwefelsäure zugefügt worden sind. 



Die Farblösung wird abfiltriert und soll ganz dunkelbraun bis 

 schwarzbraun sein. Die Lösung ist sehr haltbar. 



Man färbt Schnitte aus beliebigem Material darin 5 bis 10 Mi- 

 nuten, eventuell mit Erwärmung der Lösung; spült ab mit destil- 

 liertem Wasser, gewöhnliches Leitungswasser kann nach Belieben zur 

 Nachbehandlung verwendet werden, die Farbe wird dadurch vielleicht 

 etwas besser fixiert. 



Gewöhnlich braucht man nicht zu differenzieren , aber in ver- 

 dünnten Säuren (2- bis 4prozentige Essigsäure langsam oder 1 bis 2 bis 



1) Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XXI, 1904, p. 314—320 (Eine neue 

 Dotterfärbung), Jan. 1905. 




86 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



öpromillige Schwefelsäure schneller) erzielt man jeden beliebigen 

 Grad von Kernfärbung. 



Auch als Stückfärbung läßt sie sich sehr gut verwenden. 

 Man färbt alsdann 3 bis 4 bis 5 Tage (oder länger) in der Lösung; 

 Auswaschung in destilliertem Wasser, dann Härten in Alkohol steigen- 

 der Konzentration etc. Vorzugsweise sind die Kerne ganz schwarz 

 gefärbt, aber auch Plasma und die übrigen Gewebsbestandteile haben 

 feine graue Töne erhalten; so stark plasmafärbend wie Eisenhäma- 

 tein ist sie lange nicht, deswegen eignet sie sich besonders für Stück- 

 färbung. 



Das Eisensalz muß eine Fe r riverbin düng sein;^ 

 dies läßt sich leicht demonstrieren. 



Kocht man z. B. Cochenillelösung mit einer Lösung von Ferro- 

 ammoniumsulfat, welcher sicher keine Ferriverbindungen enthält, 

 so bekommt man nur purpurrote Farbe der Mischung; sehr ähnlich 

 der Alauncochenille unter sicherem Ausschluß von Sauerstoif färbt 

 diese Ferrocochenillelösung ganz purpurrot, analog einer Alauneoche- 

 nille , läßt man aber die also roten Sclmitte in sauerstoffhaltigem 

 Wasser liegen, so changiert die Farbe nach und nach in grau bis 

 schwarz (Kerne). Erst werden die Kerne schwarz , dann folgt das 

 Plasma, während das Bindegewebe sich etwas länger rot hält. 



Wird eine Spur von oxydierender Substanz in die Lösung ge- 

 bracht, so tritt mit dem Ferrisalz sogleich die graue bis schwarze 

 Färbung ein. 



Auch der umgekehrte Versuch läßt sich machen. Tropft man 

 eine Iprozentige Oxalsäurelösung zu der schwarzbraunen Ferricoche- 

 nillelösung (warm), so verwandelt sich nach und nach das Ferrisalz 

 in Ferrosalz; sobald diese Umwandlung vollständig ist, ^ ist die 

 Flüssigkeit jetzt ganz rotfarbig geworden und färbt die 

 Schnitte (aus sauerstoif freiem Wasser) auch rot, wie oben beschrieben; 

 bei Gegenwart von sauerstoffhaltigem Wasser geht die Farbe wieder 

 in schwarz über. 



Oxydationsmittel verwandeln natürlich die also durch Oxalsäure 

 reduzierte rote Ferrocochenille wieder in schwarze Ferricocheuille. 

 Dieser Versuch läßt sich vielfach variieren. 



Vermischt man ausgekochte Alaun ■' cochenillelösung mit gleichen 



^) Im Gegensatz zum Eisenhämatein. 



■-) Ein kleiner Überschuß an Oxalsäure ist vorteilhaft um die Luft- 

 oxydation zu neutralisieren. 

 ■') Tonerdealaun. 




XXII, 1. Hansen: Über Hiimateinlösungen und Cochenillefarblösungen. 87 



Teilen einer gleicbprozeutigen, sicher ferrisalzfreien Lösung von Eisen- 

 sulfat ^ (oder MoHRS Salz), so färben sich bei Sauerstoffausschluß die 

 Schnitte nur rot oder purpurn, wie bei der Alauncochenille üblich, beim 

 geringsten Zusatz^ aber von oxydierender Substanz (z. B. Gegenwart 

 von Chromaten oder Chromichromat) wird die Färbung aber gleich 

 schwärzlich, — hier zuerst das Plasma, während sich die Kerne länger 

 rotviolett halten. Letzteres Verhalten beruht natürlich darauf, daß 

 sich der violette oder purpurne Tonerdecochenillelack in die Kerne 

 lokalisiert hat, und daß er erst nachträglich durch den Ferrilack ver- 

 drängt werden soll; in dem zuerst erwähnten Versuche, wo nur 

 Eisenbeize vorhanden war, müßten natürlich die Kerne ihrer Affinität 

 entsprechend zuerst die Ferrisalze aufspeichern und so zuerst und 

 am stärksten schwarz werden.'^ Es ist für das Gelingen dieser Ver- 

 suche notwendig, unter peinlichstem Ausschluß des Sauerstoffs von 

 den Ferroverbindungen zu arbeiten. 



VI. Chromalauncochenille. 



Eine ziemlich gut verwendbare Chromalauncochenille läßt- sich 

 leicht herstellen: 



ö 



Chromalaun o g 



Destilliertes Wasser 200 „ 



Cochenille 10 ,, 



werden 15 bis 20 Minuten gekocht, indem das abgedampfte Wasser 

 immer ersetzt wird, eventuell kann etwas (5 cc lOprozentige H., SO^) 

 zugefügt werden. 



Man erhält nach der Filtrierung eine dunkelgraublaue Lösung, 

 welche Kerne tief graublau färbt , während das Plasma sich mehr 



^) Eventuell mit einem ganz kleinen Oxalsäuregehalt. 



'^) Die gewöhnlichen wässerigen Lösungen von Eisenoxydulsalzen ent- 

 halten ja immer etwas Ferrisalz, ohne besondere Vorsichtsmaßregeln würde 

 also auch gewöhnliche Eisensulfatlösung die roten Cochenillefarben schwarz 

 färben. 



^) Ganz analog dem hier Gesagten erklärt sich also Peteks Kot- 

 bleiben der Dotterkörner beim schwarzen Färben der Kerne. Der wässe- 

 rige Cochenilleauszug ist wahrscheinhch in den Dotterkörnern stärker 

 gebunden als in den (nicht gebeizten) Kernen; kommt jetzt Eisenalaun- 

 lösung hinzu, so findet die Lackbildung in den Kernen und also auch die 

 Umlarbung viel leichter statt als in den Dotterkörnern , deren Affinitäten 

 schon besser durch die Cochenille abgesättigt waren. 




88 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXII, 1. 



grau färbt. Besonders für Dur clif ä rbuug eignet sich diese Farb- 

 lösuug sehr gut; sie ist vorwiegend kernfärbend. Schnitte färbe man 

 entweder stundenlang oder erwärme die Farblösung; wünscht man 

 stärker diftuse Färbung, setze man 2 g Kaliumacetat hinzu und koche 

 die Lösung, oder man füge dem jedesmal zu gebrauchenden Quantum 

 ein wenig Ammoniak hinzu, 5 bis 8 Tropfen einer 25prozentigen Ammo- 

 niaklösung auf 200 cc Farblösung genügen, aber durch etwas Thymol- 

 zusatz muß man alsdann diese ammoniakhaltige Lösung vor Schimmel- 

 bildung schützen. 



Schnitte in der Chromalauncochenillelösung gefärbt werden mit 

 ^1^ pro Mille Bichromaskalicuslösung behandelt schwarz. 

 2 pro Mille Ur annitratlösung bewirkt ebenso erst schwarze, her- 

 nach grünschwarze bis dunkelgrüne Farbe der Schnitte. Übrigens 

 glaube ich nicht, daß diese Farblösung je besondere praktische Be- 

 deutung erlangen wird, weil wir andere bessere Lösungen besitzen; 

 ich habe sie auch nur deswegen erwähnt, weil sie für die Chrom- 

 cochenillelackbildung interessant ist. 



Der Chromidcochenillelack bildet sich nämlich nur leicht beim 

 Kochen der Chromalaunlösung mit dem Cochenillepulver, bei niedri- 

 gerer (also auch gewöhnlicher) Temperatur bekommt man eine schar- 

 lachrote Lösung der Cochenille in Chromalaunlösung, welche die Kerne 

 rot färbt, auch die roten Blutkörperchen stark etc.; erst beim Er- 

 hitzen der Schnitte in der Farblösung bis zum Kochen^ sieht man 

 die rote Farbe in dunkelgraublaue umschlagen, ganz wie im Ton der 

 gebildeten Chromidcochenillelacke. 



Nun ist es bekannt, daß man gelegentlich bei Alauncochenille- 

 stückfärbung von Material , welches in Chromaten fixiert wurde , oft 

 z. B. die glatte Muskulatur (auch Schleim ab und zu) mit violettroten 

 Kernen und graublauem Plasma gefärbt erhält, daß also eine ganz 

 hübsche Metachromasie vorliegen kann. Nach der Farbe der Chromid- 

 cochenillelacke zu urteilen, und da bekanntlich die glatte Muskulatur 

 nicht wenig Chromidhydroxydverbindungen zu binden vermag (so sieht 

 sie an den in Chromalaun gebeizten Stücken ganz graugrün aus), ver- 

 mute ich daher, daß diese „Metachromasie" auf die durch die lange 

 Stückfärbedauer bewirkte Bildung von Chromidcochenillelack statt der 

 Tonerdecochenillelack beruht. 



^) Hat natürlich nur experimentelle Bedeutung. 




XXII, 1. Hansen: Über Hämateinlösnngen und Coclienillefarblösungen. 89 



Literaturverzeichnis. 



(Die allgemeine chemische Literatur ist nicht angeführt.) 



I. F achchemische Literatur. 



1) Erdmann, 0. L. , Über das Hämatoxylin (Journ. f. prakt. Chemie 

 Bd. XXVI, 1842, p. 193-216 [Grundlegendes Werk]). 



2) Ref. desselben in: Annalen der Chemie und Pharmacie, herausg. 

 von WÜHLER u. Liebig. Bd. XLIV, 1842, p. 292—296. 



3) Handwörterbuch der reinen und angewandten Chemie von Liebig, 

 PoGGENDORFF u. WÜHLER. Bd. III, 1848, Artikel: Hämatein und Häma- 

 toxylin, p. 757—762. 



4) Erdmann, 0. L., Vermischte Mitteilungen. 7. Über das H.ämatoxylin 

 (Journ. f. prakt. Chemie Bd. LXXV, 1858, p. 218—224). 



5) Hesse , 0. , Über das Hämatoxjdin (Ann. d. Chemie u. Pharmacie 

 Bd. CIX— CX, 1859, p. 332—341). 



6) Beim, F., Über das Hämatoxylin (Ber. d. deutsch, ehem. Ges. 1871, 

 p. 329—334). 



7) Hummel, J. J., u. Perkin, A. G. , Über einige neue Verbindungen 

 des Hämateins und Brasileins (Ber. d. deutsch, ehem. Ges. 1882, p. 2337 

 — 2347 [u. a. eine einfache Darstellungsmethode des Hämateins]). 



8) Erdmann, E., u. Schultz, G., Über das Hämatoxylin und Hämatein 

 (Ann. d. Chemie u. Pharmacie Bd. CCXVI, 1883, p. 232—240). 



9) NiETZKi, R. , Chemie der organischen Farbstofie. 2. Aufl. Berlin 

 1894. 3. Aufl. 1897. 4. Aufl. 1901. 



10) RuPE, H., Chemie der natürlichen Farbstoffe. Braunschweig 1900. ' 



11) HuJLMEL, J. J., u. Knecht, E. , Die Färberei und Bleicherei der 

 Gespinstfasern. 2. Aufl. Berlin 1891. 



12) Kostanecki , St. v. , Lampe , V. , Studien über das Brasilin (Ber. 

 d. deutsch, ehem. Ges. 1902, Bd. 11, p. 1667—1674). 



13) BoLLiNA, E, , Kostanecki, St. v. , Tambor, J. , Studien über das 

 Brasilin (Ber. d. deutsch, ehem. Ges. 1902, Bd. II, p. 1675—1679). 



14) Kostanecki, St. v. , Rost, A. , Naphthalin aus Umwandlungspro- 

 dukten des Hämatoxylins (Ber. d. deutsch, ehem. Ges. 1903, Bd. II, p. 2202 

 — 2206; vgl. auch ein paar andere Artikel daselbst von v. Kostanecki). 



15) Perkin, W. H. jun., Über den Abbau des Brasilins (Ber. d. deutsch, 

 ehem. Ges. 1902, Bd. III, p. 2946—2947). 



16) Herzig, J., u. Pollak, J., Über Brasilin und Hämatoxylin (Ber. d. 

 deutsch, ehem. Ges. 1903, Bd. I, p. 398—400). 



17) Herzig, J. , u. Pollak, J. , Brasilin und Hämatoxylin (ibid. 1903, 

 Bd. II, p. 2319-2320). 



18) Herzig, J., u. Pollak, J. , Über Brasilin und Hämatoxjiin (ibid. 

 1903, Bd. IV, p. 3713—3715). 



II. Mikro technische Literatur (nur eine Auswahl). 



1) Benda, C, Über eine neue Färbemethode des Zentralnervensystems 

 und Theoretisches über Häraatoxylinfärbungen [Eisenhämatoxylin] (Arch. f. 

 Anat. u. Physiol., Physiol. Abt., 1886, p. 562—564). 




90 Hansen: Über Hämateinlösungen und Cochenillefarblösungen. XXIl, 1. 



2) Mayer, P., Über das Farben mit Hämatoxylin (Mitteil. d. zool. 

 Stat. Neapel Bd. X, 1891, p. 170 — 18G [macht auf das Hämatein auf- 

 merksam]). 



3) Heidenhain, M. , Neue Untersuchungen über Zentralkörper (Arch. 

 f. mikrosk. Anat. Bd. XLIII, 1894 [s. p. 431—432, Eisenhämatoxylin]). 



4) Benda, C, Zellstrukturen und Zellteilungen des Salamanderhodens 

 (Verb. d. anat. Ges., VH. Vers. Göttingen 1893, p. 1(51— 165 [Eisenhäma- 

 toxybnj). 



5) Hansen, Fr. C. C. , Eine schnelle Methode zur Herstellung des 

 Böhmer sehen Hämatoxylins (Zool. Anz. No. 473, 1895, Febr. [Das quan- 

 titative Verfahren bei der Oxydation des Hämatoxylins in Hämatein]). 



G) Mayer, P., Über Hämatoxylin, Karmin und verwandte Materien 

 (Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie Bd. XVI, 1899, p. 196-220). 



7) Janssens et Leblanc, Recher dies cytologiques sur la cellule de 

 la levure (La Cellule t. XIV, 1898); Ref. in Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. 

 Bd. XV, p. 264 (hematoxyline noire). 



8) Mayer, P., Beruht die Färbung der Zellkerne auf einem chemischen 

 Vorgang oder nicht? (Anat. Anz. Bd. XIII, 1899, p. 313—322). 



9) Lee U.Mayer, Grundzüge der mikroskopischen Technik. 2. Aufl. 1901. 



10) Lee et Henneguy, Traite des methodes techniques de l'anatomie 

 microscopique. Paris 1896. 



11) Enzyklopädie der mikroskopischen Technik Bd. I — II. Berlin 1903. 

 (Verschiedene Artikel.) 



12) Weigert, K., Eine kleine Verbesserung der Hämatoxylin- van Gieson- 

 Methode (Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XXI, 1904, p. 1—5). 



13) ScHULTZE, 0., Über Stückfärbung mit Chromhämatoxylin (Zeitschr. 

 f. wiss. Mikrosk. Bd. XXI, 1904, p. 5—9). 



14) Peter, K., Eine neue Dotterfärbung (Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. 

 Bd. XXI, 1904, p. 314—320). 



Kopenhagen, 9. März 1905. 



[Eingegangen am 30. März 1905.] 




XXII, 1. Rüzicka: Zur Theorie der vitalen Färbung. 91 



[Aus dem k. k. hygienischen Institut des Prof. Dr. Gust. Kabrhel in Prag.] 



Zur Theorie der vitalen Färbung. 



Von 

 Dr. Tlaflislav Rüzicka, 



Institut sassistent . 



Durch eine ausgedehnte Versuchsreilie ist es mir gelungen , in 

 dem tinktoriellen Verhalten des lebenden und toten Protoplasmas 

 eine Differenz nach der Richtung hin zu eruieren , daß sich das 

 lebende rot, das tote aber blau färbt, wenn man ihm ein äquimole- 

 kulares Gemisch von Neutrah-ot und Methylenblau vorsetzt. 



Die Methode gestaltet sich folgendermaßen : 



Man mischt 0'05prozentige Lösungen von Neutralrot und Methylen- 

 blau medic. Höchst in destilliertem Wasser zu gleichen Teilen. Von 

 dem Gemisch tropft man auf gut gereinigte Objektträger und läßt 

 die Tropfen bei 35^ C. im Trockenschrank verdampfen. Auf die 

 angetrocknete Farbschicht bringt man sodann das Objekt in dem 

 für dasselbe isotonischen Medium, das hiermit zugleich als Lösungs- 

 mittel des Färbegemisehes dient. 



Die verwendeten Farbstoffe sind beide basischen Charakters, 

 ihre Konstitution ist, wie aus den nachstehenden, Pappenhedis Farb- 

 chemie (St. 381 lind 376) entnommenen, Formeln zu ersehen ist, 

 sehr analog. 



CeH3N(CH3).3 

 N(^ ^N Mol. Gewicht 252-53 Neutralrot. 



C^H,— NH., 



\ 

 GH, 



C«.H,N(CH3), 



CeH3 = N(CH3)., 



Nl^ ;S Mol. Gewicht 284-36 Methylenblau. 




92 Ruzicka: Zur Theorie der vitalen Färbung. XXII, 1. 



Infolge dieses ümstandes erscheint das elektive Verhalten der 

 beiden Farbstoife sehr interessant, und zwar um so mehr, als keine 

 zwingenden Gründe vorhanden sind, um bei denselben ein verschie- 

 denes Molekularvolumen anzunehmen. 



Es ist im Interesse der Theorie der Färbung sicherlich wichtig, 

 ein klares Bild Aon den Vorgängen, welche bei Anwendung meiner 

 Methode die Färbung ermöglichen, zu erhalten. 



Dies werde ich nun hier zu entwerfen trachten. Wie die Er- 

 kenntnis dieser Vorgänge das tiefere Eindringen in die Struktur- 

 unterschiede zwischen dem lebenden und toten Protoplasma zu fördern 

 vermag, habe ich an einer anderen Stelle dargelegt.^ 



Um eine leichtere Analyse dieser Vorgänge zu ermöglichen, 

 suchte ich den Färbungsakt in seinen Hauptkomponenten: 



1) Dem Eindringen des FarbstotFes in die Zelle und 



2) der (sei es physikalischen oder chemischen) Bindung des 

 Farbstoftes in der Zelle 



näher zu erfassen. 



Hierbei ging ich von der Voraussetzung aus , daß sich die 

 lebende Substanz in mehr oder minder flüssigem Zustande befindet 

 und aus zwei Schichten von verschiedener Dichte , einer äußeren 

 dichteren imd einer inneren flüssigeren, besteht. Denkt man sich 

 eine derartig zusammengesetzte Zelle von einer Flüssigkeit umgeben, 

 so wird sich ihre Außenschicht den von derselben getrennten Flüssig- 

 keiten (d. h. dem Medium und der Innenschicht) gegenüber wie eine 

 Membran verhalten. Die physikalischen Eigenschaften dieser Membran 

 werden für den Austausch der durch dieselbe getrennten Flüssig- 

 keiten entscheidend sein. 



Da es sich in meinem Falle darum handelt, nur das Verhalten 

 von basischen Farbstoffen zu prüfen, so kann der Umstand, daß die 

 vorliegende Membran nicht für alle Stoffe permeabel ist (da mit 

 Ausnahme von Methylorange und der Tropäoline 00 und 000 keine 

 saueren Farbstoffe dieselbe zu durchdringen vermögen) , vernach- 

 lässigt werden. 



Somit nehmen wir die Membran als unveränderlich und für 

 wässerige Lösungen basischer Anilinfarbstoffe durchgängig an , wo- 

 durch der vorliegende Fall auf seine einfachsten Bedingungen zu- 

 rückgeführt erscheint. 



1) Siehe meine Arbeit „Über tinktorielle Diff'erenzen zwischen leben- 

 dem und abgestorbenem Protoplasma" (Pflügers Arch. 1905). 




XXII, 1. Ruzicka: Zur Theorie der vitalen Färbung. 93 



Dies alles angenommen , haben wir einen Fall vor uns , in 

 welchem die Färbung nach den Gesetzen der einfachen Ditfusion 

 vor sich gehen sollte. Daß die Diffusion gelöster Stolfe in Colloiden 

 mit derselben Geschwindigkeit vor sich geht wie in wässerigen Lö- 

 sungen, hat bereits Graham (1862) bewiesen. 



Diesen Gesetzen gemäß werden Farbstofflösungen mit einer 

 Schnelligkeit aufgenommen, welche der Konzentration der Lösungen 

 proportional und von der Reibung der Farbstoffmoleküle abhängig 

 ist. Die Diffusion dauert solange , bis die Konzentrationen der zu 

 beiden Seiten der Membran befindlfchen Flüssigkeiten ausgeglichen 

 sind. Bei einem elektrolytisch vollkommen dissoziierten Färbegemische, 

 wie es in unserem Falle vorliegt, müßte schließlich die Lösung zu 

 beiden Seiten der Membran gleich, d. h. im Mischtone, also violett, 

 gefärbt erscheinen. 



3Iit Hinblick darauf ist es klar, daß die Ergebnisse meiner 

 Versuche die angedeutete einfache physikalische Deutung nicht zu- 

 lassen; denn das Gemisch müßte mit derselben Geschwindigkeit 

 diffundieren, wie die dasselbe zusammensetzenden Einzellösungeu. 

 Dies tritt jedoch nicht zutage, denn die lebenden Zellen entnehmen 

 dem Gemische nur die rote, die toten nur die blaue Farbe. 



Diese mit aller Sicherheit^ konstatierte Tatsache gestattet eine 

 zweifache Deutung : 



1) Beide Farbstoffe dringen in die Zelle ein, docli unterliegt 

 der eine, je nach Leben oder Tod der Zelle, chemischen Umwand- 

 lungen, so daß stets nur der zweite zum Ausdruck gelangt. 



2) Das Methylenblau kann in die lebende Zelle nicht eindringen, 

 weil sich dem Durchtritte seines Moleküls durch die Zeilaußenschicht 

 ein für seinen Partiärdruck unüberwindlicher Widerstand ent- 

 gegenstellt. 



Der zweiten Deutung gemäß müßte man dafürhalten, daß die 

 Außenschicht der lebenden Zelle nur dem Neutralrotmolekül form- 

 adäquate Poren besitze , und daß dieselben erst durch den Tod 

 der Zelle eine auch für das Methylenblaumolekül formadäquate 

 Gestaltung erfahren. 



Es leuchtet jedoch ein , daß — wenn diese Deutung richtig 

 wäre — die definitive Färbung der (toten) Zelle wiederum violett 

 sein müßte. Sie ist jedoch rein blau. Nur Bakterien und Hypho- 

 myceten lassen sowohl während des Lebens , als auch nach dem 



^) Siehe diesbezüglich meine oben citierte Arbeit. 




94 Rüzicka: Zur Theorie der vitalen Färbung. XXII, 1. 



Tode eine violette Färbung erkennen. Doch tritt auch bei ihnen 

 der Unterschied zutage , daß intra vitani die rote , post mortem die 

 blaue Farbe entschieden überwiegt, so daß man — wollte man diese 

 Tatsache durch einfache Diffusion erklären — zu mindestens suppo- 

 uiereu müßte , daß der Durchtritt des Methylenblaus durch die 

 Bakterien- und Hyphomyceteumembrau intra vitam erschwert er- 

 scheint. Diese Erschwerung der Diifusion würde aber einer physi- 

 kalischen Erklärung große Schwierigkeiten bereiten. 



Es ist außerdem hinlänglich bekannt, daß das Methylenblau 

 auch bei der gewöhnlichen Verwendungsweise lebende Zellen sehr 

 gut färbt, so daß jede Annahme eines Widerstandes, den ihre Außen- 

 schicht dem Methylenblaumolekül entgegensetzen sollte, hinfällig wird. 

 Dasselbe gilt auch von den Bakterien. Milzbrandbazillen, die ich in 

 einem Bouillontropfen auf eine trockene Methylenblauschicht brachte 

 und auf diese Weise gefärbt habe, übertrug ich aus dem Präparate 

 nach einer halben Stunde auf frischen schrägen Agar, und konnte 

 sie so weiterzüchten. 



Der Annahme chemischer Vorgänge bei meiner vital-letalen Fär- 

 bung steht der Umstand entgegen , daß es möglich ist , sowohl eine 

 lebende, wie eine tote Zelle singulär ebeiiso mit dem Neutralrot, 

 als mit dem Methylenblau zu färben. Wie könnte man da annehmen, 

 daß die differentielle Tinktion : Rotfärbung der lebenden und Blau- 

 färbung der toten Zelle aus dem Gemische der beiden Farbstott'e, 

 auf einer chemischen Grundlage zustande kommt? 



Freilich wird die Färbung im Tone einer konzentriertereu Lö- 

 sung vollendet , als die färbende Flotte war , und dieser Umstand 

 wurde von manchen als ein Zeichen chemischer Bindung des Farb- 

 stoffes angesehen. Daß dies nicht immer der Fall ist, beweisen die 

 Versuche von Spiro. ^ Doch haben seine Schlüsse nur für tote 

 Gegenstände Geltung. 



Immerhin könnte man noch einen Deutungsversuch im Sinne 

 der physikalischen Färbungstheorie unternehmen, indem man, Over- 

 TONS Beispiel foFgend, van t'Hoffs Theorie der festen Lösungen 

 und das sogenannte Teilungsprinzip Giorgieviczs zu Rate ziehen 

 würde. 



OvERTON- hat die Behauptung aufgestellt, daß die Zellaußen- 

 schicht nur dann für einen Stoff permeabel sei, wenn er in einem 



^) Über physikalische und physiologische Selektion. Ötraßburg 1897. 

 -) Viertelj. d. naturf. Vers, in Zürich. XLIV. 1899. 




XXII, 1. Rüzicka: Zur Theorie der vitalen Färbung. 95 



Gemisch von Cholesterin , Lecithin nnd Protagon löslich ist. Die 

 genannten Stoffe sollen in der Außenschicht der Zelle stets enthalten 

 sein und haben die Eigenschaft, sehr große Quantitäten von AVasser 

 aufnehmen zu können. Dieser Umstand erklärt die Durchlässigkeit 

 der Zellaußenschicht für das Wasser. 



Applizieren wir nunmehr das eben Angeführte auf den Färbungs- 

 akt , so haben Avir erstens zu erwälnien , daß sämtliche basische 

 Farbstoffe in Cliolesterin, Lecithin etc. löslich sind. 



Des weiteren habe ich anzuführen , daß Overton ursprünglich 

 der Ansicht war , daß die Farbsalze beim Eindringen in die Zellen 

 durch Hydrolyse, infolge der Einwirkung der schwachen Gewebs- 

 säuren, dissoziiert werden und als Basen mit den Säuren der Zellen 

 zu Farbsalzen zusammentreten. Diese chemische Ansicht vom Färbe- 

 akte hat OvERTOx nachher ^ geändert und nimmt nunmehr an , daß 

 in vielen Fällen — zu welchen auch die Färbungen mit Neutralrot 

 und Methylenblau gehören — die Farbstoffe als solche in die Zelle 

 aufgenommen werden. Ich glaube diese Behauptung bestätigen zu 

 können. Die Farbstoffe gelangen also durch Diffusion in die Zelle. 

 p]s fragt sich nun, auf welche Weise sie die Färbung im Tone einer 

 kouzentrierteren Lösung vollbringen. 



Nach Overton wird dies durch mechanische Verteilung des 

 Farbstoffes auf die Farbflotte und auf das zu färbende Objekt be- 

 werkstelligt. Der Konzentrationsunterschied des Farbstoffes stammt 

 dalier, daß die Substanz der gefärbten Teile für den Farbstoff ein 

 größeres Lösungsvermögen zutage gelegt hat , als das Wasser der 

 Farbflotte. Wie lichou erwähnt, schreibt Overton dieses größere 

 Lösungsvermögen der Gegenwart von Cholesterin, Lecithin, Protagon, 

 Cerebrin zu. Zugunsten dieser Ansicht führt er an, daß diese Stoffe, 

 wenn sie in sehr verdünnten Lösungen von basischen Farbstoffen 

 suspendiert werden, die Farbstoffe an sich ziehen. 



Dies ist jedenfalls ein bemerkenswertes Resultat. Docli gibt 

 Overton selbst an , daß er nicht zu erklären weiß , wie es kommt, 

 daß sich in Nervenfäden zwar die Achsenzylinder, nicht aber das 

 Mark, welches doch soviel Protagon enthält, mit Methylenblau färben. 

 Auch dafür bleibt die Erklärung aus, wieso das Methylenblau, welches 

 doch in lebende Zellen leicht eindringt, daselbst keine kräftige 

 Färbung entfaltet. 



Dem habe ich noch hinzuzufügen , daß auch die intravitalen 



1) Jahrb. f. wiss. Botanik. XXXIV. 1900. 




96 Rüzicka: Zur Theorie der vitalen Färbung. XXII, 1. 



Kernfärbungeu auf Grund der Annahme Overtons nicht erklärt 

 werden können 5 einmal treten sie ein, das andere Mal nicht , auch 

 kann die einmal erzielte Kernfärbung wieder zurückgehen, um ent- 

 weder nie mehr oder später wieder von neuem aufzutreten. Kann 

 da auch ein Cholesterin etc. - Gehalt zur Erklärung herangezogen 

 werden und selbst wenn man einen Wechsel desselben annimmt? 



Es scheint also, daß die Erklärung Overtons auf allgemeine 

 Gültigkeit keinen Anspruch erheben kann. 



Damit will ich jedoch keineswegs bestreiten, daß die Proto- 

 plasmasubstanzen den Farbstotfen gegenüber ein großes Lösungs- 

 vermögen zutage legen können. Es geht dies ja aus meinen eigenen 

 Versuchen, bei welchen Neutralrotfärbungen lebender Zellen fast 

 momentan vollendet wurden, klar hervor. 



Wollte man jedoch das Resultat meiner vital-letalen Färbung 

 nach dem Muster von Overton bloß auf das Teilungspriuzip zurück- 

 führen, so würde man auf unüberwindliche Schwierigkeiten stoßen. 



Man könnte durch dasselbe wohl vielleicht die singulären Fär- 

 bungen erklären. Wollte man aber das Ergebnis der Färbung mit 

 meinem Gemische durch das Teilungsprinzip erklären, so müßte man 

 vorerst eine Deutung für die Tatsache finden^ daß durch Anwendung 

 meines Gemisches die lebende Zelle nur rot, die tote nur blau ge- 

 färbt wird, wobei im letzteren Falle die ganze Farblösung abgefärbt 

 erscheint. Ist es etAva zulässig, die Annahme aufzustellen, daß die 

 lebende Substanz nur für das Neutralrot, die tote nur für das Me- 

 thylenblau Lösungsvermögen aufweist ? Selbst wenn wir keinen andern 

 naheliegenden Einwurf berücksichtigen würden, so wäre zu bedenken, 

 daß bei dieser Annahme der SchlußefFekt der Färbung sich in vio- 

 letter Mischtinktion kundgeben müßte, was jedoch nicht der Fall ist. 



Ich möchte an dieser Stelle auch eines schönen Versuches Er- 

 wähnung tun, der auf Hamburgers^ Veranlassung von Versteeg 

 und DE Vries ausgeführt worden ist. Durch Vergleichung der Ge- 

 frierpunkterniedriguugen einer Farbstotf- und einer Eiweißlösung mit 

 derjenigen eines Gemisches der beiden konnte eruiert werden, daß 

 das Neutralrot mit dem toten Eiweiß keine chemische Verbindung 

 eingeht, während das Methylenblau eine solche bildet. 



1) Osmotischer Druck etc. Bd. III (St. 423, Anmerkung). Dieser Ver- 

 such war mir, wie ich ausdrücklich konstatiere, zurzeit der Ausarbeitung 

 meiner eigenen Versuche noch nicht bekannt und bringe ich ihn erst hier 

 mit den letzteren in Beziehung. 




XXII, 1. Riizicka: Zur Theorie der vitalen Färbung. 97 



Dieses Ergebnis kann mit meinen Versuchsresultaten in guten 

 Einklang gebracht werden. 



Ich habe durch Versuche, in welchen ich ganz geringe Quanti- 

 täten Farbstoff mit lebenden Zellen in Berührung brachte , zeigen 

 können, daß Zellen, welche das Neutralrot intra vitam aufgenommen 

 Laben, postmortal diese Färbung abgaben, während Zellen, welche 

 intra vitam das Methylenblau nicht aufgenommen haben, sich post 

 mortem mit demselben färbten. 



Dieses Resultat wäre im Hinblick auf den obigen Versuch 

 Hamburgers dahinaufzufassen, daß in der letzteren postmortalen 

 Methy len blaufärb ung eine chemische Färbung vor- 

 liegt. Durch diese Annahme erklärt sich, warum in den Färbe- 

 versuchen mit meinem Geraische nie eine postmortale Neutralrotfärbung 

 zustande kam , obwohl das Gemisch äquimolekular war. Die intra- 

 vitale Abfärbung des Methylenblaus ist ja auch nicht anders auf- 

 zufassen, als ein chemischer Vorgang. 



Es handelt sich nunmehr noch darum, den Charakter der vitalen 

 Neutralrotfärbung zu beleuchten. Aus Hamburgers Versuche geht 

 hervor , daß bei der Neutralrotfärbung des toten Eiweißes keine 

 chemische Verbindung zustande kommt. Die Färbung muß also durch 

 physikalische Vorgänge von statten gegangen sein. Dies lassen meine 

 Versuche sehr scharf sehen. Eine während des Lebens durch Neutral- 

 rot gefärbte Zelle entfärbt sich, während sie abstirbt. Doch tritt diese 

 Entfärbung, meinen Versuchen gemäß, nur dann ein, wenn man 

 nicht eine relativ zu gr oß e F ar b s 1 ff menge verwendet 

 h a t. Färbt man jn einem relativen Überschusse des Farbstoffes, so 

 tritt bei singulärer Färbung auch eine Neutralrottinktion der toten Zellen 

 ein. Die Abfärbung tritt dann selbst vorübergehend nicht in Sicht. 



Färbt man lebende Zellen in einem relativen Überschusse von 

 Methylenblau, so erzwingt man in analoger Weise eine Färbung, 

 doch ist diese Färbung in ihrem Wesen eine physikalische ; denn 

 benützt man relativ wenig Farbstoff, so kommt es zu einer Methylen- 

 blaufärbung erst nach dem Absterben der Zelle. 



Es ist also klar, daß bei der P^ärbung mit meinem 

 Gemische das elektive Resultat nur auf chemischen 

 Vorgängen beruhen kann. Beide Farbstoffe sind in meinem 

 Gemische in relativem Überschusse vorhanden. Während bei singu- 

 lärer Färbung unter solchen Umständen eine physikalische Tinktion 

 eintritt, führt die simultane Doppelfärbung mit dem äquimolekularea 

 Gemische zum Ausdrucke der chemischen Vorgänge, 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 1. 7 " 




98 Ruzicka: Zur Theorie der vitalen Färbung. XXII, 1. 



Dies wird durcli Aveitere von mir ausgeführte Versuche und 

 Beobachtungen bekräftigt, welche den Beweis liefern, daß die beiden 

 Farbstoffe in der Zelle gleichzeitig vorhanden sind. 



Darauf weisen die nachfolgenden Beobachtungen hin. Der mittel- 

 ständige Kern ist oft das erste , was sich in einer sonst nur von 

 dem roten Farbstoff gefärbten Zelle blau tingiert ; die in den Nahrungs- 

 vakuolen sonst gänzlich rot gefärbter Amöben enthaltenen Bakterien 

 sind blau ; ein rot gefärbtes Infusorium zeigte , von einem andern 

 gleichfalls rot gefärbten verschlungen, augenblicklichen Wechsel der 

 Färbung ins Blaue ; inmitten rot gefärbter Granula erscheinen blau 

 tingierte. Die Farblösung entfärbt sich, so daß bei Schluß des Ver- 

 suches (d. h. nachdem die Zellen abgestorben sind) sich soAvohl der 

 rote , als auch der blaue Farbstoff in den gefärbten Objekten be- 

 finden muß. 



Bewiesen wird die gleichzeitige Gegenwart beider Farbstoffe in 

 der Zelle durch Zusatz von Wasserstoffsuperoxyd. Durch Oxyda- 

 tion des zweiten, in der Zelle enthaltenen, jedoch nicht sichtbaren 

 Farbstoffes — der mit dem sichtbaren komplementär ist — tritt sodann 

 in den Zellen violette Mischfärbung auf. 



Somit kann als bewiesen gelten, daß bei Anwen- 

 dung meines Geraisches in der lebenden Zelle das 

 Methylenblau, in der toten das N e u t r a 1 r o t zwar ent- 

 halten, jedoch durch die chemischen Einflüsse des 

 Protoplasmas unsichtbar gemacht worden sind. Wie 

 aus meinen Versuchen hervorgeht , beruht diese Einwirkung des 

 Protoplasmas auf seinen reduzierenden Eigenschaften. 



Bezüglich meiner weiteren biologischen Ausführungen muß ich 

 auf meine eingangs zitierte Arbeit hinweisen. An diesem Orte wollte 

 ich nur jene Resultate hervorheben, welche sich auf die Theorie der 

 vitalen histologischen Färbung beziehen und zum ersten Male zeigen, 

 daß die Neutralrotfärbung der lebenden Zelle ein 

 chemischer Vorgang ist, a\- ä h r e n d die Methylenblau- 

 f ä r b u n g der lebenden Zelle zwar ein vitales Phäno- 

 men ist, aber auf physikalischer Grundlage beruht. 



[Eingegangen am 28. Februar 1905.] 




XXII, 1. Cristina: Nouvo metodo per attaccare i tagli fatti da pezzi, 99 



Nuovo metodo j^er attaccare i tagli fatti da 

 pezzi inclusi in celloidina. 



Per il 



Dr. Di Cristina. 



Dato clie con le nuove manipolazioni proposte da Apathy, si 

 possono ottenere sezioni sottillissime a cominciare da tre /*, si preseiita 

 di nuovo la questione deirappicicatura dei tagli. Due gravi incove- 

 nienti presenta adesso l'inclusione in celloidina : 1^ Che alcuni organi 

 come intestiuo , stomaco in sezioni sottili non resistono alle mani- 

 polazioni di colorazione , disidratazione guastandosi. 2^ Le sezioni 

 in celloidina non attaccate al portaoggetti , non possono essere disi- 

 dratate convenieutemente , perclie la celloidina negli alcool forti si 

 discioglie, rovinando cosi' le sezioni, — 



Ho cercato di ovviare a questo inconveniente servendomi di un 

 metodo semplicissimo di appicciatiira dei tagli sul vetrino portaoggetti. 

 Questo metodo permette ancbe la preparazione dei tagli in Serie in 

 modo semplicissimo. II procedimento e il segueute : Le sezioni fatte 

 se sono giä colorate in massa vengono trasportate in acool a 94*^ 

 perö devono qui soggiornare il meno possibile, se non sono colorate 

 possono essere colorate prima di attaccarle, e come ultimo vanno 

 trasportate in alcool a 94°, qui semplicemente devono restare un 

 tempo brevissimo. 



Si preparano prima dei vetrini portaoggetti, su cui si spalma 

 uno Strato di alburaina glicerinata cosi composta: 



Albumina d'uovo parti 5, Glicerina neutra parti la. 



Con una striscia di carta bibula introdotta nella vascbetta con- 

 tenente le sezioni, si cerca di prendere le sezioni in modo perö che 

 esse vengono distese sulla carta senza far pieghe. Quindi si tira 

 la carta per un estremo facendo in modo che le sezioni vi rimangano 

 attaccate. Questa striscia di carta si adaggia dal lato ove stanno 

 distese le sezioni, sul vetrino portaoggetti gia spalmato di albumina, 

 sü di essa si adaggiano altre striscie asciutte e si preme un pö col 

 palmo delle dita fiuche i tagli restano distesi. — Per l'azione coagu- 




100 Fischer: Sperrvorrichtung für mikroskup. Demonstrationen. XXII, 1, 



lante dell'alcool suiralbumiua i tagli restano appicciiiati solidameute. 

 — I tagli cosi trattati possono essere sottoposti a tutte le mani- 

 polazioni, ed infine se ne piio alloutauare la celloidiua coiralcool assoluto 

 senza che 11 preparato sublsca delle alterazlonl. — Le sezioni attaccate 

 vanuo trasportate subito in alcool assoluto. 81 deve perö badare 

 che l'albumlna glicerinata conteuga molta albumina, polche se pre- 

 domina nella soluzlone in suo luogo la gllcerina, 11 metodo nun rlesce. 



Berlin, 26. März 1905. 



[Eingegangen am 29. März 1905.] 



Eine Sperrvorrichtung für mikroskopische 

 Dem onstrationen. 



Von 



Alfred Fischer 



in Basel. 



Hierzu zwei Holzschnitte. 



Jeder, der mikroskopische Präparate zu demonstrieren hat, 

 kennt den Übelstaud, daß Unerfahrene die Mikrometerschraube nicht 

 sachgemäß benutzen und auch gelegentlich den groben Trieb miß- 

 brauchen. Die Einstellung wird gestört, die Präparate werden 

 zerquetscht. 



Auf der Städteausstellung 1903 in Dresden war eine große 

 Zahl Mikroskope aufgestellt, mit denen jedermann Bakterienpräpa- 

 rate , die durch besondere Vorkehrungen an den Mikroskopen völlig 

 geschützt waren, betrachten konnte. Jeder neu Hinzutretende konnte 

 sich mit der partiell gesperrten Mikrometerschraube das Bild selbst 

 wieder einstellen. Die dort verwendeten Einrichtungen, die für 

 wissenschaftliche Demonstrationen zu kostspielig und zum Teil über- 

 flüssig sein würden , erweckten in mir den Wunsch , auf einfachere 

 Weise dem allbekannten Übelstande abzuhelfen. Mit Avesentlicher 

 Unterstützung des Herrn Mechaniker Dijrrenberger in Basel habe 




XXII, 1. Fischer: Sperrvorrichtung für mikroskop. Demonstrationen. lOl 



ich eine solche Einrichtung für ein größeres Stativ, etwa Zeiss No. Ja, 

 zusammengestellt. 



Auf wohlfeile Art kann man die grobe Einstellung durch Kapseln 

 aus steifem Karton verdecken. Figur 1 zeigt eine elegantere Ein- 

 richtung, die eine Verkoppelung und Vereinfachung der von Zeiss 

 gelieferten Schutzhülsen für die grobe Schraube ist. Diese Zeiss sehen 

 Hülsen müssen in zweimal 2 besondern Handgriffen über die beiden 

 Schraubenknöpfe geschoben werden. Jede dieser Hülsen besteht 

 aus zwei ineinander passenden Ringen: man muß erst den einen 



1. 2. 



In einer Photographie des montierten Mikroskopes sind die beiden Teile 

 der Schutzeinrichtung nachträglich schärfer hervorgehoben. Der herunter- 

 geklappte Sperrzeiger liegt zwischen dem rechts sichtbaren und dem vom 

 Schraubenkopf verdeckten dritten Stift. 



Figur 2 ist das einfachere Modell des Sperrzeigers, rechts und links sieht 



man die Federn. 

 (Photographiert und gezeichnet von Herrn Dr. Th. Frank.) 



Ring über den Knopf schieben und dann den zweiten Ring aufsetzen. 

 Da die beiden Ringe fest aufeinanderpassen müssen, damit die Hülse 

 gut zusammenhält, so geht dieses Aufsetzen der Hülsen keineswegs 

 schnell und auch nicht ohne Verschiebung der Einstellung vor sich. 

 Die gekoppelten Hülsen, die ich hier vorschlage, werden mit einem 




102 Fischer: Sperrvorrichtung für mikroskop. Demonstrationen. XXII, 1. 



einzigen Griff aufgesetzt und verdecken die Schraubenknöpfe so 

 vollständig (Fig. 1), daß nicht mehr daran gedreht Averden kann. 



Je nach der Form des Statives, der Ansatzhöhe des Triebes 

 und anderem wird die Verkoppelung der Hülsen verschieden vor- 

 zunehmen sein. Die Figur zeigt das Modell für ein ZEisssches 

 Stativ. An dem Schraubenknopf rechts hebt sich schwarz ein Metall- 

 ring von 4'4 cm Gresamtdurchmesser, ca. 3 cm im Lichten ab. Der 

 aus geschwärztem Messingblech hergestellte Ring ist etwa 7 mm breit 

 und trägt einen nicht den ganzen Umfjing einnehmenden 8 mm hohen 

 Aufsatz , der so angebracht ist , daß er etwa ^/., des Schrauben- 

 knopfes von oben verdeckt (Fig. 1 links und rechts). Diese beiden 

 Ringe sind durch einen Metallsteg , dessen Länge aus der Distanz 

 der Schraubenknöpfe sich ergibt, verkoppelt. Die Koppelung trägt 

 an der Tubusseite eine Rinne, deren Form genau dem Querschnitte 

 der Führungsleiste für die Triebstange entspricht und so weit ist, 

 daß bequem übergeschoben werden kann. Außerdem ist die Koppe- 

 lung in der Mitte , wo die Rinne eingeschnitten ist , nach abwärts 

 eingeknickt , damit sie auf dem kleinen Vorsprung des Statives 

 (Fig. 1) aufliegt. 



Für die Sperrung der Mikrometerschraube empfiehlt sich folgende 

 Einrichtung. Auf den Schraubenknopf (Fig. l) werden in gleichen 

 Abständen eine Anzahl, etwa 4 mm hoher Metallstifte, deren Distanz 

 durch die Feinheit der Schraube bedingt ist, eingesetzt. Wenn diese 

 bei einer Umdrehung ■'/^ mm leistet , so genügen 2 oder 3 solcher 

 Stifte, bei älteren Stativen mit gröberer Schraube 4 oder 5, je nach 

 Belieben. 



An jener Stelle des Statives, die den Zeiger für die Ablesung 

 der Schraube trägt, wird ein zurückklappbarer Zeiger eingesetzt, der 

 auf den Schraubenknopf heruntergeklappt zwischen den Stiften liegt 

 und die Drehung der Schraube nur so weit gestattet, bis er an 

 einen der Stifte anschlägt. Der Zeiger muß zwar etwas kräftiger 

 sein als der Ablesezeiger, kann aber doch noch so dünn bleiben, 

 daß er auch für nicht allzu feine Ablesungen verwendet werden kann. 



Für diesen Sperrzeiger sind zwei Modelle abgebildet. In Figur 1 

 wird der Zeiger mit dem Schräubchen rechts umgeklappt, mit dem 

 links festgestellt. Diese Einrichtung ist sehr zuverlässig und ge- 

 stattet dem Beobachter nicht, die Sicherung abzustellen. Das andere 

 Modell (Fig. 2) ist einfacher und genügt im allgemeinen. Der Zeiger 

 wird mit dem Schräubchen rechts herausgeklappt und durch zwei 

 Federn in dieser Stellung gehalten. Verwendet man diese einfachere 



1 

 I 




XXII, 1. Fischer: Sperrvorrichtung für lulkroskop. Demonstrationen. 103 



Siclierimg, so muß man allerdings die Hörer darum bitten, diesen 

 Zeiger nicht heraufzuklappen, sondern nur an der Mikrometerschraube 

 zu drehen, bis sie anstößt. 



Das Präparat wird wie üblich eingestellt, der Sperrzeiger herunter- 

 geklappt und die Sicherung für den groben Trieb aufgesetzt. Eine 

 kleine Aufmerksamkeit ist vorher notwendig. Sollte der Sperrzeiger 

 zu nahe an einen der Stifte herangekommen sein bei der Einstellung 

 mit normalsichtigem Auge, so würde für die beiden Extreme der 

 fehlerhaften Augen der Spielraum zu ungleich sein. Man achte darauf, 

 daß bei normaler Einstellung der Zeiger etwa in der Mitte zwischen 

 zwei Stiften steht. 



Ist dies nicht sogleich zufällig erreicht, so klappt man den Zeiger 

 wieder herauf, hebt mit der groben J^instellung den Tubus eine Spur, 

 stellt mit der Mikrometerschraube wieder genau ein und klappt den 

 Sperrzeiger wieder herunter. Vielleicht wird noch einmal diese 

 Nachhilfe zu wiederholen sein, bis der Zeiger die gewünschte Stellung 

 hat. Wer diese kleine Nachhilfe möglichst vermeiden will, der lasse 

 in den Knopf der feinen Mikrometerschraube mit ^/^ mm Umgang 

 nur zwei Stifte einsetzen. Aber selbst bei drei Stiften (Fig. 1) ist 

 diese kleine Einstellungskorrektur so einfach und für den geübten 

 Mikroskopiker so leicht, daß es kaum der Mühe lohnt, darüber zu 

 reden. Ich brauche seit einem Jahr dreistiftige Sicherungen ohne 

 jede Beschwerde. 



Sobald die Mikrometerschraube mit guter Mittellage des Sperr- 

 zeigers eingestellt ist, werden die gekoppelten Hülsen über den groben 

 Trieb geschoben und damit ist das Präparat völlig geschützt. Die 

 Mikrometerschraube kann weder zu hoch, noch zu tief, bis zum Zer- 

 quetschen des Präparates, gedreht werden, sondern bei drei Stiften 

 nur um ^^ Umgang, bei 2 um Vi »:ich auf- und abwärts. Jeder 

 neue Beobachter kann und muß innerhalb dieser Grenzen die scharfe 

 Einstellung des Präparates finden. 



Ich erwähne, daß die feinsten Bakterienpräparate ganz Ungeübten 

 so demonstriert werden können und daß einige Mikroskopiker, die 

 diese Schutzeinrichtung kennen lernten, sofort von deren Brauchbar- 

 keit überzeugt waren. 



Ich habe diese kleine Konstruktion vor einiger Zeit der Firma 

 Zeiss vorgelegt, die mit größter Bereitwilligkeit mir ihre eigenen 

 entsprechenden I^inrichtungen zur Ansicht schickte. Über die von 

 Zeiss gelieferten Hülsen für die Knöpfe des groben Triebes wurde 

 schon gesprochen, die Sperre für die Mikroraeterschraube muß über 




104 Arndt: Technik u. Methodik d. mikroskopischen Doppelsäge. XXII, 1. 



deren Knopf liinweggeschoben werden und ist nicht so bequem zu 

 handhaben wie die hier vorgeführte Zeigersperrung. 



Leider lehnte es die Firma Zeiss ab, mein Modell auszuführen. 

 Da ich von der Brauchbarkeit meines Vorschlages nach wie vor 

 überzeugt bin, so gebe ich die Einrichtung hiermit allgemein be- 

 kannt, in der Hoffnung, daß sie vielen Kollegen recht gute Dienste 

 leisten wird. Die Herstellung ist so einfach , daß jeder Feinmecha- 

 niker sie in kurzer Zeit ausführen kann. 



[Eingegangen am 2.5. Februar 1905.] 



[Aus dem pathologischen Institut der Universität (Obermedizinalrat Prof. 

 Dr. v. BoUinger) und der Prosektur des Krankenhauses rechts der Isar 



in München (Prof. Dr. Schmaus).] 



Beitrüge zur Technik und Methodik der mikro- 

 skopischen Doppelsäge. 



Von 



Dr. Georg Arndt 



Assistenzarzt an der Künigl. chirm-g. Klinik in Erlangen, ehem. Volontärassistent 



des Instituts. 



Hierzu 5 Holzschnitte. 



Nach der vor fast vier Jahren erfolgten Veröffentlichung meiner 

 Doppelsäge ^ ward mir erst spät die Gelegenheit zum weiteren Aus- 

 bau der Methode zu teil. Das möge erklären , weshalb in den 

 folgenden Beiträgen erst ein Teil von dem vorliegt, was als nächster 

 Programmpunkt gelten mußte , der allein der Verbesserung des In- 

 strumentariums und der Methodik gewidmet war. Die in der ersten 

 Arbeit niedergelegten Anweisungen für die Behandlung und den Ge- 

 brauch des inzwischen an zahlreichen Instituten eingeführten Instru- 



^) Präzisionssäge zur Herstellung mikroskopischer Präparate harter 

 Substanzen (Diese Zeitschr. Bd. XVIII, 1901, p. 146—159). 




XXII, 1. Arndt: Technik u. Methodik d. mikroskopischen Doppelsäge. 105 



ments haben sieb mir und anderen auch weiterhin, selbst bei der 

 Bearbeitung von anscheinend ungeeigneten Objekten bewährt. Es 

 sei aber betont, daß wie für jede andere mikroskopisch -technische 

 Methode, so auch für die Doppelsäge iintadelhafte Beschaffenheit des 

 Instruments und der Sägeblätter, sowie Vertrautheit mit den genannten 

 Vorschriften die natürliche Voraussetzung für ihre erfolgreiche An- 

 wendung bilden. 



a. Verlängerung der wirksamen Sägefläche. 



Für die Bearbeitung breiter und umfangreicher Objekte , be- 

 sonders aber auch für die Sicherheit und Schnelligkeit des Sägens 

 ist die Spannweite der Sägeblätter von erheblicher Bedeutung. Der 



freie Spannraum der Doppelsäge ist nun mit 6*5 cm für die wich- 

 tigsten Zwecke 'zwar hinreichend weit getroffen , doch können von 

 diesem Maße höchstens 4*5 cm benutzt werden , weil die Vorrich- 

 tungen, welche zum Einstellen des gegenseitigen Abstandes der Säge- 

 blätter herunterklappbar angebracht sind , an jeder Seite fast 1 cm 

 fortnehmen (cf. Fig. 1, Darstellung der Doppelsäge mit der alten 

 Stellvorrichtung) ; auch der verbleibende Raum ist nur mit der Vor- 

 sicht zu benutzen, daß beim Sägen die Stellschrauben A: nicht gegen 

 Objekt oder Schraubstock stoßen dürfen, soll nicht die genaue Ein- 

 stellung der Schnittdicke verloren gehen. 



Da die Spannweite für unsere Mailänder Metallsägen nur unter 

 der Gefahr vergrößert werden kann, daß ihre straffe Spannung, Ein- 

 stellung und Festigkeit Einbuße leidet, so konnte nur von der Ver- 

 änderung der Stellvorrichtung eine Ausnutzung der verfügbaren 

 Spannweite erhofft werden. Es wurden daher die Stellschrauben /i, 

 die bisher direkt auf die Sägeblätter wirkten, weiter nach oben 




106 Arndt: Technik u. Methodik d. mikroskopischen Doppelsäge. XXII, 1. 



verlegt und durch eine gelenkige Vorrichtung mit den Sägen in 

 Verbindung gesetzt, 



Figur 4 zeigt diese Vorrichtung in natürlicher Größe von vorn, 

 Figur 2 und 3 die damit ausgerüstete neue Säge von der Seite, 

 und zwar Figur 2 mit gebrauchsfertig heruntergeklappter , Figur 3 



mit hochgedrehter Stellvorrichtung, Die Buchstabenbezeichnungen 

 der vier ersten Figuren entsprechen einander. 



Die Stellschrauben k sind in Muttergewinden der Fortsätze f 

 (s. Fig, 2 u, 4) des Sägenteiles a gelagert — mit a sind die festen, 

 mit b die beweglichen Klemmbacken bezeichnet, welche, durch die 

 Schraube e zusammengepreßt, die Sägen c zwischen sich fassen. — 



m 



Durch Ftechtsdrehung der Stellschrauben k werden die bei jj mit- 

 einander gelenkig verbundenen Branchen /^ und /„ einer gut ver- 

 stählten zangenartigen Vorrichtung einander genähert und wirken 

 gleichzeitig distanzevermindernd auf die Sägen r?, c (in Fig. 4 im 

 Querschnitt getroffen), welche, wie beim alten Instrument, durch 

 dünne, innerhalb der Klemmbacken a und b zwischen den Säge- 

 blättern eingepreßte Stahlplatten in einem maximalen gegenseitigen 




XXII, 1. Arndt: Technik u. Methodik d. mikroskopischen Doppelsiige. io7 



Abstand gehalten werden. Um den hierdurch gesetzten Widerstand 

 gegen den Druck der Branchen zu verringern, ist jedes der beiden 

 Stahlplättclien an seinem vorderen Rande , entsprechend der Aus- 

 trittstelle der Sägeblätter, mit einer 2 mm' messenden Auskehlung 

 versehen worden. Da jede der Branchen ^^^ und /., kaum O'l cm 

 dick ist und dem Sägenteil a fest anliegt,^ so gehen von der Spann- 

 weite der Sägen insgesamt nur 0'2 cm verloren , es bleiben also 

 6*3 cm verfügbar. Als weiterer Vorzug gegenüber der alten Säge 

 kommt in Betracht, daß Stöße gegen die Branchen, wie sie beim 

 schnellen Sägen vorkommen , die Genauigkeit der 

 Einstellung nicht stören. Die neue Stellvorrichtung |, f 

 kann auch an der alten Säge angebracht werden. Der 

 Preis für diese Änderung stellt sich auf 10 Mark. 



b. Methodik. 



Die Beantwortung der in der ersten Veröffent- 

 lichung der Doppelsäge gestellten Frage , ob frische, 

 feuchte Objekte bessere Schnitte ergeben als trockene , habe ich, 

 außer an Wirbeltierknochen und -zahnen verschiedener Herkunft und 

 Vorbeliandlung, auch an pflanzlichen Hartgebilden geprüft, möchte 

 aber , bei dem verhältnismäßig geringen Umfang des letztgenannten 

 Materials, das folgende Urteil vorwiegend auf tierische Hartgebilde 

 beziehen. 



Die damals mitgeteilte vereinzelte Beobachtung, daß Präparate 

 von frischen, spongiösen Knochen weit besser gelangen als solche 

 von gleichartigen macerierten Objekten, ist auch später durch 

 zahlreiche vergleichende Versuche bestätigt worden. Das gleiche 

 gilt für die kompakte Knochensubstanz, während Zement und Dentin 

 keinen Unterschied , ob feucht oder trocken geschnitten , erkennen 

 ließen. Knochen, die in Sublimat, Formalin (10 Prozent) oder Alkohol 

 konserviert waren , boten gegenüber frischen Knochen keinen Unter- 

 schied. Röhrenknochen von Neugeborenen und fötale Knochen eines 

 Falles von sogenannter fötaler Rachitis , die "/^ bis 1 Jahr in For- 

 malin gelegen hatten , schienen mir aber an Konsistenz erheblich 



^) In Figur 2 sind die Stellvorrichtungen / nur der größeren Deut- 

 lichkeit halber mit einem gewissen Abstand vom übrigen Sägenkörper ge- 

 zeichnet worden. 




108 Arndt: Technik u. Methodik d. mikroskopischen Doppelsäge. XXII. 1. 



abgenommen zu haben und ließen weniger dünne Schnitte zu als im 

 frischen Zustande. Analog den Erfahrungen, die man an Kaiserling- 

 Präparaten mit dem Verschwinden von harnsauren Niederschlägen 

 in Organen gemacht hat/ dürfte in unserem Falle die aus dem 

 Formalin sich bildende Ameisensäure die Entkalkung und Kon- 

 sistenzverminderung der jungen Knochen bewirkt haben. Da es 

 Westenhoeffer durch Einbringen von Quecksilberoxyd (zwischen 

 Fließpapierscheiben am Boden des Gefäßes und in einem Stoffbeutel) 

 in das Gefäß mit der III. Kaiserling sehen Flüssigkeit gelungen ist, 

 die Bildung der Ameisensäure für lange Zeit unschädlich zu machen, 

 so empfiehlt sich dasselbe Vorgehen auch für die Konservierung von 

 Knochen in allen Fällen , wo die Aufbewahrung in Alkohol nicht 

 bevorzugt wird." Das Vergleichsmerkmal für die Beschaifenheit feucht 

 oder trocken gefertigter Präparate bot nicht die geringste erreich- 

 bare Schnittdicke allein, sondern gleichzeitig die Ausdehnung der 

 Schnitte und der Mangel an Artefakten. Im allgemeinen konnten 

 letztere , d. h. Sägerillen , Risse , Abreißungen feiner Bälkchen und 

 Lamellen, an feucht konservierten oder frischen Schnitten weit seltener 

 als an macerierten, trockenen in störendem Maße beobachtet werden. 

 Querschnitte z.B., die von macerierten langen Röhrenknochen oft 

 dünner als von frischen oder feucht konservierten Stücken zu er- 

 halten sind, stehen doch an Vollkommenheit hinter diesen zurück. 

 Längsschnitte lassen sich aus frischen oder feucht konservierten 

 Röhrenknochen stets mindestens ebenso dünn als von macerierten 

 herstellen. 



Für die Herstellung lebensfrischer Präparate, für die die 

 Schnelligkeit der Sägemethode besonders ins Gewicht fällt, zeigte es 

 sich zweckmäßig, die Schnittstelle und die Sägen während des Schnei- 

 dens fortwährend von physiologischer Kochsalzlösung berieseln zu 

 lassen, einerseits, um die Austrocknung des dünnen Präparatblättchens 

 zu verhüten, anderseits, um die Sägeblätter, die sich sonst erhitzen 

 würden, ständig kühl und leicht gleitend zu erhalten. Die Temperatur- 

 erhöhung der Sägen • — ■ für die übrigens meines Erachtens neben der 

 äußeren noch die innere, aus den Zug- und Druckbeanspruchungen der 

 Sägeblätter und ihrer Zähne hervorgehende Reibung in Betracht kommt 

 — kann den vitalen Zustand des Gewebes verändern, aber auch durch 



*) Westenhoeffer, Salkowski- Festschrift, Berlin 1904. 

 -) „Sehr schön werden auch Knochen konserviert, besonders Rachitis 

 und Syphihs." Westenhoeffer, 1. c. 




XXII, 1. Arndt: Technik u. Methodik d. mikroskopischen Doppelsäge. 109 



ererhöhte Quelhing der nächsten Umgebung der Sägen die Arbeit des 

 Sägens selber erschweren. Letzteres habe ich an feucht konser- 

 vierten Knoclien und botanischen Objekten auch dadurcli verhindern 

 können , daß ich während des Sägens Glyzerin mit einem Pinsel 

 nicht zu sparsam auf die Schnittstelle tropfen ließ. Bespülung der 

 Schnittfläche mit reichlich Wasser oder der konservierenden Flüssig- 

 keit scheint dem Schneiden unter Glyzerin gleich zu kommen.-^ Zum 

 Auffangen der Flüssigkeit genügt ein zwischen die Wangen des 

 Schraubstocks gestecktes Tuch , welches gleichzeitig zur Ableitung 

 in ein am Boden stehendes Gefäß dient. Ist das Objekt in der 

 unten beschriebenen Schraubkluppe (Fig. 5) fixiert, so findet die 

 Flüssigkeit in dem Kasten a^^ der nicht, wie auf der Abbildung, 



von dem Holzblock g völlig ausgefüllt wird , Raum zum Sammeln 

 und fließt durch ein Loch in der Stirnwand des Kastens und den 

 Rohrstutzen A:, der zweckmäßig einen Gummischlauch als Fortsetzung 

 erhält, ab. Da es beim Sägen von Vorteil ist, die Finger der linken 

 Hand gegen das Objekt oder den Schraubstock zu stützen , sei es, 

 um Vibrationen des ersteren zu dämpfen oder die Schnittführung 

 sicherer zu gestalten, so ist für die Berieselung der Schnittstelle ent- 

 weder Assistenz nötig oder eine der einfachen Vorrichtungen, wie 

 sie zur Bespülung des Mikrotommessers beim Schneiden von Celloidin- 



^) Daß die Sägeblätter nach jedem Gebrauche gereinigt werden 

 müssen, gilt, des Röstens wegen, besonders für Formalinschnitte: man 

 reinigt die Sägen am besten im gespannten Zustande mit einem Wasser- 

 pinsel und trocknet sie durch Zwischenziehen eines Streifens Fließpapier. 




110 Arndt: Technik u. Methodik d. mikroskopischen Doppelsäge. XXII, 1. 



stücken zahlreich angegeben , entweder kontinuierlich oder durch 

 Druck auf einen Gummiball (vom Fuß) zu betätigen sind. 



Wer die Doppelsäge oft benutzt, empfindet die Berieselung auch 

 als sicheren Schutz gegen die Einatmung des Sägestaubes wohltätig. 

 Aus diesem Grunde , dann aber auch , um die Brüchigkeit der ent- 

 stehenden Präparatblättchen zu mindern und die Gleitfähigkeit der 

 Sägeblätter zu erhöhen , empfahl es sich , auch trockene und mace- 

 rierte Gewebe , besonders wieder Knochen , mit Glyzerin oder nicht 

 zu dünnem Zedernöl an der Schnittstelle zu tränken. Meistenteils 

 verdiente das Sägen mit „Schmierung" den Vorzug, es ging leichter, 

 ohne Staubentwicklung von statten und behütete zweifellos manches 

 Präparat vor dem vorzeitigen Ablösen. 



Für die Herauslösung des fertig gesägten Blättchens war in 

 der ersten Veröffentlichung die Wahl gelassen worden , es entweder 

 so abzulösen, „wie man es mit Doppelmesserschnitten zu tun pflegt, 

 indem man das Instrument etwas nach links und rechts herüber 

 biegt, während man einige Sägebewegungen ausführt", oder so, daß 

 man die Säge „vorsichtig heraushebt, mit dem Taschenmesser in 

 eine Schnittfurche eingeht und das Präparat an der Haftstelle ab- 

 knickt". Das erste der beiden Verfahren hat sich für Präparate 

 von zartem Gefüge als unzweckmäßig herausgestellt; nur dicke und 

 wenig umfangreiche Schnitte leiden keine Gefahr dabei. Statt eines 

 Taschenmessers bedient man sich beim zweiten Verfahren, besonders 

 dort , wo es sich um tief gehende Schnittfurcheu handelt , besser 

 eines dünnen, scharfen Skalpells ; ist der Schnitt an seiner Haftstelle 

 sehr dünn , so genügt auch ein dünner , aber kräftiger Metallspatel 

 zum Abknicken. 



Das Herausheben der Säge aus den Schnittfurchen kann bei 

 breiten , tiefen Schnitten Schwierigkeit macheu und zum Zerreißen 

 des Präparates führen; das läßt sich leicht dadurch verhüten, daß 

 man das ganze Stück samt der festsitzenden Säge aus dem Schraubstock 

 nimmt, und dann erst mit größerer Freiheit, die Säge heraus hebelt. 



Zum Einschluß des D au e r pr äp ar a t e s dient mir Canada- 

 balsam (sc. harter) nur für Präparate mit Lufteinschluß, die das 

 Verhalten der Knochenlacunen und ihrer Kanälchen zeigen sollen. 

 Da die wichtigste Vorbedingung für die Haltbarkeit der Präparate 

 ihre Trockenheit ist, so sei im Hinblick auf das oben empfohlene 

 Feuchtschneiden darauf hingewiesen, daß so hergestellte, an der Luft 

 getrocknete Schnitte in Canadabalsam nach längerer oder kürzerer 

 Zeit mehrfach trübe wurden; an Präparaten, die ^j.^ Stunde in 




XXII, 1. Arndt:" Technik u. Methodik d. mikroskopischen Doppelsäge, m 



absolutem Alkohol (im Brutschrank bei 37 "), dann kurze Zeit in 

 Äther zuiiTbracht hatten und nach dessen Verdunstung in flüssig ge- 

 machten Canadabalsam eingebracht worden waren, ist Trübung nicht 

 beobachtet worden. Zur Konservierung von Schnitten, die nicht so- 

 fort mikroskopiert werden sollen, ferner zum Studium von Struktur- 

 und Übersichtsbildern, Einschlüssen der knöchernen Hohlräume ist 

 der Grly zerineinschliiß an die erste Stelle zu setzen. Völlig säure- 

 freies Glyzerin dürfte im Handel kaum zu haben sein ; für die 

 Gefahrlosigkeit des sehr geringen Säuregehaltes spricht jedenfalls 

 der Umstand, daß zahlreiche Knochen- und Zahnpräparate, die ich 

 seit vier Jahren in Glyzerin eingeschlossen aufbewahre , keinerlei 

 Spuren von Säurewirkung zeigen. Schnitte von macerierten Knochen 

 werden vom Glyzerin weit schneller aufgehellt als solche von frischen 

 oder feucht konservierten. Dicke Übersichtspräparate der letzteren 

 Art können schneller aufgehellt werden, wenn man die Schnitte vom 

 Wasser (das Abpinseln des Sägemehls geschieht am besten unter 

 Wasser) nicht direkt in Glyzerin, sondern zunächst für einige Stunden 

 in eine Mischung von Wasser und Glyzerin zu gleichen Teilen bringt 

 und auch des weiteren, bis zum Verbringen in reines Glyzerin, den 

 Glyzerinanteil der Mischung nur allmählich steigen läßt. 



Was das Anwendungsgebiet der Doppelsäge betrifft , so 

 lag mir ihre Nutzbarmachung für das Gebiet der pathologischen 

 Anatomie besonders nahe. Hierbei zeigte sich, daß auch von solchen 

 Objekten, deren lockeres Gefüge die unmittelbare Bearbeitung auf 

 dem Schleifstein gänzlich ausschließt oder nur in beschränkter Größe 

 zuläßt, mit der Doppelsäge noch große Übersichtsschnitte gelangen. 

 Als Beispiel eines Objektes von ungleichartigem , teilweise lockerem 

 Gefüge können die Knochen des Schädeldaches dienen ; schneidet 

 man solche frischen oder feucht konservierten Schädelknocheu, deren 

 Markhypertrophie vermehrte Knochenbildung vortäuschte , so wird, 

 wer mit Vorsicht gesägt hatte, oft überrascht durch die Beobachtung, 

 daß selbst weitmaschige Netzwerke von feinsten Spongiosa-Bälkchen 

 meist erhalten geblieben sind. Auch von solchen pathologischen 

 01)jekten, bei denen eine Abnahme des Kalkgehaltes, wie bei osteo- 

 malacischen Knochen, oder eine hochgradige Auflockerung sämtlicher 

 Lamellensysteme, nebst Erweiterung und Deformierung der Havers- 

 schen Kanäle und ausgedehnte Volkmann sehe Kanalikulation im 

 Vordergrund standen, wie ich sie in einem Falle von Akromegalie^ 



^) Worüber an anderer Stelle berichtet werden soll. 




112 Arndt: Technik u. Methodik d. mikroskopischen Doppelsäge. XXII, 1. 



und — teilweise — an Sequestern osteomyelitischen Ursprungs reicH- 

 lich beobachten konnte, ließen sich unschwer instruktive Quer- und 

 Längsschnitte anfertigen. 



Zur Gewinnung e n t k a 1 k t e r Knochenpräparate war die Doppel- 

 säge mehrfach in denjenigen Fällen von Nutzen, wo eine beschleu- 

 nigte Untersuchung erwünscht war. Man schneidet bei hoch- 

 geklappter Stellvorrichtung Knochenplättchen von ca. 0*3 bis 0*5 mm 

 Dicke ; solche Plättchen sind leicht in großer Ausdehnung auch von 

 stark spongiösem Material zu gewinnen ; sie können in kurzer Frist 

 entkalkt und in Celloidin eingeschlossen oder gleich auf dem Gefrier- 

 mikrotom geschnitten werden. Ist für einen genau ebenen Einschluß 

 und richtige Orientierung gesorgt worden , so läßt sich immer eine 

 Anzahl feiner Mikrotomschnitte gewinnen, die in der üblichen Weise 

 weiter behandelt werden. 



c. Sehraubkluppe. 



Der Mangel an brauchbaren Vorrichtungen zur sicheren Be- 

 festigung sehr kleiner oder platter oder zarter Objekte zwecks Be- 

 arbeitung mit der Doppelsäge machte mir die Konstruierung eines 

 Hilfsmittels nötig, das technisch zur Gruppe der „Kluppen" gerechnet 

 werden kann, seiner Form nach aber sich weit von ihnen entfernt 

 und daher besonders beschrieben sei: 



p]in kräftiger schmiedeeiserner Arm a (Fig. 5) von 12 cm Länge 

 geht an dem einen Ende in den viereckigen länglichen Kasten a^ 

 über, an dessen Stirnwand das Abflußrohr k fs. o.) angebracht ist. 

 Der Innenraum des Kastens wird größtenteils von dem aus weichem 

 Holz gefertigten Holzblock g eingenommen, dessen rauher Querschnitt 

 horizontal liegt und den oberen Kastenrand um 0'5 cm überragt. 

 Die auf der anderen, auf der Figur nicht sichtbaren Seitenfläche des 

 Kastens angebrachte , punktiert gezeichnete Schraube h dient zur 

 Befestigung des Blockes. Der vom Boden des Kastens ausgehende 

 Fortsatz f kann in Schraubstöcke beliebiger Art und Größe horizontal 

 eingespannt werden. Das andere Ende des Armes a ist durch ein 

 Scharniergelenk c mit dem beweglichen Arm h verbunden, der durch 

 eine mit breitem, kräftigem Flügelgriff versehene Schraube e, ent- 

 gegen dem Widerstand einer Feder d^ dem festen Arm a genähert 

 werden kann. Das freie Ende des Armes b reicht bis zur Mitte des 

 Blockes g^ ist abgeplattet, stark verbreitert und an seiner Unterfläche 




XXII, 1. Arndt: Technik u. Methodik d. mikroskopischen Doppelsäge. 113 



gezähnt. Die Zahniuig verhindert auch ohne Anwendung starken 

 Druckes, daß ein zwischen b und den Holzblock g festgespanntes 

 Objekt / beim Sägen (die Schnittstelle ist durch einen Pfeil ange- 

 deutet) seitlich ausweicht. Der Holzblock kann natürlich beliebige 

 Form erhalten, am einfachsten lassen sich weiche Celloi'dinklötze zu- 

 stutzen ; für Schnitte von schmalen, rundlichen oder hochkantigen 

 Objekten, z. B. Querschnitte von jugendlichen Röhrenknochen, wurde 

 der Holzblock mit einer längs, in der Ebene der Zeichnung, ver- 

 laufenden Rinne versehen, in der das Objekt mit großer Sicher- 

 heit und Schonung gegen seitliche Verschiebung durch den Arm b 

 festgehalten wird. Die Holzunterlage gestattet, was besonders 

 an Querschnitten von platten Objekten , z. B. Knochenplatten der 

 Dura mater , angenehm empfunden wird , auch die untersten 

 Schichten des Objekts mit in den Bereich des Schnittes zu ziehen; 

 der Holzblock wird dabei zwar mitgeschnitten , schädigt aber die 

 Sägen nicht. 



Herstellung und Vertrieb der neuen Doppelsäge und Schraub- 

 kluppe erfolgt wie bisher durch die Fabrik chirurgischer Instrumente 

 von J. Thamm in Berlin NW., Karlstraße 14. 



[Eingegangen am 17. Februar 1905.] 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII. 1. 




]^14 Metz: Die Leitzsclie Dunkelfeldbeleuchtung. XXII, 1. 



Die Leitzsche Dunkelfeldbeleuchtung 

 bei Verwendung der homogenen Olimmersion. 



Von 



Carl Metz 



in Wetzlar. 



Hierzu vier Holzschnitte. 



Nach der Einführung eines Beleuchtimgsapparates am Mikroskop, 

 bestehend aus Spiegel und Kondensorlinsen, welchen wir den Eng- 

 ländern WoLLASTON, GoRiNG lind Brewster verdanken, findet sich 

 schon eine von Reade um 1837 angegebene Einrichtung für Dunkel- 

 feldbeleuchtung erwähnt (s. Hakting-Theile, Das Mikroskop, 2. Aufl., 

 I, p. 245). Eine Reihe von Vorrichtungen zur Erzielung der Dunkelfeld- 

 beleuchtung findet sich in der Folge erwähnt. Am meisten führten sich 

 die Zentralblenden ein. Es wird durch diese bekanntlich der zentrale 

 Teil des Kondensors bis zur Öff"nung des Objektives abgeblendet 

 und die Beleuchtung durch die Randstrahlen des Kondensors, deren 

 Apertur höher ist als die des Objektives, bewirkt. Ein Eindringen 

 der direkten Lichtstrahlen in den Bildraum bleibt dadurch aus- 

 geschlossen. Diese Blendung war zulässig, solange man nur mit 

 Trockensystemen arbeitete , deren Apertur wesentlich kleiner ist als 

 die des Kondensors. Anders verhält es sich , wenn man sich der 

 Olimmersion bedient. Die Apertur dieses Objektives und die des 

 gebräuchlichen Kondensors ist gleich. Es bieten sich zwei Wege, 

 eine Dunkelfeldbeleuchtung bei Anwendung der Olimmersion zu er- 

 zielen. Entweder benutzt man einen Kondensor von erheblich höherer 

 Apertur als 1*30 und blendet die zentralen Lichtbündel bis zu der 

 Apertur der Immersion ab, oder man verzichtet auf einen Teil der 

 Oifnung der Immersion und benutzt die ausgeschaltete Apertur des 

 Objektivs zur Beleuchtung. Es lassen sich hierzu zwei Wege ein- 

 schlagen: man benutzt die höhere Apertur zur Beleuchtung und 

 bedient sich des inneren zentralen Lichtkegels zur Beobachtung 

 (s. diese Zeitschr. Bd. XV, 1898, p. 289 ft'.), oder man beleuchtet 




XXII, 1. 



Metz: Die Leitzsche Dunkelfeldbeleuchtuni?. 



115 



mit einem inneren Lichtkegel und schaltet ihn bei der Beobachtung 

 aus. In dieser Weise ist die hier mitgeteilte, in der optischen Werk- 

 stätte von E. Leitz in Wetzlar ausgeführte , Einrichtung zustande 

 gekommen. 



Da das Licht der Sonne oder einer Bogenlampe von nicht unter 

 8 Ampere Stärke zur Verwendung vorgesehen ist, so kann der innere 

 Beleuchtungskegel dünn werden : eine starke Abbiendung des Objek- 

 tives und ein größerer Verlust an auflösender Kraft wird dadurch 

 nach Möglichkeit vermieden. 



Den einen Bestandteil der neuen Duukelfeldeinrichtung bildet 

 der eigene Beleuchtungsapparat (s. Fig. 1), welcher an Stelle des 



1. 



Dunkelfeld-Beleuchtungsapparat. 



2. 



Objektiv mit Stempelblende. 



gewöhnlichen Beleuchtungsapparates in dessen federnde Hülse unter 

 dem Mikroskop eingesteckt wird. 



Das Beleuchtungssystem ist eine achromatische Doppellinse von 

 9 mm Brennweite und 4 mm Öffnung, welche dem Üffnungswinkel 

 von 24^ entspricht. Die obere Planfläche des' Beleuchtungssystems 

 sitzt 7 mm unter der Objektebene , so daß letztere mit dem oberen 

 Brennpunkt des Beleuchtungssystems zusammenfällt. 



Unter dem Kondensor sitzt eine Blendscheibe mit den Blenden- 

 öffnungen von 0'5, 1*0, 1*5 und 2"0 mm. Nach der Wahl dieser 

 Öft'nungeu beträgt der Öffnungswinkel des Beleuchtungskegels 6, 12, 

 18 und 24 Grad. 



Durch eine Zentriervorrichtuug wird der Beleuchtungsapparat 

 genau auf die optische Achse eingestellt. 



8* 




116 



Metz: Die Leitzsche Dunkelfeldbeleuchtung, 



XXII. 1. 



Durch den Hohl- oder Planspiegel wird das Licht der Sonne 

 oder einer Bogenlampe dem Kondensor zugelenkt. 



Der zweite wesentliche Bestandteil der Dunkelfeldeinrichtung ist 

 die Blende (Fig. 2) , welche die Gestalt eines kleinen Stempels be- 

 sitzt und sich auf den zentralen Teil der hinteren Linse des Öl- 

 immersions-Systems aufsetzt. Dieser Stempel, dessen untere Fläche 

 einen Durchmesser von 1"75 mm besitzt, wird in der Achse eines 

 kleinen Zylinders mittels zwei über Kreuz laufender Drähtchen ge- 

 halten. Dieser Zylinder wird an Stelle des Objektivverbindungs- 

 stückes mit dem vernickelten die Linsen enthaltenden Teil des Ob- 

 jektives verschraubt. Die lose in der optischen Achse verschiebbare 

 Blende fällt beim Gebrauch von selbst, vermöge ihres Gewichts auf 

 die hintere Linsenverbindung des Objektives und schneidet allen 



Schematische Darstellung des Strahlenverlaufes in Blende und Objektiv. 



zentralen Bündeln bis zu einer (Jffnung von 38^ den Zutritt zum 

 Tubus und Bildraiim ab. Ein solches Bündel — in der schematischen 

 Darstellung (Fig. 3) durch die ausgezogenen Linien veranschaulicht 

 — dient also nur zur Beleuchtung des Objektes. 



Die bilderzeugenden Strahlenbündel, welche von dem grell be- 

 leuchteten Objekt ausgehen — in Figur 3 durch punktierte Linien 

 bezeichnet — besitzen die ()ffnungswinkel 38 bis 120", denen die 

 num. Aper. 0"5 bis 1*30 entsprechen. 



Nicht allzu schwierig läßt sich bei richtiger Handhabung des 

 Apparates das von störenden Lichtreflexen freie dunkle Gesichts- 

 feld erzielen. 



Der scharfe Kontrast zwischen dunkelem Feld und grell leuch- 

 tendem Bilde läßt noch Objekte hervortreten, welche bei gewöhnlicher 




XXII, 1. Metz: Die Leitzsche Dunkelfeldbeleuchtung. 117 



Beleuchtung dem Auge entgehen. Es kann deshalb diese Dunkel- 

 feldeinrichtung, welche der von Siedentopf und Zsigmondy (Annal. 

 der Physik X, 1903, p. 1 — 39) angegebenen Methode verwandt ist, 

 auch zur Erforschung ultramikroskopischer Teilchen vorteilhaft heran- 

 gezogen werden. Auch sonst unsichtbare ungefärbte Bakterien 

 lassen sich durch diese Einriclitung zur Wahrnehmung bringen. 



Zur Untersuchung ultramikroskopischer Teilchen in Flüssigkeiten, 

 z. B. in Gold- und Silberlösungen, dient eine Kammer, welche Figur 4 

 im Querschnitt zeigt. Die Einrichtung der Kammer ist folgende: 



In einer Messingplatte ist eine zylindrische Vertiefung aus- 

 gedreht. Den Boden dieser Kammer, deren Mitte durchbohrt ist, 

 deckt eine Glasplatte. Die Mitte der Glasplatte bildet eine kreis- 

 runde Erhöhung, deren plane und mit der Bodenfläche parallele Ober- 

 fläche etwa 1 mm die Bodenfläche überragt. Zwischen diesem inneren 

 zylindrischen Glaskörper und der Kammerwand ist eine Rinne ge- 



T 



-IJ 



J 



I 1 ,.__ V WflB^:^ : I 



j 



4. 

 Kaminer zur Untersuchung von Flüssigkeiten, 



bildet. Das dünne Deckglas von 18 mm Durchmesser, welches zur 

 Bedeckung der -Kammer dient, ist an der unteren Seite eines Ringes, 

 der sich auf die Metallkamraer aufschraubt, mit einer Gummidichtung 

 aufgesetzt. Das verschraubte Deckglas sitzt so auf dem oberen, etwas 

 über der Oberfläche des Glaszylinders erhöhten Metallrand der Kammer, 

 daß zwischen der Unterfläche des Deckglases und der Oberfläche des 

 Glaszylinders sich ein 0"08 mm hoher Raum bildet, der mit der 

 Rinne in Verbindung steht. Von dieser führen zwei Öffnungen, durch 

 welche die zu untersuchende Flüssigkeit zu- und abströmt, nach außen. 

 In dem von dem Dunkelfeldkondensor beleuchteten schmalen Raum 

 zwischen Deckglas und Glaszylinder wird die Untersuchung vor- 

 genommen. 



Es treten bei der Beobachtung mit der beschriebenen Dunkel- 

 feldbeleuchtung, wie überhaupt bei Anwendung von Duukelfeldbeleuch- 

 tung, leicht stark störende Beugungserscheinungen hervor. 



Sie lassen sich durch eine passende Wahl der Stelle des Prä- 




118 T r i e p e 1 : Ein Zylinder - Rotations - Mikrotom. XXII, 1, 



parates, in welcher die beleiicliteteu Objekte nicht zu sehr gehäuft 

 auftreten, durch eine günstige Einbettung der Objekte, durch richtige 

 Regulierung und Dämpfung des Lichtes vermindern. 



Gelingt es durch solche oder ähnliche Mittel Bilder zu erhalten, 

 in denen die sekundären Beugungsbilder gegen das primäre Bild 

 sehr deutlich zurücktreten und letzteres nicht verwirren, so könnte 

 dieser Beleuchtungseinrichtung, mit welcher man bei gewöhnlicher 

 Beleuchtung unsichtbare Objekte zu erkennen vermag, ein günstiges 

 Prognostikon für die Zukunft gestellt werden. 



[Eingegangen am 19. März 1905.] 



Ein Zylinder - Rotations - Mikrotom. 



Von 

 Hermaiin Triepel 



in Greifswald. 



Hierzu drei Holzschnitte. 



Bei den meisten der bisher konstruierten Mikrotome sind Schnitt- 

 ebene des Objektes und gleitende Flächen des Instrumentes so an- 

 geordnet, daß schon die geringste Abweichung von der exakten 

 Bewegung der Gleitflächen nicht unbeträchtliche Schwankungen der 

 erzielten Schnittdicke herbeiführen kann. So bedingt beispielsweise 

 bei Schlittenmikrotomen eine minimale Drehung des Messerschlittens, 

 wie sie leicht beim Schneiden schwieriger Objekte sich einstellt, 

 infolge von Hebelwirkung einen bedeutenden Ausschlag des freien 

 Messerendes. Der Übelstand wird besonders dann fühlbar, wenn 

 sich zwischen den aufeinander gleitenden Flächen eine Ölschicht be- 

 findet, da deren Form veränderlich ist. Die Dicke dieser Schicht 

 schwankt erheblich , sobald der auf ihr lastende Druck nur im ge- 

 ringsten Grade verändert wird. ^ 



1) Vgl. Heidenhain, M., Über die Schlittenbremse, eine Neukonstruk- 

 tion am Jung sehen Mikrotom zur Vermehrung der Stabilität der Schlitten- 

 führung (Diese Zeitschr. Bd. XVIII, 1901, p. 138). 




XXII, 1. 



Triepel: Ein Zylinder -Rotations -Mikrotom. 



119 



Ich glaube nun, daß bei dem Zylinder-Rotatious -Mikrotom, 

 das ich im folgenden beschreiben werde, der Einfluß der genannten 

 Fehlerquelle von vornherein durch das Prinzip ausgeschaltet ist, 

 das der Konstruktion des Instrumentes zugrunde gelegt wurde. Es 

 ist bei diesem nur eine einzige gleitende Fläche vorhanden , die so- 

 wohl bei der Hebung des Objektes , als auch bei der Herstellung 

 der Schnitte bewegt wird, so daß die unvermeidlichen Abweichungen 



1. 



von mathematisch-exaktem Gang auf einen einzigen Ort beschränkt 

 sind. Die Schnittebene des Objektes ist nun senkrecht zur Glejt- 

 fläche orientiert, und etwa vorkommende ungewollte Verschiebungen 

 werden daher im wesentlichen nur Verlagerungen des Objektes 

 parallel zur Schnittebene, aber nicht senkrecht zu ihr veranlassen. 



Das Mikrotom ist nach meinen Angaben in der Werkstätte von 

 Gustav Miehe angefertigt worden. Einige Einzelheiten der Kon- 

 struktion wurden auf Anraten von Herrn F. Bode, des Inhabers der 

 Werkstätte, in den Plan übernommen. 




J20 Triepel: Ein Zylinder -Rotations -Mikrotom. XXII, 1. 



Figur 1 zeigt das Mikrotom in (nicht ganzj ^/^ der natür- 

 lichen Größe. 



Mit einer Grundplatte ist ein auf drei Füßen ruhender stark- 

 wandiger Hohlzyliuder von 107 mm äußerem Durchmesser fest ver- 

 banden. In ihm befindet sich ein zweiter Hohlzylinder, der aus 

 Stahl gefertigt ist, eine Höhe von 115 mm und einen äußeren Durch- 

 messer von 80 mm besitzt und am oberen und unteren Ende durch 

 eine Messingplatte verschlossen ist. Der unteren Verschlußplatte ist 

 noch ein kleines Plättchen aus gehärtetem Stahl aufgeschraubt, mit 

 dem der innere Zylinder auf der Mikrometerschraube steht. Die 

 Stahlkuppe der Schraube ist gleichfalls gehärtet. Im übrigen ist die 

 Hebungsvorrichtung die bekannte ; Drehung der Scheibe um die 

 Breite eines Zahnes bewirkt Hebung des Zylinders um 2 ^i. 



An der oberen Verschlußplatte des inneren Zylinders ist die 

 Objektklammer befestigt. Das Schneiden geschieht in der Weise, 

 daß der Zylinder mit dem Objekt gedreht wird, während das Messer 

 festgestellt ist. 



Von den weiteren Einrichtungen des Apparates sind zunächst 

 die beiden Kugellager zu erwähnen, in denen sich der innere Zylin- 

 der bewegt, und die am oberen und unteren Ende des festen Zylinders 

 angebracht sind. Figur 2 stellt in "j^ der natürlichen Größe einen 

 Schnitt durch das obere der beiden Lager dar. Es bedeutet hier 

 a den äußeren, b den inneren Zylinder, c und d sind zwei Stahl- 

 ringe , die in ein an der Innenseite von a gedrehtes Gewinde ein- 

 geschraubt sind. Die Ringe sind an der unteren, beziehungsweise 

 oberen inneren Kante abgeschrägt, und sie begrenzen zusammen mit 

 der äußeren Fläche des inneren Zylinders einen im Durchschnitt 

 dreiseitigen Kanal, der vollkommen mit Stahlkugeln von 4 mm Durch- 

 messer angefüllt ist. Beim Justieren des Instrumentes wird der 

 Ring c dem Ring d nach Möglichkeit genähert und darauf durch 

 die Kontremutter e in der Lage gesichert. 



Das Messer wird auf einem massiven vierseitigen, nach oben 

 z.u etwas verjüngten Prisma (s. Fig. 1) befestigt, das 23 cm hoch ist 

 und rechts von den Zylindern etwas hinter der horizontalen Mittel- 

 linie steht. Das Prisma trägt an seiner vorderen Seite das Lager, 

 in dem sicli die Achse der Kurbel dreht. Am linken Ende der 

 Achse befindet sich ein aus Hartgummi gefertigtes Zahnrad, und 

 dessen Zähne greifen in vertikal stehende Leisten ein, die an einem 

 den äußeren Zylinder kragenartig überragenden Vorsprung der oberen 

 Verschlußplatte des inneren Zylinders angebracht sind. Bei der 




XXII, 1. 



Triepel: Ein Zylinder -Rotations -Mikrotom. 



121 



durch die Kurbeldrehimg bewirkten Bewegung des Zylinders findet 

 eine Übersetzung von 2 : 1 statt. 



Der Objekthalter ist so eingerichtet, daß er einmal im ganzen 

 in verschiedene Entfernung von der Zylinderachse gebracht werden 

 kann. (Der Ort der gleitenden Fläche ist durch einen auf der 

 oberen Verschlußplatte eingeschnittenen Kreis bezeichnet.) Ferner 

 können an einem Kreuzstück Drehungen um zwei zueinander senk- 

 recht stehende horizontale Achsen ausgeführt werden, und der Stift 

 der Klammer läßt sich höher und tiefer stellen und um seine eigene 

 Achse drehen. 



Von den Maßen des Apparates ist noch bemerkenswert, daß 

 die Mittellinien der Kugellager um 74 mm voneinander entfei'nt sind 



3. 



und die Mitte des oberen Lagers von der durch das obere Ende 

 des Prismas gelegten llorizontalebene (die annähernd mit der Schnitt- 

 ebene zusammenfällt) um 96 mm absteht. 



Es erscheint geboten , daß man bei einem neukonstruierten 

 Mikrotom die G r i) ß e des übe r h a u p t möglichen Fehlers 

 zu ermitteln sucht und so über die theoretischen Erwägungen Rechen- 

 schaft gibt, die zu dem Bau des Instrumentes geführt haben. 



Bei dem beschriebenen Zylinder-Rotations-Mikrotom ist — sofern 

 man von einer Deformation der Metallteile absieht — eine Ab- 

 weichung vom mathematisch -exakten Gang nur dadurch möglich, 

 daß der innere Zylinder selbst bei der sorgfältigsten Justierung 

 noch minimale Drehungen um horizontal liegende Achsen ausführen 

 kann. Der Mittelpunkt dieser Drehungen kann in der Zylinderachse 




122 Triepel: Ein Zylinder -Rotations -Mikrotom. XXII, 1. 



und in halber Höhe zwischen den beiden Kngellagern angenommen 

 werden. 



Beträgt die Drehung des Zylinders um den Punkt M (s. Fig. 3) 

 den Winkel 99, so bewegt sich der Objektpunkt P nach P', d. h. 

 er senkt sich um //, wobei y den gesuchten möglichen Fehler be- 

 deutet. 



Nennt man r den Abstand des Punktes P von der Zyliuder- 

 achse , d seinen Abstand von il/, h seinen Abstand von der durch 

 M gelegten Horizontalebene , .s die Gerade PP' und )] und q die 

 in den gezeichneten rechtwinkligen Dreiecken den Seiten y bezw. r 

 gegenüber liegenden Winkel, und setzt man 



QP s 



'''' T = 2^ = ^'' 



cos —■ = /»•, 

 so ergibt sich 



y = s ' sin y = s ■ sin ^-^ -f q^ 

 = s I sin ^ cos Q -|- cos ^ sin ^1 



y = 2c ich -j- kr). 



Es folgt hieraus, daß der mögliche Fehler um so größer ist, je 

 größer r ist, d.h. der Abstand des Objektpunktes von der Zylinderachse. 

 Der Fehler wächst auch mit wachsendem Ä, aber in viel geringerem 



Grade, da bei den in Frage kommenden Werten von -^ jedenfalls 



c <C k- Ja, man kann, da -^ sehr klein ist, die Größe, in der c'^ 

 als Faktor auftritt, vernachlässigen und erhält somit näherungsweise 



y = 2 ckr = 2 sin -^ cos ^ r 



y = sin (p7\ 



Der mögliche Fehler ist also direkt proportional dem Sinus des 

 möglichen Neigungswinkels und dem Abstand des Objektes von der 

 Zylinderachse. 



Der Fehler würde = werden, wenn man r ^^ machte, d. h. 




XXII, 1. Triepel: Ein Zylinder-Rotations-Mikrotom. 123 



das Objekt in die Achse des Zylinders bräclite , wobei aber natür- 

 lich die Herstellung- von Schnitten ausgeschlossen wäre. 



Die Größe des Winkels cp hängt bei gleich guter Justierung 

 des Instrumentes von den Dimensionen der Zylinder ab, cp wird um 

 so kleiner, je weiter die beiden Kugellager voneinander und von 

 der Zylinderachse (Punkt M) abstehen. Aus technischen Gründen 

 ist man freilich genötigt, gewisse Maße der Konstruktionsteile nicht 

 zu überschreiten. 



Um eine Vorstellung von der Größe y zu gewinnen, kann mau 

 für cp willkürlich einen beliebigen kleinen Wert einsetzen. Es sei 

 beispielsweise cp = l', was bei den angegebenen Maßen des In- 

 strumentes einer seitlichen Verschiebung des inneren Zylinders in 

 der Höhe eines Kugellagers um fast genau 0*0 1 mm entspricht. 

 Dann berechnet sich 



Die berechneten möglichen Fehler sind zwar schon recht merklich, 

 indessen ist zu bedenken, daß sie doch bedeutend kleiner sind als 

 die Fehler, die bei Mikrotomen anderer Konstruktion sich einstellen 

 können, daß ferner der Wert des Winkels cp bei guter Justierung 



o 



wohl noch herabgedrückt werden kann, und daß endlich die an- 

 gegebenen Werte -von // nur für den ungünstigsten Fall Geltung 

 haben, während bei gut sclmeidbaren Objekten // für jedes r eo 

 ipso =^ oder doch nahezu =^ wird. 



Wenn nun auch der mögliche Fehler, wie angegeben, zugleich 

 mit dem Abstände /• von der Achse abnimmt, so erhält man doch 

 tatsächlich durchaus befriedigende Resultate, wenn mau bei einem 

 Abstände von 4 — 5 cm arbeitet, also dort, wo der Kreis in die 

 obere Verschlußplatte des inneren Zylinders eingeschnitten ist, oder 

 noch außerhalb von dieser Stelle. Man könnte meinen, es müsse 

 störend wirken, daß die Messerschneide nicht auf geradem, sondern 

 auf kreisförmig gebogenem Wege durch das Objekt geführt wird. 

 Das ist aber nicht der Fall. Wenn r zu klein genommen wird und 

 das (in Paraffin eingebettete) Objekt nicht entsprechend schmal ist, 

 kommt es vor, daß die Zusammenschiebun» des Schnittes — die 

 ja bei Paraffinobjekten nie ausbleibt — nicht in seiner ganzen Breite 




124 Triepel: Ein Zylinder -Rotations -Mikrotom. XXII, 1. 



gleiclimäßi,^^ ausfällt. Wählt mau r etwas größer, so treteu solche 

 DifFereuzen uicht mehr iu die Erscheiuuug, so daß das Mikrotom 

 u, a, auch bei der Herstellung- von Bändern gute Dienste leistet. 



Als weiteren Vorteil, den der Gebrauch des Mikrotoms mit sich 

 bringt, möchte ich es bezeichnen, daß man es nicht nötig hat, das 

 Objekt nach Anfertigung eines Schnittes vor der Herstellung des 

 nächsten wieder unter der Messerschneide zurückzuführen. Wenn 

 man dies vermeiden will, so braucht man nur die Kurbel immer in 

 demselben Sinne weiter zu drehen. 



Als Annehmlichkeit ist es wohl anzusehen, daß die Gleitflächen 

 vollkommen verdeckt, also vor Bescliädigungen wie auch vor Staub 

 geschützt sind. Die Anwendung eines Schmiermittels ist überflüssig 

 oder nur nach sehr langem Gebrauche des Instrumentes wünschenswert. 



Das Mikrotom ist in erster Linie für Schneiden mit quer- 

 gestelltem Messer bestimmt. Das Objekt wird genau senkrecht 

 zur Messerschneide bewegt, wenn diese bezw. ihre Verlängerung die 

 Achse der Zylinder schneidet. Die radiäre Richtung erliält die 

 Messerschneide bei den gebräuchlichen kurzen Messern mit ca. 3"5 cm 

 breiter Klinge dann , wenn das Messer senkrecht zur Tiefenrich- 

 tung des ganzen Instrumentes gestellt wird, ganz entsprechend der 

 horizontalen Stellung bei Schlittenmikrotomen). 



Man kann dieselben Messer auch mäßig sehräggestellt verwenden, 

 indessen soll man mit ihnen nicht unter allzu kleinen Winkeln schneiden. 

 Wie man durch eine einfache Zeichnung leicht bestätigt, schließt eine 

 Gerade, die mehrere konzentrische Kreise schneidet, mit diesen, sofern 

 sie nicht radiär gerichtet ist, verschiedene Winkel ein. So werden 

 auch an dem neuen Mikrotom beim Schneiden mit schräggestelltem 

 Messer Teile des Objektes, die ungleich weit von der Zylinderachse 

 entfernt sind, unter verschiedenen Winkeln getroften. Große Differenzen 

 im Schnittwinkel können zum Zerreißen des Schnittes führen. Celloidiu- 

 schnitte sind widerstandsfähiger als Paraffinschnitte , dicke Schnitte 

 sind widerstandsfähiger als dünne (aus diesem Grunde läßt sich keine 

 allgemein gültige Vorschrift über den Grenzwinkel angeben, bis zu 

 dem Schrägstellungen der geraden Messer erlaubt sind). Wenn man 

 an allen Punkten des Objektes unter gleichem Winkel schneiden 

 wollte, so müßte man der Messerschneide eine gekrümmte Form 

 geben, und zwar die Form einer logarithmischen Spirale, die für 

 jeden Schnittwinkel einen besonderen Verlauf besitzen würde. Weil 

 die Herstellung exakt gekrümmter Messer mit großen Schwierigkeiten 

 verbunden ist, und zudem das Arbeiten mit sichelförmigen Messern, 




XXII, 1. Henneberg: Neues Mikrotom von Leitz. 125 



wie ein Versuch zeigte, nicht zu tadellosen Schnitten führt, wird 

 fernerhin von ihrer Anfertigung abgesehen werden. Übrigens beachte 

 man, daß an dem neuen Mikrotom ein schräggestelltes (gerades) Messer 

 mit der kreisförmigen Bahn des Objektes natürlich einen viel spitzeren 

 Winkel bildet als mit der Tiefendimension des Instrumentes. 



Der Vertrieb des gesetzlich geschützten Mikrotoms ist der Firma 

 Gustav Miehe in Hildesheim übertragen worden. 



[Eingegangen am 17. März 1905.] 



[Aus dem anatomischen Institut zu Gießen.] 



Neues Mikrotom von Leitz. 



Von 



Prof. Henueberg. 



Hierzu vier Holzs chnitte. 



Seit einigen Monaten ist im hiesigen anatomischen Institut ein 

 Mikrotom aus der Werkstatt von LEiTZ-WetzIar in Gebrauch, das 

 außer Einrichtungen, die sich bereits an andern Mikrotomen hnden, 

 einige neue aufweist und, nachdem nach unserer Angabe eine Anzahl 

 von Änderungen vorgenommen wurden, uns in mancher Beziehung 

 zweckmäßig zu sein scheint. Das Instrument ist so einfach und die 

 Figuren genügend übersichtlich, daß die Beschreibung kurz gefaßt 

 werden kann. 



Es handelt sich um ein ganz besonders stabil gebautes Schlitten- 

 mikrotom mit automatischer Objekthebnng und großem, recht schwerem 

 Messerschlitten, der direkt mit der Hand oder durch Kette und Zahn- 

 rad geführt wird. Das Instrument wird in zwei Größen mit einer 

 Bahnlänge von 32 und 42 cm hergestellt. Für die meisten Zwecke 

 wird die kleine Form genügen. 



W^ill man den Messerblock direkt mit der Hand führen, so 

 befestigt man einen Bügel an dem Block, und zwar geschieht dies 

 mit derselben Schraube, die auch die Messerklammer hält (cf. Fig. 2). 




126 



Henne b er g: Neues Mikrotom von Leitz. 



XXII, 1. 



Bei der Benutzung der Kette wird das Mikrotom an jedem 

 Ende mittelst einer Flügelschraube mit einem Balken armiert (Fig. 1), 

 von denen jeder ein Kettenrad, der eine außerdem die Kurbel, der 

 andere die Einrichtung zum Spannen der Kette trägt. Die Be- 

 wegungen des Blockes mit Hilfe der Kette kann auf verschiedene Art 

 geschehen. Dies scheint mir ein Vorzug des Instrumentes zu sein, 

 der es besonders auch für Anfänger brauchbar macht, da mau, je 

 nachdem es einem bequemer ist, entweder mit der rechten Hand die 

 Kurbel dreht und mit der linken den Pinsel führt oder umgekehrt. 

 Die Kurbel läßt sich nämlich, abgesehen von der Stellung, die Figur 1 



zeigt, an demselben Ende des Mikrotoms, aber an der andern Seite 

 des Kettenrades anbringen. Man dreht dann mit der rechten Hand. 

 Sodann lassen Kurbel und Kettenspanner sich vertauschen. Nimmt 

 man die Kurbel an das hintere Ende, so dreht man dieselbe natur- 

 gemäß mit der Linken. 



Die Art der selbsttätigen Hebung des Objekts zeigt Figur 2. 

 Die Drehung des Zahnrades um ein bestimmtes Stück geschieht 

 indirekt durch einen winkelig gebogenen Hebel, der mittels einer 

 Schraube beweglich am Block (daher Blockwinkel) befestigt ist. Der 

 nach unten gerichtete Schenkel nimmt bei der Bewegung des 

 Schlittens nach dem Ende der Bahn einen federnden Haken mit, der 




XXII, 1. 



Henneberg: Neues Mikrotom von Leitz. 



127 



in die Zähne des Rades eingreifend dies ein Stück mit herumzieht. 

 Die Länge der Strecke, um welche der Blockwiukel das Rad auf 

 solche Weise dreht, ist abhängig von der Stellung des nach unten 

 gerichteten Schenkels. Je steiler er steht, desto länger, je schräger, 

 desto kürzer ist sie. Dabei ist Voraussetzung, daß der Block immer 

 bis zu einem bestimmten Punkte der Bahn hin bewegt wird, nämlich 



2. 



bis an das Ende derselben , wo er an eine quere Platte anschlägt. 

 Letztere ist, um den Stoß zu mildern, mit Leder überdeckt. In der- 

 selben Weise wirkt es günstig, wenn man das ganze Mikrotom auf 

 eine Filzplatte stellt oder unter die drei Füße Gummistücke legt. 

 Die Steil- oder Schrägstellung des Blockwinkels geschieht, wie 

 aus der Figur 2 sofort ersichtlich, mit Hilfe eines kleinen Sperrhakens ; 

 die auf der kleinen Skala angebrachten Zahlen geben die Anzahl 

 der Radzähne an, um die bei der betreffenden Stellung des Block- 




128 



Henneberg: Neues Mikrotom von Leitz. 



XXII, 1. 



winkeis das Rad gedreht wird. Ein Radzahn entspricht einer 

 Schnittdicke von O'OOl mm. Bei steilster Stellnng des Blockwinkels 

 wird das Rad nm 25 Zähne gedreht. Es werden also dann Schnitte 

 von 25 yM geliefert. 



Die Vorwärtsbewegnng des Hakens erfolgt durch die auf der 

 Figur 2 sichtbare Spiralfeder, und zwar dann, Avenn der Block das 

 Messer zum Objekt hinführt. Hierbei gleitet der Haken am Zahnrande 

 vorwärts, bis er an der vertikalen Wand des Mikrotoms einen Wider- 

 stand findet. Damit das Zahnrad nicht zu leicht geht, wodurch ein 

 Zurückschnappen eintreten kann , ist eine kleine Bremse (auf den 

 Figuren nicht sichtbar) angebracht, die durch Anziehen einer Schraube 

 in ihrer Wirkung reguliert Avird. 



Zur Erleichterung der Einstellung des Objekthalters besteht die 

 an ihm befestigte Mutter , in der sich die Zahnradspindel bewegt, 

 aus zwei Hälften, an deren jede wie bei einer Zange je ein Schenkel 

 ansitzt (auf Fig. 1 sichtbar). Eine zwischen den letzteren angebrachte 

 Feder drückt die beiden Teile genügend fest zusammen. Ein Druck 

 auf die Schenkel genügt, um die Mutter zu öffnen und den Ob- 

 jekthalter au dem Gewinde der Spindel hinauf und hinab schieben 

 zu können. 



Die Messerklammer ermöglicht es durch den Gebrauch zweier 

 Schrauben, das Messer, das auf einer um eine Achse drehbaren Platte 

 ruht, steiler oder iiacher zu stellen; die Schraube zur Befestigung 

 der Messerklammer gleitet auf dem Block in einer Rinne, wodurch 

 die Verschiebung der Klammer sehr bequem geschieht. 



Um beim Schneiden von Celloi'dinobjekten das Messer mit 70*^/q 

 Alkohol zu beträufeln, haben wir dem Mikrotom einen Tropfapparat 

 beigefügt. Dieser besteht aus einem Kessel mit abschließbarer Aus- 




XXII, 1. 



Henne beri?: Neues Mikrotom von Leitz. 



129 



finßröhre am Boden. Er wird aufgesetzt und durch eine Schraube 

 befestigt auf einem Zapfen, der mit einer Fußplatte in die Block- 

 rinne eingeschoben wird. Es ist dafür gesorgt, daß die Ausfluß- 

 öffnung in die Nähe des Objektes geführt werden kann. Dies ge- 

 schieht einmal dadurch, daß der ganze Apparat in der Blockrinne 

 hin- und herbewegt werden kann. Sodann ist die horizontale Aus- 

 flußröhre um eine am Boden des Kessels befestigte kurze ver- 

 tikale zum Durchtritt des Alkohols durchbohrte Achse drehbar. 



Da letztere an der Peripherie des kreisförmigen -Bodens liegt, so 

 kann sie und damit auch die Ausflußöffnung, indem man den Kessel 

 um seine Achse dreht, auch auf solche Weise dem Objekt ge- 

 nähert werden. 



Um bei querstehendem Messer die zur Anfertigung gerader 

 Schnittbänder nötigen senkrecht zur Bahn und parallel zur Messer- 

 schneide stehenden Ebenen vorn und hinten am Paraffiublock her- 

 zustellen, läßt sich an dem Messerblock ein genau im rechten Winkel 

 zur Bahn stehendes Messer drehbar anbringen. Dasselbe wird ein- 

 mal mit dem einen Ende, dann mit dem anderen an den Messerblock 



Zeitschr. f. fl-iss. ilikroskopie. XXII, 1. 9 




130 Melissinos: Vorrichtung z. Färbung aufgeklebt. Öerienschnitte. XXII, 1. 



angefügt , so daß es beim Schneiden der beiden Ebenen jedesmal 

 seine genau senkrecht stehende Fläche dem Paraffinblock zuwendet. 

 Indem man den Messerblock allmählich nach dem eingebetteten Ob- 

 jekt hin bewegt, schneidet man das umgebende Paraffin, soweit es 

 entbehrlich ist, schichtweise weg. Wir haben uns dieses Messer 

 vor Jahren herstellen lassen und glauben es empfehlen zu können. 



[Eingegangen am 31. März 1905.] 



[Aus dem Pathologisch -Anatomischen Institut zu Athen.] 



Yorrichtung zur gleichzeitigen schnellen 



Färbung der auf Deckgläsern oder Objektträgern 



aufgeklebten Serienschnitte. 



Von 

 Dr. Koust. Melissinos, 



Privatdozent der Anatomie und Histologie und Prosektor an dem Pathologisch- 

 Anatomischen Institut. 



Hierzu ein Holzschnitt. 



Denjenigen , welche sich der Methoden zum ein- oder viel- 

 fachen Färben der auf Deckgläsern oder Objektträgern aufgeklebten 

 Serienschnitte bedienen, stehen einige Vorrichtungen zur Verfügung, 

 bei deren Anwendung die allgemeine Behandlung der Färbung und 

 des Auswascheus beschleunigt und die Färbung der Schnitte einfarbig 

 wird. Diese Instrumente haben die meisten (die sich mit der 

 mikroskopischen Technik beschäftigen) gemäß der Mißstände der 

 früheren modifiziert oder ganz neue anfertigen lassen , z. B. hat 

 ScHiEFFERDECKER^ im Jahre 1900 die auf der einen Seite befind- 

 liche und mit Riefeln versehene feste Platte der älteren durch 

 eine bewegliche mit Riefelungen versehene Platte ersetzt, und so ist 



^) ScHiEFFERDECKER, H., Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XVII. 




XXII,1. Melissinos: Vorrichtung z. Färbung' aufgeklebt. Serienschnitte. 131 



es ihm gelungen in den Apparat Platten verschiedener Größe ein- 

 zusetzen. R. KuTNER^ in Berlin, J. Schaffer"" in Wien, R. Bor- 

 mann '^ in Göttingen, Caro^ in Berlin, Buscalioni'' in Rom, Hellen- 

 dall'' in Straßburg, und im Jahre 1903 J. Dewitz' und Schaffer ^ 

 haben , nachdem sie die früheren Apparate modifiziert und ergänzt 

 hatten , Jeder eine eigene Vorrichtung zum Färben und zu andern 

 Behandlungen der aufgeklebten Schnitte hergestellt. 



Da wir annehmen dürfen , daß der Mikroskopiker besonders 

 darauf bedacht sein muß, wie man Zeit und Material, das oft nicht 



gerade billig ist, spare, und die in dem Kästchen eingesetzten Deck- 

 gläser bequemer und besser aufbewahre, als es die bisher übliche 

 Numerierung- gestattete , haben wir durrh die Ergänzung des mo- 



^) Kutner, K., Deutsche med. Wochenschr. 9. F., 1893. 

 ^) Schaffer, J., Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XI. 

 ^) Bormaxx, K., Zeitschr. f. wi.ss. Mikrosk. Bd. XI. 

 ^) Caro, Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XI. 

 ■") Buscalioni, Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XIV. 

 ") Hellendall, H., Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XVII. 

 ^) Dewitz, J., Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXIII. 

 *) Schaffer. J.. Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XIX. 



9* 




132 Melissinos: Vorrichtungz. Färbung aufgeklebt. Serienschnitte. XXII, 1. 



difizierten ScHiEFFERDECKERSclien Apparates und am hiesigen Platze 

 in der mechanischen Werkstätte des Herrn König einen eigenen 

 Apparat angefertigt, welclier viel besser ist als jener und allen Be- 

 dürfnissen der mit histologisch - mikroskopischen Arbeiten Beschäf- 

 tigten gerecht wird. 



Mein Apparat , welchen ich auf dem Panhellenischen Kongreß 

 in Athen (6. Mai 1903) vorgezeigt habe, besteht aus einem vier- 

 eckigen Kästchen K^ welches 80 mm lang , 45 mm breit und hoch 

 ist. Auf der einen inneren Seite des Apparates befindet sich eine 

 mit Riefelungen versehene Platte A^ welche durch einen kleinen 

 Knopf Kn festgehalten wird. Die Platte A hat 20 Riefelungen R 

 zur Aufnahme von 20 Objektträgern oder 40 Deckgläsern. Parallel 

 zu der Platte A und ebenfalls in dem Kästchen befindet sich eine 

 zweite Platte i?, welche die gleiche Anzahl von gleichgroßen Riefe- 

 hmgen hat. Diese steht durch einen langen Arm Ar mit der 

 Schraube S in Verbindung. Dreht man diese Schraube , so nähert 

 und entfernt sich die Platte B von der unbeweglichen Platte A. 

 Eine jede von den riefenhaltigen Platten trägt am unteren Rande 

 und in der inneren Fläche einen feinen Draht, welcher 5 mm über 

 die Oberfläche hervorragt und dazu dient, das Herabfallen der 

 Platten in den Niederschlag des Farbstoffes am Grunde des Ge- 

 fäßes zu verhindern. Die bewegliche Platte B trägt an ihren Seiten- 

 rändern zwei P^inschnitte , um die Zirkulation der Farbstott'lösungen, 

 Waschflüssigkeiten etc. zu erleichtern. Die größten Gläser, die man 

 hineinstellen kann, haben folgende Maße: 14X14 mm, 40X40 mm, 

 18X24 mm, 20X30 mm, 23X30 mm, 30 X 40 mm und 23 X 50 mm, 

 Deckgläser quadratische und längliche Form, 18 — 30 mm rundliche 

 Form, und 28X48 mm, 26X76 mm, 45x76 mm Objektträger. 

 Die Größe der eingestellten Deckgläser wird durch eine auf dem 

 oberen Rand der Seite , wo die Schraube S ist , eingravierte Skala 

 Sk in Millimetern gemessen. 



Mein Apparat übertriff"t die von andern Autoren beschriebenen 

 Apparate, a) weil man mit ihm Objektträger oder Deckgläser gleich- 

 zeitig behandeln kann ; b) weil die in den Riefelungen der Platten 

 A imd B eingestellten Deckgläser durch eine Umdrehung der Schrauben 

 festgehalten werden, so daß, wenn man den Apparat bei dem Aus- 

 gießen der verschiedenen Färbflüssigkeiten umkehrt, keine Platte 

 (Deckglas) hinabfällt; c) schließlich kann man mit einem und dem- 

 selben Apparat ein reichliches auf den Deckgläsern aufgeklebtes 

 Material in kurzer Zeit behandeln. Die verschiedenen darin hin- 




XXIIjl. Melissinos: Vorrichtung- z. Färbung aufgeklebt. Serienschnitte. 133 



gestellten Materialien, z. 1). FärbfUissigkeiten, Alkohol, Xylol, welche 

 man durch einen in der einen Kcke befindlichen Schnitt hineingießt, 

 werden in verschiedenen Flaschen zur zweiten und dritten Färbung 

 derselben nach vorhergehender Filtration aufbewahrt. Dieser Ap- 

 parat, dem ich eine kleine Modifikation hinzufügte, die ich bald ver- 

 öttentliclien werde , wird durch Lösen des kleinen Knopfes K und 

 der beiden kleinen Schrauben des Armes der Platte B auseinander 

 genommen und dann kann mau ihn im Innern , sowie die Platten 

 A und B gut reinigen. 



7 Monate nach meiner Mitteilung auf dem II. Panhellenischen 

 Kongreß hat Dr. W. Hoffmann ^ in Heidelberg einen kleinen Apparat 

 für Deckgläser beschrieben, welchen er Deckglastransporteur 

 für Schnittfärbuug nennt. Dieser ist sehr einfach und billig, aber 

 er erfüllt nicht alle die von mir beschriebenen Zwecke und be- 

 sonders was die gute Befestigung der Deckgläser aller Arten der- 

 selben, z. B. von rundlichem Format, betrifft. 



1) HoFFMAxx, W., Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XX, H. 2. 

 [Eingegangen am 26. Januar 1905.] 




134 Referate. XXII, 1. 



Referate. 



1. Lehr- und Handbücher. 



Schmorl , G., Die pa|liologisch-liiytologisclien Unter- 

 suchungsmethoden. 3., neu bearbeitete Aufl. ; Leipzig 

 (F. e. W. Vogel), 1905. 8-75 M. 



Die vorliegende d r i 1 1 e Auflage der „pathologisch-histologischen 

 Untersuchungsmethoden" hat eine nicht unerhebliche Mehrung ihres 

 Umfanges erfahren, was in Anbetracht der massenhaft anschwellenden 

 diesbezüglichen Verötfentlichuugen wohl nicht zu vermeiden war , im 

 Gegenteil nur zu begrüßen ist, da der Verfasser auch für die neue 

 Auflage seinem Grundsatz treu blieb , nur von ihm selbst nach- 

 geprüfte Vorschriften aufzunehmen ; auch so noch war die Auswahl 

 jedenfalls keine leichte. Einzelne Kapitel mußten infolge der Wand- 

 lungen der neuesten Technik umgearbeitet werden , andere — Ab- 

 schnitte über mikroskopisches Zeichnen und über Polarisation — 

 wurden neu eingefügt. Im übrigen blieb die Anordnung des Buches 

 die bisherige, schon bewährte. Besonders anzuerkennen ist es, daß 

 bei allem Streben nach Kürze die Darstellung der ^lethoden aus- 

 führlich genug bleibt , um eine präzise Anwendung derselben zu er- 

 möglichen und daß , was Referent besonders hoch veranschlagen 

 möchte, sich bei jedem Kapitel die einschlägige Originalliteratur zu- 

 sammengestellt rindet; sehr schätzenswert ist es ferner, daß solche 

 Methoden, welche noch nicht bis zur völligen Sicherheit herangebildet 

 werden konnten, als solche bezeichnet sind, so daß derjenige, welcher 




XXII, 1. Referate. 135 



das erstemal mit denselben hantiert , die Schuld des etwaigen Miß- 

 lingens nicht unbedingt auf sich oder seine Reagenzien zu schieben 

 veranlaßt wird, was gewiß vor einem weiteren Versuch an anderem 

 Material weniger abschrecken wird, als wenn er auf die Möglichkeit 

 des Mißlingens nicht hingewiesen worden wäre. Auch sonst zeigen 

 zahlreiche eingestreute Bemerkungen, namentlich Warnungen vor 

 einzelnen naheliegenden Fehlgriffen, daß die wiedergegebenen Me- 

 thoden unter den Augen des Verfassers im Laboratorium durch- 

 probiert worden sind und das ganze Gebiet eine didaktische Durch- 

 arbeitung erfahren hat. Erwähnt soll endlich noch werden, daß auch 

 für die dem Pathologen und Histologen sonst gewöhnlich ferner 

 liegenden Gebiete der Untersuchung des Auges und des Gehörorgans 

 ausreichende Vorschriften gegeben sind. Die Ausstattung des Buches 

 ist eine des Verlags würdige. Schmaus {München). 



WinsIOW, Ch. -E. A., Elements of applied Microscopy. 



A text-book for beginners. First edit. New York 



(Jolin Wiley & Sons), 1905. 183 pp. 

 Nach einer kurzen Schilderung des Mikroskops und seiner wich- 

 tigsten Nebenapparate bespricht Verf. die wichtigsten Stärkearten, 

 einige Nahrungs- und Genußmittel, einige technisch verwertbare Faser- 

 arten , die Zusammensetzung des Papiers , gibt einige Angaben über 

 „the Microscope in Medicine and Sanitation" und forensische Mikro- 

 skopie, spricht auf einigen Seiten kurz über Mikrochemie und schließt 

 mit einigen Winken für die Untersuchung von Metallen etc. In allen 

 Abschnitten handelt es sich nur um einige Beispiele., die V^erf. aus 

 den betreffenden Gebieten auswählt, die zur Einführung der Anfänger 

 in den Stoff vielleicht genügen mögen. Küster {Halle a. S.). 



Lindner, P., Mikroskopische Betriebskontrolle in den 

 Gärungsgewerben mit einer Einführung in die 

 technische Biologie, Hefenreinkultur und In- 

 fektionslehre. 4., neu bearb. Aufl. 237 Abb., 4 Tfln., 

 521 pp. Berlin (Paul Parey) 1905. 19 M. 



Das vortreffliche Handbuch zeigt in seiner neuen Form wiederum 

 mancherlei Ergänzungen und Verbesserungen, die den Resultaten der 

 neuesten Forschungen Rechnung tragen. Das Buch , das in erster 

 Linie für die Praktiker des Gärungsgewerbes bestimmt ist , beginnt 

 mit einer Anleitung zum Gebrauch des Mikroskops und zum mikro- 

 skopischen Sehen, erläutert unter allerhand Objekten namentlich die- 




j^36 Referate. XXII, 1. 



jeuigen, welche dem Gäruugstechuiker — oft rein zufällig — be- 

 gegnen und gibt am Ende der Einleitung Winke für die Einrichtung 

 und Ausstattung eines Laboratoriums. 



Den Hauptteil des Buches füllt die Besprechung der „Kultur- 

 versuche und Untersuchungsmethoden", die Schimmelpilz- und die 

 Hefenkunde. Zu letzterer gehören die mustergültigen Tafeln. — 

 Das Buch sei zum Studium bestens empfohlen. 



Küster {Halle a. S.). 



2. Präparationsmethoden im allgemeinen. 



Groot, J. (j. de, Ein neuer Kitt zum Schließen von Ge- 

 fäßen mit Alkoholpräparaten, auch für den 

 Versand (Zool. Anz. Bd. XXVHI, 1904, p. 406—407). 

 Derselbe besteht aus 4 g Gelatine, 30 cc Wasser imd 8 g Zink- 

 weiß. In einem dickwandigen kleinen Gefäß verreibt man zunächst 

 das Zinkweiß mit ein wenig von den 30 cc Wasser, gibt dann 

 das übrige Wasser und die zerkleinerte Gelatine hinzu, erwärmt 

 über kleiner Flamme (also ohne die Siedetemperatur zu erreichen), 

 so daß keine Luftbläschen auftreten, und bringt, nach gehöriger 

 Mischung mit einem Pinsel, eine gleichmäßige Lage auf den vorher 

 abgetrockneten Rand des Gefäßes. Dann wird ohne jede Eile die 

 Glasplatte, die man vorher schwach angewärmt hat, aufgelegt, und 

 sobald der Kitt etwas erstarrt ist, ein wenig augedrückt. Nach 

 einiger Zeit drückt man die Deckplatte fester und zum Schluß sehr 

 fest an, so daß der Kitt rings herum der Glasplatte anliegt und 

 einen glatten weißen Wulst um sie bildet. Schließlich wird die Glas- 

 platte luit einem Gewicht beschwert und das Gefäß beiseite gesetzt. 

 Dabei ist darauf zu achten, daß vorläufig der Alkohol mit dem Kitt 

 noch nicht in Berührung kommt. Sobald der Kittrand trocken ist, 

 d. h. nach etwa 2 Stunden, darf dann der Alkohol ohne Gefahr den 

 Kitt benetzen. Auch mit Korkstöpseln verschlossene Präparatgläser 

 können mit diesem Kitt verschlossen werden. Behufs Oftnen der 

 Gefäße wird der Kitt einfach mit Wasser befeuchtet. 



E. Schoebel {Neapel). 




XXII, 1. Referate. 137 



Tellyesiiiczky , K. V. , Aufkleben der Celloi diiischnitt e 

 (V^erh. d. Anat. Ges., 18. Vers., Jena 1904; Anat. Anz., 

 Ergänzungsh. z. Bd. XXV, 1904, p. 182). 

 Verf. liat die Methode von Argutinsky modifiziert. Das Wesent- 

 liche derselben besteht darin , daß die Grundlage , auf welche die 

 Celloidinschnitte aufgeklebt werden sollen , mit einer Eiweißschicht 

 überzogen wird, welche vor allem durch Wärme zur Gerinnung ge- 

 bracht wird. Auf die geronnene Eiweißschicht legt man der Reihe 

 nach die nassen Schnitte, welche dann mit mehrschichtigem Filtrier- 

 papier angepreßt werden. Die Modifikation besteht darin, daß Verf. 

 statt des Glyzerineiweißes von Mayer einfach stark verdünntes Ei- 

 weiß verwendet. Das Weiße eines Eies (etwa 20 bis 25 cc) wird 

 mit destilliertem Wasser auf 100 cc verdünnt und filtriert, nachdem 

 es gut durchgeschüttelt ist. Mit einer solchen Lösung kann man 

 leicht eine gleichmäßige und dünne Schicht erhalten, während Mayers 

 Glyzerineiweiß immer eine ungleiche rauhe Schicht ergibt. Das Gly- 

 zerin ist ganz zwecklos. Die Versuche des Verf. ergaben, daß 

 Eiweiß selbst in sehr verdünntem Zustande (1 : 80 bis 100) klebt. 

 Auch das vom Verf. empfohlene Eiweiß ist so verdünnt, daß die 

 Färbung der durch dasselbe erzielbaren Schicht fast gleich Null ist. 

 Für histologische Kurse oder bei Anfertigung von Serienschnitten 

 klebt Verf. die Schnitte auf größere Glimmerplatten, welche bei den 

 Kursen zur Verteilung der Schnitte ebenso verwendet werden , wie 

 man sie sonst bei Verteilung von Paraffinschnitten benutzt. Ein 

 großer Vorteil des Aufklebens auf Glimmerplatten ist der, daß man 

 das Aufdrücken - mit Filtrierpapier sehr vorteilhaft mit den Walzen 

 gewöhnlicher photographischer Satiniermaschinen bewirken kann , so 

 daß man auch größte Schnitte leicht behandeln kann. 



Schiefferdecker [Bonn). 



Dreu W , E x s t i r p a t i o n s - und p e r a t i o n s f e d e r (Monatsh. f. 

 prakt. Dermatol. Bd. XXXIX, 1904, p. 208—210 m. 1 Fig.). 

 Verf. beschreibt und empfiehlt ein kleines Instrument in der 

 Form einer Schreibfeder , welches dazu dienen soll , kleine Haut- 

 stückchen oder pathologische Affektionen bequem herauszuschneiden, 

 was abgesehen von andern Zwecken besonders zur Sicherung der 

 Diagnose durch die histologische Untersuchung von Wert sein kann. 

 Die Exstirpationsfeder ist zu beziehen von dem Instrumentenmacher 

 C. W. BoLTE Nachf. , Hamburg, Rathausstraße 20, zum Preise von 

 einer Mark. Schiefferdecker {Bonn). 




138 Referate. XXII, 1. 



Mlllon , P. , Action de Tacide osmique sur les graisses 

 (Bibliogr. anat. t. XIII, 1904, fasc. 4, p. 208—213). 

 Verf. kommt bei seinen Untersuchungen zu folgenden Schlüssen : 

 1) Die Ölsäure ist es allein, welche die Färbung durch Osmiumsäure 

 bei der Fixierung der Fette bewirkt. 2) Jedes Fett, das sich in 

 den Geweben direkt unter der Einwirkung von Osmiumsäure 

 schwärzt, besteht zum größten Teile aus Oleinsäure. .3) Jedes 

 Fett, welches in den Geweben unter der Einwirkung von Osmium- 

 säure gelb oder braun wird, besteht zum größten Teile aus Pal- 

 mitin- oder Stearinsäure. Die angegebene schwache Färbung wird 

 hervorgerufen durch eine geringe Menge von Oleinsäure. Ein solches 

 Fett wird durch Osmiumsäure nur schlecht fixiert und wird 

 infolgedessen durch ätherische Öle leicht gelöst. Das braun ge- 

 färbte Fett kann bei Einwirkung von schwachem Alkohol eine 

 schwarze Färbung annehmen. 4) Die Lecithine, welche infolge 

 ihrer chemischen Zusammensetzung stets arm an Oleinsäure sind, 

 gehören zu der eben genannten Kategorie der sich braun färben- 

 den Fette, die mit Alkohol sich schwarz färben und nur mangelhaft 

 fixiert sind. Schiefferdecker (Bofin). 



Skrobansky, E i n e M e t h o d e der n a c h t r ä g 1 i c h e n F ä r b u n g 

 mit Bleu de Lyon und Pikrinsäure (Intern. Monats- 

 schr. f. Anat. u. Physiol. Bd. XXI, 1904, H. 1—3, p. 21 

 —22). 

 Baumgarten und später Tonkow haben das Bleu de Lyon schon 

 benutzt. Der letztere verwendete Jodzusatz und infolgedessen färbten 

 sich die Präparate schon nach einigen Minuten , während ohne Jod 

 mehrere Stunden oder gar Tage erforderlich sind. Verf. verfuhr in 

 folgender Weise : Die Objektträger mit den in Boraxkarmin gut ge- 

 färbten Schnitten kommen aus destilliertem Wasser in folgende 

 Mischung : 



Destilliertes Wasser 50 Teile 



Bleu de Lyon, gesättigte, alkoholische (95pro- 



zentige) Lösung 2 „ 



Pikrinsäure, gesättigte, wässerige Lösung . . 5 „ 



In dieser verbleiben die Schnitte 2 bis 3 Minuten und werden dann 

 in Alkohol von 70, 80, 90 Prozent und absoluten Alkohol über- 

 tragen, dann Xylol, Kanadabalsam. Verf. hat auf diese Weise Organe 

 behandelt, die in den verschiedensten Flüssigkeiten : Alkohol, Chrom- 

 essigsäure, Sublimat, Zenker scher Flüssigkeit etc. fixiert waren; Verf. 




XXII, 1. Referate. I39 



hat ganz junge, frisch fixierte Embryonen und Organe, die erst nach 

 längerer Zeit der Leiche entnommen waren , gefärbt , und hat stets 

 ein deutlich und scharf differenziertes , mehrfarbiges Bild erhalten. 

 Die Methode ist einfach und schnell , das ganze Verfahren dauert 

 nicht länger als 7 bis 10 Minuten. Schiefferdecker (Bonn). 



Nabias , B. de , N u v e 1 1 e m e t h d e de c 1 r a t i n rapide 

 du Systeme nerve ux au chlor ure d'or (Bibliogr. 

 anat. "t. XIII, 1904, fasc. 4, p. 221—222; Compt. Rend. 

 Soc. de Biol. t. LVI, 1904, p. 426). 

 Die Schnitte des Nervengewebes nach Fixierung in Alkohol, 

 Sublimat , in den Flüssigkeiten von Flemming , kurz in irgendeinem 

 Fixierungsmittel, welches Jod eintreten läßt, werden auf dem Objekt- 

 träger nach Entwässerung in folgender Weise behandelt: 1) Be- 

 handlung mit einer Jodlösung. Man kann die Gram sehe Flüssigkeit 

 verwenden (Jod 1, Jodkalium 2, destilliertes Wasser 300) oder eine 

 schwächere Lösung, bis zu ^/jooo herunter, die weniger intensiv ein- 

 wirkt und daher den anatomischen Details weniger schaden kann. 

 Die Schnitte werden gelb , es ist dies das Zeichen , daß das Jod 

 eingedrungen ist, was durchaus nötig ist. 2) Abwaschen durch Über- 

 gießen mit destilliertem Wasser. 3) Behandlung mit einer Gold- 

 chloridlösung (einprozentig) , die Schnitte werden wieder gebleicht. 

 4) Neues Auswaschen mit destilliertem Wasser. 5) Behandlung mit 

 Anilinwasser (Anilin 1 cc, destilliertes Wasser 100 cc, tüchtig schüt- 

 teln. Filtrieren durch ein feuchtes Filter und in gelbem Glase auf- 

 bewahren. Das Anilinwasser kann bis zu ^/looo ""^^ weiter verdünnt 

 werden). Die so behandelten Schnitte zeigen sofort eine Veränderung, 

 wenn die Auiliulösung stark ist; nach einigen Augenblicken, wenn 

 sie schwach ist. Dann wieder Auswaschen in destilliertem Wasser, 

 steigender Alkohol, absoluter Alkohol, Xylol, Kanadabalsam. Die 

 eben beschriebene Umänderung kann auch, und -zwar mitunter in 

 ausgezeichneter Weise erhalten werden nach Behandlung mit Xylol- 

 Aniiin nach Entwässerung (Xylol 100 cc, Anilin 1 cc). Die Schnitte 

 erscheinen schön lila oder purpurfarbig. Die Farbe ist dunkel nach 

 starken Anilinlösungen, hell nach verdünnten. Unter den zahlreichen 

 Stoffen, welche diese Umänderung hervorrufen können (Verf. studiert 

 dieselben noch weiter), verdienen auch Resorcinlösungen von ^/^^q, 

 /looo ""<^ selbst ^'looon «zugewandt zu werden wegen der Schönheit 

 des Farbeutones und weil die Kerne deutlicher als mit andern Mitteln 

 hervorzutreten scheinen. Die Achsenzylinder sind schön imprägniert 




140 Referate. XXII, 1. 



und mit ihren Fibrillen leicht zu verfolgen. Um die Fibrillen gut 

 sichtbar zu machen, muß man die Fixierung, soweit möglich, mit 

 isotonischen Flüssigkeiten ausführen. Verf. wird später geeignete 

 Flüssigkeiten mitteilen. ScJiie/ferdecker (Bonn). 



3. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. 



A. Niedere Tiere. 



Lesage , Culture de l'amibe de la dyse uteri« des pays 

 chauds (C. R. Ac. Sc. t. CXXXIX, p. 1237—1239; Anu. 

 de rinst. Pasteur t. XIX, 1905, uo. 1, pp. 9 — IG av. 1 pL). 



Verf. kultivierte eine Amöbe, die dem Darmschleim von an tro- 

 pischer Dysenterie Erkrankten entstammte. 



Um einen an Nährstoffen armen Nährboden zu erhalten, werden 

 Schalen mit Nähragar 8 Tage lang unter einem starken Wasser- 

 strom gewaschen, dann werden sie sterilisiert und bei einer Tempe- 

 ratur von 18—25^ zur Kultur verwandt. Einige Tage nach der 

 Impfung ' erhält man kleine Amöben, die man in andere Schalen in 

 bestimmtem Abstand von einer Kolonie irgendwelcher gewöhnlichen, für 

 die Amöben unschädlichen Mikroben (Verf. gebraucht Paracoli) bringt. 

 Hat die Amöbe die Kolonie erreicht, so überträgt man sie in eine 

 weitere Schale, nach einer gewissen Zahl von Überimpfungen erhält man 

 eine reine Mischkultur (Amöbe -]- Paracoli). G. Seliber {Paris). 



Thiroux , Recherches morphologiques et experimen- 

 tales sur Trypanosoma paddae (Ann. de ITust. 

 Pasteur 1905, t. XIX, no. 2, p. 65—83 av. 1 pl.). 

 Verf. gebrauchte für die Kultureu Nähragar von folgender 



Zusammensetzung : 



P^leisch uiaceriert 100t) g 



Pepton 10 „ 



Seesalz 5 „ 



Agar 30 



n 



^ Mit frischem Darmschleim oder mit ausgetrocknetem , in dem die 

 Amöben Cysten bilden. 




XXII, 1. Referate. 141 



Ist der Nähragar bis 40 ** erkaltet, so fügt man ein gleiches 

 Volumen oder anderthalb soviel Gänseblut hinzu. Taubenblut erwies 

 sich als ungünstig für die Entwickelung. Man läßt die Reagens- 

 gläser während 24 Stungen in geneigter Stellung bei Laborien- 

 temperatur trocknen; dann werden sie mit Gummistöpseln versehen 

 und in vertikaler Stellung in einen Trockenschrank (bei 37^) ge- 

 bracht. Nach 24 Stunden wird das Kondensationswasser mit Hilfe 

 des Blutes, das man vom Herzen des Sperlings nimmt, geimpft. 



In solchen Kulturen fangen die Protozoen am 8. oder 9. Tage 

 an sich zu vermehren; am 12. bis 15. Tage bemerkt man Invo- 

 lutionsformen ; die Trypanosomen behalten ihre Beweglichkeit länger 

 als 40 Tage. — 



Die Trypanosomen haben in den Kulturen geringere Dimen- 

 sionen als im frischen Blute. Unter den Involutionsformen sind viele 

 hanteiförmig, andere rund ; die letzteren bestehen aus eineiL Haufen 

 von lichtbrechenden Kügelchen. Verf. glaubt, daß diese Segmen- 

 tierung des Protoplasmas einen Übergang zur Cystenbildung darstellt. 



Verf. färbte seine Präparate nach der Methode von Laveran mit 

 Eosinblau Borrel und Tannin (im Thermostaten bei 5.3 bis 54°); 

 Kern und Geißel wurden rotviolett, das Centrosom tiefviolett gefärbt. 



An nicht intensiv gefärbten Präparaten beobachtete der Verf. 

 vor und hinter dem Zellkern helle nicht scharf abgegrenzte Räume, 

 offenbar wenig chromophile Protoplasmateile , aber keine Vakuolen. 



G. Seliber (Paris). 



Gadzikiewicz , -W. , Über den feineren Bau des Herzens 



bei M a 1 a k s t r a k e n (Jenaische Zeitschr. f. Naturwiss. 



Bd. XXXIX, 1904, p. 203—234 m. 6 Figg. u. 4 Tfln.). 



Die zur Untersuchung dienenden Meeresformen wurden aus 



Neapel bezogen und waren teils in Pikrinsäure, teils mit Sublimat 



fixiert. Für Garamarus und Porcellio wandte V.erf. entweder die 



Hennings sehe ^ oder die GiLsoNSche Flüssigkeit an. Beide geben 



sehr gute Resultate, das Chitin ist weich und läßt sich gut schneiden. 



Trotzdem wurde , wo immer mögUch , die Cuticula entweder vom 



ganzen Körper abpräpariert oder das Herz allein verarbeitet. Für 



kleinere Objekte empfiehlt es sich auch , da das Herz direkt unter 



der dorsalen Cuticula liegt , nur die ventrale weg zu präparieren 



und das Objekt derartig beim Schneiden zu orientieren, daß das 



^) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XVII, 1900, p. 312. 




142 Referate. XXII, 1. 



Messer des Mikrotoms zuerst auf die von der Cuticula befreite Bauch- 

 seite trifft. — Von den verschiedenen Färbungsmethoden gibt Eisen- 

 hämatoxylin für die feineren Strukturverhältnisse unvergleichlich 

 bessere .Resultate als irgend eine andere Methode. In vielen Fällen 

 kann sie auch für die Zellgreuzenbestimmung die Silbermethode er- 

 setzen, wobei sie noch den Vorteil hat, so gut wie gar keine stören- 

 den Niederschläge zu geben. Verwendet wurde die Heidenhain sehe 

 Vorschrift, jedoch wurde die Einwirkungsdauer, sowohl der Eisen- 

 alaim- wie der Hämatoxyliulösung auf die Hälfte der vorgeschriebenen 

 Zeit herabgesetzt. Zur Nachfärbung wurde Erythrosin oder das 

 Pikrinsäure-Säurefuchsingemisch benutzt. Letztere Färbung hält Verf. 

 wenigstens für Crustaceen als Unterscheidungsmittel für Bindegewebs- 

 und Muskelfasern für vollständig wertlos. Häufig färben sich Muskel- 

 fasern rot und Bindegewebsfasern gelb , doch kommt auch das Um- 

 gekehrte vor. Von andern Färbungen gab noch Safranin gute 

 Resultate. Sehr gute , den Eisenhämatoxylin ähnliche Färbungen 

 liefert auch das Chromhämatoxylin nach Apathy; es ist besonders 

 für dicke Schnitte zu empfehlen. E. Schoebel (Neapel). 



Ferriaiidez, M., Zur mikroskopis chen Anatomie des Blut- 

 gefäßsystems der T Unikaten. Nebst Bemer- 

 kungen zur Phylogenese des Blutgefäßsystems 

 im allgemeinen (Jenaische Zeitschr. f. Naturwiss. Bd. 

 XXXIX, 1904, p. 323—422 m. 12 Figg. u. 4 Ttln.). 

 Zur Fixierung der Salpen kam mit gutem Erfolg Chromessig- 

 säure und FLEMMiNGSches Gemisch , für die Ascidien hauptsächlich 

 Sublimatgemische zur Verwendung. Verf. pflichtet van Benden und 

 JuLiN vollständig bei, wenn sie betonen, daß neben Schnittpräparaten 

 auch Ausbreitungspräparate für das Studium der Histologie des Tuni- 

 katenherzens herangezogen werden müssen. Vielleicht sind letztere 

 sogar notwendiger als erstere. Da bei Schnitten die dünne Muskel- 

 membran des Herzens leicht reißt, und dann bei der Weiterbehandlung 

 gern abschwimmt, so wurde die Doppeleinbettung nach Jordan^ an- 

 gewendet. Falten im Präparat sind bei derselben zwar nicht gut 

 zu vermeiden, aber wo solche nicht stören, ist durch sie doch wenig- 

 stens die Herstellung dünnerer Schnitte ermöglicht. Auch die ge- 

 wöhnliche Paraffineinbettung mit Aufkleben der Schnitte mittels 

 Glyzerin-Eiweiß und nachherigem Überpinseln derselben mit dünner 



1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XVII, 1900, p. 191. 




XXII, 1. Referate. 143 



Photoxyliulüsung- ist mit Vorteil anzuwenden. Gefärbt wurde für 

 allgemeine Zwecke mit Eisenhämatoxylin mit und ohne Erythrosiu- 

 nacbfärbung, und speziell zum Nachweis der Mitosen mit Safranin. 

 Die Ausbreitungspräparate des Herzens wurden ebenfalls meistens 

 mit Eisenhämatoxylin gefärbt ; daneben kam aber speziell für die 

 Muskelstruktur auch die Vor- und Nachvergoldung nach Apathy und 

 zur Darstellung der Zellgrenzen die von Seeliger auch für konser- 

 viertes Material gerühmte Methylenblaumethode zur Anwendung. Verf. 

 möchte aber für letzteren Zweck auch dem Eisenhämatoxylin den 

 Vorzug geben. Bei der Eisenhämatoxylinfärbung müssen aber die 

 Membranen vorher unbedingt möglichst gut ausgebreitet werden , da 

 sonst durch ungleichmäßiges Ausziehen leicht Flecken und dergleichen 

 entstehen. Die Dauer des Beizens und Färbens kann im allgemeinen 

 bis zu einer halben Stunde verkürzt werden. Die Ausbreitungs- 

 präparate wurden stets in Glyzerin eingeschlossen. Die Eisenfärbung 

 hält sich darin, besonders wenn keine Nachfärbung stattgefunden 

 hatte, recht lange Zeit unverändert. Erwähnt wird noch, daß Aus- 

 breitungspräparate nur von größeren Formen vorteilhaft herzustellen 

 sind. E. Schoehel {Neapel). 



Floyd , R., A contribution to the nervous cytology of 

 P e r i p 1 a n e t a o r i e n t a 1 i s , the common c o c k r o a c h 

 (Mark Anniversary Volume New York 190:3, Art. XVII 

 p. 341 — 357 w. 3 pl., Ref. n. Ref. in .Journ. Compar. Neurol. 

 and Psychol. vol. XIV, 1904, no. 3, p. 287—288). 

 Verf. hat eine Reihe von Versuchen über die Einwirkung von 

 verschiedenen Fixierungsmitteln auf den Bau der Nervenzellen aus 

 den Thorakalganglien von Periplaneta Orientalis angestellt. Nach 

 Fixierung in der Flüssigkeit von voi Rath, in Pikrinsäure-Formol, 

 in der Flüssigkeit von van Gehuckten, in Sublimatlösung und in 

 einer Chromsäure-Oxalsäuremischung zeigte sich eine mehr oder weniger 

 starke Schrumpfung des Zellplasmas und eine Veränderung des fei- 

 neren Baues. In allen Zellen dieser Präparate traten deutlich ein 

 zentraler, dunkel gefärbter, körniger Abschnitt und eine periphere, 

 von einem Fibrillennetzwerk gebildete Zone hervor. In den Nerven- 

 fasern zeigten die Fibrillen ebenfalls Anastomosen. Frische, lebende 

 Ganglienzellen nach Färbung mit Nissls Methylenblau in physiologi- 

 scher Kochsalzlösung zeigten nur eine geringe Schrumpfung- des Zell- 

 plasmas oder gar keine. Sie ließen durchaus keine Zellmembran 

 erkennen und zeigten auch nichts von den sich stark färbenden 




144 Referate. XXII, 1. 



Körnchen, die charakteristisch für das fixierte Gewebe sind, obgleich 

 die Fibrillennetze deutlich hervortraten. Diese normale Struktur zeigten 

 auch Zellen , welche durch Formoldämpfe fixiert , mit Methylenblau 

 gefärbt und mit Amraoniummolybdat fixiert worden waren. Verdünntes 

 Formol imd verdünnter Alkohol werden für größere Gewebestücke 

 empfohlen. Die chromophilen Körner der NissL-Substanz sind nach 

 Verf. nicht als ein normaler Bestandteil anzusehen , sondern treten 

 in dem Zellplasma erst als postmortale Veränderung auf oder wäh- 

 rend der Einwirkung der meisten Fixierungsmittel. Die NissL-Substanz 

 ist durch Färbung nicht darstellbar nach Behandlung der Zellen mit 

 Ätznatron, nach längerer Faradisation, wahrscheinlich auch nicht nach 

 Strychninvergiftung ; Arsenikvergiftung veranlaßt eine Zunahme der 

 Substanz. Scliiefferdecker {Bonn). 



Hoftendahl , K., Beitrag zur Entwicklungsgeschichte 

 und Anatomie von P o e c i 1 a s m a a u r a n t i u m Dar- 

 win (Zool. Jahrb., Abt. f. Anat. u. Ontogen. , Bd. XX, 

 1904, p. 363—398 m. 4 Tfln.). 

 Zur Untersuchung diente Material der deutschen Tiefsee-Expedi- 

 tion , das teils mit 80prozentigen Alkohol , teils mit SOprozentigem 

 Formol-Alkohol konserviert worden war. Mit beiden Methoden ist 

 aber keine sehr befriedigende Fixierung erzielt worden, wie be- 

 sonders die Untersuchung der jüngsten festsitzenden Cyprisstadien 

 und der histologischen Details ergab. Die Tiere wurden , eventuell 

 nach Entkalkung der Schalen mittels Pikrinsäure , in Nelkenöl auf- 

 gehellt und gezeichnet, dann in Paraffin eingebettet und in Schnitt- 

 serien zerlegt. Gefärbt wurde teils nach der Heidenhain sehen, teils 

 nach der van Gieson sehen Methode oder mittels Hämalaun. Die 

 Mundteile , Beine und der Penis wurden von einigen Exemplaren 

 abpräpariert und nach Aufhellung in Nelkenöl in toto in Kanada- 

 balsam eingeschlossen. E. Schoebel (Neapel). 



Heath, H., The Nervous System and Subr ad ular Organ 



in two Genera of Solenogastres (Zool. Jahrb., Abt. 



f. Anat. u. Ontogen., Bd. XX, 1904, p, 399—408 w. 1 plt.). 



Zur Fixation eignet sich vor allem 50prozentiger Alkohol , der 



nach ungefähr einstündiger Einwirkung allmählich auf 85 Prozent 



verstärkt wird. Dabei ist nur die Vorsicht zu gebrauchen, daß die 



Temperatur des schwachen Alkohols nicht die Temperatur von 15** C. 



übersteigt , um einer Mazeration vorzubeugen. Kommt es bei der 




XXII, 1. Referate. 145 



Fixation nicht auf die Erhaltung der Kalkstachehi an, können mit 

 Vorteil auch andere Fixierungsflüssigkeiten Verwendung finden. Formol 

 und Sublimat geben aber im besten Falle nur mittelmäßige Resultate, 

 gute dagegen Sublimat-Eisessig und das GiLSONSche Gemisch, ebenso 

 auch die FLEMMixGsche Flüssigkeit, abgesehen von der oft störenden 

 Schwarzfärbung der Gewebe. In mancher Beziehung verdient das 

 VOM RATiische Gemisch, vor allem bei Nachbehandlung der Objekte 

 mit einprozentiger Holzessiglösung, vor allen anderen Fixierungen den 

 Vorzug, hauptsächlich zur Untersuchung des Nervensystems. Für 

 die Färbung eignet sich Delafields Hämatoxylin und Heidenhains 

 Eisenhämatoxylin, kombiniert mit einer schwachen Rubinfärbung, am 

 besten. E. Schoebel {Neapel). 



J5. Wirbeltiere. 



Ziegler , K. , Histologische Untersuchungen über das 

 Ödem der Haut und des U n t e r h a u t z e 1 1 g e w e b e s 

 (Beitr. z. patliol. Anat. u. z. allgem. Pathol. Bd. XXXVI, 

 1904, H. .3, p. 435—505 m. 8 Figg. i. Text). 

 Die von menschlichen Leichen herrührenden Hautstüeke wurden 

 durchschnittlich 5 bis 12 Stunden nach dem Tode, einzelne auch 

 bald nach dem Tode, durch Einstichinjektion mit lOprozentiger Formol- 

 lösung fixiert, in Alkohol nachgehärtet und in Celloidin eingebettet. 

 Färbung der Scbnitte mit Hämatoxylin-Eosin, nach van Gieson, mit 

 polychromem Methylenblau und mit Eisenhämatoxylin und Nachfärbung 

 nach van Gieson (Maximow). Letztere Methode färbt die Zellkerne 

 und ihre Einschlüsse, die Zentrosomen (nur in lebend fixierten Zellen), 

 die elastischen Fasern und die Markscheiden der Nervenfasern schön 

 schwarz, die Fasern des Bindegewebes rot, uudißerenziertes Proto- 

 plasma graugelblich. Dieselbe scheint Verf. zur Unterscheidung der 

 fixen von den freien Zelleleraenten ganz unentbehrlich. Das poly- 

 chrome Methylenblau läßt die Beschaffenheit der Bindegewebszellen 

 deutlich hervortreten und färbt die Granula der EHRLicHScheu Mast- 

 zellen metachromatisch violettrot. Schiefferdecker (Bonn). 



Keinatll , K. Th. , t' b e r den mikroskopischen Nachweis 

 von Fett in normalen Muskeln (Inaug.-Dissertation 

 Tübingen 1904, 32 pp.). 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 1. 10 




146 . Referate. XXII, 1. 



Kleine Muskelstückcheu wurden in öprozentiger Formollösung 

 fixiert, ausgewaschen und mit dem Gefrierraikrotom geschnitten. Fär- 

 bung meist in TOprozentiger Alkoholsudanlösung , anfangs auch in 

 Natronlaugesudan. Letztere Methode wurde verlassen , da bei der 

 kurzen Färbezeit die Schnitte leicht überfärbt wurden und dann 

 Niederschlag eintrat. Durch TOprozentige Alkoholsudanlösung und 

 nachherige Kernfärbung mit Hämatoxylin konnte das Fett am deut- 

 lichsten sichtbar gemacht werden. Die primäre Osmierung hatte den 

 Vorteil, daß das Fett des Perimysiums, das beim Schneiden intensiv 

 schwarz war, nicht zu sehr über das Präparat verstreut wurde, doch 

 färbte sich das Fett um die Kerne der Muskeln von ausgewachsenen 

 Individuen nur sehr wenig, manchmal gar nicht. Dabei hatten die 

 Stücke so lange in Flemming scher Lösung gelegen, daß sie hinreichend 

 durchtränkt sein mußten. In so behandelten Schnitten färbte sich 

 das Fett nachträglich mit Sudan schwarzrot. Wo Verf. an dem- 

 selben Muskel auch noch die sekundäre Osmierung anwandte, färbten 

 sich die Fetttröpfchen an sehr wenig Stellen und blieben im übrigen 

 ungefärbt. Daß mit Sudan weit mehr Fetttropfen sichtbar gemacht 

 werden konnten, ist wohl darin begründet, daß dieses alles Fett 

 färbt, Osmiumsäure dagegen nur Ölsäure und Olein. 



Scliiefferdecker {Bonn). 



Weideureich , F. , Studien über das Blut und die blut- 

 bildenden und -zerstörenden Organe. 2. ISau 

 und morphologische Stellung der B 1 n 1 1 y ni p h - 

 drüsen (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXV, 1904, p. 1 — 77 

 m. 6 Figg. u. 5 THn.). 

 Die fraglichen Drüsen finden sich — Verf. untersuchte speziell 

 das Schaf — im retroperitonealen Fettgewebe abwärts von den 

 Nieren und am Beckeneingang, und zwar vorwiegend in nächster 

 Nähe der großen Gefäße. Auch im Mediastinalraum kommen sie 

 vor , aber nicht so zahlreich wie im Abdomen. Auffallend ist die 

 Inregelmäßigkeit ihres Vorkommens. Man kann oft viele Schafe 

 durchmustern, ohne an den Prädilektionsstellen irgendwelche zu finden. 

 Alter und Geschlecht ist dabei anscheinend ohne jeglichen Einfluß, 

 ebenso der Ernährungszustand des Tieres. Auch die Jahreszeit spielt 

 keine Rolle. Wie das Vorkommen variiert auch die Größe ; von 

 der Größe eines Stecknadelkopfes bis zu der einer Walnuß finden 

 sich alle Übergänge. Die Drüsen sucht man am besten am ge- 

 schlachteten und völlig entbluteten Tiere auf, nachdem der Darm 




XXII, 1. Referate. I47 



und seine Anhänge lierauspräpariert sind , die Nieren aber an Ort 

 und Stelle belassen wurden , und nimmt sie mit samt dem sie um- 

 gebenden Fett heraus. Vor dem Einlegen in die FixierungsHüssigkeit 

 ist es aber ratsam, das Fettgewebe abzupräparieren. Da die Kapsel 

 leicht einreißt , ist bei dieser Manipulation Vorsicht geboten. Als 

 ausgezeichnetes Fixationsmittel , das sowohl für das Studium der 

 gröberen wie der feineren Verhältnisse geeignet ist , empfiehlt sich 

 die ZENKERSche Flüssigkeit. Zur Färbung eignet sich besonders die 

 vom Verf. bereits für die Milz angegebene Dreifachfärbung mit 

 Hämalaun , Orange und Rubin S , speziell für die Darstellung des 

 Bindegewebes das MALLORYSche Hämatoxylin oder die Chromsilber- 

 methode nach Oppel, für elastische Fasern Resorcin-Fuchsin. Venen- 

 injektion mit Berlinerblau gelingt leicht , indem man mit einer 

 PRAVAz-Spritze in eine Drüse einsticht und die Farblösung einspritzt. 

 Es füllt sich dabei ohne weiteres die Vene der betreffenden Drüse 

 und von dieser aus die Vene der benachbarten. Will man für be- 

 stimmte Zwecke eine besonders sorgfältige Fixation erzielen, so kann 

 man auf gleiche Weise die Fixierungsflüssigkeit (Sublimat -Eisessig, 

 FLEMMiNGSche oder HERMANNSche Lösung) injizieren. Verhältnismäßig 

 schwierig ist die Injektion der Arterien, da dieselben so fein sind, 

 daß sie kaum mit bloßem Auge zu erkennen sind, und es also auch 

 unmöglich ist, eine Kanüle in sie einzuführen. Verf. verfuhr so, 

 daß er das retroperitoneale Fett von den Nieren abwärts bis zum 

 Rande des großen Beckens sorgfältig mit samt den Gefäßen heraus- 

 nahm, alle sichtbaren durchschnittenen Arterien unterband und dann 

 in die Aorta die Berlinerblaulösung einspritzte. Beim Unterbinden 

 übersehene Schnittstellen machen sich bald durch Auslaufen kennt- 

 lich und man kann nun leicht das Versäumte nachholen. So gelingt 

 es die kleinen, von der Aorta oder auch von der Arteria iliaca ab- 

 gehenden und in das Fettgewebe verlaufenden Arterien zu füllen. 

 Man sucht dann, die Abgangsstelle am Hauptgefäße auf, führt dort 

 eine feine Kanüle ein und spritzt jetzt von hier aus mit einer Pravaz- 

 Spritze die Farblösung ein. Ist die Injektion geglückt, so umschneidet 

 man die Drüse und bringt sie ohne weiteres in die Fixierungs- 

 fiüssigkeit. — 



Für das Aufsuchen der Drüsen bei kleineren Tieren empfiehlt 

 es sich , die Tiere durch Halsschnitt sich verbluten zu lassen und 

 dann nach Öffnung der Leibeshöhle sehr vorsichtig, ohne Verletzung 

 von Gefäßen , den Magen und die Gedärme zur Seite zu schlagen. 

 Man wird dann bei der Ratte z. B. die Drüsen leicht an der hin- 



10* 




148 Referate. XXII, 1. 



teren Fläche des Pankreas, sowie oberhalb der linken Nierenarterie 

 finden. E. Schoehel (Neapel). 



Galli, G. , Ein verbesserter Mischer zur Zählung der 

 Blutkörperchen (Münchener med. Wochenschr. Jahrg. LI, 

 1904, No. 13, p. 561 m. 1 Fig.). 

 Zur Verdünnung des Blutes wird bekanntlich ein Mischgefäß, 

 ein sogenannter Melangeur, verwendet. Da die jetzt vorhandene 

 Form dem Verf. nicht zu genügen schien, so hat er einen neuen 

 Apparat konstruiert, der mit einem Saugapparat versehen ist, welcher 

 die präziseste Aufsaugung ermöglicht, so daß die Verdünnung mit 

 Sicherheit jedesmal rasch und leicht gelingt. Verf. hat diesen neuen 

 Apparat mit einem Glasmantel umgeben ; der Kaum zwischen dem 

 Mantel und dem eigentlichen Apparat ist luftleer gemacht , wodurch 

 die Übertragung der Handwärme vermieden wird. Der Saugapparat 

 kann einmal durch eine Schraube feiner bewegt werden und ermög- 

 licht so eine sehr gleichmäßige und langsame Aufsaugung des Blutes, 

 es kann aber auch durch eine ziehende Bewegung die Flüssigkeit 

 rasch emporgehoben werden. Die Handhabung und Reinigung des 

 Instrumentes soll sehr einfach und bequem sein. Wegen des Näheren 

 der Konstruktion muß auf das Original und die dort gegebene Ab- 

 bildung verwiesen werden. Schiefferdecker {Boim). 



JoIIy, J. , Recherches experimentales sur la Division 

 indirecte desGlobulesrouges (Arch. d'anat. Microsc. 

 t. VI, 1904, fasc. 4, p. 455 — 6.-!2 av. 1 plches.). 

 Die Untersuchungen wurden ausgeführt an Triton cristatus, 

 palmatus , alpestris , puuctatus. Zwischen den einzelnen Arten be- 

 stehen keine wesentlichen Differenzen. Triton cristatus ist das be- 

 quemste Tier. Um Teilungen der Blutkörperchen zu erhalten , muß 

 man eine Blutregeneration herbeiführen. Man hat eine solche bis 

 jetzt durch Blutentziehung veranlaßt. Will man dieses Mittel z. B. 

 beim Frosche anwenden, so soll man wenigstens nicht ein Glied ab- 

 schneiden, sondern die Spitze einer Pipette in die Vena abdominalis 

 einführen. Verf. hat mit diesem Mittel bei Fröschen gute Resultate er- 

 halten. Bei Tritonen sind keine so großen Gefäße vorhanden, daß mau 

 dieses Verfahren verwenden kann. Verf. hat daher die Tiere mehrere 

 Monate lang hungern lassen und sie dann reichlich gefüttert. Die 

 Tiere halten das Hungern vorzüglich aus. Um sie am Leben zu 

 erhalten , legt man am besten auf den Grund einer tiefen Schale 




XXII, 1. Referate. 149 



gewaschene Kiesel und in die Mitte dieser ein Stück Ziegel. Man 

 gießt dann so viel Wasser zu, daß dieses bis an die Oberfläche des 

 Ziegels steigt und bedeckt dann die Schale mit einer Glasplatte, 

 doch so, daß noch Luft zutreten kann. Die Tiere magern während 

 der Sommermonate stärker ab als während der Wintermonate. Die 

 Männchen magern schneller ab als die Weibchen , besonders wenn 

 diese voll von Eiern sind. Man kann die Abmagerung beschleunigen, 

 wenn man den Tieren keine Steine gibt, auf denen sie außerhalb 

 des Wassers sich ausruhen können. Es schien dem Verf. aber, daß 

 die Tritonen, welche zu schnell abgemagert waren, später die Nahrung 

 weniger gut aufnahmen. Die Abmagerung kann einen sehr hohen 

 Grad erreichen , ohne den Tod zu veranlassen. Schließlich bleiben 

 die Tiere unbeweglich und können in diesem Zustande noch wochen- 

 und monatelang leben. Diesen äußersten Zustand der Abmagerung 

 darf man aber nicht eintreten lassen, denn solche Tiere nehmen die 

 Nahrung nicht mehr in richtiger Weise auf. Man erkennt den Grad 

 der Abmagerung am Anblicke des ganzen Körpers und besonders 

 des Schwanzes, der seine dorsalen und ventralen Verbreiterungen 

 verliert und sich der zylindrischen Form nähert. Dieses ist ein 

 gutes Kennzeichen für den Grad der Ernährung. Am besten fängt 

 man die Tritonen im Frühjahre (Februar, März, April) und läßt sie 

 hungern, man kann sie dann von Ende Juni bis in den November 

 hinein verwenden. Tritonen, welche im Juni oder Juli gefangen sind, 

 kann man von September bis Februar brauchen. Um sie zu füttern, 

 setzt Verf. die Tiere in eine hinreichend breite Schale mit Larven 

 von Chironomus. - Zuerst füllt sich nun der Darmkanal, dann tritt 

 eine Abschuppuug der Haut ein, welche das sichere Kennzeichen ist, 

 daß ein lebhafter Stoffwechsel eingetreten ist (gewöhnlich 48 Stunden 

 nach der ersten Mahlzeit), dieselbe setzt sich, wenn auch weniger 

 deutlich, fort. Etwa 10 bis 12 Tage nach dem Beginne der Fütte- 

 rung treten die ersten Mitosen in den roten Blutkörperchen auf. 

 Verf. hat vergleichsweise das fixierte und gefärbte Blut und das 

 frische und lebende Blut untersucht. Um Präparate von fixiertem 

 Blute herzustellen, breitet Verf. das Blut auf einem Deckgläschen 

 dadurch in dünner Schicht aus, daß er mit dem Rücken eines anderen 

 Gläschens darüberfährt 5 dann wird das frische Blut sofort fixiert, 

 entweder mit Sublimat oder noch besser mit der folgenden modifi- 

 zierten Flemming sehen Lösung, bei der der Essigsäuregehalt herab- 

 gesetzt ist: 




150 Referate. XXII, 1. 



Chromsäure, einprozentige Lösung .... 30 Vt. 

 Osmiumsäure, einprozentige Lösung .... 15 „ 

 Essigsäure 05 „ 



Dauer der Fixierung 10 Minuten, doch kann mau ohne Schaden die 

 Präparate 24 Stunden und länger in der Fixierungsflüssigkeit lassen. 

 Das Fixierungsmittel wirkt wie eine Beize, welche die Färbung be- 

 günstigt. Nach sorgfältigem Auswaschen in fließendem Wasser oder 

 in einer größeren Menge öfters gewechselten Wassers kann man mit 

 den meisten Farbstoff'en färben. Am günstigsten erwiesen sich : 

 Thionin, Safraniu mit nachfolgender Färbung in der Benda sehen 

 Mischung oder ohne solche, Eisenhämatoxylin nach Heidenhain. So 

 erhält mau ausgezeichnete Kernteilungsfiguren. Benutzt man eine 

 FLEMMiNüSche Lösung ohne Essigsäure, also eine Chrom -Osmium- 

 mischung, so erhält man ziemlich gute Resultate in bezug auf die 

 Fixierung des Hämoglobins und des Kernes, doch ist dieser natürlich 

 nicht so gut fixiert, als wenn man Essigsäure mit verwendet. — 

 Um Blut von Triton zu erhalten , kann man entweder den Schwanz 

 an seiner Basis abschneiden, oder man kann das Blut dem Herzen 

 entnehmen (bedeutend besser). Man muß möglichst reines Blut 

 nehmen, ohne Beimischung von Gewebssäften, wodurch die Gerinnung 

 beschleunigt wird. Verf. schneidet daher die Spitze des Herzens ab 

 und führt eine Pipette ein. — Um das frische Blut zu studieren, 

 kann man verschieden verfahren. Am einfachsten nimmt man einen 

 Objektträger, der mit zwei kleinen Paraffinstreifen versehen ist, auf 

 welche später das Deckglas gelegt wird: das Blut ist vor Druck 

 geschützt und um den Blutstropfen verbleibt eine gewisse Luftmenge. 

 Man schließt mit Paraffin ein. Der Blutstropfen muß abgerundet im 

 Zentrum liegen. Verf. hat weiter die feuchte Kammer benutzt mit 

 hängendem Tropfen. Hier stört die Menge der Blutkörperchen, 

 jedenfalls darf man nur die Randpartieen untersuchen, außerdem 

 bewegen sich die Körperchen stets etwas. Verf. gibt der ersteren 

 Methode den Vorzug. — Um die Blutkörperchen bei höheren 

 Temperaturen zu studieren, hat Verf. sich der Apparate von Malassez 

 und Regaud bedient. Schiefferdecker {Bonn). 



Helber , E. , Über die Zählung der Blutplättchen im 



Blute des Menschen und ihr ^' e r h a 1 1 e n bei 



pathologischen Zuständen (Deutsches Arcli. f. klin. 



Med. Bd. LXXXI, 1904, H. 3, 4, p. HIG— 327). 



Die Angaben über die Zahl der Blutplättchen lauten bis jetzt 




XXII, 1. Referate. 151 



sehr verschieden. Dies kann an unregelmäßigen Schwankungen der 

 Plättchenzahl liegen, es kann aber auch daran liegen, daß man noch 

 nicht darüber einig ist, welche Gebilde als Plättchen aufgefaßt werden 

 sollen. Durch die neueren Arbeiten von Dekhuyzen und Deetjen 

 wurde die Zellnatur und das Vorhandensein eines Kernes festgestellt, 

 durch Kopsi'H wurden diese Annahmen bestätigt. Will man bei einer 

 Zählung nur die diesen Bedingungen entsprechenden Plättchen zählen, 

 so sind alle die Umstände auszuschalten, durch die eine Veränderung 

 des Blutes während der Entnahme und der Anfertigung des Präpa- 

 rates entstehen kann. Denn Veränderungen der Erythrocyten und 

 Leukocyten führen zu Abschnürungen von Teilen derselben und diese 

 können dann mit den eigentlichen Plättchen die grüßte Ähnlichkeit 

 haben, eine so große Ähnlichkeit, daß selbst Forscher wie Arnold 

 und seine Schüler sie mit den früher von Bizzozeko beschriebenen 

 Plättchen völlig identifizieren. Durch physikalische Veränderungen 

 des Blutes, z. B. durch eintretende Gerinnung, treten die sogenannten 

 Arnold sehen Körperchen aus den roten Blutkörperchen aus. Auch 

 die Blutstäubchen sind nicht unter die Blutplättchen zu rechnen. 

 Früher wurde das Verhältnis der Plättchen zu den roten Blutkörper- 

 chen in frischen oder in Trockenpräparaten bestimmt und daraus 

 die Plättchenzahl ausgerechnet. Dies ist neuerdings sehr erleichtert 

 worden durch die Entdeckung Deetjen s von der Bedeutung des 

 Natriummetaphosphats für die Erhaltung der Plättchen , die extra- 

 vasculär sehr labiler Natur sind. Aber auch hierbei sind noch 

 Schwierigkeiten und Unsicherheiten vorhanden. Die Zahl der Plättchen 

 ist immer weseaitlich (etwa lömal) kleiner als die der roten Blut- 

 körperchen, man muß also, um eine ausreichende Zahl der Plättchen 

 zu bekommen, sehr viele Erythrocyten zählen. Ferner hat das Mischen 

 von Blut- und Salzlösung durch Verreiben auf dem Objektträger 

 mittels Platinöse ebenfalls seine Nachteile , da es nicht leicht ist, 

 eine gleichmäßige Verteilung zu erzielen. Die Zählung mittels der 

 Thoma-Zeiss sehen Kammer ergab keine besseren Resultate. Zwar 

 läßt sich das Haften der Plättchen am Glase verhindern, wenn man 

 mit gereinigten Gläsern und schnell arbeitet. Aber die gewöhnlichen 

 Kammern sind so hoch , daß die Plättchen sich bei ihrer Kleinheit 

 in den verschiedenen Höhenschichten verteilen und somit nur ein Teil 

 auf den Boden der Kammer zu liegen kommt. Das Aufsuchen der 

 in verschiedenen Höhenlagen schwimmenden Plättchen mittels der 

 Mikrometerschraube , besonders in den oberen Teilen der Kammer, 

 wobei die Kammerstriche anfangen unsicher zu werden , macht die 




152 Referate. XXII, 1. 



Zählung sehr unsicher. Erschwert wird sie ferner dadurch , daß 

 wegen des großen Abstandes des Deckgläschens von dem Quadrat- 

 netze stärkere Objektive wegen ihres geringen Fokalabstandes nicht 

 anwendbar waren. Will man aber die Plättchen als solche sicher 

 erkennen und von andern Gebilden des Blutes, insbesondere den Ab- 

 kömmlingen der roten Blutscheiben sicher unterscheiden, so ist min- 

 destens eine Vergrößerung von 500 nötig. Nach vielem Probieren 

 erwies sich das folgende Verfahren als bi*auchbar : Die Firma C. Zeiss 

 fertigte eine Zählkammer von 0*02 mm Höhe an. Sonst gleicht diese 

 vollkommen der gewöhnlichen 0*1 mm hohen Kammer zur Blut- 

 körperchen-Zählung. Bei dieser neuen Kammer fällt die lästige Durch- 

 musterung der verschiedeneu Höhenlagen fast weg. Wenn man das 

 O'l mm dicke Deckgläschen von Zeiss verwendet, so können auch 

 stärkere Objektive benutzt werden. Zweckmäßig erwiesen sich die 

 Wasserimmersion D und das Trockensystem E. Bei Verwendung 

 des Kompensationsokulars 12 konnten dann Vergrößerungen bis zu 

 1080 erzielt werden. Diese reichten bei guter Beleuchtung voll- 

 kommen aus , um die Plättchen sicher zu erkennen und von allen 

 andern Gebilden ohne Schwierigkeit zu unterscheiden. Meistens wurde 

 mit E und Kompensationsokular 6 gearbeitet. Das Blut wurde aus 

 dem vorher mit Alkohol und Äther gereinigten Ohrläppchen ent- 

 nommen und in einem Mischer (Verdünnung 1 : 31), der mit Salpeter- 

 säure, Wasser, Alkohol, Äther sorgfältig gereinigt war, bis zur 

 Marke 1 aufgesogen und weiter schnell durch eine lOprozentige 

 Natriummetaphosphatlösung bis zur Marke 31 verdünnt. Der Mischer 

 wurde geschüttelt und sofort ein kleiner Tropfen auf den Boden der 

 Kammer gebracht. Wenn die Mischung in der Ampulle bei durch- 

 fallendem Lichte hell und bei auffallendem stark lichtreflektierend 

 ist, so ist das Präparat meist gut (Deckfarbe). Eine Mischung, die 

 Lackfarbe zeigt, ist stets unbrauchbar. Werden beim Einstechen in 

 das Ohrläppchen Quetschungen vermieden, und sind die Gläser immer 

 sauber, so werden stets brauchbare Bilder erzielt. Die Metaphosphat- 

 lösung ist sehr wenig haltbar, so daß sie am besten ungefähr alle 

 3 Tage neu bereitet und vor dem Gebrauche filtriert wird. Das in 

 dieser Weise zubereitete Präparat soll das folgende Bild zeigen : Die 

 roten Blutkörperchen liegen völlig intakt, mit Delle versehen, neben- 

 einander auf dem Boden der Kammer, keine Geldrollenbildung; 

 zwischen den roten Blutscheiben liegen ziemlich gleichmäßig verteilt 

 rundliche oder ovale, stärker lichtbrechende, mit dunkleren Stellen, be- 

 sonders an den Randpartien , versehene , völlig farblose Körperchen 




XXII, 1. Reteiate. 153 



von etwa ein Drittel der Größe der roten Blutkörperchen. Sie liegen 

 einzeln oder zu zweien, dreien, jedoch deutlich voneinander abgrenz- 

 bar. Man sieht auch größere Plättchen von etwa der halben Größe 

 der roten Blutscheiben , die sich wohl in gequollenem Zustande be- 

 finden. Nicht sämtliche Plättchen sind rund oder oval , ein Teil, 

 besonders wenn eine leichte Beschädigung stattgefunden hat, ist un- 

 regelmäßig zackig. Leukocyten sind bei der Kleinheit der Kammer 

 nur in kleiner Anzahl vorhanden. Hat das Blut Schaden gelitten, 

 so kann man sehr gut Abschnürungsprodukte von den Erythrocyten 

 beobachten ; diese sind dann rund und kugelig, der größte Teil zeigt 

 auch, wenigstens im Anfange noch, deutlich Hämoglobinfarbe. Solche 

 Präparate sind von der Zählung stets auszuschließen , ebenso die- 

 jenigen, in denen die Plättchen deutliche Haufen über 6 bis 8 bilden 

 oder die roten Blutkörperchen agglutiniert sind. Man kann somit in 

 der Kammer gleichzeitig Erythrocyten , Plättchen und Leukocyten 

 zählen. Die Zahl der letzteren ist wegen der Kleinheit der Kammer 

 etwas ungenau. Schiefferdeclxer (Bonn). 



Meyburg , H. , Beitrag zur Kenntnis des Stadiums der 

 „primären in toto konzentrischen" Knochen- 

 bildung (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXIV , 1904, 

 p. 627—652 m. 8 Figg.). 

 Als Material zu den anzufertigenden Schliffen dienten Knochen 

 vom Rind, Schaf, Kamel, Pferd und Ziege. Es wurden teils mace- 

 rierte Knochen verwandt, teils solche, die, nachdem sie etwa 3 Wochen 

 in 4prozentiger i'ormoUösung und darauf in 96prozentigem Alkohol 

 gelegen hatten, getrocknet worden waren. Die mit der Säge her- 

 gestellten Knocheuscheiben wurden zunächst mittels Feilen zu dünneu 

 Lamellen bearbeitet und dann erst fertig geschliften und poliert. 

 Diese Methode gestattet ein außerordentlich schnelles Arbeiten und 

 die Anfertigung großer Übersichtsschliffe. Geschliffen wurden fast 

 durchweg Metacarpi und Metatarsi , und zwar quer , radial und 

 tangential. E. Schoebel {Neapel). 



Borchert, M., Über Markscheidenfärbung bei niederen 



Wirbeltieren (Verhandl. der Berliner Physiol. Ges. Sitz. 



6. Mai 1904, Arch. f. Anat. u. Physiol. 1904, Physiol. Abt., 



H. 5, 6, p. 572—575). 



Die Osmiumsäure wird, wie Max Schul tze zuerst gezeigt hat, 



durch das gesamte Gewebe des Zentralnervensystems reduziert. Die 




154 Referate. XXII, 1. 



intensivste Reduktion erfolgt in den Marlcsclieiden der marklialtigen 

 Nervenfasern. Aus dem zwischen den marklialtigen Nervenfasern 

 gelegenen Gewebe lassen sich die Osraiumsäure-Reduktiousprodukte 

 durch DifFerenzierungsflüssigkeiten (am besten durch die von Pal an- 

 gegebene Ditfereuzierung mittels Kali liypermanganicum und darauf 

 folgende Behandlung mit Kali oxalicum und Kali sulfuricum) voll- 

 ständig entfernen, so daß die markhaltigen Nervenfasern schwarz auf 

 weißem Grunde liegen. Für die systematische Untersuchung der 

 Hirnfaserung ist die Osmiumsäure nur von Exner und Tuczek ange- 

 wendet worden. Für die Hirnfaseranatomie der niederen Wirbeltiere 

 ist sie niemals angewendet worden, obwohl die Gehirne hier so klein 

 sind, daß sie sich anwenden ließe. Bei niederen Wirbeltieren ist 

 aber die Weigert sehe Markscheidenfärbung oft mit größeren Schwierig- 

 keiten verbunden. Nur eine viele Monate währende Vorbehandlung 

 mit MtJLLERScher Flüssigkeit läßt gute WEioERT-Präparate erhotfen, 

 und auch dann ist der Erfolg noch unsicher. Noch schwieriger liegt 

 die Sache bei jugendlichen, noch nicht markreifen Gehirnen niederer 

 Wirbeltiere. Die Chromhämatoxylinlacke werden bei der Weigert- 

 sclien Methode in dem zwischen den markhaltigen Nervenfasern ge- 

 legeneu Gewebe mit besonderer Zähigkeit festgehalten und lassen 

 sich selten ohne schwere Schädigung der Faser daraus entfernen. 

 Dem gegenüber gelingt es hier, mit der Osmiumsäurebehandlung in 

 3 bis 4 Tagen lückenlose Serien von Markscheidenpräparaten zu er- 

 halten , die hinter den schönsten WEiGERx-Präparaten nicht im ge- 

 ringsten zurückstehen. Diese Methode ist dabei ungemein einfach, 

 versagt nie und eignet sich in gleicher Weise für jugendliche wie 

 für erwachsene Gehirne. Im Gegensatze zu der WEiGERT-Methode 

 leidet sie unter der Paraffineinbettung nicht, gestattet also die Her- 

 stellung auch feinster Schnitte. Ein weiterer Vorzug der Osniium- 

 methode ist die Möglichkeit der Stückfärbung des Gehirns. Methode: 

 Die Gehirne, die dem Verf. in lOprozentiger Formollösung von der 

 zoologischen Station in Neapel zugesandt waren , wurden in .3 mm 

 dicke Scheiben zerlegt. Diese kommen für 24 Stunden in ein- 

 prozentige Osmiumsäurelösung , dann für mehrere Stunden in destil- 

 liertes Wasser, steigenden Alkohol, werden in Paraffin eingebettet und 

 geschnitten. Schon jetzt zeigen die Präparate einen schönen Kontrast 

 zwischen grauer und weißer Substanz. Solche Präparate geben eine 

 Kontrolle dafür ab , ob und in wie weit durch die Differenzierung 

 markhaltige Nervenfasern zerstört werden. Eine solche Kontrolle 

 kann in Fällen von pathologischem Faserausfall von großer Bedeutung 




XXII, 1. Referate. I55 



werden. Eine solche Kontrolle fehlt bei der Weigert sehen Methode. 

 Die übrigen Schnitte werden nach Pal dilierenziert, d. h. sie kommen 

 für wenige Sekunden in eine O"2.5prozentige Lösung von Kalium 

 In-perraanganicum, werden dann kurz abgespült und kommen für kurze 

 Zeit in eine Lösung von: 



Acid. oxal lü 



Kalium sulf. 1-0 



Destilliertes Wasser 200-0 



Nach beendigter Differenzierung mehrstündiges oder noch längeres 

 Auswaschen in häufig gewechseltem oder fließendem Wasser, damit 

 auch die kleinsten Spuren von Diflerenzierungsflüssigkeit entfernt 

 werden. Dann Entwässerung, Aufhellung, Kanadabalsam. Verf. ist 

 nach seinen Untersuchungen der Meinung, daß die Osmiumsäure- 

 behandlung für die systematische, faseranatoraische Untersuchung des 

 erwachsenen und fötalen Selachiergehirns (hierauf beziehen sich bisher 

 die Untersuchungen) die Markscheidenfärbung von Weigert-Pal völlig 

 ersetzt und wesentliche Vorzüge vor ihr Ijat. Der einzige Nachteil 

 dieser Methode ist der, daß sie auf kleinere Gehirne beschränkt ist. 

 Frisches Torpedogehirn direkt mit Osmiumsäure behandelt zeigte eine 

 ebenso gelungene Markscheidenfärbung , wie das zuerst mit Formol 

 behandelte , nur zeigen die Präparate , bevor sie difterenziert sind, 

 einen weniger scharfen Kontrast zwischen grauer und weißer Sub- 

 stanz, da die zwischen den markhaltigen Nervenfasern gelegene 

 Substanz stärker mit gefärbt ist. ScMe ff er decket' (Bonn). 



Cajal, S. ß., Das Neurofi brillenne tz der Retina (Intern. 

 Monatsschr. für Anat. u. Physiol. Bd. XXI, H. 4—8, 1904, 

 p. 369—396 m. 1 Tfl.). 

 Die Silbermethode von Cajal ist schon in dieser Zeitschrift aus- 

 führlich mitgeteilt worden; Cajal gibt in der vorliegenden Arbeit 

 nur eine kurze Mitteilung darüber, in welcher Weise seine Methode 

 speziell für die Retina anzuwenden ist. 1. Methode: 1. Frische Stücke 

 von Netzhaut und Sclera werden drei Tage lang im Wärmeofen bei 

 30bis3.T^ C. in einer l"5prozentigen Lösung von Silbernitrat ge- 

 lassen. (Man kann auch Lösungen von 0'75 bis 3 Prozent verwenden.) 

 2. Waschen in destilliertem Wasser wenige Sekunden und Einlegen 

 für 24 Stunden in folgende Mischung: Dest. Wasser 100 cc, Hydro- 

 chinon oder Pyrogallussäure 1 g, Formol h bis 10 cc. 3. Auswaschen 

 der Stücke in dest. Wasser wenige Minuten , steigender Alkohol, 




156 Referate. XXII, 1. 



Celloidin , Origanumöl , Xylol-Damar. Die Imprägnation betrifft ge- 

 wöhnlich alle Zellen, welche ein differenziertes Neurofibrillennetz be- 

 sitzen. Doch trifft man auch Stellen , an welchen nur eine Zellart 

 oder nur einige Zellen gefärbt sind , solche sind besonders geeignet 

 zu einer genauen Untersuchung. Je länger die Stücke im Ofen bleiben, 

 desto größer ist die Gefahr, Imprägnationen ohne Kontrast zwischen 

 Grund und Fibrillen zu erhalten. Im allgemeinen ist bei einer Tem- 

 peratur, welche nicht über 32° C. hinausgeht, die Reife der Stücke 

 (Zeitpunkt des größten Kontrastes) zwischen dem 3. und 4. Tage er- 

 reicht. Starke Silberlösungen (3 Prozent) ergeben eine sehr gute 

 Fixierung, aber geringere Kontraste als weniger starke Lösungen 

 (1 bis 1*5 Prozent). Die 0'75prozentige Lösung ergibt eine sehr 

 intensive und kontrastreiche Färbung des Netzes , jedoch schrumpft 

 das Protoplasma zu sehr, so daß oft eine Lücke zwischen Zellmem- 

 bran und Neurofibrillenplexus entsteht. Deshalb hat Verf. hauptsäch- 

 lich Lösungen von 1'2 oder 1'5 Prozent verwendet, namentlich bei 

 der dünnen Netzhaut von Kaninchen und Meerschweinchen. Dicke 

 Retinae, welche eine große Menge von Silbernitrat absorbieren, ver- 

 langen , wenn die Flüssigkeitsmenge nicht groß ist , höhere Konzen- 

 tration. 2. Methode: F i x i e r u n g d u r c h A m m o n i a k a 1 k o h o 1. 

 Zur Färbung der großen Netzhautzellen der großen Säugetiere (Hund, 

 Schaf, Pferd etc.). 1. Die Netzhautstücke kommen für 24 Stunden 

 in eine Mischung von 50 cc Alkohol von 96 Prozent und 5 Tropfen 

 Ammoniak. 2. Abspülen einige Sekunden in destilliertem Wasser und 

 Einlegen in eine einprozentige Lösung von Silbernitrat auf ungefähr 

 4 Tage (Ofen, 30 ° C). 3. Reduktion, Härtung, Einbettung etc., wie 

 bei Methode 1. Verf. setzt manchmal der Fixierungstlüssigkeit 5 Teile 

 Glyzerin auf 100 Teile Flüssigkeit zu: es scheint dies den Grund 

 durchsichtiger zu machen. Wenn man dem Reduktionsbade 20 Teile 

 Alkohol von 96 Prozent auf 100 cc zusetzt, scheint der Unterschied 

 zwischen dem Grunde und den Neurofibrillen etwas größer zu werden. 

 Bei dieser Methode der alkalischen Fixierung färben sich hauptsäch- 

 lich die großen Ganglienzellen und die Horizontalzellen oft schokoladen- 

 braun ; für die mittleren und kleinen Ganglienzellen ist diese Methode 

 nicht so gut wie die vorige. Es scheint, daß das Fibrillennetz der 

 kleinen Zellen durch die alkalische Flüssigkeit verändert wird, denn 

 es nimmt das Silber oft nicht an. Diese beiden eben empfohlenen 

 Methoden ergeben auch bei Nervenzentren gute Resultate, wenn man 

 das Silber einen oder 2 Tage länger einwirken läßt. Verf. hat ferner 

 oft zugleich mit den Zellen der Netzhaut sehr gute Färbungen der 




XXII, 1. Referate. 157 



Neurofibrillen in den motorischen Nervenendigungen der Augenmuskeln 

 (junge Kaninchen, einige Tage alte Sperlinge etc.) sowie der elasti- 

 schen Fasern und der Muskelfasern erhalten. In den Muskelfasern 

 sieht man außer den dunklen Querstreifen ein interfibrilläres Netz, 

 welches wahrscheinlich dem Sarkoplasma entspricht. Die Theorie 

 dieser Methode ist noch nicht klar. Der schwierigste Punkt der 

 Imprägnation ist die Feststellung der Reifezeit der organischen Silber- 

 verbindung. Man muß in jedem einzelnen Falle die günstigste Zeit 

 für die Reduktion feststellen. Die Einwirkung der Wärme ist wohl 

 vergleichbar dem Einflüsse des Lichtes auf die Photographie. Trotz 

 der Einfachheit der Methode und ihrer konstanten Resultate sind nicht 

 alle Präparate gleich gut in bezug auf die Schärfe der Neurofibrillen 

 und die Vollständigkeit der Färbung. Diese Verschiedenheiten hängen 

 zweifellos ab von der Art des Tieres, seinem Alter (bei jungen Tieren 

 ist die Reaktion gewöhnlich stärker) und noch von verschiedenen 

 anderen bisher unbekannten Dingen. Schiefferdecker (Bonn). 



Hardesty, I., On the Development and Nature of the 

 Neuroglia (Amer. Journ. Anat. vol. III, 1904, no. 3, 

 pp. 229—268 w. 5 pltes.). 

 Untersucht wurde an Schweineembryonen. Fixiert wurde in der 

 Flüssigkeit von Carnoy. Paraffinschnitte, Färbung mit Hämatoxylin 

 und Congorot , welch letzteres die Zellgrenzen sehr gut hervortreten 

 läßt, ferner mit der Neurogliamethode von Benda nach der Modifikation 

 von Huber. Für fibröses Bindegewebe wurde oft die Methode von 

 Mallory verweiulet. Zur Vergleichung und Kontrolle wurde die 

 Silbermethode benutzt, die bei Tieren unter 10 mm Länge keine 

 Resultate ergab. Es wurde die schnelle GoLC4ische Methode ver- 

 wendet und Silberimprägnation nach Formalinhärtung. Nach der 

 nötigen Übung gelang es, bei Tieren über 10 mm erfolgreiche Fär- 

 bungen zu erhalten und auch bei jüngeren waren. die Resultate be- 

 friedigend. Auch die Pankreatin -Verdauungsmethode wurde benutzt; 

 die jüngsten hierzu verwendeten Stadien maßen 15 mm. Zur Zeit 

 des Beginns der Markreife wurde Osmiumsäure verwendet. Durch 

 die Benda sehe Neurogliafärbung werden die Neurogliafasern und das 

 Kernchromatin tief blau gefärbt. Die gewöhnliche Beschreibung der 

 Neuroglia bezieht sich eben nur auf Fasern, welche sich blau zu 

 färben vermögen. Es ist dabei aber wohl möglich, daß nur die voll 

 entwickelten Fasern diese Fähigkeit besitzen. Andere Formen des 

 nicht nervösen Gewebes des Rückenmarks werden braunrot oder in 




158 Referate. XXII, 1. 



versehieclenen Nuancen von rosa (pink) gefärbt. In den frühen Ent- 

 wicklungsstadien des Schweines, bevor die Neurogliafasern entwickelt 

 sind, färben sich die Kerne allein blau. Das allgemeine spongio- 

 blastische Gewebe wird hinreichend rötlich gefärbt, um Struktur 

 und Anordnung zu erkennen, Zellgrenzen treten dabei aber nicht 

 hervor. Es wurden daher in diesen Fällen noch andere Methoden 

 angewendet. Bei der erwachsenen Neuroglia dagegen übertriftt die 

 Methode von Benda alle anderen in bezug auf klare Darstellung der 

 Details der Neurogliafasern und Schärfe des Kontrastes. 



Schiefferdecker {Bonn). 



Rubaschkill, W., Studien über Neuroglia (Arch. f. mikrosk. 

 Anat. Bd. LXIV, 1904, p. 575—626 m. 4 Tfln.). 

 Mit der WEiGERTSchen Methode konnte Verf. keine befriedigen- 

 den Resultate erhalten, da ihm kein vollständig frisches Material vom 

 menschlichen Gehirn zur Verfügung stand ; zu befriedigenden Resul- 

 taten aber führte folgende Methode, die auch zur Untersuchung der 

 Glia im Gehirn von Tieren verwendbar ist. Besonders gute Resul- 

 tate gibt das Katzengeliirn. Für das Gelingen der Methode wesent- 

 lich ist die Injektion der Gehirngefäße mit der fixierenden Flüssigkeit. 

 Diese wird an dem frischen mittels Chloroform getöteten Tier durch 

 die Aorta oder Art. carot. comm. oder sonst geeignetes Gefäß aus- 

 geführt. Als tauglich für die Weiterbearbeitung sind nur diejenigen 

 Hirnbezirke anzusehen , welche von der fixierenden Flüssigkeit ge- 

 troffen, d. h. deutlich gelbgrün gefärbt sind. Die fixierende Flüssig- 

 keit besteht aus : 100 Teilen 2'5prozentiger Lösung von doppelchrom- 

 saurem Kali , 0*5 bis 1 Teil neutrales essigsaures Kupfer , 2"5 bis 

 3 Teilen Eisessig und 10 Teilen käufliches Formol. Die Menge des 

 Kupfersalzes wie die der zu seiner Auflösung notwendigen Essigsäure 

 muß nach Art und Alter des Tieres etwas geändert werden. Für 

 junge und kleine Tiere nimmt man 0"5, für alte und große 1, und 

 für Katzen von mittlerem Alter 0*75 Teile des ersteren. Die fixierende 

 Flüssigkeit wird folgendermaßen zubereitet: Der siedenden Lösung 

 von doppelchromsaurem Kali wird das fein pulverisierte essigsaure 

 Kupfer und dann die zur Lösung dieses Salzes notwendige Menge 

 Essigsäure (aber nicht mehr als 3 Teile) zugesetzt. Nach höchstens 

 5 bis 10 Minuten langem Kochen klärt sich die Flüssigkeit und 

 wird grün. Ist die Flüssigkeit aus irgendeinem Grunde nicht klar 

 geworden, so muß sie filtriert werden. In diesem Zustande ohne 

 Formol kann die Flüssigkeit beliebig lange aufbewahrt werden. Das 




XXII, 1. Referate. IfjO 



Formol setzt man immer erst unmittelbar vor dem Gebrauch zu. Vor 

 der Injektion wird die zu benutzende Flüssigkeit zur Hälfte mit 

 Wasser verdünnt und, auf 37 bis 38 '^ C. erwärmt, in einer Menge 

 von 200 bis 1000 cc — je nach der Größe des Tieres und der Injek- 

 tionsstelle — eingespritzt. Nach 10 Minuten werden nach Eröffnung 

 des Schädels die zur Untersuchung tauglichen Teile des Hirns aus- 

 geschnitten und in die unverdünnte Fixierungsflüssigkeit von 35 bis 

 40° C. für 5 bis 7 Tage eingelegt. Die ersten 4 Tage muß die Flüssig- 

 keit gewechselt werden. Nach beendeter Fixierung werden die Objekte, 

 ohne vorher mit Wasser abgespült zu werden, leicht mit Fließpapier 

 abgetrocknet, dann für 6 bis 12 Stunden in 95prozeutigem Alkohol 

 entwässert und schließlich in gewöhnlicher Weise in Paraffin ein- 

 gebettet. Celloi'dineinbettung ist nicht rätlich, da durch sie die Färbung 

 sehr erschwert wird. Wenn möglich sollen auch die Paraffinschnitte 

 nicht aufgeklebt werden, sondern die vom Paraffin befreiten Schnitte . 

 in Schalen gefärbt werden. Die P^ärbung stellt eine Modifikation 

 der Weigert sehen Fibrinfärbung dar. Die nicht aufgeklebten Schnitte 

 werden 6 bis 12 Stunden (die aufgeklebten 3- bis 4mal länger) 

 in einer gesättigten wässerigen Lösung von Methyl-Violett B oder 

 20 bis 30 Minuten in einer Mischung aus 3 Teilen gesättigter alko- 

 liolischer Lösung der gleichen Farbe und 1 Teil Anilinwasser ge- 

 färbt. Wässerige Lösungen geben eine zartere Färbung, Anilin- 

 lösungen dagegen nicht selten reichlichen Niederschlag auf den 

 Präparaten. Ganz im allgemeinen ist es angebracht auf etwa 

 5 cc Farblösung einige Tropfen einer öprozentigen Oxalsäurelösuug 

 zuzusetzen. Die gefärbten Schnitte kommen nach gründlichem 

 Abspülen in Wasser für Ya '^^'' ^'"® Minute in eine Jod -Jod- 

 kaliumlösung (Jod 1, Jodkalium 2, Wasser 300), werden dann 

 wieder abgespült, dann ^i '*'s ^^ Minute lang in 95prozentigem 

 Alkohol entwässert und schließlich in Nelken- oder Anilinöl differen- 

 ziert. Ersteres dürfte im allgemeinen vorzuziehen - sein , weil es die 

 Farbe weniger energisch auszieht, und die Differenzierung so leichter 

 zu überwachen ist. Meist können die Schnitte ohne Nachteil sogar 

 einige Stunden im Nelkenöl verbleiben. Tritt gelegentlich im Nelkenöl 

 keine genügende f^ntfärbung ein, dann ist dieselbe doch meist noch 

 mit Anilinöl leicht zu erzielen. Bei dieser Färbemethode nehmen die 

 Gliafasern eine gesättigte violette Farbe an, das Zellprotoplasma 

 färbt sich heller. In den Nervenzellen färben sich die Kerne und 

 die NissL sehen Schollen. Die Nervenfasern bleiben ungefärbt, ebenso 

 die Pia mater und das Bindegewebe. Zum Schluß ist noch zu er- 




160 Referate. XXII, 1. 



wähnen , daß in einigen Hirubezirken , nämlich in der Groß- und 

 Kleinliirnrinde, meist nur ungenügende Färbung zu erreichen ist. 

 Leicht und mit größter Regelmäßigkeit färbt sich die Neuroglia im 

 Rückenmark , in der Medulla oblongata , im Hirnstamm und in der 

 Umgebung der Ventrikel. E. Schoebel {Neapel). 



Pinkus, F., Über Hautsinnesorgane neben dem mensch- 

 lichen Haar (Haarscheiben) und ihre ver- 

 gleichend-anatomische Bedeutung (Arch. f. mi- 

 krosk. Anat. Bd. LXV, 1904, p. 78 — 95 m. 2 Ttln.). 

 Zur Untersuchung des nervösen Teiles der in Frage stehenden 

 Gebilde dienten anfangs Gold- und Golgi- Präparate , welche aber 

 nur mäßige , teils lückenhafte , teils nicht einwandsfreie Resultate 

 ergaben. Bessere Präparate, welche namentlich die gröbere Anord- 

 nung der Nerven sehr gut darstellten, lieferte die Behandlung der 

 frischen Hautstückchen mit Palladiumchlorürlösung während 2 bis 

 4 Tagen. Nach Alkoholbehandluug und der gewöhnlichen Paraffin- 

 einbettung wurde ganz sichere Schwärzung der Achsenzylinder er- 

 zielt , leider waren aber gewisse Forraveränderungen , namentlich im 

 Epithel nicht zu umgehen, und die Färbbarkeit der übrigen Gewebs- 

 elemente zeigte sich stark beeinträchtigt. Ist aber erst einmal die 

 Nervenverteilung eruiert, so genügt die gewöhnliche van GiESONSche 

 Hämatoxylin- Pikrinsäure- Fuchsin S- Färbung oder eine der üblichen 

 Färbungen der elastischen Fasern vollständig, um die Nerven bis in 

 die Nähe des Epithels verfolgen zu können. Gute Übersichtsbilder 

 über die ganze Haarscheibe und vor allem die Möglichkeit des Stu- 

 diums der feineren Verhältnisse sind aber ausschließlich mit Methylen- 

 blaupräparaten (in der Modifikation von Dogiel und Bethe) zu er- 

 zielen. E. Schoebel {Neapel). 



Ballowitz , E. , Die Riechzellen des Flußneunauges 

 [Petromyzon fluviatilis] (Arch. f. mikrosk. Anat. 

 Bd. LXV, 1904, p. 78—95 m. 1 Tfl.). 

 Zur Untersuchung des aus dem frisch getötetem Tiere heraus- 

 präparierten Geruchsorgans und seiner Riechschleimhaut kamen haupt- 

 sächlich drei Verfahren zur Anwendung : 1) Mazeration und Isolierung 

 der Epithelelemente ; 2) Fixierung durch Sublimat, Sublimat-Eisessig 

 (5 Prozent Eisessigzusatz zu konzentrierter Sublimatlösung), absoluter 

 Alkohol und FLEMMiNosche Flüssigkeit, Einbettung in Paraffin, Färbung 

 der Schnittserien hauptsächlich mit Eisenhämatoxylin nach Heiden- 



I 




XXII, 1. Referate. 161 



HAIN ; 3) Imprägnation mit Silberchromat nach der von Ramön y 

 Cajal modifizierten Golgi sehen Methode. 



Die wichtigsten Resultate wurden durch Mazeration und Isolie- 

 rung erhalten. In den Mazerationsflüssigkeiteu dürfen die kleinen 

 Stücke nicht zu lange liegen, nach einem bis 2 Tagen Mazerations- 

 dauer erhält man gewöhnlich die besten Präparate. 



E. Schoebel (Neajjel). 



Kamoil, K. , Über die Geruchsknospen (Arch. f. mikrosk. 

 Anat. Bd. LXIV, 1904, p. 653—664 m. 1 Tfl.). 

 Die Untersuchungen wurden an der Nasen- und Mundschleim- 

 haut von Esox und Trigla angestellt. Die ausgeschnittenen Schleim- 

 hautstücke dieser Fische wurden in Zenker scher, Flemming scher und 

 Hermann scher Flüssigkeit oder Kochsalz-Sublimatlösung fixiert. Subli- 

 raathaltige Flüssigkeiten dürften für den vorliegenden Zweck die 

 geeignetsten Fixierungsflüssigkeiten sein. Gefärbt wurde hauptsächlich 

 mit Eisenhämatoxylin. Zum Studium des Verhaltens der Nerven- 

 fasern fand die Golgi sehe Methode, sowie die vitale Methylenblau- 

 färbung Anwendung. Zur Isolierung der Elemente der Regio olfac- 

 toria wurde 0"05prozentige Chromsäurelösung benutzt. 



E. Schoebel {Neapel). 



PÖtzsch, 0., Über die Entwicklung von Niere, Peri- 

 kard und Herz beiPlanorbis corneus (Zool. Jahrb., 

 Abt. f. Anat. u. Ontogen. , Bd. XX, 1904, p. 409—438 

 m. 10 FJgg. u. 3 Tfln.). 

 Der Laich wird im allgemeinen während des ganzen Sommers 

 reichlich abgesetzt , und zwar an untergetauchten Pflanzenteilen und 

 welken Blättern. Durch seine flach scheibenförmige Gestalt und 

 rötliche Farbe ist er ohne weiteres von demjenigen von Limnaeus 

 zu unterscheiden , der sich zumeist an der Unterseite der auf dem 

 Wasser schwimmenden Blättern findet und durch eine mehr wurst- 

 förmige Gestalt und ein vollständig wasserhelles Aussehen charakte- 

 risiert ist. Vor der Fixierung, die Verf. hauptsächlich mit Hermann- 

 scher oder ZENKERScher Flüssigkeit vornahm, wurde immer der Kokon 

 geöfl:net und das anhaftende Eiweiß vom Embryo mittels physiologischer 

 Kochsalzlösung abgespült. Die Orientierung der Objekte beim Mikro- 

 tomieren wurde nach der von Hoffmanx in dieser Zeitschrift Bd. XV, 

 p. 317, beschriebenen Nelkenöl-CoUodium-Methode vorgenommen. Als 

 Orientierungsmarken und Anhaltspunkte zur Bestimmung des relativen 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 1. 11 




162 . Referate. XXII, 1, 



Alters der einzelnen Embryonen diente einmal die mehr oder weniger 

 tiefe Einbuchtung zwischen Fuß und Eingeweidesack, und außerdem 

 die Ausbildung der Radulatasche , die an dem aufgehellten Objekt 

 immer sehr gut zu erkennen ist. 



Die Färbung der Schnitte geschah fast ausschließlich nach der 

 Heidenhain sehen Eisenhämatoxylin-Methode. Nur für die ganz jungen 

 Stadien ist einfache Färbung in DELAFiELoschem Hämatoxylin vor- 

 zuziehen, weil das Eisenhämatoxylin das Dotter vollständig schwärzt, 

 wodurch die Deutlichkeit der Bilder stark beeinträchtigt wird. Für 

 Totalpräparate erwies sich Alaunkarmin mit starker Differenzierung 

 in Salzsäurealkohol als recht günstig. E. Schoebel {Neapel). 



Fleischer, B., Beiträge zur Histologie der T r ä n e n d r ü s e n 

 und zur Lehre von den S e k r e t g r a n u 1 a (Anat. Hefte, 

 Heft 78 [Bd. XXVI, H. 1] 1904, p. 103—166 m. 6 Tfln.). 

 Es wurde die Tränendrüse des erwachsenen Rindes und des 

 Kalbes benutzt. Gleich nach dem Schlachten wurde der knöcherne 

 Orbitalrand ringsum losgeschlagen von dem Inhalte der Orbita und 

 hierauf die Tränendrüse von hinten herauspräpariert. Dieselbe liegt 

 oben außen hinter dem Orbitalrande und ist ein länglich ovales Organ 

 von über Walnußgröße, ventralwärts abgeplattet. Kleine Stückchen 

 wurden nach möglichster Entfernung der derben umhüllenden Fascien 

 sofort in die verschiedenen Fixierungsflüssigkeiten gebracht. Fixie- 

 rung: Konzentrierte Sublimatlösung in 0'6prozentiger Kochsalzlösung, 

 Alkohol 70 Prozent (täglich steigend) , Mischung von konzentrierter 

 Sublimat- und 2prozentiger Osmiumsäurelösung, 0'5prozentige Osmium- 

 säurelösung, FLEMMiNGSche Lösuug , konzentrierte wässerige Pikrin- 

 säurelösung , Trichloressigsäure lOprozentige Lösung (die Präparate 

 dürfen nicht in Wasser ausgewaschen werden, da sonst Quellung ein- 

 tritt; die t'bertragung geschieht direkt in 96prozentigen oder abso- 

 luten Alkohol). Nach 24- bis 48 stündigem Aufenthalte in diesen 

 Lösungen wurden die Präparate in steigendem Alkohol langsam ent- 

 wässert (außer den Präparaten aus Trichloressigsäure). Einbettung 

 in Paraffin nach der Schwefelkohlenstoftmethode von M. Heidenhain 

 (absoluter Alkohol und Schwefelkohlenstoff zu gleichen Teilen, Schwefel- 

 kohlenstoff 1 und 2, konzentrierte Lösung von 45grädigem Paraffin 

 und Schwefelkohlenstoff bei etwa 20 *^, konzentrierte Lösung von 55grä- 

 digem Paraffin bei etwa 40'^, Paraffin 1 und 2), Die 3 bis h fi dicken 

 Schnitte wurden mit Wasser auf dem Objektträger fixiert. Die Subli- 

 matfixierung eignete sich gut zur Darstellung der Sekretkapillaren 




XXII, 1. Referate. 163 



und der Zentralkörper-, auch die Trichloressigsäure war hierfür brauch- 

 bar. Die Alkoholfixierung führte starke Veränderungen des Zellproto- 

 plasmas herbei, es wurden deshalb nur im Stück mit Chromhäma- 

 toxylin nach R. Heidenhain gefärbte Präparate zu bestimmten Zwecken 

 benutzt. Die in Flejiming scher Lösung fixierten Stücke ließen sich 

 mit den angewandten Farbstoffen sehr schlecht färben , so daß sie 

 nicht benutzt wurden. Die in Osmium fixierten Präparate wurden 

 in beschränktem Maße, besonders zur Darstellung der Sekretgranula 

 benutzt. Eine besonders gute Erhaltung dieser Granula zeigte sich 

 bei der Pikrinsäurefixierung der Kalbsdrüse. Auch die frische 

 Drüse wurde untersucht, indem mit dem Rasiermesser möglichst dünne 

 Schnitte abgetragen und unter dem Deckglase, eventuell nach leichtem 

 Zerzupfen, mit oder ohne Zusatz von 0*7prozentiger Kochsalzlösung 

 mit Ölimmersion untersucht wurden. Verf. hat auch die frische Drüse 

 maceriert (nach Peiser): Einlegen von kleinen Stückchen für 12 bis 

 24 Stunden in konzentrierte Salzsäure, dann auswaschen und untersuchen 

 in Wasser mit oder ohne Deckglas : Die einzelnen Tubuli beziehungs- 

 weise die Gruppen derselben werden isoliert und es läßt sich ihre 

 Form durch Hin- und Herneigen des Objektträgers (ohne Deckglas) 

 von verschiedenen Seiten beobachten. Die menschliche Tränendrüse 

 wurde ebenso wie die tierische behandelt, unmittelbar nach der Hin- 

 richtung in die Fixierungsflüssigkeit gebracht etc. Färbung: Zur 

 Darstellung der Sekretkapillaren und Zentralkörper wurde die Eisen- 

 hämatoxylinraethode von M. Heidenhain verwendet. Zum Auffinden 

 der Zentralkörper bewährte sich eine Nachfärbung mit Kongokorinth 

 (konzentrierte alkoholische Lösung): leichte Rotfärbung des Protoplas- 

 mas und deutlicheres Hervortreten der um die Zentralkörper herum 

 befindlichen hellen Zone. Ferner wurde zum Studium der allgemeinen 

 histologischen Verhältnisse , insbesondere des ausführenden Systems 

 eine Nachfärbung der mit Hämatoxylin (Delafield) gefärbten Schnitte 

 mit Benzopurpurin 6 B angewandt (M. Heidenhain) : .Färbung mit kon- 

 zentrierter alkoholischer Lösung, nachdem der Schnitt durch kurzes 

 Verweilen in leicht alkalischem Alkohol alkalisch gemacht und dann 

 sorgfältig wieder ausgewaschen war; Auswaschen des überflüssigen 

 Farbstott'es in Alkohol. Zur Darstellung der Sekretgranula hat Verf. 

 außer der Eisenhämatoxylinfärbung eine kombinierte Anilinfärbung 

 benutzt (beschrieben von Heidenhain in dieser Zeitschrift Bd. XX, 

 1903, p. 179), nachdem Versuche mit Safranin, Lichtgrün, Lichtgrün- 

 Safranin, Methylenblau, Thiazinrot keine befriedigenden Resultate er- 

 geben hatten, nämlich eine Kombination von Brillantschwarz, Toluidin- 



11* 




164 Referate. XXII, 1. 



blau und Safraniu: Die Schnitte kamen in eine einprozeutige wässe- 

 rige Lösung von Brillantscliwarz 3B für wenige Minuten (Schnitte 

 bläulich schwarz) , dann für wenige Minuten in eine gleich starke 

 Lösung von Toluidinblau (Schnitte stark dunkelblau), dann Differen- 

 zierung in einer 0"5prozentigen alkoholischen Safraninlösung (nicht 

 zuviel!), endlich Entfernung des überschüssigen Safranins mit Alkohol. 

 Diese Färbung wurde besonders angewandt bei Präparaten nach Fixie- 

 rung in Sublimat, Trichloressigsäure und Pikrinsäure. Zur Darstel- 

 lung der Membrana propria der Tubuli wurde nach Vorfärbung mit 

 Carmalaun eine einprozeutige wässerige Lösung von Blauschwarz B 

 benutzt, wodurch dieselbe als scharfe blaue Linie hervortritt. — 

 Zu besonderen Zwecken wurde auch die Submaxillaris und Parotis 

 des Rindes, sowie diese und die Tränendrüse des Kaninchens unter- 

 sucht. Sckiefferdecker (Bonn). 



Porcile, Y., Untersuchungen über die Herkunft der 

 Plasmazellen in der Leber (Beitr. z. pathol. Anat. 

 u. z. allgem. Pathol. Bd. XXXVI, 1904, H. 2, p. 375—399 

 m. 1 Tfl.). 

 Verf. hat durch Einspritzen von Terpentinöl in die Kaninchen- 

 leber Gewebsteile zum Absterben gebracht und dann den Heilungs- 

 prozeß genauer untersucht, Terpentinöl wird von den Tieren besser 

 vertragen als Karbol und bringt eine gleichmäßigere Wirkung hervor, 

 als organische Extrakte oder Nukleoproteine. Nach der Einspritzung 

 wurde das Tier noch 30 Stunden, 56 Stunden, 4 Tage, 7 Tage und 

 10 Tage am Leben gelassen. Fixiert wurde mit Alkohol, Sublimat, 

 Zenker scher Flüssigkeit, MüLLER-Formol, seltener mit Flemming scher 

 Lösung. Gefärbt wurde mit Methylenblau (gewöhnlichem oder poly- 

 chromem nach Unna) , Methylgrünpyronin nach Pappenheim , Häma- 

 toxyhn-Eosin, Safranin und der Methode von van Gieson. Die Fär- 

 bung mit Metylpyronin lieferte sehr schöne, charakteristische Bilder. 



Schieferdecker (Bonti). 



Tiberti , N., Über die Sekretionserscheinungen in den 

 Nebennieren der Amphibien (Beitr. z. pathol. Anat. 

 u. z. allgem. Pathol. Bd. XXXVI, 1904, H. 2, p. 161—183 

 m. 1 Tfl.). 

 Verf. hat bei den vorliegenden Untersuchungen die Absicht ge- 

 habt, vom histologischen Gesichtspunkte aus das Verhalten der Neben- 

 nieren nach der Injektion gewisser Substanzen zu studieren, von 




XXII, 1. Referate. 165 



denen einige imstande sind, die Sekretion in den wahren und eigent- 

 lichen Drüsenorganen zu befördern , andere als technische Produkte 

 des Stoffwechsels betrachtet werden müssen. Unter den Substanzen 

 der ersten Art wählte Verf. das Pilocarpin und das Nikotin , von 

 denen der zweiten das Xanthin , das Leucin , das Kreatin und die 

 Taurocholsäure. Die Nebennieren von Kaninchen, Meerschweinchen 

 und Hunden erwiesen sich bald als ungünstig für diese Untersuchung, 

 Verf. wählte daher die Amphibien (besonders Bufo vulgaris und 

 Rana temporaria). Die Injektionen wurden stets unt.er die Haut des 

 Abdomens gemacht. Gleich nach Tötung des Tieres wurde die Bauch- 

 höhle eröffnet, die Nieren wurden herausgenommen und die Neben- 

 nieren ausgeschnitten 5 an letzteren blieb infolge ihrer innigen Be- 

 ziehung zu den Nieren immer ein Stück Nierenparenchym hängen, 

 wodurch es möglich wurde, vergleichsweise zu untersuchen, wie sich 

 die Granularsekretion in den Nierenepithelien und in den Neben- 

 nieren verhielt. Die Organstücke wurden fixiert in Flemming scher, 

 Hermann scher, Zenker scher Flüssigkeit, sowie in gesättigter Sublimat- 

 lösung. Gefärbt wurde vorzugsweise mit der Methode von Galeotti 

 in folgender Weise : Fixierung in FLEMMiNGScher oder Hermann scher 

 Flüssigkeit. Einschluß in Paraffin. Färbung der sehr feinen , am 

 Deckglase befestigten Schnitte unter Erwärmung mit einer gesättigten 

 Fuchsinlösung in Anilinwasser. Reichliches Auswaschen in fließen- 

 dem Wasser. Die Schnitte kommen in eine gesättigte hydroalkoho- 

 lische Lösung von Pikrinsäure , wodurch das Cytoplasma der Zell- 

 elemente entfärbt wird. Waschen in fließendem Wasser. Einige 

 Minuten lang Färbung , ohne zu erwärmen , in einer 0"5prozentigen 

 alkoholischen Lösung von Methylengrün. Auswaschen in destilliertem 

 Wasser. Schnelles Entwässern durch absoluten Alkohol, Xylol, Bal- 

 sam. Die Körnchen und Kerne färben sich rot , das Cytoplasma 

 grün. Außerdem wurden auch einfache Färbungen mit Safrauin, 

 Hämatoxylin, Eosin etc. verwendet. Schiefferdecker {Bonn). 



Tiberti , N., Mikroskopische Untersuchungen über die 

 Sekretion des Pankreas bei entmilzten Tieren 

 (Beitr. z. pathol. Anat. u. z. allgera. Patliol. Bd. XXXVI, 

 1904, H. 2, p. 184—191 m. 1 Tfl.). 

 Die Versuche wurden an Hunden ausgeführt. Die Operation 

 wurde sehr gut vertragen. Die Tiere wurden gewöhnlich .S^/^ Stun- 

 den nach Nahrungsaufnahme getötet, da dies der geeignete Zeitpunkt 

 war, um die Alveolarzellen im Maximum ihrer sezernierenden Tätig- 




166 Referate. XXII, 1. 



keit anzutreffen. Wäre die Beobachtung später vorgenommen worden, 

 so hätte man die Zellen arm an Körnchen angetroffen, da letztere 

 sieh in die Ausscheidungswege ergossen haben würden. Nach Tötung 

 des Tieres wurden kleine Pankreasstücke herausgenommen und in 

 Flemming scher, Hermann scher Flüssigkeit, sowie in gesättigter Subli- 

 matlösung fixiert. Zur Färbung wurde fast ausschließlich die Methode 

 von Galeotti benutzt (siehe das vorstehende Referat). Das Proto- 

 plasma der Zellen färbt sich grün , die Körnchen , der Nucleus und 

 die Nucleoli färben sich rot. Schiefferdecker {Bonn). 



Lams, H., Contribution ä TEtude de la Genese du 



vitellus dans l'Ovule des Teleosteens (Arch. 



d'auat. microsc. t. VI, 1904, fasc. 4, pp. 633 — 652 



av. 2 plches.). 



Untersucht wurden die Eier des Stints (Osmerus eperlanus). 



Verschiedene Stücke des Ovariums wurden tixiert in Flemming scher, 



Hermann scher, Bouin scher Flüssigkeit, Sublimat-Essigsäure, absolutem 



Alkohol. Die besten Resultate ergab die Flemming sehe Flüssigkeit, 



Einbettung in Paraffin. Die mit dem Minot sehen Mikrotom gemachten 



Schnitte wurden mit Safranin in Verbindung mit Lichtgrün und 



Geutiana violett gefärbt. Sublimat- Essigsäure mit darauffolgender 



Färbung durch Eisenhämatoxylin von Heidenhain ließ die Chromatin- 



teile des Kernes und des Dotters hervortreten. 



Schiefferdecker {Botin). 



C. Botanisches. ^ 



Beck Yon Managetta, 0., Über die Verwendung der 



Persio-Essigsäure zu mikroskopischen Tink- 



tionen (Sitzungsber. d. Deutseh. naturwiss.-mediz. Vereins 



f. Böhmen „Lotos" 1904, No. 1). 



Als neuen empfehlenswerten, vielseitig verwendbaren Farbstoff" 



nennt Verf. P er s i o. 



„Persio, roter Indigo oder Cudbear, ist ein der Orseille nach 



1) Referate über bakteriologische und raineralogische Arbeiten ira 

 nächsten Heft. K. 




XXII, 1. Referate. 167 



Herkunft und Zusammensetzung ganz ähnliches Produkt und stellt 

 ein purpurrotes bis violettes Pulver mit laugenhaftem Geschmack 

 und etwas urinösem Gerüche dar. Es entstammt den Orseille- 

 Flechten und wird in mehreren Farbenabstufungen in den Handel 

 gebracht. Persio ist im Wasser sowie in Essigsäure leicht löslich, 

 wenig oder gar nicht im Alkohol." 



Besonders empfehlenswert ist die Anwendung des Farbstoffs in 

 Form der Persio-Essigsäure; eine konzentrierte Lösung färbt 

 Schnell und kräftig in 1 bis 2 Minuten. Man färbt in einem Tropfen 

 der Farbstofflösung auf dem Objektträger. Bei Anwendung einer 

 verdünnten Lösung, die man einige Stunden lang einwirken lassen 

 muß, fällt die Färbung noch schöner aus. — Die gefärbten Schnitte 

 können in Glyzerin, gesättigte Lösung von Kaliumazetat und vene- 

 zianischen Terpentin übertragen werden , die alle die ursprüngliche 

 Färbung verändern — aber in vorteilhaftem Sinne. „In Glyzerin 

 bleibt die braun-purpurfarbige Tinktion der Chloro- und Leukoplasten 

 erhalten. Die Zellkerne speichern gewissermaßen den Farbstoff auf 

 und werden dunkelpurpurn, die Chromatinsubstanz derselben erscheint 

 sehr deutlich : hingegen wird die Zellmembran nur schwach gefärbt. 

 — In venezianischem Terpentin werden die Zellwände etwas 

 rötlichviolett, alle plasmatischen Teile violett, die Kerne noch dunkler 

 gefärbt. — In Kaliazetat wird die Farbe der Tinktion in ein schönes 

 Blauviolett umgewandelt. Überraschenderweise erlangt die Färbung 

 mit der Zeit immer tiefere Töne : die Kerne werden fast schwarz 

 und dadurch ungemein auffällig. Aber auch das lästige Aufquellen 

 der Zellkerne, welches dieser Einbettungsflüssigkeit anhaftet — was 

 z. B. die so schönen Methylgrünessigsäure-Tinktionen schädigt — wird 

 vermieden. Läßt man Persio-Essigsäure kräftiger resp. länger ein- 

 wirken, so erhält man schön differenzierte Färbungen der Gewebe. 

 Bast- und Sklerenchymzellen werden prächtig rotviolett und die Kuti- 

 kula gelb. Gewöhnliche Zellulosemembranen bleiben hell." — 



Persio-Essigsäure läßt sich mit anderen Farbstoffen kombinieren. 

 Verf. erprobte folgende Mischungen: 



Persio-Essigsäure- Kernschwarz und Persio-Essig- 

 säure-Nigrosin: Einbettung in Glyzerin ; schwarzviolette, dauer- 

 hafte Färbung. Zellwände, auch Collenchym gefärbt. 



Persio - Essigsäure - Methylgrün essigsaure: warm 

 rotbraune Töne. In Glyzerin starke Färbung der Membranen, 

 Sklerenchyra und Collenchym fleischrot ; ähnliche Färbungen bei Ein- 

 betten in Terpentin. 




168 Keferate. XXII, 1. 



Persio-Essigsäure-Gentianaviolett (verdünnte Lö- 

 sung) : Einbetten in Terpentin. Zellwände blauviolett, Zellkerne und 

 plasmatische Substanz schön rotbraun. — 



Persio - Essigsäure färbt plasmatische Substanz , auch die Chro- 

 matophoren rasch und dauerhaft; besonders wertvoll macht den Farb- 

 stoff die Haltbarkeit der Färbungen in Glyzerin. Auch andere 

 Organismen — Schizophyceae , Bacillariaceae , Conjugaten etc. — 

 färben sich gut. Verf. macht auf die gute Färbung der Pyrenoide 

 und Chloroplasten bei Konjugaten durch Persio-Essigsäure aufmerksam. 

 Bei Rot- und Braunalgen färben sich Kern und Chromatophoren gut, 

 bei Pilzen nur die plasmatischen Teile. Die Chloroplasten der Moose 

 färben sich erst bei längererer Einwirkungsdauer. 



Küster {Halle a. S.). 



Phillips, D. P. A., Comparative Study of the Cytology 

 and Movements of the Cyanophyceae (Transact. 

 a. Proceed. Botan. Soc. Pennsylvania vol. I, 1904, no. 3, 

 p. 237—335). 

 Die zu studierenden Algen waren sowohl unter günstigen natür- 

 lichen Bedingungen als in Nährlösungen mit Zusatz oder Weglassung ver- 

 schiedener Stoffe kultiviert. Gefärbt wurde in vivo durch Methylenblau 

 oder nach Fixierung. Zum Fixieren wurden folgende Lösungen ver- 

 wandt : Chromsäure von verschiedenen Konzentrationen , Chromessig- 

 säure, Sublimat (heiße wie kalte Lösung), alkoholische und wässerige 

 Lösungen von Pikrinsäure, Pikrinschwefelsäure, Osmiumsäure, Flemming- 

 sches Gemisch (konzentriert und verdünnt), Hermann sehe Lösung, 

 Essigsäure von verschiedenen Konzentrationen, Formalin, Alkohol, 

 Formalin und Alkohol , und kochende Wasser. Bei Prüfung aller 

 einzelnen Fragen benutzte Verf. Material , das mit allen genannten 

 Mitteln fixiert worden war, sowie lebendiges Material. Entweder 

 sogleich nach dem Fixieren und Auswaschen oder erst nach allmäh- 

 lichem Entwässern wurde gefärbt. 



Am besten geeignet zeigten sich folgende Färbemittel : Heiden- 

 hain sches Eisenalaun- und Delafield sches Hämatoxylin. Benutzt 

 wurden ferner saures Hämatoxylin, Safranin, Eosin, Erythrosin, Methyl- 

 grün, Methylenblau (intra vitam), Methylviolett, Gentianaviolett, Pikro- 

 karmin, Borkarmin und Karbolfuchsin. Gebeizt wurde nach bakterio- 

 logischen Methoden. Die gefärbten Fäden wurden in lOprozentiges 

 Glyzerin eingelegt und dem Verdunsten ausgesetzt. Nach Eindicken 

 des Glyzerins wurde Glyzeringelatine zugesetzt. 




XXII, 1. Referate. 169 



Die gallertigen äußeren Schichten der Zellwände von Nostoc, 

 Oscillaria etc. wurden nach vorherigem Beizen durch Eisessig, Karbol- 

 fuchsin, Methylenblau oder saures Hämatoxylin gefärbt. 



Im Kern (Zentralkörper) finden sich Körner, die Kernfärbe- 

 raitteln gegenüber wie Chromatinbläschen reagieren. Nach Ver- 

 dauung der Zelle in künstlichem Magensaft bleibt Kern samt Chro- 

 matinbläschen unzerstört. 



Die im Cytoplasma liegenden Cyanophycinkörner werden 

 durch DELAFiELDSches Hämatoxylin schwach gefärbt, durch 4prozentige 

 Salzsäure oder einprozentige Schwefelsäure oder Chloralhydrat gelöst. 

 Die „Schleimkugeln" stellen Kohlehydrate dar, die 6prozentiger 

 Kalilauge gegenüber wie Paramylum reagieren. — Das Vorhanden- 

 sein von Glykogen läßt sich mikrochemisch nachweisen. — Bei Ver- 

 wendung der oben erwähnten Farbstoffe war eine Art Kernteilung, 

 die sich mit Karyokinese vergleichen ließ, zu beobachten. 



Durch Plasmolyse nach der GARDiNERSchen Methode mit Jod 

 imd Schwefelsäure bewies Verf., daß die cilienähnlichen Körper, 

 die man für anhängende Bakterien gehalten hat, wirklich Cilien 

 sind. An den Endzellen der Fäden sind sie lang, an den anderen 

 Zellen kurz. Die letzteren lassen sich nicht gleich durch Färben 

 nachweisen , da der Zusatz von Beizen oder auch von Wasser die 

 Cilien gegen die Wand drückt. Wenn man aber mit Protoplasma- 

 färbemitteln ohne nachheriges Waschen färbt, so sind die 0*5 ,a 

 langen Cilien gut zu sehen. Ernst A. Bessey {Washington). 




170 Neue Literatur. XXII, 1. 



Neue Literatur 



1. Lehr- und Handbücher. 



Clausen, Grundriß der Trichinenschau. Leitfaden für den Unterricht in 

 der Ausbildung der Trichinenschauer nebst den preußischen gesetz- 

 lichen Bestimmungen. Berlin (R. Schoetz) 1905. 55 pp. 1- — M. 



Heine, P., Hilfsbuch für Fleischbeschauer. Hannover (M. u. H. Schaper) 

 1905. 108 pp. geb. 2-75 M. 



Heine, P. , Leitfaden der Trichinenschau. Hannover (M. u. H. Schaper) 

 1905. 47 pp. geb. 1-50 M. 



Joseph, M., Dermato-histologische Technik, 3. Aufl. Berlin (Louis Markus- 

 sche Verlagsbuchhandlung) 1905. 



Liuduer, P. , Mikroskopische Betriebskontrolle in den Gärungsgewerben 

 mit einer Einführung in die technische Biologie, Hefenreinkultur und 

 Infektionslehre. 4., neu bearb. Aufl., 237 Abb., 4 Tfln., 521 pp. Berlin 

 (Paul Parey) 1905. (Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 135.) 19 M. 



Lynch, R., Mikroskopische Untersuchung der Fäces. Ihre Bedeutung und 

 ihre Anwendung in der ärztlichen Praxis. 8'-. Leipzig (G. Thieme) 



1904. 35 pp. 1-20 M. 

 Schmorl, G., Die pathologisch-histologischen Untersuchungsmethoden. 3., 



neu bearbeit. Aufl. Leipzig (F. C. W. Vogel) 1905. (Vgl. diese Zeitschr. 



Bd. XXII, 1905, p. 134.) 8-75 M. 



Winslow, Ch.-E. A., Elements of applied Microscopy. A text-book for 



beginners. First edit. New York (John Wiley & Sons) 1905. 183 pp. 



(Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXH, 1905, p. 135.)' 

 Anleitung, kurze, zur Herstellung mikroskopischer Präparate (Fixier ungs-, 



Härtungs-, Einbettungs- und Färbungsmethoden). Würzburg (Mönnich) 



1905. 8'\ ^ —-80 M. 




XXU, 1. Neue Literatur. 171 



2. Mikroskop und mikroskopische Apparate. 



a. Nene Mikroskope. 



(^Chabrie, M. C. ,) Construction-principle of an optical apparatus for 



obtaining very lars^e magnifications [The Diastoloscope] (C. K. Acad. 



Sc. Paris t. CXXXVIII , 1904, p. ^Oö; vgl. Journ. R. Microsc. Soc. 



1905, pt. 1, p. 108). 

 Koristka's large Model microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 1, 



p. 101: vgl. F. Koristka's special Catalogue; Milan Nov. 1904). 



b. Objective. 



Chalmers, S. D., The theory of symmetrical optical objectives. Part 11 



(Roy. Soc. London, Jan. 26., 1905). 

 H., Construction of aplanatic combinations of lenses with or without 



achromatism (English Mechanic vol. LXXX, 1904, p. 252). 

 (Keeley, F. J.,) Spencer Objective (Journ. R. Microsc Soc. 1905, pt. 1, 



p. 103 ; vgl. Proc. Acad. Nat. Sei., Philadelphia vol. LVI, 1904, p. 475). 



c. Okular. 



Merlin, A. A. C, Microscopical high powers and deep eye-pieces (English 

 Mechanic vol. LXXX, 1904, p. 455; vgl. Journ. R. Microsc. Soc. 1905, 

 pt. 1, p. 103). 



d. Lupen. 



Das Mikrophotoskop [Generalstabskartenlupe] (Kriegstechnisclie Zeitschr. 

 1905, H. 1). 




172 Neue Literatur. XXII, 1. 



e. ültramikroskop. 



(Biltz, W.,) Ultramicroscopic observations on the decomposition of Sulphur 



from Thiosulphuric acid and of Selenium from Selenic acid (Nachr. 



d. kgl. Ges. d. Wiss. Göttingen 1904, p. 300; vgl. Journ. R. Microsc. 



Soc. 1905, pt. 1, p. 107). 

 (Maxwell, J. C.,) Colours in inetal glasses and in metallic films (Proc. 



Roy. Soc. vol. LXXIII, 1904, p. 443; vgl. Journ. R. Microsc. Soc. 



1905, pt. 1, p. 107). 

 Michaelis, L. , Ultramikroskopische Untersuchungen (Virchows Arch. f. 



pathol. Anat. Bd. CLXXIX [Folge 17, Bd. IX], 1905, H. 2, p. 195—200). 



3. Mikrophotographie und Projektion. 



(Chapman Jones,) Three-colour photography (Knowlßdge vol. I, 1904, 

 p. 285; vgl. Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 1, p. 104). 



Edelmann, M. , Universal-Vorlesungs- Projektionslampe (Phys. Zeitschr. 

 Bd. VI, 1905, p. 78). 



(Köhler, A.,) Photomicrography with the aid of iiltra-violet light (Enginee- 

 ring vol. LXXVIII, 1904, p. 760; vgl. Journ. R. Microsc. Soc. 1905, 

 pt. 1, p. 103). 



Simon et Spillmann, L., Application de la Photographie ä la numeration 

 des elements figures du sang (Compt. Rend. Soc, Biol. t. LVII, 1904, 

 no. 37, p. 659—6(30). 



(Thompson, J. ,) Photomicrography and Photomicrometry (Proc. Scot. 

 Micr. Soc. vol. IV, 1903, p. 44; vgl. Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 1, 

 p. 106). 



4. Präparationsmethoden im allgemeinen. 



(Collins, J. R.,) Hanging-drop preparations (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, 

 pt. 1, p. 117; vgl. Brit. Med. Journ. vol. II, 1904, p. 1635). 



Darvk^in, H., Electric thermostat (Phil. Mag. vol. VII, 1904, p. 408). 



Dreuw , Exstirpations- und Operationsfeder (Monatsh. f. prakt. Dermatol. 

 Bd. XXXIX, 1904, p. 208—210 m. 1 Fig. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 

 1905, p. 137). 




XXII, 1. Neue Literatur. 173 



Goppelsroeder, Fr., Studien über die Anwendung der Kapillaranalyse bei 

 vitalen Tinktionsversuchen (Verh. d. Naturf. Gesellsch. Basel Bd. XVII, 

 1904, p. 157—198 m. 23 Tfln.). 



Groot, J. G. de, Ein neuer Kitt zum Schließen von Gefäßen mit Alkohol- 

 präparaten, auch für den Versand (Zool. Anz. Bd. XXVIII, 1904, 

 p. 406—407; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. ISC). 



Hesketh Walker, Notes on Marine alpharia (English Mechanic vol. LXXX, 

 1904, p. 324). 



(Horder, E. ,) AU-metal cover-glass holder (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, 

 pt. 1, p. 117; vgl. Brit. Med. Journ. vol. II, 1904, p. 759). 



Lugaro, E., Sulla tecnica del metodo di Nissl (Monit. Zool. Ital., Anno IG, 

 no. 1, p. 11 — 16). 



3Iarrassini, A. , Nota di tecnica microscopica (Rendic. Accad. med. Pisa, 

 24 febbr. 1904; Giorn. Ital. Sc. med., Anno 2, 1904, no. 5, p. 66). 



Mulon, P., Action de l'acide osmique sur les graisses (Bibliogr. anat. 

 t. XIII, 1904, fasc. 4, p. 208—213 ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, 

 p. 138). 



Nabias, B. de, Nouvelle methode de coloration rapide du Systeme nerveux 

 au chlorure d'or (Bibliogr. anat. t. XIII, 1904, fasc. 4, p. 221—222; 

 vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 139). 



Prytz , K. , Optisk kontakt mellem et mikroskop og en spejlende flade. 

 I. Tilvejebringelse af kontakten (Overs. Vidensk. Selsk. Forh. Kopen- 

 hagen 1905, p. 17). 



Skrobansky, Eine Methode der nachträglichen Färbung mit Bleu de Lyon 

 und Pikrinsäure (Intern. Monatsschr. f. Anat. u. Physiol. Bd. XXI, 

 1904, H. 1—3, p. 21—22; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXI, 1905, p. 138). 



New imbedding bath (Cambridge Scientific Instrument Company, Special 

 Catalogue 1904; vgl. Journ. R. Microsc. Soc. 1904, pt. 1, p. 114). 



5. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. 



a. Niedere Tiere. 



Fernandez, M., Zur mikroskopischen Anatomie des Blutgefäßsystems der 

 Tunikaten. Nebst Bemerkungen zur Phylogenese des Blutgefäßsystems 

 im allgemeinen (Jenaische Zeitschr. f. Naturwiss. Bd. XXXIX, 1904, 

 p. 323—422 m. 12 Figg. u. 4 Tfln. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, 

 p. 142). 



Floyd, R. , A contribution to the nervous cj-tologj' of Periplaneta orien- 

 talis , the common cockroach (Mark Anniversary Volume New York 

 1903, Art. XVII, p. 341—357 w. 3 pl., Ref. n. Ref. in Journ. Compar. 




174 Neue Literatur. XXII, 1. 



Neurol. and Psycho!, vol. XIV, 1904, no. 3, p. 287—288; vgl. diese 



Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 143). 

 Gadzikiewicz, W,, Über den feineren Bau des Herzens bei Malakostraken 



(Jenaische Zeitschr. f. Naturwiss. Bd. XXXIX, 1904, p. 203—234 m. 



(j Figg. u. 4 Tfln.; vgl. diese Zeitsclir. Bd. XXII, 1905, p. 141). 

 Heath, H., The Nervous System and Subradular Organ in two Genera of 



Solenogastres (Zool. Jahrb., Abt. f. Anat. u. Ontogen., Bd. XX, 1904, 



p. 399—408 w. 1 plt. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 144). 

 Hoffendahl , K. , Beitrag zur Entwicklungsgeschichte und Anatomie von 



Poecilasma aurantium Darwin (Zool. Jahrb., Abt. f. Anat. u. Ontogen. 



Bd. XX, 1904, p. 363—398 m. 4 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 



1905, p. 144). 

 Lesage, Culture de l'amibe de la dysenterie des pays chauds (C. R. Ac. 



Sc. t. CXXXIX, p. 1237—1239; Ann. de l'Inst. Pasteur t. XIX, 



1905, no. 1, p. 9—16 av. 1 pl. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, 



p. 140). 

 Sala, Luigi, Intorno ad una particolaritä di struttura delle cellule epiteliali 



che tappezzano il tubo ovarico e spermatico degli Ascaridi (Arch. Sc. 



med. vol. XXVIII, 1904, fasc. 3, p. 301-317 c. 1 Tfl.). 

 Thiroux, Recherches morphologiques et e.xperiraentales sur Trypanosoma 



paddae (Ann. de ITnst. Pasteur t. XIX, 1905, no. 2, p. 65 — 83 av. 1 pl. ; 



vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 140). 



b. Wirbeltiere. 



Ballowitz, E., Die Riechzellen des Flußneunauges [Petromyzon fluviatihs] 



(Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXV, 1904, p. 78—95 m. 1 Tfl. ; vgl. diese 



Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 160). 

 Borchert, M., Über Markscheidenfärbung bei niederen Wirbeltieren (Verh. 



d. Berliner Physiol. Ges. Sitz. 6. Mai 1904 ; vgl. Arch. f. Anat. u. Physiol. 



Physiol. Abt., 1904, H. 5, 6, p. 572—575; diese Zeitschr. Bd. XXII, 



1905, p. 153). 

 Bosellini, B. L., Plasma cellule ed apparato linfoemopojetico (Giorn. Ital. 



Malattie veneree e pelle vol. XLV, 1904, Anno 39, fasc. 5, p. 521—565 



c. 1 tav.). 

 Cajal, S. R., Das Neurofibrillennetz der Retina (Intern. Monatsschr. f. Anat. 



u. Physiol. Bd. XXI, 1904, H. 4-8, p. 369—396 m. 1 Tfl.; vgl. diese 



Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 155). 

 Ferra! , Carlo, Sulla diagnosi specifica del sangue col metodo biologico 



in medicina legale. 3. Nota: Azione della putrefazione sulla reazione 



col metodo biologico (Bull. Accad. med. Genova, Anno 19, 1904, no. 3, 



p. 191—204). 




XXII, 1. Neue Literatur. 175 



Fleischer, B., Beiträge zur Histologie der Tränendrüsen und zur Lehre 

 von den Sekretgranula (Anat. Hefte, H. 78 [Bd. XXVI, H. 1], 1904, 

 p. 103— 1G6 m. GTfln.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1904, p. 162). 



Galli , G. , Ein verbesserter Mischer zur Zählung der Blutkörperchen 

 (Münch. med. Wochenschr. Jahrg. LI, 1904, No. 13, p. 561 m. 1 Fig.; 

 vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 148). 



Hardesty, I., On the Development and Nature of the Neuroglia (Amer. 

 Journ. Anat. vol. III, 1904 , no. 3, p. 229 — 268 w, 5 pltes. ; vgl. diese 

 Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 157). 



Helber, E., Über die Zählung der Blutplättchen im Blute des Menschen 

 und ihr Verhalten bei pathologischen Zuständen (Deutsches Arch. f. 

 Idin. Med. Bd. LXXXI, 1904, H. 3, 4, p. 316—327 ; vgl. diese Zeitschr. 

 Bd. XXII, 1905, p. 150). 



Jelly, J., Recherches experimentales sur la Division indirecte des Globules 

 rouges (Arch. d'anat. Microsc. t. VI, 1904, fasc. 4, p. 455 — 632 av. 

 4 plches.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 148). 



Kamou, K., Über die Geruchsknospen (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXIV, 

 1904, p. 653—664 m. 1 Tti.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, 

 p. 161). 



Keinath, K. Th., Über den mikroskopischen Nachweis von Fett in nor- 

 malen Muskeln (Inaug. Dissertation Tübingen 1904, 32 pp. ; vgl. diese 

 Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 145). 



Lams , H. , Contribution h l'Etude de la Genese du vitellus dans TOvule 

 des Teleosteens (Arch. d'anat. microsc. t. VI, 1904, fasc. 4, p. 633 — 652 

 av. 2 plches.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 166). 



Meves, Fr., Über die Wirkung gefärbter Jodsäure auf die roten Blut- 

 körperchen der Amphibien (Anat. Anz. Bd. XXVI, 1905, No. 4, 5, 

 p. 97—103 m. 4 Figg.). 



Meyburg, H. , Beitrag zur Kenntnis des Stadiums der „primären in toto 

 konzentrischen" Knochenbildung (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXIV, 

 1904, p. 627—652 m. 8 Figg.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, 

 p. 153). 



Modica, Orazio, Nuovo metodo di fissazione del sangue (Arch. Farmacol. 

 sperim. e Sc. aftini. Anno 3, vol. III, 1904, fasc. 11, 5 pp.). 



Moll , Alfr. , Zur Darstellung der Neuroglia und der Achsenzylinder im 

 Sehnerven (Beitr. z. Augenheilk. , Festschr. Jul. Hirschberg überr., 

 Leipzig 1905, p. 195—198 m. 1 Tfl.). 



Pardl, F., Eritrociti nucleati (eritroblasti) ed anucleati, leucoblasti e cellule 

 giganti (megacariociti) nel grande epiploon del coniglio (Rendic. Accad, 

 med. Pisa, 5 febbr. 1904: Giorn. Ital. Sc. med.. Anno 2, 1904, no. 4, 

 p. 56 — 57). 



Pensa, Antonio, Delhi esistenza di fibre nervöse aventi speciali rapporti 

 collependima (Boll. Soc. med.-chir. Pavia, 1904, no. 3, p. 156—160 

 c. 1 tav.). 



Pinkus, F., Über Hautsinnesorgane neben dem menscMichen Haar (Haar- 

 scheiben) und ihre vergleichend -anatomische Bedeutung (Arch. f. 

 mikrosk. Anat. Bd. LXV^, 1904, p. 78—95 m. 2 Tlin. ; vgl. diese Zeit- 

 schr. Bd. XXH, 1905, p. 160). 




176 Neue Literatur. XXll, 1. 



Pötzsch, O. , Über die Entwicklung von Niere, Perikard und Herz bei 

 Planorbis corneus (Zool. Jahrb. , Abt. f. Anat. u. Ontogen. Bd. XX, 



1904, p. 409—438 m. 10 Figg. u. 3 Tfln. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 



1905, p. 161). 



Forelle, V., Untersuchungen über die Herkunft der Plasmazellen in der 

 Leber (Beitr. z. pathol. Anat. u. z. allgem. Pathol. Bd. XXXVI, 1904, 

 H. 2, p. 375—399 m. 1 TH. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXH, 1905, p. 164). 



Raehlmauu, E., Ultraiuikroskopische Untersuchungen von Blut- und Sekret- 

 bestandteilen (Wiener med. Wochenschr. , Jahrg. LV, 1905, No. 1, 

 p. 30—37 m. 7 Figg.). 



Rubaschkiu, W., Studien über Neuroglia (Arch. f. mikrosk. Ant. Bd. LXIV, 

 1904, p. 575—626 m. 4 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, 

 p. 158). 



Tarugi , N. , Di alcune incertezze suU'esame di macchie sanguigne e suUa 

 probabile costituzione chimica del sangue (Giorn. Ital. Sc. med.. Anno 2, 

 1904, No. 12, p. 183—185). 



Tiberti, N., Mikroskopische Untersuchungen über die Sekretion des Pan- 

 kreas bei entmilzten Tieren (Beitr. z. pathol. Anat. u. z. allgem. Pathol. 

 Bd. XXXVI, 1904, H. 2, p. 184—191 m. 1 Tfl.; vgl. diese Zeitschr. 

 Bd. XXn, 1905, p. 165). 



Tiberti, N. , Über die Sekretionserscheinungen in den Nebennieren der 

 Amphibien (Beitr. z. pathol. Anat. u. z. allgem. Pathol. Bd. XXXVI, 

 1904, H. 2, p. 161—183 m. 1 Tfl. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, 

 p. 164). 



Torday, Ariiäd v., Die basophilen Körnchen der roten Blutkörperchen 

 (Pester med.-chir. Presse, Jahrg. XLI, No. 8, p. 173 — 176). 



Weidenreich , F. , Studien über das Blut und die blutbildenden und 

 -zerstörenden Organe. 2. Bau und morphologische Stellung der Blut- 

 lymphdrüsen (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXV, 1904, p, 1 — 77 m. 

 6 Figg. u. 5 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 146). 



Weidenreich , F. , Über die Form der Säugererythrocyten und die form- 

 bestimmenden Ursachen (Folia haematol., Jahrg. II, No. 2, p. 95 — 104). 



Ziegler, K., Histologische Untersuchungen über das Ödem der Haut und 

 des Unterhautzellgewebes (Beitr. z. pathol. Anat. u. z. allgem. Pathol. 

 Bd. XXXVI, 1904, H. 3, p. 435—505 m. 8 Figg.-, vgl. diese Zeitschr. 

 Bd. XXII, 1905, p. 14.5). 




Band XXII. Heft 2. 



Ein Beitrag zur Paraffinschneidetechnik. 



Von 

 Dr. Anton Siding, 



Stadt. Arzt im Versorgungsheim der Stadt Wien, gewes. Assistent am I. anat. Institut 



in Wien. 



Ein gewiß oft empfimtlener Übelstand bei dei* Herstellung- von 

 Paraffinschnitten ist der , daß infolge des Wechsels der äußeren 

 Temperatur auch die Konsistenz und infolgedessen die Schnittfähig- 

 keit des Paraffinblockes sich ändert. Dieselbe Paraffinmischung, die 

 z. B. morgens gute und glatte Schnitte liefert , erweist sich mittags 

 als zu weich ; die Schnitte falten sich , kleben am Messer oder es 

 ist das Umgekehrte der Fall, die Schnitte rollen sich oder bröckeln 

 gar. Wenn man , wie es Rawitz ^ mit Recht empfiehlt , nur hartes 

 Paraffin mit einem Schmelzpunkt von 56 bis 58^ C. benützt, so hat 

 man zwar den Vorteil , möglichst dünne Schnitte zu erzielen , aber 

 die Unannehmlichkeit des Rollens und Bröckeins der Schnitte ist 

 natürlich in erhöhtem Maße vorhanden. 



Bei Anwendung des im folgenden zu beschreibenden Kunst- 

 griffes , der mir oft aus der Verlegenheit geholfen hat , gelang es 

 mir oft, schöne glatte Schnitte zu erhalten, wenn die bekannten 

 Mittel gegen das Rollen nnd Bröckeln der Schnitte — Schnittstrecker, 

 Erwärmen des Messers etc. — mich im Stiche ließen. 



Ich presse mir mit den Fingern ein Stückchen Zugparaffin zu 

 einer dünnen, durchscheinenden Platte von der Größe der Schnitt- 

 rtäclie zurecht und drücke dieselbe auf die Schnittfläche des Paraffin- 

 blockes auf. Einige Übung lehrt es bald, den richtigen Druck zur 

 Erzielung einer innigen Adhäsion zu finden. 



^) Leitfaden für histologische Untersuchungen. 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 2. 12 




178 Siding: Ein Beitrag zur PHraffinsclineidetechnik. XXII, 2. 



Blöcke aus hartem Paraffin oder niclit zu weichen Paraffin- 

 mischungen halten diesen Druck ganz gut aus ohne Schaden zu leiden. 



Wenn die Platte gut aufgedrückt ist, so bleibt nach dem Durch- 

 ziehen des Messers der Paraffinschnitt glatt auf der Unterfläche der 

 aufgelegten Paraffinplatte kleben und man kann nun letztere samt 

 dem Schnitt mit dem Finger auf den mit der Aufklebeflüssigkeit 

 bestrichenen Objektträger drücken. Es entfällt somit das zeitraubende 

 und unsichere Glätten des Schnittes mit der Staarnadel. 



Die vorzügliche Methode von Gaule und Altmann, bei welcher 

 die Schnitte ohne Aufklebemittel, bloß durch Kapillar-Attraktion am 

 Objektträger haften, ist hier allerdings nicht anwendbar. Die weitere 

 Behandlung des Schnittes ist die sonst bei Paraffinschnitten ge- 

 bräuchliche. 



Man erzielt bei einiger Übung sehr hübsche Resultate , man 

 kann sehr dünne und zugleich große Schnitte mit wenig Mühe an- 

 fertigen. Besonders bei der Anfertigung von histologischen Präpa- 

 raten , die als Übersichtsbilder dienen , leistet diese Methode sehr 

 gute Dienste. Bei sehr großen Objekten kann man auch, um einen 

 innigeren Kontakt der Paraffinplatte mit der Schnittfläche zu er- 

 zielen, folgendermaßen verfahren : Man erhitzt auf dem Spatel etwas 

 weiches Paraffin bis auf seinen Schmelzpunkt — eine zu starke Er- 

 wärmung ist nicht zulässig — und gießt dann das geschmolzene 

 Paraffin auf die Schnittfläche auf. 



Eine ähnliche Methode wandte Professor Hochstetter an, indem 

 er ein Stückchen Seidenpapier fest auf die Schnittfläche andrückte. 

 Böhm und Oppel^ empfehlen zur Herstellung dünnerer Schnitte die 

 Schnittfläche des Celloidin- oder Paraffinblockes mit einer dünnen 

 Kollodiumschicht zu bestreichen , dieselbe erstarren zu lassen und 

 dann zu schneiden. Bei Celloidin führt jedoch diese Methode nie 

 zum Ziele, da an dem feuchten Celloidinblock das Kollodium einfach 

 nicht haftet; bei Paraffin ist sie wohl anwendbar, doch falten sich 

 immer die Schnitte infolge der ungleichmäßigen Zusaramenziehung 

 des Celloidinhäutchens , so daß es ganz unmöglich ist , den Schnitt 

 glatt auf den Objektträger zu bringen. 



') Taschenbuch der mikrosk. Technik, S, 36. 



[Eingegangen am 15. April 1905.] 




XXII, 2. Konasch ko: Zur Technik der Injektion feiner Gefäße. 179 



[Aus dem Laboratorium für allgemeine Pathologie der Kaiserl. St. Wladimir- 

 Universität zu Kiew. Direktor: Prof. W. Lindemann.] 



Zur Technik der Injektion feiner Grefäße. 



Von 

 P. Konaschko 



in Kiew. 



Beim Injizieren von einzelnen Organen kleiner Tiere ist es bis- 

 weilen erforderlich, Kanülen in sehr feine Gefäße einzuführen. So 

 erweist es sich z. B. beim Injizieren des Pfortadersystems der Frosch- 

 niere als am zweckmäßigsten, die Kanüle in die v. portae renis 

 selbst einzuführen, wenngleich diese Prozedur bedeutende Schwierig- 

 keiten bietet. Man könnte ja freilich die Kanüle in die v. abdom. 

 anter. einbinden und von dieser aus injizieren. Doch ergäbe sich 

 dann erstens keine so vollkommene Injektion, weil ein beträchtlicher 

 Teil des Druckes auf die Injektion auch der übrigen Äste der 

 V. abdom. anter. käme, und zweitens vermöchten wir nicht, eine 

 genügend deutlich gegen kollaterale Rahmen und Anastomosen ab- 

 gegrenzte Injektion zu erhalten. 



Die Einführijug einer Kanüle in ein feines Gefäß (als „Finder" 

 dient gewöhnlich die feine Branche einer gebogenen Pinzette , wie 

 sie beim Anfertigen von mikroskopischen Präparaten gebraucht wird) 

 ist überaus schwierig und gelingt bei Anwendung der allgemein 

 üblichen Methode nicht immer. Das Haupthindernis besteht nicht in 

 der absoluten Enge des Gefäßlumens , sondern im Zusammenfallen 

 des letzteren nach dem Auswaschen des Gefäßes mit physiologischer 

 Kochsalzlösung zwecks Entfernung des Blutes. Im Zustande der 

 Ausdehnung vermag nun aber ein sogar äußerst enges Gefäß eine 

 entsprechend feine Kanüle durchzulassen. Auf Grund der erwähnten 

 Tatsachen wende ich mit Erfolg folgendes Verfahren an, bei welchem 

 zwei Kanülen zur Verwendung gelangen. Dasselbe zerfällt in zwei 

 Prozesse : 



a) Die erste — die Hilfskanüle — wird gewöhnlich in das 

 größte der mit dem zu injizierenden Gebiete im Zusammenhang 



12* 




löO Konaschko: Zur Technik der Injektion feiner Gefäße. XXII, 2. 



stehenden Gefäße eingeführt ; so wird z. B. beim Injizieren des Pfort- 

 adersystems der Niere die Hilfskanüle etwa in die v. cava inferior, 

 oder die v. abdom. anter. eingeführt. Durch diese Kanüle injizieren 

 wir das betreffende Gebiet möglichst vollständig mit einer warmen 

 farblosen Gelatinelösung von nicht allzu starker Konzentration. Hier- 

 bei ist natürlich das ganze Präparat in ein warmes Wasserbad zu 

 bringen. Nach möglichst vollkommener Injektion wird das Präparat 

 dem Bade entnommen und kalt gestellt. Die im Innern der Gefäße 

 erstarrende Gelatine erhält dieselben nun im Zustande der Aus- 

 dehnung. 



b) Es gelingt nun ziemlich leicht eine entsprechend feine Kanüle 

 in das auf solche Weise dilatierte Gefäß einzuführen. War die 

 Gelatinelösung nicht allzu konzentriert, so leistet die im Innern des 

 Gefäßes erstarrte Gelatinesäule der Einführung der Kanüle nur ge- 

 ringen Widerstand. Nach Befestigung der Kanüle wird das ganze 

 Präparat von neuem in warmes Wasser gebracht, nach Verlauf von 

 einigen Minuten die nun wieder flüssig gewordene Gelatine zum 

 Ausfließen gebracht und alsdann die eigentliche Injektionsmasse ein- 

 gespritzt. 



Mit Hilfe dieser Methode ist es mir gelungen, Kanülen sogar in 

 eine der vv. renis advehens secundariae zu bringen , die ungefähr 

 zweimal so dünn ist, als die v. renis advehens princeps (= v. portae 

 renis). Die Kanülen , die von mir in die erstgenannte Vene ein- 

 geführt wurden, stellen dünne, zu äußerst feinen Kapillaren aus- 

 gezogene Glasrölirchen dar, welche die unter hohem Drucke stehende 

 Flüssigkeit nicht in einem Strahle, sondern tropfenweise heraustreten 

 lassen. Zur Glättung der Ränder einer solchen Kanüle genügt schon 

 eine schwache Flamme. 



[Eingegangen am 5. April 1905.] 




XXII, 2, Neumayer: Objektträgergestell zur Massenfärbung. 181 



Objektträgergestell zur Massenfarbuiig von auf- 

 geklebten Paraffinschnitten. 



Von 



L. Neuniayer 



in München. 



Hierzu ein Holzschnitt. 



Die Notwendigkeit gleichzeitig zahlreiche auf Objektträgern auf- 

 geklebte Parafßnschnitte zu beliandeln fülirte zur Konstruktion von 

 Apparaten, die in vielen Fällen in rationeller Weise die Prozeduren 

 vereinfachen und abkürzen. 



Wenn ich von den vielfach im Gebrauch befindlichen Farb- 

 trögen aus Porzellan, Glas etc. absehe, die — wie schon der erste 

 von Mährenthal (1) oder der von Schaffer (2) angegebene Apparat 

 — vor allem den Nachteil liaben , daß die Objektträger, jeder 

 einzeln für sich, von einer Flüssigkeit resp. Schale in die andere 

 gebracht werden müssen, kommen hier nur jene Apparate in Betracht, 

 welche eine größere Zahl von Objektträgern mit einem Hand- 

 griff aus einem - Medium in das andere überzuführen gestatten. 



Diese Idee versuchte wohl zuerst H. Stuasser (3) praktisch zu 

 verwirklichen , indem er Blechkästchen mit siebartig durchlöcherten 

 Boden für je einen 01)jektträger verwandte, die zu je sechs in 

 flache Schalen gestellt wurden. 



Einen bedeutenden Fortschritt in gewisser Hinsiclit zeigt schon 

 das von J. Dewitz (4) aus Glas konstruierte „Gestell für Objekt- 

 träger bei Serienscluiitten". Hier können mindestens 10 Objektträger 

 zu gleiclier Zeit behandelt werden, indem der mit Objektträgern be- 

 schickte xVpparat von einer Flüssigkeit in die andere übergeführt wird. 



Auf denselben Prinzipien fußt der von R. Borrmann (5) an- 

 gegebene Apparat. Bokrmaxn , der das von Dewitz angegebene 

 Modell nicht erwähnt, konstruierte seinen Apparat aus Messing. Ein 

 aus diesem Metall hergestellter Kechen liält die auf einem messingenen 

 Wellblech ruhenden Objektträger der Länge nach in vertikaler Kich- 




182 Neuraayer: Objektträger gestell zur Massenfärbung. XXII, 2. 



tuDg und kann montiert mit 30 Objektträgern — oder 60, wenn je 

 zwei zusammen in ein Fach gebracht werden — an einer Stangen- 

 führung in den Flüssigkeitsbehälter eingesenkt oder herausgehoben 

 werden. Die hierdurch erzielten Vorteile sind in die Augen springend : 

 Es können die 60 Objektträger wie ein einziger zu gleicher Zeit 

 entparaffiniert, vollständig gleich stark gefärbt und aufgehellt werden. 

 Die Flüssigkeitsmenge von 300 bis 400 cc ist der großen Anzahl 

 von Objektträgern entsprechend und kann öfters gebraucht werden. 



Im Jahre 1901 demonstrierte v. Apathy (6) auf dem Zoologen- 

 kongreß in Berlin eine Serienklammer, die ohne Benutzung eines in 

 Fächer geteilten Gefäßes mehrere Objektträger zu gleicher Zeit zu 

 behandeln gestattet. Durch eingelegte Glasleisten werden die Ob- 

 jektträger voneinander getrennt und durch Federkraft zusammen- 

 gehalten. 



Von denselben Gesichtspunkten ausgehend konstruierte Arlexs 

 Kappers (7) einen Apparat. Derselbe besteht aus einem Metall- 

 kästchen, in das die Objektträger — bis zu 14 Stück — durch 

 Glasklötze voneinander getrennt, eingesetzt und durch Federwirknng 

 festgehalten werden. 



Zu erwähnen sind noch die von K. Holzapfel (8) mid S. Lichten- 

 berg (9) angegebenen Objektträgergestelle. Bei jenem werden die 

 Objektträger — bis zu 30 Stück — durch rechenförmige Glas- 

 rahmen in aufrechter Stellung in genau passende Glasgefäße ge- 

 bracht ; der von S. Lichtenberg angegebene Apparat ist von vier 

 aus Nickelin hergestellten gekerbten Rahmen konstruiert, in die — 

 in maximo 12 — Objektträger ebenfalls der Länge nach eingesteckt 

 lind das Ganze mittels eines über die oberen Enden der Objektträger 

 heraussehenden Verbindungsarmes in die verschiedenen Reagentien 

 gebracht werden kann. 



Aus dieser kui-zen Zusammenstellung der bisher konstruierten 

 Apparate ergeben sich zwei Systeme — abgesehen von den mit 

 Rippen versehenen Farbtrögen — von Apparaten für Massenfärbungen : 



1) Die stabilen Rahmen aus Glas oder Metall; hierher gehören 

 die von Dewitz, Borrmann, Holzapfel und Lichtenberg angegebenen 

 Vorrichtungen. 2) Die nach dem Prinzip federnder Zangen kon- 

 struierten Objektträgerhalter von Apathy und Ariens Kappers. 



Da ich für Kurszwecke 80 und mehr Objektträger gleichzeitig 

 zu färben, entwässern etc. hatte, versuchte ich die praktische Ver- 

 wendbarkeit der meisten oben angegebenen Objektträgergestelle mit 

 wenig befriedigendem Resultate. Während die einen durch die ge- 




XXII, 2. Neumayer: Objektträgergestell zur Massenfiirbung. 183 



ringe Anzahl der aufgenommenen Objektträger kaum ein rascheres 

 Arbeiten als die Farbtröge ermöglichten , erwiesen sich die andern 

 infolge ihrer Zerbrechlichkeit als wenig ökonomische Instrumente. 

 Diese und noch andere Gründe veranlaßten mich, einen soliden, ein- 

 fachen Apparat zu konstruieren , der , handlich , eine Mindestzahl 

 von 80 Objektträgern (engl. Format) zu gleicher Zeit zu behandeln 

 gestattete. 



Beistehende Figur zeigt das Instrument in der Ansicht von oben. 

 Es besteht aus zwei konzentrischen Reifen a und b , welche durch 



zwei rechtwinklig aufeinanderstehende Balken — e und c — fixiert 

 werden. Die beiden Reifen haben je eine Höhe von 2'9 cm und 

 stehen 7*9 cm in lichter Weite voneinander ab, so daß ein Objekt- 

 träger vom englischen Format leicht der Länge nach eingeschoben 

 werden kann. Auf den Querbalken e — e laufen je 1 cm vom 

 äußern und Innern Reifen entfernt zwei Ringe c und f/, die den 

 Objektträgern als Unterlage dienen. An der Innenseite des äußeren 

 Reifens a springen 80 imgefähr 1'8 cm hohe Leisten vor, die 

 ca. 0*4 cm breite Spalten zwischen sich lassen , in die die Objekt- 

 träger eingeschoben werden. Der innere Reifen b trägt acht solche 




184 Neumayer: Objektträgergestell zur Massenfärbung. XXII, 2. 



Leisten, die in etwa 2 cm Entfernung voneinander stehen und ebenso 

 "wie die am äußeren Reifen etwas niedriger wie dieser sind. Der 

 Kaum, der zwischen je zwei Leisten des inneren Reifens sich findet, 

 reicht vollkommen aus, um 10 Objektträger von gewöhnlicher Dicke 

 zu fassen , ja es bleibt noch Raum , so daß in jeden Fächer je 

 zwei Objektträger eingeschoben, in maximo also 160 Objektträger 

 zu gleicher Zeit behandelt werden können. Eine Partie des mon- 

 tierten Apparates zeigt der nach oben gekehrte Quadrant der Ab- 

 bildung, wo die Lage der Objektträger zu erkennen ist. 



Dort , wo sich die beiden Querbalken c und e innerhalb des 

 inneren Ringes {b) überkreuzen, ist in einen zylindrischen Zapfen ein 

 T-förmiges Metallstück [f) eingeschraubt. An diesem kann der ganze 

 Apparat mit Hilfe eines hakenförmigen Schlüssels, der dem Apparate 

 beigegeben ist , gefaßt und in die verschiedenen Reagentien trans- 

 feriert werden. 



Zur Herstellung dieses Objektträgergestelles wurde Gußeisen 

 verwendet, das weiß emailliert gegen alle in der histologischen Technik 

 angCAvandten Reagentien genügend widerstandsfähig ist. Aus der 

 Verwendung dieses Materials erklärt sich das relativ große Gewicht 

 des ganzen Apparates, das bei vollständiger Füllung mit 80 Objekt- 

 trägern noch um ca. 400 g steigt. Andrerseits ist aber hierdurch 

 eine Haltbarkeit des Instrumentes erzielt, die allen Anforderungen 

 im Laboratorium sowohl wie in Kursen genügen dürfte. Ich hebe 

 hier hervor, daß wir auch Versuche mit andern ]\Ietallen, Avie z. B. 

 Aluminium zur Herstellung des Apparates gemacht haben, daß aber 

 die bisherigen Erfolge gerade mit diesem Metall , wenn auch eine 

 Gewichtsverminderung auf 365 g erzielt Avurde, wenig befriedigend 

 waren. Vielleicht ergeben weitere Versuche mit Legierungen dieses 

 Metalles bessere Resultate. Als Behälter für die verschiedenen 

 Reagentien verwende ich die Koch sehen Kulturschalen. Bei der 

 Überführung der Präparate empfiehlt es sich, die den Objektträgern 

 oder zwischen denselben adhärierende Flüssigkeit abtropfen zu lassen 

 oder noch besser mit einem Fließpapierbauschen von unten lier ab- 

 zusaugen. Wird in dieser Weise verfahren, so lassen sich Toluol, 

 Alkohol etc. öfters gebrauchen und wird an Reagentien mehr gespart, 

 als wenn eine Reihe kleiner Apparate verwendet würde. 



Die bis jetzt verwendeten Apparate haben sich auf das beste 

 bewährt ; die Vorzüge derselben liegen vor allem in der großen Zeit- 

 ersparnis, die das Arbeiten mit ihnen bei Massenfärbungen gewährt, 

 in ihrer Widerstandsfälligkeit gegen alle Reagentien, gegen große 




XXII, 2. Neuiuayer: Objektträgergestell zur Massenfärbung. 185 



Hitze und in der Gleiclimäßig'keit der Fcärbung, die bei absolut 

 gleich lang-er Tinktion sämtliche Schnitte zeigen. 



Die beschriebenen Objektträgergestelle sind durcli das Spezial- 

 geschäft für Mikroskopie und medizinische Diagnostik von Dr. A. 

 ScHWALM, München, Sonnenstraße 10, zu dem Preise von 6 Mark 

 zu beziehen, welches auch die technische Ausführung der Apparate 

 übernommen hatte. 



Literaturverzeichnis. 



1) Zitiert bei Dewitz, J., Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXIII, p. 41(j. 



2) Schaffer, J., Ein Glasgefaß zur Verarbeitung umfangreicher auf- 

 geklebter Schnittserien (Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XI, p. 150). — Der- 

 selbe, Ein neuer gläserner Farbtrog für Serienschnitte (Zeitschr. f. wiss. 

 Mikrosk. Bd. XIX, p. 297). 



3) Strasser , H. , Über die Nachbehandlung von Serienschnitten bei 

 Paraffineinbettung (Zeitschr. f. wiss. ]Mikrosk. Bd. III, 1880, p. 346). 



4) Dewitz, J., Gestell für Objektträger bei Serienschnitten (Arch. f. 

 mikrosk. Anat. Bd. XXXIII, p. 410). 



5) BoRRJiANN, R., Ein neuer Apparat zur bequemen, schnellen und 

 gleiclimäßigen Färbung und Weiterbehandlung von Serienschnitten (Zeitschr. 

 f. wiss. Mikrosk. Bd. XI, p. 459). 



ij) Apäthy, S. V., Über einige neue mikrotechnische Vorrichtungen. 

 Mit Demonstration der Apparate, 9 Figg. (Ber. üb. d. Verh. d. 5. Internat. 

 Zool. Kongr. Berlin 1901). 



7) Ariens Kappers, C. U. , P^in kleiner Apparat für die Gesamt- 

 behandlung vieler Objektträger (Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XXI, p. 185). 



8) Holzapfel, K., Gestell für Objektträger bei Reilienschnitten (ArcJL 

 f. mikrosk. Anat. u. Entwicklungsgesch. Bd LIX, p. 457). 



9) Lichtenberg, S., Objektträgergestell zur gleiclizeitigen Behandlung 

 zahlreicher Schnitte (Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XXI, p. 321). 



[Eingegangen am 19. Juni 1905.] 




186 P a V 1 w : Kreosot als wasserentziehendes Mittel bei Einbettung. XXII, 2. 



Kreosot als wasserentziehendes Mittel bei der 

 Einbettun o; in Paraffin. 



Von 

 W. Pavlow 



in Charkow. 



Die üblichen Methoden für Einbettung in Paraffin bestehen im 

 allgemeinen in folgendem. Die fixierten Objekte werden in Wasser 

 gewaschen und hiernach in Alkohol verschiedener Stärkegrade zur 

 Entwässerung und Härtung gelegt. Weiter bringt man sie in Flüssig- 

 keiten, welche Paraffin lösen (z.B. Xylol, Toluol etc.) und endlich 

 in reines Paraffin. Die Entwässerung und die Härtung in absolutem 

 Alkohol wird als unerläßlich für die Einbettung in Paraffin be- 

 trachtet. 



Der Nachteil dieser Methode ist allen bekannt. Wenn das 

 Objekt bei der Übertragung in Xylol, Toluol etc. nicht gut genug ent- 

 wässert ist, so wird es von den Flüssigkeiten und vom Paraffin nicht 

 durchdrungen , und infolgedessen schneiden sich solche Präparate 

 schlecht. 



Zur völligen Entwässerung ist es unbedingt nötig, die Objekte 

 längere Zeit im Alkohol , welcher einige Male gewechselt Avird , zu 

 halten, was — von den Kosten abgesehen — die fixierten Gewebe 

 angreift: sie schrumpfen, brechen leicht etc. 



Die von mir vorgeschlagene Methode der Einbettung der Objekte 

 in Paraffin erleichtert die Sache sehr, und die Präparate fallen dabei 

 nicht schlechter aus als bei der alten. 



Die in irgendeiner Flüssigkeit fixierten, und wenn nötig, mit 

 Wasser gewaschenen Objekte werden ohne vorhergehende 

 Entwässerung in Creosotum fagi auf 4 bis 24 Stunden 

 (je nach der Größe des Objekts), dann auf 2 bis 3 Stunden in 

 reines Kreosot gebracht, dann auf Filtrierpapier zur Entfernung des 

 überschüssigen Kreosots gelegt, auf eine Stunde in Xylol oder Toluol 

 übertragen, und dann wie gewöhnlich im Paraffin eingebettet. 




XXII, 2. Fiorentini-Signer: Metodo di Colorazione e Conservazione. 187 



Man kann auch aus dem reinen Kreosot direkt ins Paraffin 

 übertragen. Die auf solche Weise eingebetteten Objekte werden 

 gut vom Mikrotom geschnitten, färben sich gut und stehen den mit 

 vorangehender Entwässerung eingebetteten Objekten nicht nach. 



[Eingegangen am 4. Juni 1905.] 



[Istituto di Clinica ^ledica deUa R. Universitä di Messina. Diretto dal 



Prof. Cav. U. Gabbi.J 



Su di un Metodo di Colorazione e Conservazione 

 permanente del Sedimente urinario. 



Dei 



Dott. Pietro Fiorentiui, ed M. Signer, 



I" Assistente Assistente volontario. 



Con una tavola (tab. I). 



Tutti coloro che si sono occupati di ricerche di microscopia clinica 

 sono d'accordo neU'ammettere che e una buona pratica colorare il 

 sedimento urinario, ed in ispecie perche i cilindri ialini sono talora 

 cosi diafani da riuscirne difficile l'osservazione. 



Jaksch^ dice che inditfenteremente si possono nsare il picro- 

 carminio , il violetto di Genziana , l'eosina , rematossilina acida , la 

 saffrauina, il Bruno di Bismarck. Tale affermazione e certamente 

 inesatta giacche, come vedremo in seguito , alcune di tali sostanze 

 coloranti rispondono assai mediocremente allo scopo. 



Beale- consiglia il Rosso di Magenta , che corrisponde assai 

 bene ; Knüll ^ il Violetto di Metile. — Altri, ed anche lo stesso Jaksch, 

 raccomandano la soluzione iodoiodurata, l'acido osmico, il bicromato 



^) Jaksch : La diagnosi clinica delle malattie interne (Milano, Vallardi). 



-) Beale : Arch. of Med. 1863. 



"") Knoll: Zeitschr. f. Heilk. 1882—1884. 




188 Fiorentini-Signer : Metodo di Colonizione e Consei-vazione. XXII, 2. 



potassico ; Coplin-^ il Sudan III per il grasso ; Padoa^ la doppia 

 colorazione clie si ottiene col Sudan III (Daddi) ed il Bleu di Metile. 



E stata usata la fucsina , Fematossilina alluminata , Padoa ä 

 esperimentato con la nnicomateina e col mucocaruiinio , constataudo, 

 a difterenza di Meyer ed Harris, che queste 2 ultime sostanze non 

 presentano alcun speciale vantaggio. Kon furono dimenticati l'acido 

 picrico, le soluzioni ammoniacali di Carminio, la tintura di Jodo. 



Noi abbiamo provato, senza risultati degni d'interesse, l'orceina, 

 il rosso inagdala, la cocciniglia, la tionina fenica. 



Gli inconvenieuti a cui danno luogo questi metodi varii di colora- 

 zione si possono brevemente riassumere cosi : 



Le soluzioni alcaline sciolgono in parte i cilindri mentre in 

 quelle neutre questi si rigonfiano ed assumono assai male il colore. 

 I cristalli subiscono anch'essi delle alterazioni piü o meno notevoli. 



L'acido osmico da dei preparati in genere assai confusi a causa 

 della notevole quantitä di precipitato, e per quanto si cerclii, non e 

 possibile ottenere preparazioni nitide e pulite. 



Inoltre il metodo e poco spedito giacclie Tacido osmico deve 

 agire a lungo. Padoa, che si e niolto occupato deirargomento, non 

 ha avuto anch'egli buoni risultati. 



L'ematossiline rispondono discretamente purche l'orina non con- 

 tenga muco e non si tratti della alluminata , e cosi pure rispondono 

 discretamente allo scopo „l'eosina, il violetto di Genziana, la fucsina 

 acida, l'acido picrico , il bleu di metile , la tintura di jodio , sempre 

 in soluzioni diluite. 



II metodo della doppia colorazione proposto da Padoa col Rosso 

 Sudan III (Daddi) ed il bleu di metile serve molto bene per la 

 ricerca del grasso nei cilindri urinarii. 



Ma cio che colora ottimamente il sedimento urinario nei suoi 

 singoli componenti e la miscela triacida di Ehrlich. Con questa 

 si ha una colorazione di contrasto che e veramente interessante. 



II Protoplasma cellulare ed i globuli rossi assumono una distin- 

 tissima colorazione rosso orange, mentre i globuli bianchi si colorauo 

 nei loro protoplasma in rosso, i nuclei in verde e cosi pure i raicro- 

 organismi. Gli spermatozoi assumono nella porzione cefalica una 

 bella colorazione verde, mentre la coda si colora piü debolmente : 



1) Coplin: Reazioni microchiiuiche dei cilindri renali (British Med. 

 Journ. 1902). 



-) Padoa: Iliv. Crit. Clin. Med. 1904. 




XXII, 2. Fiurentinl-Öigner: Metodo di Colorazione e Conservazione. 189 



i cilindri ialini si colorano in im delicatissimo colore violetto, meiitre 

 i granulosi, ed i cerei in rosso orange, gli ialino granulosi assiimono 

 tale doppia colorazione. I cristalli in genere non vengono alterati. 

 Gli elementi nei cilindri assuraono il colore nel modo gia indicato. 



I granuli grassosi spiccano piu distintaniente (vedi tavola), 

 Castellino a recentissimamente confermata la nostra osservazione 

 (Sahli Punt'^ V«). 



Inoltre nel metodo che noi veniamo indicando cio che ha spe- 

 ciale importanza e quanto rigiiarda non la tecnica di Colorazione, 

 ma qiiella di Conservazione. E noto che il volere fare dei preparati 

 permanenti di sediraento urinario e cosa difticile per il fatto che il 

 sedimento siibisce sia col proscingamento all'aria , sia con quello al 

 calore anche lieve o con l'alcool o coi metodi di Lenker, Marchi 

 Müller, delle modificazioni e dei guasti piü o meno gravi secondo 

 che si tratta di cellule, di globiili, di cilindri e di cristalli. Questi 

 diie Ultimi in genere souo i piü danneggiati. 



l'cr questo si usa molto poco il metodo di Conservazione per- 

 manente di sedimento urinario. Noi facendo una Serie di ricerche 

 sul proposito abbiamo potuto constatare che il sedimento Jion subisce 

 alcuna modificazione ove venga trattato con glicerina lievissima- 

 mente acida. 



Forti di questa osservazione , dopo avere raccolto il sedimento 

 urinario o mediante centrifugazione o lasciandolo precipitare in cilindri 

 di vetro , dopo averlo rapidamente colorato con la miscela triacida, 

 lo abbiamo trattato con glicerina leggermente acidulata. 



Una goccia. dei sedimento cosi colorato e preparato, posto su 

 di un porta oggetti, ricoperto dal relativo coprioggetti , si luta con 

 Bitume Giudaico. 



In tal modo si ottengono dei preparati permanenti, ottimamente 

 colorati, che resistono inalterati alla luce ed alFaria per dei mesi. 

 (La tavola rappresenta una goccia di sedimento d'iirina di un nefri- 

 tico degente in clinica nel febbraio. II preparato venne precisamente 

 allestito in tale epoca , il disegno fu fatto 3 mesi dopo senza che 

 dnrante tale periodo di tempo il sedimento subisse alterazione alcuna.) 



L'utilita quindi di tal metodc» e grandissima in ispecie dal punto 

 di vista dimostrativo , in quanto che si puo cosi teuere e rievocare, 

 quando si voglia, tutta revoluzione di un processo renale. 



[Eingegangen am 15. Juni 1905.] 




190 Bödecker: Eine Entkalkungsmethode für Gewebe. XXII, 2. 



Eine Entkalkungsmethode für Gewebe, 

 welche wenig organische Substanz enthalten, ins- 

 besondere Zahnschmelz. 



[Vorläufige Mitteilung.] 



Von 



C. Francis Bödecker, 



D. D. S. 



Hierzu eine Tafel (Tab. II). 



Die außerordentliche Schwierigkeit, gute mikroskopische Präpa- 

 rate von dem organischen Bestandteil des Schmelzes herzustellen, 

 veranlaßte mich, eine neue Entkalkungsmethode zu ersinnen. Bei 

 dem Gebrauch dieser Methode ist es möglich, den gesamten proto- 

 plasmatischeu Inhalt des Schmelzes in annähernd riclitiger Lage zu 

 erhalten. Durch die übliche Entkalkungsmethode, bei welcher Zähne 

 direkt in eine dünne Säurelösung gelegt werden, wird der Proto- 

 plasmabestandteil des Schmelzes von dem des Dentins abgerissen 

 und weggewaschen. Bessere Präparate wurden durch Entkalkung 

 dünner Schmelzschliffe unter dem Deckglas erhalten, aber auch hier- 

 bei konnte man nur kleine starkverzerrte Reste sehen. 



Bei Anwendung der neuen Methode werden die Präparate in 

 der üblichen Weise bis zur dünnen Celloidinlösung gebracht. Dann 

 kommen die Stücke in die Entkalkungslösung , welche aus dickem 

 Celloidin mit einem Zusatz von 6 bis 10 Prozent konzentrierter 

 Salpetersäure besteht. Die Stärke der Säure ändert sich außer- 

 ordentlich wegen der schnellen Verdunstung des Alkohols und Äthers. 

 Darum müssen alle 2 bis 3 Tage einige Tropfen Alkohol und Äther 

 zugesetzt werden, um die richtige Konsistenz zu erhalten. Die Dauer 

 des Entkalkungsprozesses hängt natürlich von der Größe des Präpa- 

 rats ab. Ich habe Schliffe von ungefähr 30 Mikron Dicke innerhalb 




XXII, 2. Bödecker: Eine Entkalkungsmethode für Gewebe. 191 



2 Wochen entkalkt, während ein 1 mm dicker Querschnitt von einem 

 Bikuspidaten über 2 Monate in Anspruch genommen hat. Nachdem 

 das Präparat 2 Tage Lang in der Säurelösung verweilt hat, bekommt 

 es ein kreideartiges Aussehen. In dem Maße aber , wie die Ent- 

 kalkung fortschreitet, wird der Schmelz immer durchsichtiger, bis er 

 zuletzt anscheinend verschwunden ist. Nur eine feine Linie markiert 

 die äußere Grenze des Schmelzes. Wenn dieses Stadium erreicht 

 ist, läßt man das Celloidin allmählich erhärten. Wegen der Schwierig- 

 keit, dünnere Celloidinschnitte wie 10 bis 1,5 Mikron zu erhalten, bette 

 ich den Celloidinblock in Paraffin ein und erlange durch diese kom- 

 binierte Methode dünnere Schnitte. 



Das Quantum organischer Bestandteile im Schmelz verschiedener 

 Personen variiert außerordentlich. Außer den Schmelzfasern und 

 andern protoplasmatischen Bildungen, die von meinem Vater im Jahre 

 1878^ beschrieben worden sind, habe ich zwei neue Arten organischer 

 Körper gefunden. Der eine von diesen tritt auf in der Gestalt von 

 Bündeln dickerer organischer Fasern, welche ihren Ursprung in der 

 Grenze zwischen Schmelz und Dentin haben und in der Richtung 

 nach außen laufen. Diese Bündel kommen öfters in Paaren vor, 

 und können im Schliff mit der Form eines Büschels verglichen werden. 

 Die andern sind blattartige, wellenförmige Fortsätze, die in ungefähr 

 derselben Richtung wie die Schmelzprismen verlaufen. Von ihrem 

 Ursprung an der Dentingrenze durchziehen sie den Schmelz öfters 

 bis zur Oberfläche, während die büschelförmigen Bündel nur ungefähr 

 bis zu einem Sechstel dieser Länge eindringen. Da die blattartigen 

 Fortsätze denselben Verlauf aufweisen wie Sprünge im Schmelz, sind 

 sie bisher auch als solche aufgefaßt. Ein passender Name für diese 

 Gebilde wäre „Schmelzlamellen". 



Die Methode kann auch mit Vorteil zur Entkalkung und Ent- 

 kieselung der Schwämme angewandt werden. Die Entkalkung wird 

 in der beschriebenen Weise ausgeführt, während, die Entkieselung 

 mit Flourwasserstoff in von Blei und Glimmer speziell konstruierten 

 Gefäßen vorgenommen werden muß , worüber ich noch einen ein- 

 gehenderen Bericht bringen werde. 



Mit dieser Methode hoffe ich mehrere dunkele Stellen in der 

 Entwicklung des Schmelzes aufzuklären. Auch werde ich die ver- 

 gleichende Anatomie des Schmelzes nach dieser Methode durch- 

 arbeiten, und hoffe bald darüber berichten zu können. 



1) BÖDECKER, C. F. W., Dental Cosmos vol. XX, p. 582. 




192 S t r e li 1 : Mikroskopisches Experiment. XXII, 2. 



Tab. II. Entkalkter Schnitt eines menschlichen Zahnes; Färbung 

 mit Gold. — Unten Dentin, oben organische Bestandteile im Schmelz 

 sichtbar. 



[Eingegangen am 19. Juli 1905.] 



Mikroskopisches Experiment. 



Von 



Karl Strehl 



in Erlangen. 



Auf Seite IG meiner scheint es fast unbekannten „Tlieorie der 

 allgemeinen mikroskopischen Abbildung" (Erlangen 1900) zeigte ich, 

 daß die Beugungsspektra komplementärer Strukturen (z. B. von Löcher- 

 platte und Körnerschicht) Hauptmaxima von gleicher, Nebenmaxima 

 von gegensätzlicher Phase liabeu. Ein derartiges Verhältnis weist 

 u. a. das reziproke Gitter auf, bei Avelchem die Striche zur einen 

 Hälfte Lücken, zur andern Hälfte Leisten sind. Wenn die Maxima 

 (Hauptmaximum), 1 und 2 (1. und 2. Nebenmaximum) der oberen 

 Hälfte gleiche Phase, d. h. die folgeweisen Vorzeichen -| — | — \- haben 

 (dies ist z. B. der Fall bei dem Verhältnis Lückenbreite : Leisten- 

 breite = 1:2), dann sind die entsprechenden Vorzeichen bei der 



unteren Hälfte (mit dem reziproken Verhältnis 2 : 1) -| ■ — ; wenn 



man mithin das Hauptmaximuni abblendet , dann müssen die beiden 

 Nebenmaxima (weil unter sich von gleicher Phase, die einen -| — |-, 



die andern , und auch gegenseitig von gleicher Stärke , die 



einen ebenso hell wie die andern) in beiden Hälften das gleiche Bild 

 erzeugen, d. h. Lücke auf Lücke und Leiste auf Leiste treffen. 



Diesen Versuch hat Herr Julius Rheinberg (London) photo- 

 graphisch fixiert, beschrieben und in seiner Weise erklärt in „The 

 intluence on Images of gratings of phase-difterences amongst their 

 spectra" (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, p. 152), wovon er mir einen 

 Abzug zu senden die Güte liatte. 



Auf Seite 14 meiner oben genannten Schrift zeigte ich auch, 

 daß das AVandern einer Struktur in Phasenänderungen der sonst 

 scheinbar unveränderten Nebenmaxima seine Erklärung findet. Eine 




XXII, 2. S t r e h 1 : Mikroskopisches Experiment. 1 9 3 



Verschiebung des Gitters vim die halbe Gitterkonstante entspricht 

 einer Phasenänderimg von Maximum zu Maximum um ^/2 mehr, mit- 

 hin einer Multiplikation der entsprechenden Vorzeichen abwechselnd 

 mit — und -\-. 



Auch hierüber stellte Herr Julius Rheinberg Versuche an laut 

 einem andern Abzug (Journ. R. Microsc. Soc. 1904, p. 388 ; gleicher 

 Titel). Für mich ist nun wertvoll zu zeigen , daß die Verbindung 

 beider Gesichtspunkte gestattet, aus dem Beugungsspektrum der 

 zentrierten (d. h. die Mikroskopachse mit einer Lücke, nicht Leiste, 

 treffenden) oberen Hälfte das der zentrierten unteren Hälfte abzuleiten. 



Wenn die Vorzeichen für die obere Hälfte -j 1 \~ sind, dann 



sind sie aus Gründen der Reziprozität (komplementären Struktur) für 



die untere Hälfte -| nach der Verschiebung um die halbe 



Gitterkonstante, vor der Verschiebung, d. h. für die zentrierte untere 



Hälfte mithin -] \ ; hierin kommt der angeblich erst von A. E. 



CoNRADY bemerkte Phasenwechsel der Nebenmaxima zum Ausdruck. 



Tatsächlich ist der Vorzeichenwechsel an Stelle der absoluten 

 Minima (dunkeln Beugungsringe) schon längst (mindestens seit v. Lom- 

 MELS Arbeiten) bekannt; ihm Rechnung zu tragen, lassen die in 

 meiner Mikroskoptheorie für die Beugungsspektra eingeführten all- 

 gemeinen Koeffizienten h i j />• ohne weiteres zu. Daß , wenn eine 

 unendliche , periodische , regelmäßige Struktur an Stelle einer konti- 

 nuierlichen Beugungsfigur, wie sie durch eine einzige Öffnung ent- 

 steht, durch das Zusammenwirken aller Öffnungen isolierte Maxima 

 zeigt, diese dann an der örtlichen verhältnismäßigen Lichtstärke und 

 Phase teilnehmeiij dies ist wohl selbstverständlich. Einige Sätze 

 über Zahl und Lage der positiven Nebenmaxima zwischen Zentrum 

 und 1. absolutem Minimum allerdings sind interessant und erscheinen 

 mir für den Augenblick neu. 



Und so begrüße ich denn die angezeigten hübschen und ver- 

 dienstlichen Experimente als willkommenen Anlaß, Anregung zu geben, 

 daß man auch bei uns — nicht nur in England — sich eifrig mit 

 beugungstheoretischer Optik beschäftige. Möge .man jedoch auch 

 von dem Einsicht nehmen , was schon vorhanden ist ; denn der 

 Rohbau ist im großen und ganzen schon fertig, es wird sich meines 

 Erachtens meist nur um die Ausschmückung einzelner Räume handeln. 



[Eingegangen am 14. Juni 1905.] 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 2. 13 




194 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



Die Fortschritte 



der botanischen Mikrochemie seit Zimmermanns 



„ Botanischer Mikrotechnik ". 



Saminelreferat 

 von 

 Dr. Oswald Richter . 



in Prag. 



Einleitung. 



Die ungeahnte Höhe, zu der sich die Mikrochemie als Hilfs- 

 wissenschaft der Botanik aufgeschwungen liatte, veranlaßte 1881 

 PouLSEN auf Anregung Warmings sein Werkchen „Die botanische 

 Mikrochemie" zu veröffentlichen, die sich als treffliches Hilfs- 

 mittel in der Hand des Botanikers erwies. 



Zu derselben Zeit beschäftigte sich W. Behrens mit der Redak- 

 tion seines Werkes „Hilfsbuch zur Ausführung mikrosko- 

 pischer Untersuchungen", bei dem er sich als Ziel gesteckt 

 hatte , die „wichtigsten Keaktionsmethoden und die mikroskopische 

 Untersuchung der Pflanzenstoffe" in erschöpfender Darstellung zu 

 bringen. 



War PouLSENS Werk ein Führer für Anfänger, so sollte 

 dieses dem Fach manne gleichzeitig einen vollkommenen Einblick 

 in die einschlägige Literatur bieten und dadurch zu einem großen 

 wertvollen Hilfsbuche werden. 



In der richtigen Erkenntnis, daß die Botaniker bei der Unter- 

 suchung der Nahrungs- und Genußraittel das Hauptgewicht auf die 

 Anatomie , die Chemiker aber bloß auf die in den Objekten ge- 

 fundenen Stoffe legten , veranlaßte jMolisch zu einer Verbindung 

 dieser getrennten Standpunkte und wies so der Mikrochemie auch 

 die gebührende Rolle in der Nahrungsmitteluntersuchung zu. Die 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 195 



liäutige Bezugnalime auf seinen „Grundriß e i n e r H i s 1 c h e m i e 

 der pflanzlichen Genuß mittel" gibt den besten Beleg dafür, 

 wie notwendig dieser Fortschritt war. 



Somit war seit Poulsen und W. Behrens etwa ein Dezennium 

 verstrichen, während welchem die Mikrochemie immer neue Gebiete 

 eroberte, und die Fülle von Schriften botanisch-mikrochemischen und 

 mikroskopisch-technischen Inhalts, die in den verschiedensten Zeit 

 Schriften veröffentlicht worden waren, hatten das Bedürfnis gezeitigt, 

 sie zusammenfassend und kritisch zu behandeln. In wie ausgezeich- 

 neter Weise Zimmermann dieser schwierigen Aufgabe gerecht wurde, 

 beweist die starke Verbreitung seines Werkes „Die botanische 

 Mikrotechnik" und die große Beliebtheit, deren es sich erfreut. 



Um dieselbe Zeit baute H. Behrens in Verfolgung der durch 

 K. Haushofers „Mikroskopische Reaktionen" gegebenen Anregungen 

 sein großes System der mikrochemischen Analyse aus, um es 1895 

 bis 1897 in seiner „Anleitung zur mikrochemischen Ana- 

 lyse" zum Abschluß zu bringen. 



Daß bei der Fülle von Stoff, der zu bewältigen war, mancher 

 geringe Fehler unterlaufen ist, so z. B. gewisse Reaktionen ohne ge- 

 nügende Überprüfung mit aufgenommen worden sind, tut der Behrens- 

 schen Leistung keinen Eintrag und wird dem Verfasser des großen 

 Werkes den Ruhm nicht nehmen, der Begründer des Systems 

 der mikrochemischen Analyse gewesen zu sein. 



Es braucht kaum hervorgehoben zu werden , daß Behrens be- 

 sonders bei der Analyse der wichtigsten Faserstoffe der botanischen 

 Mikrochemie gerecht wurde. 



In kurzen Zügen ist er auf den technischen Teil seiner Aus- 

 führungen im Jahre 1900 in seinem Büchlein „Mikrochemische 

 Technik" zurückgekommen. 



Inzwischen gab W. Behrens auch ein sehr beliebt gewordenes 

 Buch heraus; seine „Tabellen zum Gebrauche bei mikro- 

 skopischen Arbeiten", das dem Tier- wie dem Pflanzen- 

 histologen gleich wert geworden ist. 



Kurz sei auch auf Dünnenbergers „Chemische R e a g e n - 

 tien und Reaktionen" verwiesen, die von einem Apotheker für 

 Apotheker und Chemiker geschrieben, durch Aufnahme auch von 

 botanisch- mikrochemischen Reaktionen Interesse für die botanische 

 Mikrochemie gewinnen. 



Doch speziell mit dieser Wissenschaft bat sich seit Zimmermanns 

 erwähntem Buche kein größeres Werk beschäftigt. 



13* 




196 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



Seit dem Erscheinungsjahre der „Mikrotechnik" war wiederum 

 etwa ein Dezennium verflossen und die inzwischen angehcäufte Literatur 

 hat ein neues großartig angelegtes Werk gezeitigt, dessen Verfasser, 

 vornehmlich Ärzte und Chemiker, ihr Hauptaugenmerk natürlich der 

 Mikrotechnik auf menschen- und tier histologischem 

 Gebiete zuwandten, die aber, um den Einseitigkeitsstandpunkt zu 

 vermeiden, sich auch mit Botanikern in Verbindung setzten und so 

 ein Werk zu schaffen verstanden, das in der mikroskopischen Technik 

 einzig dasteht, die „Enzyklopädie der mikroskopischen Technik" von 

 P. Ehrlich, R. Krause, M. Moose, H. Rosin. Berlin u. Wien (Verlag 

 ürban u. Schwarzenberg) 1903. 



Den botanischen Teil übernahm W. Magnus, Berlin. 



Der schlagwortweisen Anordnung der Enzyklopädie entsprach 

 es natürlich , daß auch die botanischen Daten in derselben Weise 

 geliefert wurden, wodurch sie sich wohl harmonisch in den Rahmen 

 des Ganzen fügten , dabei aber sachgemäß ihren inneren Zusammen- 

 hang preisgaben. 



Da nun W. Magnus' Ausführungen die letzten zusammenfassen- 

 den Erörterungen über botanische Mikrochemie enthalten , so ergibt 

 sich hier eine Lücke — es fehlt ein Sammelreferat für botanische 

 Mikrochemie über die letzten 12 Jahre — , das zu übernehmen, 

 beziehungsweise die auszufüllen ich von dem Herausgeber dieser 

 Zeitschrift gebeten wurde. Eine derartige Literaturzusammenstel- 

 lung über Arbeiten auf dem Gebiete der botanischen Mikrochemie 

 wird um so berechtigter erscheinen, als diese sehr an Bedeutung 

 gewonnen hat. 



Im Jahre 1867 hat sie Wiesner die Mittel in die Hand gegeben, 

 seine „Einleitung in die technische Mikroskopie" zu schreiben. Und 

 wer heute die im Jahre 1900 erschienene zweite, gänzlich umgearbeitete 

 und erweiterte Auflage seines Werkes „Die Rohstoffe des Pflanzen- 

 reiches" durchsieht und auf die Einleitung, dann gewisse Kapitel wie 

 „Physikalisch -mikroskopisch -chemische Charakteristik des Indigo", 

 „Chemische p]igenschaften der Stärke", „Chemische Charakteristik 

 des Holzes und der andern fibrösen Pflanzengewebe", „Chemische 

 Eigenschaften der Fasern" genauer eingeht, wird von der Bedeutung 

 der botanischen Mikrochemie auch auf dem Gebiet der Rohstoft'lehre 

 und ihrer Bedeutung überhaupt überzeugt sein. — J^ine neue Rich- 

 tung der Wissenschaft, die auch hervorragend durch die Mikrochemie 

 gefordert wurde, ist die Biochemie, wie Czapeks umfassendes Werk 

 beweist. — Man wird daher mein Beginnen, ihre Geschichte seit 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 197 



Zimmermanns botanischer Mikrotechnik zu schreiben, für gerecht- 

 fertigt halten. 



Mein Sammelreferat schließt also unmittelbar an Zimmermanns 

 Mikrotechnik an, was sich auch äußerlich darin ausprägen soll, daß 

 ich soweit wie möglich die gleiche f^inteilung verwendet und damit 

 sowohl in sachlicher wie in historischer Beziehung mit meinem Re- 

 ferate eine freilich äußerst unvollkommene Ergänzung dieses Werkes 

 mich zu liefern bemüht habe. 



Es ist selbstverständlich, daß ich bei der Fülle des Stoffes außer 

 der Bewältigung der Lektüre einiger Arbeiten im Originale mich 

 vornehmlich an Referate und hier wieder besonders an die in dieser 

 Zeitschrift erschienenen gehalten habe. 



Um nun bei den Besitzern derselben eine rasche Orientierung 

 zu ermöglichen , habe ich auch auf die Stellen in dieser Zeitschrift 

 verwiesen, indem ich den Titel der Arbeit in der Literaturzusammen- 

 stellung nur gekürzt wiederholte. In jenen Fällen natürlich , wo 

 eine Besprechung in ihr noch nicht erfolgt ist, und in jenen, wo 

 ich mich auf Seitenzahlen zu beziehen hatte, wurde die Arbeit aus- 

 führlich zitiert. 



Nachdem ich so die Gedanken, die mich bei Verfassung meines 

 Referates geleitet haben, und den Vorgang, an dem ich bei der 

 Niederschrift festhielt, erörtert habe, übergebe ich es der Öffentlich- 

 keit und bitte die geehrten Fachgenossen um gütige Nachsicht. 



I. Abschnitt : 



Anorganische Verbindungen. 



Sauerstoff O.,. 



f. 



Als empfindlichstes bisher bekanntes Reagens auf Sauerstoff gilt 

 die Engelmann sehe Bakterien- Methode. 



Fast scheint sie aber übertroffen durch den von Beijerinck an- 

 gegebenen Sauerstoffnachweis mittels Leuchtbakterien. Zieht man in 

 einer Eprouvette mit chlornatriumhaltiger Fleischbouillon Leucht- 

 bakterien, so zeigt sich, daß sie nur oben leuchtet, dort, wo die 

 Bakterien unmittelbar mit der Luft in Berührung kommen, tiefer 

 unten verlischt infolge des durch Atmung erzeugten Sauerstoffmangels 




198 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, '2. 



(las Leuchten der geschüttelten Eprouvette alsbald. Wirft man ein 

 ZweigstUck von Fucus in die Bouillon und wartet im Dunkeln das 

 Dunkelwerden am Eprouvettengrunde ab, so genügt nachher das Licht 

 eines Streichhölzchens , um das Fucusfragment zum Leuchten im 

 Dunkeln zu veranlassen. Der Moment der Beleuchtung hat genügt,. 

 um die Kohlensäureassimilation zu induzieren. Und jene Spur ab- 

 geschiedenen Sauerstoffes reicht aus, um die Bakterien zum Leuchten 

 zu bringen. — Beijerinck hat diese Methode später zur Unter- 

 suchung der Chlorophyllfunktion benutzt und Moliscu sie zum Nach- 

 weis postmortaler Assimilation bei Lamium album- Blättern verwendet. 



Das Problem der Assimilation hat auch Kohl die alte Bläschen- 

 zählmethode in eine neue mikroskopisch verwendbare umsetzen lassen. 

 Er nennt die Modifikation: die vol u m e tr is ch e B las ch en z ä h 1- 

 methode. Eine geeignete Versuchsanstellung gestattet nämlich, die 

 Durchmesser der sich bildenden Bläschen sofort abzumessen , wo- 

 durch die Möglichkeit auf das Volumen zu schließen, unmittelbar 

 gegeben ist. 



Zumeist findet der Sauerstoff in physiologischer Beziehung Er- 

 wähnung. Molisch und Lidforss beweisen die Notwendigkeit von 

 Sauerstoff zum Auskeimen des Pollens und Molisch, daß die Pollen- 

 schläuche nur eine ganz bestimmte 0-Spannung lieben und vor dem 

 Sauerstoff der Luft fliehen („negativer Aerotropismus"). Im übrigen 

 vergleiche man die übliclien Lehrbücher. 



Schwefel S. 



Nach H. Behrens wird der Schwefel als Calciumsulfat, als 

 Caesiumalaun und als Bleisulfat nachgewiesen. Es wird wohl ein- 

 mal notwendig sein, die Verwendbarkeit dieser mikrochemischen 

 Methoden für den Nachweis des Elementes in der Pflanze darzufun. 



Bekanntlich erscheint der Schwefel in elementarer Form bei 

 den Schwefelbakterien. In zusammenfassender Darstellung findet man 

 unsere derzeitigen Kenntnisse dieser Organismen in dem ,, Handbuch 

 der technischen Mykologie" unter dem Titel „Der Kreislauf des 

 Schwefels" von W. Omelianski wiedergegeben. — Einen neuen 

 Schwefelorganismus hat Hinze in der Thiophysa volutans entdeckt. 

 Die in den Zellen der Thiophysa gelegenen Körnchen bestehen ebenso 

 wie die der Beggiatoa aus Schwefel. In reinem Glyzerin kristal- 

 lisiert der Schwefel allmählich in monuklinen Kristallen aus. In 

 entschwefelten Thiophysen scheinen Schwefelbildner sichtbar zu wer- 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrocheraie. 199 



den. Auch bei OsciUarien konnte Hinze einen sehr beachtenswerten 

 Befund verzeichnen, der auf die „Gasvakuolenfrage" ein Streiflicht 

 wirft. Hinze hat nämlich bei gewissen OsciUarien diese ,,Gasvaku- 

 olen" als Schwefel erkannt, den er in reinem Glyzerin zur Kristal- 

 lisation brachte. 



P"'ärbung des Schwefels. Gibt man nach A. Fischer ein 

 Präparat von Chromatium ohne vorherige Entschwefelung und Fär- 

 bung in Kanadabalsam oder Damarlack, so sind die Chromatien nach 

 10 Minuten entfärbt und statt des Schwefels sind schön rotgefärbte 

 Kugeln und Körnchen da. Bei Betrachtung in Luft war Schwefel 

 und Farbstoif getrennt vorhanden. 



GoLA verwendet die Rotfärbung, die Schwefel mit Nitroprussid- 

 natrium gibt, auch fiir mikrochemische Zwecke. Besonders junge 

 Triebe von Asparagus sollen fiir derartige Untersuchungen sehr ge- 

 eignet sein. 



Salzsäure HCl und deren Salze. 



Die gebräuchlichsten Reaktionen auf Chlor führen zu den Fällungen 

 als Thallo- und Silberchlorid und Thallo- und Kaliumchloroplatinat. Davon 

 sind in die botanische IMikrotechnik bis jetzt die ersten zwei mit Erfolg 

 eingeführt worden. In neuerer Zeit hat Molisch die Milchsäfte mit den 

 gleichen Reagentien auf Chlorgehalt untersucht und sie je nach den Ver- 

 suchsobjekten sehr verschieden reich an diesem Stoffe gefunden. Chlor- 

 kaliumkristalle erzielte Monteverde. 



Jod-J. 



Durch eigenartige Zellen von Bonnemaisonia asparagoides wird nacli 

 GoLENKiN freies Jod oder eine stärkebläuende Jodverbindung ausgeschieden ; 

 diese Zellen enthalten eine große stark lichtbrechende Vakuole, welche 

 nach ausgeführten Reaktionen weder Gerbstoffe, noch fettartige Stoffe ent- 

 hält. Hingegen färben sich die Vakuolen mit C^anin intensiv braun. Dieses 

 bildet mit Jodlösungen einen braunen in Wasser ziemlich schwer löslichen, 

 unbeständigen Niederschlag. Golenkin glaubt damit ein für botanische 

 Zwecke sehr gut verwertbares mikrochemisches Reagens auf Jod angegeben 

 zu haben. Ich kenne nun zwar diese Reaktion weiter nicht, weiß auch 

 nichts von ihrer Empfindlichkeitsgrenze, möchte aber doch denken, daß, 

 so lange Reaktionen, die auf Bildung von Jodaraylum, Thallo-, Silber-, 

 Pallado-, Mercurijodid und Kaliumjodoplatinatbildung beruhen, existieren, 

 man niclit zur Jodcyanin('?)bildung Zuflucht nehmen sollte, um so mehr als 

 in der Mikrotechnik (man vgl. das Kapitel: „Verkorkte Membranen") dem 

 zur Reaktion verwendeten Cyanin ja noch eine Unzahl anderer Funktionen 

 zukommen. 




200 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



Schwefelsäure SO., (OH), und deren Salze. 



Zum Nachweise der Schwefelsäure fehlt es auch heute noch an einer 

 zuverlässig-en Methode. Über den Nachweis mit Baryumchlorid und Stron- 

 tiumnitrat und als Kaliumsulfat und Natriumsulfat, vgl. Z. M. ^, p. 48. 



Belzung und Poirault haben sie im ausgepreßten Safte von Angio- 

 pteris evecta nachgewiesen. 



Salpetersäure NO, OH, salpeterige Säure NO OH und deren 



Salze. 



Während der Einwand, den man gegen Molisch s Dipheny- 

 laminschwefelsäure - Probe machen könnte, die Nitrite würden mit 

 ihr gleichzeitig angezeigt , für die Pflanze wegen des vollstän- 

 digen Fehlens dieser letzteren in ihr kaum in Betracht kommt, ist 

 ein zweiter, daß in verholzten Membranen die Nitratprobe auch 

 bei großer Menge Nitrates ausbleiben kann, unangenehmer. Ellram 

 hat sich nun dem mikrochemischen Nachweise der Nitrate in 

 Pflanzen gewidmet, um speziell die wertvolle Dipheuylaminprobe 

 nach dieser Ptichtung zu überprüfen. Wie bekannt, hat Arnaud 

 und Pade salzsaures Cinchouamiu (C\g H.-,^N.^O) als neues Nitrat- 

 reagens empfohlen. Für den mikrochemischen Nachweis von Nitraten 

 in Pflanzen hat nach Ellram s Kontrollversucheu das neue Reagens 

 gar keinen Wert. 



„Die von Molisch empfohlene Diphenylaminschwefelsäure ist nicht 

 nur das empfindlichste Reagens auf Nitrate überhaupt, sondern auch in 

 Verbindung mit Ellram s Ligninreagens das nach allen Richtungen hin 

 am meisten genügende und unter allen Umständen praktisch brauchbarste 

 Reagens für den mikrochemischen Nachweis bei pflanzenphysiologischen 

 Forschungen. Alle andern Methoden sind minderwertig. 



Lösungen von «-Naphthol, /S-Naphthol und Cinchonamin in konzen- 

 trierter Schwefelsäure sind recht empfindliche Reagentien auf Nitrate und 

 Salpetersäure, lassen sich aber bei phytophysiologischen Untersuchungen 

 kaum mit Nutzen verwerten. 



Außer in verholzten Geweben ist bei pflanzenphysiologischen Unter- 

 suchungen mit Diphenylaminschwefelsäure eine eventuelle Beeinträchtigung 

 der Oxydation des Diphenylamins vermittels vorhandener Nitrate (Salpeter- 

 säure) durch reduzierende Wirkung der in den betreffenden Gewebearten 

 vorhandenen oder etwa sich bildenden Stoffe entweder ausgeschlossen 

 oder für die Beobachtung der Reaktion selbst praktisch genommen un- 

 wesentlich. 



^) Z. M. = Zimmermanns Mikrotechnik. 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 201 



In vollkommen verholzten Geweben typischer Holzgewächse können 

 sich Nitrate befinden, die sich dann mittels der Diphenylaminschwefelsäure 

 nachweisen lassen nach vorgenommener Ligninreaktion mit dem Diphe- 

 nylaminligninreagens." ^ 



Ein neues Reagens auf Salpetersäure verdanken wir R. Brauns. 

 Behandelt man einen Tropfen der Lösung, in der man ein Nitrat ver- 

 mutet, mit einem Tropfen Baryumclilorid und erwärmt man auf dem 

 Wasserbade, so scheiden sich aus der nitratlialtigen Lösung farblose, 

 scharf ausgebildete reguläre Oktaeder von Baryumnitrat aus, die meist 

 auf einer Oktaedertiäche liegen, w^eshalb sie dreiseitige oder sechs- 

 seitige Umrisse zeigen. 



Ob sich diese Reaktion auch für phytophysiologische Versuche 

 wird verwerten lassen, wird die Zukunft zeigen. 



Über andere Arten des Nachweises vergleiche H. Behrens, 

 A. z. m. A."- p. 118 — 115. Es ist selbstverständlich, daß alle von 

 H. Behrens angegebenen Methoden in ihrer Verwendbarkeit für die 

 Pflanzen erst überprüft werden müssen. Bisher bleibt nach Ellram s 

 Befunden die Diphenylaminschwefelsäure das zweckmäßigste Nitrat- 

 reagens. Es hat daher auch in allen Handbüchern Aufnahme ge- 

 funden. 



Von neueren Experimenten mit dieser Probe möchte ich das 

 negative Resultat erwähnen, das Molisch bei Milchsäften zumeist er- 

 hielt. Bezüglich Auftretens von Kaliumnitrat in kristallisierter Form 

 vergleiche man Zimjiermanns Mikrotechnik p. 50 und das im Kapitel 

 „Kalium" darüber Erwähnte. 



Phosphorsäure PO (OH)^ und deren Salze. 



Zum mikrochemischen Nachweis von Phosphorsäure werden be- 

 sonders Salpetersäure mit molybdänsaurem Ammon und Magnesium- 

 sulfat mit Chlorammonium verwendet. Beide haben sich auch in der 

 botanischen Mikrochemie bewälu't, freilich fehlt beiden der Vorzug 

 der lokalisierten Fällung des gesuchten Stoffes. 



Diesem Mangel hofften nun Lilienpeld imd Monti mit molyb- 

 dänsaurem Ammoniak und Pyrogallol abzuhelfen. Jedoch haben 

 Raciborskis kritische Nachprüfungen gezeigt, daß Lilienpelds und 



^) Der unter Anführungszeichen gestellte Absatz ist entnommen dem 

 Referate von E. Roth (Halle) im Bot. Zentr. Bd. LXVII, 1896, p. 74. 

 -) A. z. m. A. = Anleitung zur mikrochemischen Analyse. 




202 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



MoNTis angebliche Farbenreaktion auf Phosphor mit dem Phosphor 

 in keinem Zusammenliange steht, und somit aus der mikrochemischen 

 Literatur gestrichen werden muß. 



Kurze Zeit nach Raciborskis kritischem Referate versuchte 

 PoLLACci eine neue Farbenreaktion auf Phosphorsäure für Pflanzen- 

 untersuchungen einzuführen. Er bringt Schnitte von frischem oder 

 Alkohol-Material unter Benutzung von mit Platinspitzen versehenen 

 Pinzetten in eine Lösung von molybdänsaurem Ammoniak , wäscht 

 dann wiederholt mit neutralem, oder besser mit durch Salpetersäure 

 angesäuertem destilliertem Wasser aus und überträgt scliließlich in 

 Zinnchlorür. Bei Anwesenheit von Phosphor entsteht dann eine 

 dunkelblaue bis graue Färbung, die nach Ansicht Pollaccis auf 

 der Bildung von Molybdänsesquioxyd (Mo., O3) beruht. Bei Ge- 

 weben , die sehr reich an Phosphor sind , muß eine verdünnte Lö- 

 sung von Zinnchlorür augewendet werden. — Die so erhaltenen Prä- 

 parate sollen ihre Färbung in Glyzerin oder auch in Wasser sehr 

 gut behalten, während bei den nach der Methode von Lilienfeld und 

 MoNTi dargestellten Präparaten eine Konservierung in Glyzerin nicht 

 möglich ist. Außerdem soll Pollaccis Reaktion empfindlicher sein. 

 Man könne mit ihr beweisen, daß in den reproduktionsfähigen Organen 

 und hier wieder in den Chromatinkörnern des Kerns der Hauptsitz 

 der Phosphorsäure sei. 



Auf eine Bemerkung Fioris hin, daß das PoLLACcisclie Reagens 

 (Molybdänsäure und Zinnchlorür) in gerbstofthaltigen Zellen, speziell 

 in dem „sistema albuminosa tannico" nicht zu verwenden sei, führt 

 PoLLAcci in einer späteren Mitteilung den Beweis, daß es sich in 

 diesem Falle um vollkommenen Mangel an Phosphor in den betref- 

 fenden Zellpartien gehandelt habe. 



Als eine Art Abschluß kann man nach dieser Richtung seine 

 Besprechung der Methoden des mikrochemischen Nachweises von 

 Phosphor in Pflanzengeweben ansehen. 



Daß es an Gegnern nicht gefehlt hat, ist selbstverständlich, 

 nachdem beispielsweise Xanthoproteinsäure mit Zinnchlorür allein in 

 ähnlicher Weise reagiert wie Phosphorsäure. Auch sollen sich 

 Lecithin- und Nukleinphosphor der Reaktion entziehen. Pollacci hält 

 gegen alle Einwände seine Probe aufrecht. Er gibt ein genaues 

 Rezept an, mit dem man besonders günstige Resultate erzielt, weist 

 auf die Wichtigkeit gründlichen Auswaschens nach Einwirkung des 

 Reagens hin, verwirft den Einwand von der Blaufärbung der Xantho- 

 proteinsäure mit Zinnchlorür auf Grund neuerlicher Untersuchungen, 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 203 



redet der Verwendung des Zinnchloriir das Wort, — „man kann es 

 nicht nur, soll es beibehalten, da dadurch die Empfindlichkeit der 

 Reaktion ganz außerordentlich gesteigert werde'^ — kurz: Pollaccis 

 Reaktion ist gut und bleibt verwendbar, solange sich keine neuen 

 Gegner finden; sie lautet: Molybdänreagens, dann Waschen in sal- 

 petersaurem Wasser und darauf Behandlung mit Zinnchlorür. 



Auf einem ähnlichen Prinzipe beruht MacCallums Blaugrün- 

 färbung der phosphorhaltigen Zellen. Nach seinem Vorschlage wird 

 der Phosphor aus in Alkohol gehärtetem Material mit salpetersaurem 

 Molybdänammon gefällt und in einprozentiges Phenylhydrazinhydro- 

 chlorid übertragen. Die phosphorhaltigen Zellen werden alsdann 

 bläulichgrün. Bei Cyanophyceen und bei Hefezellen wurde so der 

 Phosphor nachgewiesen. 



Es scheint nun auffällig , daß Iwanoff nur die in Z. M. ange- 

 gebenen Reaktionen genau in ihrer Anwendbarkeit iÜr die Pflanzen- 

 untersuchung überprüft hat. Er findet, daß sich beide in ergänzender 

 Art verwenden lassen, indem in Fällen, wo mit dem Molybdat Mohl, 

 mit der Magnesiummischung keine Fällung auftritt, auf organische 

 Phosphorverbindungen geschlossen werden kann. Gibt irgendwo 

 Magnesiumsulfat und Chlorammonium weder die schönen Tripelphos- 

 phatkristalle , noch elliptische Körner , so sei dies ein Hinweis auf 

 eine Bindung von Phosphor an Eiweiß. 



Die Mehrdeutigkeit beider Reaktionen käme bei Pflanzen nicht 

 in Betracht, da die Möglichkeit einer Arsenausfällung für Ptlanzen 

 nicht zu fürchten ist, und dort, wo gewisse organische Verbindungen 

 die Molybdänprobe unmöglich machen, die Phosphorsäure durch die 

 Magnesiummischung immer noch nachgewiesen werden könne. 



Vorkommen. Belzung und Poirault weisen Phosphorsäure im 

 ausgepreßten Safte der Angiopteris evecta nach. Die Fällung als Magne- 

 siumammoniiunpliosphat war wegen der gummiartigen Substanzen kugel- 

 förmig; Belzuxg fand in kaktusartigen Euphorbien Culciummalophosphat. 

 Zijimerjiann hat die Calciumphosphatausscheidungen in lebenden Zellen 

 genauer untersucht. Aus Hansens und Leitgebs Untersuchungen über 

 Sphärokristalle hatte sich ergeben, daß die in Alkoholmaterial auftreten- 

 den Spliärite häufig aus Calciumphosphat bestehen. In lebenden Pflanzen 

 wurden nur von Nobbe, Hänlein und Councler derartige Sphärite nach- 

 gewiesen. Zimmermann hat solche Calciumphosphatsphärite bei einer nicht 

 näher bestimmten Cyperus-Art gefunden. Um einen zentralen organischen 

 Teü bildet sich hier der Sphärit. Der Nachweis gelang mit molybdän- 

 saurem Ammoniak in salpetersaurer Lösung, durch Lösung in öprozentiger 

 Essigsäure und durch Erzeugung von Magnesiumamraoniumphosphat. — 

 Die Lilienfeld sehe Reaktion erscheint vermieden. — Re berichtet von 




204 Richter: Die Fortseliritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



Sphäriten bei Agave americana, die Calcium und Phosphor mit organischer 

 Substanz enthalten. 



Heinricher findet, daß beiden Arten von Lathraea, die er unter- 

 suchte, das reichliche Vorkommen von Phosphorverbindungen gemeinsam 

 sei, die in Alkoholmaterial in der Form kugeliger Ausscheidungen von 

 wechselnder Größe ausfallen. Sie sind im wesentlichen lokalisiert im unteren 

 Teile des Tracheidenkopfes. Die Ausscheidungen sind organischer Natur, 

 da sie beim Glühen einen kohligen, kugelförmigen Rückstand lassen. Magne- 

 sium fehlt ihnen wahrscheinlich und Calcium sicher, der Nachweis erfolgte 

 nach Z. M. ; für die Molybdänprobe wurde erwärmt. Auch Molisch ver- 

 wendete bloß diese Methoden des Phosphorsäure-Nachweises. Nach seinen 

 Befunden ist der Phosphor in Milchsäften in organischer Bindung vorhanden. 



Färbung der Calciumphosphatsphärite in Pflan- 

 zen. Bringt man Calciumphospliatsphärite in Farbstofflösungen, 

 so speichern die im Inneren eingeschlossenen Schleimkerne nach 

 H. Fischer den Farbstoff. 



Arsen As. 



Indem ich auf den Nachweis von Arsen und Arsensäure in H. Behrens' 

 A. z, m. A. verweise, mache ich noch auf die physiologische Art des 

 Arsennachweises aufmerksam, die Plato und Guth mit Penicillium brevi- 

 caule bei 22 bis 30** C. gelang. Das Penicillium wuchs auf Agarplatten 

 mit einem Zusatz von einem Teil Arsen zu 50000 Teilen Agar. Bei seiner 

 Entwicklung erzeugte der Pilz einen intensiven Geruch nach Knoblauch, 

 der auf das vorhandene Arsen deutet. 



Kohlenstoff- C. 



Ein ausgezeichnetes Reagens auf reinen Kohlenstoff verdanken wir 

 Wiesner, dem es gelungen ist, mit Hilfe der von Crüger in die Mikro- 

 chemie eingeführten „Chrom-Schwefelsäure" die verschiedenen Formen der 

 Kohle voneinander zu unterscheiden und das Lungenpigment als Rußkohle 

 zu erkennen. 



Kohlensäure CO.. 



Nestler weist mit der bekannten mikrochemischen Methode, Zusatz 

 von Salzsäure, in dem Sekretwasser -Rückstand von Phaseolusblättern 

 kohlensaures Kali nach. 



Rechinger konnte das Vorkommen von Calciumkarbonat in Gesneria- 

 ceenhaaren dartun. 



Kieselsäure SiO., und Silikate. 



Glühen, Schwefelsäurebehandlung, Miliarakis Verfahren, Lösung 

 in Flußsäure und Bildung von Kieselfluornatriumkristallen stellen 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 205 



heute noch als vorzügliche Methoden zum Kieselsäurenachweis im 

 Gebrauche. Ob auch die Bildung von Rubidiumsilicomolybdat sich 

 für botanische Zwecke eignen wird, muß erst die Zukunft lehren. 



In neuerer Zeit hat sich Küster eingehend mit dem Nachweise 

 der Kieselsäure in der Pflanze beschäftigt und gefunden, daß Kiesel- 

 körper und verkieselte Membranen durch Aufhellung mit Benzol, 

 Chloralhydrat und Phenol nachgewiesen werden können. Besonders 

 zuverlässig ist der entstehende rötliche oder bläuliche Glanz. Am 

 geeignetsten erwies sich bei dieser Probe zunächst das Phenol. Bei 

 seinen späteren Studien über Chrysobalaneen zog er auch das Ver- 

 halten der Kieselablagerungen dieser Pflanzen gegen Farbstofl"e mit 

 in Betracht und fand, daß gewisse Formen sich analog wie Tabaschir 

 verhalten. Sie speichern Gentianaviolett und Methylenblau. KtJSTER 

 erwähnt übrigens auch eine interessante Beobachtung Ajibronns über 

 das Braunwerdeu von Tabaschir in blauen Jodlösungen von Chloro- 

 form oder Schwefelkohlenstoft". Chrysobalaneenkieselkörper zeigen 

 diese Reaktion nicht. 



Es erübrigt nur noch über bekannt gewordene neue Vorkommen zu 

 referieren. Zimmermann teilt einen Fund in den Blättern von Cyperus 

 alternifolius mit. Hier finden sich eigenartige, meist halbkugehg in den 

 Innenraum der Zellen hineinragende Verdickungen, bei deren näherer 

 Untersuchung sich ergab, daß sie mit Kieselsäure durchsetzte Membran- 

 verdickungen darstellen, bei denen die Kieselsäure in einem Zellulosegerüste 

 sitzt, was mit Flußsäure nachgewiesen werden kann. Rechinger erwähnt 

 Kieselsäure in den Haaren der Gesneriaceen. Beachtenswert ist auch der 

 Befund Bargaglis von intrazellulären Kieselsäureabsonderungen. 



Kalium K. 



Die gebräuchliche Reaktion mittels Platinchlorid hat sich auch bei 

 den neueren Untersuchungen Czapeks bewährt. Bei Wurzelausschei- 

 dungen ist es nach Czapek am besten, die zu prüfende Flüssigkeit lang- 

 sam verdunsten zu lassen, dann einen Tropfen des Reagens zuzusetzen 

 und das Deckglas aufzulegen. Auch Nestler bediente sich dieser Reak- 

 tion. Nach seinen Beobachtungen erscheint es zweifellos, daß im Sekret- 

 wasser der Bohnenblätter kohlensaures Kali vorhanden ist, Kaliumnitrat 

 beobachtete Monteverde. Ebenso gelang ihm die Erzeugung von Chlor- 

 kaliumkristallen. Ähnlich erzielte Belzung tafel- und stäbchenförmige 

 Kaliumnitratkristalle bei Cucurbita Pepo intrazellulär in Glyzerinpräpa- 

 raten. Im übrigen wirkt Salpeter in größerer Konzentration als Gift. Nach 

 LiDFORSS verhindert er die Pollenschlauchbildung. Man vergleiche das 

 Kapitel „Giftwirkung der neutralen Salze der Alkalimetalle in 0. Loews 

 ,Ein natürliches System der Giftwirkungen'", p. 113—116. Beachtenswert 

 erscheint auch die Beobachtung Retgers, wonach sich Kalisalpeter aus 




206 Richter: Die Fortschritte der botanischen Milcrocheinie. XXU, 2. 



Nigrosin-haltigen Lösungen in violetten, stark dichroitischen Säulen ab- 

 scheidet, während Kaliumsulfat mit Bismarckbraun faserige, stark dichroi- 

 tische Kristalle liefert. 



Natrium Na. 



Mit dem Nachweise in der Pflanze hat man sich seit 1892 meines 

 Wissens nicht beschäftigt, es bleiben daher die Proben mit Uran^'lmagnesium- 

 acetat und Uranylacetat vorläufig die verwendbarsten. Nach H. Behrens 

 werden von ihnen noch 0'8 beziehungsweise 04 Mikromilligramm Natrium 

 angezeigt. 



'ö' 



Ammonium NH(. 



Bezüglich der Reaktionen vgl. Z. M., p. 55 — 56. 



Nach Retgers Untersuchungen nimmt Ammoniumnitrat Indulin und 

 Nigrosin auf, was für die Erkennung desselben unter andern Kristallen 

 von Bedeutung sein kann. — • Vorkommen. Debski glaubt nach dem 

 Verhalten des Zellsaftes der Marantaceen gegen Weinsäure auf NH^ oder 

 eines seiner Alkyl -Substitutionsprodukte als die zu der vermutlich vor- 

 handenen Äpfelsäure gehörige Base schließen zu sollen. 



Calcium Ca. 



Die gebräuchlichsten Fällungsmethoden der Mikrochemie zum 

 Nachweise des Calciums sind die, welche zur Bildung von Calcium- 

 sulfat, Calciumtartrat, Kalium-Calciumferrocyaiiid und Calciumoxalat 

 führen. Davon erscheint die Schwefelsäureprobe am geeignetsten 

 auch für mikrochemisch-botanische Zwecke. Zum Nachweise des Cal- 

 ciums in Protei'nkörnerii benutzt Brien außer Schwefelsäure eine 

 Lösung von oxalsaurem Ammon und Chlorammonium. 



Molisch wies mit Schwefelsäure geradezu Unmassen von Cal- 

 cium im Milchsafte von Euphorbia Lathyris nach. Bei anderen Mileli- 

 säften war ein starkes Schwanken bezüglich der Calciummengen zu 

 bemerken. 



Das Calcium kommt in der Pflanze als Oxalat, Karbonat, Sul- 

 fat, Tartrat usw. vor. Ich werde die seit 1892 bekannt gewordenen 

 Vorkommen von Calciumverbindungen in der Pflanze in der Pieihen- 

 folge von Z. M. besprechen. 



a) Calciumoxalat (COO).jCa. — Buscalioxi hat die Calciumoxalat- 

 drusen einer eingehenden Untersuchung unterzogen. Den Körper ihres in- 

 neren Hohlraumes hält er für harzartig. Mit dem Reagens von Unverdorben- 

 Franchimont kann man einen starken grünblauen Niederschlag erzeugen, 

 dessen Analyse einen Pektinstoff oder einen verwandten Körper, jedenfalls 

 aber nicht Oxalsäure anzeigt. Der neue Körper wurde „Corpo mucilaginoso 




XXII, 2. Richter: Die Fortscliritte der botanisclien Mikrocliemic. 207 



delle druse" genannt. Wittlin beliandelte aiisführlicli die Bildung der 

 Kalkox;datt;ischen. Krasser gab die Mittel an, wie man im Aleuron leicht 

 die Calciumoxalatdrusen erkennen könne. Es eignet sich das phosphor- 

 saiire Xatron dazu wohl am besten. In den sogenannten „Ölplastiden" 

 fand LiDFORSS Calciumoxalatkristalle. 



Ein P"'all des Vorkommens von gelöstem Calciumoxalat wird von 

 Belzung gemeldet. Er fand nämlich bei den Samen von Lupinus albus 

 Calciumoxalat, und zwar wahrscheinlich in loser Bindung mit Oxalsäure 

 und Zitronensäure. Namentlich diese konnte er in großer Menge aus den 

 genannten Samen isolieren. Das Calciumoxalat fällt beim Erhitzen aus dem 

 eingedickten Extrakte der Samen in tetraedrischen Kristallen aus. 



Ich schließe die Aufzählung der Calciuraoxalatvorkommen mit dem 

 Hinweise auf Wehmers Arbeit, in der er die Calciumoxalatnatur vieler 

 Raphiden in Frage stellt und auf die Möglichkeit vom Vorhandensein von 

 Kalkcitratraphiden aufmerksam macht. 



b) Calcium kar bona t COgCa. — Bekanntlich erscheint der kohlen- 

 saure Kalk gewöhnlich als Merabraninkrustation. Fälle dieser Art sind 

 neuerlich bekannt geworden. Rechixger beschrieb sie bei Haaren der 

 Gesneriaceen und Mangin bei den Fruchthyphen und Sporangien der 

 Mucorineen. Yexdo gab zur Entkalkung des Korallineenthallus die Pere- 

 NYische Flüssigkeit an. 



c) Calciumsulfa t SO^Ca. — Nach Hansen kommt bei Angiopteris 

 Gips in Form von großen Kristallen des monoklinen Systems vor. Schon 

 Monteverde hatte die Richtigkeit dieser Angaben bestritten und die be- 

 treffenden Kristalle für Calciumoxalat erklärt. Auch Belzung und Poi- 

 RAULT kamen zu diesem Resultate. 



Belzung beobachtete übrigens die Bildung von Gipskristallen ge- 

 legentlich seiner Studien über den Asparaginnachweis , wenn er die 

 Schnitte in vollkommen reines Glyzerin gab. Die entstandenen Kristalle 

 sind büschel- oder pinsel artig. 



d) Caiciumphosphat (P0.2).2(0,2Ca)3? — Re erwähnt Sphärite bei 

 Agave americana , " die Kalk, Phosphor und organische Substanzen ent- 

 halten. Zimmermann beobachtete Calciumphosphatausscheidungen in leben- 

 den Zellen. Zur Prüfung auf Calcium wurde Schwefelsäure verwendet. 

 Ließ man vor Zusatz der Schwefelsäure öprozentige Essigsäure auf die 

 Präparate einwirken, so entstanden weniger Gipsnadeln. Überdies wurde 

 lOprozentiges Ammoniumoxalat mit lOprozentiger Essigsäure zur Reaktion 

 verwendet. Werden die Schnitte in dieser Lösung erhitzt, so werden die 

 Sphärokristalle in Klumpen winziger Kristalle verwandelt, die in 5pro- 

 zentiger Essigsäure gar nicht, in Salzsäure dagegen sehr leicht löslich 

 sind. In einer Lösung von O'Aprozentigem Ammoniumoxalat und einpro- 

 zentiger Essigsäure trat auch ohne Erwärmung die gleiche Erscheinung 

 nach Verlauf einer halben Stunde auf. 



Bezüglich der Möglichkeit der Farbstoffaufnahme durch die von den 

 Sphäriten eingeschlossenen Schleimkerne vergleiche das Kapitel „Phosphor- 

 säure" und IL Fischers einschlägige Arbeit. 



e) Calci umpek tat. Mangin und Wille äußerten die Ansicht, daß 

 die Mittellamelle aus Calciumpektat bestehe. Jüngst hat Devaux Beob- 




208 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



achtungen gemacht, die ihn allerdings sehr zur Negierung dieser Maxgix- 

 WiLLE sehen Ansicht aufmuntern konnten. (Man vergleiche das Kapitel 

 „Pektinstoffe", Abschnitt „Mittellamelle".) 



f) Calcinmmalat und -malophosphat. — Belzüng und Poi- 

 RAULT fanden bei Angiopteris evecta neutralen äpfelsauren Kalk. Bei 

 zweimonatlichem Stehen des Saftes entstanden Sphärite von C'alcium mit 

 einer noch unbekannten Säure. Belzung wies Calciummalo- und Calcium- 

 phosphatsphärite in kaktusartigen Euphorbien nach. Über die Unterschei- 

 dung beider vgl. das Kapitel „Apfelsäure". 



g) Calciumcitrat. — Wehmer beobachtete bei zwei Pilzen Bil- 

 dung von Calciumcitratraphiden und konnte Calciumcitrat auch künst- 

 lich zur Raphidenbildung veranlassen. Er vermutet deshalb, daß das, 

 was man als Calciumoxalatraphiden beschrieben hat, sich oft als Raphiden 

 der Zitronensäure herausstellen dürfte. Vgl. diesbezüglich das Kapitel 

 „Zitronensäure". 



Nach alledem erscheint das Ca als jenes Element, das mit den meisten 

 Säuren sich verbindet, die man als gewöhnlich für Pflanzen beschreibt. 



Magnesium Mg. 



Die bekannteste Reaktion auf Magnesium ist die, welche zur 

 Bildung des Magnesiumammoniumphospliates führt. Sie hat sich auch 

 anläßlich meiner Untersuchungen über das Magnesium in seinen Be- 

 ziehungen zur Pflanze ^ heute noch als die geeignetste herausgestellt. 

 Zu kontrollierenden Versuchen können Verwendung finden : 



1) Arsenverbinduugen bei Gegenwart von Ammoniak. 



2} Kaliumpyroantimoniat. 



3) Seignettesalz mit Ammoniak. 



4) Ferrocyankalium und Ammoniak. 



5) Ammoniumoxalat und Essigsäure. 



6) Ammoniumoxalat allein. 



7) Oxalsäure und Zinksulfat. 



8) Kaliumoxalat. 



9) Schwefelsäure mit und ohne Wasser. 



Auszuscheiden sind die Reaktionen mit Natriumkarbonat allein, 

 bei Gegenwart von Calcium, dasselbe bei Gegenwart von Phosphor, 

 Oxal- und Essig-, Fluorwasserstoffsäure, Ammoniumfluosilikat und 

 Uranylacetat. 



Sind die für die Bildung von Magnesiumammoniumphosphat not- 

 wendigen Komponenten Magnesium und Phosphor in einem pflanz- 



^) Zur Orientierung über die Kristallform und deren optischen Cha- 

 rakter vergleiche man meine Untersuchungen über diesen Gegenstand. 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 209 



liehen Objekte frei vorhanden, so kann man beide mit einem Schlage 

 auch durch Ammoniak allein nachweisen : die Ammoniakreaktion. 

 Brien wies auch das Magnesium der Proteinkörner mit Natrium- 

 phosphat und ammoniakalische Chlorammoniumlösung nach. 



Vorkommen. Molisch führt als Beispiele starker Mg-Anhäufung 

 au die Milchsäfte von Ficus elastica , Galactodendron utile und Eu- 

 phorbia mammilaris. Eschbaum berichtet von Magnesiumammonium- 

 phosphatkristallen in Agarabkochungen und führt deren Bildung auf 

 Bakterien und Pilze zurück. Nach meinen Versuchen mit Gelatine 

 glaube ich, ist der Gedanke zu erwägen, ob nicht die Austrocknung 

 des Agars allein schon die drei zum Tripelsalz notwendigen Kom- 

 ponenten zur Bildung des Magnesiumammoniumphosphates zu ver- 

 anlassen vermag. 



Eisen Fe. 



Wie bekannt, haben Weiss und Wiesner Rhodankalium als 

 Reagens auf Eisen in Form von unlöslichen Oxyd- oder Oxydul- 

 verbindungen bei höheren Gewächsen angegeben ; für Eisen bei Algen 

 in Form des Oxydhydrats war 10 Prozent Ferrocyankalium, dem 

 etwas Salzsäure zugesetzt war, von Hanstein als sehr zweckmäßig 

 erkannt worden. 



Molisch hat nun diese Reaktionen nachgeprüft und gefunden, 

 daß auch für höhere Pflanzen Ferrocyankalium zum Nachweise am 

 geeignetsten sei besonders wegen der lokalisierten Fällung von Ber- 

 linerblau. Er empfiehlt eine 2prozentige Blutlaugensalzlösung und 

 lOprozentige Salzsäure (bei 15'' C 4*9 Gewichtsteile HCl). 



Um die Lagerung des Eisens in toto festzustellen, wurden die 

 Objekte, Samen etc. je nach Bedarf 1 bis 24 Stunden in verdünnter 

 Blutlaugensalzlösung liegen gelassen. Das Kaliumferrocyanid zeigt 

 Oxydsalze an. Bekommt man daher keine Reaktion mit diesem 

 Reagens, so kann noch das Eisen als Eisenoxydulverbindung vor- 

 liegen. Eine 2prozentige Ferricyankaliumlösung und 10 prozentige Salz- 

 säure gibt darüber Aufschluß. Bekanntlich entsteht ein Niederschlag 

 von Turnbullsblau innerhalb weniger ^Minuten. 



Man hat es daher in der Hand, sich jederzeit zu überzeugen, 

 ob Eisen vorliegt 



1) als Oxyd- (gelbes Blutlaugensalz), 



2) als Oxydul- (rotes Blutlaugensalz), 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 2. 14 




210 Richter: Die Fortsclu-itte der butanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



3) als Oxyd-Oxydulform (gleichzeitige Behandlung einer Anzahl 

 gleicher Objekte mit beiden Lösungen). 



Der große Vorteil liegt in der lokalisierten Fällung des Berliner 

 Blaus, wodurch über die Verteilung direkt nachweisbaren Eisens in 

 der PHanze sichere Schlüsse gezogen werden können. 



War mit den Reagentien und den mikroskopischen Schnitten kein 

 Resultat zu erhalten, so wurde natürlich noch die Asche auf Eisen 

 untersucht. 



Bei seinen Mitteilungen über das Eisen erwähnt Moliscii auch 

 eine neue Reaktion auf das von ihm „maskiert" genannte Eisen. 

 Läßt man rämlich Objekte, in denen mit den oben angeführten 

 Reagentien das Eisen nicht nachgewiesen werden kann, Tage und 

 Wochen oder Monate in einer gesättigten „reinsten" Kalilauge 

 liegen , so färben sie sich nachher, mit Wasser ausgewaschen , mit 

 den verwendeten Reagentien sehr deutlich und zeigen lokalisierte 

 Farbenverteilang. Besonders auffallend war, daß Spirogyren, Holz- 

 fasern etc., die, verascht, nicht eine Spur der Reaktion erkennen 

 ließen, nach jenem Kalilaugen-Verfahren eine ganz ausgezeichnete 

 Färbung zeigten. 



A. Meyer wies in seinem Referate darauf hin, daß reinste Baum- 

 wolle die selbst in „reinster" Kalilauge des Handels vorhandenen 

 Eisenspuren speichert und so nachweisbar macht. 



Molisch überprüfte nochmals seine Probe. Die neuen Experi- 

 mente mit Fichtenholzspänen und Baumwolle ergaben die gleichen 

 Resultate, woraus sich für den 3. Abschnitt des Molisch sehen Eisen- 

 büchleius der Schluß ergibt: 



„Daß gewisse Zellen oder Teile derselben, z. B, die Globoide 

 der Aleuronkörner usw. Eisen der Kalilauge zu entziehen und zu 

 speichern vermögen, über die Verteilung des Eisens in der Pflanze 

 selbst lehren sie (die Angaben des 3. Abschnittes nämlich) nichts." 



Und aus dem Reaktionsregister scheidet durch die Berichtigung 

 von Molisch die Reaktion auf das „maskierte" Eisen aus. 



Meyer und Molisch hielten also die käufliche „reinste" Kali- 

 lauge nicht für rein. Dagegen wendet sich Müller und behauptet, 

 die Kalilauge sei wohl eisenfrei, durch das Stehen in den Glasgefäßen 

 nehme sie aber Eisen aus dem Glase auf. Beweis : in Nichtglas- 

 gefäßen bleibt die Lauge rein. Auch werde Eisen als Berlinerblau 

 aus Blutlaugensalz durch Salzsäure abgespalten und mag so zu den 

 Schnitten dazugekommen sein, denn selbst sehr stark verdünnte Säuren 

 scheiden aus Blutlaugensalz allein Berlinerblau ab. Müllers Aus- 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 211 



führnngen berühren somit bloß das „Wober" des „maskierten" Eisens 

 und können als Bestätigung des obigen Zitates angesehen werden. 

 Wie vorsichtig man bei einem Urteil über die Verteilung des Eisens 

 sein muß , haben die Ausführungen bisher erwiesen. Darum wird 

 man Petits Bemerkungen vom Eisen im Xuklein um so vorsichtiger 

 aufnehmen müssen, als er auf Grund von makrochemischen Befunden 

 allein zu dieser Ansicht gelangte. 



Macallum will im Zentralkörper der Cyanophyceen, freilich nicht 

 stets streng lokalisiert, das Prisen nachgewiesen haben : Alkoholmaterial 

 wird in Glyzerin und Ammoniumsulfat bei 60^ gehalten. Der Zentral- 

 körper wird dunkelgrün. Schneller kommt man zum Ziel, wenn man 

 Alkohol und Schwefelsäure, Ferrocyankalium und 0"5prozentige Salz- 

 säure oder O'öprozentiges Hämatoxylin verwendet. Doppelfärbungen 

 mit Umwandlung nach Preußisch Blau und Färbung mit Pikrokarmin 

 lassen auch die Cyanophycinkörncheu hervortreten. — Welche von 

 diesen Reaktionen als echte Eisenreaktionen angesehen werden können, 

 ist eigentlich schon durch die Wiedergabe der Molisch sehen Unter- 

 suchungen gesagt. 



Eng an die Molisch -Meyer sehen Befunde von der Eisen- 

 speicherung seitens pflanzlicher Membranen schließen Devauxs Unter- 

 suchungen über Pektinstoffe an , wonach letztere die Eigentüm- 

 lichkeit besitzen das Eisen zu speichern ; Holzzellen speichern Eisen 

 nur nach Behandlung mit Eau de Javelle. Membranen speichern 

 Eisen noch aus Verdünnungen von 1 : 10 000 000. Nach später an- 

 gegebenen Rezepten färbte Devaux Cellulose mit Eisenchlorid und 

 Ferrocyankali blau, mit Kupferacetat und Ferrocyankali rot und mit 

 Bleiacetat und Kaliumbichromat gelb , ebenso mit Eisenchlorid und 

 Ammoniumsulfat. 



Mangan Mn. 



Nacli H. Behrens sind die geeignetsten mikrochemischen Reaktionen 

 auf Mangan seine Füllungen als Oxalat, Ammoniummanganophosphat und 

 Superoxyd. Besonders die zweite kann man nun, wie Gössl gezeigt hat, 

 bei geeigneter Versuchsanstellung dazu benutzen, Mangan gleichzeitig neben 

 Co, Ni, Fe und Mg nachzuweisen. Davon kommt bei der Pflanze besonders 

 das Mg in Betracht. Man braucht nur die erzeugten MnNH^PO^ + öH.jO- 

 Kristalle mit ~]j KMnO^ zu beliandeln, wobei sie sich braun färben. Die 

 Fällung geschah in mikroskopischen Schnitten und aus Lösungen. Durch 

 diese Gösse sehe Probe erscheint besonders für Untersuchungen an Pflanzen 

 die Fällung als Manganamraoniumphosphat als derzeit beste mikrochemisch- 



botanische Reaktion auf Mangan, 



14^ 




212 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2, 



Alle übrigen Arbeiten über diesen Stoff, die in den letzten Jahren er- 

 schienen sind, haben sich bloß mit dem ernährungs-physiologischen, speziell 

 stimulatorischen Werte dieses interessanten Elementes der Eisengruppe be- 

 schäftigt oder sich der Giftigkeit desselben gewidmet. 



Von mikrochemischem Interesse ist das starke Anschwellen der Scheide 

 der Eisenbakterien bei Manganfütterung, wie es Molisch nachgewiesen hat, 

 und der Gallertschichte von Anthophysa vegetans, die unter denselben Be- 

 dingungen von Adler gezogen wurde. 



Tonerde. 



Radlkofer entdeckte kieselsäuremassenähnliche Körper bei Symplocos- 

 Arten. Man konnte sie mit Alizarin und Brasilin von den gleichzeitig vor- 

 handenen Fettkörpern differenzieren, da sie sich intensiv färbten. Nach der 

 Aschenanalyse hat man es hier mit Tonerde zu tun. 



II. Abschnitt. 



Org-anisehe Verbindungen 



[ausschließlich der Zellwandstoffe]. 



A. Fettreihe. 

 1. Alkohole. 



Bekanntlich hat Borodin den Dulcit in der Weise nachgewiesen, daß 

 er auf die zu untersuchenden Objekte etwas Äthylalkohol gab, den er nach 

 Bedecken mit dem Deckgläschen eindampfen ließ. Der vorhandene Dulcit 

 kristallisiert so in großen prismatischen oder unregelmäßigen Kristallen aus. 

 Monteverde hat dieselbe Methode sowohl für Dulcit wie für Mannit ver- 

 wendet und die auskristallisierten Substanzen mit Borodins Methode der 

 gesättigten Lösungen überprüft. 



2. Aliphatische Karbonsäiiren. 



Ameisensäure. — Während Behrens zum Nachweise der Ameisen- 

 säure Merkuronitrat verwendet, benutzt Czapek Sublimatlösung ; er erwärmt 

 auf 70 bis 80 '', worauf sich ein weißer Niederschlag von Kali )mel bildet, der 

 in Salzsäure unlöslich ist. Um nun Ameisensäure in den Zellen selbst nach- 

 zuweisen, wurden Wurzelstücke in konzentrierter Sublimatlösung, die mit 

 Wasser auf das fünf- bis zehnfache verdünnt war, im Wasserbade eine 

 bis 2 Stunden lang erhitzt. Nach den notwendigen Reinigungen wird in 

 einprozentiger Kalilauge gelinde erwärmt. In den formiatlialtigen Teilen 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Milirochemie. 213 



tritt sofort Schwärzung auf (Niedersclüag im Protoplasma, niclit im Zell- 

 saft und Zellkern). 



Oxalsäure. — Nachweis. Tritt nach Behkp:\s der Nachweis der Oxal- 

 säure als Calcium- gegenüber dem als ötrontiumoxalat zurück, und wird 

 er nur bei sehr verdünnten Lösungen empfohlen, die eine Einengung niclit 

 vertragen, oder die man nicht einengen will, so spielt er in der botanischen 

 Mikrochemie eine desto größere Rolle. Giessler hat ihn daher aucli ver- 

 wendet, um die Verbreitung der Oxalsäure besonders in löslicher Form 

 oder als Bioxalat im Pflanzenkörper festzustellen. Die Objekte wurden 

 unter Anwendung der Luftpumpe mit einer Lösung von einem Teil Calcium- 

 chlorid in drei bis vier Teilen Wasser injiziert, oder es wurde das Pflanzen- 

 material direkt in eine kocliende Clilorcalciumlösung geworfen. Nach dem 

 Auswaschen in Wasser war die Oxalsäure als Calciumoxalat in Form einer 

 feinkörnigen kristallinischen Masse oder in der von Sphäriten zu sehen. 

 Leider beeinträchtigten Gerbstoffe, die in stärkerer Konzentration als grau- 

 schwärzliche oder bräunliche Massen niedergeschlagen werden, sehr stark 

 die Reaktion. 



Vorkommen. Nachdem ich bereits bei der Besprechung des Calcium- 

 oxalats der Arbeiten von Buscalioni, Belzing und Poirault, Krasseii, 

 WiTTLiN, LiDEORSS und Belzung gedacht habe, möchte ich hier noch 

 auf die letzte genauer eingehen. Es gelang Belzung Calciumoxalat im 

 Zustande der Lösung im Samen von Lupinus albus nachzuweisen. Nach 

 seiner Meinung dürfte es da in loser Bindung mit Oxalsäure und Citronen- 

 säure vorkommen. Dickt man nämlich unter Erhitzen das wässerige Extrakt 

 ein, so fällt das Calciumoxalat in Form tetraedrischer Kristalle aus. — 

 Wehmers Verdacht von der Calciumcitratnatur vieler Raphiden wurde 

 oben schon erwähnt. 



Äpfel säure. — Indem ich kurz auf den Nachweis der Äpfelsäure als 

 Silbermalat oder durch Überführung in Malein- und Fumarsäure verweise, 

 gehe ich gleich auf die mir bekannt gewordenen Fälle charakteristischen 

 Vorkommens die&er Säure ein. In kaktusförmigen Euphorbien erkannte 

 Belzung die schon mehrfach untersuchten Fällungen durch Alkohol 

 teils als Calciummalophosphat, teils als Calciummalat. Jenes bildet Sphärite, 

 die zunächst amorph erscheinen und später eine radiäre Struktur annehmen, 

 dieses prismatische zu Sphäriten geordnete Kristalle. Beide werden am 

 besten mit TOprozentigem Alkohol erhalten. Die Kristalle konnten auch 

 aus künstlich dargestelltem Calciummalophosphat mit Alkohol erzeugt 

 werden. Durch Debskis Untersuchungen wurde das Vorhandensein von 

 Äpfelsäure in den Blättern und Blattstielen von Marantaceen sehr wahr- 

 scheinlich. Vgl. schließlich den Abschnitt über Calciummalat (oben p. 208). 



Citronensäure. — Der Nachweis der Citronensäure erfolgt wieder 

 am günstigsten durch Silbernitrat. Das Calciumcitrat hält Behrens für 

 mikroskopische Erkennung für völlig wertlos. Wegen seiner Unlöslichkeit 

 in Wasser ist es aber zur Trennung der Citronensäure von flüchtigen 

 Säuren von großer Bedeutung. Dieser Umstand kam nun Wehmer bei 

 seinen Studien der von zwei verschiedenen Hyphomyzeten ausgeschie- 

 denen Calciuracitrate sehr zustatten. Die Pilze wurden in mit Kreide ver- 

 setzter Zuckerlösung kultiviert. Das Calciumcitrat wurde durch Erwärmen 




214 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



nachgewiesen, dabei füllt es sofort in Form von Raphiden- und Sphärit- 

 ähnlichen Körpern aus. Wehmer vermutet daher, daß vielleicht viele der 

 bisher für Oxalatraphiden gehaltenen Kriställchen Kalkcitratraphiden seien. 

 — Mit Oxalsäure zusammen ist die Citronensäure im Lupinensamen von 

 Belzung gefunden worden. 



Milchsäure. — Die Milchsäure habe ich an den Schluß meiner Aus- 

 führungen über nicht flüchtige aliphatische Karbonsäuren gestellt, weil 

 sie stets nur als mikrotechnisch wichtig genannt wird. Krasser hat ihr 

 deshalb geradezu eine Abhandlung gewidmet. Seither empfahl sie Lager- 

 HEiii mit Jod zum Stärkenachweis und Klebahn fand sie bei der Unter- 

 suchung von Herbarmaterial von Rostpilzen in Übereinstimmung mit Lager- 

 heim vorzüglich geeignet. 



8. Aldehyde. 



Bei der Frage nach dem Vorhandensein von Aldehj'den handelt es 

 sich gewöhnlich darum , quantitativ den Aldehydgehalt der Blätter fest- 

 zustellen, um Stützen für die Bayer sehe Assimilationshypothese zu ge- 

 winnen, also um rein physiologisch-chemische Probleme, die somit über den 

 Rahmen dieses Referates hinausgehen. Man vgl. diesbezüglich Bokornys 

 „Über Stärkebildung aus Formaldehyd" und Reixkes und Braunmüllers 

 „Untersuchungen über den Einfluß des Lichtes auf den Gehalt grüner 

 Blätter an Aldehyd". Pollacci bringt neue Angaben betreffend den Nach- 

 weis des Formaldehyds in grünen assimilierenden Pflanzenteilen, besonders 

 über die Farbenreaktion mit Codein und Schwefelsäure, doch spricht er 

 nicht von ihrer mikrochemischen Verwendbarkeit. 



4. 01.^ 



Unterscheidung von fettem und ätherischem Öle. 

 Bisher war A. Meyers Methode der Unterscheidung- von ätherischen 

 und fetten Ölen wohl zumeist im Gebrauche. Da bei der Auf- 

 bewahrung der Objekte im Brutschrank bei 130^ das ätherische Öl 

 abdampft, hat man nachher eigentlich bloß die fetten Öle vor sich. 

 Es muß somit als ein Fortschritt betrachtet werden, daß uns Mesnard 

 mit einer Methode bekannt macht, die direkt unter dem Mikroskope 

 die beiden so häutig vorkommenden Formen des Öles zu unterscheiden 

 gestattet. Zu diesem Zwecke nimmt man eine feuchte Kammer mit 

 zwei konzentrischen Ringen und gibt in den inneren Kreis Glyzerin 

 mit Zucker , darauf die Schnitte , in den Hohlring aber rauchende 



*) Man vergleiche auch Biermann, R., „Über Bau- und Entwicklungs- 

 geschichte der Olzellen und die Ölbildung in ihnen." Inaug.-Diss. Berlin 1898. 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 215 



Salzsäure. Unter diesen Bedingungen kann man bemerken, daß sich 

 das flüchtige Ol in goldgelbe Tröpfchen zusammenballt, die später 

 verschwinden, während das fette Öl unverändert erscheint. Wie gut 

 diese Methode zu sein scheint, erhellt daraus, daß man bei Orangen- 

 blüten mehrere ätherische Öle unterscheiden kann , was theore- 

 tisch den Schluß gestattet, daß ihr Geruch ein zusammengesetzter 

 sein muß. 



Bei seinen Studien über die Lokalisation der fetten Öle während 

 der Keimung versuchte Mesnard noch eine passende Verbesserung 

 seiner Methode, und zwar mit gutem Erfolge. Nach Belassung der 

 Präparate in Salzsäuredämpfen während 2ö — 30 Stunden, während 

 welcher Zeit das ätherische Öl zerstört wurde, und der Zellinhalt auf 

 einen Tropfen zusammengezogen war, wurden durch 2 Sekunden hin- 

 durch Joddämpfe einwirken gelassen. Dadurch tritt Gelbfärbung des 

 fetten Öles ein, wodurch es sehr deutlich und zum Messen geeignet 

 wird. Aus der Größe des Durchmessers wurde die enthaltene Öl- 

 menge berechnet. Es konnte auf diese sinnreiche Weise gezeigt 

 werden, daß sich die erhaltenen Zahlen nach Tageszeit, Belichtung 

 und Entwicklungszustand ändern. 



Danach zeigen also beide Arten von Öl Tropfenbildung in Salz- 

 säuredämpfen, doch das ätherische sofort, das fette erst nach etwa 

 einem Tage, wodurch die Möglichkeit gegeben ist, leicht die beiden 

 Formen zu unterscheiden. 



Eine solche Methode erscheint um so wertvoller, als erst in der 

 jüngsten Zeit Tschirch gezeigt hat, daß die Methode, durch Er- 

 hitzen des Präparates eine Unterscheidung beider Öle möglich zu 

 machen, nie einwandsfrei ist. Selbst bei 100 bis 110^ verflüchtigen 

 sich nicht alle ätherischen Öle. Die höher siedenden Terpene und 

 Polyterpene zum Beispiel, und viele andere Öle verharzen bei der 

 Erhitzung. Auch ist angeblich keines der vorhandenen Reagentien 

 der fetten Öle zur Unterscheidung von Ilarzbalsam verwertbar. 



Ölkörper der Lebermoose. Passend dürften sich hier 

 auch die Methoden zur Unterscheidung der Ölkörper der Lebermoose 

 von den fetten und ätherischen Ölen anschließen. Nach den bekannten 

 Untersuchungen von Pfeffer hat sich besonders v. Küster dem Studium 

 der Ölkörper gewidmet und eine vielfache Übereinstimmung ihrer Keak- 

 tionen mit den der fetten und ätherischen Öle gefunden. Andrews 

 hat später die mechanische Trennung durch Zentrifugalkraft zu 

 Hilfe genommen, die die Ölkörper infolge einer in ihnen vorhandenen 

 spezifisch schwereren Substanz stets in das zentrifugale Zellenende 




216 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



schleuderte. Die neuesten diesbezüglichen Angaben rühren vou Loh- 

 mann her. Danach sind die Ölkörper 



1) Löslich in Petroläther, Äther, Aceton, Chloroform, Benzol, 

 Schwefelkohlenstoft", Nelkenöl, starkem Alkohol, aber auch verdünntem 

 Alkohol (noch in bis 40prozentigen), Eisessig und Chloralhydratlösung. 



2) Kalilauge und Säuren lösen nicht; wohl kann es bei der Ein- 

 wirkung von Kalilauge geschehen, daß die Ölkörper plötzlich ver- 

 schwinden, aber eine Verseifnng in der Weise, daß erstarrte Seifen- 

 massen sichtbar werden, tritt sogar bei vorhergegangener Kochhitze 

 nicht ein. 



o) Durch Osmiumsäure, Alkanna und verschiedene andere Farb- 

 stoffe färben sie sich leiclit. 



Es ist somit die Verseifungsmethode, die sicherste zur Differen- 

 zierung der Ölkörper von fetten und ätherischen Ölen. 



Auch Garjeanne hat neuerdings eine interessante Arbeit über 

 die Ölkörper der Jungermanniaceen veröffentlicht, die sich mit Ent- 

 wicklungsgeschichte , Lage , Bewegungserscheinungen , Vermehrung, 

 Bedeutung und Vorkommen der Ölkörper beschäftigt. Für die ent- 

 wicklungsgeschichtlichen Studien hat sich eine konzentrierte wässerige 

 Pikrinsäure als zweckmäßig erwiesen. Die Hülle der Ölkörper, auf 

 die auch schon Küster aufmerksam gemacht hat, besteht nach Gar- 

 jeanne wahrscheinlich aus gerbsaurem Eiweiß. 



Fettes Öl. — Unter den F e ttr eagentien spielen, wie be- 

 kannt, die Farbstoffe Alkanniu und Cyanin eine große Rolle. Nachdem 

 Rosenthal die Verwendbarkeit von Sudan III für den Fettnachweis 

 dargetan hatte, bürgerte es sich für diese Zwecke bald ein. Man ver- 

 gleiche BuscALioNi, der das Reagens in die botanische Mikrotechnik 

 eingeführt hat, B. Fischer, Herxheimer und Kohl. Dagegen äußert sich 

 Lewinson abfällig über den Farbstoff ebenso wie über die Osmium- 

 säure. Er gibt für tierhistologische Zwecke eine Methode au, die 

 in der Einwirkung von Müller scher Flüssigkeit, Kaliumhyperman- 

 ganat, Oxalsäure und schwefligsaurem Kalium besteht. Zu Kontrast- 

 färbungeu sollen besonders Karminlösungen bei Naclibehandlung mit 

 Säurealkohol und gesättigter Pikrinsäure und Einbetten in Kanada- 

 balsam geeignet sein. Dadurch wird das Fett dunkelblau, fast 

 schwarz, die Kerne rot und das Protoplasma gelb. Vielleicht ließe 

 sich mit passenden Änderungen dieses Verfahren auch auf pflanz- 

 liche Objekte anwenden. Auch andere Farbstoffe sind noch empfohlen 

 worden: Scharlach R von Lagerheim zum Nachweise fremden Fettes 

 in der Schokolade , und von B. Fischer , Alizarin und Brasilin von 




XXII, 2. nicht er: Die Fortscliritte der botanisclien Mikrochemie. 217 



Radlkoper, und Prodigiosin von Rosenberg. Kohl endlich gibt an, 

 daß mittels Dimethylamidazobenzol Fett gelb gefärbt wird. 



Es ist interessant, zu hören, welches Ergebnis eine kritische 

 Untersuchung dieser zahlreichen Methoden des (Jlnachweises ge- 

 zeitigt hat. Eine solche danken wir Hartwich und Uhlmann, die 

 den Beweis erbrachten , daß alle hinter der Fettverseifungsmethode 

 von MoLiscii zurückbleiben, da mit ihr nicht nur das Öl an und für 

 sich, sondern sogar die Natur des fetten Öles unter dem Mikroskope 

 festgestellt werden kann , wenn man nämlich Kristallform und Zeit- 

 dauer der Kristallisation bei der Beurteilung zu Hilfe nimmt. 



Bezüglich der Kristallbildung in Öltropfen sei auch auf Bertrand 

 und PoiRAULT verwiesen, die in Glyzerineinschluß in Öltropfen Kristalle 

 entstehen sahen, welche Fett oder Cholesterin sein mochten, und auf 

 Kohl, der bei Behandlung von Schnitten durch die Blütenblätter von 

 Silphium perfoliatum, Calendula offic. und Gazanea splendens mit 

 alkoholischer Kalilauge Phytosterinsphärite erhielt. Man bekommt 

 sie auch bei Behandlung granaführender Leukoplasten aus der Epi- 

 dermis der Agave americana oder dem Stengelparenchym von Equi- 

 setum arvense. 



Lösung. Bekanntlich (Z. M. p. 87) erscheint nach genaueren 

 Untersuchungen über die Löslichkeitsverhältuisse von Ölen auch der 

 Eisessig als vorzügliches Lösungsmittel. Davis nutzte nun diese Er- 

 fahrung mit bei Verwendung von Chromessigsäure als Fixierungsmittel 

 fett- und ölreicher Zellen aus, denn bei Anwendung dieser Säure er- 

 halte man die Zellen möglichst frei von Fett und Öl, vgl. diesbezüglich 

 auch Lohmann 1. -c. 



5. Wachs. 



Wie bekannt, bezeichnet man mit Wachs gewöhnlich die Sub- 

 stanz, die bei zahlreichen Gewächsen alle oberirdischen Teile über- 

 zieht und ihnen einen eigenartigen hell-blaugrünen Schimmer verleiht. 



Mit der von Wiesner eingehender untersuchten Substanz stimmt 

 nun eine von Möbius im Lmeren der Zellen gefundene im wesent- 

 lichen überein, so daß man heute auch von einer „Wachsausscheidung 

 im Inneren der Zellen" reden kann. Das von Möbius entdeckte 

 Wachs fließt in heißem Wasser zusammen, löst sich in kochendem 

 Alkohol und Terpentinöl, wird von Kalilauge, konzentrierten Mineral- 

 säuren und kaltem Alkohol angegriffen und von Jod gelb gefärbt. 




218 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



Farbstoffe , z. B. Fuchsin , speichert es. Diese Farbstoffspeicherimg 

 wird für das o-ewöhnliclie Wachs und Sudan III von Buscalioni be- 



stätigt. 



Die klebrige Substanz der Pollinien bei Asklepiadaceen soll nach 

 Dop Wachs sein, sie färbt sich auch mit Sudan III. 



6. Kohlehydrate. 



Allgemeiner Nachweis, l'ber den Bedeutungswandel, den 

 MoLiscHS beide Zuckerproben schon in den ersten vier Jahren durch- 

 gemacht hatten, berichtet bereits Zimmermann. Es hat sich nun eine 

 ganze Literatur über diese beiden Proben entwickelt, die in jüngster 

 Zeit zusammenfassend von B. Reinbold unter dem Titel „Über die 

 Molisch -ÜDRÄNSKYSche a-NaphtoI- Schwefelsäure -Reaktion" behandelt 

 worden sind. 



Glykose CgH^oO^. Bereits Fischers Arbeit „Beiträge zur 

 Physiologie der Holzgewächse" hat den großen Wert der A. Meyer- 

 schen mikrochemischen Reaktion auf Glykose zur Genüge gezeigt. 

 Wie sehr sich die Fälle ihrer Anwendbarkeit vermehren lassen, geht 

 aus Hoffmeisters Versuchen über den Nachweis von Rohrzucker her- 

 vor. Es gelingt ihm damit der Nachweis von Rohr- und Trauben- 

 zucker als auch der Nachweis von beiden nebeneinander. 



Andere Fälle der Verwendung von Fehlings Lösung vgl. beiKNUTH 

 „Über den Nachweis von Nektarien auf chemischem Wege", Molisch 

 „Milchsaft und Schleimsaft", Ikeda „Studies in the physiological 

 functious etc.". 



Daß endlich die Glykose auch bei gewissen Reaktionen hemmend 

 auftritt, beweist der Ausfall der Leptominprobe nach den Mitteilungen 

 von Hunger. 



Riegler empfiehlt oxalsaures Phenylhydrazin als Glykose. 

 rcagens. 



Rohrzucker Cj^ H..,.-, 0^^^. Wesentlich für den Nachweis der 

 Saccharose war bisher gerade der negative Ausfall der Trommer- 

 schen Probe. Es ist aber schon früher betont worden, daß wegen 

 der starken Alkaleszenz beim längereu Kochen mit der Fehling sehen 

 Lösung sich Invertzucker bildet und dadurch das Reagens bei Unter- 

 suchungen, wo es auf die Beantwortung der Frage, ob Saccharose 

 oder gar ob sie neben Glykose vorkommt, vollkommen unbrauchbar 

 wird. Auch Sachs' Probe besitzt erhebliche Mißstände. 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 219 



Die Möglichkeit, Saccliarose durch Invertineinwirkung in Invert- 

 zucker umwandeln zu liönnen, liat nun Czapek zum mikrochemischen 

 Nachweise dieses Stoffes ausgenutzt und auf seine Anregung Hoff- 

 meister in weitgehendstem Sinne verwertet. In seiner Arbeit „Über 

 den mikrochemischen Nachweis von Rohrzucker in pflanzlichen Ge- 

 weben'' kommt er zu dem Schlüsse, daß sich Czapeks Methode des 

 Rohrzuckernachweises in der Tat allgemein verwenden lasse. Hoff- 

 meister verfährt folgendermaßen : Auf frische, etwa 3 — 4 Zelllagen 

 dicke Schnitte wird konzentrierte Invertinlösung gebracht. Nach zwei 

 bis drei Stunden ist die Enzym Wirkung beendet. Nun bringt man das 

 Präparat in A. Meyers Kupfersulfat-Seignettesalz-Natronlauge und 

 erhitzt zum Sieden. Durch Vergleichung der Kupferoxydulbildung 

 vor und nach der Invertierung kann man Rohr- neben Trauben- 

 zucker nachweisen. KoutroUversuche mit Helianthusmark lehrten, 

 daß sich auf diese Weise noch O'Olprozentiger Rohrzucker nach- 

 weisen ließ. 



Für den Nachweis von Rohr- neben Traubenzucker in glukose- 

 reichen Geweben wurden die Präparate in siedendes MEVERSches 

 Reagens gebracht, nach einer bis 2 Minuten in schwacher Weinsäure- 

 lösung abgespült und auf dem Objektträger in einen Tropfen Magnesium- 

 chloridlösung gebracht, worin der Kupferoxydul-Niederschlag sofort 

 verschwindet. Das Magnesiumchlorid wurde mit weinsäurehaltigem 

 Wasser ausgewaschen und nachher die Invertinprobe gemacht. So 

 konnte bei Apfel, Birne, Hagebutte, Johannisbrot, Möhre und Peter- 

 silienwiirzel Saccharose neben Glykose nachgewiesen werden. 



Daß der Rohrzucker auch in den Knollen des nordamerikanischen 

 Josopyrum vorkommt und vornehmlicli zur Winterszeit angetroft'en wird, 

 hat Mac Douüal mit der von Kraus 187G angegebenen Methode nach- 

 gewiesen. Er verwendete zum Einlegen der Schnitte starken, mindestens 

 TOprozentigen Alkohol, wobei er zahlreiche Körnchen erzielte. Es wäre 

 nicht uninteressant, die Resultate dieses Forschers nach der neuen Methode 

 zu überprüfen und auf breiter Versuchsbasis die Verbreitung des Rohr- 

 zuckers im Pflanzenreiche festzustellen. Eine solche Arbeit erschiene um 

 so dankbarer, als Grüss erst jüngst eine Arbeit über „Die Rohrzucker- 

 bildung aus Dextrose in der Zelle" veröffentlicht hat. 



luulin GjoH.jqOjq. Von Green wurde, wie bekannt, Orcin 

 als Reagens auf Inulin empfohlen. Meyer und Behrens finden diese 

 Reaktion sehr verwendbar. Als Versuchsobjekte benutzten sie To- 

 pinamburstengel. Diese wurden zuerst in alkoholische Orceinlösung 

 gegeben, der Wirkung starker Salzsäure ausgesetzt und dann auf 

 dem Objektträger erhitzt. Es färbt sich in den oberen Teilen der 




220 Richter: Die Furtschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



luuliii fiilirendeu Region nur der Inhalt der Gefäße orangerot, in den 

 unteren Stengelteilen auch das periphere Mark, Markstrahlen und 

 Holzparenchym ; bei Helianthus annuus tritt nur Blaurotfärbung ein. 

 Die Sphärite werden orangerot. Die Reaktion glückt bei frischem 

 und bei Alkohohnaterial. 



Bezüglich des Vorkommens in den Gefäßen dürfte zu bedenken 

 sein, ob hier nicht durch die Präparationsmethode und den negativen 

 Luftdruck das Inulin in die Gefäße gelangt sein kann, wie man das 

 schon lange vom Milchsafte weiß. 



Daß das Wasser bei der Erkennung von luulinsphäriten eine 

 wesentliche Rolle spielt, ist schon aus Zimmermanns Ausführungen zu 

 ersehen. H. Fischer hält nun die Quellbarkeit der Sphärite in 

 Wasser für sehr charakteristisch. Er hat trotz eifriger Umschau 

 nur noch bei Alkoholmaterial von Cyclamen europaeum in Wasser 

 quellbare Sphärite erhalten. Beim Erwärmen in Wasser oder Zus-atz 

 von Alkalien schmelzen sie aber langsam ab. Im polarisierten Lichte 

 verhalten sie sich wie Stärkekörner. Auch gegen Farbstofte zeigen 

 sie ein ähnliches Verhalten. Man kann sagen, daß sie die im Wasser 

 gelösten Farbstoffe aufzunehmen vermögen, ohne sie speichern zu 

 können. Nicht vermögen in sie einzudringen : Nigrosin, Hessisch 

 Purpur, Diamin- Echtrot und Ammoniak-Karmin. 



Glykogen CgH^pO^. Nach den grundlegenden Versuchen 

 Erreras aus dem Jahre 1886 über die Verbreitung des Glykogens 

 und seinen Nachweis, war es wiederholt Gegenstand eingehender 

 Bearbeitungen; man vgl. G. Clautriau, „Etüde chimique du glucogene 

 chez les Champignons et les levures" und Ch. M. D. Creighton, 

 „Microscopic researches of the formative property of glycogen", 

 Arbeiten, die das Glykogen als einen sehr häufigen Bestandteil der 

 Pilz- und Hefezelle erscheinen lassen. Zacharias und Hec4Ler haben 

 auch bei Cyanophyceen Glykogen nachgewiesen. Nach Zacharias' 

 Meinung enthalten die „Zentralkörper" einen Stoff mit den Reak- 

 tionen des Glykogens und Hegler hält es geradezu für das erste 

 wahrnehmbare Assimilationsprodukt der Oszillarien. Sehr verdünnte 

 heiße Jodlösung färbe es mahagonischwarzbraun. — Diese Zunahme 

 der Fundorte von Glykogen macht es niclit unwahrscheinlich , daß 

 man es auch noch bei anderen Pflanzengruppen wird nachweisen 

 können. A. Fischer hat sich Heglers Anschauung angeschlossen. 

 Zur Färbung des Glykogens empfiehlt Irischer Safranin und andere 

 basische Farbstoffe. 



Seltene Kohlehydrate. In seiner Arbeit „Über die Kohlen- 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 221 



hydrate derMonokotyledonen, insbesondere Irisin, Sinistrin und Triticin" 

 führt Keller den Nachweis von der Identität von Irisin und Triticin. 

 Endlich hat A. Fischer als neues Kohleliydrat „Anabänin" bei 

 Cyanophyceen beschrieben. 



Nektarien. Nach Knuth gelingt der mikrochemische Nachweis 

 von Nektarien, einerseits mit Fehling scher Lösung, anderseits mit der von 

 Hoppe -Seyler als Zuckerreagens vorgeschlagenen Ortho -Nitro - Phenol- 

 Propiol- Säure, die bei Anwesenheit von Traubenzucker einen tiefblauen 

 Niederschlag von Indigo bildet. Doch darf man nicht einzelne Blütenteile, 

 sondern muß ganze Blüten in die Reagentien bringen, um lokalisierte Fäl- 

 lungen zu erzielen. Die Blüten wurden nach 24stündigem Verweilen in den 

 Reagentien in ihnen gekocht und dann in kaltem Wasser ausgewaschen. 



7. Stärke. 



Allgemeines. Zur allgemeinen Orientierung mögen vor allem 

 A. Meyers „Untersuchungen über Stärkeköruer" dienen, von welchen 

 namentlich das erste Kapitel zahlreiche wertvolle Beiträge für die 

 uns hier interessierenden Fragen liefert. Daß das Werk an Be- 

 deutung durch die Mängel nicht verliert, welche Rothert in seinen 

 kritischen Bemerkungen aufdeckt, ist selbstverständlich. — Ebenso 

 kann auf Hanauseks Behandlung der Stärke und das diesbezügliche 

 Kapitel in Wiesners „Rohstoffen" verwiesen werden. 



Reaktionen. Bisher erscheinen die Jodreagentien als die 

 empfehlenswertesten zum Stärkenachweis , gleichviel ob das Jod in 

 Wasser, Jodkalium, Chloralhydrat u. dgl. gelöst ist. In neuester Zeit ist 

 von Lagerheim für- Drogenuntersucliungen sehr zweckentsprechend ge- 

 funden worden eine Lösung von Jod in sirupdicker Milchsäure ; des 

 Jod-Paraftins von Harz wird später gedacht werden. Bei dem all- 

 gemeinen Vertrauen zu Jodpräparaten für diese Zwecke erscheint 

 eine Beobachtung von Nemec besonders erwähnenswert. Werden näm- 

 lich Wurzeln von Allium Cepa abnorm niedrigen oder abnorm hohen 

 Temperaturen ausgesetzt , so färbt sich ihre Stärke mit Jod nicht, 

 wie gewöhnlich, blau, sondern schwach gelb. Läßt man aber vor dem 

 Jodzusatz eine schwache Mineralsäure auf die Körner einwirken , so 

 tritt normale Jodprobe ein. 



Auch die Verkleisterung findet noch immer ergänzend eine 

 zweckmäßige Anwendung. Selbstverständlich wird sie in Schleim- 

 zellen ungemein schwer sichtbar. Walliczek gelang es , durch Be- 

 handlung der Schnitte mit Alkohol und Bleiessig diese Schwierigkeit 

 zu überAvinden. 




222 Kichter: Die Fortschritte der botaniachen Mikrochemie. XXII, 2. 



Daß die Ergebnisse der „Mikrochemie" auf diesem Gebiete auch 

 reiclilicli praktische Verwertung gefunden haben, beweisen 

 ViNASSAS „Mehluutersuchungen" und die 2. Aufhige von Schimpers 

 „Untersuchung der Nahrungs- und Genußniittel". 



Schichtung und Struktur. Bixz empfiehlt zur Unter- 

 scheidung wasserreicher und wasserarmer Schichten im Stärkekorne 

 verdünnte Jodjodkaliumlösung, die bei langsamem Zutritt bloß die 

 letzteren färben soll. Bei Pellionia soll man einen grünen zentralen 

 Teil von einem farblosen Rande unterscheiden können. Nach Bus- 

 CALiONi ist Chloroform und Chromsäure zur Darstellung besonders 

 der Quellungserscheinungen sehr gut geeignet. 



Hier würden natürlich alle jene Färbemethoden zu erwähnen 

 sein, die außer der Färbung der Stärkekörner auch die Darstellung 

 deren Schichtung bezwecken , doch davon später. Eine originelle 

 Art der Sichtbarmachung empfiehlt H. Fischer, der zum Studium 

 der Schichtung Mikrophotogramme herstellt, was ihn in den Stand 

 setzt, die strukturelle Übereinstimmung der geschichteten Stärke- 

 körner mit in Gummi gezüchteten Inulinsphäriten zu zeigen. Die 

 radiäre Struktur wurde besonders mit Xylol- Alkohol und Erhitzen 

 deutlich gemacht. 



Färbung. Seitdem Correns die Versilberung zum Struktur- 

 nachweis der Membran und der Stärkekörner angewendet hat, wurden 

 eine ganze Anzahl Methoden zu gleichen oder ähnlichen Zwecken 

 empfohlen , die entweder auf demselben oder dem von Zimmermann 

 angewendeten Prinzipe beruhen. So hat Lagerheim eine haltbare 

 Stärketinktion in die botanische Mikrochemie eingeführt, die im 

 wesentlichen darin besteht, daß er die mit einer bestimmten .Jodjod- 

 kaliumlösung blaugefärbten Stärkekörner zunächst mit Silbernitrat 

 behandelt, der Sonne aussetzt und dann das so erzeugte Jodsilber 

 mit einem Ilydrochinonentwickler entwickelt. Das gut ausgefallene 

 Präparat zeigt die Stärkekörner braungefärbt. Die zu hell gefärbten 

 Körner können „verstärkt" werden. Lagerheim empfiehlt die er- 

 zielte Färbung für Demonstrationszwecke. Bei aller Anerkennung 

 für seine Methode kann ich die Bemerkung nicht unterdrücken, daß 

 man zur Demonstration immer das Geläufigste, das Alltägliche ver- 

 wenden soll, und da scheint mir die Braunfärbung noch nicht die 

 richtige Vorstellung von dem Bilde der vom Zögling später hunderte 

 Male selbst auszuführenden Jodprobe zu liefern. 



Haltbare -Dauerfärbungen der Stärke haben weiter noch Schaff- 

 ner und DoDGE angegeben. Das Correns -Lagerheim sehe Silber- 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 223 



verfahren fand neuerdings Salter geeignet. Zur Tinktion sollen 

 Methyl-, Gentianaviolett und Aramoniakfuchsin, zur Doppelfärbung, 

 also gleichzeitigen Deutlichmachung der Chroruatophoren, aufeinander- 

 folgende Anwendung von Säurefuchsin und Gentiana- oder IMethyl- 

 violett gut sein. H. Fischer rät behufs Sichtbarmachung der Schich- 

 tung an, auf die Stärkekörner von Canna indica wässerige 

 F'arbstotl'lösung zu tropfen , eintrocknen zu lassen und nachher 

 Pikrinsäure zuzusetzen. Geeignet sind dazu Fuchsin, Safranin, 

 Methyl- und Methylenblau, denn diese fallen bei der Behandlung mit 

 Pikrinsäure als feiner Niederschlag in den wasserreichen Schichten 

 aus. Andere Farbstotfe sind deshalb ungeeignet, weil sie entweder 

 diffus oder gar nicht färben. So werden Lösungen von Nigrosiu, 

 Hessisch Purpur, Echtrot, Ammoniak -Karmin, Anilinblau, Kongorot 

 und Zyanin in öOprozentigem Alkohol nicht aufgenommen. Methylen- 

 blau dringt langsam ein. Dagegen färben rasch und stark : Fuchsin, 

 Safranin, Chrysoidin, Malachitgrün, Methyl-, Jodgrün, Gentianaviolett 

 auch in stark verdünnten Lösungen. 



Abgesehen von diesen Allgemeinfärbungen der Körner sind jeden 

 falls die oben angegebenen über die Sichtbarmachung der Schichtung 

 die interessantesten, auch weil sie wiederum einen Beitrag zur Theorie 

 der Färbungen zu liefern vermögen. Aus der Tatsache nämlich, 

 daß nur die wasserreichen Schichten in den genannten Fällen gefärbt 

 erscheinen, würde man sich zu dem Schlüsse berechtigt glauben, daß 

 den weicheren Schichten alleia das Farbstoffspeicheruugsvermögeu 

 zukommt, während es den dichteren ganz abginge. Dieser Schluß 

 stimmt nun mit anderweitigen Erfahrungen Fischers nicht, die ihn 

 gerade die dichtesten Partieen am intensivsten gefärbt erscheiuen 

 ließen. Merkwürdig ist auch der Befund, daß schwache Lösungen 

 der oben für lokalisierte Fällung empfohlenen Farbstoffe bei gleicher 

 Nachbehandlung nur diffus färben. 



Es dürften hier Avohl Versuche wie die v. Wisselinghs über 

 Zellulosefärbung die Möglichkeit einer iM'klärung näherrücken. In 

 einer späteren Arbeit hat sich H. Fischer des Lagerhelm scheu Silber- 

 verfahrens für Dauerfärbungen bedient und es für kleine Stärkekörner 

 nicht, wohl aber für große ganz ausgezeichnet geeignet gefunden. 

 Noch einfacher aber ist es nach seinen Erfahrungen, die stark mit 

 Jod überfärbten Stärkekörner in Kanadabalsam zu legen, worin sich 

 der Überschuß farblos löst und die Stärkekörner gefärbt bleiben. Eine 

 interessante Doppelfärbung der Stärkekörner selbst hat Kkaemer mit- 

 geteilt. Er färbt mit verdünnten wässrigen Lösungen von Gentiana- 




224 ßichter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



violett und Safranin. Dabei färben sich nur die wasserreichen 

 Schichten und das Zentrum. Mit Jod kann er nun die ungefärbt 

 gebissenen nachfärben. Die Doppelfärbung wird bei 60 bis 65 ^^ C. 

 ausgeführt. Mit Clirorasäure, Calciumnitrat und Speichel kann man 

 noch den kristallinischen Aufbau deutlich machen und auch die Lösungs- 

 verhältnisse genauer studieren. — Nach Red soll auch das MANNSche 

 Membranfärbeverfahren zur Tinktion der Stärkekörner sehr geeignet 

 sein. Im Prinzipe stimmt mit dem Jod - Kanadabalsamverfahren 

 H. Fischers eines, das Harz unter dem Titel „Jodparaffinöl, ein neues 

 Mikroreagens und Einbettungsmediura", in dieser Zeitschrift verötfent- 

 licht hat, überein. Bereits früher hatte er auf das farblose Paraftinöl 

 als gutes Einbettungsmittel für Stärke hingewiesen. Nun färbt er sie 

 auch noch mit Jod , das im Verhältnisse 1 : 100 im Paraffin gelöst 

 wird. Die Stärke wird gelb bis dunkelbraun und zeigt oft eine 

 scharfe Differenzierung in dunkelbrauner Farbe , die pferdeschweif- 

 artig vom Kornkern ausgeht , nur vereinzelte Körner werden blau. 

 Dabei verhalten sich die verschiedenen Stärkesorten verschieden. 

 Auch diese Färbung soll für Demonstrationszwecke geeignet sein. 



Und mag nun die Braunfärbung noch so gut gelungen sein, ein 

 Bild von der Blaufärbung gibt sie nicht, und bevor diese nicht — 

 und das wird wegen des nötigen Wassergehaltes recht schwer sein — 

 „haltbar" gemacht wird, wird für die Demonstration der „Jodprobe" 

 kein Fortschritt zu verzeichnen sein. 



F 1 r i d e e n s t ä r k e. Wegen ihres eigentümlichen Verhaltens gegen 

 Jodlösungen wurden, wie bekannt, die von VAn Tieghem und Belzung 

 untersuchten stärkeartigen Körnchen in den Zellen der Flnrideen als Flo- 

 rideenstärke bezeichnet. Bis 1892 war über ihre chemische Zusammen- 

 setzung noch nichts bekannt und, wenn wir aufrichtig sein wollen, so gilt 

 dies auch heute noch, denn die beiden großen Arbeiten, die seither sich 

 mit diesen interessanten Körpern beschäftigt haben, enthalten doch eigent- 

 lich bloß sehr wertvolle Beiträge zur Kenntnis ihres Verhaltens gegen Jod- 

 reagentien, ihrer Verbreitung usf., ohne über ihre Chemie Aufschluß geben 

 zu können. Es handelt sich um die Schriften von Kolkwitz und BtJTSCHLi. 



Läßt man nach Kolkwitz Florideenstärke erst in Chloralhydrat auf- 

 hellen und färbt dann mit Judjodkalium, so kann man zwei Farbennüancen 

 beobachten, den Laurencia- und den Furcellaria-Typus, wovon der letztere 

 dem Kartoffel-, der andere dem Macistypus nahekommt. Beachtenswert ist; 

 daß sicli die Stärke von Spermothamnium Turneri mit Chloralhydrat allein 

 bläut. Vermutlich macht dieses Jod aus irgend einer Verbindung frei; 

 ganz ähnlich wirkt Schwefelsäure auf die Karposporen von Ceramium 

 rubrum. 



BÜTSCHLi, der auch die makrochemischen Eigenschaften der Florideen- 

 stärke berücksichtigt , kann auf Grund ihres Verhaltens gegen Jod, in 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 225 



Daiapfform oder in Lösung, Jodjodkaliura nach Meyer, Kaliumchh)rid usf. 

 mit und ohne Vorbeliandlung- mit Kalihuige eine ganze Skala von Farben- 

 tönen bei ihr feststellen von Saccardo vinosus bis zum Saccardo violaceus 

 und lividus Saccardo. 



Trotz dieser Untersuchungen kann ich also wohl auch heute noch 

 diesen Abschnitt mit Zimmekmanns Schlußsatz beschließen: „Eine genauere 

 chemische Untersuchung über die Substanz der Florideenstärke fehlt zur- 

 zeit noch." 



Phäophyceenstärke. Schmitz hatte im Cytoplasraa von Phäo- 

 phyceen farblose Kcirnchen beobachtet, die sich mit Jod nicht färben sollten, 

 Bertholi) hatte deren Vorkommen bestritten. Haxsex konnte wiederum 

 fettähnliche Tropfen wahrgenommen , die in Wasser unlösHch sind und in 

 Glyzerin zusammenfließen, ohne sich darin zu lösen. Sie werden mit Jod- 

 jodkalium dunkelbraun. Kalilauge läßt sie zunächst deutlich hervortreten, 

 macht sie aber bald durch Verseifung schaumig. In 90 ^/q Alkohol und Äther 

 sind sie leicht löslich. Hansen spricht daher den Phäophyceen echte Stärke 

 vollständig ab. Schon vorher hat Crato die von B. Hansteen als organoid 

 beschriel)enen merkwürdigen Gebilde der Phäophyceenzelle für organisch 

 erklärt und durch Reaktionen der verschiedensten Art deutlich zu machen 

 gesucht. Auch hatte er ihnen einen neuen Namen „Physoden" gegeben. 

 Die neuerliche Prüfung ließ nun Hansteen zur Überzeugung kommen, daß 

 seine „Fukosankörner" doch organoide und nicht organische Gebilde sind. 

 Ganz besonders auffällig ist die von Crato zuerst beobachtete Phlorogluzin- 

 reaktion dieser Körper mit Linds Reagens (Vanillinsalzsäure). In jüngster 

 Zeit hat Hunger diese Tatsache bestätigen und hinzufügen können, daß 

 1 °/o Osmiumsäure in Meerwasser, Schwärzung der Körper erzeugt. Hunger 

 betont ausdrücklich, daß nur die im Zeillumen liegenden Inhaltskörper von 

 Dictyota die genannten Reaktionen geben. 



Wir sehen, daß heute, wo noch über die organische oder organoide 

 Natur dieser Körper der Phäophyceenzelle Uneinigkeit herrscht, von der 

 Erschließung der chemischen Natur dieser Gebilde gar keine Rede sein kann, 

 müssen aber doch zugeben, daß unsere Erkenntnis in dieser Richtung im 

 Laufe der letzten 10 Jahre insofern zugenommen hat, als man wenigstens 

 das Vorhandensein derselben nicht einfach mehr hinwegdisputieren kann. 

 A. ^Ieyer findet übrigens, daß die Fukosankörner zum Teile aus Volutin 

 bestehen. 



Amylinkörner bei Beggiatoa. Hinze beobachtete bei Beggiatoa 

 mirabilis Kiirner, die sich mit .lodjodkalium bläulich oder bräunlich färben 

 und die im Speichel langsam löslich sind. Hinze hat sie deshalb Amylin- 

 körner genannt. 



Rote Stärke (Amylodextrin oder Dextrinstärke). Der Name rührt, 

 wie bekannt, von dem roten Farbenton her, den diese Stärkesorte mit Jod 

 liefert. Eine eingehende Behandlung hat sie durch Shi.moyama und A. Meyer 

 erfahren. Heinricher fand sie wieder im Tracheidenkopf und den Tracheiden 

 der Lathraea clandestina und Squamaria, während im Rindenparenchym ge- 

 wöhnliche Stärke vorkommt. Jodalkohol färbt gelblich, Jodjodkalium rot- 

 braun. Einige Stärkekörner sind sogar aus „blauer" und aus „roter" Stärke 

 zusammengesetzt, und zwar so, daß die rote die Hülle der blauen bildet. 



Zeitsohr. f. wiss. Mikroskorie. XXII, 2. l.Ö 




226 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2, 



MacDougal fand sie in den Sommerknollen von Isopyrura. Sperlich beob- 

 achtete sie im hyalinen Gewebe der inlialtsreichen Haustorien von Rhinan- 

 taceen. Der Nachweis gelang nur nach Zerstörung des Inhaltes mit Eau 

 de Javelle. • 



Braune Stärke. Bei seinen Untersuchungen mit der von ihm ein- 

 geführten Jodrailchsäure fand Lagerheim nun auch Amylodextrinkörner, 

 die sich bräunten, in den Kelchblättern von Anemone nemorosa, A. nemo- 

 rosaranunculoides, nicht bei A. ranunculoides, wodurch die „mikrochemischen 

 Stärkesorten" wieder um eine vermehrt erscheinen. 



Verwandte Stoffe. 1) Amyloid. Nach v. Wisselingh wird es durch 

 eine Lösung, die 0Ü4prozentiges Jod, 0'4prozentiges Jodkalium und lOpro- 

 zentige Schwefelsäure enthält, gebläut. Zellulose braucht einen höheren 

 Schwefelsäuregehalt zur Blaufärbung, daher können beide gut unterschieden 

 werden. Auch Riedel hat sich mit dem Körper beschäftigt. 2) Die Kis- 

 liche Stärke. Mit diesem Ausdruck scheint zweierlei bezeichnet zu werden. 

 Die Botaniker verstehen darunter Körner, wie sie im Zellsafte der Epidermis- 

 zellen, z. B. von Saponaria ofticinalis vorkommen, die Chemiker aber jenes 

 Produkt, das entsteht, wenn man Kartoffelstärke mit Salzsäure von 7'5 Pro- 

 zent übergießt, 2 Tage bei Zimmertemperatur stehen läßt, abgießt und diese 

 Prozedur zweimal wiederholt, worauf mit Wasser ausgewaschen und ver- 

 dünntes Natriumkarbonat zugesetzt wird. Da sie sich selbst bei Kochhitze 

 nicht mit Gelatine mischen läßt, kann man die erzeugte Emulsion nach 

 Beijerinck zu interessanten Demonstrationen verwenden: Nachahmung 

 eines künstlichen Zellgewebes, bei dem die Zwischenwände aus Stärke, der 

 „Zellinhalt" aus Gelatine besteht oder eine Art Imitation autochthoner 

 Stärke u. dergl. mehr. Bei Erhöhung des Gelatinegehaltes scheidet sich die 

 Stärke in der Gelatine in Form von Körnern ab, die aber keine Doppel- 

 brechung zeig.^n und somit kein neues Licht auf die Struktur und Bildungs- 

 weise der Stärke zu werfen vermögen. 



8. Schwefelkohlenstoff. 



Das auf Java sehr verbreitete, auf alten abgefallenen Zweigen von 

 Podocarpus, toten Bambusstengeln und totem Zuckerrohr vorkommende 

 Schizophytum lobatum Bref. , erzeugt nach Went am Myzel eigenartige 

 kurze Seitenzweige, an deren Spitze Tröpfchen einer stark lichtbrechenden 

 Flüssigkeit zu erscheinen pflegen. Gleichzeitig beobachtet man einen auf- 

 fälligen Geruch nach Schwefelkohlenstoff. Um die Schwefelkohlenstoff- 

 ausscheidung nachzuweisen, wurde der Pilz in Kultur genommen (Zucker- 

 pepton) und das in alkoholischer Kalilauge aufgefangene Destillat der 

 Kulturflüssigkeit näher untersucht. Der nach entsprechender Behandlung 

 entstandene Niederschlag von xanthogensaurem Kupfer wies auf das Zu- 

 treffen der Annahme hin. 



Es wäre gewiß eine dankbare Aufgabe, mikrochemisch in den Gutta- 

 tionströpfchen vielleicht den Schwefelkohlenstoff" nachzuweisen. 




XXII, 2. Ricliter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 227 



9. Aspar.ngiu und Leuciii. 



Von neueren Arbeiten über Asparagin seien genannt: Die Belzuxgs 

 „Sur divers principes issus de la germination et leur oristallisation intra- 

 cellnlaire" und L(iws „Das Asparagin in pflanzencheiuischer Beziehung". 



Belzung teilt mit, daß das Asparagin auch intracellulär zur Kristal- 

 lisation gebracht werden könne, wenn man die zu untersuchenden asparagin- 

 haltigen Schnitte in reines Glyzerin übertrage. Es kristallisiert dann in 

 rhombischen oder rechteckigen Tafeln aus. 



Auch das Leucin hat Belzung in analoger Weise kristallisieren 

 lassen. Es fällt in Glyzerin in herzförmigen Lamellen aus. (Versuchs- 

 objekt Lupinus albus.) 



10. Blausäure HCN. 



Treub ist es gelungen , die Reaktion auf Blausäure mikrochemisch 

 auszuwerten. Behandelt man nämlich nicht zu feine Schnitte von Pangium 

 edule mit alkoholischer Kalilauge, Eisensulfat-Eisenchlorürlösung und 20pro- 

 zentiger Salzsäure , so entsteht in den blausäurehaltigen Zellpartien ein 

 Niederschlag von Berlinerblau. Um die Verteilung der Blausäure auch 

 makroskopisch zu demonstrieren , muß man die Blätter zunächst durch 

 einen Schlag mit der Bürste mit möglichst vielen Wunden versehen; es 

 entstehen nachher bei der Reaktion rings um die Wunden blaue Flecke. 

 Natürlich ist bei Treub s Versuchsanstellung der Einwand gestattet, daß 

 auch durch Zersetzung entstandene Blausäure angezeigt wird, doch kann 

 im Falle Pangium davon abgesehen werden, da Greshoff makroskopisch 

 Blausäure bei dieser Pflanze nachgewiesen hat. In ausführlicher Weise hat 

 er 190.5 seine Erfahrungen in der Arbeit „Nouvelles recherches sur le 

 röle de l'acide cyanhydrique dans les plantes vertes" zusammengestellt. 



B. Aromatische Reihe. 

 1. Plieuole.^ 



Phloroglucin €«113(011)3. Weselsky hat bekanntlich eine, wie 

 man bisher meinte, präzise Reaktion auf Phloroglucin veröffentlicht, die 

 darauf beruht, daß stark verdünnte Lösungen dieses Körpers mit salpeter- 

 saurem Toluidin und sehr verdünnte Lösungen von salpetersaurem Kalium 

 oder Natrium ein Gemisch liefern, das anfangs farblos, später gelblich, 

 dann (u-angerot wird und zum Schlüsse einen zinnoberroten Niederschlag 



^) Eine Übersicht über die Reaktionen der Phenole hat H. Behrens 

 in seiner Arbeit „Mikrochemischer Nachweis und Unterscheidung der Phenole" 



und in seiner A. z. m. A. d. 0. V. gegeben. 



15 = 




228 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



absetzt. Th. v. Weixzierl hat AVeselskys Probe für mikroskopische Zwecke 

 ausgewertet. Später wurde nach den großen Fortschritten, die die Holz- 

 untersuchung durch WiESXERS Holzstoftprobe mit Phloroghicin-Salzsäure 

 gemacht hatte und nach der vermutungsweisen Feststellung Singers, 

 Vanilhn sei der Träger der Holzreaktion, von Lindt Vanillin-Salzsäure zum 

 Phloroglucinnaehweise verwendet. Beide Phloroglucinproben wurden bisher 

 als eindeutig und unzweifelhaft sicher angeselien. Möller stellte nun 

 neue vergleichende Versuche über mikrochemische Reaktionen an und kam 

 in seiner Arbeit „Über das Vorkommen von Phloroglucin in den Pflanzen" 

 zu dem Schlüsse, daß sowohl makroskopisch wie mikroskopisch überall dort, 

 wo LixDTs Probe gelinge, auch die Gerbstoffprobe zu erzielen sei, und zwar 

 mit gleicher Intensität und gleicher Lokalisation, ja noch mehr, er konnte 

 in denselben Zellen durch Salzsäurebehandlung die eine Probe in die andere 

 überfüliren, so daß man, je nach Zusatz von Eisensalzen oder Salzsäure und 

 Vanillin, folgende Farbenfolge bekam: Dunkelblau, gelb, farblos, rot, farb- 

 los, dunkelblau. Dadurch ist den Phloroglucinproben scheinbar sehr viel 

 an Wert genommen, und alle Fälle von Phloroglucinnachweis vor und nach 

 Möller, die sich noch auf die Vanillin-Salzsäureprobe stützen, sind heute 

 als doppeldeutig anzusehen; vgl. Klemm s Nachweis von Phlorogluzin mit 

 LiNDTs Reagens in den Granulationskörnchen, den Cratos bei seinen 

 „Physoden", Hansteens „Fukosankörnern", ebenso den Hungers beim 

 Assimilationsprodukte von Dictyota, vgl. auch Brexxers Phloroglueinprobe 

 bei Idioblasten von Fettpflanzen. Aus demselben Grunde erscheint Czapeks 

 Vorschlag, statt der Vanillinsalzsäure Hadromalsalzsäure zu verwenden 

 stark in seiner Bedeutung geschädigt, der ohnehin mit dem Nachteil 

 zu rechnen hatte, daß das Hadromal erst dargestellt, noch ein Mixtum 

 compositum ist, während Vanillin leicht käuflich, rein in Verwendung 

 kommen kann. 



Die Möller sehe Arbeit scheint übrigens Waage s Beobachtungen 

 über die Speicherung von Methylenblau in „Phlorogluzinzellen" zu erklären. 



2. Säuren. 



Ty rosin. Im großen und ganzen ist heute noch die Borodin sehe 

 Methode des Tyrosinnachweises üblich. So hat sich ihrer Shibata in seinen 

 „Beiträgen zur Wachstumsgeschichte der Bambusgewächse" bedient. Er 

 findet, daß die rote Auflösung in Millons Flüssigkeit ein ganz ausgezeich- 

 netes Erkennungsmerkmal abgibt. Zur Feststellung der Verteilung des 

 Tyrosins sei das Einlegen in MiLLONsches Reagens sehr zweckmäßig, wo- 

 durch die tyrosinreichen Zellen sofort intensiv rot würden. 



Eine Verwechslung mit der Eiweißprobe könne mit Auslaugen der 

 Schnitte in absolutem Alkohol ausgeschlossen werden. Saito beobachtete 

 Rotfärbung der Bastzellen verschiedener Monokotyledonen mit Millon und 

 ist geneigt, wenigstens bei Bambusa, Tyrosin als Ursache anzunehmen. 



Übrigens ist er mit dieser Annahme nicht zuerst vorgetreten, da schon 

 Correns gelegentlich seiner Widerlegung Wiesners auf die durch Millon 

 bewirkte Rotfärbung der Membranen in Bromeliaceenblättern zu sprechen 

 kommt und sie auf Tyrosin zurückführt. 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 229 



3. Aldehyde. 



Vanillin 0^11^0^ (Schmelzpunkt bei 80*'). Zur Orientierung über 

 das Vorkommen des Vanillins sei auf W. Busses „Studien über die Va- 

 nille" und J. Behrens' Arbeit „Über das Vorkommen des Vanillins in der 

 Vanille'' verwiesen. — Indem ich der geschichtlichen Entwicklung etwas 

 vorgreife , reihe ich das von Czapek als neu beschriebene Hadromal in 

 das Kapitel über Vanillin. Bekanntlich iiat Czapek durch entsprechende 

 Präparation aus dem Holze einen aldehydartigen Körper isoliert, der stark 

 nach Vanillin roch und die Proben dieses Stotfes in ganz besonderer Weise 

 zeigte. Czapek hat ihn, weil eine volle Identifizierung nicht möglich war, als 

 neu beschrieben und mit dem Namen Hadromal belegt (vgl. Holz). Da es 

 nun aber Gräfe gelungen ist, dessen Zusammensetzung aus Vanillin (C^H^, 

 O3), Brenzkatechin (C„IIuO.,) und 2 bis 5 Methylfurfurol (C^^HyO^) zu er- 

 weisen, stehe ich nicht an, auch das Hadromal unter Vanillin zu subsumieren, 

 soweit es nicht aus den beiden andern Komponenten besteht. 



Wie die Sache heute liegt, gibt es kein Hadromal mehr und die Zahl 

 der wichtigen pflanzlichen aromatischen Aldehyde ist wieder auf die Zahl fünf 

 beschränkt, wenn man nicht die von Geneau und LtDFORSS beschriebenen 

 dazu rechnen will. Auf Grund von FarbstoftVeaktionen (Eintreten der Fär- 

 bung mit Schiffs Reagens) nimmt nämlich Geneau auch einen beson- 

 deren Aldehj'dstoflf in Cuticulahäuten an, und Lidforss vermutet einen 

 aromatischen Aldehyd in den elaioplastenartigen Gebilden der Epidermis- 

 2ellen von Potamogetonarten. 



4. Kohlenwasserstoffe {L\qK^,.)u. 



Über ätherisches Öl vergleiche das Kapitel „Unterscheidung des 

 fetten und ätherischen Öles" (oben p. 214). 



Myrrhe. Über ein Reagens auf Myrrhe vgl. E. Hirschsohn. 



Harze. Überblickt man die Erfahrungen Heckels und Schlagden- 

 hauffens über die nahe Verwandtschaft von Gerbstoffen und Harzen und 

 deren Entdeckung eines Gerbstoffharzes bei Spermolepis, Rymoschs über 

 die Harzreaktion eines Öls mit Kupferacetat und Buscalionis über die 

 Rotfärbung von Harz mit Sudan III, so kann man nicht anders als Tschirch 

 recht geben, wenn er meint, es gebe kein einheitliches Harzreagens, denn 

 „Harz" sei wie „Gerbstoff" ein Sammelbegriff der verschiedensten Sub- 

 stanzen. Er umfasse Verwandte der Öle und Fette und der Gerbstoffe. 

 Doch gebe es gewisse Mittel der Unterscheidung: Chloralhydrat löst Fette 

 schwerer als Harzbalsam. Vorzügliche Resultate liefert die Verseifungs- 

 methode, die sich darauf gründet, daß sich in Harzsekreten fast immer 

 Terpene finden, die unverseif bar sind, und daß die Glyzerinester und Fett- 

 säuren bei Behandlung mit Alkalihydraten schon in der Kälte Seifen liefern, 

 die in Wasser löslich sind. Doch versagt sie natürlich überall dort, wo 



^) Behrens, A. z. m. A. d. w. 0. V., 1. H., 1895, p. 57 — 63. 




230 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



die im Kali nicht löslichen Bestandteile, Resene und Terpene, in Harzsekreten 

 fehlen oder gegen die löslichen, Oleole, Resinole und die Resinolsäuren, stark 

 zurücktreten. Handelt es sich aber nicht um genauere Unterscheidungen, 

 so wird immer noch die Unverdorben -Franchimont sehe Kupferacetat- 

 probe recht geeignet sein; man sieht sie daher noch allgemein in An- 

 wendung. So benutzte sie Frau Schwabach bei ihren Studien über Harz- 

 abscheidungen. Zalewski verwendete heißes Kupferoxalat zum Nacliweis 

 der HarzfüUung der Resinocysten. — Nach Trotter gibt das eigenartige 

 Sekret mancher Eichengallen, das auf diesen einen glänzenden Belag bildet, 

 harzartige Reaktionen und Tichomirow weist Harze in intracellulären Ein- 

 schlüssen nach. — Kristallisation. Molisch gelang die Kristallisation 

 des Aloins in den Aloinzellen von Aloe succotrina mittels Glyzerin. 



Kautschuk. Eine Unterscheidung von Kautschuk und Harz unter 

 dem Mikroskope ist nicht leicht, auch existierten keine mikrochemischen 

 Methoden der Unterscheidung. Man war daher geneigt, weil die makro- 

 clieraische Analyse z. B. beim Ficusmilchsafte im wesentlichen Kautschuk 

 ergeben hatte, die größeren Kügelchen, die die Hauptmasse bildeten, als 

 Kautschuk anzusprechen und anzunehmen, daß die kleineren Harztröpfchen 

 seien. Molisch hat gezeigt, daß die Kügelchen sich zum Teil in Alkohol 

 lösen, während der Rest nach den physikalischen Eigenschaften zu schließen 

 aus Kautschuk besteht. Die Kügelchen sind löslich in Äther, Benzol und 

 Schwefelkohlenstoff, unlöslich in Wasser, Glyzerin, verdünnten Sauren und 

 Alkalien. Chloralhydrat macht sie quellen und wandelt sie in amöben- 

 artige Massen um. Alkanna fiirbt sie wie ätherisches Ol und Fette. Hervor- 

 gehoben aber sei, daß sie mit konzentrierter Zuckerlösung und Schwefel- 

 säure sehr schön die RASPAiLsche Reaktion geben, wodurch zu weiterer 

 Vorsicht bei der Anwendung von Eiweißreaktionen gemahnt wird, vgl. 

 Krasser. — Fritsch hat beim Studium des Kautschuks bei Hippocrateaceen 

 gefunden, daß dieser lebhafte Doppelbrechung zeigt, die beim Kochen mit 

 Wasser und bei Einwirkung heißer Kalilauge verloren geht, um nachher 

 wieder aufzutreten. Beim Erwärmen verflüchtigt sich dieser Kautschuk. 



Guttapercha. Mit dem Kautschuk wird oft ein anderer Stoff 

 pflanzlichen Ursprungs verwechselt, dessen Studium sich Obach gewidmet 

 hat, die Guttapercha. Der chemischen Zusammensetzung nach besteht sie 

 aus Kohlenwasserstoffen der Terpenreihe, von denen die wichtigsten sind 

 Isopren (C^Hg) und Kautschin (C^qÜ^q), die nämlichen Stoffe, die auch aus 

 Kautschuk isoliert worden sind. Sie ist das Rohprodukt aus dem Milch- 

 safte des Guttaperchabaumes (Taban Merah, Palaquium Gutta), einer Sapo- 

 tacee. Da wir es hier offenbar mit einem sehr interessanten Stoffe der 

 Kautscliukgruppe zu tun haben, habe ich, obwohl mikrochemisch hier noch 

 nicht viel geleistet ist, diese Notiz in mein Referat mit aufgenommen. 



5. Glykoside. 



Trotz aller Versuche, einheitliche Reagentien für die Glykosidgruppe 

 zu ermitteln, besitzen wir heute ebensowenig eines wie zur Zeit der Ver- 

 öffentlichung der Mikrotechnik von Zimmermann. 




XXII, 2. Kicliter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 231 



Nachdem Weevers darauf aufmerksam gemacht hatte, daß die übliche 

 Methode, Glykoside durch Behandlung der Objekte mit konzentrierter 

 Schwefelsäure nachzuweisen, keine einwandfreien Resultate liefert und daß 

 auch die von Molisch eingefülirte «-Naphtol-Probe, auf Glykoside ange- 

 wandt, entsprechende Vorsicht erheische, schien Goris für kurze Zeit das 

 Problem gelöst zu haben, indem er Sonnenscheins eisenhaltige Salpeter- 

 säure und Ammoniak auf glykosidhaltige Zellen anwandte. Daß er sich 

 auch getäuscht hat, konnte Cazzani zeigen (vgl. Gerbstoffe). Es erübrigt 

 daher eine kurze systematische Besprechung der Reaktionen einiger Gly- 

 koside. Salicin: Nach Weevers ist es am geeignetsten, die Spaltungspro- 

 dukte dieses Glykosids nachzuweisen, doch ist es bisher nicht gelungen, 

 diese sekundär auftretenden Körper lokalisiert zu fällen, nach Gorris kann 

 es mit selensaurem, in Schwefelsäure gelöstem Natrium sichtbar gemacht 

 werden. Aesculin: Zu seinem Nachweis ist Sonnenscheins Reagens be- 

 sonders empfehlenswert. Es zeigt schöne Rotfärbung. Fustin wird nach 

 Goris mit Sonnenschein schem Reagens schwach rot, Fraxinin auf gleiche 

 Weise behandelt : veilchenblau, wird mit Kalilauge, Ammoniak und Calcium- 

 oxydhydrat gelb ('?), Daphnin wird mit Kalilauge gelb. Anthokyan gehört 

 nach Weigert und Overton auch in diese Gruppe und soll an Gerbstoff 

 gebunden sein. Gorris hält auch eine Bindung der gewöhnlichen Glykoside 

 mit Gerbstoff für möglich. 



Indikan. Die Muttersubstanz des Indigo ist ein farbloses Glykosid, 

 das Indikan, das durch die verschiedensten Agentien in Indigblau und eine 

 Zuckerart gespalten werden kann. Um nun diese Zerspaltung innerhalb 

 der indikanhaltigen Zellen zu bewirken, bringt Molisch die lebenden Pflanzen- 

 teile in Alkoholdampf. Nach 24 Stunden ist die Abspaltung des Indigo- 

 blaus erfolgt, das durch Extraktion des Chlorophylls mit Alkohol schon 

 makroskopisch sichtbar, der SACHSschen Jodprobe entsprechend, einen Über- 

 blick über die Verteilung des Indigos und seiner Muttersubstanz gestattet. 

 Mikroskopisch wird am besten in einer Chloralhydratlösung 5:2 be- 

 obachtet. Man steht in dem Präparate Körnchen oder Kriställchen von 

 Indigo. Die Molisch sehe Indikanprobe läßt sich natürlicli auch mit 40- 

 prozentigem Alkohol erzielen, doch da das Indikan in Alkoliol löslich ist, 

 wird es sich teilweise der Beobachtung entziehen. Bleibt uian dagegen bei 

 der Alkoholdampfeinwirkung, so gelingt es auch bei einiger Übung, den 

 Sitz des Indikans im Chlorophyllkorn zu ermitteln. Behandelt man nämlich 

 nach Molisch Blätter von Phajus grandifolius, Isatis tinctoria mit Alkohol-, 

 Ammoniak- oder Chloroformdämpfen, so erweist sich das Indigblau auf die 

 Cidorophyllkörner der jungen Blätter lokalisiert. Es scheint also das In- 

 dikan im Chlorophyllkorn zu entstehen. — Indikan beobachtete Molisch 

 auch bei seinen Untersuchungen über Milch- und Schleimsaft in dem die 

 Milchröhren begleitenden Mesophylle von Echites religiosa. 



Eine zusammenfassende historisch - histologisch - mikroskopisch - mikro- 

 chemische Skizze von Molisch ist in Wiesners „Rohstoffen" erschienen, 

 aus der nur die Verwendung der Sublimation des Indigos und seine leichte 

 Unterscheidbarkeit von künstlich erzeugtem Indigo hervorgehoben sein 

 mögen, Bemerkungen, die um so wichtiger sind, als es 1878 Baeyer gelang, 

 das Isatin und damit den Indigo künstlich <larzustellen. 




232 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



Saponarin. Das von Barger genauer studierte Glykosid färbt 

 sich mit Jod intensiv blau. Es scheint einem Flavonderivat anzugehören 

 und eine gewisse Ähnlichkeit mit dem Scutellarin von Molisch und Gold- 

 SCHMIEDT zu haben. 



0. Farbstoffe. 



a) Chlorophyll. 



Mikrochemische Reaktionen. Die Zahl der raikrocliemi- 

 schen Reaktionen auf Chlorophyll war nicht gerade groß. Mit Aus- 

 nahme der Hypochlorin- oder Chlorophyllanreaktion, die nach A. Meyer 

 mit Eisessig ausgeführt wird, sucht man in Zimmermanns Mikro- 

 technik vergebens nach einer zweiten. — Eine neue Reaktion hat 

 Molisch angegeben. Schon 1892 fand er bei seinen Untersuchungen 

 über das Eisen, daß das Chlorophyll in gesättigter Kalilauge sofort 

 hellbraun, nach wenigen Minuten oder einer Viertelstunde aber wieder 

 grün wird. Dieses Umschlagen von Braun in Grün geht sofort und 

 viel schöner beim Erwärmen oder Hinzufügen von Alkohol vor sich. 

 Die Reaktion gelingt bei zahlreichen Objekten, auch bei solchen, die 

 jahrelang im Herbar gelegen hatten. Das einmal gebildete Alkali- 

 chlorophyll läßt natürlich nach dem Auswaschen mit Wasser und 

 neuerlicher Behandlung mit Kalilauge keinen Farbenumschlag mehr 

 eintreten. Auch wenn das Chloropliyll nur mit verdünnter Kalilauge 

 behandelt wird, gelingt die Reaktion nicht mehr. Bei Diatomeen und 

 Phaeophyceen ist vorherige Behandlung mit siedendem Wasser not- 

 wendig. Bei Florideen und Cyanophyceen machen die gleichzeitigen 

 Farbstoflfreaktionen die Chlorophyllprobe minderwertig. Tswett hat 

 im selben Jahre mit Wasserstoffsuperoxyd und Ferrocyankalium 

 experimentiert und die Hypochlorinreaktion genauer studiert. Essig-, 

 Phosphor- oder Salzsäure lassen deutlich dichroitische Kristalle auf- 

 treten. Überdies scheint Kaliumpermanganat zur Deutlichmachung 

 der Struktur der Chloroplasten , Schwefel- und Salpetersäure aber 

 wegen der Lösung der Stärke für die Untersuchung sehr ge- 

 eignet. In der Folge fand Tswett, daß konzentrierte Lösungen von 

 Dioxybenzolen (Resorcin, Pyrokatechin) Proteinstofie lösen und ver- 

 flüssigen. Das Cytoplasma wird in Resorcin sofort gelöst, die Chloro- 

 phyllköruer ballen sich dagegen zu hyalinen, halbflüssigen Massen zu- 

 sammen, nachdem sich in ihnen kleine grüne Tröpfchen abgeschieden 

 haben. Alkalisches Resorcin, das rascher wirkt, löst die Chloroplasten 

 und der Farbstoff" der ganzen Zelle fließt in große Kugeln zusammen. 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Milvrocheniie. 238 



die al« Chloroglobin bezeichnet werden. Beim Answaschen mit Wasser 

 oder Glyzerin ballt sich der Farbstoff in Klumpen zusammen. Mit 

 Chloralhydrat erhält man ähnliche Resultate. Bei Einwirkung von 

 neutraler Resorcinlösung auf Chloroglobin entstehen Karotinkristalle. 

 Säuren rufen Chlorophyllanbildung hervor. Eiweißprobe gibt das 

 Chloroglobin nicht. 



Molisch weist endlich Indikan durch Indigobildung im Chloro- 

 phyllkorne der Indikanptlanzen nach (man vgl. das Kapitel Glykoside). 



Fixierung und Färbung der C h 1 o r o p 1 a s t e n. — Angaben 

 über Fixierung und Färbung bei Oltmanns, Salter u. a. — Buscalioxi 

 kann mit Sudan III iin Chlorophyllkorn gewisse winzige Körnchen intensiv 

 rot färben, während das Korn sonst zart rot bleibt. Prowazek benutzt 

 einprozentige Chromessigsäure zur Fixierung und Gentianaviolett zur Fär- 

 bung der Chromatophoren. — Panachure und Chlorose. Zimmermann 

 konnte Chromatophoren in chlorotischen Blättern nachweisen , auch bei 

 panachierten kommen scharf abgegrenzte Chromatophoren vor, nur bei ganz 

 weißen können sie fehlen. Weitere Aufschlüsse gibt Kohls Arbeit über 

 Karotin. In neuester Zeit hat Pantanelli Sublimat -Pikrinsäure, Säure- 

 fuchsin oder Gentianaviolett für die Darstellung der Chromatophoren jjana- 

 chierter Blätter als zweckmäßig angegeben. 



b) Karotin. 



Dem bisherigen Nachweise des Karotins gegenüber stellt das von 

 Molisch angegebene Kristallisationsverfahren einen bedeutenden Fort- 

 schritt vor, auf dem auch die von Kohl vorgeschlagene Gliederung in 

 Eukarotine und Karotinine beruht. 



Nach dem von Molisch als Kalimethode bezeichneten Verfahren 

 werden die frischen grünen Blätter oder kleine Stücke derselben in 

 40voluinprozentigen Alkohol, der 20 Gewichtsteile Kalilauge gelöst 

 enthält, gelegt und darin mehrere Tage, gewöhnlich solange bei Ab- 

 schluß von Licht belassen, bis alles Chlorophyll ausgezogen ist. Ist 

 dies geschehen, so wird die Kalilauge durch destilliertes Wasser aus- 

 gewaschen. Schließlich werden die Blattfragmente zum Zwecke 

 mikroskopischer Beobachtung in Glyzerin übertragen. Man findet 

 dann innerhalb der früher chlorophyllführenden Zellen das Xantho- 

 phyll (Karotin) in der Regel in Kristallform abgeschieden, selten in 

 Form gelber Tröpfchen oder den Zellinhalt durchtränkend. 



Etwa bei 100 Phanerogamengattungeu wurde auf diese Weise 

 die Kristallisation erzielt. Auch eine neue Reaktion auf diese Kri- 

 stalle konnte in Phenol- oder Thymol-Salzsäure angegeben werden. 

 Bei Algen tritt die Kristallisation auch oder nur außen auf. Bei 




234 Kichter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



Oscillaria leptotrioha erzielt man mit Essigsäure allein die Kristalli- 

 sation. Dabei geht Chlorophyll und Karotin aus den Zellen, während 

 das Phykoeyan allein in ihnen zurückbleibt. 



Zum direkten Nachweise des Karotins erwies sich nach Kohls 

 kritischer Behandlung des Gegenstandes , auf dessen Literatur- 

 zusammenstellung ich verweise, konzentrierte Schwefel-, konzentrierte 

 Salpeter- und Salzsäure, diese mit Phenol oder Thymol, Bromwasser 

 und Bromdampf am geeignetsten, für den indirekten Molisch s Kali- 

 oder Franks Säuremethode. 



Die CARNAUDSche Formel für das Karotin wird mit C^gHog an- 

 gegeben nnd von Kohl akzeptiert. 



Molisch hat noch im Erscheinungsjahre von Kohls Arbeit Beobach- 

 tungen über eine interessante Verfärbung grüner Aloe- und Selaginella- 

 blätter nach Rotbraun, hervorgerufen durch starke Sonne, veröifentliclit 

 und gezeigt, daß diese Verfärbung auf Umwandlung des Chlorophylls in 

 Karotin beruht. Auch die Hötung fertiler Equisetenstengel ist aufKarotin- 

 neubildung zurückzuführen. Das Karotin wies er mit den gebräuchlichen 

 Methoden nach. Jaxssexs und Mertens fanden, daß das Pigment der rosa 

 Hefe neben anderen Stotfen auch Karotin enthält. 



Xicht genügend begründet erscheint heute noch die Ansicht vom A"or- 

 kommen des Karotins in den Wurzeln von Dracaena und anderen Liliaceen, 

 das Schmied aus den vorkommenden rubinroten Tröpfchen erschließt, die 

 sich wohl mit Schwefel- und Salpetersäure, nicht aber mit Phenol-Salzsäure 

 bläuen und nicht nach Molisch kristallisieren lassen. Verwiesen sei auch 

 auf den von Keller bei (,'elastrus s.candens beschriebenen Farbstoff. 



c) Seltenere Farbstoffe. 



Prodigiosin. Die chemische Analyse Griffiths, durchgeführt mit 

 einem alkoholischen Extrakte des Bacillus prodigiosus, ergab die empirische 

 Formel Cjs H56 NO5 . Absorptionsstreifen in Grün und Blau. Nach Rosen- 

 BERG kann es zur Suberinfärbung benutzt werden. 



Violacei'n. Der Farbstoff des Bacterium violaceum läßt sich nach 

 Matruchot gleichfalls in der Mikrotechnik verwerten. Im übrigen scheint 

 er , das Chroioogen von Fusarium und die Farbstoffe vieler Farbstott- 

 bakterien zu Vitalfärbungen außerordentlich geeignet. 



Farbstoff von Aposphaeria violacea n. sp. Bertel kulti- 

 vierte den auf dem Glashauslacke auftretenden violetten Pilz und studierte 

 die Bedingungen der Farbstoft'bildung. Sehr charakteristisch ist eine mit 

 Alkalien auftretende intensive Bhiuviolettfärbung des im mikroskopischen 

 Bilde braunrot erscheinenden Farbstoffes. Bei geeigneter Versuchsanstellung 

 gelingt es auch, das Chromogen in Sphäriten abzuscheiden. Eine Identifi- 

 zierung mit anderen Farbstoffen war unmöglicli. 



Bakteriopurpurin. Nach den Untersuchungen von Lankaster 

 und Bütschli ist das Bakteriopurpurin von Winogradsky und Engelmann 




XXII, 2. Kichter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 235 



untersucht worden, die eine starke Abhängigkeit des Stoffes von den 

 äußeren Bedingungen gefunden haben. Über die Natur des Stoffes herrscht 

 vorläufig noch vollkommene Unklarheit. 



Phykoerythrin und Phykocyan, vgl. das Kapitel „Eiweiß". 



C h r m a t o p h r e n der s c i 1 1 a r i e n. Fischer isolierte die Chro- 

 matophoren der Cyanophyceen mittels Flußsäure. Hegler führt den Be- 

 weis, daß Chlorophyll und Phykocyan an die nändichen Farbstoffträger 

 i'„Cyanoi)lasten") gebunden sind. Um das Chlorophyll sichtbar zu machen, 

 verwende man Clüoroformwasser. Gesättigte Lösungen von Magnesium- 

 oder Ammoniurasulfalt, die mit Schwefelkohlenstoff" oder Chloroform ge- 

 schüttelt waren, zeigen das Phykocyan sehr deutlich. Vgl. A. Fischer 

 .,üie Zelle der Cyanophyceen." 



Diatomin und Phykophaei'n. Vgl. insbesondere die neuen Unter- 

 suchungen von Molisch, die die neueste Literatur über den Gegenstand 

 kritisch behandeln und eine große Anzahl wesentlicher neuer Befunde 

 mitteilen. 



P seudoindican. Die Cystolithen verschiedener Acanthaceen ent- 

 halten ein farbloses Chromogen, das beim Kontakt mit der atmosphärischen 

 Luft einen intensiv blaugrünen Farbstoff liefert. Wegen des labilen Cha- 

 rakters ist dieser Stoff scharf vom Indigo bezw. der Muttersubstanz des- 

 selben, dem Indican, unterschieden. Molisch, der sich dem Studium beider 

 gewidmet hat, wählte daher den Naiuen „Pseudoindican". Es ist nicht 

 unmöglich, daß dieser Stoff", oder wenigstens ein sehr nahe verwandter, 

 auch in Lathraea vorkommt. Der Farbstoff' entsteht erst nach Verletzung. 

 Die Cystolithen reagieren alkalisch. 



Scutellarin. Kocht man die Blätter von Scutellaria altissima in ein- 

 prozentiger Salzsäure etwa 10 Minuten, so bemerkt man nachher, namentlich an 

 der Unterseite der Blätter, zahlreiche weiße, mit freiem Auge deutlich wahr- 

 nehmbare Flecke von oft sternartiger Form , die sich unterm Mikroskope 

 als dendritisch verzweigte, gewöhnlich aus Nadeln zusammengesetzte Kristall- 

 aggregate erweisen. Die Kristalle entstehen in solcher Menge, daß die 

 Blattunterseite oft weißgrau erscheint. Beim Eintauchen eines beblätterten 

 Sprosses in ein- bis.oprozentige kalte Salzsäure bilden sich nach ^/.. bis 2 Tagen 

 gelbe sphärokristallinische Bildungen in Gestalt von Klümpchen, Knollen 

 oder Warzen, die in den Epidermiszellen liegen. Kocht man die frisch ge- 

 pflückten Blätter mit der zehnfachen Menge Wasser etwa ^j^ Stunde aus, 

 so scheiden sich nach Zusatz von zirka ein- bis 2prozentiger Salzsäure zu 

 dem nitrierten P^xtrakte reichlich Kristalle in Form von büschel- oder kugel- 

 artigen Drusen ab. Bei heißer Fällung treten zumeist stern-, büschel- oder 

 besenartige Kristallaggregate von hellgelber, bei kalter Fällung hingegen 

 gewöhnlich Sphärite von goldgelber Farbe auf. Die trockenen oder nur 

 mit wenig Wasser befeuchteten Krystalle werden mit etwas Barytwasser 

 momentan rostrot und. kurze Zeit darauf an der Luft dunkelgrün. Durch 

 Brom-, Chlor- oder Jodwasser entsteht die grüne Farbe nach vorheriger 

 Behandlung mit Barytwasser sofort. 



Der mikrochemische Nachweis des Stoffes gelingt besonders gut 1) mit 

 konzentrierter rauchender Salzsäure und Beobachtung in Chloralhydrat (5:2), 

 der Stoff ist dann in Sphärokristallen bis zu Ol mm Durchmesser ausgefallen 




236 Richter: Die Fortscliritte der botnnisclien Mikrochemie. XXII, 2. 



und 2) mit lOprozentiger Salzsäure, die ihn in büschelartigen Aggregaten 

 ausfallen läßt. Das Scutellarin fand sich in allen untersuchten Scutellaria- 

 Arten, in Wurzel, Stengel, Blatt und Blüte, in der Oberhaut aber am meisten, 

 auch bei Galeopsis Tetrahit L. und Teucrium Chamaedrys L. fand es sich. 

 Die übrigen untersuchten Labiaten gaben durchwegs negative Resultate. 

 Die von Goldschmiedt vorläufig gefundene Formel für Scutellarin lautet 



21 20 12 • 



Andere Farbstoffe der Blätter und Stämme höherer 

 Pflanzen. Heixricher fand in den desorganisierten Leukoplasten der 

 Lathraea Squ. goldgelbe bis orangene Tröpfchen, die er für das mit Sprozen- 

 tiger Salzsäure extrahierte Pigment der J-athraea hält. 



MüBius konnte feststellen, daß der braune Farbstoff der Vicia-Faba- 

 Blüten mit keinem bekannten identifizierbar sei. Er gab ihm daher einen 

 Namen : Anthophäin. Die Reaktionen des Körpers sind nicht charakteristisch. 



SCHLOCKOW hat bei Oncidium sphacelatum chromatophorenähnliche 

 Gebilde beobachtet , deren Verhalten gegen verschiedene gebräuchliche 

 Reagentien studiert wurde. Die Natur des Farbstoffes ist noch unauf- 

 geklärt. — Glan beschreibt den Farbstoff der schwarzen Malve. 



Farbstoffe in Samen. Krömer untersuchte die von Tschirch in 

 den Kaffeebohnen bemerkten .,Chromatophoren", und erkannte sie als 

 Farbstoffkristalle. Schröttek beschreibt den Farbstoff des Arillus von 

 Afzelia und rechnet ihn vorläufig zu den Lipochromen, wahrscheinlich liegt 

 ein Karotin vor. Sehr interessant ist die Beobachtung, daß im Ravenala- 

 arillus aller Wahrscheinlichkeit nach Berlinerblau die Färbung besorgt, 

 was mit dem großen Eisengehalt gut stimmt. Indigblau ist der Farb- 

 stoff' jedenfalls nicht. Gestützt wird Schrötters Ansicht auch dadurch, 

 daß die Ravenalasamen wie das Berlinerblau bei Sauerstoffentzug, z. B. 

 beim Untertauchen unter Wasser , grünlich bis farblos werden und , an 

 die Luft gebracht, sich wieder bläuen. 



d) Anthokyan. 



Auch bei diesem Farbstoffe kann ich mich kurz fassen, da eine 

 umfangreiche Literaturzusammenstellung im Vereine mit eigenen Be- 

 obachtungen von BuscALiONi und Traveuso erst in der jüngsten Zeit 

 veröffentlicht worden ist. Überdies findet sich in der Botanischen 

 Zeitung eine Arbeit von Molisch, worin auf die wichtigsten Arbeiten 

 eingegangen und von der Kristallisation dieses solange jedem Kristal- 

 lisationsversuche widerstrebenden Stoftes berichtet wird. 



Es hat sich ergeben , daß man mit dem Worte „Aiitliokyan" 

 eine große Gruppe von Stoffen bezeichnet, die eigentlich wesentlich 

 voneinander verschieden sind, so daß man, Avie man einst von „Karo- 

 tin", jetzt von „Karotinen", auch von Antliokyanen zu reden sicli 

 genötigt sieht. Das neue Reagens , das Buscalioni und Pollacci 

 angegeben liaben , möclite icli in seiner Güte vorläufig anzw^eifeln 




XXII, 2. Ricliter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 237 



und erst die Frage aufwerfen, ob Nikotin kein alkalisch reagierender 

 Körper ist. Ist er das, dann ist jene Grün-, Blau- oder Gelbfärbung, 

 die man nach Angabe der beiden Autoren mit verdünntem Nikotin 

 bei Anthokyangehalt erzielt , einfach die Indikatorfarbe des Stoffes 

 für geringe oder größere Alkalescenz. 



Chemische Natur und Auftreten des Anthokyans im 

 Zellsafte. In dieser Richtung verdanken vvir Ovehton wertvolle Mit- 

 teilungen. Er wies eine Proportionalität nach zwischen dem Zucker- und 

 Anthokyangehalte der Pflanzen. Dies spricht für die Glykosidnatur des 

 Anthokyans, wie sie schon Weigert angenommen hat. 



Außerdem aber scheint auch ein Gerbstoffkomplex im Anthokyan 

 vorhanden zu sein, wofür man vornehmlicii die Parallele, die zwischen 

 dem Auftreten anthokyanhaltiger und Gerbstoffzellen in der Pflanze be- 

 steht, dann ihr Verhalten gegen Methylenblau, Kaliurabichromat, Koffein 

 und Antipyrin anführen könnte. Man kommt durch die Annahme einer 

 Glykosid-Gerbstoffverbindung über diese .Schwierigkeit am besten hinweg. 

 Ich möchte darauf aufmerksam machen, daß heute, wo Lidforss' und 

 Möllers Arbeiten über Glykoside und Gerbstoffe vorliegen, welche die 

 Unmöglichkeit, sie heute mikrochemisch zu scheiden, unzweifelhaft nach- 

 weisen, Meinungsverschiedenheiten zwischen den Forschern auf diesem Gebiete 

 ziemlich bedeutungslos erscheinen. Erst, wenn es gelingen sollte, ein ein- 

 deutiges Reagens für Glykoside oder Gerbstoffe zu linden, wird dieser 

 Frage neuerdings mit Aussicht auf Erfolg näher getreten werden können. 

 Man vergleiche die beiden Kapitel: „Gerbstoffe" und „Glykoside". 



7. Gerbstoffe. 



Nachweis. -Bei der Behandlung der. Gerbstoffreaktion gehört 

 in den Vordergrund des Interesses die Lidforss sehe Arbeit „Über 

 die Wirkungssphäre der Glykose- und der Gerbstoff- Reagentien". 

 Nachdem Lidforss gezeigt hat , daß Tannin mit Eisenchlorid eine 

 Grünfärbung gibt, wenn man einige Kriställehen Zitronensäure zu- 

 setzt , kann man von der alten Einteilung in eisenbläuende und 

 eisengrünende Gerbstoffe füglich absehen. Maßgebend werden immer 

 die begleitenden Umstände bleiben, unter denen man die Gerbstoff- 

 probe vollzieht. Auch sonst noch zeitigte die Lidforss sehe Arbeit 

 beachtenswerte Ergebnisse : Es ist unmöglich Glykosen , Glykoside 

 und Gerbstoffe scharf zu trennen. Mit FEHLiNoscher Lösung ist dabei 

 zu keinem Ergebnisse zu gelangen, da es auch viele Stoffe gibt, die 

 weder Glykosen noch Glykoside sind und doch die FEHLiNosche 

 Lösung reduzieren. Noch größer wird die Verwirrung, da viele 

 „Gerbstoffe" die Membranreaktioneu beeinÜusseu und Proteinreaktionen 




238 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



geben. Der Hilflosigkeit, in der man sich befindet, bester Ausdruck 

 ist wohl die Redeweise: „Es ist ein Gerbstoff". Zum Schlüsse 

 empfiehlt Lidforss eine alkoholische Kupferlösung statt der Fehling- 

 schen, da man bei deren Anwendung lokalisierte Fällungen erhalte, 

 auch extrahiere sie Nicht -Glykosen und belasse Glykosen in ihren 

 Zellen. Man beachte auch die von Weigert und neuerlich von 

 OvERTON vertretene Ansicht von der Glykosid -Gerbstotinatur des 

 Authokyans (vgl. dieses). 



Von nicht geringerem Interesse ist der Befund Möllers von 

 dem Gelingen der LiNorschen Phloroglucinprobe mit gerbstoft'haltigen 

 Zellen. Er konnte direkt durch geeignete Behandlung die Gerbstoff- 

 probe mit Eisenchlorid in die Rotfärbung mit Vanillin-Salzsäure über- 

 fuhren. Ich habe bereits in dem Kapitel „Phloroglucin" eingehender 

 diese Arbeit besprochen. Vor Lidforss hat aucli Moore eine ähn- 

 liche Untersuchung durchgeführt und Büttner die Gerbstoffreak- 

 tionen in der lebenden Pflanzenwelt eingehend untersucht und dabei 

 festgestellt, daß außer des von Pfeffer empfohlenen Methylenblaus 

 Eisensalze allein die Fähigkeit des zuverlässigen Gerbstoffnachweises 

 in der lebenden Zelle besitzen und dabei der Probe eine relativ große 

 Empfindlichkeit verleihen. Die Salze wurden in Lösungen von 0*02 

 bis 0'2 Prozent in Brunnenwasser verwendet. Übrigens scheint die 

 von Berthold angegebene Methode der Injektion von Geweben mit 

 konzentrierter Kaliumbichromatlösung unter der Luftpumpe behufs 

 Gerbstoffnachweises für viele Zwecke nicht unvorteilhaft zu sein. Die 

 Konservierung erfolgt in konzentriertem oder TOprozentigem Glyzerin. 

 Klercker empfiehlt zur Herstellung von Dauerpräparaten gerbstoft- 

 haltiger Objekte sie in Flejimings Chromosmiumsäure oder in ein 

 Gemisch von einem Teil Pikrinschwefelsäure und einem Teil 5pro- 

 zentiger Kaliumbichromatlösung oder in ein Gemisch von einem Teil 

 Pikrinschwefelsäure und einem Teil konzentrierter Kupferacetatlösung 

 zu legen und sonst wie üblich zu verfahren. Eine vergleichende 

 Studie über den Nachweis der Oxycarbon-, Gallus- und Gerbsäure 

 rührt noch von Marpmann her. 



Beim Rückblicke auf die umfassenden Arbeiten über Gerbstoft"- 

 nachweis haben wir als eines der Hauptresultate die Unmöglichkeit 

 erkannt, Gerbstoffe von Glykosiden und Glykosen scharf zu unter- 

 scheiden. Es mußte daher als ein Fortschritt betrachtet werden, 

 als neuerdings Goius als bestes Reagens auf Glykoside das von 

 Sonnenschein erklärte, das auf der Einwirkung eisenhaltiger Salpeter- 

 säure und Ammoniak auf glykosidhaltige Zellen beruht. Leider hat 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 239 



Cazzanis Mitteilung': „Osservazioni critiche sopra alcune ricerclie 

 deU'esciüina eseguite dal Dott. A. Goris" diese Hoffnung rasch zer- 

 stört. Man kann nämlich in vitro mit Tanninlösung zeigen , daß 

 bei Behandlung mit Salpetersäure und Ammoniak dieselbe Rotfärbung 

 auftritt, wie sie von Sonnenschein für Äsculin angegeben worden 

 ist. Auch wird die Reaktion durch Eisenzufuhr nicht zuverlässiger, 

 wie GoRis behauptet hatte. 



Somit sind wir bezüglich der eindeutigen Gerbstoffreaktionen 

 wieder beim Alten : Es gibt auch heute noch kein Reagens, das man 

 als spezifisch für Gerbstoffe ansehen könnte. 



Anderseits hat sich die Zahl der Gerbstoffreagentien wieder 

 um eines vermehrt, von dem man freilich noch nicht den Um- 

 fang seines Reaktionsgebietes genau abgegrenzt hat. In seinem 

 Büchlein über Milchsaft und Schleimsaft erwähnt Molisch, daß gerb- 

 stoft'haltige Milchsäfte , mit Kalilauge erwärmt , sich rot bis blau- 

 violett färben. Brenner hat nun, offenbar ohne Kenntnis von der 

 erwähnten Beobachtung, diese Reaktion nochmals für Idioblasten von 

 Fettpflanzen beschrieben ; er teilt mit, daß Kalilauge die Idioblasten 

 der unter der Epidermis gelegenen Zellschichte bläut. Natronlauge 

 gibt die gleiche, Chlorammonium und Borax geben jedoch keine 

 Reaktion. Bei manchen Zellen gleicher Art entstehe ein dunkel- 

 brauner Niederschlag, der auf Gerbstoff" deute. Der blau gefärbte 

 Körper gebe dagegen Konkretionen und schließlich tiefblaue Klumpen. 

 Brenner hält deshalb diesen sich bläuenden Körper für etwas anderes 

 und glaubt, weil auch gewisse „Eiweißreaktionen" mit seinen Idio- 

 blasten gelingen, eine neue Ei weißr eaktion beschrieben zu haben. 

 Wenn man aber in Betracht zieht, daß Gerbstoftzellen bei Fettpflanzen 

 lange bekannt sind, und daß Gerbstoffe auch mit gewissen Eiweiß- 

 reagentien Färbungen liefern, und daß endlich Molisch für Kalilauge 

 die Fähigkeit , Gerbstoffe blau zu färben , erwiesen hat , darf man 

 wohl Brenner als den zweiten Entdecker der besprochenen Gerb- 

 stoffprobe bezeichnen. 



Es scheint übrigens auch Solla bei den Idioblasten des Johannis- 

 brotes die gleiche Reaktion beobachtet zu haben , ohne ihr damals 

 noch die richtige Deutung geben zu können. 



Schließlich seien noch Maneas rntersuchungen „Sur les acides 

 gallotannique et digallique" erwähnt. 



Vorkommen. Die sozusagen unendlicli weite Verbreitung der Gerb- 

 stoffe macht es erklärlich , daß nur interessantere Funde Erwähnung' 

 finden können. So haben Heckel und Schlag denhauffen bis 80 Prozent 




240 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



Gallusgerbsäure bei der Myrtacee Spermolepis gummifera nachgewiesen, 

 auch scheinen sie hier ein Gerbstoffharz entdeckt zu haben. Sie halten die 

 harzartigen Überzüge gewisser Blattknospen der Chinagerbsäure für sehr 

 nahe verwandt. Wallin fand bei Bromeliaceen-Blättern in den Zellen der 

 Gefäßbündelscheiden Tröpfchen einer gerbstoflfähnlichen, vermutlich einer 

 oxyaromatischen Substanz. Molisch beobachtete in den Cj^stolithen der 

 Acanthaceen einen Gerbstoff, der sich unter den Keaktionsbedingungen 

 grün färbte, um nachher rot zu werden, was auf Eisenoxydhydratbildung 

 durch die Wirkung des Calciumkarbonats der Cystolithen zurückzuführen 

 ist. Nach Solla zeigen die Johannisbrotidioblasten Gerbstoffreaktion. 

 Busse fand in den Gerbstoffschläuchen des Rindenparenchyms von Abies 

 alba in einem ganz bestimmten Entwicklungszustand einen eisenbläuenden 

 Gerbstoff' von körniger Beschaffenheit, außerdem öltropfenähnliche Körper, 

 die sich als schwach gerbstofthaltig erwiesen. Die Doppelfärbung mit Häma- 

 toxylln-Jodgrün ließ dieGerbstoff'zellen grün, das Meristem violett erscheinen. 

 Auch bei Pilzen und Moosen sind Gerbstoffe nicht selten, vgl. Naumann 

 „Über den Gerbstoff der Pilze", Czapek „Zur Chemie der Zellmembranen 

 bei Laub- und Lebermoosen", Kindermann „Über das sogenannte Bluten 

 der Fruchtkörper von Stereum sanguinolentura Fries", Küster „Die Ül- 

 körper der Lebermoose und ihr Verhältnis zu den Elaioplasten". Solche 

 GerbstoftVorkommen pflegen in der Regel störend für gewisse beabsichtigte 

 z. B. Membranreaktionen zu sein (vgl. Membran). Einen solchen „störenden" 

 Gerbstoff, der die RACiBORSKische Leptominprobe verhindert, beschrieb 

 Hunger in seiner Arbeit „Über die reduzierenden Körper der Oxyde- und 

 Peroxydasereaktion". Der Sitz dieses Gerbstoffes ist im Korkgewebe, Ex- 

 traktion mit 80prozentigem Alkohol macht auch in dieser Gewebeart die 

 Leptominprobe möglich. Weitere Vorkommen von Gerbstoffen wurden be- 

 schrieben : von Molisch in Milchsäften, von Brenner bei Fettpflanzen von 

 TiCHOMiROW bei intrazellularen Einschlüssen gewisser Früchte etc. 



Alkaloide. 



lu der richtigen Erkenntnis , daß die sogenannten Alkaloid- 

 Gruppenreaktioneu nur unter ganz besonderen Umständen verwert- 

 bare Resultate liefern, hat man den Speziaireaktionen besondere Auf- 

 merksamkeit zugewendet. Das prägt sich denn auch durchwegs in 

 der neueren Literatur aus. So hat Istvanffi dem Nachweis des 

 Capsaicins eine Arbeit gewidmet. Zum Nachweis des Stoffes verwendet 

 er Kalilauge, Salpeter-, Schwefelsäure, Jodkalium und Salzsäure. 

 Wegen Mangels gut ausgebildeter Chromatophoren hält er unreife 

 Früchte für besonders geeignet zum Capsaicinnachweis. Rosoll arbei- 

 tete über den mikrochemischen Nachweis des Coniins in den vegetabi- 

 lischen Geweben, Guerin über den des Anagyrins und Cytisins, 

 DE Toni über den des Nikotins. Belzung untersuchte das Xantliin, 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Milcrochemie. 241 



dessen Derivate Wevre, Schoorl wie Wevre das Atropin, Starke 

 das Solanin und Rüssel das Taxin. 



Auch sieht man vielfacli die Tendenz auftreten, gewisse Pflanzeu- 

 familien, die durcli ihren Alkaloidgehalt bekannt sind, nach dieser 

 Richtung hin monographisch zu behandehi. So bilden die Solana- 

 ceenalkaloide den Gegenstand einer Bearbeitung von Molle, die der 

 Loganiaceen seitens Elfstrand, die der Ranunculaceen seitens Vander- 

 LiNDEN und eine Monographie eigener Art bildet die der Samen- 

 alkoide von Clautriau, der auch gemeinsam mit Errera über die 

 lokalisierte Eällung der Alkaloide wertvolle Mitteilungen machte. 

 Endlich haben Barth, Siim -Jensex, Hedebrand und Marpmann vom 

 pharmazeutischen Standpunkte aus der Alkaloidfrage größere Auf- 

 merksamkeit geschenkt. Eine physiologische Monographie verfaßte an 

 der Hand mikrochemischer Untersuchungen J. Feldhaus. 



Die vergleichenden Reaktionsstudien haben nach Erreka (Di- 

 stinction des alcaloides etc.) ihre Vertreter gefunden in G. Clautriau 

 (Nature et signification des alcaloides vegetaux) und E. Pozzi-Essot 

 (Coutributions a la recherche microchimique des alcaloides). 



De Wildeman und Molle scheinen bei Orchideen bezw. bei Clivia 

 miniata neue Alkaloide gefunden zu haben. Molisch kommt auch 

 bei seiner Monographie des Milch- und Schleimsaftes auf die Alkaloide 

 zu sprechen. Man beachte auch Th. Weevers und C. J. Weevers 

 DE Graaffs Arbeit „Investigations of some xanthine derivatives 

 in connections with the internal mutation of plants". Neu er- 

 scheint Nestlers Einführung der Sublimation für Cumarin und Thein, 

 über dessen Lokalisation in der Pflanze wir Suzuki Mitteilungen 

 verdanken. 



Aus den in der Übersicht angeführten Arbeiten mag das Folgende 

 hervorgehoben sein : 



Nach Molle gibt es bislang fünf gut charakterisierte Alkaloide der 

 Solanaceen: das Atropin, Hyoscyamin, Hyoscin, Nikotin, Solanin. Als 

 gemeinsame Reagentien für ün-en mikrochemischen Nachweis gibt er an: 

 Jodjodkalium. Phosphormolybdänsäure, Kaliumquecksilberjodid, Pikrinsäure, 

 Tannin, Queeksilbercldorür, Platin- und (ioldchlurid. Es ist dabei stets not- 

 wendig, mehrere Proben für ein Alkaloid zu machen, da es keine für ein 

 Alkaloid allein charakteristische Reaktion gibt. Auch muß immer mit der 

 schon von Zimmermann als sehr naheliegend hervorgehobenen möglichen 

 Verwechslung mit Eiweißreaktionen gerechnet werden. Immerhin erweist 

 sich die Methode von Errera als brauchbar , um einem Irrtume vor- 

 zubeugen. Legt man die Schnitte vor der Reaktion in Weinsäurealkohol 

 (1 g kristallisierte Weinsäure, gelöst in 20 cc abs. Alkohol) und unterbleibt 

 die Reaktion mit Phosphormolybdänsäure, so deutet dies auf ein Alkaloid, 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 2. 16 




242 Richter: Die Fortscliritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



— andernfalls kann eine Proteinsubstanz vorliegen. Auch Elfstrand hielt 

 sich an Erreras Methoden. Er findet für Strychnin am besten Mandelin s 

 Reagens geeignet, Brucin wird damit gelbrot. Auch Gelsemin und Gelse- 

 minin können damit nachgewiesen werden, desgleichen Coniin Für Curarin 

 eignet sich aber am besten Vanidinschwefelsäure. — Um im reiten Samen 

 von Datura Stramonium das Alkaloid nachzuweisen, läßt Clautriau Jod- 

 jodkalium zu einem trockenen Schnitte langsam zufließen. Alsbald füllen 

 sich die Schichten der Samenschale mit einem massigen tiefbraunen Nieder- 

 schlage, der bisweilen kristallinisch wird. Am allgemeinsten anwendbar 

 ist nach ihm Jodjod-Kalium. Nach Barth sind für den mikrochemischen 

 Nachweis von Alkaloiden am allerwenigsten die flüssigen Reagentien ge- 

 eignet, dagegen sehr gut die gasförmigen wie Jod-, Brom- und Salzsäure- 

 dampf. Bettet man dann auch noch in reinem weißen Paraffinöl ein, so 

 erhält man vorzügliche Präparate lokalisierter Fällung. Einen mittleren 

 Wert besitzen für mikrochemische Zwecke die Färbungen, doch gibt Vanidin- 

 schwefelsäure mit Strychnin ganz brauchbare und die nachträglichen Fär- 

 bungen wie die mit Rhodankalium und verdünnter Eisenchloridlösung ganz 

 prachtvolle Resultate. Eine Bestätigung haben Barths Untersuchungen 

 durch Shm- Jensen erfahren, von dem außerdem Jodjodkalium und Kalium- 

 wismutjodid neben dem von ihm eingeführten Bromkalium besonders em- 

 pfohlen werden. Das Bromkalium übertreffe Bromwasser um das drei- bis 

 vierfache an Empfindlichkeit und hätte den Vorzug vorzüglicher Loka- 

 lisation für sich. Von hervorragender Bedeutung für das Gelingen der 

 Reaktion sei der von Sum- Jensen verwendete Wachsabschluß des Deck- 

 gläschens. 



Daß übrigens die oben von Barth als ziemlich untergeordnet erklärten 

 Farbenreaktionen unter gewissen Umständen ganz ausgezeichnete Resultate 

 zu liefern vermögen, beweisen Rüssels Untersuchungen über das Taxin, 

 in denen sich Mandelin s Reagens und Schwefelsäure mit Ammoniumvanadat 

 als höchst geeignet erwiesen haben, um das Taxin in lokalisierter hell- 

 roter Färbung sichtbar zu machen. 



Nach Molischs Angaben über Alkaloidnachweis läßt bei Milch- 

 säften lOprozentige Salzsäure den Milchsaft geradezu zu einem Kristallbrei 

 erstarren. 



Kristallisation. Belzitng gelang es, aus einem Extrakte von 

 Cicer arietinum-Keimlingen das Xanthin in undeutlich kristallinischer Form 

 darzustellen. 



Die beste Orientierung über die Versuchsanstellung bei Alkaloid- 

 reaktionen und die Unterscheidung der einzelnen Alkaloi'de voneinander 

 gibt wohl der Abschnitt (Pflanzenalkaloide) in Behrens' Anleitung zur 

 mikrochemischen Analyse der wichtigsten organischen Verbindungen. 3. H. 

 1896, p. 46—133. 



9. Eiweiß. 



Die bekannten Eiweißreaktionen unterzog Wevre einer neuer- 

 lichen eingehenden Überprüfung, deren Erfolg in übersichtlicher Weise 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Miicrochemie. 243 



in A. Zimmermanns Referat in dieser Zeitschrift Bd. XI, 1894, p. 407 

 bis 410, dargestellt ist. 



Hier sei nur erwähnt, daß auch von Wevre zur Fällung der Ei- 

 weißstoffe der absolute Alkohol, zur Extraktion der Alkaloide Erreeas 

 öprozentige Weinsäure in Alkohol am geeignetsten angesehen wird, 

 daß nach ihm unter allen Reagentien auf Eiweiß Jodjodkalium als 

 das empfindlichste und Eosin unter allen Farbstoffen als bestfärbender 

 gilt. Aus der Zahl der mikrochemischen Eiweißreaktionen sind die mit 

 Tannin, Goldchlorid, Salzsäure und Jorissens Reagenz auszuscheiden. 

 Damit erscheint auch Mesnards Mitteilung von der Viotettfärbung 

 von Eiweiß durch Salzsäure und das Rosawerden der Propeptone 

 durch das gleiche Reagens erledigt. Eine vergleichende Untersuchung 

 der Eiweiß- und Tj^rosinreaktionen rührt von Wurster her. 



Besondere Erwähnung verdient die Arbeit O'Briens über Ei- 

 weiß. O'Brien ist es gelungen, aus Weizenmehl künstliche Eiweiß- 

 kristalle zu erzeugen, indem er das in Kochsalzlösung gelöste Globulin 

 durch Alkohol fällte und den Niederschlag mit verdünntem Alkohol 

 auswusch, dann wieder in Salzsäure auflöste und von dieser Lösung 

 einen Tropfen auf dem Objektträger verdunsten ließ. Es bildeten 

 sich hexagonale Platten von Globulin. Tanninlösung diente zur Fixie- 

 rung. Übrigens hat ein Jahr vor O'Brien Molisch das Phykoerythrin 

 zur Kristallisierung gebracht hat, das sich als Eiweißstoff heraus- 

 stellte (vgl. Phykoerythrin). 



Als Eiweißreaktion wurde jüngst von Brenner die bei Sukku- 

 lenten auftretende Blaufärbung einiger Zellen durch Kalilauge ge- 

 deutet, da auch die RASPAiLsche Reaktion mit diesen Idioblasten 

 gelingt. Weil jedoch auch Gerbstoffe nach Lidforss Proteinreak- 

 tionen geben, und Brenner selbst von der deutlichen Reaktion mit 

 LiNDTSchem Reagens Mitteilung macht, das erst neuerdings von 

 Möller wieder auch als Gerbstoffreagens betont wurde , dürfte es 

 sich hier umsomehr, als Molisch bereits in seinem Milchsaftbüchlein 

 die Blaufärbung mit Kalilauge als Gerbstoffprobe angegeben hat, um 

 einen Gerbstoff handeln. 



Besondere Fälle von Eiweißproben führen Hartwich und Ikeda 

 au, von denen der erste bei Strophantus-Samen mit Schwefelsäure 

 allein proportional zu deren Verdünnung alle Farbentöne von Grün 

 über Rot nach Blau erhielt, der zweite in der Samenknospe von 

 Liliaceeu mit Fehlinc4S Lösung Biuret- Reaktion, aber keine Zucker- 

 probe bekam. 



Zum Schlüsse sei auf das von Tichomirow beobachtete Vor- 



16* 




244 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



kommen von Eiweiß in intrazellulären Einsclilüsseu der Datteln etc. 

 hingewiesen. 



Eiweißkristalle und Eiweißkristalloi'de. 1) Cy toplas ma 

 oder Zellsaft. Es ist eine allbekannte Tatsache, daß in den der 

 Periderraschichte der Kartoifelknolle unmittelbar anliegenden Zellschichten 

 prachtvolle würfelförmige Eiweißkristalle vorkommen. Heinricher konnte 

 ein massenhaftes Auftreten von Kristalloiden in den Laubtrieben von 

 Solanum tuberosum feststellen. Auch fand er derartige Gebilde außerhalb 

 des Zellkernes bei Lathraea squamaria. Bei Epiphyllum waren sogar ring- 

 förmige Kristalloi'de von Molisch beobachtet worden. Da Wakker einen 

 gleichen Befund nachher als neu beschrieb, wurde von Molisch die ge- 

 schichtliche Folge der diesbezüglichen Entdeckungen genau fixiert. 



Beim Nachweis der Eiweißkristalle und Kristalloide spielte stets 

 Zimmermanns Säurefuchsingemisch eine hervorragende Rolle, Huie ver- 

 weist demgegenüber auf Manns Fixierungsgemisch und auf ein von ihr 

 verwendetes Rezept , die angeblich beide den Vorzug verdienen. Nach 

 MoLLSCH finden sich Unmengen von Proteinkristallen im Milchsafte von 

 Musa chin., jeder von einer eigenen feinen Membran, von Molisch „Pro- 

 tei'noplasten" genannt, umgeben. Noll beschrieb geformte Proteiden im 

 Zellsafte von Derbesia. Eine eingehende Behandlung haben die Reaktionen 

 auf Prote'inkristalle erst jüngst wieder durch Milroy erfahren. 



2) Zellkern. A. Zimmermann hat mit seinen bekannten Färbe- 

 methoden eingehende Studien über das tinktionelle Verhalten der Zellkern- 

 kristalloide angestellt. Nach Auerbachs Nomenklatur muß man sie als 

 typisch erythrophil bezeichnen , soweit nach Fischer diese Bezeichnung 

 noch gelten darf. 



Neuerlich hat Molisch auch in den Blasenkernen, die er im Musa- 

 Milchsaft vorfand, oft mehrere Kristalle einer eiweißartigen Substanz fest- 

 stellen können. Sperlich macht mit Eiweißkristalloiden in den Zellkernen 

 der Haustorien von Melampyrum pratense und M. silvaticum bekannt, die 

 nach Zimmermann färbbar sind. 



Aleuron und seine Kristalle und Kristalloi'de. 



Da die Zahl der dauerhaften Kristalloidfärbungen nicht allzu zahl- 

 reich ist, scheint die Anführung einer neuen nicht überflüssig, so hat 

 Krasser Pikrinsäure - Eosin und Pikrin - Nigrosin als besonders vor- 

 teilhaft angeführt. Gram teilt neuerdings seine Erfahrungen mit 

 den gewöhülicheu Fixierungs- und Färbemethoden an den Protein- 

 körnern der Ölgewächssamen mit. Er hält Pfeffers Härtungsmethodc 

 mit Sublimatalkohol für unzweckmäßig. Oft sei dagegen Pfeffers 

 Natriumphosphat gut verwendbar. Dauerpräparate stelle mau am 

 besten nach Poulsens Methode her. Zur Färbung eigne sich besonders 

 Boraxweiustein. Hervorgehoben sei noch die Arbeit Reeds: „A study 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 24.') 



of tlie enzymesecreting cells in the seedlings of Zea Mays and Phoenix 

 dactilifera", in der er die Fixierungs- und Färbemethoden einer 

 eingehenden kritischen Nachprüfung unterzieht und findet, daß pro- 

 portional zur Säuremenge des Fixierungsmittels die Eiweißkörner 

 besser erhalten bleiben, und daß Manns Eosin-Toluidinblau-Methode 

 den übrigen Färbeverfahren vorzuziehen sei. Auch Manns Pikrin- 

 Sublimatlösung sei sehr empfehlenswert. 



Zum Einbetten von Aleuronkörnern werden gewöhnlich fette Ole 

 empfohlen. Winton fand nun bei seinen Untersuchungen über Hanf- 

 samen Terpentin für diese Zwecke besonders geeignet. 



Zum Schluß sei auf einen neuen Einschluß des Aleuronkorns 

 aufmerksam gemacht, dessen Entdeckung wir Meyer verdanken: Mit 

 Alkohol -Methylenblau -Schwefelsäure gelingt es nämlich über den 

 Globoiden Volutinkörner naclizuweisen. 



Eine eingehende Untersuchung über Aleuronkörner haben auch 

 TscHiRCH und Kritzler veröffentlicht, die im wesentlichen ergab, daß 

 die Aleuronkörner der untersuchten Pflanzen hauptsächlich aus Glo- 

 bulinen bestehen, ob sie auch Albumosen enthalten, ist derzeit noch 

 fraglich. Die Kristalloide bestehen mindestens aus zwei Globulinen. 

 Über die verschiedenen Lösungsverhältnisse der Stoffe sehe man die 

 Arbeit nach. 



Besondere ^^ o r k o m m e n von E i w e i ß k ö r n e r n und Eiweiß- 

 1 eisten. Eiweißkörner beobachtete Zimmermann bei Tradescantialeuko- 

 plasten („Leukosomen"). Mit Millon und mit Salpetersäure reagieren sie 

 ganz entschieden, und Öl, Stärke und Gerbstoff sind sie gewiß nicht. 



Für Eiweißleist^en hält Nestler die leistenförmigen Bildungen in den 

 Blasenzellen von Antithamnium Fluraula. — HECiLER wie Kohl sehen die 

 Cyanophycinkörner der Cyanophyceen für Eiweißkörper an. 



Phykoöry tlirin und Phykocyan. Schon Klein hat auf die 

 Tatsache aufmerksam gemacht, daß man durch Einlegen von Rhodophy- 

 ceen in Kochsalzlösungen oder Weingeist prachtvolle intensiv rotgefärbte 

 Kristalle erhalten kann , die nach Moliscii als „ P h y k o e r y t h r i n - 

 kristalloide" anzusehen sind. Hansen hat sich bemüht, eine Dar- 

 stellungsmethode des Phykoi'rytlirins zu ermittehu Als er eine wässerige 

 Lösung auf flachen Tellern in dünner Schicht bei 35" bis 40" eindampfte, 

 erhielt er in der Tat spröde Blättchen, die die ursprüngliche Farbe voll- 

 ständig bewahrt hatten, in Wasser aber unlösflch waren: daher soll das 

 Phykoerytlirin in den Chromatophoren als Eiweißverbindung vorhanden ge- 

 wesen und als solche ausgezogen worden sein. Außer bei Florideen fand 

 Hansen das Phykoerythrin auch bei Bryopsis disticha, wo Alkohol die 

 Kristallisation bewirkt, bei der Floridee Liagora genügt bereits mechani- 

 scher Druck dazu. Aus Taonia und Dictyota bereitete er sich mit destil- 

 flertem Wasser ein rotes Phykoerythrinextrakt. Auch Bruns hat öfters 




246 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrocheraie. XXII, 2. 



Phykoerythrinkristalle aufgefunden, wie bei Nemastoma cervicornis und 

 Wrangeha penicillata, bei denen ihm durch konzentrierte Kochsalzlösung-, 

 einprozentiges FonuaHn die KristaUisation gelang. 



Die eingehendste Untersuchung, die über die vermutete Eiweißnatur 

 dieser Kristalle gar keine Zweifel mehr läßt, ist IVIolischs Abhandlung 

 über „Das Phykoerythrin". Gibt man eine lebende Rotalge in lOprozen- 

 tiges Natriumchlorid, dem einige Tropfen Schwefelkohlenstoff zugesetzt 

 sind, so kristallisieren bexagonale Kristalle des Phykoerythrins mit geringer 

 Doppelbrechung und ohne Pleochroismus aus. Sie sind unlöslich in Al- 

 kohol, Äther, Benzol, Schwefelkohlenstoff, Oliven- und Terpentinöl. Nur 

 anfangs sind sie in Wasser h'ishch, später nicht mehr. Die Eiweißreak- 

 tionen gelingen alle. Durch plötzliches Erhitzen auf 100^ C. werden sie 

 unlöslich, ebenso nach Behandlung mit Alkohol, sie sind durch Kochsalz, 

 Ammonium- und Magnesiumsulfat aussalzbar. — Durch Lösen in destil- 

 liertem Wasser bei 35*' C. im Dunkeln, Filtrieren, Fällen mit Alkohol, wieder 

 Lösen usw. und Abdampfenlassen der reinen wässerigen Lösung auf dem 

 Objekträger gelingt auch die Kristallisation außerhalb der Pflanze. 



Nach Molisch kann der Ausdruck Cramers Rhodosperminkristalle 

 wegfallen: sie sind entweder Phykoerythrin-, oder, wenn farblos, Proteins- 

 kristalle; vgl. auch im Lit. A'erz. die einschl. Arbeit Nolls. 



Ebenso gelang es Moliscii aus der durch Extraktion von Oscillaria 

 leptotricha im Dunkeln erhaltenen Farbstofflösung durch Aussalzen mit 

 Chlornatrium-, Chlorkalium- und Magnesiumsulfat das Phykocyan zur 

 Kristallisation zu bringen. Nach den Untersuchungen von Becke dürften 

 die Kristalle dem monoklinen Systeme angehören und die Kombination 

 eines Prismas mit einem Klinodoma darstellen. Sie sind prachtvoll indig- 

 blau, in Wasser quellbar, löslich in Wasser, Glyzerin, verdünnten Alkalien, 

 unlöslich in Alkohol, Äther, Benzol, Schwefelkohlenstoff" und verdünnten 

 Säuren. Mit Salpetersäure (1 Vol. Säure + 1 Vol. Wasser) werden die Kri- 

 stalle unter Abrundung schön karminrot, dann gelb, eine Farbe, die bei 

 Zusatz von Ammoniak sehr intensiv wird. Millons Reagens färbt pur- 

 pur-, dann ziegelrot. Brorawasser entfärbt. Auch die farblosen Kristalle 

 geben die Eiweißprobe. Jod, Eosin, Fuchsin, Gentianaviolett werden gierig 

 aufgenommen. Bei Berücksichtigung aller dieser Eigenschaften ist es 

 zweifellos , daß das Phykocyan ein kristallisierbarer Eiweißkörper ist. — 

 Später fand Molisch in der konzentrierten Essigsäure ein vorzügliches 

 Mittel, sich über die Verteilung des Phykocyans im Innern der Zellen zu 

 orientieren. Eisessig entzieht nämlich den Oscillarien das Chlorophyll und 

 den gelben Farbstoff, und so bleibt das Phykocyan allein in ihnen übrig. 



Pyrenoide. Nach Mitrophanow erweist sich zur Färbung von 

 Diatomeenp3'renoiden als sehr zweckmäßig Rubin -Orange -Methylgrün- 

 gemisch. Zacharias empfiehlt ganz allgemein zur Pyrenoidfärbung essig- 

 saure Glaubersalzlösung, Fuchsin S und für Euglenen soll nach Dangeard 

 Rubin S und Coccinin sehr gut sein. Gegen energische Mittel wie das 

 MiLLONsche Reagens zeigt sich die sog. „Pyrenoidmembran" besonders 

 widerstandsfähig; da die Chromatophoren bei dieser Behandlung ganz oder 

 teilweise zerstört werden, treten, wie Boubier gefunden hat, die Pyrenoide 

 sehr deutlich hervor. Das Kristalloid ist von einer hyalinen Zone umgeben. 




XXII, 2. Hiebt er: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 247 



die durch Lösung der Stärke zustande koiunit, von der sich mit deutliehen 

 doppelten Konturen die Pyrenoidhaut abhebt. Die gleiche Widerstandsfähig- 

 keit gegen Millon zeigen auch die schon von Nägeli bei Spirogyra beob- 

 achteten Leisten, die den Namen „Pyrenoidbänder" erhalten haben. Außer 

 bei Spirogyra wurden sie auch bei Mougeotia scalaris nachgewiesen. 



D a s Löw-BoKORN Ysche Reagens auf „ a k t i v e s A 1 b u m i n " . Eine 

 Art Abschluß ihrer Untersuchungen über aktives Albumim stellt Löws und 

 BoKORXYs Arbeit „Zur Chemie der Proteosomen" dar, in der sie die Unter- 

 schiede zwischen aktivem und passivem Eiweiß angeben. 



Aktives gerinnt mit lüprozentigem Alkohol, passives nicht. 



„ wird mit verdünntem Ammoniak gebunden, passives ist dem- 

 gegenüber indifferent. 

 „ ist unlöslich in konzentriertem Ammoniak, koaguliertes löst 



sich darin. 

 „ reduziert alkoholische Silberlösung, passives nicht. 

 „ verliert durch verdünnte Säuren dieses Reduktionsvermögen 

 sehr rasch. 

 Daß Lüw-BoKORNYS Hypothese eine vielfache Berichtigung erfahren 

 hat, ist schon aus Zimmermanns Mikrotechnik, pag. 237, ersichtlich, nur soll 

 noch Klemms Befunden in dieser Richtung gedacht sein. Die von Löw- 

 BoKORXY angegebene Silberausscheidung hätte darnacli mit dem hypothe- 

 tischen aktiven Albumin gar nichts zu tun, sondern könne jederzeit mit 

 Gerbsäure, Koffein oder Ammoniak und Silberlösung nachgeahmt werden. 

 Lecithin. B. v. Bittö, Estimation of lecithin in plants. Diese Z. 

 1896, Bd. XIII, pag. 556 und Stoklasa „Lecithin in der Pflanze." 



10. Kern, Nukleiii, Plastiu, Volutiu etc. 



Als Vorläufer seines Biiclies über „Die Morphologie und Pjiysio- 

 logie des pflanzlichen Zellkernes" könnte man die diesbezüglichen Aus- 

 führungen Zimmermanns in seiner Mikrotechnik bezeichnen. Mit dem 

 Erscheinen des oben genannten Buches war endlich die Möglichkeit 

 gegeben , die unendlich angeschwollene Kernliteratur zu überblicken 

 und an der Hand der Ausführungen dieses geübten Mikrotechnikers 

 die notwendig gewordene Sichtung durchzuführen. Seit 1896, dem 

 Erscheinungsjahre dieses Werkes , haben sich die Kenntnisse über 

 den Kern bedeutend vermehrt und sind auch in mehr als einer 

 Richtung bedeutend vertieft worden. Weiterhin liat sich Kürnicke 

 der großen Arbeit einer kritischen Behandlung der neuereu Literatur 

 über den Kern unterzogen, wobei er die Abhandlungen bis 1903 ein- 

 schließlich berücksichtigt hat. 



Wenn ich trotz der Literaturzusammenstellung Körnicke s, die 

 mit der Anführung der Arbeiten ja gleichzeitig das Mittel an die 




248 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



Hand gibt, sich in diesen über die verwendeten niikrochemiscli- 

 mikrotechnischen Methoden zu orientieren, nocii einiges erwähne, so 

 geschieht dies lediglich deshalb , um anf besonders bewährte , neu 

 eingeführte Untersuchungsarten hinzuweisen, oder Mikrochemisches 

 über den Kern wieder aufzufrischen oder , um an Werke zu er- 

 innern, die als grundlegend fiir die zu verwendenden Methoden zu 

 betrachten sind. 



So hat V. Wasielewski die verschiedenen Fixierungsmittel genau 

 überprüft und dabei das Brauchbare vom Unbrauchbaren zu sondern 

 sich bemüht. Eine derartige Untersuchung war gerade in dem Er- 

 scheinungsjahre am Platze, da A. Fischer in seinem Buche „Fixierung, 

 Färbung und Bau des Protoplasmas" zu einer Schlußfolgerung kommt, 

 die geeignet erscheint, die ganze Mikrotechnik in Frage zu stellen. 

 „Die neuere Zeliforschung, besonders die Mitosenlehre, ist genau be- 

 trachtet, nichts anderes als die Untersuchung ausgewählter Fällungs- 

 bilder nach Fixierung mit Flemming scher und Hermann scher Lösung, 

 ergänzt durch einige andere Mittel , deren Erfolge aber auch nach 

 den Bildern der genannten Gemische zurechtgestutzt werden.'" 



Ist nun zwar mit diesem vernichtenden Urteile über die Be- 

 strebungen der Mikrotechniker etwas über das Ziel hinausgeschossen, 

 so kann man es dennoch begreifen , wenn man in Fischers Buclie 

 nach dessen logischen Prämissen Umschau hält. Eigentlich genügt 

 es, bloß die Abbildungen p. 37, 4.5, 210 und besonders p. 222 zu 

 betrachten, und man wird eine ganze Menge bei den verschiedensten 

 Organismen „neu entdeckter Granula" als Niederschlagsbestandteile 

 wieder erkennen. Ein Blick auf diese Bilder und eine Unzahl auf- 

 sehenerregende Plasmastrukturen stellen sich als bloße Kunstprodukte 

 dar. In den engeren Paihmen dieses Referates gehören Kapitel III, 

 das sich mit der Fällungsform einzelner, Kapitel IV, das sich mit 

 der von mehreren Eiweißkörpern in Mischung beschäftigt, und Ka- 

 pitel V, das auf den Nachweis der Albumose und der Nukleinsäure 

 genauer eingeht. — Durch seine Beobachtungen fand sich Fischer 

 veranlaßt, der physikalischen Farbstofftheorie das Wort zu reden, 

 der sich Miehe, Arnoldi und andere Autoren angeschlossen haben. 



Dagegen scheint Zacharias noch an der Möglichkeit festzuhalten, 

 Nuklein als solches durch Farbstoffreagentien festzustellen , um auf 

 seine Verbreitung zu schließen. Wenigstens spricht die Anführung 

 von Fuchsin S in essigsaurem Glaubersalz zur Unterscheidung nuklein- 

 haltiger von nukleinfreien Teilen der Spermatozoon der Characeen 

 und gewisser Tiere viel für ein Beharren bei seinen früheren An- 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 249 



schauungeii. Dagegen sclieinen die von ihm bei fixiertem Materiale 

 im Kernraume beobachteten Fasern Kunstprodukte im Sinne Fischkks 

 zu sein. 



Ein angeblich sehr gtites mikrochemisches Reagens auf Nuklein, 

 das sicli an die von Zacharias empfohlenen anschlösse , ist nach 

 V. WissELiNGii öOprozentige Chromsäure. Gegen diese ist das Kern- 

 geriist sehr lange widerstandsfähig, löst sich aber später wie das 

 Plasma und läßt die Nukleolen übrig , die nun für sich wieder ein 

 Fadengerüst zeigen, das noch bleibt, wenn die Wand bereits in 

 Lösung gegangen ist. Auch Glyzerin läßt sich in ähnlicher Weise 

 verwenden. Interessant ist auch Meyers Anschauung von der Natur, 

 des von ihm entdeckten und beschriebenen Volutins als Nuklei'n- 

 körper. 



Eigens über das Vorkommen des Nukle'ins zu sprechen, dessen 

 große Verbreitung bekannt ist, scheint unpassend, darum mag dies- 

 bezüglich in Körnicke s Sammelreferat nachgesehen werden. 



Volutin und die metachromatischen Körperchen. Güiller- 

 MoxD beschreibt leicht färbbare Kcu-perchen, die als metachromatisch be- 

 zeichnet wurden. Zu ihrer Darstellung empfiehlt er Pikroformol und Foly- 

 chromblau. Villard hat bei Zoochlorellen diese metachromatischen Körnchen 

 gleichfalls nachgewiesen. Nach A. Meyer sind die von ihm beschriebenen 

 Volutine identisch mit Guillerjioxds metachromatischen Körperchen, es 

 soll eine Nukleinverbindung vorUegen. Ebenso hält Meyer die von Kohl 

 bei Schizophyceen beobachteten „Zentralkörner" für Volutin und die Hax- 

 steex sehen „Fukosankörner" der Braunalgen enthalten es nach seiner 

 Meinung wenigstens zum Teil. Am klarsten differenziert sich das Volutin 

 mit Meyers Formol -Methylenblau -Schwefelsäure -Methode, die auf der 

 Wirkung der Schwefelsäure beruht, alle übrigen eventuell gefärbten Zell- 

 bestandteile zu entfärben. Denn nur das Volutin hält unter solchen Be- 

 dingungen die Farbe. 



Bei Pinnularia radiosa scheinen Volutinsphärite vorzukommen. Auch 

 macht es den Eindruck, als ob es mehrere Volutine gäbe. So fand Meyer 

 bei Mougeotia sp. einen Stotf, der in der lebenden Zelle mit Methylenblau 

 tiefblaue tropfenförmige Ausscheidungen lieferte: Meyers 1-Volutin; bei 

 Achlya Körner, die sich mit Methylenblau färben, quellen und sich in eine 

 leichtflüssige tiefblaue Lösung verwandeln: Meyers /S- Volutin. 



Plast in. Das von Reixke dargestellte Plastin, dessen Reinheit 

 übrigens von Low bestritten wurde, hat Zacharias mikrochemisch zu 

 charakterisieren versucht und die Ansicht ausgesprochen, daß es die 

 Grundsubstanz des Cytoplasmas sei. Er teilt nun neuerdings mit, daß auch 

 die von ihm im Kernraume beobachteten Spindelfasern in bestimmten Fällen 

 Plastin enthalten können. 




250 Kicliter: Die Fortschritte der botanisclien Mikrochemie. XXII, 2. 



11. Fermente und Enzyme. 



Myrosin. Guignard gibt konzentrierte Salzsäure, die auf 1 cc einen 

 Tropfen einer lOprozentigen wässrigen Orcinlösung enthält, als Reagens auf 

 uiyrosinhaltige Zellen an. Er stellte damit fest, daß die von HEiXRiCHer als 

 Eiweißidioblasten beschriebenen eigenartigen Zellen vieler Kruziferen Myrosin 

 enthalten. Spazier kommt nun bei seinen Untersuchungen „Über das Auf- 

 treten und die physiologische Bedeutung des Myrosins in der Pflanze" zu 

 der Anschauung, daß es in den vegetativen Organen stets in gelöster, in 

 ■ den Samen aber stets in körniger Form enthalten sei. Die Körnchen des 

 zweiten Vorkommens bezeichnet er als „Mja-osinkörner". Sie sollen den 

 Aleuronkörnern sehr ähnlich sehen, doch sind sie stets farblos, stark licht- 

 brechend und einschlußfrei, auch leicht löslich in Glyzerin und sehr leicht 

 löslich in Wasser. 



E m u 1 s i n k ö r n e r. Bei Amygdaleen-Saraen fand Spazier in den 

 Prokambialsträngen Körner, die er Emulsinkörner nennt. Auch bei ihnen 

 fehlen Einschlüsse völlig. Durch Guajakharz erzielte er in den Emulsin- 

 körnerzellen intensive Blaufärbung, weshalb er in ihnen den Sitz der Spal- 

 tung des Amygdalins vermutet. Somit tritt diese Guajakreaktion ergänzend 

 zu den von Guignard angegebenen mit Mielox und Kupfersulfat-Kalilauge. 



Diastase. Gibt man pflanzliche Objekte zunächst in eine alkoho- 

 lische dunkelbraune ätherfreie Lösung von Guajakharz und nach dem 

 Verdunsten des Alkohols in eine mehr oder weniger verdünnte Lösung- 

 von Wasserstoflsuperoxyd, so wird die mit Guajak durchtränkte gefällte 

 Diastase prächtig blau gefärbt und in Wasser unlösHch. Diese Reaktion 

 ist von Grüss eingeführt und ein Jahr darauf für Keimungsstudien ver- 

 bessert und als Diastasereaktion gedeutet worden. 



Leider gibt es eine ganze Anzahl anderer Substanzen, die sich sehr 

 ähnlich verhalten (vgl. Leptomin) und noch unsicherer wird die Reaktion 

 dadurch, daß es Stoffe gibt, die, trotzdem Diastase vorhanden ist, ihren 

 Nachweis unmöglich machen, z. B. Sauerstoffübertrager, Eiweiß und Gerb- 

 stoffe. Grüss hat nun mit seinem neuen Reagens zunächst festgestellt, daß 

 die Diastase nicht in die Masse des Kornes einzudringen vermag, sich 

 vielmehr bloß im bezw. in der unmittelbarsten Nähe des Lösungskanals 

 betindet. Auch zum Studium der Physiologie der Keimung sei es außer- 

 ordentlich verwendbar, wenn es sich um die Stärkekörner handle, ja auch 

 bei der Untersuchung der Wirkung diastatischer Fermente auf Zellhäute 

 leiste es vortreffliche Dienste. Eine zweckmäßige Kontrolle sei dabei durch 

 die Anwendung von Kongorot gegeben, das bloß die unangegriffenen Stellen 

 färbe und so auf rotem Grunde die farblosen Angriffsstellen deutlich hervor- 

 treten lasse. (Merkwürdig, daß sich Präparate von Mais gegen Kongorot 

 gerade umgekehrt verhalten.) 



Wie oben angedeutet, mußte es schließlich zu einer Auseinandersetzung 

 zwischen dem Entdecker der Diastase- und dem der Leptominreaktion 

 kommen. So hat denn auch Grüss auf Grund der Tatsache, daß von 

 ScHUCHARDT gelieferte Diastase mit frischer Guajaklösung befeuchtet und 

 dann in Wasserstoffsuperoxyd gegeben (Raciborskis Probe) eine Bläuung 




XXII, 2. Richter: Die Fortscliritte der botanischen I\likrocheiuie. 251 



zeigt, den Schluß gezogen, daß Raciborskis Leptomin lediglich kata- 

 lytisch wirkende Diastase sei. Die Antwort Raciborskis lautete dahin, 

 daß Grüs.s mit Leptomin verunreinigte Diastase von Schuuhardt erhalten 

 haben möge. 



Oxydasen und Peroxydasen. Das günstigste Material zum Nach- 

 weise oxydierender Enzyme im Körper höherer Pflanzen bildet nach Grüss 

 solches, das von Parasiten, wie der Mistel heimgesucht ist. Als Reagens wird 

 Tetramethylparaphenyldiaminchlorid empfohlen. Damit färbt sich das be- 

 fallene Holz schwach, die Rinde stark. Die den Tracheiden anliegenden 

 Zellen bleiben gelbgrün, färben sich aber mit Guajak und H.,02 stark blau. 



Behandelt man zuerst mit Azeton, Ätherazeton und Glyzerin und dann 

 mit Guajak, so kommt der Sitz der Aminoxydase zutage. Die Sklerenchym- 

 zellen, die verholzten Stränge und das Kambium zeigen von deren An- 

 wesenheit. Azeton unterdrückt somit nicht die Oxydasereaktion. 



Fermente und Enzyme im allgemeinen. Es sei auch noch 

 auf die Arbeit Dastres über die Extraktion endozellulärer Fermente durch 

 Chloroform verwiesen. 



Reduzierende und oxydierende Substanzen. Czapek gibt 

 ammoniakalische Silbernitrat -Lösung an als Mittel, mit dem man bei geo- 

 tropisch gereizten Wurzeln im Vergleiche zu ungereizten eine Vermehrung 

 reduzierender Substanz nachzuweisen imstande ist. Der Nachweis der Ver- 

 minderung der Sauerstoff leicht abgebenden Substanz gelingt dagegen gut 

 mit Guajaktinktur, Indigweiß und «-Naphtol-Paraphenyldamin. 



12. Indol. 



Hesse hat in jüngster Zeit festgestellt, daß man auch die gering- 

 sten Mengen von Indol in gewissen pflanzlichen Parfüms des Handels 

 nachzuweisen vermöge mittels Zusatz von Pikrinsäure zu den weniger 

 flüchtigen Substanzen und durch die charakteristischen Farbenerscheinungen 

 am Indolpikrat. Die verwendeten Pflanzenparfums stammten von Jasminum 

 grandiflorum und Citrus Bigaradia. 



Verschaffelt gibt nun die Oxalsäure wegen der sehr charakteristi- 

 schen rosa bis violetten Farbentinten, die nach M. J. Guerda beim Über- 

 streichen von Indoldämpfen über Oxalsäure entstehen, als treffliches makro- 

 und mikrochemisches Reagens auf Indol in Pflanzendüften an. Wesentlich 

 für das Urteil, ob Indol vorhanden ist oder nicht, ist die Verwendung 

 lebender Blüten zur Reaktion. 



1) V e r s u c h s a n s t e 1 1 u n g : Auf den Grund eines Glastrichters oder 

 einer Kristallisierschale gibt man einen Wattebausch oder besser Glaswolle, 

 die mit konzentrierter Oxalsäure getränkt ist und darüber, getrennt durch 

 ein Stückchen Glas, eine frisch aufgebrochene Jasminblüte. Nach ^/., bis 

 1 Stunde beginnt die Rotfärbung des Bausches von der Blüte her. Die 

 Farbe vertieft sich vom Rosa bis ins Violett. Nach einigen Stunden ist die 

 Färbung bis ins Innere des Pfropfens vorgedrungen. 



2) Ver SU chs ans t eilung: Mit Hilfe einer Stütze und einer Klemm- 

 schraube wurde über die blühende Trugdolde des Jasmins eine Kristallisier- 




252 Richter: Die Fortschritte der butanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



schale mit oxalsäuregetränlvtera GlaswoUenbansche gestülpt. Schon nach 

 kurzer Zeit konnte festgestellt werden, daß nun die Blüten in dem oben 

 angegebenen Sinne sich verfärbten in Farben, die auch mikroskopisch 

 deutlich wahrgenommen werden konnten. 



Beurteilung der Reaktion: Zwar Gruppenreaktion auf das Indol 

 und seine Verwandten, kann sie bei Blüten auf Grund der chemischen 

 Analj'sen, die stets Indol, nie aber seine Verwandten anzeigten, als Indol- 

 reaktion gelten und in die Mikrochemie als solche aufgenommen werden. — 

 Reaktionspflanzen: Von allen untersuchten Blüten gaben nur die des 

 Jasmins und des Goldregens die Reaktion. (Erhärtet durch Hesse und 

 Verschaffelt.) 



IB. Yaria. 



Die C y a n p h j' c i n k ö r n e r , Z e n t r a 1 k ö r p e r und Zentral- 

 k ö r n e r d e r C y a n o p h y c e e n. Die sogenannten C y a n o p h y c i n k ö r n e r 

 sind wiederholt Gegenstand wissenschaftlicher Untersuchungen gewesen. 

 Macallum teilt mit, daß sie sich mit Pikrokarmin färben, Hegler schließt 

 auf Grund der durchgeführten Reaktionen auf Eiweißnatur der Körner 

 und Kohl erklärt sie geradezu für Eiweißkristalloide im Cytoplasma 

 Nach seinen Beobachtungen sind besonders Säurefuchsin-Anilinwasser und 

 Zimmermanns Säurefuchsinmethode zur Färbung zu empfehlen. Hieronymus 

 will sie mit den von Schmitz beobachteten Schleimkugeln identifizieren. 

 Von den Cyanophycinkihmern sind die Zentralkörner scharf zu unter- 

 scheiden. Während nämlich jene im Cytoplasma vorkommen, ist der Platz 

 dieser im Zentralkörper. Kohl betont als deren Charakteristikon: 1. Blau- 

 färbung mit Molybdänschwefelsäure und 2. große Widerstandsfähigkeit 

 gegen Eau de Javelle und Ameisensäure. A. Meyer erklärt sie für 

 Volutinkörner. 



Zur Sichtbarmachung des Z e n t r a 1 k ö r p e r s sind nach Hegler stark 

 reduzierende Fixierungsmittel nötig, nach Kohl ist besonders Eau de Javelle 

 dazu geeignet. 



Fischer definiert den Zentralkörper als den vom Chromatophor um- 

 schlossenen Hauptteil des Protoplasten, den Zentralkörper Bütschlis bei 

 schwefelfreien Bakterien dagegen als kontrahierten Protoplasten und die 

 Kapseln als Kunstprodukte, entstanden durch an der Basis verquollene Geißeln. 

 Es sei unberechtigt, die Färbbarkeit der Bakterien mit Kernfarbstoffen zu 

 sehr hervorzuheben. Verdauungsversuche könnten über die Kernnatur des 

 Zentralkörpers der Cyanophyceen keinen Aufschluß geben, da die ver- 

 wendete Pepsin-Salzsäure bereits „enzymatische Kontraktion" hervorrufe. 

 Man beachte auch die neueste Arbeit von Fischer. 



Die sogenannten Gas Vakuolen. P. Richter hatte in Gloio- 

 trichia echinulata unter dem I\Iikroskope rötlich erscheinende Inhaltskörper 

 beobachtet und für Schwefel angesehen. Klebahn sprach sie in seiner 

 Arbeit „Gasvakuolen, ein Bestandteil der Zellen der wasserblütebildenden 

 Phykochromaceen" als Gas an, ohne jedoch die wichtige Frage zu beant- 

 worten, welches Gas vorliege. Nur welches es nicht sei, konnte er mit 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 253 



Bestimmtheit sagen. Das Gas sei weder Kolilensäure noch Sauerstoff. Seiner 

 Vermutung nach könne am ehesten an Luft oder an Stickstoff gedacht wer- 

 den. Daß überhaupt kein Gas vorliegt, zeigt die Arbeit von Moliscii. Schon 

 Brand hatte die Vermutung ausgesprochen, mit Klebahns Gasvakuolen 

 müßte es eine andere Bewandtnis haben, den Beweis dafür hat erst Moijsch 

 gebracht. Es kann heute gar keinem Zweifel melir unterliegen, daß die 

 „Gasvakuolen" keine Spur von ^Gas" enthalten. Als den besten Beweis 

 kann man wohl ansehen, daß es gelang, die „Gasvakuolen" zu isolieren, 

 ohne daß sie sich verflüchtigt hätten. Bringt man frisches Material von 

 Aphanizomonon flos aquae in eine lOprozentige Kaliumnitratlösung, so wird 

 die Alge mazeriert und die frei werdenden „Gasvakuolen" erweisen sich 

 als Vakuolen mit einer Unzahl kleinster Inhaltskörperchen. Hinze hat in 

 einer seiner neuesten Arbeiten die alte P. liiCHTERsche Anschauung 

 wieder aufgenommen und damit die Ansicht über die Gasvakuolen" dahin 

 formuliert hat : Die „Gasvakuolen" vieler Oscillarien bestehen aus Schwefel. 

 — Dagegen hält sie A. Fischer für das sogenannte Anabaenin: ein Kohle- 

 hydrat, angeblich das erste Assimilationsprodukt. 



Physoden. Crato bezeichnet als Physoden bläschenartige Gebilde, 

 die ein stärkeres Lichtbrechungsvermögen besitzen als die übrigen Zell- 

 bestandteile, sich selbständig innerhalb der Plasmalamellen verschieben und 

 auch ausgedehnte amöboide Formveränderungen zeigen können. Bei den 

 Phäophyceen, die Crato eingehender untersucht hat, kommen die Physoden 

 in allen Zellen vor. Sie bestehen hier aus einer mit Wasser mischbaren 

 Flüssigkeit, welche von einer zarten Plasmalamelle umgeben ist, die 

 durch verschiedene Reagentien in ein undurchlässiges Häutchen verwan- 

 delt wird und somit den Verlauf der Reaktionen in verschiedener Weise 

 beeinflussen kann. Vanillin -Salzsäure erzeugt intensive Rotfärbung, es 

 sei nicht unmciglich , daß Phlorogluzin ein Bestandteil der Physoden ist. 

 Anihnsulfat und Kaliumnitrit färben die Physoden erst gelb , dann rot. 

 Phenolartige Stoffe seien der Grund des Auftretens gewisser Eiweiß- 

 reaktionen, doch -bestünden die in Rede stehenden Inhaltskörper keines- 

 falls aus Eiweiß! 



Hansteen suchte die schon vor Crato geäußerte Ansicht von der 

 organoiden Natur der von Crato als organisch beschriebenen Gebilde durcli 

 neue Tatsachen zu stützen. Er hätte die Körper als „Fukosankörner" 

 beschrieben und könne nicht anders als sie noch so benennen , sie seien 

 mit Schmitz' „Phäophyceenstärke" identisch (vgl. diese).. Nach Meyer sollen 

 sie zum großen Teile aus Volutin bestehen. 



My rioph yllin. Raciborski hat die schon mehrfach beschriebenen 

 Inhaltskörper der Myriophyllumtrichome, die ilirer Entwicklung nach mit 

 GerbstoftVakuolen eine große Ähnlichkeit haben, einer eingehenden mikro- 

 chemischen Analyse unterworfen, auf Grund derer er zu dem Ergebnisse 

 gelangt, der Körper sei gewiß kein Phloroglucin. doch sei es immerhin 

 wahrscheinlich, daß ein glykosidartiger Körper vorliege. Die mit ^'anillin- 

 Salzsäure erhaltenen Resultate über Phlorogluzinverbreitung müßten sonach 

 nachgeprüft werden, vgl. Möller. Die Myriophyllinuntersuchungen wurden 

 wieder aufgenommen von Pröscher, der sich besonders auf die Rotfärbung 

 des Myriophyllins mit Vanillin-Salzsäure konzentrierte: nach ihm wird es durch 




254 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 



Abspaltung- von höchst oxj^dabel wirkenden Hydroxylgruppen organischen 

 oder anorganischen IJadikals hervorgerufen. Er hat das Myriophyllin und 

 das Oxymyriophyllin (die rote Verbindung) isoliert und stellt Mitteilungen 

 darüber in Aussicht. 



Lep tomin. Bringt man Schnitte aus Stengelstücken von Saccharum 

 officinarum in eine alkoholische Guajaklösung, so färbt sicluder parenchyma- 

 tische Teil, aus dem sich die Gefäßbündel farblos hervorheben. Die im 

 Zuckerrohre enthaltene Oxydase veranlaßt die Oxydation und damit die 

 Blaufärbung. Beim Erwärmen auf 60** und durch absoluten Alkohol wird 

 die Oxydase zerstört. Behandelt man jetzt wieder mit Guajak und Wasser- 

 stojfsuperoxj'd, so zeigt sich abermals eine prachtvolle, tiefblaue Reaktion, 

 nur sind jetzt gerade die Gefäßbündel gefärbt, speziell die Siebröhren und 

 Geleitzellen des Leptoms. Der anscheinend neue Körper, auf den diese 

 Reaktion zurückzuführen ist, wurde vom Entdecker Raciborski nach dem 

 Orte seines Vorkommens: Leptomin genannt. Doch ist dieses nicht bloß 

 auf die Siebröhren beschränkt, im Milchsafte, auch im Marke gewisser 

 Pflanzen kommt es vor. Seine Bedeutung soll analog der des Hämoglobins 

 in der 0-Übertragung gelegen sein. 



Die Widerstandsfähigkeit des Leptomins ist so groß , daß es feucht 

 bis 94'* C, trocken sogar 100'^ C. auszuhalten vermag, ohne eine Schwächung 

 der Reaktion zu zeigen. 



Grüss hat nun zunächst eingewendet, daß Raciborskis Leptomin 

 nichts weiter sei als eine katalytisch wirkende Diastase (s. o.). Moliscpi 

 wendete sich besonders gegen die Behauptung des Entdeckers von der 

 prinzipiellen Lokalisation seines Stoffes, indem er zeigen konnte, daß 

 außer Sieb- und Milchröhren auch Bast-, KoUenchym-, Phellogen- und 

 Epidermiszellen die Raciborski sehe Reaktion zu geben A'ermögen. Die 

 Antwort ist in Raciborskis Demonstrationsversuchen mit Leptomin ent- 

 halten. Grüss mag mit Leptomin verunreinigte Diastase verwendet haben. 

 Die Lokalisation aber kann immer erzielt werden, wenn man nur gewisse 

 Vorsichtsmaßregeln anwendet, und vor allem das rasche Eindringen des 

 Alkohols in die pflanzlichen Lufträume durch Anwendung einer Ver- 

 dünnungsluftpumpe möglich macht. Es wird dann das Diffundieren in 

 andere Gewebe unmöglich. 



Zum makroskopischen Nachweis eignet sich nach Raciborski am 

 besten Guajaklösung und H, 0., (Blaufärbung), die alkoholische Lösung 

 eines nicht zersetzten Dimethylparaphenylendiamins und H, 0„ (rote Fär- 

 bung) und die alkoholische Lösung gleicher Teile «-Naphtol und Dimethyl- 

 paraphenylendiarain nebst einigen Tropfen H., O.^ (dunkelindig- bis schwarz- 

 blaue Färbung). 



Für mikroskopische Zwecke sind Guajak und «-Naphtol am geeignet- 

 sten. Molisch empfiehlt gleichfalls «-Naphtol. 



Über einen reaktionshindernden Gerbstoff vgl. das Kapitel „Gerb- 

 stoffe". 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 255 



Neue Stoffe. 




256 Richter: Die Fortschritte der butanischen Mikrochemie. XXII. 2. 




XXII, 2. Richter: Die Fortscliritte der botanischen Mikrochemie. 257 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 2. 



17 




258 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 259 



17* 




260 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 2. 




XXII, 2. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 261 



Anmerkung: Man vergleiche auch das Kapitel „Der Zellulose ver- 

 wandte Körper" und „Die Kutikula und die verkorkten Membranen", 

 „Neue dem Suberin verwandte Körper etc." 



(Schluß im nächsten Heft.) 



[Eingegangen am 4. Juni 1905.] 




262 Referate. XXII, 2. 



Referate. 



1. Präparationsmethoden im allgemeinen. 



Fischler, F., Über die Unterscheidung von Neutral- 

 fetten, Fettsäuren und Seifen im Gewebe (Zen- 

 tralbl. f. allg. Pathol. u. path. Anat. Bd. XV, 1904, No. 22, 

 p. 913—917). 

 Verf. hebt hervor, daß wir immer nocli recht weit entfernt sind 

 von einigermaßen einheitlichen Vorstellungen über das Wesen der 

 Prozesse, welche beim Auftreten oder Verschwinden mikroskopisch 

 nachweisbaren Fettes in Zellen und Organen bei ihren verschiedenen 

 Funktiouszuständen auftreten. Wir würden in den Auf- und Abbau 

 von Fett einigermaßen Einblick gewinnen können, wenn es uns ge- 

 länge, die Spaltungsprodukte desselben womöglich in loco zu fixieren. 

 Als solche würden die Fettsäuren und ihre Salze, die Seifen, eine 

 besonders wichtige Rolle spielen. Anknüpfend an die Methode von 

 Benda (Beizung der Gewebe mittels Weigerts Gliabeize oder reiner 

 konzentrierter Kupferacetatlösuug) hat Verf. versucht, eine entspre- 

 chende mikrochemisch brauchbare Methode zu finden. Er probierte 

 zunächst aus, wieweit die Kupfersalze der verschiedenen Fettsäuren 

 mit Hämatoxylin eine Lackverbiudung eingehen : es reagierten alle 

 drei fettsauren Kupfersalze, das ' Stearin-, palmitin- und Oleinsäure 

 Kupfer mit WEiGERTSchem Hämatoxylin unter Lackbildung und auch 

 ihre gekupferten Kalium-, Natrium- und Calciumsalze. Die fast 

 völlige Unlöslichkeit der Kupferlacke in Weigert scher Difterenzie- 



I 




XXII, 2. Referate. 263 



rungsflüssigkeit erlaubt die Anwendung der Methode auf die Gewebe, 

 in denen auf diese Art und Weise Fettsäuren auch in den kleinsten 

 Tropfen nachgewiesen werden können. Aber nicht nur Fettsäuren 

 lassen sich so fixieren, aucli die Seifen sind einer ähnlichen Behand- 

 lung zugänglich. Hierzu ist nur die Umwandlung der Seife in loco 

 in ein unlösliches fettsaures Salz nötig, wofür sich ein leicht lös- 

 liches Calciumsalz, das Salizylsäure Calcium, bewährte. Bringt man 

 von diesem etwas in eine dünne Seifenlösung, so bildet sich sofort 

 ein weißer, voluminöser Niederschlag von fettsaurem Kalk. Bei den 

 Geweben fixiert Verf. Stücke, die auf Seifengehalt zu prüfen sind, in 

 lOprozentiger Formollösung, der salizylsaures Calcium bis zur Sätti- 

 gung zugesetzt ist. Überall, wo im Gewebe Seifenlösung vorhanden 

 ist, entsteht sofort fettsaures Calcium, das hiermit in loco fixiert ist. 

 Dieses läßt sich dann wieder verkupfern und dann mit Hämatoxylin 

 nachweisen. Bei einfach mit Formol gehärteten Geweben geht even- 

 tuell vorhandene Seife in die Härtungsflüssigkeit über. Der Vergleich 

 zwischen diesen und den mit Calciumzusatz gehärteten Präparaten 

 (bei sekundärer Ki'ipferuug und Hämatoxylinbeizung) läßt einen Schluß 

 zu darauf, ob außer Fettsäure auch noch Seife im Gewebe vorhanden 

 ist. Unter Seife wird hier das Kalium- oder Natriumsalz der Fett- 

 säure verstanden. Versuche, welche Verf. au Organen machte, be- 

 stätigten die bisherigen Versuche im Reagenzröhrchen. Nun hat 

 Benda aber seinerzeit angegeben, daß die fettsauren, gekupferten 

 Kristalle in wässeriger Hämatoxylinlösung ihre blaugrüne Eigenfarbe 

 behielten, und mit Fettgewebsnekrosematerial angestellte Versuche 

 bestätigten diese Angabe. Als Grund dafür ergab sich, daß sich 

 das reine Ölsäure Kupfer nur schwer mit wässerigem Hämatoxylin 

 färbt, weil es sich eben nur sehr langsam darin löst. Alkoholische 

 Hämatoxylinlösungen ergaben daher auch eine Färbung: Bringt man 

 für' wenigstens 12 bis 24 Stunden Stücke mit nekrotischem Fett- 

 gewebe in eine dünne Hämatoxylinlösung in 96- bis lOOprozentigem 

 Alkohol, so färben sich auch die Nekroseherde ganz schwarz, wider- 

 stehen den entfärbenden Eigenschaften der Ferrocyankalium-Borax- 

 lösung und können als isolierte blauschwarze Flecke in dem sich 

 sonst entfärbenden Gewebe dargestellt werden. Verf. hebt besonders 

 hervor, daß sich die gekupferten Calcium-, Kalium-, Natrium- und 

 Magnesiumsalze viel rascher mit Hämatoxylin anfärben, auch in 

 wässeriger Lösung, als die Verbindung, welche man beim Zusammen- 

 bringen von reiner Ölsäure mit Kupferacetat erhält. Dieses letztere 

 Salz sieht auch am meisten grün aus. Man muß daher für die Aus- 




264 Referate. XXII, 2. 



führung der oben beschriebenen Reaktion im Gewebe alkoliolisclie 

 Hämatoxylinlitsungen verwenden und möglichst dünne Stücke, also 

 am besten Gefrierschnitte. Es hat sich bis jetzt die alkoholische 10- 

 prozentige WEiGERTSche Hämatoxylinlösung bewährt, doch dürfte sich 

 die Anwendung auch noch stärkerer alkoholischer Lösungen emp- 

 felilen. Schieferdecker {Bonn). 



Lenhossek, M. V., Ramön y Cajals neue Fibrillenmethode 

 (Neurol. Zentralbl. Jahrg. XXIII, 1904, No. 13, p. 593— 609). 

 Verf. rühmt nach seinen Erfahrungen die Silbermethode von 

 Ramön y Cajal und empfiehlt, die Färbung noch durch das Tönen 

 der Schnitte im Goldbade zu ergänzen. Sein Assistent, Dr. L. Bakay. 

 hat auf die Mitteilung von Bielsckowsky hin das folgende Verfahren 

 dafür ausprobiert : Nachdem die Schnitte die Silbermethode von 

 Cajal bis zu Ende durchgemacht haben, kommen sie in destilliertes 

 Wasser. Dann in eine sehr schwache Goldchloridlösung: Von der 

 vorrätigen einprozentigen Lösung werden 4 cc mit 150 cc destillierten 

 Wassers verdünnt. Eine Ansäuerung des Goldbades (Bielschowsky) 

 ist nicht nötig. Die Schnitte bleiben verschieden lange Zeit in der 

 Goldlösung (10 Minuten bis eine Stunde) je nach der Beschaffenheit 

 des Objektes und der Dicke der Schnitte : Die gelbe Farbe muß 

 vollkommen einer stahlgrauen gewichen sein, was sich schon mit 

 freiem Auge feststellen läßt, indessen kann man den richtigen Zeit- 

 punkt zur Herausnahme nur mit dem Mikroskope feststellen 5 er ist 

 eingetreten, sobald die Fibrillen intensiv schwarz, die übrige Sub- 

 stanz der Zellen und ebenso auch die Kerne, abgesehen von dem 

 bräunlich gefärbten Kernkörperchen , vollkommen entfärbt oder in 

 einem blaß violetten Tone gefärbt sind. Ist dies der Fall, so bringt 

 man die Schnitte auf etwa 5 Minuten in eine 3- bis 5prozentige 

 Lösung von Fixiernatron und auf weitere 10 Minuten in fließendes 

 oder öfter gewechseltes Wasser, dann gründliche Entwässerung, Auf- 

 hellung, Kanadabalsam. Übermäßiges Vergolden verdirbt die Prä- 

 parate. Resultat : Die Grandsubstanz der Nervenzellen und ihrer 

 Dendriten, die früher eine gelbliche Farbe zeigte, erscheint jetzt 

 fast ganz ungefärbt; bei den Dendriten lassen sich die Grenzlinien 

 kaum noch feststellen, es sieht aus, als ob ihre Neurofibrillen ganz 

 frei, extrazellulär lägen. Die Neurofibrillen treten viel schärfer hervor, 

 auch feine, früher fast unsichtbare Fibrillen sind jetzt sichtbar. Die 

 Fibrillen sind dabei nicht dicker als in dem unvergoldeten Präparate. 

 Am besten bewährt sich die Methode bei den Zellen der Grenzzone 




XXII, 2. Referate. 265 



zwisclien innerer und mittlerer Scliicht (der ganz schwach gefärbten 

 und der mäßig gefärbten) ; Zellen, mit denen man wegen der blassen 

 Färbung der P^'ibrillen im nicht vergoldeten Präparate nicht viel an- 

 fangen konnte, werden jetzt durch die stahlgraue Färbung der 

 Fibrillen zu vorzüglichen üntersuchungsobjekten. Die Präparate sehen 

 nun ungefähr so aus, wie die von Bielschowski. — Verf. hebt hervor, 

 daß die Theorie der ganzen Färbungsmethode noch sehr dunkel ist. 

 Es handelt sich wohl ziemlich sicher um eine „Imprägnation" und 

 nicht um eine „Färbung", doch ist dies nur theoretisch zu er- 

 schließen, denn gelungene Präparate zeigen ganz das Bild einer rich- 

 tigen Färbung. Die Niederschlagsmassen müssen also außerordent- 

 lich fein verteilt sein. Schiefferdecker [Bonn). 



2. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. 



A. Niedere Tiere. 



Depdolla , Ph. , Untersuchungen über die Sperma- 

 togenese von Lumbricus terrestris (Zool. Anz. 

 Bd. XXVIII, 1905, p. 545—557). 

 Zur Fixierung wurde anfangs die Hermann sehe Platinchlorid- 

 osmiumessigsäure Tjevorzugt, später aber ausschließlich die von Benda 

 für Mitochondrien empfohlene Chromosmiumessigsäure angewandt. 

 Zur Färbung diente außer Eisenhämatoxylin noch Gentianaviolett und 

 die Benda sehe Mitochondrienfärbung mit alizarinsulfosaurem Natrium 

 und Kristallviolett. Zwar erhielt Verf. nie , wie Benda angibt , die 

 Mitochondrien allein blau und den übrigen Zellinhalt rötlich, sondern 

 Chromatin und Zentralkörner blau, trotzdem aber waren die Resultate 

 sehr befriedigend. Um die gestreckten Spermatiden und die Sperma- 

 tozoon ganz zu erhalten, wurden Ausstrichpräparate hergestellt. 



E. Schoebel (Neapel). 



Hirschler, J., Weitere Regenerationsstudien an Lepi- 

 dopterenpuppen [Regeneration des vorderen 

 Körperendes] (Anat. Anz. Bd. XXV, 1904, No. 18, 19, 

 p. 417—435 m. 5 Figg.). 




266 Reterate. XXII, 2. 



Verf. experimentierte au drei eiuheimischen Arten, Thais Poiy- 

 xena Schiff. , Bombyx Lanestris L. , Saturnia pavonia L, und einer 

 ausländischen Art, Samia promethea. Am geeignetsten zur Reg'ene- 

 rationsversucheu erwiesen sich Saturnia, Bombyx und Samia, gänz- 

 lich ungeeignet war Thais. Verf. schnitt den Puppen mit einem 

 scharfen Rasiermesser die Kopf- und Halsgegend, sowie den vorder- 

 sten Thoraxteil vom Körper ab. Gleich nach der Verwundung floß 

 ein großer Teil des Puppeninhaltes heraus ; die Wunde wurde mit 

 mäßig erhitztem Paraffin bedeckt und so vollkommen abgeschlossen. 

 Die sämtlichen Regenerationsprozesse dauerten 40 Tage (bei ziem- 

 lich warmer Zimmertemperatur), wonach die totale Falterentwicklung 

 eintrat. So behandelte Puppen wurden in bestimmten Zeiträumen 

 fixiert in einer gesättigten wässerigen Sublimatlösung mit öprozentiger 

 Essigsäure. Jede Puppe wurde vor der Fixierung in der Mitte 

 durchschnitten und außerdem die Chitindecke an zahlreichen Stellen 

 durchstochen. Dauer der Fixierung 6 bis 7 Stunden. Nach Ent- 

 wässerung in steigendem Alkohol und Behandlung mit Xylol spaltete 

 Verf. von der rechten oder linken Puppenseite her mittels eines 

 flachen Schnittes den Chitinmantel ab, um im Verlaufe von 7 Stunden 

 eine Paraffindurchtränkung zu ermöglichen. Gefärbt wurde mit 

 Hämatoxylin (Delapield) , Hämatein (Apathy) in Verbindung mit 

 wässerigem Eosin oder Lichtgrün, Thionin , Krauses Dreifarben- 

 mischung und dem Eisenhämatoxylin von Heidenhain, das gute Dienste 

 bei der Beobachtung der Muskeldegeneratiou leistete. Die GoLGische 

 Chromsilbermethode ergab zum Studium der nervösen Elemente sehr 

 ungünstige Resultate. Schiefferdecker {Bonn). 



B, Wirbeltiere. 



Preisich, K., u. Heim, P., Über die Abstammung der 



Blutplättchen (Virchows Arch. Bd. CLXXVHI , 1904, 



H. 1, p. 43—60 m. 1 Tfl.). 



Die Verf. lassen die Blutplättchen aus den Kernen der roten 



Blutkörperchen hervorgehen. Die Untersuchungen wurden meist an 



getrockneten und gefärbten Präparaten ausgeführt. Zur Färbung 



wurde die folgende Modifikation des Rom anowszky sehen Verfahrens 



verwendet , durch welche die Färbung einfacher wurde ; die so er- 




XXII, 2. Referate. 267 



haltenen Bilder unterschieden sich wesentUch von denen, welche nach 

 dem gewöhnlichen Verfahren gewonnen werden. Methode: Die 

 Methylenblaulösung und die einprozentige wässerige Eosinlösuug wur- 

 den genau nach der Vorschrift von Romanowszky angefertigt ; die 

 Modifikation bestand in der Mischung der beiden Farbstoffe : Die 

 Verff. bringen von der Stammlösung des Methylenblaus 10 Tropfen 

 durch Filtrierpapier in 10 cc destilliertes Wasser, und nach der 

 Vermischung dieser mit dem Wasser werden ein bis 2 Tropfen der 

 Eosinlösung dazu gesetzt und rasch gemischt. Das Deckgläschen 

 mit dem aufgetrockneten Blute wird auf die Oberfläche der so ge- 

 wonnenen Farbmischung gebracht, so daß es auf dieser schwimmt. 

 Wichtig ist es hierbei, daß das Blutpräparat nach der Eintröpfelung 

 des Eosins sehr rasch der Farbmischung aufgelagert wird , bevor 

 sich auf der Oberfläche dieser ein metallglänzendes Häutchen bilden 

 kanu, welches übrigens ein Beweis für die Güte des Farbstoffes ist. 

 Man bekommt schon nach 10 Minuten ganz schöne Bilder, doch 

 können die Präparate eine halbe Stunde und länger gefärbt werden, 

 ohne daß sie Schaden nehmen. Nach der Färbung werden die 

 Präparate mittels eines gelinden Wasserstrahles gut, aber nicht allzu 

 lange abgewaschen , dann läßt man sie trocknen und montiert in 

 Ivanadabalsam, Die zum Färben benutzte Lösung muß jedesmal ganz 

 frisch aus den beiden Stammlösungen hergestellt werden. Die Methyleu- 

 blaustammlösung hält sich 6 bis 8 Wochen, doch schwächt sich ihre 

 Färbefähigkeit während dieser Zeit schon ab. Es empfiehlt sich 

 daher, auf je 2 Wochen des Alters der Methylenblaustammlösung 

 über die 10 Tropfen einen Tropfen mehr in die 10 cc des destil- 

 lierten W^assers zu briugen. Die mittels Hitze fixierten Präparate 

 eigneten sich weniger zur Färbung nach diesem modifizierten Ver- 

 fahren als jene, welche mittels einer Mischung von Alkohol und 

 Äther fixiert worden waren. Man kann aber auch die mittels Hitze 

 fixierten Präparate zur Färbung nach der vorliegenden Methode ge- 

 eignet machen, wenn man sie vor der Färbung für einige Minuten 

 in eine Mischung von Alkohol und Äther bringt. Die so gefärbten 

 Präparate zeigen folgendes : Rote Blutzellen stahlblau, Zellkerne röt- 

 lichblau bis violett, Protoplasma der Lymphocyten blau, Granulation 

 der weißen Blutzelleu rot, die Granula der eosinophilen Zellen färben 

 sich nicht, das Protoplasma dieser Zellen zeigt eine lichtblaue Zeich- 

 nung, in der ungefärbte, derbe Körnchen wahrnehmbar sind. Die 

 Blutplättchen werden rotviolett bis lebhaft rot, d. h. sie fttrben sich 

 in denselben Farbenschattierungen wie die Granula der weißen Blut- 




268 Referate. XXII, 2. 



Zellen. Die Kerne abgestorbener weißer Blutzellen werden lebhaft 

 rot und zeigen jede Schattierung bis zum lichten Rosenrot. — Die 

 Untersuchungen erstreckten sich in erster Reihe auf das normale 

 Blut von Kindern und Säugetieren (Kaninchen, Meerschweinchen). 



ScJiiefferdecke?' {Bonn). 



Helber, E., Über die Entstehung der Blutplättchen 



und ihre Beziehungen zu den S p i n d e 1 z e 1 1 e n 



(Deutsches Arch. Klin. Med. 1904. Bd. LXXXII, H. 1,2, 



p. 41 — 59 m. 1 Ttl). 



Froschblut untersuchte Verf. in der Weise auf Blutplättchen, 



daß er es einer Bauchvene entnahm und in einer Mischpipette mit 



einer lOprozentigen Lösung von Natriummetaphosphat auf das 30- 



fache verdünnte. Die Beobachtung erfolgte in einer Zeiss sehen 



Kammer von 0'02 mm Höhe ; die besten Bilder der Blutplättchen 



geben Färbungen nach Romanowsky-Giemsa. Härtung in einer 



Mischung von gleichen Teilen von Alkohol und Äther. Kernsubstanz 



der Plättchen leuchtend violett-rot, Protoplasma in indifferentem 



Farbentone. Färbungen mit Hämalaun-Eosin oder nach Chenzinsky 



geben nicht dieselben brauchbaren Bilder, da die Plättchen nur 



schwach gefärbt sind. Schiefferdecker [Bonn). 



Kopsch, F., Über den Kern derThrombocyten und über 

 einige Methoden zur Einführung in das Stu- 

 dium der Säugetier-Thrombocyten (Internation. 

 Monatsschr. f. Anat. u. Physiol. 1904, Bd. XXI, H. 4—8, 

 p. 344— .353). 

 Verf. gibt in dieser Arbeit eine hübsche Zusammenstellung der 

 für die Untersuchung der Thrombocyten oder Blutplättchen günstigen 

 Methoden. Ich werde versuchen, dieselben möglichst kurz hier an- 

 zuführen. 1) Beobachtung der Thrombocyten innerhalb 

 der Gefäßbahn: Mesenterium kleiner Säugetiere (Ratten, Meer- 

 schweinchen, Kaninchen) oder Fledermaustlügel. Für Kurszwecke 

 kleine Stücke des großen Netzes, entnommen dem soeben durch Kopf- 

 abschneiden getöteten Tiere, ohne ZusatzÜüssigkeit zwischen Deckglas 

 und Objektträger; Umrandung des Deckglases mit Paraffinum liqui- 

 dum. Kleines Blutgefäß oder Kapillare, welche nur wenige Blut- 

 körperchen enthält. Die Thrombocyten in Brown scher Molekular- 

 bewegung. 2) Thrombocyten im gewöhnlichen frischen 

 Blutpräparate. Objektträger, Deckglas, scharfe Nadel bereit 




XXII, 2. Referate. 269 



legen, in die mit Alkohol gereinigte Fingerbeere einstechen, die 

 ersten Tropfen abwischen, mit der Unterseite des Deckglases einen 

 kleinen Tropfen des eben herausgequollenen Blutes abwischen, auf 

 den Objektträger legen und ohne Zeitverlust diejenige Stelle betrach- 

 ten, an der das Blut das Deckglas zuerst berührt hat : an der Unter- 

 fläche des Glases kleben einzeln oder in kleinen Gruppen die hell- 

 glänzenden Thrombocyten. Nach kurzer Zeit Sternform, Vakuolen usw.; 

 nach 4 bis 5 Minuten Fibrinfäden. Man muß die hellen, von 

 roten Blutkörperchen freien Lücken des nicht zu dicken Präparates 

 aufsuchen. Au dem frischen Blutpräparate können folgende Versuche 

 vorgenommen werden: a) Wegschwemmen der Erythro- 

 cyten und Leukocyten. An den Rand des Deckglases ein 

 Tropfen von gewöhnlichem oder destilliertem Wasser, Absaugen auf 

 der anderen Seite mit Filtrierpapier. Nach Wegschwemmen der 

 Blutkörperchen sieht man die an der Unterfläche des Deckglases in 

 ungeheurer Menge haftenden Thrombocyten. Bald bildet sich in 

 jedem eine Vakuole, welche allmählich größer wird und an deren 

 Peripherie sich der Kern beflndet. b) Behandlung des fri- 

 schen Bluttropfens mit Essigsäure. Starke Lösungen von 

 Essigsäure konservieren die Form, welche die Thrombocyten im 

 zirkulierenden und frisch quellenden Blute haben, verdünnte Lösungen 

 wirken wie Wasser, c) Kalilauge von 3.3 Prozent verändert 

 die Gestalt wenig, verdünnte Lösungen zerstören sie sehr schnell. 

 3) Gewinnung zahlreicher isolierter Thrombocyten 

 nach BtJRKER^. Vorzubereiten: eine feuchte Kammer und ein 

 Stück Paraffin, dessen eine Fläche durch Abschaben mittels eines 

 Objektträgers oder durch Überfahren mit heißem Spatel glatt ge- 

 macht worden ist. Auf diese Fläche läßt man einen reichlich gToßen 

 Bluttropfen fallen und bringt dann das Paraffinstück in die feuchte 

 Kammer. Das Blut gerinnt nicht, so daß eine Trennung der ver- 

 schieden schweren Bestandteile eintreten kann. Oben befindet sich 

 nach 20 bis 30 Minuten das Plasma mit den spezifisch leichten 

 Thrombocyten, welches man mittels eines Deckglases abheben kann, 

 um die Thrombocyten zu beobachten und verschiedenen Reaktionen 

 zu unterwerfen. 4) Konservierung der Thrombocyten in 

 dem Zustande, welchen sie im zirkulierenden Blute 

 haben unter Erhaltung der E r y t h r o c y t e n und L e u k o - 



1) BüRKER, K. , Blutplättchen und Blutgerinnung (Arch. f. d. ges. 

 Phys. Bd. CII, 1904, p. 36-94, s. p. 41). 




270 Referate. XXII, 2. 



cyten. Osmiurasäurelösung 0,5 bis 2 Prozent mit und ohne Essig- 

 säure, Jodjodkaliumlösung, metaphosphorsaures Natron, Hayems Flüs- 

 sigkeit u. a. Man bringt einen Tropfen der gewählten Flüssigkeit 

 auf die Fingerkuppe und sticht durch ihn mit der Nadel in die Haut. 

 Der herausquellende Bluttropfen wird mit der Fixierungsflüssigkeit 

 durch Umrühren mit der Nadel gemischt, zwischen Deckglas und 

 Objektträger gebracht und umrandet. 5) Beobachtung der 

 lebenden Thrombo cyten außerhalb der Gefäßbahn 

 nachDEETjEN (vergl. diese Zeitschr. Bd. XVIII, 1901, S. 336 bis 

 339 und S. 341). 6) Färbung der Thrombocyten im fri- 

 schen Blutpräparate durch Methylviolett ^. Man läßt 

 zu einem soeben angefertigten Blutpräparate einen Tropfen irgend- 

 einer wässerigen Methylviolettlösung fließen, die Erythrocyten und 

 die Leukocyten werden zum Teile weggeschwemmt oder nach einer 

 Seite gedrängt. Die au der Unterfläche des Deckglases haftenden 

 Thrombocyten nehmen die Farbe schnell an, erleiden aber dieselben 

 Veränderungen wie bei Zusatz von Wasser oder verdünnter Essig- 

 säure. Ferner färben sich die Kerne und das Protoplasma der 

 Leukocyten sowie die Membran der Erythrocyten. Für ein Dauer- 

 präparat muß recht stark gefärbt werden, dann Abheben des Deck- 

 glases, Abspülen in Wasser, lufttrocken machen, noch etwas über 

 der Flamme trocknen, auf ein Tröpfchen Kanadabalsam legen. Je 

 nachdem die Farbe gleich nach Anfertigung des Präparats oder später 

 zugesetzt wird, ist das Aussehen der Thrombocyten verschieden, bei 

 der vierten bis fünften Minute wundervolle Färbung des Fibrinnetzes. 

 7) Färbung der Thrombocyten durch Tetrajodfluo- 

 resceiu. Diese von Ehrlich^ angegebene Färbung ist außerordent- 

 lich wichtig, da sie beweist, daß im Protoplasma der Thrombocyten 

 ebenso wie in dem der Leukocyten freies Alkali enthalten ist. Die 

 Farblösung wird frisch bereitet: in ein Reagierröhrchen wird etwas 

 Eosin- oder Erythrosinlösung getan und mit etwas Salzsäure ver- 

 setzt. Sofort flockiger Niederschlag des in Wasser unlöslichen Tetra- 

 jodfluoresceins. Nun wird etwas Toluol oder Chloroform zugesetzt 

 und geschüttelt. Der Niederschlag löst sich hierin mit hellgelblicher 

 Farbe. Etwas von dieser Lösung kommt in ein zugedecktes Schälchen 

 und hier hinein das nur lufttrockene (sonst nicht weiter fixierte) 



^) Schäfer, E. A. , The essentials of histology. G. Aufl. London 

 (Longmans, .Green & Co.) 1902. p. 22. Vorschrift 3. 

 ^) Ehrlich u. Lazarus, Anämie Bd. I. 




XXII, 2. Referate. 271 



Präparat für einige Minuten. Abspülen des Präparates in reinem 

 Toluol oder Chloroform. Einschluß des feuchten Präparates in Kanada- 

 balsam : Erythrocyten ungefärbt, Protoplasma der Thrombocyten und 

 Leukocyten rot, ihre Kerne ungefärbt. 8) Färbung der Throm- 

 bocyten im gewöhnlichen Bluttrockenpräparat. Sie 

 gelingt mit vielen (vielleicht mit allen) der bisher zur Färbung von 

 Bluttrockenpräparaten empfohlenen Farbstoffe oder Farbgemische. 

 Bei der Herstellung des Trockenpräparates äußerste Sauberkeit und 

 Schnelligkeit; letztere namentlich beim Lufttrockenwerden des Prä- 

 parates ; je schneller die Lufttrocknung erfolgt, desto besser färben 

 sich die Thrombocyten: Unterstützung der Verdunstung durch 

 Fächeln und dadurch, daß man die mit Blut beschickten Deckgläser 

 auf eine körperwarme Platte legt. Man achte auch hier auf die 

 Stelle des oberen Deckglases, welche die Kuppe des Bluttropfens 

 zuerst berührt hat: hier sind die Thrombocyten am zahlreichsten. 

 Die Fixierung kann durch Hitze oder absoluten Alkohol oder Alkohol- 

 äther erfolgen. Erfolgreich gefärbt wurde mit: Triacid in seinen 

 verschiedenen Modifikationen, Eosin-Methylenblau, Hämatoxylin-Eosin. 

 Der Thrombocytenkern ist meist nicht vom Protoplasma zu unter- 

 scheiden, nur bei Methylenblau-Eosin nach Reuter^ gelang es manch- 

 mal, den Kern blau, das Protoplasma rot oder rotgelb zu erhalten. 

 9) Verdauung mittels Pepsinsalzsäure^. Man setzt zu 

 einem schnell hergestellten frischen Blutpräparate an den linken Rand 

 des Deckglases tropfenweise Pepsinsalzsäure (Pepsin-Glyzerin von 

 Grübler 100 cc und Salzsäure 1 cc) , während am rechten Rande 

 ein Stück Filtrierpapier den Überschuß von Flüssigkeit absaugt. Die 

 roten Blutkörperchen und ein Teil der Leukocyten werden weg- 

 geschwemmt. Die an der Unterfläche des Deckglases haftenden 

 Thrombocyten und Leukocyten bleiben zurück; an ihnen wird die 

 Wirkung des künstlichen Magensaftes mit Immersion beobachtet, auf 

 jedem Thrombocyten entsteht eine Hohlkugel, an deren Wand der 

 Kern liegt; die Wand derselben verschwindet später, so daß nur 

 der etwas gequollene und eine Anzahl feiner Kügelchen zeigende 

 Kern zurückbleibt. Jetzt wäscht man die Pepsinsalzsäure mit Wasser 

 aus und verdrängt das Wasser mit absolutem Alkohol (eine bis 



1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XVIII, 1901, p. 314—317. 



^) Vergleiche dieserhalb auch Lilienfeld, L., Hämatologische Unter- 

 suchungen (Arch. f. Anat. u. Phys. 1892; diese Zeitschr. Bd. IX, 1892, 

 p. 363—364). 




272 Referate. XXU, 2. 



zwei Minuten). Färbt man jetzt mit Methylgrün, so werden die 

 kleinen glänzenden Kügelchen des Throrabocytenkernes grün gefärbt. 

 10) Studium der Blutgerinnung. Man bringt einen großen 

 Tropfen Blut zwischen Deckglas und Objektträger und läßt das Prä- 

 parat 5 bis 10 bis 15 Minuten und länger in der feuchten Kammer. 

 Dann Abheben des Deckglases, Abspülen in Wasser, dann absoluter 

 Alkohol (10 Minuten), oder einprozentige Osmiumsäurelösung (eine bis 

 2 Minuten), dann Färbung mit konzentriertem Alaunhämatoxylin oder 

 mit Methylviolettlösung. Schieffcrdccker {Bonn). 



Bai) , H. , Die Colostr Umbildung als pliysiologisches 

 Analogon zu Entzündungsvorgängen. Gleich- 

 zeitig ein Beitrag zur Lehre von den Leuko- 

 cyten und deren Granulationen. Mit histori- 

 schen Darlegungen. Berlin (A. Hirschwald) 1904. 

 97 pp. 

 Verf. hat bei seineu Untersuchungen intraperitoneale Milchinjek- 

 tionen gemacht bei Meerschweinschen und bei Salamandra maculosa. 

 Die Kuhmilch wurde vorher abgekocht. Nach der Injektion wurde 

 dann von Zeit zu Zeit etwas von der intraperitoneal angesammelten 

 Flüssigkeit entnommen und sowohl frisch und ungefärbt (resp. mit 

 geringem Methylenblauzusatz) als auch als gefärbtes Trockenpräparat 

 mikroskopisch untersucht. Die Fixierung wurde meist durch Formol- 

 dämpfe erzielt , öfters auch durch Alkohol , durch Erhitzen in der 

 Flamme, durch einfache Lufttrocknung, durch Äther, durch Sublimat- 

 alkohol oder endlich durch einstündiges Erhitzen bei konstant bleiben- 

 der Temperatur von 110^. Am meisten bewährte sich die recht 

 bequeme Methode der 2 bis 3 Minuten langen Einwirkung der Formol- 

 dämpfe in einer feuchten Kammer, da hierbei das Fett nicht gelöst 

 wird und außerdem Veränderungen in der Struktur der Gewebe nur 

 in sehr geringem Maße stattfinden. Gefärbt wurde mit folgenden 

 Farbstoffen: 1) Scharlach R (Fettponc^au), gelöst in TOprozeutigem 

 Alkohol. Nachfärbung mit Hämatoxylin zur Blaufärbung der Kerne 

 und Glyzerineinschluß. Die Verwendung von Scharlach zur Fett- 

 färbung ist aufs wärmste zu empfehlen, da sie ausgezeichnet klare 

 Bilder gibt und keinen Zweifel läßt, ob etwas Fett ist oder nicht. 

 Präparate viele Monate haltbar. 2) P^osin- Hämatoxylin, Kanada- 

 balsam. 3) Ehrlich s Triacid (Orange G, Säurefuchsin, Methylgrün) 

 zur Darstellung der eosinophilen und pseudoeosinophilen (neutro- 

 philen) Granula. Kanadabalsam. 4) Dreifachsaures Gemisch: Au- 




XXII, 2. Referate. 273 



rantia-Eosin-Nigrosin zur Darstellung- der Eosinophilen und Kurloff- 

 schen Nigrosinopliilen. Kanadabalsam. 5) Thionin oder Methylenblau 

 oder Nilblau zur Darstellung von Mastzellen. Kanadabalsam. 6) Eosin- 

 saures Methylenblau in Methylalkohol nach May- Grünwald für Mast- 

 zellen , eosinophile und neutrophile Granulationen. Kanadabalsam. 

 7) FLEMMiNGSches Säuregemisch (Chromsäure-Osmiumsäure-F]isessig) 

 zur Fettschwärzung. Kanadabalsam. 8) Ehrlichs Jodgummimethode : 

 LuGOLSche Lösung und dicker Gummischleini. Zum Glykogennach- 

 weise. — Die der Bauchhöhle entnommene Flüssigkeit (Milch und 

 Exsudat) ist zuerst reichlich und milchig , wird dann gelblich und 

 mehr oder weniger fadenziehend und zäh, nimmt allmühlich an Menge 

 ab , wird farblos , trübserös und versiegt schließlich gänzlich. Die 

 Gelbfärbung scheint in erster Linie von den Polynukleären abzu- 

 hängen, doch sind wohl auch die Mononukleären beteiligt. 



Schieferdecker {Bonn). 



Rossi, E., L'intima struttura delle cellule nervöse 

 umane (Le Nevraxe vol. VI, fasc. 3, 1904, p. 331 — 349 

 av. 16 Fig.). 

 Frische Stücke von Nervengewebe, 3 bis 4 mm dick, kommen in 

 eine 2prozentige Lösung von Platinnitrat für 24 bis 48 Stunden. Dann 

 in eine 0"5prozentige Goldchloridlösung, hierauf kurzes Abwaschen 

 in destilliertem Wasser und Übertragen in eine einprozentige Lösung 

 von Ameisensäure (24 Stunden im Dunklen). Dann wieder schnelles 

 Abwaschen in destilliertem Wasser, steigender Alkohol, Paraffinein- 

 schluß. Die Methode ist sehr einfach und ergab immer gute Resul- 

 tate bei Katzen, Hunden nnd beim Menschen, von welch letzterem 

 Großhirn- und Kleinhirnrinde, Rückenmark und Spinalganglien unter- 

 sucht wurden. Schic/f'crdecJcer {Bonn). 



ßamou J Cajal, S., La methode a Targent reduit as- 



s c i e e ;\ 1 a methode e m b r y o n n a i r e p o u r 1' e t u d e 



des noyaux moteurs et sensitifs (ßibliogr. Anat. 



t. XIII, 1904, fasc. 5, p. 242—275 av. 12 figg. Dasselbe 



in Trab. Labor. Investig. Biol. Univ. Madrid t. III, 1904, 



fasc. 2, 3, p. 65—96 av. 12 figg.). 



Verf. macht in dieser Arbeit einige weitere genauere Angaben 



in bezug auf seine Silberfärbung nach vorheriger Fixierung in am- 



moniakalischem Alkohol. 1) Frische Stücke der Medulla oblongata, 



des Mittelhirns etc. von Reptilien, Vögeln und jungen Säugetieren 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 2. 18 




274 Referate. XXII, 2. 



kommen für 12 bis 24 Stunden zur Fixierung in die folgende 

 Mischung : 



Absoluter Alkohol 50 cc 



Reines Ammoniak von '24:" Baume 5 Tropfen. 



Die Ammouiakmenge kann auf 8, 10 und 12 Tropfen erhölit 

 werden, wenn man eine sehr zarte Imprägnation der Neurofibrillen 

 wünscht. In solchem Falle dürfen die kleinen Stücke niclit länger 

 als 12 bis 14 Stunden in der Fixierungsflüssigkeit verbleiben. Bei 

 Stücken von Hühnerembryonen kann man die knorpelige Umhüllung 

 des Nervensystems erhalten, doch ist es gut, die Muskelmassen zu 

 entfernen. Die Stücke dürfen nicht dicker als 4 mm sein. 2) Nach 

 einem Auswaschen von einigen Sekunden in destilliertem Wasser 

 kommen die Stücke in eine reichliche Menge einer einprozentigen 

 Silberlösung. Sind die Stücke verhältnismäßig groß , so ist eine 

 l"5prozentige Lösung besser. Die Stücke verbleiben, je nach ihrer 

 Größe, 5 bis 7 Tage im Ofen bei 28 bis 32*^. Man kann auch 

 höhere Temperaturen verwenden, 35 bis 40^ und mehr, aber dann 

 kürzt sich das Reifestadium sehr ab und man riskiert, es nicht 

 richtig zu treffen. 3) Nach einem Abwaschen in destilliertem Wasser 

 (einige Sekunden), um das überschüssige Silbernitrat von der Ober- 

 fläche der Stücke zu entfernen , kommen diese für 24 Stunden in 

 die folgende Mischung : 



Hydrochinon oder Pyrogallol 1— 15 g 



Destilliertes Wasser 100 cc 



Formol 5—10 „ 



Absoluter Alkohol 5—10 ., 



Das Hydrochinon ist im allgemeinen vorziehbar für embryonale 

 Präparate, da es eine stärkere P^'ärbung ergibt. Der Alkohol, der 

 übrigens nicht unumgänglich notwendig ist, begünstigt in etwas das 

 Eindringen der Reduktionsflüssigkeit in das Präparat. Diese Flüssig- 

 keit dringt in die Mitte der Stücke nur in geringem Maße ein, man 

 muß daher die Dicke derselben oft auf 2 mm vermindern , bevor 

 man sie in das Reduktionsbad bringt , oder diesem Alkohol oder 

 Glyzei'in zusetzen, um das Eindringen zu erleichtern. Der Alkohol 

 scheint außerdem den Kontrast zwischen den Achsenzylindern und 

 dem Grunde zu erhöhen. Nichtsdestoweniger kann man, wenn man 

 vor allem eine sehr genaue Difterenzierung der Neurofibrillen wünscht, 

 mehr als eine starke Färbung der Zellen und ihrer Achsenzylinder, 

 auch den Alkohol fortlassen. Dann muß man aber die Ammoniak- 




XXII, 2. Referate. 275 



menge in der Fixieningsflüssigkeit erhöhen. 4) Abwaschen der Prä- 

 parate in Wasser während einiger Minuten, dann Alkohol, Celloidin- 

 einschluß , nicht zu feine Schnitte und gewöhnliche Montierung. — 

 Verf. gibt dann noch einige allgemeine Regeln an. Zunächst ist die 

 Höhe der Temperatur und die Dauer ihrer Einwirkung von Wichtig- 

 keit. Man muß für jedes Objekt durch Versuche feststellen , wann 

 die Reifeperiode eintritt. Sehr praktisch ist es , zu diesem Zwecke 

 Stücke in die Reduktionstlüssigkeit zu bringen nach einem Aufenthalte 

 im Ofen vom vierten Tage an bis zum achten. In diese Zeit fällt 

 gewöhnlich die Reifeperiode, d. h. der Zeitpunkt, an dem die Neuro- 

 fibrillen sich am schärfsten vom Grunde abheben und am besten ge- 

 färbt sind. Man kann aber auch mit bloßem Auge schon nach der 

 Farbe den Erfolg beurteilen , wenn man die in dem Reduktionsbade 

 liegenden Stücke durchschneidet : wenn das Nervengewebe bleigrau 

 aussieht, so ist sicher ein körniger, grober Silberniederschlag vor- 

 handen und die Imprägnation verfehlt. Wenn das Stück dagegen, 

 selbst auf der Oberfläche , dunkelbraun oder schwarz erscheint , so 

 ist das Resultat sehr gut. In diesem Falle hat das Präparat also 

 gerade die richtige Zeit im Ofen verweilt, im ersten Falle dagegen 

 ist es zu kurze oder zu lange Zeit darin gewesen. — Liegt einem 

 weniger an einer guten Neurofibrillenfärbung als an einem sehr 

 scharfen Kontraste zwischen Nervenfasern und Untergrund , so muß 

 man weniger Ammoniak bei der Fixierungsflüssigkeit verwenden, 

 eventuell sogar nur reinen Alkohol. — Ein dunkelroter Ton der 

 zentralen Teile des Stückes mit einer grauen und körnigen Ober- 

 flächenpartie ist -ein Zeichen, daß die Reife überschritten ist. In 

 Schnitten von solchen Stücken findet man die markhaltigen Nerven- 

 fasern ziemlich gut imprägniert, aber die Zellen sind blaß oder un- 

 gefärbt und heben sich von dem Grunde nicht ab. Nichtsdesto- 

 weniger können manche Schnitte noch brauchbar sein. — Daß die 

 Ammoniakmenge überschritten ist, oder daß die Einwirkungszeit zu 

 lange gewesen ist, erkennt man an drei Zeichen: 1) Feinheit und 

 schwache ziegelrote Färbung der Neurofibrillen. 2) Körniges und un- 

 gleichmäßiges Aussehen der oberflächlichsten motorischen Zellen, deren 

 Dendriten unvollkommen gefärbt sind. 3) Marmoriertes Aussehen 

 (apparence jaspee) der weißen Substanz : Braune Flecke und gelbe, 

 durchscheinende Punkte durcheinander in verschieden großer Anzahl. 

 Tiefere Teile der Stücke können indessen trotzdem noch brauchbare 

 Schnitte liefern. Eine zu geringe Menge von Ammoniak verrät sich 

 durch eine vollständige Färbung der Zellen und Achsenzylinder und 



18* 




276 Referate. XXII, 2. 



durch ein leicht körniges Ausselien ihrer Neurofibrillen. — Die so 

 angewandte, hier beschriebene Silbermethode läßt gerade da Resultate 

 erhalten, wo die Methoden von Golgi und Ehrlich uns im Stiche 

 lassen, so bei der Färbung der großen Zellen und der dicken Achsen- 

 zylinder. Aber auch sie hat ihre Mängel: 1) Einer dieser Mängel 

 besteht in der zu schwachen Färbung der marklosen F'asern und 

 darin, daß nur einige Arten der nervösen Endverzweigungen gefärbt 

 werden. So kann man mittels der hier angegebenen Methode weder 

 die Endästchen der feinen Kollateralen der weißen Substanz im 

 Riickenmarke, im verlängerten Marke, im Gehirn etc. sehen, noch die 

 pericellulären Nester bestimmter Zellen in den höheren Zentren , so 

 in den Deiter sehen und Bechterew sehen Kernen etc. Dagegen ist 

 die Imprägnation der Körbe und Nester der Purkinje sehen Zellen 

 konstant und schön. Ebenso färben sich ausgezeichnet die Endkeulen 

 von Auerbach an den motorischen Zellen und den Zellen der oberen 

 Oliven , allerdings nur , wenn man die Stücke zuerst 2 bis 3 Tage 

 in absolutem Alkohol fixiert und dann 24 Stunden in ammoniakalischem 

 Alkohol , bevor man sie in die Silberlösung bringt. Die hier ange- 

 gebene Methode ist daher in bezug auf die Färbung der Endigungen 

 der Achsenzylinder nicht sehr wirksam, die früher angegebenen Me- 

 thoden sind in dieser Hinsicht wirksamer. Keine von allen aber ist 

 imstande, alle Nervenendigungen darzustellen. 2) Ein weiterer Nach- 

 teil ist die Färbung sämtlicher Fasern und Zellen, wodurch ein großes 

 Gewirr entsteht. 3) Ein dritter Nachteil , der allerdings weniger 

 wichtig ist, ist der, daß bei dickeren Stücken die Peripherie über- 

 färbt ist , weiter nach innen folgt dann eine günstige Zone. Um 

 diesen Nachteil zu vermeiden, muß man entweder nur kleine Stücke 

 verwenden, in welche die Silberlösung schnell eindringt, oder das 

 Stück mit gleichgültigen Gewebsteilen umgeben, so daß diese dann 

 die zu starke Färbung in sich aufnehmen. Man kann indessen diesen 

 Nachteil einigermaßen vermindern, wenn man bei großen Stücken die 

 folgenden Vorsichtsmaßregeln anwendet: 1) Man muß sie bis zur 

 Reduktion im Dunkeln halten. 2) Man muß sie mit einer gleichgül- 

 tigen Substanz umgeben (Gelatine, Blut etc.). 3) Während des letzten 

 Tages im Ofen muß man den Gehalt an Silbernitrat vermindern. 

 Diese letzte Maßregel ist die wirksamste. Nehmen wir z. B. an, daß 

 die Stücke 6 Tage in einer Silberlösung von 1 bis 1*5 Prozent ver- 

 weilt haben, so würde man sie die letzten 24 Stunden hindurch in 

 einer Silberlösung von 0*75 bis 0*5 Prozent belassen. — Eine nachträg- 

 liche Goldfärbung verbessert Schnitte, welche zum Studium der moto- 




XXII, 2. Referate. 277 



rischeii und sensiblen Kerne wälirend ihrer Entwicklun<;- dienen sollen, 

 gewöhnlich nicht. Dagegen ist das Goldbad mitunter nützlich, wenn 

 die Schnitte z. B. einen sehr schwach rötlichen Ton haben oder wenn 

 man nur die feine Struktur des Neurofibrillennetzes untersuchen will. 

 — Man kann auch die oberflächlichen Schnitte von einem Stücke 

 benutzen, welche gewöhnlich zu stark imprägniert sind, wenn man sie 

 für einige Minuten in eine schwache (0"25 bis 0'5prozentige) Lösung 

 von i'erricyankalium bringt, die frisch zubereitet ist, dann in eine 

 öprozentige Lösung von unterschwefligsaurem Natrium. Nach Ab- 

 waschen in Wasser behandelt man sie mit Goldchlorid bis zur ge- 

 wünschten Litensität. Ist die Goldfärbung zu stark geworden , so 

 überträgt man sie wieder in die beiden eben genannten Lösungen, 

 wodurch die Färbung abgeschwächt wird. Man muß hierbei sehr 

 aufmerksam verfahren, erhält aber mitunter eine prachtvolle schwarze 

 Färbung der Neurofibrillen und der Achsenzylinder auf einem sehr 

 hellen oder selbst farblosen Grunde. — Verf. geht dann weiter darauf 

 ein, daß es nötig sei, eine mechanische Vorrichtung zu konstruieren, 

 um bei Serienschnitten immer genau dieselbe Faser sofort wieder 

 einstellen zu können und gibt eine Methode an, wie sich das vor- 

 läufig wenigstens einigermaßen erreichen läßt. Es wird dieserhalb 

 auf das Original verwiesen. Schiefferdecker {Bonn). 



Kozowsky, A. D., Zur F ä r b u n g s m e t h o d i k der Nerven- 

 fasern des Zentralnervensystems (Neurol. Zen- 

 tralbl. Jahrg. XXIII, 1904, Nr. 2l>, p. 1041 — 1042). 

 Verf. gibt einie Methode an, welche ähnliches zu leisten scheint, 

 wie die WEioEiiTSche. Die Gehirnstücke werden in gewöhnlicher 

 Weise in MtJi.LER scher Flüssigkeit gehärtet, die Härtung muß mög- 

 lichst vollständig sein, je länger sie dauert, um so besser ist es. 

 Einbettung in Celloidin. Färbung in der folgenden Weise : 



Hämatoxylin lO'O g 



Absoluter Alkohol 60'0 „ 



Destilliertes Wasser 60'0 „ 



Lithion carbonicum, gesättigte wässerige Lösung lO'O „ 



Nach einer Woche ist die Farbe fertig. Die Schnitte bleiben 

 hierin 24 Stunden bei Zimmertemperatur, dann abspülen in Wasser. 

 Die schwarz gefärbten Schnitte werden in eine einprozentige Lösung 

 von Kalium hypermanganicum übertragen und verbleiben darin, bis die 

 graue Substanz braun wird. Dann kommen sie in Liquor ferri sescjui- 

 chlorati (2- bis 3mal wechseln), bis die graue Substanz deutlich 



& 




278 Referate. XXII, 2. 



weiß wird. Sorgfältiges Abspülen in Wasser, Alkohol, Xylol oder 

 Origanum-Ül, Kanadabalsam. Die Nervenfasern erscheinen schwarz 

 auf weißem Untergründe. Wenn man schnell fcärben will, müssen 

 die Sclniitte in der Farbflüssigkeit über der Lampe 5 bis 6 Minuten 

 erwärmt werden (zufällig dabei sich entflammender Spiritus ist zu 

 löschen und die Erwärmung fortzusetzen bis zu der bestimmten Zeit). 

 Nach Abkühlung Abwaschen der Schnitte in Wasser, sonst wie oben. 

 Die ganze Färbung dauert in diesem Falle nur 30 bis 45 Minuten. 



Schiefferdecker (Bonn) . 



Cavalie, M., Les ramifications nerveuses dansl'organe 

 electrique de la torpille (Torpedo Galvani) [Dis- 

 positif fibrillaire dans les gaines des f ihres 

 nerveuses et autour d'elles] (Bibliogr. anat. t. XIII, 

 1904, fasc. 4, p. 214—220 av. 5 figg.). 

 Die im vorigen Referate angegebene Methode von Nabias hat 

 Verf. für das elektrische Organ augewendet nach vorheriger Fixierung 

 mit einer 2prozentigen Osmiumsäurelösung. Die Präparate werden dann 

 zuerst zerzupft und auf einem Objektträger ausgebreitet. Die GuAMSche 

 Lösung wurde 2 bis 5 Minuten angewendet, dann nach Gelbwerden der 

 Präparate wurde mit einigen Tropfen destillierten Wassers abge- 

 waschen; dann Zusatz von einigen Tropfen einer einprozentigen Gold- 

 chloridlösung (8 bis 6 Minuten, eine längere P^inwirkung schadet nichts). 

 Dann nach wiederholtem Abwaschen in destilliertem Wasser Zusatz 

 von einigen Tropfen einer sehr schwachen Anilinwasserlösung oder 

 einer sehr schwachen Resorcinlösung (1 bis 2 Minuten). Die violette 

 Färbung der Präparate darf nicht zu dunkel werden. Dann wieder 

 einige Tropfen destilliertes Wasser , Glyzerin und Deckgläschen. — 

 Nach Injektion mittels einer Pravaz sehen Spritze von einigen Tropfen 

 einer 2prozentigen Osmiumsäurelösung schneidet man das imprägnierte 

 Stück heraus. In dem direkten Bereiche der Einstichöffnung sind die 

 elektrischen Platten schwarz, weiterhin werden sie immer heller braun. 

 Die eben genannnte Goldfärbung ergibt verschiedene Resultate je nach 

 der Stärke der ursprünglichen Färbung. Verf. hat ein klares Bild 

 des von ihm entdeckten Fibrillcnapparates nur an den hellbraun ge- 

 färbten Platten erhalten , d. h. an solchen Stellen, an denen die Os- 

 miumsäure hinreichend stark fixierend gewirkt hat, ohne doch die 

 Gewebe zu schwärzen. Schiefferdecker [Bonn). 



i 




XXII, 2. Keferate. 279 



Grabower, Die Verteiluni,^ und Zahl der Nervenfasern 

 in den Kehlkopfmuskeln und die Hinfälligkeit 

 des Erweiterers der Stimmritze (Arch. f. Laryng. 

 n. Rhinol. Bd. XVI, 1904, H. 2, p. 189—207 m. 2 Tlln.). 

 Bei den Kehlkopfmuskeln kann man sich recht gute Übersichts- 

 bilder der Innervationsfigur verschatt'en durch Anwendung der Osmium- 

 Essigsäure-Methode von Xussbaum, Allerdings ist diese Methode so, 

 wie sie angegeben ist, für den menschlichen Muskel nicht brauchbar. 

 Verf. hat die betreffenden Muskeln frieren lassen , sie mit dem 

 Mikrotom in Schnitte von 50 /t Dicke zerlegt und hat sie alsdann 

 nach Vorbehandlung mit verdünnter Essigsäure durch Osmium ge- 

 färbt. Diese Methode gibt natürlich nur Übersichtsbilder , über die 

 feinere intramuskuläre Nervenversorgung gibt sie keinen Aufschluß. 

 Um diesen zu gewinnen, hat Verf. die Muskeln vergoldet, dann ge- 

 härtet und in Serienschnitte von 10 /t Dicke zerlegt. Die Muskeln 

 wurden längs ihres Verlaufes geschnitten. Verf. hat nicht nur 

 Muskelstücke in Paraffin eingebettet und dann geschnitten (hierbei 

 werden die Muskelfasern durch das Paraffin immer mehr oder weniger 

 auseinander gedrängt, so daß die Nervenfädchen sich verschieben und 

 den Überblick erschweren), sondern auch die Muskeln in einzelne 

 Stücke zerlegt und diese nach ihrer Vergoldung und Differenzierung 

 lange Zeit in Glyzerin liegen lassen , das mit verdünnter Ameisen- 

 säure gemischt war. Nach einem Vierteljahre oder länger gelang 

 es sehr leicht, diesen Muskelstücken kleine Stückchen zu entnehmen, 

 welche außerordentlich weich waren, sich ohne jede Präparation auf 

 dem Objektträger 'auseinander legten und durch den bloßen Druck 

 des Deckglases derart entfalteten, daß man die Muskelfasern in ihrer 

 natürlichen gegenseitigen Verbindung unter dem Mikroskope betrachten 

 konnte. Außerordentlich klar konnte man dann die von Faser zu 

 Faser ziehenden Nervenfädchen überblicken. 



Schiefferckcker {Bonn). 



Joris, H., Histogenese du Neurone (Bull. Acad. K. Med. 

 Belgique 25 juin 1904, 44 p. av. 5 pl.). 

 Verf. benutzte das Nervensystem von menschlichen Foeten von 

 2, 5, 6 und 8 Monaten; von Kaninchen-, Katzen- und Hühnerembryo- 

 neu von verschiedenen Entwicklungsstadien. Um künstliche Ver- 

 änderungen in dem Baue möglichst auszuschließen, wurden sehr ver- 

 schiedene Fixierungsraittel verwendet. Die besten Resultate ergaben : 

 die Flüssigkeit von Bouin (Formol 10, Essigsäure 2, gesättigte wässe- 




280 Referate. XXII, 2. 



rige Pikrinsäiirelösung 30), Anweudungsdaiier 6 bis 24 Stunden; dann 

 abwaschen in starkem Alkohol, absoluter Alkohol, Chloroform, Lack. 

 Sodann Sublimat-Essigsäure (Sublimat 8 g, Essigsäure 5 cc, destilliertes 

 Wasser 100 cc), Anwendungsdauer 4 bis 6 Stunden, auswaschen in 

 jodiertem Wasser und in jodiertem Alkohol, Entwässerung, Einschluß. 

 Endlich einprozentige Osmiumsäurelösung für einige Minuten; beson- 

 ders für sehr junge Embryonen; auswaschen in einer wässerigen 5pro- 

 zeutigen Essigsäurelösung, Entwässerung, Einschluß. Gefärbt wurde 

 in einer wässerigen Lösung von Toluidinblau von 0'5 auf 100 (1 bis 

 Minuten) mit nachfolgender Fixierung der Färbung durch Ammonium- 

 molybdat. Ferner mit Hämatein und Rubin nach Apäthy. Um die 

 chromophile Substanz zu untersuchen , wurde nach Nissl verfahren 

 (Fixierung in Alkohol, Färbung mit Methylenblau). Das colloidale 

 Gold Avurde nach Fixierung der Embryonen in Sublimat-Essigsäure 

 angewendet; die Reaktion tritt in den Geweben von sehr jungen 

 Embryonen noch nicht ein. Auch die Methode von Bethe gelingt 

 erst bei älteren Embryonen. Schiefferclecker (Bonn). 



Krel)S, P. , Die Nervenendigungen im Musculus stape- 

 dius mit besonderer Berücksichtigung der bei 

 der Färbung angewandten Technik (Arch, f. 

 mikrosk. Anat. Bd. LXV, 1905, p. 704—727 m. 1 Fig. 

 u. 1 Tfl.). 

 Das kleine Objekt bot wegen der großen Menge von Binde- 

 gewebe, sowie wegen des eingebetteten Sesambeinchens bei der 

 Herstellung der Präparate große Schwierigkeit. Nur Methylenblau- 

 und Goldchlorid- Färbung lieferten in geeigneter Weise modifiziert 

 brauchbare Präparate. Da aus ökonomischen Gründen von einer In- 

 jektion der Methylenblaulösung in die Bliitbahn Abstand genommen 

 werden mußte, wurden aus frisch geschlachteten gut ausgebluteten 

 Tieren (Kalb, Rind, Pferd, Hund) die Muskeln möglichst schnell und 

 zum großen Teil unter Anwendung einer Lupe herauspräpariert. 

 Dieses geschah auf folgende Weise : Nach Eröffnung des Processus 

 mastoideus wurden die Zwischenwände der Cellulae mastoideae bis 

 auf den Canalis facialis P'allopii weggeräumt. Hierauf wurde der 

 äußere Gehörgang bis zum Trommelfell abgemeißelt, dieses dann 

 samt Hammer und Amboß entfernt, der Steigbügel aber, an seiner 

 Sehne hängend, belassen. Weiter wurde dann in den Canalis facialis 

 eingedrungen, das diesen von der Höhle des Musculus stapedius 

 trennende Septum durchbrochen und der Muskel selbst mit einer 




XXII, 2. Referate. 281 



stumpfen Nadel von seiner knöchernen Umhüllung losgelöst. Köpfe 

 von jungen Tieren sind zu bevorzugen, einmal wegen der leichteren 

 Präparation, anderseits aber auch wegen der leichteren Färbbarkeit 

 der Nerven. Wurde nach Dogiels Vorschrift das Objekt auf Glas- 

 wolle in eine Schale gelegt und bei 37*^ C. im Thermostaten zuerst 

 mit einer ^/^- bis ^/gprozentigen und dann von Zeit zu Zeit mit einer 

 ■^/jgprozentigen Methylenblaulösung angefeuchtet, so war immer, auch 

 bei größter Sorgfalt , die Randzone , besonders aber die zu unterst 

 liegende Hälfte stai'k überfärbt, während die innere Partie meist 

 keine Spur von Färbung aufwies. Um das ganze Präparat möglichst 

 gleichmäßig und gleichzeitig mit der Farblösung zu imbibieren, wurden 

 die Präparate zunächst an Ort und Stelle (also meist dem Schlacht- 

 hofe) in ein Schälchen mit ^/^.prozentiger Methylenblaulösung, die 

 auf ca. 37^ C. erwäi-mt war, gelegt und rasch, gut verschlossen und 

 möglichst vor Abkühlung geschützt, zur weiteren Bearbeitung in das 

 Laboratorium transportiert. Hier wurde das Schälchen auf ein Wasser- 

 bad von ca. 40^ C. und mit diesem in ein Vakuum gesetzt. In 

 diesem blieben die Präparate unter allmählicher Drucksteigerung 

 25 Minuten, um dann herausgenommen, und sofort auf gazeartiges 

 Baumwollengewebe gebracht zu werden, das über eine etwas physio- 

 logische Kochsalzlösung [warum nicht nur Wasser? Ref.] enthaltendes 

 Becherglas gebunden war. Dieses Becherglas wurde dann mit einem 

 größeren Becherglase so überdeckt, daß der Inift freier Zutritt zu 

 den Präparaten gestattet war, und das Ganze in einen Thermostaten 

 von ca. 37^ C. etwa 2 bis 2^/2 Stunden gestellt. Die von Zeit zu 

 Zeit notwendige Befeuchtung geschah mit -^/.^^prozentiger, auf 37° C. 

 erwärmter Methylenblaulösung. Da ein etwaiger Überschuß von 

 Farbflüssigkeit von der Baumwollenunterlage aufgesogen wird , ist 

 eine Überfärbung der Unterseite der Präparate ausgeschlossen. — 

 Von der Fixierung in pikrinsaurem Ammonium mußte von vornherein 

 abgesehen werden, da es ganz unmöglich war, die -kleinen, überaus 

 festen und bindegewebsreichen Muskeln mechanisch auch nur an- 

 nähernd so weit zu isolieren, wie es zu einer, wenn auch nur ober- 

 flächlichen Betrachtung, notwendig gewesen wäre [?]. Die Fixierung 

 wurde deshalb mit reichlicher, auf 0° C. abgekühlter, 7prozentiger 

 Lösung von molybdänsaurem Ammonium unter Zusatz von 1 cc Wasser- 

 stoftsuperoxyd und einem Tropfen Salzsäure auf 10 cc Lösung nach 

 Bethes Vorschrift ausgeführt. Fixierung mit reiner molybdänsauren 

 Ammoniumlösung ohne den genannten Zusatz , wie sie Dogiel emp- 

 fiehlt, ergab immer unbrauchbare Präparate. Sie zeigten meistens 




282 Referate. XXII, 2. 



nur eine diffuse Färbung aller Gewebselemente mit einer nur schwachen 

 Differenzierung der Nerven. In der Fixierungsflüssigkeit blieben die 

 Objekte ca. 12 Stunden. Dann wurden sie ca. 1 Stunde in fließen- 

 dem, destilliertem Wasser gewaschen, 1 Stunde mit 75prozentigem, 

 eine weitere Stunde mit 96prozentigem Alkohol behandelt, durch 

 Bergamottöl in Xylol gebracht und schließlich unter der Luftpumpe 

 in Paraffin eingebettet. Unter der Luftpumpe wurde die Einbettung 

 deshalb vorgenommen , weil dieselbe so schneller und vollständiger 

 vor sich geht und die Überführung durch Chloroform und Chloroform- 

 paraffin umgangen wird [?]. 15 bis 20 jli dicke Schnitte zeigten 

 bei gelungener Färbung zerstreut motorische Nervenendigungen. Um 

 Übersichtsbilder zu erhalten , welche eine größere Anzahl von Endi- 

 gungen im Zusammenhange mit den Nervenstämmcheu zeigen, wurden 

 dicke, ca. 30 fi dicke Schnitte mittels Xylol vom Paraffin befreit und 

 dann ungefähr 8 Tage lang mit dickflüssigem Damarharz durchtränkt. 

 Ein Zerfallen der Schnitte ist wegen des Biudegewebsreichtum, nicht 

 zu befürchten, zumal auch die vorherige Behandlung mit Bergamottöl 

 die Präparate vor Sprödigkeit schützt ['?]. Nach der Durchtränkung 

 wurden die Schnitte mit dem Spatel auf eine weiße, glatte Porzellan- 

 platte übertragen und nach sorgfältiger Entfaltung durch Überrollen 

 mit einem glatten, mit Xylol befeuchtetem Glasstab unter leichtem 

 Druck ausgebreitet. Auf diese Weise wurden äußerst klare Bilder 

 größerer Nervenstämme mit deren Seitenästchen erhalten, an welchen 

 die Nervenendigungen deutlich hervortreten. Von einer Entkalkung 

 des in dem Musculus stapedius vorkommenden Sesambeinchens mußte 

 abgesehen werden , da die Färbung bei allen probierten Methoden 

 entschieden litt. — Die verschiedenen Goldchloridmethoden gaben 

 anfangs so gut wie keine Resultate. Der negative Erfolg war wohl 

 zumeist der Schwierigkeit zuzuschreiben , die Elemente des binde- 

 gewebsreichen Objektes genügend zu isolieren. Deshalb wurde der 

 Versuch gemacht, die Reduktion des Goldchlorids mit einer möglichst 

 ausgiebigen Mazeration zu kombinieren. Dieses gelang mit Hilfe ver- 

 dünnter Salzsäure unter gleichzeitiger Anwendung höherer Wärme- 

 grade. Die herauspräparierten Muskeln wurden zunächst für 5 Minuten 

 in ein Gemisch von 1 Teil Ameisensäure und 3 Teilen Wasser ge- 

 bracht und mittels eines Glasstäbchens dünn ausgev/alzt; dann kamen 

 sie im Dunkeln in ein Gemisch von 4 Teilen ^/^prozentiger Gold- 

 chloridlösung und 1 Teil Ameisensäure. Die Goldchloridlösung war 

 vorher tagelang dem Sonnenlicht ausgesetzt gewesen (Apathy) und 

 das Gemisch zum Sieden gebracht und wieder abgekühlt worden. 




XXII, 1. Referate. 283 



In dieser Flüssigkeit wurden die Präparate unter den Rezipienten 

 einer Luftpumpe gebracht, um so mittels Luftauspumpen und Luft- 

 zuströmen eine möglichst rasche und gleichmäßige Imbibition mit 

 Goldlösung herbeizuführen. Man evakuiert hierbei, bis keine Bläschen 

 mehr aus dem Objekt aufsteigen. Nach 8- bis lOstündiger Behandlung 

 mittels verdünnter Ameisensäure (3:1) im Dunkeln folgte Mazera- 

 tion in verdünnter Salzsäure (250 : 1). In dieser wurden die Präparate 

 einige Male bis zum Sieden erhitzt und schließlich, um die Säure 

 zu entfernen, in reinem Wasser aufgekocht. Nach einem jedesmaligen 

 Erhitzen wurde die Flüssigkeit möglichst bis auf 0^ C. abgekühlt, 

 wodurch das im kochenden angesäuerten Wasser in Leim verwandelte 

 Bindegewebe seine Zähigkeit und Klebfähigkeit verliert. Eine zu 

 häufige und eine damit verbundene zu starke Reduktion des Gold- 

 chlorids muß vermieden werden. Einen Maßstab für die genügend 

 starke Reduktion gibt die Verfärbung der Präparate aus dem Dunkel- 

 violetten ins Dunkelbraune. Nach entsprechender Reduktion kamen 

 die Muskeln für 48 Stunden in 75prozentigen Alkohol, dann auf 2 bis 

 3 Wochen in 20prozentiges ameisensaures Glyzerin [?] , um schließ- 

 lich nach Pressung zwischen zwei Objektträgern mit Nadeln zerzupft 

 zu werden. Leider ist auch bei peinliclister Sorgfalt nicht für den 

 Erfolg zu garantieren. Gut gefärbte Präparate können während der 

 Alkoholbehandlung noch unbrauchbar werden. 



E. Schoebel {Neapel). 



Imhof, G., Anatomie und Entwicklungsgeschichte des 

 Lumbal^iarkes bei den Vögeln (Arch. f. mikrosk. 

 Anat. Bd. LXV, 1905, p. 498— GIO m. 30 Figg. u. 1 Tri.). 

 Die Fixierung erfolgte entweder in Formol-Pikrinsäure (Formol, 

 lOprozentig, 50 Teile, Pikrinsäurelösung, konzentriert, 50 Teile) oder 

 Alkohol -Pikrinsäure (Alkohol, 9Gprozentig, 65 Teile, Pikrinsäure- 

 lösung, konzentriert, 35 Teile) oder aber Pikrinsäure-Sublimat (Pikrin- 

 säurelösung, konzentriert, 1 Teil, Sublimatlösung, konzentriert, 1 Teil, 

 Wasser, destilliert, 1 Teil). Aus den beiden ersten Gemischen kamen 

 die Objekte nach 2 bis 4 Tagen in TOprozentigen Alkohol, aus dem 

 letzteren nach 12 bis 24 Stunden in SOprozentigen und eventuell 

 zur vollständigen Beseitigung des Sublimates in Jodalkohol. Als 

 vorzügliches Färbemittel für den gegebenen Zweck erwies sich das 

 saure Hämatoxylin von Ehrlich. Nach einer Färbedauer von 2 bis 

 5 Minuten wurden die Schnitte mehrere Stunden im fließenden Wasser 

 bis zum Eintritt intensiver Nachdunkelung ausgewaschen. Nach Ditferen- 




284 Referate. XXII, 



•> 



zierung in 5prozeiitiger Essigsäure und nochmaligem Auswaschen in 

 destilliertem Wasser erfolgte rasches Nachfärben in einprozentiger 

 alkoholischer Eosinlösung. Weiter kam noch die rasche doppelte 

 Methode von Golgi zur Anwendung. Zur Darstellung der Neuroglia 

 wurde das Mark erwachsener Vögel 1 bis 2 Tage in Osmium-Bichromat- 

 Gemisch (einprozentige Osmiumsäurelösung 1 Teil, 3*5prozentige Lö- 

 sung von doppeltchromsaurem Kali 4 Teile) eingelegt und nach kurzem 

 Abspülen in gebrauchte Silbernitratlösung 2 bis 3 Tage in eine frische 

 0*75prozentige Silbernitratlösung gebracht. E. Schoebel (Neapel). 



Illing, G. , Vergleichende makroskopische und mikro- 

 skopische Untersuchungen über die s u b m a x i 1 - 

 laren Speicheldrüsen der Haussäugetiere (Anat. 

 Hefte, H. 70, 80 [Bd. XXVI, H. 2, 3], 1904, p. 389—526 

 m. 4 Tfln.). 

 Untersucht wurden die Drüsen von Hund, Katze, Pferd, Esel, 

 Rind, Schaf, Ziege, Schwein, Kaninchen. Dem soeben getöteten Tiere 

 wurden die Drüsen möglichst schnell entnommen (wegen der Art des 

 Herausschneidens vergleiche das Original). Sodann wurden sofort aus 

 verschiedenen Stellen der Drüse kleine Würfel von nicht mehr als 5 mm 

 Seite herausgeschnitten und sofort in die FixierungsÜüssigkeit gebracht. 

 Als solche wurde durchgängig eine heiß gesättigte Sublimat-Kochsalz- 

 lösung mit Zusatz von etwas Eisessig benutzt, nachdem vorher zahl- 

 reiche Versuche mit der Podwysotzky sehen Lösung (Chromsäurelösung, 

 einprozentig 15 cc , Sublimatlösung 5prozentig 15 cc, Osmiumsäure- 

 lösung 2prozentig 4 cc und Essigsäure 6 bis 8 Tropfen) ungünstige 

 Resultate ergeben hatten. Nachdem die Präparate 24 Stunden in 

 der Sublimatlösung fixiert worden waren, kamen sie auf 24 Stunden 

 in fließendes Wasser, dann in steigenden Alkohol von 70, 80, 90 Pro- 

 zent mit Zusatz von Jodtinktur, von 95 Prozent und schließlich in ab- 

 soluten Alkohol. Paraffin- oder Celloidineinbettung. Paraffinschnitte 

 von durchschnittlich 2 bis 4 /^ Dicke. Celloidinschnitte 8 bis 10 /< 

 dick (kleines Celloidinmikrotom nach Ebneu- Weichselbaum). Auf- 

 kleben der Paraffinschnitte mit Wasser auf dem Objektträger. 

 F ä r b u n g : Es sollte eine möglichst gute Schleimreaktion erhalten 

 werden und die Sekretkapillaren sollten deutlich hervortreten. Um 

 die Frage zu lösen, ob in den Drüsenzellen und eventuell in den 

 Zellen der ausführenden Kanäle, beziehungsweise auch in dem etwa 

 in den Drüsenhohlräumen und dem ausführenden Apparate vorhan- 

 denen Sekretmateriale Mucin enthalten sei oder nicht, hat Verf. ver- 



I 




XXII, 2. Referate. 285 



schiedene Doppelfärbungeii angewendet, bei denen die schleimlialtigcn 

 Zellen und Sekrete eine andere , und zwar deutlicli hervortretende 

 Färbung annehmen sollten als die übrigen P^lemente und Gewebe 

 der Drüsen. Verf. hat zu diesem Zwecke vier Doppelfärbungen 

 benutzt: 1) Hämatoxylin (Delafield) mit Eosin oder Kongorot. 

 2) Muchämatein mit Erythrosin. 3) Hämalaun mit Mucincarmin. 

 4) Hämalaun mit Bismarckbraun. Alle vier Methoden ergaben sehr be- 

 friedigende Resultate ; es wurden daher die Schnitte jeder Drüse 

 mindestens einmal mit jeder dieser vier Methoden gefärbt. Ferner 

 versuchte Verf. Toluidinblau und Thionin. Hierbei machte er, wie 

 schon viele andere Autoren, die Erfahrung, daß sich die mit diesen 

 Farbstoffen behandelten Präparate nicht aufbewahren ließen, und daß 

 die prächtige metachromatische Färbung sofort verschwand, wenn 

 man sie in Alkohol brachte. Für eine momentane Untersuchung sind 

 diese Methoden sehr gut verwendbar. Auch verschiedene Versuche 

 des Verf., diese Färbungen haltbar aufzubewahren, hatten keinen 

 Erfolg. Zum Studium der Sekretkapillaren und des Netzes der Kitt- 

 und Schlußleisten wurde das Eisenalaun von M. Heidenhain mit 

 immer gleich guten Resultaten benutzt, öfter mit Nachfärbung mit 

 dünner wässeriger Lösung von Erythrosin oder Rubin S. Zum Nach- 

 weise von Muskelelemeuten wurden die Drüsenschnitte mit Pikro- 

 karrain und Säurefuchsin-Pikrinsäure, zum Nachweise der elastischen 

 Fasern mit Fuchsin-Resorcin gefärbt. Schicfferdeckei' {Bonn). 



Backmiiiill , K. , Entwicklung der Haare und Schweiß- 

 drüsen -der Katze (Anat. Hefte, H. 79, 80 [Bd. XXVI, 

 H. 2, ,3], p. 317—383 m. 4 Tfln.). 

 Die Embryonen wurden sofort nach dem Tode des Muttertieres 

 dem Uterus entnommen und, nachdem an verschiedenen Stellen der 

 Haut Einschnitte gemacht worden waren, in toto für 24 Stunden in 

 ZENKERSche Flüssigkeit gelegt; dann ebenso langes Auswaschen in 

 fließendem Wasser, dann steigender Alkohol im Dunklen. Um die 

 Sublimatniederschläge zu entfernen, wurde dem 90prozentigen Alkohol 

 Jodtinktur zugesetzt; in diesem 8 bis 14 Tage, dann Auswaschen 

 in OOprozentigem mehrfach gewechseltem Alkohol. Es wurden neun 

 Entwicklungsstadien untersucht: Jedesmal Stücke von der Haut des 

 Ober- und Unterkiefers , des Scheitels , des Rückens , des Bauches 

 (Achselhöhle und Inguinalgegend) und der Sohlenballen der Pfoten, 

 ferner von der Aftergegend, der Außenfläche des Oberarms und des 

 Oberschenkels. Einbettung in Paraffin, vollständige Schnittserien von 




286 Referate. XXII, 2. 



5 bis 7'5 und 10 /u Dicke. Längsschnitte, Quer- und Horizontalschnitte. 

 Aufkleben der Schnitte mit Eiweißglyzerin, Färbung- von jedem 

 Präparate sowohl mit Hämatoxylin (Hansen) und Eosin als mit Eisen- 

 hämatoxjiin und nachfolgender Pikrofuchsinfärbung nach van Giesox. 



Schiefferdecke?" {Bonn). 



Glas , E. , Über i n t r a e p i t h e 1 i a l e Drüsen, Cysten und 

 L e u k c y t e n h ä u f c h e n der menschlichen Nasen- 

 schleimhaut (Arch. f. Laryngol. u. Rhinol. Bd. XVI, 

 1904, H. 2, p. 236—264 m. 1 Tfl.). 

 Zur Färbung der intraepithelialen Drüsen hat Verf. die folgen- 

 den spezifischen Schleimfärbemittel verwendet : Thionin, Toluidinbh^u, 

 polychromes Methylenblau, Mucikarmin. Die ersten drei genannten 

 FarbstotFe wurden später verlassen: Die Metachromasie, welche bei 

 den in Wasser untersuchten Präparaten vorzüglich hervortritt, geht 

 bei eingeschlossenen Präparaten bald verloren. Ist die Fixierung 

 der Präparate eine günstige , so färben sich die Schleimzellen vor- 

 züglich rotviolett mitten in dem blau gefärbten Grundgewebe. Längeres 

 Auswässern schadet der Metachromasie nichts. Läßt man aber dann 

 steigenden Alkohol einwirken, so blaßt die rotviolette Farbe ab. Die 

 Präparate, welche in konzentrierter wässeriger Subliraatl(3sung fixiert 

 wurden, sind in dieser Beziehung günstiger als die Alkoholpräparate, 

 da sie die Farbe erst nach längerer Zeit abgeben. Wesentlich er- 

 leichtert wird infolgedessen die Untersuchung, wenn man gleich nach 

 der Färbung in Wasser untersucht. Zur Aufhellung hat sich Nelkenöl 

 besser als Xylol bewährt, da dieses letztere noch mehr Farbstolf 

 auszog. Die Präparate blieben längstens 8 bis 14 Tage schön ge- 

 färbt. Bei Alkoholpräparaten erwies sich die polychrome Metliylen- 

 blaufärbung als besser und haltbarer als die Thioninfärbung (Unna). 

 Eine lOprozentige Lösung von Kaliumbichromat fixiert bei diesen 

 Präparaten gut den Farbstoff (Unna). Verf. hat daher später aus- 

 schließlich die Mucikarminfärbung verwendet: Die mit Ilämalaun vor- 

 gefärbten Präparate werden in einer Lösung von Mucikarmin (Staram- 

 lösung auf -^/^Q mit destilliertem Wasser verdünnt) einige Stunden 

 gefärbt, mit Wasser abgespült, entwässert und aufgehellt. 



Schiefferdecker [Bonn). 



Arnold, J. , t'ber Bau und Sekretion der Drüsen der 

 F r s c h h a u t ; zugleich ein Beitrag zur P 1 a s m o - 




XXII, 2. Referate. 287 



s m e n - G r a u u hl I e li r e (Arch. f. niikrosk. Anat. Bd. LXV, 



1905, p. 649—665 m. 1 Tfl.). 

 Zunächst ist hervorzuheben , daß über die Beschaffenheit der 

 Driisensekrete nur bei Anwendung bestimmter Hxiernngsmittel und 

 bestimmter Tinktionsraethoden Aufschluß zu erwarten ist. FLEMMiNGSche 

 Flüssigkeit, für Kernstnikturen besonders geeignet, wandelt das Sekret 

 der Körnerdrüsen in blasige und fädige Massen um, während es an 

 Formol- und Sublimatpräparaten aus scharf differenzierten Körnern 

 zusammengesetzt erscheint. Es ist also unbedii.gt nötig, die Präparate 

 des auf verschiedene Weise fixierten Materials zu vergleichen. Was 

 die Färbungen betrifft , so ist für den Mucinnachweis Mueikarmin 

 nicht zu entbehren, da an mit Thionin gefärbten Präparaten die 

 Metachromasie nicht konstant und nicht dauerhaft ist. Im übrigen 

 sind an Tinktionsmethoden notwendig das Eisenhämatoxylinverfahren 

 nach Heidenhain, Färbung nach Heidenhain - Biondi , Pianese und 

 VAN GiESON. Weiter sind unter andern noch empfehlenswert poly- 

 chromes Methylenblau und die WEiGERTSche Fibrinfärbung. Zur Be- 

 urteilung der Kittleistenfrage verdienen, nach Ansicht des Verfassers, 

 die Vorgänge der Indigabscheidung in den Interzellularräumen , wie 

 sie nach Injektion von Indigkarmin in das Blut des lebenden Frosches 

 erfolgen, mehr Beachtung als ihnen bisher zuteil geworden ist. 



E. Schoehel {Neapel). 



Bimting, P. L., The Histology of Lymphatic Glands: 

 t h e g e n e r a 1 S t r u c t u r e , t h e R e t i c u 1 u m and t h e 

 Germ Centres (Journ. of Anat. a. Physiol. vol. XXXIX, 

 1904, p. 55—68 w. 5 pltes.). 

 Die Untersuchungen wurden hauptsächlich an Paraffinschnitten 

 ausgeführt. Zur Fixierung des Materials diente schwache FLEMMiNosche 

 Lösung und ZENKERSches Gemisch, zur P'ärbung der Schnitte entweder 

 Carmalaun allein oder kombiniert mit Pikrinsäure, Safranin oder 

 Safranin und Kernschwarz ; ferner Hämatoxylin kombiniert mit Eosin, 

 Thionin oder Hansens Pikrofuchsin ; ferner die von Thomö empfohlene 

 MALLORYSche Färbung^ und die von Retterer vorgeschlagene Modi- 

 fikation des Israel-Pappenheim sehen Gemisches von Eosin, Orange 

 und Aurantia,- letztere kombiniert mit Hämatoxylin oder Weigerts 

 Resorciu-Fuchsin. Eine Anzahl von Drüsen wurde außerdem frisch 



^) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XIX, 1902, p. 23G. 

 2) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XIX, 1902, p. 105. 




288 Referate. XXII, 2. 



mit Silbernitratlösung behandelt und dann entweder nach Paraftin- 

 einbettung oder nach Gefrieren lassen geschnitten. Ferner stellte 

 Verf. Auswaschpräparate her, indem er Gefrierschnitte zirka 15 Mi- 

 nuten in halb mit Wasser gefülltem Reagenzglas schüttelte und von 

 Zeit zu Zeit den Eftekt kontrollierte. E. ScJwebel (Neapel). 



Koiransky, Eugenie, Über eigentümliche Gebilde in den 

 L e b e r z e 1 1 e n der Amphibien (Anat. Anz. Bd . XXV, 

 1904, No. 18, 19, p. 435—456 m. 6 Figg. im Text). 

 Verf. verwendete die Lebern von Salamander, Frosch und Triton. 

 Fixiert wurde in dem Gemisch von Carnoy, Sublimat und Zenker- 

 scher Lösung. Das erste ergab die besten Resultate. Je nach der 

 Größe blieben die Stücke 12 bis 14 Stunden in den Fixierungs- 

 Üüssigkeiten , dann kamen sie (nach ZENKERScher Flüssigkeit erst 

 24stündiges Auswässern im Brunnenwasser) in steigenden Alkohol bis 

 zu absolutem, dann in Karbolxylol, Xylol, Paraffin. Die 3 bis 4 ju 

 dicken Schnitte wurden mit Wasser oder nach der japanischen Me- 

 thode auf den Objektträger aufgeklebt. Besonders günstig war eine 

 Färbung mit Eisenhämatoxylin und Nachfärbung mit Pikrorubin oder 

 Erythrosin. Nicht nur die Zelle , sondern auch die Anordnung des 

 Bindegewebes und die Gallenkapillaren mit den Schlußleisten waren 

 leicht nachweisbar. Auch mit Hämatoxylin-Eosin und Toluidinblau- 

 Erythrosin wurde gefärbt. Feine Stäbchen , welche den Kern um- 

 faßten , färbten sich mit Toluidinblau. Verf. hat auch verdünnte 

 chinesische Tusche unter nicht sehr starkem Drucke vom Frosch- 

 herzen aus in die Gefäße fließen lassen, um das feinere Verhalten 

 der Gefäße zu den Zellen zu studieren. Die Fixierung in Trichlor- 

 essigsäure und Färbung mit Resorcinfuchsin zur Darstellung der 

 Trophospongienkanälchen nach Holjigren ergab keine verwertbaren 

 Resultate. Schieffenlecker {Bonn). 



Fichera, G., Über die Verteilung des Glykogens in ver- 

 schiedenen Arten experimenteller Glykosurie 

 (Beitr. z. pathol.Anat. u.z. allgem.Pathol. Bd. XXXVI, 1904, 

 H. 2, p. 273— .339 m. 1 Tfl.). 

 Verf. führte seine Versuche au erwachsenen, gesunden Hunden 

 aus und tötete sie zur geeigneten Zeit mittels Durchschneidung der 

 großen Halsgefäße , so daß sie an Verblutung starben. Die Organ- 

 stückchen wurden unmittelbar nach dem Tode entnommen und in abso- 

 lutem Alkohol (der Alkohol muß öfter erneuert werden, um ihn ganz 




XXII, 2. Referate. 289 



wasserfrei zu erhalten, sonst könnte er das etwa vorhandene Glj^kogen 

 lösen) oder in Flemming scher Flüssigkeit fixiert. Paraffineinschluß. 

 Färbung mit den für die einzelnen Gewebe geeignetsten Verfahren. 

 Von den verschiedenen Färbungsmethoden des Glykogens hat Verf. 

 die wichtigeren einer genauen Prüfung unterzogen. Nach Ehrlich 

 gebraucht mau folgende Mischung: LuGOLSche Flüssigkeit ein Teil 

 auf 100 Teile einer Gummilösung von sirupartiger Konsistenz. Nach 

 Barfurth färbt und konserviert man die Präparate in einer Mischung 

 von einem Teil LuGOL scher Flüssigkeit auf zwei Teile Glyzerin. Nach 

 Langhans: 5 bis 10 Minuten in Lugol scher Flüssigkeit, dann waschen 

 in einer Mischung von einem Teil der offizinelleu Jodtinktur auf 4 Teile 

 absoluten Alkohol; Ol. origan. cret. Wird vorher mit Boraxkarmin 

 (Mayer) gefärbt , so erscheinen die Kerne rot und das Glykogen 

 braungelb. Nach Lubarsch (Gentianaviolett) werden nach Härtung 

 in absolutem Alkohol Schnitte hergestellt, die man in Boraxkarmin 

 (Mayer) färbt und dann 1 bis 2 Minuten in eine leicht erwärmte Lösung 

 von Gentianaviolett in Anilinwasser legt. Nach Auswaschen in Wasser 

 bringt man sie für nur wenige Sekunden (5 bis 10) in Lugol sehe Lösung 

 und trocknet sorgfältig; dann ditFerenzieren in einer Mischung von 

 zwei Teilen reinen Anilinöls auf einen Teil Xylol. Klärung in Xylol, 

 Kanadabalsam. Kerne rot, Glykogen dunkelblau oder violett. Nach 

 Lubarsch (Jodhämatoxylin) färbt man die Schnitte 5 Minuten lang 

 in Jodhämatoxylin (altes Hämatoxyliu nach Delafield 10 Teile, 

 Gram 10 Teile, destilliertes Wasser 5 Teile), bringt sie unmittelbar 

 darauf in absoluten Alkohol, trocknet sorgfältig, dann Xylol, Kanada- 

 balsam. Die Präparate bleiben 1 bis 2 Tage lang dem Tageslicht 

 ausgesetzt. Nach Best: Einbettung in Celloidin, Färbung der Schnitte 

 mit Hämatoxylin (Delafield), auswaschen in Wasser, Färbung mit 

 Karmin (Karmin O'b, Ammon. chlorat. 1, Lithium carbon. 0*2, destil- 

 liertes Wasser 50) 15 bis 30 Minuten in absolutem Alkohol 2 Teile 

 und Liqu. ammon. caust. ein Teil, auswaschen in TOprozentigem Al- 

 kohol, Entwässerung in absolutem Alkohol, Xylol, Kanadabalsam. 

 Von den angegebenen Methoden hat jede ihre Vorteile und Nachteile. 

 Barfurth: Äußerst durchsichtige Präparate, aber infolge der lösenden 

 Wirkung des Glj^zerius tritt die charakteristische Jodreaktion recht 

 bald zurück. Laxghans : Keine sehr schönen Präparate, die sich nur 

 einige Monate halten. Lubarsch (Gentianaviolett j : Man braucht sehr 

 gute Lösungen und viel Zeit; dabei geht das Glykogen durch die 

 zahlreichen Übertragungen leicht in Lösung über; viele Organe ver- 

 sagen auf die Glykogenreaktion, und diese tritt eigentlich nur ein in 



Zeitscbr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 2. 19 




290 Referate. XXII, 2. 



der Leber, in den Muskeln und in der Plazenta. Bei der Lubarsch- 

 schen Jodhämatoxylinmethode handelt es sich nicht um eine wirkliche 

 Färbung des Glykogens, sondern um eine Kombinierung von Jodreak- 

 tion und Hämatoxylinfärbung. Man erreicht mit dieser Methode selten 

 gut gelungene Färbungen und muß häufig die Schnitte in reiner 

 LuGOL scher Lösung nachfärben. Die Methode von Best eignet sich 

 nur für die schwer löslichen Glykogeusorten , da die leicht löslichen 

 infolge der vielen Behandlung mit wasserhaltigen Mitteln zum Schwinden 

 gebracht werden. Mit diesem Verfahren kommen im Knorpel und im 

 geschichteten Epithel selbst die kleinsten Mengen Glykogen zum Vor- 

 schein, während es sich bei Hoden, Leber, Muskeln und Hyper- 

 nephromen nicht bewährt. Die Ehrlich sehe Methode bietet, wenn sie 

 auch die gleichzeitige Untersuchung auf Glykogen und auf den Bau 

 der Zellen nicht gestattet , doch die Vorteile , äußerst einfach und 

 kurz zu sein , das Glykogen nicht aufzulösen , es im Gegenteil 

 in jedem Gewebe in einer schönen mahagoniroten Färbung hervor- 

 treten zu lassen. Verf. benutzte daher dieses letztere Verfahren. 

 Er verwandte möglichst feine Schnitte und möglichst geringe Mengen 

 der Färbemischung, um nicht undeutliche Präparate zu bekommen, 

 bei welchen eine eventuelle Anhäufung von Jodgummi das Vorhanden- 

 sein von Glykogen hätte vortäuschen können. Eine Verwechslung 

 von Amyloid mit Glykogen ist leicht zu vermeiden , da man beide 

 durch viele Mittel unterscheiden kann, wie Verf. ausführt. Der Nach- 

 weis von Zucker, Aceton und Eiweiß im Urin wurde mit den ein- 

 facheren und sicheren der bekannten Verfahren ausgeführt. 



Scliiefferdecker {Bonn). 



Cameron , J. , The Development of the Retina in Am- 

 phibia, an Embryological and Cytological 

 Study (Journ. of Anat. a. Phys. London vol. XXXIX, 1905, 

 p. 135—152 w. 2 pltes,). 

 Zur Fixierung der Netzhäute wurde mit befriedigendem Erfolg 

 ein Gemisch, aus 90 Teilen TOprozentigeu Alkohol, 3 Teilen Eis- 

 essig und 7 Teile Formol angewendet. In der Fixierungsflüssigkeit 

 blieben die Objekte eine Woche, kamen dann direkt für 24 Stunden 

 in 90prozentigen Alkohol, zweimal für je 24 Stunden in absoluten, um 

 nach 24stündiger Behandlung mit auf 55° C. erwärmtem Zedernholzöl 

 in Paraffin eingebettet zu werden. Gefärbt wurden die mit Wasser 

 aufgeklebten Schnitte entweder mit Eisenhämatoxylin oder Hämalaun, 

 kombiniert mit Eosin oder Methylblau-Eosin. Schließlich wurden die 




XXII, 2. Referate. 291 



entwässerten Schnitte vor dem Balsameinschluß mit Lavendelöl auf- 

 gehellt. E. Schoebel (Neapel). 



Sala , G. , Beitrag zum Studium der feineren Struktur 



der Netzhaut (Anat. Anz. Bd. XXV, 1904, No. 9, 10, 



p. 246—249 m. 2 Tfln.). 



Verf. hat die Silbermethode von Cajal angewendet. Er hat 



die Netzhäute 4 bis 5 Tage lang in einer ein- bis l'öprozentigen 



Silbernitratlösung im Ofen bei 37*' gehalten, dann nach Auswaschen 



in der von Cajal angegebenen Weise reduziert. Die Resultate waren 



sehr günstig. Schiefferdecker (Bonn). 



Meves, F., Zur Wirkung von Säure auf die roten Blut- 

 körperchen der Amphibien (Anat. Anz. Bd. XXV, 

 1904, No. 9, 10, p. 240—245). 

 Kneuttinger hat im Jahre 1865 beschrieben, daß die roten 

 Blutkörperchen des Frosches bei der Einwirkung von Säure (7"2pro- 

 zentige Essigsäure) sich unter Erhaltung der elliptischen Scheiben- 

 form, plötzlich wie mit einem Rucke nach allen Richtungen erweitern. 

 Verf. hat bei seinen Blutuntersuchungen auch diese Säureeinwirkung 

 (7- bis lOprozentige Essigsäure) auf die roten Blutkörperchen der 

 Amphibien untersucht. Er verfuhr in der Weise, daß er einen 

 Tropfen frischen Blutes und einen Tropfen einer 7- bis lOprozentigen 

 Essigsäure in einiger Entfernung voneinander auf den Objektträger 

 setzte und beide Tropfen mit einem großen Deckglase zusammen 

 eindeckte , so daß sie sich erst dann vereinigten. Bringt man das 

 Präparat unter das Mikroskop, so ist an der Berührungsstelle selbst 

 die Säurewirkung in der Regel schon abgelaufen. Man muß in einiger 

 Entfernung davon beobachten, um noch die ersten Veränderungen 

 wahrzunehmen. Verwendet man eine Essigsäure , der man 0*5 bis 

 1 Prozent Methylgrün zugesetzt hat, so sieht man, daß der Kern 

 erst im Momente des Erblassens beginnt sich mit dem Farbstoffe zu 

 imbibieren. Schiefferdecker {Bonn). 



19' 




292 Referate. XXII, 2. 



C, Bakterien, 



Heller, 0., Die RoTHSERGERScbe Neutr alrotr eaktiou auf 

 Gelatine bei 37» (Centralbl. f. Bakteriol., I.Abt., Orig. 

 Bd. XXXVIII, H. 1). 

 Verf. unterwarf den Rothberger sehen Neutralrotagar und die 

 von Oldbkop angegebene Verbesserung dieses Reaktionsnährbodens 

 (0"3 Prozent Agar) einer Prüfung mit einer größeren Anzahl Bak- 

 terien, die der Coligruppe teils angehören, teils nahestehen. Er 

 konnte feststellen, daß die Veränderung des Neutralrotfarbstofts bei 

 dem Oldekop sehen Nährboden schneller und deutlicher als bei dem 

 Rothberger sehen Agar eintritt, jedoch konnte er noch bessere Resul- 

 tate erhalten, wenn er der gewöhnlichen Laboratoriumsgelatine in 

 Reagensgläschen vier Tropfen sterilisierter, gesättigter, wässeriger 

 Lösung von Neutralrot zusetzte und die geimpften Röhrchen in den 

 Brustschrank von 37** stellte; hierbei trat deutliche Fluoreszenz 

 schon nach 6 Stunden ein, die lange bestehen bleibt und in ihrer 

 Färbung weder von dem Nährboden noch durch den Luftsauerstoft' 

 beeinträchtigt wird. W. Hoff mann (Coblenz). 



Billlmann, W., Über das Verhalten des im Erdboden 

 eingesäten Typhusbazillus (Zentralbl. f. Bakteriol., 

 I. Abt., Orig. Bd. XXXVIII, H. 4). 

 Als Fortsetzung seiner schon früher — obige Zeitschrift Bd. XXX 

 Nr. 8 — über denselben Gegenstand mitgeteilten Untersuchungsergeb- 

 nisse berichtet Verf. über Resultate, die er bei dem P^insäen von 

 Typhusbazillen in vorher sterilisierte Erdproben erhielt. Er benutzte 

 hierzu sogenannte Saftflaschen, die zu ein Drittel gefüllt, jedesmal 

 nur 50 g Erdmaterial enthielten. Als Erdproben benutzte er ge- 

 waschenen roten Flußsand, durchgesiebten Humus und Bauschutt. 

 Bei der Sterilisation der Erden stieß Verf. auf manche Schwierigkeit, 

 zumal da er eine sehr widerstandsfähige, sporentragende Bakterien- 

 art antraf, die auf den Platten sehr typhusähnlich wuchs und hier- 

 nach später zu Trugschlüssen Veranlassung geben konnte. In ver- 

 schieden großen Zeitabschnitten entnahm er Proben und versuchte, 

 Typhusbazillen zu isolieren, die er mit besonderer Berücksichtigung 

 eventuell eingetretener Änderungen in ihrem morphologischen, kultu- 

 rellen und biologischen Verhalten prüfte. 




XXII, 2. Referate. 293 



Er konnte die eingesäten Typliusbuzillen in den zuletzt staub- 

 trocken gewordenen Erden nocli nach 18 Monaten nachweisen. 



Die isolierten Mikroorganismen hatten sich morphologisch und 

 kulturell nicht verändert, dagegen war eine Differenz in ihrem bio- 

 logischen Verhalten zu verzeichnen, indem die Agglutination nicht 

 mehr in einer Verdünnung von 1 : 10*000 bis 1 : 40'000, sondern 

 nur noch von 1 : 2500 eintrat. 



Nur auf den Humusplatten beobachtete er auch kulturelle Ver- 

 änderungen, indem von diesen Erdproben zunächst Kolonien wuchsen, 

 die mehr dem Bacterium coli glichen, aber bei weiteren Übertragungen 

 wieder durchaus die Charakteristika der Typhusbazillen zeigten. 



Die drei verschiedenen Erdsorten hatten verschiedenen Einfluß 

 auf die Lebensdauer der Typhusbazillen, indem sie in dem an or- 

 ganischem Nährmaterial armen Flußsand früher zugrunde gingen, als 

 in dem Humus und dem Bauschutt. W. Hoff mann (Coblenx). 



Gaehtgens, W., Der Bacillus jasmino-cyaneus und der 

 Bacillus flavo-aromaticus, zwei neue Farbstoff 

 bildende Bakterien (Zentralbl. f. Bakteriol., I. Abt., 

 Orig. Bd. XXXVm, H. 2, p. 129). 



Wie auch von anderer Seite schon öfters erwähnt, ist die Bak- 

 terienflora bei Darmkatarrhen, im besonderen bei Typhus und typhus- 

 ähnlichen Erkrankungen im allgemeinen eine von der Norm abwei- 

 chende. In dem hygienischen Institut der Universität Straßburg 

 wurden in letzter Zeit bei der Untersuchung typhöser Stuhlgänge 

 zwei besondere Arten gefunden, die sich durch Geruch und Farb- 

 stofi'bildung auszeichnen. 



Der Verf. liatt^. diese beiden Bakterienarten genauer studiert. 

 Die eine, B. jasmino-cyaneus, wurde mittels der Ficker-Hoffmann- 

 schen Coft'einbouillon isoliert. Er fand sich meist in Reinkultur, wo- 

 durch gegebenenfalls der Nachweis der Typhuserreger sehr erschwert 

 wurde ; abgesehen von der Coft'einbouillon fand er sich auch auf den 

 Malachitgrüuagarplatten nach Lentz-Tietz. Diese Bakterienart steht 

 dem B. pyocyaneus sehr nahe und unterscheidet sich hauptsächlich 

 durch ihren ausgesprochenen Jasmingeruch ; auch die Virulenz für Tiere 

 ist vorhanden. Die zweite Bakterienart ist von dem Verf. isoliert und 

 mit dem Namen B. flavo-aromaticus belegt worden; sein kulturelles 

 Verhalten beansprucht kein besonderes Interesse, jedoch ist er nicht 

 tierpathogen. W. Hoffmann {Coblenz). 




294 Referate. XXII, 2. 



Doerr, R., Beobachtungen über bazilläre Dysenterie 

 (Zentralbl. f. Bakteriol., I. Abt., Orig. Bd. XXXVIII, H. 4, 

 p. 420). 



Verf. hatte Gelegenheit, in einem Jahre eine Ruhrepidemie in 

 Krakau und in Wien bakteriologisch zu untersuchen. Er fand bei 

 der ersten den SHiGA-KRusE-Dyseuteriebazillus, während es ihm in 

 Wien unter 29 Fällen 12 mal gelang, den FLEXNERSchen Dysenterie- 

 erreger nachzuweisen. Zur Isolierung benutzte er durchweg den 

 Drigalski sehen Typhusnährboden, jedoch zog er zur Identifizierung 

 noch Traubenzuckeragar, den Barsiekow sehen Nährboden, Kartoffeln, 

 Bouillon, Gelatine, Peptonwasser und Lakmusmolke und schließlich 

 hochwertiges Immunserum heran. Im allgemeinen fand er völlige 

 Übereinstimmung der einzelnen Individuen, nur wichen seine isolierten 

 SfflGA-KRUSE-Stäbchen von einem ihm von Kruse übersandten Stamm 

 betreffs des Wachstums in Bouillon ab. 



Von Interesse ist die Beobachtung des Verf., die auch von 

 anderer Seite schon mitgeteilt war, daß im Anfang der Erkrankung 

 die Ruhrerreger fast in Reinkultur in den Stühlen vorhanden waren 

 und daß die üblichen Darmbakterien, besonders Bacterium coli, numme- 

 risch in den Hintergrund traten. W. Hoff mann (Coblenz). 



Stroß, 0., Über das Wachstum der Gonokokken auf 

 serumh altigen Nährböden (Zentralbl. f. Bakteriol., 

 I. Abt., Orig. Bd. XXXVIII, H. 4, p. 491). 

 Nach einer umfassenden Literaturübersicht berichtet Verf. in 

 eingehender Weise über seine Versuche, die das quantitativ ver- 

 schiedene Wachstum der Gonokokken auf menschen- und tierserum- 

 haltigen Nährböden erklären sollten. Es sind die verschiedensten 

 Variationen im Zusatz einer großen Anzahl von Eiweißkörpern vor- 

 genommen worden, auf die im einzelnen hier nicht eingegangen 

 werden kann; von Interesse dürfte es wohl sein, daß Verf. mit 

 zentrifugierten nnd gewaschenen roten Blutkörperchen regelmäßig 

 die Gonokokken in üppiger Weise zum Wachstum bringen konnte, 

 wenn er die Blutkörperchen im Verhältnis von 1 : 10 Agar zusetzte. 

 Im übrigen fand Stross, daß die verschiedenen Tiersera von 

 Tier zu Tier stark schwankende Eigenschaften haben, während 

 Menscheusera regelmäßige Resultate geben ; bei den Tierseris ist noch 

 hervorzuheben, daß sie, in kleiner Menge dem Agar zugesetzt, wachs- 

 tumfördernd wirken, während bei Zusatz größerer Mengen überhaupt 

 kein Wachstum erfolgt. Per Verf. schließt hieraus, daß in den Tier- 




XXII, 2. Referate. 295 



seris für Gonokokken besondere wachstumhemmende Stoife vorhanden 

 sein' müssen. W. Hoff mann {Coblenz). 



Dschunkowsky, E., u. Liihs, S., A p p a r a t zum sterilen B 1 u t - 

 entnehmen zwecks Untersuchung (Zentralbl. f. Bak- 

 teriol., I. Abt., Orig. Bd. XXXVIII. H. 3, p. 367j. 



\ erff. verfolgten die Absicht, einen bequem zu handhabenden 

 Apparat zur sterilen Gewinnung einer kleineren Menge nichtdefibri- 

 nierten Blutes und dessen bakteriologischer Untersuchung zu kon- 

 struieren und empfehlen zu diesem Zweck folgenden Apparat: 



In der Hauptsache besteht er aus einer größeren Flasche (3 

 bis 100 cc) mit langem ausgezogenem Halse, auf den ein gleich 

 weites, ca. 10 cc langes Gummirohr gezogen wird. In die Flasche 

 gießt man bis zu ein Zehntel des Inhalts Natrium citricum, um eine 

 Gerinnung des Blutes zu verhüten. Auf das Gummirohr kommt be- 

 hufs späteren Verschlusses ein Quetschhahn, sodann wird mittels 

 einer Spritze die Flasche bis zu einem gewissen Grade luftleer ge- 

 macht, der Quetschhahn geschlossen und au das freie Ende des 

 Gummischlauches wird eine Hohlnadel angebracht, die durch ein 

 passendes Reagensgläschen umschlossen werden kann ; in dieser Ver- 

 fassung wird der ganze Apparat sterilisiert und ist dann jederzeit 

 fertig zum Gebrauch. W. Hoff mann {Cohlenx). 



Kral, F., tn^er einfache expeditive Geißelfärbungs- 

 methoden (Verh. d. Ges. deutsch. Naturf. u. Ärzte, 

 74. Vers. ^z. Karlsbad, IL Teil, 2. Hälfte [erschienen 1903], 

 p. 621). 

 Um auf einem einfachen und expeditiven Wege die Geißeln 

 aller beweglichen Bakterien in allen Intensitätsabstufungen zu färben, 

 ist ausreichend eine 1 ^/.^ Minuten lange P^inwirkung einer genau 

 nach LöFFLERS Vorschrift bereiteten und in luftdicht verschlossenen 

 Gefäßen aufbewahrten Beize mit darauffolgender Wasserspülung und 

 ebenso langer Färbung mit einprozentiger wässeriger Fuchsinlösung 

 oder 5 bis 8 Sekunden lauger Färbung mittels Ziehl sehen Karbol- 

 fuchsins unter Wegfall von Alkoholentfärbung und Erwärmen. Hier- 

 bei sind vollkommen niederschlagsfreie Stellen in den Präparaten 

 weit häufiger als bei nach andern Methoden behandelten Präparaten. 

 Wenn man die Beizdauer entsprechend verlängert, so kann man 

 dieselbe Beize auch nach eingetretener Abschwächung ihres Beiz- 

 vermögens jahrelang benutzen. 




296 Referate. XXII, 2. 



Um sofortige Geißelfärbungen vornehmen zu können , ohne daß 

 man über eine ausgereifte und brauchbare Beize verfügt, verfahre man 

 nach folgendem Recept : Von einer Tanninfiiclisiulösung aus 100 Teilen 

 Tannin , 8 Teilen kristallisiertem Fuchsin und 400 Teilen Wasser 

 bringt man 20 cc in ein schmales Becherglas und gießt unter leb- 

 haftem Schwenken dieser Lösung eine Lösung von . 5 g Ferrosulfat 

 in 20 cc Wasser hinzu. Nachdem man das Gemisch , bedeckt mit 

 einem Uhrschälchen, 15 Minuten der Ruhe überlassen hat, ist sofort 

 mit der Geißelfärbung zu beginnen , weil das Beizvermögen dieser 

 Beize binnen kurzer Zeit verloren geht. Die Beizdauer beträgt eine 

 bis l^/o Minuten; man färbt nach Spülung mit Wasser, ohne das 

 Deckgläschen zu trocknen, 8 Sekunden lang mit Karbolfuchsin, gleich- 

 falls ohne Erwärmen und ohne Entfärben mit Alkohol nach dem 

 Beizen. Beide Methoden sollen sich auch sehr gut zu einer negativen 

 Kapseldarstellung eignen. 



Um möglichst normale Geißellagerung zu erzielen, läßt mau die 

 Bakterienmasse sich spontan ohne mechanische Intervention in Wasser, 

 eventuell bei Brutwärme, verteilen, benetzt eine Seite der Deck- 

 gläschen durch Berühren des Flüssigkeitsspiegels , saugt rasch die 

 überschüssige Flüssigkeit ab und läßt die horizontal gelagerten Deck- 

 gläschen unter einer Glasglocke trocknen. 



Wanger in {Halle a. S.). 



Kral, F., Zur Differenzierung und objektiven Dar- 

 stellung des Z e 1 1 i n h a 1 1 e s von Hefe- und Spalt- 

 pilzen (Verh. d. Ges. deutsch, Naturf. u. Ärzte, 74. Vers, 

 z. Karlsbad, IL Teil, 2. Hälfte [erschienen 1903], p. 621—622). 

 Um bei der mikrophotographischen Darstellung der lebenden 

 Hefe- und Bakterienzelle auf dem Negativ Zellkontur und -einschlüsse 

 gut differenziert zu erhalten , ist es erforderlich , die Zellen mit 

 Reagentien zu behandeln , welche , ohne ihre Größenverhältnisse zu 

 beeinflussen, verschiedene Reaktionen auf Zellmembran, Vakuolen, 

 Fetttröpfchen , Körnehen , Plasma etc. auslösen. Am geeignetsten 

 für diesen Zweck hat Verf. die Ernst sehe Vitalfärbung mit Neutral- 

 rot und die Glykogenreaktion mittels LuGOLScher Lösung, beide 

 einzeln oder miteinander kombiniert, befunden. Bringt man Bakterien, 

 Hefen, Eumyceten und Algen in Wasser auf das Deckglas und fügt 

 ein kleines Tröpfchen Jodjodkaliumlösung zu, so weisen sie in ihren 

 einzelnen Zellbestandteilen, je nach der Beschaffenheit derselben, die 

 gelbe Eiweiß-, eventuell auch die braunrote Glykogen- und die blaue 




XXII, 2. Referate. 297 



Granulosereaktiou auf, also Farben, welche sich vorzüglich zur Mikro- 

 photographie eignen. — Neben Neutralrot hat Verf. zur Vitalfärbung 

 auch Methylenblau , Safranin und Thionin verwendet. Die besten 

 Resultate erzielte er mit Neutralrot an Hefepilzen; die Einschlüsse 

 der Zellen und ihrer Vakuolen weisen bei der Behandlung mit Spuren 

 von Neutralrot einen außerordentlichen Reichtum an den verschieden- 

 sten Farbtönen auf. Setzt man zu einem solchen Präparate ein 

 Tröpfchen Lugol scher Lösung zu, so vollzieht sich ein plötzlicher 

 Farbenwechsel des in allen Schattierungen von Rot gefärbten Zell- 

 inhaltes in Gelb bis Braun. Einzelne dunkelrote Körnchen und Zellen 

 verändern ihre Farbe nicht ; dagegen können einzelne Zellteile die 

 blaue Granulosereaktion annehmen, andere farblos bleiben. Bakterien, 

 die vorher gleichmäßig rot gefärbt waren , können nun braun bis 

 dunkelbrau, fast schwarz erscheinen. Es treten demnach Farbreak- 

 tionen auf, wie sie für die Mikrophotographie nicht erwünschter sein 

 könnten. Man erhält von solchen Präparaten schon ohne Lichtfilter 

 und auf nicht orthochromatischen Platten gute Resultate, kaum noch 

 mit kurzwelligem Licht (Zettnow- oder Ferricyankaliumfilter) und 

 orthochromatischen Platten. Wangerin {Halle a. S.). 



D. Botanisches, 



Zacliarias , E. , Über die C y a n o p h y c e e n (Mitt. a, d. botan. 



Staatsinstituten in Hamburg, 3. Beih. z. Jahrb. d. Hamburg. 



wissenschaftl. Anstalten 1904, p. 47). 

 Die Arbeit bringt in erster Linie eine ausführliche kritische 

 Besprechung der Kohl sehen Bücher über Cyanophyceeu. Die neuen 

 eigenen Versuche des Verf. beziehen sich hauptsächlich auf das 

 mikrochemische Verhalten der Cyanophycinköruer und ihre Löslich- 

 keit in verdünnten Säuren. Küster {Halle a. S.). 



Claussen , P. , Zur Entwicklung der Ascomyceten. Bou- 

 DiERA (Botan. Zeitg. Bd.LXIH, 1905, Abt. 1, H. 1, 2, p. 1). 



Zum Fixieren des Materials benutzte Verf. folgende Flüssig- 

 keiten : 



1) Schwächere FLEMMiNGSche Flüssigkeit: Dauer der Fixierung 

 10 Minuten, mehrstündiges Auswaschen in fließendem Wasser. Über- 




298 Keferate. XXII, 2. 



tragung- in 35prozeutigen Alkohol, Härtung in üblicher Weise. Fixiert 

 die Asci gut und die schraubigen luitialorgane. 



2) MERKELSche Flüssigkeit: Dauer der Fixierung etwa 2 Mi- 

 nuten, mehrmaliges Auswaschen in öOprozentigem Alkohol. Härtung. 

 Fixiert die Initialorgane gut. 



3) VOM RATHSche Flüssigkeit II, 1 -\- 20. Dauer der Fixierung 

 2 Minuten , gründliches Auswaschen mit öOprozentigem Alkohol, 

 Härtung. 



Bei der Einbettung in Paraffin verfährt man nach den üblichen 

 Methoden, doch sind allzu hohe Temperaturen (über 55^ C.) zu 

 meiden. Schwierigkeiten macht die Färbung der Kerne in den 

 schraubigen Initialorganen , da das Plasma die Farbstoffe so stark 

 speichert. Die besten Resultate bei Untersuchung der Schrauben- 

 kerne liefert Flemmings Safranin-Gentianaviolett-Orange G -Verfahren. 

 Heidenhains Häraatoxylin- Eisenalaun gibt ebenfalls gute Resultate, 

 wenn man mit Eosin-Nelkenöl gegenfärbt ; die Ascuskerne sind leicht 

 zu färben, — am besten mit P^eemmings Dreifarbengemisch. 



Hat man nach Flemming oder Merkel fixiert , so färbe man 

 mit Safranin-Gentianaviolett-Orange G, nach Fixierung in vom Rath- 

 scher Flüssigkeit mit Heidenhains Hämatoxylin. 



Küster {Halle a. S.). 



Senft , E. , Über den mikrochemischen Z u c k e r n a c h w e i s 

 durch essigsaures Phenylhydrazin (Sitzber. d . 

 Akad. Wiss. Wien, math.-naturw. Kl., Bd. CXIII, 1904, 

 Abt. 1, p. 3). 

 Verf. modifiziert die FiscHERSche Phenylhydrazinmethode vor 

 allem dadurch, daß er beide Komponenten des Reagens, das salz- 

 saure Phenylhydrazin wie das essigsaure Natrium in Glyzerin im 

 Verhältnis von 1 : 10 löst. Beide Vei'bindungen sind in Glyzerin 

 leicht löslich. — Die Lösungen sind jahrelang haltbar; das Nach- 

 dunkeln der Phenylhydrazinlösung beeinträchtigt die Reaktion in 

 keiner Weise. 



Verf. benutzt keine in Wasser aufgeweichten Schnitte — wegen 

 der Löslichkeit des Zuckers — , sondern frisches Material, Alkohol- 

 oder Glyzerinmaterial oder bei trockenen Objekten — Drogueu etc. — 

 unaufge weichte Schnitte. Auf dem Objektträger wird von beiden 

 Lösungen je ein Tropfen aufgetragen , die beiden Tropfen gut ver- 

 mischt und die Schnitte hineingelegt. Die Präparate werden alsdann 

 am siedenden Wasserbad eine halbe Stunde erwärmt. Schon beim 




XXII, 2. Referate. 299 



Abkühlen kann man gewöhnlich unter dem Mikroskop sehr schöne 

 Garben mid Büschel der Osazonkristalle wahrnehmen. — Das Er- 

 wärmen der Schnitte dient zumeist nur zur Beschleunigung der Reak- 

 tion ; in vielen Fällen tritt auch in der Kälte schon die gleiche 

 Reaktion ein, — allerdings entstehen nur kleine Kristallbüschel und 

 vorzugsweise Sphärokristalle. Au Schnitten , welche nicht erhitzt 

 worden sind , kann man auch die Lokalisation des Zuckergehaltes 

 studieren. — Je wasserreicher die untersuchten Gewebe sind , um 

 so schöner fallen die Osazonkristalle aus. 



Die Weiterbehandlung der nach des Verf. Methode untersuchten 

 Schnitte macht keine besonderen Schwierigkeiten , nur ist die An- 

 wendung von Alkohol und alkoholischen Lösungen zu vermeiden ; 

 daher ist auch Kanadabalsam ausgeschlossen. Gegen SOprozentige 

 Kalilauge sind die Osazonkristalle widerstandsfähig, auch gegen 60pro- 

 zentige Chloralhydratlösung hinreichend resistent. Zur Anfertigung 

 von Dauerpräparaten verwende mau Glyzerin und Glyzeringelatine. 



Küster {Halle a. S.). 



Albanese , N. , Ein neuer Fall von E n d o t r o p i s m u s des 

 Pollenschlauches und abnormer Embryosack- 

 entwicklung bei Sibbaldia procujnbens L. (Sitzber. 

 d. Akad. Wiss. Wien, math.-naturw. Kl., Bd. CXIII, 1904, 

 Abt. 1, p. 653). 

 Verf. färbt die Präparate mit Hämatoxylin nach Heidenhain, 

 um den Verlauf des Pollenschlauches im Gewebe des Gynaeceums 

 deutlich zu machen. — Safranin färbt die Kerne des Embryosackes 

 und besonders die Nukleolen kräftig. Küster {Halle a. S.). 



Ernst, A., Zur Kenntnis des Z e 1 1 i n h a 1 1 e s von D e r b e s i a 

 (Flora Bd. XCIII, 1904, p. 514). 

 Die von ihm gefundenen Eiweißkristalloide im Zellinhalt von 

 Derbesia prüfte Verf. mit verschiedenen Reagentieu. Sie färben sich 

 mit Jod etc. und nehmen Eosin, Säurefuchsin, Safranin, Methylen- 

 blau, Methylviolett u. a. reichlich auf. Werden kristalloidhaltige 

 Schläuche in einer wässerigen Tanninlösung gebeizt und nach sorg- 

 fältigem Waschen in Wasser in einprozentige Osmiumsäure gebracht, 

 so färben sich die Kristalloide braun, Beizung mit 25prozentiger 

 Tanuinlösung und Behandlung des ausgewaschenen Materials mit 

 Eisensulfat bedingt tiefblaue bis schwarze Färbung. 



Küster {Halle a. S.). 




300 Referate. XXII, 2. 



Woycicki, Z., Einige neue Beiträge zur Entwicklungs- 

 geschichte von B a s i cl i b 1 u s R a n a r u m (Flora 

 Bd. XCIII, 1904, p. 87). 

 Gute Resultate erzielte Verf. durch Fixierung mit Merkel scher 

 oder Kaiser scher Flüssigkeit. Gefärbt wurde mit Hämatoxylin nach 

 Heidenhain oder Delafield. Küster {Halle a. S.). 



Björkeiiheim, C. G., Beiträge zur Kenntnis des Pilzes 

 in den W u r z e 1 a n s c h w e 1 1 u n g e n von A 1 n u s i n - 

 cana (Zeitschr. f. Pflanzenkrankh. Bd. XIV, 1904, p. 128). 

 Verf. fixierte sein Material in Merkel scher Flüssigkeit und 

 brachte es nach dem Auswaschen in Alkohol steigender Konzentra- 

 tion bis 98 Prozent zur dauernden Aufbewahrung. Die Schnitte 

 wurden mit Ziehl schein Karbolfuchsin gefärbt. — Verf. empfiehlt 

 besonders Freihaudschnitte an fixiertem und frischem Material aus- 

 zuführen. Den Zerfall der Hyphen in einzelne stäbchenartige Glieder 

 konnte Verf. bei Untersuchung nicht eingebetteten Materials nie kon- 

 statieren , vielleicht handelt es sich bei dem Zerfall um eine Folge 

 der Einbettung (Wasserentziehung). Küster [Halle a. S.). 



Michniewicz, H. R. , Über Plasmodesmen in den Kotyle- 

 donen von Lupin US-Arten und ihre Beziehung 

 zum interzellularen Plasma (Österr. Bot. Zeitschr. 

 Bd. LIV, 1904, p. 165). 

 Um in den Zellwäudeu der Kotyledonen von Lupinus angusti- 

 folius die Plasmodesmen sichtbar zu machen, kocht Verf. angeschnittene 

 Kotyledonen einige Minuten mit absolutem Alkohol. Dann werden 

 Schnitte aus den oberflächlichen, völlig entwässerten Teilen an- 

 gefertigt und in konzentrierte Chlorzinkjodlösung übertragen.^ 



Küster [Halle a. S.). 



1) Nach Kny (Ber. d. deutsch. Bot. Ges. Bd. XXII, 1904, p. 347) 

 handelt es sich nur um radikale Wandstrukturen , nicht um Plasmo- 

 dermen. 




XXU, 2. Referate. 301 



B, Mineralogisch - Petrographisches, 



Quincke, G., Doppelbrecluing der Gallerte beim Auf- 

 quellen und Schrumpf e n (Sitzber. d. k. preuß. Akad. 

 d. Wiss. 1904, p. 258—265). 

 Der Verf. nimmt bei doppeltbreehenden Gallerten das Vor- 

 handensein von unsichtbaren Schaumzellen an, deren Menge schwan- 

 ken und daher auch einen von Stelle zu Stelle wechselnden Grad 

 der Doppelbrechung innerhalb einer Gallertmasse erzeugen kann. 

 Je nachdem ein Aufquellen oder Schrumpfen statttindet, ist an der 

 Außenseite der Gallerte der Charakter der Doppelbrechung positiv 

 oder negativ, gegen das Innere zu kehrt sich das Vorzeichen um. 

 Ähnlich den festen Gallerten verhalten sich auch klebrige Flüssig- 

 keiten, doch ist bei letzteren die Doppelbrechung nur vorübergehend, 

 die Relaxationszeit der diktierten Flüssigkeit also meist nur kurz, 

 während starre Gallerten festgewordene Schaumwände mit unendlich 

 großer Relaxationszeit haben sollen. Die Richtung der größten 

 Quellung und Schrumpfung fällt mit der Richtung der größten Dila- 

 tation der klebrigen Schaumwände oder der optischen Achse der 

 Doppelbrechung an den verschiedenen Stellen einer flüssigen Gallerte 



E. Sommerfeldt {Tübingen). 



Quincke , G. , Über Ausbreitung und E x t e n s i o n s k r a f t 

 (Ann. d. Phys. [4] XV, 1904, p. 55—60). 

 Der Verf. weist auf den Zusammenhang seiner Theorien über 

 Tropfen- und Schaumbildung (vgl. d. vor. Ref.) mit seinen früheren 

 Arbeiten über Kapillarität und Oberflächenspannung liin; sodann 

 wendet sich derselbe besonders gegen eine Arbeit von G. van der 

 Mensbuugghe , welcher bestritten hatte , daß durch periodische Aus- 

 breitung von Seifenlösung an der Grenzfläche von Ol und Wasser 

 die freiwillige Bildung von Ölemulsionen herbeigeführt werden könne. 

 Quincke weist nach , daß die Extensionskraft , welche nach Mens- 

 BRUGGHES Meinung das Öl in kleine Tröpfchen zerreiße, lücht nach- 

 weisbar sei, da die Ausbreitung noch nicht während der chemischen 

 Wirkung erfolge, sondern oft erst 30 Sekunden später. * 



E. Sormnerfeldt {Tübingen). 




302 Referate. XXII, 2. 



Hlawatsch , C, Bestimmung der Doppelbrechung für 

 verschiedene Farben an einigen Mineralien 

 (TscHERMAKS miueral. u. petr. Mitt. Bd. XXIII, 1904, p. 415 

 bis 450 m. 3 Fig.). 

 Die Mineralien Äkermannit , Melilith , Gehlenit zeigen eine ähn- 

 liche Abhängigkeit der Interferenzfarben von der Dispersion wie der 

 vom Verf. nach dieser Richtung bereits früher untersuchte Vesuvian. 

 Teils an natürlichem Vorkommen , teils an Hüttenprodukten werden 

 bei den drei erstgenannten Mineralien mittels Polarisationsmikroskopes 

 und Babinet sehen Kondensators die optischen Eigenschaften bestimmt, 

 wobei sich zeigt, daß die zweigliederige CAucHYSche Dispersions- 

 formel diesen Erscheinungen der Dispersion der Doppelbrechung nicht 

 genügt. E. Sommerfeldt {Tübingen). 



Braun , F., Einige Beobachtungen, die sich auf künst- 

 liche Doppelbrechung beziehen (Ann. d. Phys. [4] 

 XVI, 1905, p. 278—281 m. 1 Fig.). 

 Der Verf. beschreibt mehrere Verfahren, um durch Übereinander- 

 schichten von Gelatine- oder Kollodiumhäutchen die optischen Er- 

 scheinungen ein- und zweiachsiger Kristalle nachzuahmen. Neu sind 

 sind besonders die Beobachtungen, welche sich auf die Ausscheidung 

 mikroskopischer Teilchen beim Einlegen von Gelatineplatten in Methyl- 

 alkohol und auf die hierbei entstehende Doppelbrechung beziehen; 

 dieselbe verschwindet nur zum Teil beim Wiedereintrocknen der 

 Methylalkoholpräparate. E. Sommerfeldt {Tühhigen). 



Braun, F., Herstellung doppelt brechender Körper aus 

 isotropen Bestandteilen (Physik. Zeitschr. V, 1904, 

 p. 199 — 203). 

 Der Verf. weist zunächst theoretisch nach , daß ein Gemenge 

 zweier einzeln isotroper Medien doppelt brechend sein kann , wenn 

 die Korngröße des Gemenges so klein ist, daß es als homogen im 

 Vergleich zur Wellenlänge aufgefaßt werden darf. Notwendig hier- 

 für ist , daß die Dielektrizitätskonstanten der sich durchdringenden 

 Medien verschieden sind. Für elektrische Wellen weist der Verf. 

 auch experimentell diese Entstehungsursache der Doppelbrechung nach 

 und vermutet daher, daß in vielen Fällen auch optische Doppel- 

 brechungserscheinungeu (z. B. bei Mischkristallen die sogenannten 

 optischen Anomalien) aus dem gleichen Grunde entstanden sein 

 können. E. Sommerfeldt {Tübinge7i). 




XXII, 2. Referate. 303 



Hinden, F., Neue Reaktionen zur Unterscheidung von 

 Caicit und Dolomit (Verli. d. natnrforsch. Ges. in Basel 

 Bd. XV [2], 1904, p. 201—202). 

 Als mikrochemische Reaktion zur Unterscheidung- von Kalkspat 

 und Dolomit empfiehlt der Verf. die Behandlung mit lOprozentiger 

 Eisenchloridlösung , wobei letzterer unverändert bleibt , ersterer hin- 

 gegen sich rotbraun färbt. Auch die Lösungen von Bleiazetat, 

 Kupfersulfat, Quecksilberchlorid werden hinsichtlich ihrer Einwirkung 

 auf beide Mineralien geprüft. ^ Sommerfddt {Tübingen). 



* 

 Thugutt, St. J., Fritz II i n d e n s „N eue Reaktionen zur 

 Unterscheidung von Caicit und Dolomit" (Zen- 

 tralbl. f. Min. Geol. Pal. 1905, p. 265—266). 

 Der Verf. weist darauf hin, daß bereits vor Hinden (vgl. d. 

 vorige Ref.) sehr ähnliche und zum Teil noch vollständiger aus- 

 gearbeitete Unterscheidungsreaktionen zwischen Kalkspat imd Dolo- 

 mit von Lemberg beschrieben worden sind. 



E. Sommerfeldt {Tübingen). 



Lehmann, 0., Flüssige Misch- und Schichtkristalle (Ann. 

 d. Phys. [4] XVI, 1905, p. 160—165). 

 Es wurde ein neuer Repräsentant der kleinen Klasse organischer 

 Körper aufgefunden , welche eine flüssige doppeltbrechende Modi- 

 fikation aufweisen (vgl. diese Zeitschr. Bd. XXI, 1904, p. 104). Be- 

 sonders interessante Eigenschaften zeigten die flüssig - kristallinen 

 Mischungen dieses Körpers, des Anisaldazins, mit Methoxj^zimtsäure, 

 und zwar ließen sich bei geeignetem Mischungsverhältnis starke und 

 mit farbenprächtigen Erscheinungen verbundene Schwankungen der 

 Interferenzfarben mikroskopisch nachweisen, welche an die plötzlichen 

 Umwandlungen polymorplier Modifikationen erinnerten. Jedoch scheinen 

 nicht solche , sondern nur Schichtenbildungen wirklich statt- 

 zufinden, indem die beiden Substanzen in einem beschränkten Ver- 

 hältnis miteinander mischbar sind und die sich übereinander lagernden 

 dünnen Schichten ihrer chemischen Zusammensetzung nach den End- 

 punkten des Lückeniutervalls entsprechen. Von Interesse sind auch 

 die mikroskopischen Beobachtungen des Verf. über Ätzfiguren, welche 

 sich an den flachgedrückten Tropfen erkennen lassen. 



E. Sommerfeldt {Tübingen). 




Q 



04 Referate. XXII, 2. 



Richards, Th. W., a. Wells, R. Cl., The Nephelometer, 



au Instrument for Detecting and Estimating 



opalasceut Precipitations (Amer. Chem. Journ. vol. 



XXXI, 1904, p. 235—243). 



Um zu entscheiden, ob in einer Flüssigkeit feine Niederschläge 



suspendiert sind , bestimmt der Verf. die Intensität des reflektierten 



Anteils eines auffallenden Lichtstrahles , dessen Lichtstärke konstant 



bleibt. Dadurch wird zugleich ein quantitatives Maß für die Menge 



dieser , zum Teil submikroskopischen Teilchen gewonnen , da die 



Intensität des reflektierten Lichtes dieser Menge proportional sein 



muß. Die zu bestimmende Lösung und die Vergleichslösung müssen, 



wenn die quantitativen Angaben genau sein sollen, vollkommen gleichen 



Versuchsbediugungen unterworfen werden. 



E. Sommerfeldt {Tübingen). 



Donau , Über die Färbung der B o r a x p e r 1 e durch kol- 

 loidal gelöste Edelmetalle (Monatshefte f. Chem. 

 Bd. XXV, 1904, p. 913—918). 

 Der Verf. gibt einige Bestimmungsarten der Edelmetalle an, 

 welche die bisherigen mikrochemischen Methoden an Empfindlichkeit 

 wesentlich übertreffen und auf den Färbungen beruhen, welche kol- 

 loidal verteilte Spuren dieser Metalle in der Boraxperle verursachen. 

 Von besonderem Interesse sind die vergleichenden Angaben des Verf. 

 über die Empfindlichkeit der verschiedenen Mikroreaktionen der Edel- 

 metalle. Es lassen sich z. B. beim Gold mikrochemisch durch Zinn- 

 chlorür nur 2 spektraaualytisch noch 0,13 durch kolloidale Färbung 

 aber sogar 0,002 Mikromilligramme nachweisen. 



E. Sommerfeldt {Tübingen). 



Brauns, R., Mineralogie. 3. Aufl., Leipzig (J. G. Göschens Ver- 

 lag) 1905; 134 pp., 132 Figg. 

 Die ^Entwicklung der Mineralogie während der letzten Jahre ist 

 in der neuen Auflage des Büchleins nicht unberücksichtigt geblieben, 

 sondern die Seitenzahl sowie auch die Textfiguren wurden im Ver- 

 gleich zur zweiten Auflage vermehrt (diese um zwei, jene um vier). 

 Die in der Kürze ihren Vorzug suchende Tendenz der „Göschen- 

 Bändchen" ist in zweckmäßiger Weise mit dem Bestreben, möglichste 

 Vollständigkeit zu erreichen, vom Verf. vereinigt worden. 



E. Soynmerfeldt {Tübingen). 




XXII, 2. Referate. 305 



Behrens, H. , Reaktionen für den mikrochemischen 

 Nachweis organischer Basen (Zeitschr. f. anal. Chem. 

 Bd. XXXXIII, 1904, p. 333—355). 

 Im Anschhiß an das dritte Heft seiner „Mikrochemischen Ana- 

 lyse" teilt der Verf. zunächst Reaktionen zur Unterscheidung der 

 einzelnen C4ruppen organischer Basen mit, z. B. zur Unterscheidung 

 von aliphatischen und aromatischen, sowie von primären, sekundären 

 und tertiären Basen. Sodann wird auf einzelne Gruppen im speziellen 

 eingegangen, und zwar auf das Anilin und seine Homologen, die 

 Naphtylamine, auf die Amidophenole, die azetylierten Basen, auf die 

 Benz3daraine, die Diamine, Phenylhydrazine, Naphtylhydrazine, ferner 

 auf eine Reihe von heterozyklischen Basen und Alkaloiden. 



, E. Sommer felcU {Tübingen). 



Vaniuo , S. , u. Hartl , F. , Über neue B i 1 d u n g s w e i s e n 

 kolloidaler Lösungen und das Verhalten der- 

 selben gegen Baryumsulfat (Ber. d. deutsch, chem. 

 Ges. Bd. XXXVII, 1904, p. 3620—362.3). 

 Die Verf. beschreiben eine Methode , um durch Schütteln mit 

 Baryumsulfat zu entscheiden , ob die Färbung einer Flüssigkeit von 

 einer gelösten oder von einer submikroskopisch verteilten kolloidalen 

 Substanz herrührt. ^ Sommerfeldt {Tübingen). 



Bredi§-, G., u. Scliukowsky, G. V., Prüfung der Natur der 

 flüssigen Kristalle mittels elektrischer K a t a - 

 phorese (Ber. d. deutsch, chem. Ges., Bd. XXXVII, 1904, 

 p. 3419—3425). 

 Um die Frage zu entscheiden , ob die flüssigen Kristalle sub- 

 mikroskopische Suspensionen enthalten, bedienten sich die Verf. einer 

 elektrochemischen Methode. Durch Wanderung der suspendierten 

 Teilchen im elektrischen Strome können kolloidale Flüssigkeiten, 

 Emulsionen u. dgl. meistens geklärt werden ; es erwies sich aber 

 in allen untersuchten Fällen (p-Azoxyanisol , Anisaldizin, Cholesterin- 

 propionat, Kondensationsprodukte von Benzaldahyd mit Benzidin, 

 ferner von Toluylaldehyd mit Benzidin) eine Trübungsabnahme nach 

 dieser Methode als undurchfühlbar, so daß es auch hiernach naheliegt, 

 die Körper als einheitliche Produkte aufzufassen. 



E. Sommerfeldt {Tübingen). 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 2. 20 




306 Referate. XXII, 2. 



Braun, F., Über metallische Gi tte rpolarisatioii, ins- 

 besondere ihre Anwendung- zur Deutung mikro- 

 skopischer Präparate (Ann. d. Phys. [4], Bd. XYI, 

 1905, p. 238—278). 

 Braun , F. , Der HertzscIic Gitter versucli im Gebiete 

 der sichtbaren Strahlung (Sitzber. d. Akad. d. Wiss. 

 Berlin, math.-physik. KL, 1904, p. 154). 

 Zur Erklärung des Pleochroismus bei manchen Färbungen, Gläsern, 

 isomorphen Mischkristallen und anderen „festen Lösungen" hatte der 

 Verf. bereits früher die Hypothese aufgestellt, daß die Partikeln des 

 „gelösten" Stoftes in ähnlicher Weise wie ein submikroskopisches 

 Hertz sches Gitter in dem festen Lösungsmittel angeordnet seien. 

 Bisher war diese Hypothese nur durch Beobachtungen im durch- 

 gehe n d e n Licht geprüft , nunmehr jedoch geht der Verf. zu den 

 besonders interessanten Folgerungen, welche sich für das reflek- 

 tierte Licht aus seiner Annahme ergeben , über. Vorzugsweise 

 wurden die nach einer Methode Ambronns hergestellten Goldfärbungen 

 (z. B. bei Pinus silvestris , Nesselfasern u. a.) untersucht. Die Be- 

 schreibung der Versuchsanordnung enthält bemerkenswerte Einzel- 

 heiten über die Anwendung des neuen Zelss sehen Vertikalilluminators 

 für starke Vergrößerungen. 



Es zeigte sich, daß die Gitterstäbe in den Gefäßwänden liegen 

 und denselben parallel sind , daß ferner in den Gittern für alle 

 Wellenlängen eine Absorption durch Joule sehe Wärme stattfindet. 

 Auch für Metallzerstäubungen wurde die Gitterstruktur festgestellt, 

 indem z. B. bei zerstörtem Platin die Durchlaßfarbe gelblich oder 

 grünlich-bläulich erschien , je nachdem die Lichtschwingungen quer 

 oder parallel zu den Gitterstäbchen erfolgten. Auch hier bildeten 

 — ■ ebenso wie bei den imprägnierten Pflanzenfasern — die Er- 

 scheinungen im reflektierten Licht die Ergänzung zu denjenigen im 

 durchfallenden Licht. E. Sonimerfeldt {Tübingen). 



Becke , F. , Optische U n t e r s u c h u n g s m e t h o d e n (Denkschr. 



d. math.-naturw. Kl. d. k. Akad. d. Wiss., Wien, Bd. LXXV, 



1904, p. 55—95). 

 Zur mikroskopischen Bestimmung der Mineralien hat der Verf. 

 eine Reihe von Methoden ausgearbeitet, welche auf den Polarisations- 

 erscheinungen im parallelen und konvergenten Licht basieren, teil- 

 weise auch die Benutzung von Hilfskristallplatten (Gipsblättchen, 

 BABiNET-Kompensator etc.) bedingen. Dieselben werden in einer für 




XXII, 2. Referate. 307 



die Praxis sehr zweckmäßigen Art beschrieben und auch theoretisch 

 auf eine neue Weise behandelt, nämlich unter Zuhilfenahme der vom 

 Verf. unter der Bezeichnung „Skiodromen" eingeführten Kurven. 

 Es leiten sich diese Kurven von den Kegeln ab, welche der Forde- 

 rung genügen , daß die Lichtgeschwindigkeit für alle in ihrer Ober- 

 fläche gelegenen Richtungen gleich ist; die Skiodromenmethode läßt 

 die Haupttypen der Isogyren besonders einfach erkennen. Auch die 

 Methode des Verf. , den Winkel der optischen Achsen mittels eines 

 auf das Mikroskop aufgesetzten Abbe sehen Zeichenapparats zu be- 

 stimmen, ist in erweiterter Form und mit neuen Berücksichtigungs- 

 verfahren der Fehlerquellen beschrieben. 



E. Sommerfeldt {Tübingen). 



Stark , M. , Zusammenhang des B r e c h u n g s e x p o n e n t e n 

 natürlicher Gläser mit ihrem Chemismus (Tscher- 

 MAKS min. u. petr. Mitt., Bd. XXIII, 1904, p. 536 — 550). 

 Nach der mikroskopischen Methode F. Beckes bestimmt der 

 Verf. den Brechungsexponenten bei einer großen Zahl von Gesteins- 

 gläsern und stellt die Abhängigkeit desselben von dem Kieselsäure- 

 gehalt des Gesteines tabellarisch zusammen. Auch wurden die von 

 dem GLADSTONSchen Gesetz geforderten Werte der Brechungsexpo- 

 nenten mit den direkt beobachteten verglichen , wobei sich nur in 

 einem Falle eine Ausnahme von diesem Gesetz ergab. 



E. Sommerfeldt (Tübingen). 



20* 




308 ' Neue Literatur. XXII, 2. 



Neue Literatur. 



1. Lehr- und Handbücher. 



Bayon, P. G. , Die histologischen Untersuchungsmethoden des Nerven- 

 systems. Würzburg (Stuber); VIII + 187 pp. 3-60 M. 



Bolles Lee, A., The Microtomist's Vademecum. A Handbook of the 

 methods of microscopic anatomy. 6tii edit. London (J. a. A. CLmrchill) 

 1905; X + 538 pp. 



Lo Forte , Giac. , II microscopio : Manuale pratico per i primi esercizi di 

 microscopia. 6 Fig. Milano (Soc. edit. Sonzogno) 1904. 62 pp. 



ten Siethoff, E. G, A. , Handleiding bij het mikrophysisch onderzoek van 

 urine. Rotterdam 1904; 308 pp. 



2. Mikroskop und mikroskopische Apparate. 



a. Neue Mikroskope. 



Ladd's Student's Microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 2, p. 238). 

 Portable Microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 2, p. 239). 

 Reichert's Large Stand No. 1 A, titted with Tip-up Stage-Clips (Journ. 



R. Microsc. Soc. 1905, pt. 2, p. 243; vgl. C. Reichert s Katalog No. 25, 



1904, p. 17). 

 Reichert's Lai-ge Mineralogical Stand (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 2, 



p. 247; vgl. C. Reichert s Katalog No. 25, 1904, p. 28). 

 Reichert's Microscope for determining hardness of substances (Journ. R. 



Microsc. Soc. 1905, pt. 2, p. 247; vgl. C. Reichert s Katalog No. 25, 



1904, p. 36). 




XXII, 2. Neue Literatur. 309 



Eeichert's New Mineralogical Stand (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 2, 



p. 245; vgl C. Reicherts Katalog No. 25, 1904, p. 30). 

 Reichert's. New Large Stand A 1 , with extra wide tube and new lateral 



micrometer-screw (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 2, p. 241; vgl. 



C. Reicherts Katalog No. 25, 1904, p. 14). 

 Zeiss' New Laboratory Stand (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 2, p. 240; 



vgl. Carl Zeiss' Spezialkatalog No. 10, 1904). 



b. Objective. 



H. , Construction of aplanatic combinations of lenses with or without 



achromatism IV. (Engl. Meclianic 1905, vol. LXXX, p. 595). 

 Malassez, L., Sur la notation des objectifs microscopiques. 2 Fig. (Arch. 



d'Anat. microsc, t. VII, fasc. 2, p. 270—350). 

 Malassez, L., Sur la notation des objectifs microscopiques [3. Note] (Compt. 



Rend. Soc. Biol. t. LVII, 1904, no. 35, p. 545). 

 Reichert's Objectives with Bourguet's Spring safety action (Journ. R. 



Microsc. Soc. 1905, pt. 2, p. 249; vgl. C. Reicherts Katalog No. 25, 



1904, p. 5). 



c. Beleuchtungsaj)parate. 



(Ross, H. C.,) Electric warm-stage for use with the microscope combined 



with a Nernst lamp to illuminate the microscope (Journ. R. Microsc. 



Soc. 1905, pt. 2, p. 2.50). 

 Troester, C, Über Dunkelfeldbeleuchtung (Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 2, 



Bd. XIV, 190.5, No. 15, 16, p. 511). 

 Baker's electric lamp for the microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, 



pt. 2, p. 252). 

 Improved methods of working with the vertical Illuminator (Journ. R. 



Microsc. Soc. 1905, pt. 2, p. 251). 

 Reichert's Swing-out Condensor and Iris Diaphragm (Journ. R. Microsc. 



Soc. 1905, pt. 2, p. 249; vgl. C. Reicherts Katalog No. 25, 1904). 




310 Neue Literatur. XXII, 2. 



d. Ultramikroskop. 



Marpmann, Über ultramikroskopisches Sehen (Zeitschr. f. angew. Mikrosk. 

 Bd. XI, 1905, H. 1, p. 1). 



Raehlmann, E., Das Ultramikroskop, seine Technik und seine Anwendung 

 zur Untersuchung von Blut- und Sekretbestandteilen (Zeitschr. f. ärztl. 

 Fortbildung Bd. II, 1905, p. 149). 



Beschreibung und Handhabung des Apparates zur Sichtbarmachung ultra- 

 mikroskopischer Teilchen, von Ernst Leitz, Optische Werkstätte in 

 Wetzlar. 2 Fig. (Wochenschr. f. Brauerei, Jahrg. XXII, No. 7, p. 99 

 —102). 



Über die Grenzen der miki'oskopischen Abbildung und die Sichtbarmachung 

 „ultramikroskopischer" Teilchen (Zentralzeitg. f. Opt. u. Mech. Bd. XXV, 

 1904, No. 5, p. 51). 



e. Verschiedenes. 



Braun, F., Über metallische Gitterpolarisation insbesondere ihre Anwendung 



zur Deutung mikroskopischer Präparate (Ann. d. Phys. Bd. XVI, 1905, 



p. 238-, vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 2). 

 Braun, F., Der Hertz sehe Gitterversuch im Gebiete der sichtbaren Strah- 

 lung (Sitzber. d. Akad. d. Wiss. Berlin, math.-physik. Kl., 1904, p. 154; 



vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 306). 

 Crisp , Fr. , Linnaeus and the use of the Microscope (Journ. K. Microsc. 



Soc. 1905, pt. 2, p. 2.53). 

 Fr. F. R. M, S., Amphipleura Lindheimeri (English Mechanic vol. LXXX, 



1904, p. 455). 

 Gordon, J. W., The theory of highly magniiied Images (Journ. R. Microsc. 



Soc. 1905, pt. 1, p. 1). 

 Guilloz, Th., Sur la notation des objectifs et des oculaires de microscope. 



(Compt. rend. Soc. Biol., T. LVIII, 1905, No. 3, p. 139—141. [Reun. 



Biol. de Nancy]). 

 Guilloz, Th., Sur la relation qui doit exister entre le numero de l'oculaire, 



le numero de l'objectif et son ouverture numerique pour pouvoir 



beneficier dans l'observation microscopique de tout le pouvoir separa- 



teur de l'instrument (Compt. rend. Soc. Biol., T. LVIII, 1905, no. 15, 



p. 730—732). 

 Hunter, J., „Gross" formula (Proc. Scot. Micr. Soc. vol. IV, 1903/1904, 



p. 49). 

 (Kingstbrd, T. G.,) Method of constructing small glass tanks (Journ. R. 



Microsc. Soc. 1905, pt. 2, p. 253; vgl. Journ, Queckett Micr. Club 1904, 



vol. IX, p. 117—120). 




XXII, 2. Neue Literatur. 311 



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der Dicke und des Brechungsindex von Planparallelphitten (Zeitschr. 



f. Instrumentenk. Bd. XXV, 1905, p. 87; vgl. Ann. de Chim. et de 



Phys. t. II, 1904, p. 78). 

 Martin, K., Über Zonenfehlerkorrektion durch geeignete Glaswahl (Zeitschr. 



f. wiss. Photogr. Bd. U, 1904, p. 231). 

 Milne, J. R., New form of spectrophotometer (Proc. Roy. Soc. Edinburgh 



1904, vol. XXY, p. 338—354). 

 Milne, J. R. , New form of Juxtapositor to bring into accurate contact 



the edges of the two beams of light used in spectrophotometry with 



an apphcation to Pohirimetrj^ (Proc. Roy. Soc. Edinburgh 1905, vol. 



XXV, p. 355—363). 

 (Mostyn, C.,) Resolution of Amphipleura pellucida (Knowledge vol. I, 



1904, p. 307; vgl. Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 1, p. 107). 

 Porter, A. B. , On Abbe's diffraction theory of microscopic vision. Ab- 



stract of a paper presented at the Chicago meeting of the Physical 



Society, April 21, 1905 (Phys. Rev. vol. XX, 386—287, 1905). 

 Rheiuberg, J. Ernst Abbe (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 2, p. 156). 

 Schott, O., Über eine neue Ultraviolett -Quecksilberlampe. UvioUampe 



(Mitteil. a. d. Glaswerk Schott u. Gen., Jena, 10 pp.). 

 VVinkelmann, A. , Ernst Abbe, Rede bei der von der Universität Jena 



veranstalteten Gedächtnisfeier am 2. Mai 1905 gehalten, 23 pp. Jena 



(G. Fischer) 1905. 2 M. 



Aperture table (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 1, p. 107). 



3. Mikrophotographie und Projektion. 



Bellieni, Methode pratique et simplifiee de microphotographie (C. R. Soc. 



Biol. t. LVIII, 1905, no. 7, p. 339—341). 

 Guilloz , Th., Determination de la grandeur reelle des objets dans les 



photomicrographies (C. R. Soc. Biol. t. LVIII, 1905, no. 7, p. 343). 

 Köhler, A., A microscopic arrangement for ultra-violet light and investi- 



gations of organic substances, with its use (The Opt. Instrum. Monthlj- 



vol. I, no. 1, 1905, p. 4). 

 Mathet, L., Sur la reproduction des objets difficiles par la photomicro- 



graphie (Rev. d. Sc. photographiques t. I, 1904, p. 18). 

 Spitta, E. J. , On suiting contrasts screens for the photography of bacte- 



ria (Photography vol. XVII, 1904, p. 577—579). 

 Zeiss' reflecting lantern, the epidiascope (The Opt. Instrum. Monthly vol. I, 



no. 1, 1905, p. 26). 




312 Neue Literatur. XXII, ■>. 



4. Präparationsmethoden im allgemeinen. 



Alfieri e Lacroix, Come si devono fare gli originali per le riproduzioni 



fotomeccaniche (Monit. Zool. Ital., Anno XVI, no. 4, p. 111 — 116). 

 Behring, E. v, , Über ultraiuikroskopische Proteinuntersuchungen (Beitr. 



z. exper. Ther., hrsg. v. E. v. Behring, 1905, H. 10, p. 22—29). 

 Berg, W., Weitere Beiträge zur Theorie der histologischen Fixation [Ver- 

 suche an nukleinsaurem Protamin] (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LX"\', 



1904, H. 2, p. 298—357). 

 Best, Über mikroskopische Eisenreaktion (Verh. d, deutsch. Pathol. Ges. 



8. Tagg., Breslau 1904, Ergänzungsh. z. Bd. XV d. Zentralbl. f. pathol. 



Anat. 1905, p. 147). 

 Davidsohn, C, Vorzüge der Kresylviolettfärbung (Verh. d, deutsch. Pathol. 



Ges. 8. Tagg., Breslau 1904, Ergänzungsh. z. Bd. XV d. Zentralbl. f. 



pathol. Anat. 1905, p. 150—152). 

 Dor, L. , L'essence de moutarde comme liquide conservateur des pieces 



anatomiques (C. R. Soc. Biol. t. LVIII, 1905, no. 11, p. 479—481). 

 Briessen, L. F., Zur Glykogenfärbung (Zentralbl. f. allgem. Pathol. u. 



pathol. Anat. Bd. XVI, 1905, No. 4, p. 129). 

 Fischler, F., Über die Unterscheidung von Neutralfetten, Fettsäuren und 



Seifen im Gewebe (Zentralbl. f. allgem. Pathol. u. pathol. Anat. Bd. XV, 



1904, No. 22, p. 913—917 ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 262). 

 Gerlach, L., Die anatomisch -histologische Technik des 19. Jahrhunderts 



und ihre Bedeutung für die Morphologie. Erlangen 1904. 38 pp. 8". 



• M. 1-50. 



Grigorjew, A. , Über Konservierung von Organen und Organinhalt zu 



nachträglicher mikroskopischer und chemischer Untersuchung (Viertel- 



jahrsschr. f. gerichtl. Medizin, F. 3, Bd. XXIX, 1905, H. 1, p. 79). 

 Lenhossek, M. v., Ramön y Cajals neue Fibrillenmethode (Neurol. 



Zentralbl. Jahrg. XXIII, 1904, No. 13, p. 593—609 ; vgl. diese Zeitschr. 



Bd. XXII, 1905, p. 264). 

 Liepmann, Konservierung von pathologisch -anatomischen Präparaten 



(Zeitschr. f. Geburtsh. \\. Gynäkol. Bd. LIV, 1905, H. 1, p. 158). 

 Liigaro, E., Un metodo di colorazione delle neurofibrille mediante l'argento 



colloidale (Monit. Zool. Ital., Anno XV, no. 11, p. 350—356). 

 Lugaro, E. , Sui metodo di demostrazione delle neurofibrille (Ann. di 



nevrologia, Anno XVI, 1904, fasc. 5, p. 495—496 [12. Congresso d. 



soc. freniatr. Ital. in Genova 1904]). 

 Miodowski, F., Neueste Vorschläge zur histologischen Technik (Internat. 



Zentralbl. f. Ohrenheilk. Bd. III, 1905, H. 4, p. 133). 

 Osborn, Fr. A., A simple electrical thermostat (Journ. Phys. Chem. Bd. IX, 



1905, p. 297—298). 



Rosenau, M. J., Laboratory course in pathology and bacteriology [revised 

 edition] (Treasury Departm. Hyg. Labor. Washington, Bull. no. 8, 1904 

 79 pp.). 




XXII, 2. Neue Literatur. 313 



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Wochensclir. Bd. XXXI, 1905, No. 11, p. 419). 

 Strauch, Eine Methode farbiger Konservierung frischer Leichenteile für 



ZAvecke der somatischen Anthropologie (Zeitschr. f. Ethnologie Jahrg. 



XXXVI, 1904, H. 5, p. G71). 

 Thilo, 0., Vorrichtung zum Durchlüften des Wassers von Aquarien 



(Korrespondenzbl. d. Naturf. Ver. zu Riga, Jahrg. XL VII, 1904, p. 5). 

 Beiträge zur praktischen Mikroskopie. 1. Neuere Präparationsmethoden 



(Zeitsclir. f. angew. Mikrosk. Bd. XI, 1905, H. 3, p. 57). 



5. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. 



a. Niedere Tiere. 



Depdolla, Ph. , Untersuchungen über die Spermatogenese von Lumbricus 



terrestris (Zool. Anz. Bd. XXVIII, 1905, p. 545—557 ; vgl. diese Zeitschr. 



Bd. XXII, 1905, p. 265). 

 Hirschler, J. , Weitere Regenerationsstudien an Lepidopterenpuppen 



[Regeneration des vorderen Körperendes] (Anat. Anz. Bd. XXV, 1904, 



No. 18, 19, p. 417—435 m. 5 Figg. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 



1905, p. 265). 

 Jakimoff, W. L. , Zur Biologie der Trj'panosomen der Nagana und des 



Mal de Caderas (Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Orig. Bd. XXXVII, 



1904, H. 5, p. 668—678). 

 Marino, F., Coloration des protozoaires et observations sur la neutrophile 



de leur noyau (Ann. de l'Inst. Pasteur, Annee VIII, 1904, no. 12, 



p. 761—766). 

 Smedley, R. D., The cultivation of Trypanosomata (Journ. of Hygiene 



vol V, 1905, no. 1, p. 24—47). 



b. Wirbeltiere. 



Arnold, J., Über Bau und Sekretion der Drüsen der Froschhaut; zugleich 

 ein Beitrag zur Plasmosomen- Granulalehre (Arch. f. mikrosk. Anat. 

 Bd. LXV, 1905, p. 649—665 m. 1 Tfl.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 

 1905, p. 286). 




314 Neue Literatur. XXII, 2. 



Bab , H. , Die Colostrumbildun^ als physiologisches Analogen zu Ent- 

 zündungsvorgängen. Gleichzeitig ein Beitrag zur Lehre von den 

 Leukocyten und deren Granulationen. Mit historischen Darlegungen. 

 Berlin (A. Hirschwald) 1904; 97 pp. (Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 

 1905, p. l>7-2.) 



Backmund, K. , Entwicklung der Haare und Schweißdrüsen der Katze 

 (Anat. Hefte, H. 79, 80 [Bd. XXVI, H. 2, 3], p. 317—383 m. 4 Tfln. ; 

 vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 285). 



Bunting, P. L. , The Histology of Lymphatic Glands: the general Struc- 

 ture, the Reticulum and the Germ Centres (Journ. of Anat. a. Physiol. 

 vol. XXXIX, 1904, p. 55— (i8 w. 5 pltes. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 

 1905, p. 287). 



Cameron, J., The Development of the Retina in Amphibia, an Embryo- 

 logical and Cytological Study (Journ. of Anat. a. Phys. London 

 vol. XXXIX, 1905, p. 135—152 w. 2 pltes. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 

 1905, p. 290). 



Cavalie, M., Les ramifications nerveuses dans Torgane electrique de la 

 torpille (Torpedo Galvani) [Dispositif tibrillaire dans les gaines des 

 fibres nerveuses et autour d'ellesj (Bibliogr. anat. t. XIII, 1904, fasc. 4, 

 p. 214—220 av. 5 figg.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 278). 



Cesa-Biauclii, D. , Contributo alla conoscenza dell'istogenesi delle cisti 

 semplici dell'ovaia (Arch. Sc. med. vol. XXIX, 1905, p. 1). 



Delflno , E. , Macroglossia congenita neuroübromatosa (Arch. Sc. med. 

 vol. XXIX, 1905, p. 34). 



Donati, M. , Ipernefroma maligno del fegato (Arch. Sc. med. vol. XXIX, 

 1905, p. 154). 



Fichera, G. , Über die Verteilung des Glykogens in verschiedenen Arten 

 experimenteller Glykosurie (Beitr. z. pathol. Anat. u. z. allgem. Pathol. 

 Bd. XXXVI, 1904, H. 2, p. 273—339 m. 1 Tfl.; vgl. diese Zeitschr. 

 Bd. XXII, 1905, p. 288). 



Glas, E. , Über intraepitheliale Drüsen, Cysten und Leukocytenhäufchen 

 der menschlichen Nasenschleimhaut (Arch. f. Laryngol. u. Rhinol. 

 Bd. XVI, 1904, H. 2, p. 236—264 m. 1 Tfl.; vgl. diese Zeitschr. 

 Bd. XXII, 1905, p. 286). 



Goldberg, B. , Über die Müller sehe Modifikation der Donne sehen Eiter- 

 probe (Zentralbl. f. inn. Med. Jahrg. XXVI, 1905, No. 20, p. 497). 



Grabower, Die Verteilung und Zahl der Nervenfasern in den Kehlkopf- 

 muskeln und die Hinfälligkeit des Erweiterers der Stimmritze (Arch. 

 f. Laryng. u. Rhinol. Bd. XVI, 1904, H. 2, p. 189-207 m. 2 Tfln.; 

 vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 279). 



Halber, E., Über die Entstehung der Blutplättchen und ihre Beziehungen 

 zu den Spindelzellen (Deutsches Arch. Klin. Med. Bd. LXXXII, 1904, 

 H. 1, 2, p. 41—59 m. 1 Tfl.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, 

 p. 268). 



Illing , G. , Vergleichende makroskopische und mikroskopische Unter- 

 suchungen über die submaxillaren Speicheldrüsen der Haussäugetiere 

 (Anat. Hefte, H. 70, 80 [Bd. XXVI, H. 2, 3], 1904, p. 389—526 m. 

 4 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 284). 




XXII, 2. Neue Literatur. 315 



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 den Vögeln (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXV, 1905, p. 498—610 m. 

 30 Figg. u. 1 Tfl.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p 283). 



Joris, H., Histogenese du Neurone (Bull. Aead. R. Med. Belgique, 25 juin 



1904, 44 pp. av. 5 pl.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 279j. 

 Koiransky, Eugenie, Über eigentümliche Gebilde in den Leberzellen der 



Amphibien (Anat. Anz. Bd. XXV, 1904, No. 18, 19, p. 435—456 in. 



6 Figg.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 288). 

 Kopsch, F., Über den Kern der Thrombocyten und über einige Methoden 



zur Einführung in das Studium der Säugetier -Thrombocyten (Intern. 



Monatsschr. f. Anat. u. Physiol. Bd. XXI, 1904, H. 4—8, p. 344—353; 



vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 268). 

 Kozowsky , A. D. , Zur Färbungsmethodik der Nervenfasern des Zentral- 

 nervensystems (Neurol. Zentralbl. Jahrg. XXIII, 1904, No. 22, p. 1041 



—1042; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 277). 

 Meves, F., Zur Wirkung von Säure auf die roten Blutkörperchen der 



Amphibien (Anat. Anz. Bd. XXV, 1904, No. 9, 10, p. 240—245; vgl. 



diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 291). 

 Meyer , P. , Ein Verfahren zur Erzielung haltbarer Amyloidpräparate 



(ViRCHOWs Arch. f. pathol. Anat. Bd. CLXXX [Folge 17, Bd. X], 



H. 2, p. 359—361). 

 Modica, O., Nuovo metodo di fissazione di sangue (Arch. farmacol. speri- 



ment. e Sc. affini, Anno 3, vol. III, 1904, fasc. 11). 

 Palleske, Eine neue Methode des Blutnachweises? (Vierteljahrsschr. f. ge- 



richtl. Med., Folge 3, Bd. XXIX, 1905, H. 2, p. 331—338). 

 Pighini, G. , Sulla struttura dei globuli rossi (Arch. Sc. med. vol. XXIX, 



1905, p. 49). 



Preisich, K. , u. Heim, P. , Über die Abstammung der Blutplättchen 



(ViRCHOWs Arch. Bd. CLXXVIII, 1904, H. 1 , p. 43—60 m. 1 Tfl.; 



vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 266). 

 Ramön y Cajal, S., La methode ä l'argent reduit associee ä la methode 



embryonnaire pour l'etude des noyaux moteurs et sensitifs (Bibliogr. 



Anat. t. XIII, 1904, fasc. 5, p. 242—275 c. 12 figg. Dasselbe in Trab. 



Labor. Investig. Biol. Univ. Madrid t. III, 1904, fasc. 2, 3, p. 65—96 



av. 12 figg.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 273). 

 Ravenna, E., Sui cosidotti tumori endoteliali. Memoria seconda: Gli 



emoangioendoteliomi del fegato. [Osservazioni anatomo-patologiche.] 



(Arch. Sc. med. vol. XXIX, 1905, p. 124). 

 Reichert, C. , Über das Vorkommen kleinster Körperchen im frischen 



Menschenblut (Zeitschr. f. angew. Mikrosk. Bd. XI, 1905, H. 12, p. 309). 

 Rossi , E. , L'intima struttura delle cellule nervöse umane (Le Nevraxe 



vol. VI, fasc. 3, 1904, p. 331—349 av. 16 figg.; vgl. diese Zeitschr. 



Bd. XXII, 1905, p. 273). 

 Sala, G., Beitrag zum Studium der feineren Struktur der Netzhaut (Anat. 



Anz. Bd. XXV, 1904, No. 9, 10, p. 246—249 m. 2 Tfln.; vgl. diese 



Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 291). 

 Schridde,H., Weitere Untersuchungen über die Körnelungen der Plasmazellen 



(Zentralbl. f. allgem. Pathol. u. pathol. Anat. Bd. XVI, 1905, No. 11, p.433). 




316 Neue Literatur. XXII, 2 



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Simon et Spillmann, L., Ai^plication de la Photographie ä la nuineration 

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 Biedert, Über die Biedert sehe (Mühlhäuser -Czaplewski sehe) Methode 



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1905, No. 5, p. 241). 

 Blecher, C, Ein Apparat zum Lösen und Filtrieren großer Quantitäten 



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 Blumenthal, J. M. u. Lipskerow, M. , Vergleichende Bewertung der 



difterentiellen Methoden zur Färbung des Diphtheriebazillus (Zentralbl. 



f. Bakteriol. Abt. 1, Orig. Bd. XXXVIII, 1905, H. 3, p. 359). 

 Borden, J. H., The Wid.\l Test for practicing phj^sicians (Proc. New York 



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 Doerr, R., Beobachtungen über bazilläre Ü3^senterie (Zentralbl. f. Bakteriol-. 



1. Abt., Orig. Bd. XXXVIII, H. 4, p. 420; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 



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 Dscliunkowsky, E., u. Luhs, S., Apparat zum sterilen Blutentnehmen 



zwecks Untersuchung (Zentralbl. f. Bakteriol. 1. Abt., Orig. Bd. XXXVIII, 



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 Dworetzky, A., Erfahrungen mit der Spengler sehen Formalinmethode 



zur Reinzüchtung von Tuberkelbazillen aus Bakteriengemischen (Zen- 

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 Gaethgens, AV., Der Bacillus jasmino-cyaneus und der Bacillus flavo-aro 



maticus, zwei neue Farbstoff bildende Bakterien (Zentralbl. f. Bakteriol 



1. Abt., Orig. Bd. XXXVIII, H. 2, p. 129 ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII 



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med. research. vol. XIII, 1904, no. 1, p. 97—98). 

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 74. Vers, zu Karlsbad, IL Teil, 2. Hälfte [erschienen 1903], p. 621-622; 

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 deutsch. Naturf. u. Ärzte, 74. Vers, zu Karlsbad, II. Teil, 2. Hälfte 

 [erschienen 1903], p. 621; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 295 >. 

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 Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 306). 



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 diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 305). 



Braun, F., Einige Beobachtungen, die sich auf künstliche Doppelbrechung 

 beziehen (Ann. d. Phys. [4] Bd. XVI, 1905, p. 278—281 m. 1 Fig.; vgl. 

 diese Zeitschr.- Bd. XXII, 1905, p. 302). 



Braun, F., Herstellung doppelt brechender Körper aus isotropen Bestand- 

 teilen (Physik. Zeitschr. V, 1904, p. 199—203; vgl. diese Zeitschr. 

 Bd. XXII, 1905, p. 302). 



Braun, F., Über metallische Gitterpolarisation, insbesondere ihre Anwen- 

 dung zur Deutung mikroskopischer Präparate (Ann. d. Phys. [4], 

 Bd. XVI, 1905, p. 238—278; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 306. 



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 diese Zeitschrift Bd. XXII, 1905, p. 306. 



Brauns, R., Mineralogie. 3. Aufl. Leipzig (J. G. Göschens Verlag) 1905; 

 134 pp. mit 132 Figg.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 304. 



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 Kristalle mittels elektrischer Kataphorese (Ber. d. deutsch, chem. Ges., 

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Campbell, W., On the microstructure of metalls and alloys (Electrochem. 

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320 Neue Literatur. XXII 2 



Donau, Über die Färbung der Boraxperle durch kolloidal gelöste Edel- 

 metalle (Monatshefte f. Chem. Bd. XXV, 1904, p. 913—918; vgl. diese 

 Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 304). 



Gledhill , J. M. , Development and use of high-speed tool steel (Iron and 

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Hinden, F., Neue Reaktionen zur Unterscheidung von Calcit und Dolomit 

 (Verh. d. naturforsch. Ges. in Basel Bd. XV [2], 1904, p. 201—202; 

 vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 303). 



Hlawatsch, C, Bestimmung der Doppelbrechung für verschiedene Farben 

 an einigen Mineralien (Tschermaks mineral. u. petr. Mitt. Bd. XXIII, 



1904, p. 415—450 m. 3 Figg.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, 

 p. 302). 



Lehmann, O., Flüssige Misch- und Schichtkristalle (Ann. d. Phys. [4] 



Bd. XVI, 1905, p. 160—165; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, 



p. 303). 

 Quincke, Gr., Über Ausbreitung und Extensionskraft (Ann. d. Phys. [4] 



Bd. XV, 1904, p. 55—60; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 301). 

 Quincke, G., Doppelbrechung der Gallerte beim Aufquellen und Schrumpfen 



(Sitzber. d. k. preuß. Akad. d. Wiss. 1904, p. 258—265; vgl. diese 



Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 301). 

 Richards , Th. W. , a. Wells , R. Cl. , The Nephelometer , an Instrument 



for Detecting and Estimating opalascent Precipitations (Amer. Chem. 



Journ. vol. XXXI, 1904, p. 235—243; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 



1905, p. 304). 



(Rose, T. K.,) Certain properties of alloys of Silver and Cadmium (Journ. 

 R. Microsc. Soc. 1905, pt. 1, p. 119; vgl. Proc. Roy. Soc. vol. CXXIV, 

 1904, p. 218). , 



Seaton, A. E., a. Jude, A. , Impact tests on tlie wrought steels of com- 

 merce (Proceed. Inst. Mechan. Engineers 1904, Nov. 18). 



Stark, M., Zusammenhang des Brechungsexponenten natürlicher Gläser 

 mit ihrem Chemismus (Tschermaks min. u. petr. Mitt. Bd. XXIIl, 



1904, p. .536; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 307). 



(^Stead, J. E.,) Sulphides and Silicates of Manganese in Steel (Journ. R. 

 Microsc. Soc. 1905, pt. 2, p. 265; vgl. Iron and Steel Magaz. vol. IX, 



1905, 1). 105—113). 



Thugutt, St. J. , Fritz Hinden s „Neue Reaktionen zur Unterscheidung 



von Calcit und Dolomit" (Zentralbl. f. Min. Geol. Pal. 1905, p. 265—266 ; 



vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 303). 

 (Turner,) Ilardness of metals (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 1, p. 118; 



vgl. English Mechanic vol. LXXX, 1904, p. 404). 

 Vauino, S., ü. Hartl, F., Über neue Bildungsweisen kolloidaler Lösungen 



und das Verhalten derselben gegen Baryumsulfat (Ber. d. deutsch. 



chem. Ges. Bd. XXXVII, 1904, p. 3620—3623; vgl. diese Zeitschr. 



Bd. XXII, 1905, p. 305). 




Band XXII. Heft 3. 



Die Tricliloressigsäure als Fixierungsmittel. 



Von 



Prof. i)r. Martin Heidenhain 



in Tübiugen. 



Die Tricliloressigsäure yerwende ich schon seit mehr als 10 Jahren 

 als Fixierungsmittel. Anfangs habe ich sie nur wenig benutzt, später 

 mehr und mehr; jetzt, nachdem ich die Bedingungen der Verwend- 

 barkeit besser kennen gelernt habe, möchte ich sie nicht mehr missen 

 und verwerte sie besonders zu Kurszwecken in ausgedehnter Weise. 



Den Hinweis auf die Trichloressigsäure verdanke ich noch 

 meinem Vater, welcher zwar selber das Mittel für die Zwecke der 

 Histologie nicht benutzt hat, indessen mir auf eine spezielle Anfrage 

 liin diese Säure als ein besonders stark und sicher eiweißfällendes 

 Keagens bezeichnete. Inzwischen haben auch andere Autoren die 

 Trichloressigsäure oder analoge Verbindungen (Trichlormilchsäure 

 Holmgren) zu Fixierungszwecken verwendet , indessen geschah dies 

 nur selten , und man scheint von den Residtaten meist nicht be- 

 friedigt gewesen zu sein. Aus diesem Grunde ist es mein Wimsch, 

 den Gegenstand einmal zur Sprache zu bringen. 



Ich verwende diese Säure in 5- bis lOprozentiger Lösung; in- 

 dessen dürfte die 5prozentige Lösung für alle gewöhnlichen Fälle 

 ausreichen. Die Eigentümlichkeiten und Vorzüge des Mittels sind 

 die folgenden. 



1) Die Trichloressigsäure fällt alle Eiweiße, auch die Mucine ; 

 meiner Beobachtung nach konserviert sie aber, — wie übrigens die 

 sämtlichen andern Fixierungsmittel auch — die serösen Drüsen- 

 granula nur längs der Oberfläche der Stücke. 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 3. 21 




322 Heidenhain: Die Trichloressigsäure als Fixierungsmittel. XXII, 3. 



2) Das Reagens dringt sehr rasch ein. Da es nicht wie 

 viele andere stark eiweißfällende Lösnngeu an der Oberfläche der 

 Stücke eine dichte , harte , schwer dnrchgängige Krnste produziert, 

 wie dies z. B. bei der Pikrinsäure und der Chromsäure der Fall 

 ist , so Averden aucli große Stücke binnen kurzem vollständig 

 durchfixiert. 



3) Die Stücke gewinnen eine gleichmäßige Konsistenz und betten 

 sich leicht ein. Die Durclidringung mit Paraffin wird (besonders 

 nach Schwefelkohlenstofifdurchtränkung) eine so vollkommene , daß 

 Paraffin und Gewebe meist eine vollkommen gleichartige, durchsich- 

 tige Masse bilden. Dies tritft auch für solche Objekte zu, welche 

 dafür bekannt sind , daß sie sich verhältnismäßig schwer einbetten 

 und schneiden, wie Speicheldrüsen, Pankreas, Muskulatur, Haut. 



4) Da Schrumpfungen überhaupt nicht, eher geringe Quellungen 

 statthaben (etwa wie bei Pikrinschwefelsäure), wird die Größe^ Form, 

 Anordnung, gegenseitige Orientierung der Zellen vorzüglich gut er- 

 halten. Schöne , typische Bilder gewinnt man besonders von epithe- 

 Dalen Organen (Drüsen, Magen, Darm, Nebenniere). 



5) Es hinterbleibt eine ausgezeichnete , und zwar nicht modi- 

 fizierte Färbbarkeit (etwa wie bei Alkohol, Sublimat) für Karmin, 

 Eisenhämatoxylin und Anilinfarben. Bei DELAFiELoschem Hämatoxylin 

 muß man gewöhnlich aus sehr verdünnten Lösungen längere Zeit 

 färben, um eine schöne Kerntinktion zu erhalten. 



6) Die feinsten Details im Kern und Plasma erhält die Trichlor- 

 essigsäure nicht. Dagegen reicht sie aus um Granula, Zentralkörper, 

 Spindeln, Chromosomen, Schlußleisten, Sekretkapillaren, die Muskel- 

 struktur etc. geuügend zu konservieren. Dies Resultat ist sehr be- 

 achtenswert, da, wie gesagt, Schrumpfungen gänzlich fehlen. 



Soweit wäre nun alles ganz hübsch und gut , indessen müssen 

 wir leider bei Trichloressigsäure -Fixierung einen großen Übelstand 

 mit in Kauf nehmen, nämlich die Neigung des Bindegewebs in 

 Wasser und wässerigen Lösungen zu quell e n. Dieser Umstand 

 ist den Histologen bereits bekannt und, er ist es offenbar, der einer 

 ausgedehnten Anwendung des Mittels bisher im Wege stand. 



Ich bin nun aber im Avesentlichen über diese Klippe dadurch 

 hinweggekommen, daß ich die Stücke aus der Fixierungsflüssigkeit 

 sofort in absoluten Alkohol übertrage und mit diesem die Säure 

 extrahiere. In der ersten Woche wechsele ich den Alkohol häufig; 

 weiterhin lasse ich die Stücke noch einige Monate (eventuell dauernd; 

 in absolutem Alkohol liegen und wechsele denselben noch einige 




XXII, 3. Heidenhain: Die Trichloressigsäure als Fixierungsraittel. 323 



Male in größeren Zwischenräumen. Nach dieser Behandlung ist 

 die Neigung der Stücke , bezw. des Bindegewebs , zu quellen , in 

 hohem Grade verringert. Alsdaim bette ich ein, schneide und klebe 

 die Schnitte auf (in diesem Fall mit Eiweißlösung) , denn die auf 

 einer Unterlage fixierten Schnitte A'^erhalten sich meiner P>fahrung 

 nach gegenüber Quellung und Schrumpfung bewirkenden Mitteln 

 weniger empfindlich. 



Es ist also dringend nötig die Stücke aus der Säure sofort 

 in absoluten Alkohol zu übertragen , letzteren oft zu wechseln und 

 diese Behandlung einige Zeit fortzusetzen. 



In den fertigen , gefärbten Präparaten präsentieren sich alle 

 derben Lagen fibrillären Bindegewebs unter den Bilde einer mehr 

 oder weniger glasigen Masse, innerhalb deren die Bindegewebszellen 

 in sehr deutlichem Grade hervortreten. Mithin habe ich anfangs 

 geglaubt, daß es sich um eine Zerstörung des Bindegewebs handele. 

 Späterhin bin ich indessen zu der Überzeugung gekommen, daß dies 

 keineswegs der Fall ist. Vielmehr sehen wir in diesen Präparaten 

 das Bindegewebe sozusagen nur von einer andern Seite her als dies 

 gewöhnlich der Fall zu sein pflegt. Denn gewöhnlich ist das Binde- 

 gewebe in unseren Präparaten etwas geschrumpft, also auch ent- 

 stellt, jedoch in anderem Grade als bei den Trichloressigsäurepräpa- 

 raten. Wendet man auf ein solches bindegewebsfärbende Mittel an, 

 so zeigt sich, daß die Bindegewebsbündel keineswegs verquollen und 

 zerstört, sondern samt ihrer fibrillären Struktur recht schön erhalten 

 sind ; ich besitze z. B. mit Chromotrop 2 R gefärbte Querschnitte 

 einer Zunge vom Hunde, in deren Schleimhaut durchgehends präch- 

 tige, lockige, fibrilläre Bindegewebsbündel sichtbar sind. Es dürfte 

 also nur darauf ankommen , aus jener scheinbar glasigen Masse , in 

 welche das fibrilläre Bindegewebe nach Trichloressigsäure-Behandlung 

 übergeht, die Struktur wieder herauszuarbeiten. Diese Aufgabe dürfte 

 allerdings nicht sehr dankbar sein. Da nun aber gerade im Unter- 

 richt bei denjenigen Organen, für welche sich die Trichloressigsäure 

 im besonderen Grade eignet, wie Drüsen, Magen, Darm, Muskeln, 

 das fibrilläre Bindegewebe eine geringe Rolle spielt, so meine 

 ich, daß man sich der zweifellosen Vorzüge des Mittels erfreuen und, 

 wenn eine Darstellung der Bindegewebsstruktur gewünscht wird, 

 anders fixieren soll. 



Übrigens scheint dies alles nur vom fibrillären Bindegewebe 

 zu gelten, denn an jenen membranösen Häutchen, welche in vielen 

 Organen (Muskeln, Drüsen) die feineren Teile des Bindegewebsgerüstes 



21* 




324 Heidenhain: Die Trichloressigsäure als Fixierungsmittel. XXII. 3. 



ausmachen, habe ich einstweilen keine Veränderung gewahren können. 

 Daher erscheinen Organe, welche wenig librilläres Bindegewebe ent- 

 halten (Herzmuskel, Pancreas etc.), kaum verändert. 



Schließlich will ich die Frage, ob man mit Trichloressigsäure 

 fixieren soll oder nicht, noch von einer andern Seite her beleuchten. 

 Meines Erachtens nach ist nämlich unser neues Mittel ein beachtens- 

 werter Konkurrent der beliebten, aber wenig dankbaren Müller sehen 

 Flüssigkeit. Letztere wird aus Rücksichten der Bequemlichkeit sehr 

 viel gebraucht ; allein die Resultate der Konservierung sind bei 

 diesem Mittel mäßig und die Haltbarkeit der auf diesem Wege ge- 

 wonnenen Präparate ist geradezu schlecht. Wir haben in Würz- 

 burg sehr viel mit Müller scher Flüssigkeit gearbeitet und unsere 

 Schnitte möglichst sorgfältig eingelegt; jetzt, 10 bis 15 Jahre 

 später ist der größte Teil der Präparate wegen des Zurückgehens 

 der Farben unbrauchbar geworden, ja selbst die solidesten Carmin- 

 präparate sind abgeflaut. Aus diesem Grunde wende ich die 

 MüLLERSche Flüssigkeit, falls es nicht dringend geboten ist (Zentral- 

 nervensystem!), nicht mehr an. Wie ich vermute, beruht das Ver- 

 bleichen der Präparate aus Müller scher Flüssigkeit auf dem Gehalt 

 an Chromoxyden, welche die Rolle von Sauerstoffüberträgern zu 

 spielen scheinen, so daß die Farben wegoxydiert werden. 



Es wäre also sehr zweckmäßig, wenn wir einige Mittel hätten, 

 welche sich an die Stelle der Müller sehen Flüssigkeit setzen lassen. 

 Hierzu gehört nun die Trichloressigsäure. Denn man kann mit ihrer 

 Hilfe verhältnismäßig große Stücke durchfixieren, einbetten und 

 schneiden. Die Präparate sind ferner leicht und schön färbbar und, 

 soweit ich weiß, vorzüglich haltbar. 



[Eingegangen am 16. September 1905.] 




XXir,3. Heidenhain: Färbung von Knochenknorpel zu Kurszwecken. 325 



Über die Färbung von Knochenknorpel 

 zu Kurszwecken. 



Von 



Prof. Dr. Martin Heideiihaiii 



in Tübingen. 



In den mikroskopischen Kursen legen wir unseren Schülern 

 einerseits Knochenschliife, anderseits ungefärbte und gefärbte Schnitte 

 von „Knochenknorpel" vor. Es ist richtig, daß die gefärbten Schnitte 

 entbehrt w^erden können, da jeder einigermaßen durchsichtige Rasier- 

 messerschnitt durch entkalkten Knochen fast die ganze Struktur zum 

 Vorschein bringt ; nichtsdestoweniger ist es wünschenswert zum Zwecke 

 wiederholter Untersuchungen und für die die Vorlesung begleitenden 

 Demonstrationen über gut gefärbte Schnitte zu verfügen. Aus diesem 

 Grunde habe ich seit Jahren immer wieder bei Gelegenheit des 

 mikroskopischen Kursus mich damit befaßt nach einer einfachen gut 

 ausführbaren Methode der Färbung von Schnitten durch Kuochen- 

 knorpel zu suchen. Folgendes Verfahren kann ich auf das angelegent- 

 lichste empfehlen. 



Die Färbbarkeit hängt beim Knochen sehr wesentlich von der 

 Vorbehandlung ah. Ich benutze frische menschliche Knochen, welche 

 noch bedeckt von den Weichteilen sind, und lege sie in 96prozen- 

 tigen Alkohol ein. Von diesem Materiale decke ich meinen Bedarf. 

 Ich entnehme dem Mittelstück eines kleineren Röhrenknochens 

 unter Erhaltung des Periosts Stücke bis zu 1 cm Länge und lege 

 sie behufs Entkalkung in öprozentige Trichloressigsäure ein ; nach 

 der Entkalkung übertrage ich in starken Alkohol (96prozentigen), 

 welcher viele Male gewechselt wird, bette schließlich in Celloidin ein 

 und fertige Schnitte von 20 bis 25 u Stärke an. 



Sehr dicke Knochen , wie die Tibia , werden auf diese Weise 

 weder gleichmäßig gehärtet, noch gleichmäßig von der Trichloressig- 

 säure durchdrungen. Daher benutze ich entweder die dünneren 

 Teile von Radius und Ulna oder die Metakarpalknochen. Letztere 

 geben sehr hübsche Bilder, da sie auch die Grundlamellen in reicher 

 Entwicklung zeigen, was ja nicht bei allen Skeletteilen so der Fall ist. 




326 Heidenhain: Färbung von Knochenknorpel zu Kiirszwecken. XXII,3. 



An eleu Schnitten entferne ich das Celloidia nicht ; sollte das 

 Knochenmark noch Fett enthalten, so entfette ich zunächst in Äther, 

 ehe ich färbe. 



Die Vorteile der bisher geschilderten Proceduren bestehen 

 darin , daß einmal der Alkohol den Knochen samt seinen Weich- 

 teilen genügend gut konserviert, daß die Trichloressigsäure nicht 

 zu kompakte Knochenstücke schnell und gut entkalkt , daß die 

 Schueidbarkeit vorzüglich ist und eine gute Färbbarkeit schließlich 

 hinterbleibt. 



Das Färbungsverfahren besteht eiufacherweise darin , daß man 

 die Schnitte zunächst in DELAFiELoschem Hämatoxylin tingiert und 

 weiterhin B o r a x k a r m i n einwirken läßt. Da dieses letztere Karmin 

 stark alkalisch ist , so kommt an den mit Hämatoxylin gefärbten 

 Schnitten ein dreifacher Etfekt zustande: 1) wird der Schnitt alka- 

 lisch und die Farbe des Hämatoxylins geht somit in ein reines Blau 

 über ; durch die Alkaleszenz der Schnitte wird die Haltbarkeit des 

 Hämatoxylins garantiert ; 2) wird das Hämatoxylin teilweise extrahiert, 

 was in unserem Falle einer histologischen „Diiferenzierung" der 

 Schnitte gleichkommt; 3) nimmt der Schnitt das Kai'min auf, so daß 

 eine bestimmt charakterisierte Doppelfärbung entsteht. Nachdem die 

 Schnitte alsdann mit dünnem Alkohol abgewaschen worden sind, können 

 sie in 75prozentigem Alkohol beliebig lange aufbewahrt werden. Beim 

 Versuch , sie in Kanadabalsam einzulegen , schrumpfen sie stark zu- 

 sammen, und ich lege sie daher in alkoholischen Glyzeriuleim ein, 

 dessen Rezept ich weiter unten mitteile. Zunächst mag es erlaubt 

 sein, noch einige Einzelheiten, welche die Färbungsmethode betreffen, 

 durchzusprechen. 



Das DELAFiELDSche Hämatoxylin Avende ich sehr verdünnt an 

 und überfärbe nicht gerne, denn es zeigt sich, daß das Hämatoxylin 

 beim Einbringen in die alkalische Boraxkarminlösung stark nach- 

 dunkelt. Wenn man ein überfärbtes Hämatoxylinpräparat extrahieren 

 will, so gebe man zu einer reichlichen Menge destillierten Wassers 

 wenig Essigsäure. 



Das DELAFiELDSche Hämatoxylin (vgl. Schaffer, Artikel „Knochen 

 und Zähne" in der „Enzyklopädie") färbt bei unseren Schnitten in 

 sehr hübscher Weise die „Grenzscheiden" der Knocheukanälchen, 

 so daß das Kanalsystem der Grundsubstanz gut hervorzutreten ptlegt. 

 Ferner färbt es die Grundlamellen dunkler, die Haversi sehen 

 Lamellen heller. Es ist also von vornherein eine gewisse färberische 

 Differenzierung der Lamellensysteme vorhanden. Weiterhin erhält 




XXII,3. Heidenhain: Färbung von Knochenknorpel zu Kurszwecken. 327 



mau eine Kernfärbiing aller Zejlen , sowie eine Hervorhebung der 

 (wenig bekannten) Kitt- und Ansatzlinien aller Lamellensysteme ver- 

 schiedener Art und verschiedenen Alters. 



Beim Einlegen in das Karmin schreitet die Differenzierung der 

 Lamellensysteme in gleichem Sinne fort : es extrahiert sich das 

 Hämatoxylin leichter aus den HAVERSischen Lamellen, schwerer aus 

 den Grundlamellen. Diese bleiben daher dunkler, jene werden in 

 stärkerem Grade aufgehellt; umgekehrt aber färbt das 

 Karmin die H a v e r s i s c h e n Lamellen dunkler, die 

 G r u n d 1 a m e 1 1 e n heller, wodurch eine schöne , unter Umstän- 

 den starke, prächtige Kontrastfärbung der Lamellensysteme zustande 

 kommt. Die Färbung der Kerne , Grenzscheiden , Kitt- imd An- 

 satzlinien bleibt bestehen, bezw. tritt noch deutlicher zutage als 

 vorher. 



Die Kontrastfärbung der Lamelleusysteme muß nun wohl einen 

 in der Sache selbst liegenden Grund haben. Nach sorgfältiger Durch- 

 musterung meiner Präparate kann ich mich nur dahin entscheiden, 

 daß im allgemeinen die im Verhältnis älteren Lamellen relativ 

 mehr Hämatoxylin als Karmin , die jüngeren umgekehrt mehr 

 Karmin als Hämatoxylin aufnehmen. Durch die Superposition beider 

 Färbungen wird der lebhafte Kontrast bewirkt. Fast überall, wo 

 ein jüngeres Lamellensystem sich an die Stelle eines älteren gesetzt 

 hat, gewahrt mau, daß das jüngere System stärker rot, das ältere 

 stärker blau gefärbt ist. Man würde also diese Methode der Färbung 

 auch für wissenschaftliche Untersuchungen benutzen können. 



Nach dem Einlegen in Glyzerinleim findet im Laufe von Wochen, 

 Monaten, Jahren eineUmfärbung der Präparate statt. Diese 

 beruht darauf, daß das Karmin in dem Glyzerinleim löslich ist, 

 während das Hämatoxylin allerdings konstant bleibt. Die Karmin- 

 färbung pflegt aus diesem Grunde bei einigen Schnitten diffuse zu 

 werden, in andern erhalten sich aber die ursprünglichen Kontraste; 

 die Hauptsache aber ist, daß das Karmin sich mit der Zeit in den 

 Knochenhöhlen und teilweise auch in den Knochenröhrchen nieder- 

 zuschlagen beginnt, wodurch sich allmählich eine prächtige Färbung 

 der Knochenzellen und der Ausläufersysteme erzeugt. Vielfach findet 

 man späterhin in den Kuochenhöhlen einen leuchtend rot gefärbten 

 Plasmakörper , während die Ausläufer zum Teil wie früher blau, 

 zum Teil ebenfalls rot gefärbt sind. Bestenfalls präsentieren sich 

 die Lückensysteme der Grundsubstanz so , als ob sie mit Fuchsin 

 injiziert seien. Weiterhin gewahrt man später eine differente Hervor- 




328 Heidenhain: r<ärbung von Knochenknori)el zu Kurszwecken. XXII, 3. 



hebung- der Lamellen innerhalb d^ einzelnen Systeme , wobei die 

 dichteren oder dunkleren Lamellen stärker gefärbt erscheinen. Dies 

 beruht jedoch nicht darauf, daß die dunkleren Lamellen sich in der 

 ganzen Tiefe des Präparates färben, vielmehr schlägt sich das Karmin 

 auf der Oberfläche des Schnittes in stärkerem Grade längs den 

 dichteren Lamellen nieder, so daß diese wie mit Karmin angetuscht 

 erscheinen. Hieraus resultieren bei schwächerer Vergrößerung zier- 

 liche Bilder. 



Da an solchen Präparaten alle Weichteile erhalten und gefärbt 

 sind, kann man an ihnen das Periost, die oberflächlichen Resorptions- 

 stellen mit den Ostoklasten , die Resorption älterer Lamellensysteme 

 im Innern , die Neubildung von solchen und die zugehörigen Osto- 

 klastenlager, ferner die Gefäße, die Volkmann sehen Kanäle das 

 Knochenmark, kurz alle in Betracht kommenden Teile des lebendigen 

 Knochens zeigen. Nur die Sharpey sehen Fasern treten nicht deut- 

 lich hervor. 



Alle Bemühungen diese Präparate in Glyzerinleim konstant zu 

 machen, schlugen bisher fehl. Da aber die umgefärbten Präparate 

 ebenfalls sehr tauglich sind, so sehe ich keinen Grund das Verfahren 

 aufzugeben. Vielleicht wird es später gelingen durch vorgängige 

 Anwendung einer geeigneten Beize (etwa Zinn, Blei oder Calcium) 

 das Karmin unlöslich zu machen. In diesem Falle würden wir auf 

 die nämliche Weise gar zwei Reihen von Präparaten erhalten können, 

 solche ohne und solche mit Umfärbung, je nachdem die Beize voraus- 

 geschickt wurde oder nicht. 



Schließlich ist noch nötig die wenigen Punkte zu besprechen, 

 die beim Einlegen der Präparate in Betracht kommen. Peinige Schnitte 

 habe ich allerdings durch steigenden Alkohol allmählich in eine 

 Mischung von Kreosot und Terpentin und alsdann in Balsam über- 

 tragen. Hierbei schrumpfen indessen die Schnitte und da nunmehr 

 dieselbe Farbmenge auf einen geringeren Flächenraum sich verteilt, 

 so dunkeln die Schnitte gleichzeitig nach. Daher ziehe ich es vor 

 die Schnitte in Glyzerinleim einzulegen. Eine passende Formel ist 

 die folgende : 



Gelatine 45 



Wasser 210 



Glyzerin 35 



Alkohol, absoluter 70 



Man löst zunächst die Gelatine unter gelindem Erwärmen im Wasser, 

 fügt das Glyzerin hinzu und filtriert im Wärmeofen bei 56 1^. In 




XXII,3. Heidenhain: Färbung von Knochenknorpel zu Kurszwecken. 329 



das klare Filtrat gibt man unter heftigem Umrühren tropfen- 

 weise den absoluten Alkohol hinein. 



Dieser Glyzerinleim fault und schimmelt nicht, wenigstens wenn 

 man ihn einigermaßen sorgfältig, in einem Glas mit eingeriebenem 

 Deckel, aufbewahrt. Erkaltet ist er in dünner Schicht lederartig 

 zäh und kautschukartig dehnbar. 



Man kann nun beim Einlegen so verfahren, daß man den Schnitt 

 aus Wasser auf den Objektträger bringt, ihn mit Fließpapier ab- 

 trocknet und glatt drückt, dann den Leim aufträgt und das Deck- 

 glas darüber gibt. In diesem Falle fängt man leicht Luftblasen. 

 Ich verfahre daher lieber wie folgt. Ich mache eine genügende 

 Quantität des Leims in einer flachen Glasschale flüssig, gebe die 

 Schnitte in kleinen Portionen, zu 5 bis 6 Stück, in den Leim und 

 übertrage sie einzeln mit dem angewärmten Spatel auf den Objekt- 

 träger. Nach Auflegen eines (möglichst großen) Deckglases gebe 

 ich dem Objektträger eine starke Neigung und presse alsdann das 

 Deckglas kräftig an ; hierauf ebnet sich der Schnitt und der Über- 

 schuß des Glyzerinleims quillt heraus. Bei Gelegenheit dieser Pro- 

 cedur wird gewöhnlich der Objektträger und öfters auch das Deck- 

 glas längs dessen Rändern von der Leimmasse überschwemmt, da 

 aber der Leim in einigen Tagen eine lederartige Konsistenz annimmt, 

 kann dann die übergequollene Masse in Form eines zusammen- 

 hängenden Häutchens reinlich abgezogen werden. 



Es ist durchaus notwendig das Deckglas so fest auf den Schnitt 

 aufzupressen, daß letzterer zwischen Deckglas und Objektträger 

 völlig eingeklemmt wird. Tritt nämlich später die allmähliche Lösung 

 des Karmins ein, so ist, falls die beiden Flächen des Schnittes sich 

 aufs innigste mit den Glasflächen berühren, das Karmin gezwungen 

 durch das Lakunensystem des Schnittes hindurchzudiftundieren. Dies 

 ist, wie mir wenigstens scheint, die Ursache der nachträglichen 

 Färbung der Knochenzellen und Knochenkanälchen. Es empfiehlt 

 sich daher , solange der Leim noch flüssig ist , mit dem verkehrten 

 Ende eines Nadelhalters das Deckglas auf den Schnitt durch Massage- 

 bewegungen anzudrücken. Eventuell eiiipfiehlt es sich, den Objekt- 

 träger für einige Minuten auf den Paraffinofen zu legen und das 

 Deckglas mit Bleigewichten so schwer zu belasten, daß eine innige 

 Adhäsion der Schnittoberflächen am Glase erzielt wird. 



Mit diesen Präparaten habe ich sehr hübsche Lehrerfolge in 

 den mikroskopischen Kursen erzielt; auch benutze ich sie ständig 

 bei den Demonstrationen. Sobald man sich darauf eingearbeitet hat 




330 Heidenhain: Über Massenfärbung- mikMskopischer Schnitte. XXII, 3. 



die beiden Färbungen in Hämatoxylin nnd Karmin kunstgerecht 

 gegeneinander abzuAvägen, kommt man zu schönen Resultaten und 

 ich hoffe, daß dieses „Kurspräparat" auch anderwärts aufgenommen 

 werden wird. 



[Eingegangen am 16. September 1905.] 



Über die Massenfärbuug mikroskopischer Schnitte 



auf GlimmerpLatten. 



Von 



Prof. Dr. Martin Heidenliain 



iu Tübingen. 



Hierzu zwei Holzschnitte. 



Als ich im Jahre 1899 nach Tübingen übersiedelte, übernahm 

 ich von meinem verehrten Freunde und Vorgänger M. v. Lenhossek 

 das Verfahren Schnitte zu Unterrichtszwecken en masse auf Glimmer- 

 platten zu färben. 



In Würzburg war es zu meiner Zeit Sitte, die meisten Kurs- 

 präparate „frei" zu behandeln, d. h. ohne vorherige Aufklebung. 

 Aufgeklebt wurden nur wenige feinere Präparate, welche zuvor 

 durchgefärbt wurden. Der Wunsch, die feinere Technik der Mikro- 

 skopie auch für die Kurse zu verwerten, bewog- mich dem Vorgange 

 V. Lenhossek s zu folgen und so habe ich in den verflossenen Jahren 

 die Methode der Massenfärbung auf Glimmerplatten soweit aus- 

 gebildet, daß auch meine studentischen Assistenten dieselbe sich an- 

 eignen und ausführen können. 



Der allgemeine Modus procedendi ist selbstverständlich der gleiche 

 wie beim Aufkleben und Färben von Schnitten auf Objektträgern. 

 Jedoch gestaltet sich die Technik bei gleichzeitiger Verarbeitung 

 einer sehr großen Anzahl von Schnitten und Verwendung entsprechend 

 großer Glimmerplatten naturgemäß etwas anders und so will ich für 

 diejenigen, die der Sache noch nicht näher getreten sind, den Vor- 

 gang kurz schildern. 




XXII, 3. Heidenhain: Über Massenfiirbung mikroskopischer Schnitte. 331 



1) Anfertigung der P araffin sclmitte. Wenn eine sehr 

 große Anzahl von Schnitten auf Glimmerphxtten aufgelegt werden 

 soll, so ist es unvermeidlich, sämtliche Schnitte ohne Unterbrechung 

 hintereinander abzuziehen und sie auf einer reinen Unterlage auf- 

 zusammeln ; erst später kann dann die ganze Serie in zusammen- 

 hängender Arbeit auf den Glimmer übertragen werden. Nur auf 

 diese Weise wird eine gleichmäßige schöne Arbeit geliefert und nur 

 so können später gleichmäßige schöne Färbungen entstehen. 



Als Unterlage für die Schnitte benutze ich Zigarrenkästen, welche 

 zugeschlagen und mit weißem Schreibpapier überspannt Averden. Die 

 auf diese Weise erhaltenen Tischchen kann man leicht vor dem in 

 allen Laboratorien reichlich niederfallenden Staube schützen , wenn 

 man ein zweites Blatt Schreibpapier benutzt, um eine Art Deckel 

 oder Klappe herzustellen, welche über das Tischchen hinweggeschlagen 

 werden kann, sobald dasselbe außer Funktion ist. 



Bei dieser Gelegenheit möchte ich empfehlen die Schnittdicke 

 niemals geringer zu nehmen als im Hinblick auf die nachfolgende 

 Färbung notwendig ist ; denn man sollte Organe und Gewebe, welche 

 dem elementaren Unterrichte in der Mikroskopie dienen , nie in 

 stärkerem Grade zerschneiden als irgend notwendig ist. 



2) Die Glimmer platten. Die Platten sollten so dünn wie 

 möglich, aber noch von genügender Haltbarkeit sein. Sind sie ver- 

 unreinigt, so kann man sie nicht durch Abwischen mit nassen Tüchern 

 oder auf ähnliche Weise reinigen ; denn wenn man auf die Fläche 

 einer Glimmerplatte einen irgendwie stärkeren Druck ausübt , ent- 

 stehen in ihreiQ Innern leicht feinste irisierende Sprünge , welche 

 späterhin die Untersuchung erheblich stören. Vielmehr entfernt man 

 Staub- und Schmutzteilchen meiner Erfahrung nach am leichtesten, 

 wenn man die Platte vermittels eines kräftigen Strahles aus der 

 Spritzflasche gründlich abwäscht. 



0) Das Auftragen der Schnitte auf die Platte. Die 

 angenäßte Glimmerplatte wird in hinreichender Weise mit Wasser 

 oder Eiweißlösung beschickt. Als Eiweißlösung verwerte icli eine 

 schwach alkoholische Lösung von Serumalbumin (Albumin aus Blut, 

 puriss, von Merck in Darmstadt ; 100 gr = 2*50 Mark). Das 

 Albumin wird in einer Reibschale zu feinstem Mehle gerieben 5 4 gr 

 davon werden auf 100 Wasser gegeben und die Mischung kräftig 

 geschüttelt. Darauf läßt man 24 Stunden lang absetzen, dekantiert 

 und filtriert die Lösung und versetzt sie schließlich mit dem gleichen 

 Volumen öO^^rozentigen Alkohols. 




332 Heidenhain: Über Massenfärbung mikroskopischer Schnitte. XXII, 3. 



Mau kann nun die mit Flüssigkeit beschickte Glimmerplatte 

 nicht leicht ans freier Hand in zweckmäßiger Weise regieren. Die 

 Flüssigkeit wird trotz Aufwendung aller möglichen Geschicklichkeit 

 gelegentlich über die Ränder der Platte hinweglaufen, wobei sie dem 

 Arbeitenden über die Hände fließt ; zudem veranlassen unbeabsichtigte 

 Bewegungen der Platte leicht ein Fortschwimmen der Schnitte u. s. f., 

 u. s. f. In der Tat ist es nicht möglich besonders größere Platten, 

 — und ich benutze solche bis zu 20 cm im Geviert — , mit voll- 

 kommener Sicherheit in der Linken zu halten und entsprechend zu 

 bewegen, während die Rechte die Schnitte aufträgt; gelingt das 

 Kunststück einige Male, so wird es ein ander Mal mißglücken. Der 

 Grund hierfür liegt meines Erachtens nach darin, daß die Glimmer- 

 platte für sich allein zu leicht ist; es mangelt eine genügende 

 Wirkung der Schwere auf die Hand und es fehlt der letzteren infolge- 

 dessen das richtige Gefühl für die feinere Orientierung der Platte 

 im Raum und die Kontrolle durch das Auge allein genügt nicht. 

 Es handelt sich mithin darum eine gute, verläßliche, sichere Hand- 

 habe für die Glimmerplatte zu finden , vermittels deren man die 

 auf der Platte befindliche Flüssigkeitsschicht samt den Schnitten in 

 geeigneter Weise zu balancieren vermag. Nach einigem Hin- und 

 Herprobieren bin ich nun schon vor Jahren dazu gekommen, die 

 Glimmerplatte auf ein in einen Holzrahmen eingesetztes Drahtnetz 

 zu legen (Fig. 1). Dieses sehr einfache Hilfsmittel genügt allen An- 

 sprüchen, denn wir fassen nicht mehr die Glimmerplatte, sondern 

 den Rahmen, welcher mit der genügenden Schwere in unserer Hand 

 lastet, so daß wir in derselben ein sehr feines Gefühl für die Neigung 

 der Platte gegen den Horizont haben. Demgemäß gelingt es dann 

 leicht die aufgetragene Flüssigkeitsschicht ganz nach Belieben durch 

 feine Bewegungen der Hand auf der Platte hin- und herzuleiten. 



Das Drahtnetz stellt man sich am besten selbst her. Man be- 

 nutzt den Rahmen einer Schiefertafel und arbeitet in denselben ein 

 Netz ein, dessen Drähte in einfacher Weise rechtwinklig durch- 

 einander geflochten werden ; die Maschen sollten etwa 1 qcm groß 

 sein. Benutzt man nicht ein Netz, sondern eine solide Papp- oder 

 Holztafel, so ergibt sich der Mißstand, daß, sobald einmal die Flüssig- 

 keit über die Ränder der Glimmerplatte hinausfließt, sie sich in den 

 kapillaren Spaltraum unter der Platte hineinzieht ; alsdann haftet die 

 Platte durch Adhäsion fest auf der Unterlage und man pflegt sie 

 ohne Gewaltanwendung, wobei leicht Beschädigungen eintreten, nicht 

 mehr loszubekommen. Die Verwendung des Drahtnetzes garantiert 




XXII, 3. Ileiclenliain: Über Massenfärbung mikroskopischer Schnitte. 333 



außerdem eine größere Reinlichkeit und ermöglicht die Benutzung 

 sehr großer Glimmerplatteu. 



Die aufgelegten Schnitte sollten sich nicht nach allen Seiten hin 

 vollständig berühren ; vielmehr muß zwischen ihnen immer noch soviel 

 freier Raum bleiben, daß sie sich bei der nachfolgenden Erwärmung- 

 bequem glatt strecken können. Es ist daher am besten, wenn die 

 Paraffinschuitte nicht rechteckig sind und sich nur mit einigen 

 Spitzen berühren. Größe re Schnitte legen sich bei weitem leichter 

 auf als kleinere, weil sie schwerfälliger sind, nicht vollständig schwim- 

 men und daher teilweise auf der Platte festliegen. 



4) Erwärmung und Streckung der Schnitte. Fixiert 

 man Schnitte auf dem Objektträger, so geschieht die Prozedur des 



1. 



Streckens auf dem BoRNScheu Tischchen. Ich habe daher früherhin 

 die mit Schnitten beschickte Platte in einiger Entfernung über dem 

 BoRNSchen Tischchen freihändig hin- und herbalanciert, bis die 

 Schnitte vollkommen gestreckt waren. Nunmehr lasse ich zu diesem 

 Zwecke die Platte auf dem Drahtnetz liegen. Weitei'hin habe ich 

 das heizbare Tischchen abändern müssen. 



Es ist nämlich der Schnabel des Born sehen Tischchens so 

 schmal, daß, wenn bei geringem Luftzug die Flamme seitlich ausweicht, 

 neben dem Schnabel ein glutheißer Lufthauch emporkommt, wodurch 

 die Schnitte zum Schmelzen kommen. Auch ist die Anwärmung der Luft- 

 masse über dem Born sehen Tischchen überhaupt zu ungleichmäßig, als 

 daß bei einer irgendwie größeren Platte eine allerseits gleichartige Ein- 

 wirkung auf die Schnitte erzielt werden könnte. Ich habe mir daher 




334 Heidenhain: Über Massenfärbung mikroskopischer Schnitte. XXII, 3. 



ein größeres Tischchen mit doppelter Phitte anfertigen lassen, 

 welches vortreffliche Dienste leistet (Fig. 2). Seine Höhe beträgt 

 15 cm; die Form ist qnadratisch bei 21 cm Seite. Die Platte des 

 Tischchens ist verdoppelt; beide Platten sind um die Dicke eines 

 starken Eiseudrahtes voneinander entfernt, welcher am Rande des 

 Tischchens zwischen dieselben eingeschaltet ist. Auf diese Weise 

 fassen die Platten einen schmalen mehrere Millimeter hohen Luft- 

 raum zwischen sich und der unter dem Tischchen befindliche Mikro- 

 brenner erhitzt daher direkt nur die untere, indirekt den Luftraum 

 und die obere Platte. Das Tischchen erwärmt sich langsam und 

 gleichmäßig; bringt man also die auf dem Drahtnetz ruhende (ilim- 

 merplatte in passende Entfernung darüber, so kann man die Streckung 

 leicht und gefahrlos besorgen. 



Ist dies geschehen, so lasse ich den Überschuß der Flüssigkeit 

 in sehr vollkommener Weise ablaufen, sauge auch mit Fließpapier 

 alle sichtbaren größeren Flüssigkeitsmengen ab. Die Platte wird 

 alsdann in den Wärmofen gebracht, wo die Schnitte bei 33° bis 

 35° sich vollkommen ausebnen und fixieren können. 



5) Die Färbung wird jeder geschickte Mikroskopiker ohne 

 weiteres in entsprechender Weise handhaben können. Es sind daher 

 nur wenige Worte nötig, v. Lenhossek benutzte als Färbeschalen 

 die bekannten rechteckigen photographischen Glaswannen und ich bin 

 dabei im wesentlichen geblieben. Beim Wechseln der Flüssigkeiten muß 

 jedoch beachtet werden, daß zwischen der Glimmerplatte und dem Boden 

 der Schale immer eine gewisse Menge Flüssigkeit befindlich ist, welche, 

 wenn die Übertragimg von einem Reagens in das andere eine voll- 

 kommene sein soll, hinweg gewaschen werden muß. Es ergibt sich 

 daraus die Regel, die Glimmerplatte gelegentlich aufzuheben, so daß 

 der Boden des Gefäßes und die Unterseite der Platte abgespült 

 werden kann. Am besten hebt man die Platte auf, wäscht den 

 Boden des Gefäßes rein, dreht die Platte um, wäscht sie auf der 

 vormaligen Unterseite ab, wendet die Platte wieder um u. s. f. Das 

 Wenden der Platten geschieht am besten mit Pinzetten, welche an 

 den Enden winklig abgeknickt und schwimmhautartig verbreitert sind 

 (Deckglaspincette). 



Vermöge dieses Verfahrens ist man in der Lage alle möglichen 

 feineu und feinsten Methoden der Färbung für den mikroskopischen 

 Kursus ausnützen zu können. Was mich betrifft, so habe ich alle 

 meine neueren feinen Färbungen (Eisenhämatoxylin , Congofarben, 

 Beuzopurpurine, Blauschwarz, Violettschwarz, Neutralfarben, Chromo- 




XXII, 3. Heidenhain: Über Massenfärbung mikroslvopischer Schnitte. 335 



trope etc.) für den Kursus nutzbar gemacht. Nocli möchte ich 

 darauf aufmerksam machen, daß mit dem Paul MAYERSchen Carm- 

 alaun, einem vortretf liehen Farbkörper, bei 12stündiger Einwirkung 

 prächtige Schnittfärbungen erzielt werden können, welche für den 

 Unterricht in hohem Grade tauglich sind. Da aber alle Karrain- 

 lösungen dazu neigen, Sedimente abzusetzen, muß die Glimmerplatte 

 in der Farblösung vertikal stehen. Für diesen Fall benutze ich 

 daher als Färbewanne die bekannten Hachen, parallelepipedisehen 

 Präparatengläser der makroskopischen Anatomie. Das Hereinsenken 

 und Herausnehmen der Glimmerplatteu aus der Farblösung kann 

 man sich erleichtern, indem man die Platte auf einer als Handhabe 

 dienenden Glasscheibe durch Adhäsion fixiert. Zu diesem Behufe 



beschickt man die Glimmerplatte nicht vollständig mit Schnitten, 

 sondern läßt einen Streifen von 2 bis 3 cm frei. Dieser muß jeder- 

 zeit über dem Spiegel der Farbflüssigkeit befindlicli sein, damit die 

 Adhäsion wirksam bleibt. 



6) Austeilung der Glimmerplattenpräparate im mikroskopi- 

 schen Kurse. Bezüglich dieses Punktes habe ich die Erfahrung 

 gemacht, daß es keineswegs zweckmäßig ist, die Platten vor den 

 Kursen schon durch Zerschneiden in die einzelnen Präparate auf- 

 zulösen, denn die letzteren bestoßen sich leicht gegenseitig; auch 

 ist die Austeilung der Präparate erschwert. Somit bringe ich die 

 unter Xylol aufbewahrte, unversehrte Platte ins Kurszimmer, schneide 

 bei der Austeilung Streifen um Streifen herunter und trenne wiederum 

 von jedem Streifen den einzelnen Schnitt so ab , daß er auf den 

 untergehaltenen Objektträger des Kursisten fällt. Auf diese Weise 




336 Heidenhain: Über Massenfärbung- mikroskopischer Schnitte. XXII, 3. 



kann leb 50 bis 60 Präparate in 2 Minuten austeilen , eine Zeit- 

 ersparnis, ohne die ich hierorts gar nicht durchkommen würde. 



7) Anlegung eine r Sammlung von Paraffin schnitten. 

 Da icli hierorts die sämtlichen für den mikroskopischen Kurs be- 

 nötigten Präparate allein, nur mit Hilfe zweier jedesmal ad hoc 

 angelernter, studentischer Assistenten herstelle, ist es mir unmöglich, 

 in jedem Jahre alle Präparate von neuem anzufertigen. Daher lasse 

 ich von jedem Präparate die doppelte oder dreifache Anzahl der 

 erforderlichen Schnitte herstellen und sämtlich auf Glimmerplatteu 

 fixieren. Die erübrigten Schnitte werden für spätere Jahre gut be- 

 zeichnet zwischen Fließpapier in Mappen nach Materien geordnet 

 aufbewahrt. Auf diese Weise bin ich jederzeit in Besitz einer ge- 

 waltigen Sammhing von Paraffinschnitten, welche in jedem Augen- 

 blick gebrauchsfähig sind. Diese Sammlung erstreckt sich über alle 

 Gewebe tmd alle Organe und geht der Schnittzahl nach in die 

 Tausende. Dabei sind schließlich viele Reste von Präparaten übrig 

 geblieben , die für den mikroskopischen Kursus wohl nicht mehr 

 ausreichen, wohl aber gelegentlich für Spezialuntersuclumgen , für 

 Färbungsproben, für Organ- und Gewebsdiagnosen im Examen etc. 

 dienen. 



[Eingegangen am 16. September 1905.] 




XXII, 3. Heidenhain: Anwendung- des Azokarmins u. der Chromotrope. 3;^7 



Über die Anwendung des Azokarmins und der 



Chromotrope. 



Von 



Prof. Dr. Martin Heidenhain 



In Tübingen. 



Unlängst habe ich in dieser Zeitschrift (Bd. XX, 1903, p. 179 

 bis 186j darüber Bericht erstattet, daß einige Amidoazokörper, näm- 

 lich die Congofarbstotfe und Benzopnrpurine, mit großem Vorteil aus 

 rein alkoholischen Lösungen auf den Schnitt aufgefärbt werden kön- 

 nen. In dieser Art der Anwendung liegt ein neues Prinzip, da bisher 

 nur die wässrigen Farbstotflösungen benutzt wurden. Während 

 nämlich kein Zweifel ist , daß im letzteren Falle der für uns Histo- 

 logen wesentliche Teil des Färbungsprozesses auf den chemi- 

 schen Wechsehvirkungen zwischen den Farbkörpern einerseits und 

 den Eiweißkörpern der mikroskopischen Schnitte anderseits beruht, 

 tritt bei Färbungen aus rein alkoholischer Lösung nach neueren Er- 

 fahrungen (Bethe , ich) der Chemismus zurück und es bleiben die 

 rein physikalischen Verhältnisse der Imbibition , Adsorption und Lö- 

 sung der Farbe im Schnitt als beherrschende Faktoren des Vorgangs 

 bestehen. Man kann also offenbar ein und denselben Farbkörper in 

 gänzlich verschiedener Weise anwenden, je nachdem man ihn in 

 Wasser oder Alkohol löst. 



Der praktische Zweck jener neuen Färbungen aus alkoholischer 

 Lösung lief darauf hinaus die Eosine zu ersetzen. Diese 

 letzteren sind, wie bekannt, als Nachfarbe nach' Ilämatoxylin seit 

 Jahrzehnten in Gebrauch. Nichtsdestoweniger sind Eosinfärbungen 

 eigentlich recht wenig leistungsfähig, denn 1) ziehen sie nur schwierig 

 auf den alkalischen Schnitt, während eben doch mit Hämatoxylin 

 gefärbte Schnitte um der Haltbarkeit willen alkalisch gemacht werden 

 sollen ; und 2) „schmieren" sie stark, d. h. sie färben nicht scharf, 

 sondern überziehen den Schnitt mit einer mehr oder weniger gleich- 

 mäßigen roten Tönung, 



Die von mir empfohlenen Färbungen vermittels der Amido- 

 körper sind nun in der Tat frei von den bezeichneten Fehlern, denn 



Zeüschr. f. wisR. Mikroskopie. XXII. 3. 22 




338 Heidenhain: Anwendung des Azokarmins u. der Chromotrope. XXII,3. 



sie färben auch alkalische Schnitte leicht in distinkter Weise; allein 

 bei vielfachem Gebrauch der alkoholischen Farbstotflösnngeu haben 

 sich mit der Zeit doch einige Mißstände deutlich herausgestellt, welche 

 eine Verbesserung des Verfahrens wünschenswert erscheinen ließen. 



Ein erheblicher Übelstand ist es zunächst, daß die alkoholischen 

 Lösungen der in Betracht kommenden Benzidin- und Tolidinfarbstotfe 

 wenig konstant sind. Es zeigte sich nämlich, daß anfänglich aller- 

 dings verhältnismäßig viel von der Trockensubstanz des Farbkörpers 

 durch den Alkohol aufgenommen wird, daß aber kurze Zeit darauf 

 der in Lösung befindliche Stotf in einen neuen, andersartigen, weniger 

 löslichen Zustand übergeht und deswegen sukzessive wieder ausfällt. 

 Daher mindert sich die Konzentration der Lösung binnen wenigen 

 Tagen in dem Grade, daß sie unbrauchbar wird. Ja ich möchte 

 glauben, daß je nach der Güte des absoluten Alkohols von vorn- 

 herein bald mehr bald weniger Farbe löslich ist, so daß auch die 

 anfänglich erhaltenen Lösungen nicht immer gleich gut färben. 



Weiterhin machte ich die Erfahrung, daß die Haltbarkeit der 

 fertigen in Balsam aufgestellten Präparate zu wünschen übrig ließ. 

 Hier kommt in erster Linie in Betracht, daß die Congofarbstotfe und 

 Benzopurpurine bei den Technikern als nicht-lichtecht gelten. In 

 den von mir beobachteten Fällen allerdings kann ich wohl mit gutem 

 Grunde die Schuld an dem Zurückgehen der Farbe auf jene geringen 

 Jodmengen schieben, welche in Sublimatpräparaten nach dem Jodieren 

 derselben bei nicht genügender Vorsicht leicht zurückbleiben. Es 

 zeigte sich nämlich, daß verschiedene, gleichzeitig hergestellte Schnitte 

 desselben Präparates teils die Farbe bewahrten, teils auch nicht; 

 letzteren Falls machte sich dabei eine deutliche Abänderung der 

 Farbentönung in der Piichtung nach Schwarz kenntlich. Da nun die 

 einzige Variable nur in dem geringen Jodgehalt gegeben sein konnte, 

 so stellte ich daraufhin einige Versuche an, und es zeigte sich sofort, 

 daß durch Jod die roten Amidoazokörper aus wäss- 

 r i g e r Lösung in s c h ^\' ä r z 1 i c h e n Massen ausgefällt 

 werde n. Da nach früheren Erfahrungen auch die Farben der 

 Triphenylmethangruppe (Methylviolett, Fuchsin, BiONDische Lösung 

 etc. etc.) nach der Jodierung der Schnitte leicht verbleichen, so 

 leitet sich hieraus die Regel ab, daß man aus jodierten Präparaten 

 das freie Jod vollständig entfernen soll, z. B. durch kurzes Eintauchen 

 der Schnitte in eine schwache Sublimatlösung (1 : 1000). Dieser 

 Fehler der Technik wäre also leicht zu beheben ; allein da blieb 

 noch die Frage der Lichtunechtheit und der Inkonstanz der Lösungen, 




XXII,3. Heidenliain: Anwendung des Azokarmins u. der Chromotrope. 339 



und so erschien es mir besser noch einmal auf die Suche zu gehen, 

 um Farbkörper zu finden, welche bei gleichen Vorzügen frei sind 

 von den Schwächen der Congofarben und Benzopurpurine. 



Ich habe nun eine größere Reihe saurer Farbkörper in An- 

 wendung gezogen und darunter einige gefunden, welche gute, zum 

 Teil glänzende Resultate liefern, während mit der Mehrzahl aller- 

 dings gar nichts anzufangen war. 



Sehr schöne Resultate hatte ich zunächst mit dem Azokarmiu 

 B. (Bad. Anilin- u. Sodafabr. Ludwigshafen). Dieser Farbkörper ist 

 wiederum eine Amidosäure, nämlich das saure Natriumsalz der Phenyl- 

 rosindulintrisulfosäure. Er löst sich einigermaßen leicht in Alkohol, 

 mehr noch in Methylalkohol und liefert prachtvolle, scharfe, rubin- 

 rote Färbungen des Bindegewebes, welches er einschließlich der 

 feinen Basalmembranen unter den Epithelien vorzüglich tiugiert. Die 

 Färbung erstreckt sich in zweiter Linie auch auf das Protoplasma, 

 besonders der Epithelzellen, Muskelzellen, Eier u. s. f. Ebenso be- 

 steht eine gewisse Neigung für Schleimfärbung, so daß in einigen 

 Fällen die Mucingranula gut hervortraten. 



Hier wie bei allen andern Färbungen aus absolutem Alkohol 

 zeigte sich, daß chromierte Präparate die Farbe schneller aufnehmen 

 als nichtchromierte Objekte ; doch bedurfte es nur eines längeren 

 Zuwartens, um fast in allen Fällen vortretfliche Resultate zu erhalten, 

 so daß ich mit diesem Mittel massenhafte Präparate zu Kurszwecken 

 herstellen konnte. 



Dieser Farbkörper soll nun ganz besonders echt sein und 

 demgemäß habe ich bisher ein Zurückgehen der Farbe nicht wahr- 

 nehmen können. So Aväre nun alles in schönster Ordnung, wenn 

 nicht der Farbkörper eine Eigenheit hätte, die bei vielfachem Ge- 

 brauche öfters störend hervortritt; er setzt sich nämlich hin und 

 wieder auf der Obertläche der Schnitte in kleinen Kristallen ab. 

 Da die Lösungen immer gut filtriert wurden und ganz klar waren, 

 kann es nur die Rauhigkeit der Schnittobertläche sein, welche be- 

 wirkt, daß der Körper aus der konzentrierten Lösung gerade an 

 dieser Stelle sich ausscheidet. Wurden aber nicht-kouzentrierte 

 Lösungen verwendet, so fielen die Tinktiouen bei den nicht-chromier- 

 ten Präparaten mangelhaft aus. Ich komme also zu dem Schlüsse, 

 daß ich zwar viele tadellose, zum Teil prachtvolle Präparate ver- 

 mittelst des Azocarmins erhalten habe, daß der Körper aber trotz- 

 dem für den fortwährenden Gebrauch, besonders bei Massenfärbungeu 

 für den Unterricht nicht allgemein anwendbar ist. Will man den 



22* 




340 Heidenhain: Anwendung- des Azokarmins u. der Chromotrope. XXII,3. 



Farbstoff für spezielle Z^vecke verwerten, was ich nur anempfehlen 

 kann, so lasse man die frisch hergestellte, konzentrierte Lösung 

 einige Tage stehen, damit der Farbstoff, da er die Neigung hat aus- 

 zukristallisieren, so weit als möglich sich absetzt. Hat man dennoch 

 Kristalle auf der Schnittfläche erhalten, so bringe man die Präparate 

 in Wasser, in welchem die Farbkörperchen augenblicklich in Lösung 

 gehen. Für chromierte Präparate empfiehlt sich die Verwendung 

 nicht ganz konzentrierter Lösungen. 



Bei weitem angenehmer gestalten sich alle Umstände bei einer 

 zweiten Klasse von Farbkörpern, bei den Chromotropen (Höchster 

 Farbwerke). Diese färben leicht und tadellos aus alkoholischen 

 Lösungen, welche nicht einmal konzentriert zu sein brauchen. Sie 

 ziehen auf den alkalischen Schnitt bei jeder Art der Vorbehandlung, 

 sie schmieren nicht, sondern zeichnen differente Bilder, sie tingieren 

 in prachtvoll roten Nuancen und sind, Avie versichert wird, in hohem 

 Grade haltbar. Diese Farbkörper haben, wie ich glaube, in der 

 Praxis der Histologie eine große Zukunft vor sich und werden die 

 Eosine vielfach ersetzen. 



Die Chromotrope leiten sich sämtlich von der Chromotrop- 

 säure ab und sind Azoderivate der letzteren. 



OH OH 



SO3H. \y\^y -so^H 



Chromotropsäure. 



Bei dieser so beschaffenen Konstitution sind für den Techniker 

 die beiden in Peristellung befindlichen Hydroxylgruppen wichtig. 

 Diese verleihen dem Körper , auch wenn die beiden Sulfonsäure- 

 gruppen durch Na abgesättigt sind , einen s c h w a c h s a u r e n Cha- 

 rakter. Das gleiche gilt für die von der Chromotropsäure sich 

 ableitenden gelb- bis blaurot getönten Azofarbstoffe. Als Beispiel 

 setze ich die Formel des Chromotrop 2R her, mit welchem ich 

 in der Tat Tausende von Schnitten fingiert liabe. 



OH OH 



N = N • CßH, 

 Chromotrop 2R. 



SO3 Na • ' .1 I • SO3 Na 




XXII,3. Heidenliain: Anwendung des Azokarmins u. der Chromotrope. 341 



Es können nun diese Farben auf Grund ihres schwachsauren 

 Charakters Metall aufnehmen (Fe, Cu u. s. f.J, wodurch sie eine deut- 

 liche Abänderung ihrer Nuance erleiden , ein Umstand , der für den 

 Techniker sehr wichtig, für den Mikroskopiker einstweilen ohne Be- 

 deutung ist. 



Eine solche Konstitutionsformel , wie die zitierte , läßt nun ge- 

 wisse Vergleiche mit dem Aufbau des Alizarins zu, 



OH 



Alizarin. 



denn die beiden benachbarten Hydroxyle verleihen dem Alizarin einen 

 ausgesprochen sauren Charakter , weshalb es befähigt ist, mit basi- 

 schen Körpern Salze zu bilden, Avobei die gelbliche Farbe des freien 

 Alizarins in Rot übergeht. 



Es kann daher nicht auffallen, daß die Chromotrope ebenso wie 

 die Alizarine beizenziehende Farbkörper sind, nur mit dem Unter- 

 schiede , daß die ersteren auch ohne vorgängige Beize aus Wasser 

 oder Alkohol aufgefärbt werden können. Aus allem diesem erhellt, 

 daß die Chromotrope auf drei sehr verschiedene Weisen 

 verwendet werden können. Man kann nämlich färben : 



1) aus wässeriger Lösung, und zwar 



a. auf eine Metallbeize , wobei die Hydroxyle ins Spiel 

 kommen ; 



b. oder ohne Beize unter Znsatz freier Säure , w^obei die 

 Sulfonsäuregruppen aktiv werden und' die Verankerung 

 der Farbe am Schnitt bewirken. 



2) aus alkoholischer Lösung, wobei der Chemismus weniger 

 wirksam wird und die physikalischen Faktoren des Färbungs- 

 prozesses in den Vordergrund treten. 



Über die aus wässeriger Lösung möglichen Färbungen stehen 

 mir einstweilen noch keine Erfahrungen zu Gebote ; jedoch habe ich 

 die Absicht, die Chromotrope auch nach dieser Richtung hin genauer 

 zu bearbeiten. Man würde nämlich, wenn man aus saurer Lösung 

 auffärbt, offenbar die Hydroxyle für die Einwirkung einer nach- 




342 Heidenhain: Anwendung des Azokarmins u. der Chromotrope. XXII,3. 



« 



folgenden basischen Farbe frei behalten , mit andern Worten : 

 wahrscheinlich werden sich diese Farbstoife vorzüglich für Neutral- 

 färbungen eignen, ein Gebiet, mit welchem ich mich bereits viel- 

 fach beschäftigt habe. 



Die Tabellen von Schultz und Julius führen neun verschiedene 

 Chromotrope auf. Ich selbst habe vier derartige Körper durch- 

 probiert, nämlich die Chromotrope 2 R, 2 B, 6 B, 7 B, welche, obwohl 

 sie der Konstitntion nach teilweise erheblich voneinander abweichen, ^ 

 docli im wesentlichen übereinstimmende, nnd zwar vorzügliche Eigen- 

 schaften aufweisen , so daß man bei der speziellen Auswahl die 

 Nuance der Farbkörper, ihre Löslichkeit und andere Nebeneigen- 

 schaften berücksichtigen kann. 



In dieser Hinsicht erwähne ich zur näheren Orientierung folgen- 

 des. Die Chromotrope 2R und 2B gehen mehr nach Gelbrot, 6B 

 und 7 B mehr nach Blaurot. 2 B löst sich relativ wenig in abso- 

 lutem Alkohol und die Tinktionen gehen dalier etwas langsam vor 

 sich. Die an den Schnitten produzierte Nuance ist ein kräftiges 

 Orangerot. Jedoch färbt dieser Körper im Ganzen nicht sehr tief, 

 so daß feinere Strukturteile hell bleiben, und daher sind die andern 

 Chromotrope entschieden vorzuziehen. 



Der Chromotrop 2 R löst sich stärker als 2 B, jedoch geht beim 

 Filtrieren der alkoholischen Lösung ein guter Teil des aufgeschwemmten 

 Farbkörpers durch den Filter hindurch. Dies schadet nun nichts, 

 denn beim Auswaschen des gefärbten Präparates in reinem Alkohol 

 löst sich das Sediment , welches sich auf den Schnitten niedersetzt, 

 in leichtester Weise. Außerdem kann man gänzlich ohne Schaden 

 für die nachfolgende Färbung das trübe Filtrat so stark mit reinem 

 Alkohol verdünnen, daß alle suspendierten Teilchen sich klar lösen. 

 Die an den Schnitten erhaltene Nuance ist ein sehr schönes, kräf- 

 tiges Kirschrot. 



Die Chromotrope 6 B und 7 B verhalten sich ganz ähnlich und 

 sind in ähnlicher Weise zu behandeln. Jedoch sind sie viel dunkler 

 und die an den Schnitten erhaltene Nuance ist ein prächtiges Rubinrot. 



Die histologischen Färbungsresultate sind wirklich exzellent. 

 Die bindegewebigen Teile werden prächtig dargestellt ; auch die 

 Basalmembranen , teilweise selbst das Reticulum der lymphatischen 

 Organe nehmen die Farbe an. Die elastischen Fasern bleiben aller- 

 dings ununterscheidbar ; wo aber starke, elastische Häute vorhanden 



^) Die Formeln siehe in Pflügers Archiv Bd. XC, p. 212. 




XXll,o. Hefdenhain: Anwendung des Azokarmins u. der Chroinotrope. 343 



sind, treten sie stark gefärbt hervor. Embryonale Knochensubstanz 

 färbt sich sehr stark , ein Umstand , den ich zu Kurszwecken aus- 

 nützte. Sclileimfärbungen kommen nicht immer zustande ; es gelang 

 mir aber mittels des Cliromotrop 2 R die verschleimten Teile des 

 Oberflächenepithels des Magens präclitig zu färben. 



Diese Farbkörper wirken auch protoplasmafärbend, und zwar 

 in günstigem Sinne, d. h. mit der Tendenz zur Ditferentiation sehr 

 feiner Teile. Hierüber liegen mir mehrfache Erfahrungen vor. Im 

 ganzen habe ich bisher über 30 verschiedene Gewebe und Orgaue 

 mit verschiedenen Chromotropen gefärbt uud bin fast immer zu tretf- 

 lichen Resultaten gekommen, besonders auch bei den Massenfärbungen 

 für die mikroskopischen Kurse. Daher glaube ich, daß diese Farb- 

 stoffe sich binnen kurzem einbürgern und ein dauerndes Hilfsmittel 

 in der Hand der Mikroskopiker sein werden. 



Die gesammte Färbungsprocedur ist also denkbar einfach uud 

 verläuft in folgenden Stationen : 



1) Kernfärbung in DELAFiELDSchem Hämatoxylin 5 eventuell 

 Differenzierung desselben, Abwaschen in Wasser, Einlegen in 96pro- 

 zentigen Alkohol. 



2) Alkalesziereu der Schnitte. Hierzu benutze ich nach vielen 

 Versuchen einen ammoniakalischen Alkohol, welcher auf 

 1 Liter absoluten Alkohol 1 cbcm Salmiakgeist enthält. Die Schnitte 

 bläuen sich in kürzester Zeit. Der alkalische Alkohol wird darauf 

 in das Standgefäß zurückgegossen und durch reinen Alkohol ersetzt. 



3) Färbung vermittels einer alkoholischen Chromotroplösung 5 

 diese Lösung kann konzentriert sein, aber auch verdünnte Lösungen 

 verlieren die Färbekraft nicht. 



4) Auswaschen in reinem absoluten Alkohol, Xylol, Balsam. 



[Eingegangen am 16. September 1905.] 




344 Pauly: Methode zur Bestimmung der Brechungsexponenten. XXII, 3, 



Über eine einfache Methode zur Bestimmung der 

 Brechungsexponenten von Flüssigkeiten. 



Von 



Anton Panly 



Wien. 



Hierzu eine Textfigur. 



Zahlreiche mineral-mikroskopische Arbeiten, bei welcbeu es 

 wünschenswert war , die Brecliungsexponenten von Flüssigkeiten zu 

 bestimmen, führten mich dahin. Versuche zu unternehmen, um eine 

 Methode zu finden, mittels welcher man, ohne kostspielige Apparate, 

 an einer sehr geringen Menge von Flüssigkeit den Brechungs- 

 exponenten bestimmen kann, imd zwar sollte dies mit einer erreich- 

 baren Genauigkeit von 2 bis 3 Einheiten der vierten Dezimalstelle 

 geschehen können. 



Die Methode beruht auf folgender tlberleguug, die eine glück- 

 liche Modifikation der AMSRONNSchen Methode (siehe: Ambronn, H., 

 Königlich sächsische Akademie der Wissenschaften, 1893, p. 3) 

 darstellt. 



Der geometrische Ort aller Indices bei einem optisch einachsigen 

 Mineral ist ein Rotationsellipsoid. Jeder Schnitt durch ein solches 

 Rotationsellipsoid, vorausgesetzt, daß er durch den Mittelpunkt geht, 

 bildet eine Ellipse.^ 



Sind die zwei Achsen der Ellipse gegeben, so läßt sich jeder 

 Radiusvektor berechnen , wenn der Winkel , den er mit den Achsen 

 einschließt, gegeben ist. 



a • h 

 1/ h' sin'^ {ap) -{- a^ cos- {ap) 



Da aber die Achsen der Ellipse gleich den Hauptbrechungs- 

 exponenteu des einachsigen Minerales gemacht werden, a = 2f, 6 = |, 



^) Vgl. Rosenbusch, H., Mikroskopische Physiographie der Minera- 

 lien, 1904, p. 68. 




XXII, 3. Pauly: Methode zur Bestimmung der Brechungsexponenten. 345 



so sind die Radiusvektoren j) = 7/ , gleich den zwischen a = ir 

 und 6 = 1 liegenden Breclmngsexponenten n , und der unter dem 

 Winkel (wn) zu v gerichtete Index ist gleich (nach obiger Formel), 



)l = 



i/"!"^ sin- {wn) + w- cos- [wn) 



Beim Doppelspat sind die Hauptbrechungsexponenten (bei Na- 

 Licht) iCna = l'G585, ^,ui = 1*4864, alle andern Indices zwischen 

 1-6585 und 1-4864 liegen auf der Ellipse. 



Hat man also eine parallel zur Hauptachse geschnittene Doppel- 

 spatplatte, so kann man damit alle Brechimgsexponenten von 1*4864 

 bis 1-6585 messen, wenn man den Winkel {ic n) kennt, indem man 

 jenen Brechungsexponeiiten sucht , der gleich dem Index der zu 

 untersuchenden Flüssigkeit ist, und indem man die Richtung, d.h. 

 den Winkel {ivn) bestimmt. 



Bei der praktischen Ausführung- verfährt man auf folgende W^eise : 

 Man gibt von der zu untersuchenden Flüssigkeit ein Tröpfchen auf 

 die Doppelspatplatte, bedeckt mit einem Deckglas, und schaltet den 

 Polarisator zur Festlegung der Schwingungsrichtung- ein. Der durch 

 den Nikol gehende Strahl schwingt nur in einer ganz bestimmten 

 Richtung, und nur der parallel zu dieser Schwiugungsrichtung liegende 

 Brechungsexponent kann zur Geltung- kommen. Da der Flüssigkeits- 

 tropfen isotrop ist , ist bei demselben der Breclnmgsexponent nach 

 allen Seiten hin der gleiche. Nach eingeschaltetem Polarisator dreht 

 man den Objekttisch mit dem Präparat so lange , bis die Uneben- 

 heiten der Oberfläche desselben oder die Grenzen des Randes ver- 

 schwinden. (Über das Verschwinden der Grenzen und die dabei 

 auftretenden Farbenerscheinungen siehe : Schröder v. d. Kolk, Kurze 

 Anleitung zur mikroskopischen Kristallbestimmung, Wiesbaden 1898, 

 und Ambronn, H., Königl. sächsische Gesellsch. d, Wissenschaften, 

 Leipzig 1896.) 



Der beim Verschwinden der Unebenheiten am Rande des Ob- 

 jekttisches abgelesene Winkel sei A. Hierauf dreht man weiter bis 

 die Grenzen wieder verschwinden, die am Rande des Objekttisches 

 nun abgelesene Zahl sei B. 



Die halbe Differenz der beiden Ablesungen, ^ ., {A — B) = T , 

 ist der Winkel, um den man den Doppelspat drehen mußte, d. h. 

 der Winkel, den der zu suchende Brechimgsexponent mit dem Haupt- 

 brechungsexponenten einschließt. Aus dem Winkel T' läßt sich )i 

 wie folgt berechnen : 




346 Pauly: Methode zur Bestimmung der Brechungsexponenten. XXIl, 3. 



n 



w'ii 



|A|i2gin2^_^^2cos2F 



oder man kann den Index n graphisch finden, indem man sich ein 

 Schema anlegt , auf dessen horizontaler Koordinate man die n auf- 

 trägt, z. B. in Intervallen von 0*01 zu O'Ol und auf dessen verti- 

 kaler Koordinate man die Winkel V aufträgt, z. B. von 10^ zu 10*^. 

 Beistehende Figur stellt ein solches Schema für eine |1 der 

 Hauptachse geschnittene Calcitplatte vor : Man hat beim Aufsuchen 



j ßö fO'r 1'62 1öO l'se 136 föh 1ö2 120 P/ S 



i658S i'6'1 /Ö2 löO fJS /JÖ -fö^ /.S2 /JO ISS 



des Brechungsexponenten darauf zu achten, ob der Winkel [ivri) 

 oder (|?i) gemessen wurde, da sich beide zu 90*^ ergänzen. Bei 

 diesem Schema ist der Winkel {iv n) augegeben. 



Hat man kein Mikroskop mit drehbarem , in Grade geteiltem 

 Objekttisch, so kann man das Präparat ruhig liegen lassen, und den 

 Analysator drehen, anstatt den Polarisator einzuschalten. 



Betrachtet man die Kurve dieses Schemas , so sieht man , daß 

 bei kleinen und großen Winkeln Y die Genauigkeit ziemlich groß 

 ist, während bei mittlerem V {V =^ 20*^ — 70^) die Genauigkeit nicht 

 so groß ist, da die Kurve im ersten Falle sehr steil ist, d. h. 

 bei großen Änderungen von V nur sehr kleine Änderungen von 

 n stattfinden. Im mittleren Teile der Kurve ist dies aber nicht 

 der Fall. 




XXII, 3. Pauly: Methode zur Besthumung der Brechungsexponenten. 347 



Will man nur Brechungsexponenten von n = 1"567 — n^ 1"658 

 bestimmen, so kann man sich eines gewöhnlichen Spaltblättchens von 

 Doppelspat bedienen. 



Die bei der Spaltung entstehenden treppeuförmigen Uneben- 

 heiten geben dabei vollkommene Kanten ab , deren Grenzlinie man 

 durch Drehen zum Verschwinden bringen kann. Da die Ebene des 

 Spaltblättchens 44^36' zur Hauptachse geneigt ist, so ist der kleinste 

 Brechimgsexponent | nicht 1'4864, sondern ^^ = 1*567, da |^ zu f 

 ebenfalls 44*^36' geneigt ist. 



Für größere Brechungsexponenten über 1;658 kann man sich 

 einer ebenfalls parallel zur Hauptachse geschnittenen Platte von 

 Eisenspat (Siderit) bedienen, deren | = 1'643 und deren iv ^= 1'872 

 ist. Man kann daher mit einer || zur Hauptachse geschnittenen 

 Calcit- und einer eben solchen Sideritplatte alle Brechungsindices 

 von 1"4864— 1*872 bestimmen, und zwar in einer für die Praxis 

 vollkommen genügenden Genauigkeit. Auch die Ausdehnung der 

 Indices von 1*486 — 1*872 dürfte für die Praxis vollkommen aus- 

 reichen. Daß man natürlich zur Herstellung der Kristallplatten nur 

 reinstes Material nehmen kann, ebenso , daß es vorteilhaft ist, die 

 Hanptiudices der Kristallplatten refraktometrisch zu bestimmen , um 

 dieselben möglichst genau zu kennen , braucht wohl nicht erwähnt 

 zu werden. Die Einfachheit dieser Methode dürfte wohl voraussetzen, 

 daß sie schon hier und da in Gebrauch ist, da ich sie jedoch in der 

 einschlägigen Literatur nicht erwähnt fand , so Avill ich dieselbe in 

 der Art, wie ich sie schon über ein Jahr im Gebrauch habe, ver- 

 ötfeutlichen. 



Durch Anwendung der Imraersionsmethoden, wie sie von nach- 

 stehenden Autoren ausgearbeitet wurden, und nachherige Bestimmung 

 des Brechimgsexponenten des Flüssigkeitsgemisches, kann man auch 

 die Indices fester Körper, besonders von Mineralien bestimmen, was 

 sehr willkommen sein dürfte. 



1) Schröder van der Kolk, Kurze Anleitung zur mikroskopischen Kri- 



stallbestimmung, Wiesbaden 1898. 



2) Lewy, Michel, Etüde sur la determination des Feldspats, Paris 1894, p. 58. 



3) Ambronn, H., Kgl. Sachs. Gesellsch. d. Wissenschaft., Leipzig 1893, p. 3. 



4) Brux, A., Archiv des Sciences phys. et mathem., Geneve 1894. 



5) Thonlet, J., Bulletin de la Societe mineralogique de France 1880, p. 62. 



6) Brandäo, V. DE SoNSA, Zentralblatt 1904. 



7) Über die Bestimmung von Brechungsexponenten von Mineralien nach 



dieser Methode: in Tschermaks „Mineralogischen und Petrographi- 

 schen Mitteilungen". 




348 Pauly: Methode zur Bestimmung der Brecbungsexponenten. XXII, 3. 



Einige Beispiele sollen die Brauchbarkeit und Genauigkeit dieser 

 Methode zeigen. 



1) Es ist der Index von Benzol zu bestimmen. 



Die beim Verschwinden der Grenze abgelesenen Winkel seien unter 

 A und B angegeben. Der gefundene Index = m, die Dift'erenz der Ab- 

 lesungen ^/., {A — B) sei V. 



A B V n 



156-60 298« 700 42' 1-5008 



298" 336-8 19" 24' 1-5008 



336-80 117-6" 700 24' 1-5012 



117-60 156-6" 190 1-5016 



Der Durchschnitt daraus = 150095. 



Mittels Prisma und Ablenkung wurde gefunden n = 1-5010. 



2) Der Index von Nitrobenzol ist fraglich. 



Ä B V n 



3570 960 49.50 1.551 



96« 1780 410 1-553 



1780 2740 480 1-555 



2740 3570 41-50 1-554 



Der Durchschnitt daraus = 1-55325. 

 Mittels Prisma n = 1-5537. 



3) Der Index von Zedernöl ist zu suchen. 



Der Durchschnitt daraus = 1-51525. 

 Mittels Prisma n = 1-5155. 



Der Durchschnitt daraus = 1-7425. 

 Mittels Prismamethode n = 17426. 



Sämtlich bei Na -Licht und 15 Celsius. 

 [Eingegangen am 29. September 1905.] 




XXII, 3. Ambronn: Über pleocliroitisehe Silberkristalle. 349 



[Mitteilung aus dem Institut für ^Mikroskopie an der Universität Jena. 



Über pleocliroitisehe Silberkristalle und die 

 Färbung mit Metallen. 



Von 

 H. AmbroDU 



in Jena. 



Im Jahre 1890 veröffentlichte ich in den Berichten der Sachs. 

 Gesellsch. d. Wiss. eine Mitteilung über die Färbung von pflanz- 

 lichen lind tierischen P^isern mit Gold- und Silbersalzen und den 

 dabei auftretenden sehr starken Pleochroismus.^ Auch doppel- 

 brechende Gelatine zeigte bei Behandlung mit Silbernitrat oder Gokl- 

 chlorid eine ganz ähnliche Verschiedenheit in der Absorption. Ich 

 hatte schon damals die Vermutung ausgesprochen, daß der Pleo- 

 chroismus in diesen Fällen auf die Einlagerung der Metalle in ihren 

 allotropen Modifikationen zurückzuführen sei, und daß wahrscheinlich 

 außer der regulär kristallisierenden Form des Silbers und des Goldes 

 noch eine in anisotropen und pleochroitischen Kristallen auftretende 

 Form existiere. Als Stütze für diese Vermutung konnte ich damals 

 nur die weitgehende Analogie in der Farbe der Fasern und der 

 Gelatine mit den Farben der allotropen oder kolloidalen Metall- 

 lösungen anführen ; außerdem wies ich auf den starken Pleochroismus 

 der zuerst von Kundt" durch Zerstäubung hergestellten Metallspiegel 

 hin. Versuche, die Fasern direkt mit den kolloidalen Metalllösungen 

 zu färben, hatten zwar keinen Erfolg gehabt, ich konnte aber einige 

 Jahre später in Gemeinschaft mit R. Zsigmondy^ nachweisen, daß 

 Gelatine mit kolloidaler Gold- oder Silberlösung vermischt im ge- 

 spannten Zustande denselben starken Pleochroismus zeigt , wie die 



^) Sitzb. d. math.-naturw. Klasse d. Kgl. Sachs. Ges. d. Wiss. Bd. XL VIII, 

 1896, p. 613-628. 



2) WiEDEM. Ann. Bd. KXVII, 1886, p. 61. 



3) Sitzb. Sachs. Ges. d. Wiss. Bd. LI, 1899, p. 13—15. 




350 Ambronn: Über pleochroitische Silberkristalle. XXII, 3. 



mit den Metallsalzen behandelten Fasern oder Gelatinestreifen. Daraus 

 durfte mit ziemliclier Sicherheit der Schluß gezogen werden, daß die 

 weitgehende Übereinstimmung im optischen Verhalten in beiden Fällen 

 auf der Identität der färbenden Körper beruhe , die in dem einen 

 Falle direkt durch Färben mit den allotropen oder kolloidalen Lö- 

 sungen, im andern Falle durch Behandlung mit Silber- und Gold- 

 salzen in der Gelatine eingelagert werden. 



Neuerdings ist es mir nun auch gelungen, meine damals aus- 

 gesprochene Vermutung noch nach einer andern Richtung zu be- 

 gründen. Bei der Entstehung der Farben in den mit den Metallsalzen 

 behandelten Fasern oder Gelatinestreifen spielt sich jedenfalls ein 

 Eeduktionsprozeß ab, und zwar erfolgt diese Reduktion in sehr engen 

 Räumen , nämlich in den Micellarinterstitien. Welche Dimensionen 

 hier in Betracht kommen , läßt sich natürlich nicht genau angeben, 

 w^ohl aber kann man mit einiger Wahrscheinlichkeit annehmen , daß 

 es sich um Strecken von nur wenigen Milliontelmillimetern handelt. 

 Es bietet nun gar keine Schwierigkeit, auf andere Weise solche 

 Räume herzustellen , die wenigstens in einer Richtung so kleine 

 Dimensionen besitzen. 



Wenn die chemische Natur der Fasern keine wesentliche Rolle 

 bei dem Reduktionsvorgang spielt, so war zu erwarten, daß sich in 

 derartigen Räumen die Reduktion jener Metallsalze in ähnlicher Weise 

 abspielen werde, wie in den Fasern. Diese Erwartung hat sich nun 

 insofern erfüllt, als in der Tat aus Lösungen von Silbernitrat bei 

 geeigneter Behandlung anisotrope und sehr stark pleochroi- 

 tische Kristalle sich bilden, deren sonstiges Verhalten zu dem 

 Schlüsse drängt, daß man es mit einer 1 a b i 1 e n F o r m des Silbers 

 zu tun habe, deren Kristalle nicht dem regulären, 

 sondern e i n e m a n d e r u , vermutlich d e m r h o m b i s c h e n 

 Kristallsystem angehören. 



Die Methode , die zur Herstellung jener äußerst engen Räume 

 dient, ist sehr einfach ; sie beruht auf demselben Verfahren, das ich 

 schon früher zur Erzeugung sehr dünner Kristalle , z. B. von Jod, 

 Kongorot, Methylenblau angewandt hatte. -^ Drückt man zwei ebene 

 gut gereinigte Glasplättchen fest aufeinander, so entstehen Newton sehe 

 Farbenringe und innerhalb der Ringe meist auch mehr oder weniger 

 ausgedehnte Flächen, die im auffallenden Lichte schwarz erscheinen. 

 Gerade an diesen Stellen beträgt nun die Dicke der zwischen den 



1) Berichte d. Deutsch. Botan. Ges. Bd. VI, 1888, p. 2'28. 




XXII, 3. Ambronn: Über pleochroitische Silberkristalle. 351 



beiden Platten befindlichen Schicht nur noch wenige Milliontelmilli- 

 meter (jit/^), und dieser Abstand dürfte jedenfalls den submikro- 

 skopischen Micellarinterstitien vergleichbar sein. Man verwendet zu 

 den Versuchen am besten Objektträger aus gutem Spiegelglas und 

 möglichst ebene Deckgläser. Die Hauptbedingung für das Gelingen 

 der Versuche ist eine äußerst sorgfältige Reinigung der beiden Glas- 

 flächen; vor dem Auflegen des Deckglases müssen beide Flächen 

 nochmals mit einem ganz reinen Haarpinsel abgestäubt werden. Auf 

 den in dieser Weise vorbereiteten Objektträger bringt man nun 

 mittels eines feineu Glasfadens eine sehr geringe Menge der Silber- 

 nitratlösung und legt dann möglichst rasch das gut abgestäubte Deck- 

 glas darüber. Bei leichtem Andrücken des Deckglases mit dem 

 Finger erhält man breite Ringe in den Farben der ersten Ordnungen, 

 zugleich aber auch ausgedehntere Partien, die im auffallenden Lichte 

 nur Schwarz zeigen. Die so hergestellten Präparate läßt man nun 

 einige Tage an einem hellen Fenster liegen, es verdunstet dabei 

 der größte Teil der Flüssigkeit und in den farbigen Ringen bilden 

 sich dünne Kristalle des benutzten Salzes ; in den schwarzen Partien 

 bleibt jedoch noch längere Zeit eine Flüssigkeitsschicht erhalten, 

 deren Dicke jedenfalls, wie schon erwähnt, nur wenige ///t beträgt. 

 Meine Absicht ging nun zunächst dahin , jene dünnen Kriställ- 

 chen in irgendeiner Weise so zu Silber zu reduzieren, daß gewisser- 

 maßen Pseudomorphosen von Silber nach Silbernitrat entstanden. 

 Alle Versuche in dieser Richtung schlugen aber vollständig fehl. 

 Dagegen ergab sich das für die vorliegende Frage viel Avichtigere 

 Resultat, daß innerhalb der äußerst dünnen Flüssigkeitsschicht stark 

 pleochroitische Kristalle von sehr verschiedener Gestalt entstehen, 

 deren Wachstum und Formveränderung mehrere Tage hindurch be- 

 obachtet werden kann. Es scheint also hier die Reduktion aus- 

 schließlich durch den Einfluß der Belichtung zustande zu kommen. 

 Meist bilden sich unregelmäßig geformte dunkelblaugraue Plättchen, 

 die bei Untersuchung im polarisierten Lichte einen sehr deutlichen 

 Pleochroismus indigoblau-gelb oder hellblau-rotviolett zeigen. Der 

 Umstand, daß zwei deutUch verschiedene Formen des Pleochroismus 

 auftreten, weist darauf hin, daß es sich um optisch-zweiachsige Kri- 

 stalle handelt ; die äußere Form der Plättchen , sowie die Lage der 

 Auslöschungsrichtungen läßt auf die Zugehörigkeit der Kristalle zum 

 rhombischen System schließen ; eine genauere kristallographische Be- 

 stimmung dürfte bei der meist ganz unregelmäßigen Begrenzung der 

 Plättchen, die sich fast stets zu drusenförmigeu Gruppen zusammen- 




352 Ambronn: Über pleocbroitische Silbeikristalle. XXII, 3. 



lagern, kaum auszuführen sein. Außer diesen Formen treten, wenn 

 auch seltener, natlelartige Kristalle und in ganz einzelnen Fällen 

 sehr regelmäßig gestaltete Sphärokristalle auf. Sowohl die Nadeln, 

 wie die Sphärokristalle zeigen nur den Pleochroismus indigoblau- 

 gelb ; die Sphärokristalle besitzen demnach über dem Polarisator 

 zwei blaue und zwei gelbe Sektoren , und zwar geht die Polarisa- 

 tionsebene des Polarisators durch die gelben Sektoren hindurch. 



Es kann ja allerdings nun die Frage gestellt werden, ob man 

 es in diesen optisch anisotropen und pleochroitischen Kristallen wirk- 

 lich mit elementarem Silber zu tun habe, oder ob nicht vielmehr 

 eine niedere Oxydationsstufe dieses Metalls vorliege. Eine völlig 

 sichere Beantwortung dieser Frage auf Grund der bis jetzt vor- 

 liegenden Beobachtungen wird sich allerdings nicht geben lassen, 

 doch sprechen verschiedene Gründe dafür, daß die Kristalle eine 

 labile Modifikation des Silbers selbst darstellen. Der Charakter des 

 Pleochroismus ist derselbe wie bei den mit Silbernitrat behandelten 

 Fasern, und die allgemeine Annahme geht doch wohl dahin, daß in 

 diesen Fällen eine Reduktion zu elementaren Silber vorliege. Auch 

 die von Kundt und später von F. Braun ^ durch Zerstäubung von 

 Drähten hergestellten , doppelbrechenden Silberniederschläge zeigen 

 ähnliche Verschiedenheiten in der Absoi-ption. Kicht bloß in dem 

 optischen Verhalten besteht zwischen den in engen Räumen gewach- 

 senen Kristallen und jenen Silberniederschlägen eine weitgehende 

 Analogie, sondern auch noch in einem andern Punkte, nämlich darin, 

 daß beide mit der Zeit ihre Doppelbrechung und damit natürlich 

 auch den Pleochroismus verlieren. Bei den Kundt sehen Spiegeln 

 tritt diese Veränderung erst nach längerer Zeit ein,- bei den aus 

 Silbernitratlösung entstandenen Kristallen kann man sie auf zweierlei 

 Weise unter dem Mikroskop direkt beobachten. Sprengt man nämlich 

 das Deckglas ab, so bemerkt man sofort nicht bloß die Veränderung 

 im optischen Verhalten, sondern es tritt auch in der Regel eine 

 wesentliche Veränderung der Form und der Färbung ein. Beson- 

 ders deutlich kann man diesen Vorgang beobachten, wenn man 

 Präparate wählt, in denen die Kristalle in drusenförmig zusammen- 

 gelagerten Plättchen ausgebildet sind. Diese Drusen wandeln sich 

 nach Wegnahme des Deckglases in metallisch glänzende Spiegel um, 



1) Drude s Ann. Bd. XVI, 1904, p. 1—19, u. 238—281. 



2) Vgl. Braun, F., Drude s Ann. Bd. XVI, 1904, p. 4 und Kaempp, F., 

 ebenda, p. 324. 




XXII, 3. Arabronn: (l)er pleocliroitische Silberkristalle. 353 



wobei nicht nur die frühere Begrenzung stark verändert wird, sondern 

 auch ein Wechsel der Farbe im durchfallenden Licht von dunkel- 

 blaugrau in ein intensives Stahlblau eintritt. Auch ohne Entfernung 

 des Deckglases läßt sich die Umwandlung leicht beobachten, wenn 

 das Wachstum einer solchen Druse mehrere Tage hindurch unter 

 dem Mikroskop verfolgt wird. Man sieht dann , daß in einer aus 

 lauter stark pleochroitischen Plättchen bestehenden Druse nach drei 

 oder vier Tagen an einzelnen Stellen der Pleochroismus völlig ver- 

 schwindet und eine wesentlich anders begrenzte, metallisch glänzende 

 Schicht entsteht. Diese Veränderung breitet sich allmählich immer 

 weiter aus und ergreift schließlich fast die ganze Druse ; nur an 

 deren Rande entstehen immer neue pleochroitische Plättchen, die 

 aber nach einigen Tagen dieselbe Umwandlung erfahren. Diese 

 Umwandlung, sowie das Weiterwachsen der Kristalle scheint ganz 

 zu unterbleiben , wenn man die Präparate nach Bildung der pleo- 

 chroitischen Kristalle im Dunkeln aufbewahrt. Es ist mir sehr wahr- 

 scheinlich, daß bei dem fortschreitenden Wachstum der Drusen die 

 Dicke an einzelnen Stellen vergrößert und infolgedessen das Deckglas 

 etwas emporgehoben wird ; es könnte dadurch sehr wohl die Ent- 

 fernung zwischen Deckglas und Objektträger , die ursprünglich nur 

 wenige /^// betrug, an diesen Stellen beträchtlich vergrößert werden. 

 Ist aber eine solche lokale Erweiterung des Raumes geschaffen, dann 

 erfolgt die eben geschilderte Umwandlung der labilen Modifikation 

 in die stabile des gewöhnlichen Silbers. 



Man würde demnach anzunehmen haben, daß in den mit Silber- 

 nitrat behandelten Fasern die labile Modifikation des Silbers in sehr 

 kleinen gleichsinnig orientierten Kristallen eingelagert sei , und daß 

 in den engen Micellarinterstitien dieser labile Zustand dauernd er- 

 halten bleibe, etwa wie bei isodimorphen Mischkristallen häufig die 

 eine Komponente in einer Kristallform erhalten bleibt , in der sie 

 unter gewöhnlichen Verhältnissen nicht bestehen kann. Es soll hier 

 nicht weiter auf diese Analogie zwischen gefärbten Fasern und Misch- 

 kristallen, gefärbten Kristalleu und ähnlichen Geraengen eingegangen 

 werden, nur soviel mag noch erwähnt werden , daß die Annahme 

 des Dimorphismus für Silber und auch für andere bislier nur als 

 regulär bekannte Metalle meines Eraclitens gar nichts Befremdendes 

 hat. Viele andere regulär kristallisierende Körper sind dimorph ; 

 auch einigen, dem Silber nahestehenden Metallen, wie Palladium und 

 vermutlich auch den anderen Platinmetallen kommt diese Eigenschaft 

 zu. Bemerkenswert ist auch, daß ein Goldamalgam tetragonalkristalli- 



Zeitsclir. f. iviss. Mikroskopie. XXII, 3. 28 




354 Ambronn: Über pleochroitische Silberkristalle. XXII. 3. 



siert, während doch bisher sowohl für Gold wie für Quecksilber nur 

 die reguläre Modifikation bekannt ist. 



Wenn die Annahme begründet ist , daß bei der Silberfärbung 

 die Einlagerung des Metalls in einer nicht regulären Form erfolgt 

 und dadurch der starke Pleochroismus hervorgerufen wird , so ist 

 auch zu erwarten, daß bei Färbung mit anderen Metallen ganz ähn- 

 liche Erscheinungen auftreten. Daß bei Behandlung mit Goldchlorid 

 in den verschiedensten Fasern ebenfalls ein sehr starker Pleochroismus 

 erzeugt wird, habe ich schon früher nachgewiesen. Inzwischen ist 

 es nun auch gelungen, mit Platin, Palladium, Quecksilber^, ferner 

 mit Selen und Arsen in Nesselfasern intensive Färbungen und Pleo- 

 chroismus hervorzurufen ; und ich zweifle gar nicht daran, daß sich 

 bei Versuchen mit anderen Metallen, die noch im Gange sind, ganz 

 ähnliche Resultate ergeben werden. Es soll hier nicht näher auf 

 diese Färbungen eingegangen werden, da demnächst au anderer 

 Stelle darüber berichtet werden wird. 



Es lag nun die Frage nahe, ob sich nicht aus Goldchlorid- und 

 Platiuchloridlösungen ebenso Avie aus Silbernitrat in sehr engen 

 Räumen anisotrope und pleochroitische Kristalle ausscheiden. Bei 

 Goldchlorid ist es mir iu der Tat gelungen, nadeiförmige, stark 

 doppelbrechende Kristalle zu erhalten , die denselben Pleochroismus 

 weinrot-blaugrün zeigen, wie er in den mit Goldchlorid behandelten 

 Fasern auftritt. Bei Platinchlorid habe ich bisher trotz vieler Be- 

 niühungen noch keine sicheren Resultate in dieser Richtung erhalten ; 

 ich hoffe jedoch, auch bei Platin und den anderen Metallen, mit 

 denen Färbungen bereits ausgeführt Avurden, zu ähnlichen Resultaten 

 wie beim Silber und Gold zu gelangen. 



Auch über eine weitere Frage, die von allgemeinerem Interesse 

 ist, sollen noch Versuche angestellt werden. Da die Färbungen der 

 Fasern mit Quecksilber leicht gelingen, so ist zu erwarten, daß sich 

 in den Fasern , die bereits mit einem anderen Metall gefärbt sind, 

 Amalgame erzeugen lassen. 



Zum Schlüsse möge noch auf die Beziehungen hingewiesen 

 Averden, die zwischen den im vorstehenden mitgeteilten Beobachtungen 

 und den schon erAvähnten Untersuchungen von F. Braun über das 

 optische Verhalten von Metallspiegeln bestehen. Braun hat in seinen 

 Mitteilungen mehrfach auf den Pleochroismus der mit Silber und 



^) Vgl. Fox, K., Beiträge zur Kenntnis der Färbereivorgänge (Zeitschr. 

 f. Farben- und Textilindustrie, IV. Jahrg., H. 11). 




XXII, 3. Ambronn: Über pleochroitische Silberkristalle. 355 



Gold gefärbten Fasern Bezug genommen ; er hat die verschiedene 

 Absorption in den von ihm und früher von Kundt hergestellten 

 Metallspiegeln auf eine Gitterwirkung zurückgeführt und diese Er- 

 klärung auch auf die Erscheinungen in den gefärbten Fasern aus- 

 gedehnt. In einem anisotropen trüben Medium oder in einem Gitter 

 mit verschiedenen Abständen in verschiedenen Richtungen können, 

 wie ich früher schon hervorgehoben habe ^, zweifellos Unterschiede 

 in der Absorption auftreten ; es ist nur nicht recht verständlich, 

 warum manche intensive Färbungen von Fasern , auch solche mit 

 Silber und Gold, absolut keinen Pleochroismus erkennen lassen. Daß 

 bei gefärbten Fasern in manchen Fällen solche Gitterwirkungen zu- 

 stande kommen, ist keineswegs ausgeschlossen ; es ergibt sich aber 

 meines Erachtens eine viel plausiblere Erklärung des starken Pleo- 

 chroismus, wenn man nachweisen kann, daß die färbenden Substanzen, 

 also z. B. Gold, Jod, Silber, Kongorot, in optisch anisotropen und 

 pleochroitischen Kristallen existieren, oder daß wenigstens unter ge- 

 wissen Umständen aus den zur Färbung benutzten Lösungen Kri- 

 ställchen entstehen, die in ihrem optischen Verhalten mit dem der 

 gefärbten Fasern eine weitgehende Übereinstimmung zeigen. 



1) Sitzb. Sachs. Ges. Wiss. Bd. XLVIII, p. 621 u. 622. 

 Jena, September 1905. 



[Eingegangen am 6. Oktober 1905.] 



23' 




356 Sommerfeldt: Achsenwinkelbestimmung b. Kristallpräparat. XXII,3. 



Die mikroskopische Achsenwinkelbestimmung 

 bei sehr kleinen Kristallpräparaten. 



Von 



Erust Sommerfeldt 



in Tübingen. 



Hierzu vier Holzschnitte. 



Die Ausmessung der Interferenzbilder, welche im konvergenten 

 polarisierten Licht bei anisotropen Kristallen entstehen , ist einfach, 

 solange das vorliegende Präparat noch groß genug ist, um die Inter- 

 ferenzerscheinungen unter Mitbenutzung des Okulars beobachten zu 

 können; mag man sich der Klein sehen oder Bertrand sehen Lupe 

 bedienen, so genügt stets die Anbringung eines Mikrometers im 

 Okular, um die Entfernung der optischen Achsen an Platten, welche 

 senkrecht zur spitzen Mittellinie geschnitten sind, zu bestimmen. Ist 

 die Platte schief zu dieser Mittellinie gerichtet, so genügt zwar ein ein- 

 faches Skalenmikrometer nicht mehr, ist dasselbe aber um die Mikro- 

 skopachse drehbar und der Drehungswinkel genau meßbar, so bietet 

 gich wiederum die Möglichkeit den Achsenwinkel zu bestimmen, denn 

 es ist alsdann möglich beliebige Punkte des luterferenzbildes durch 

 ihre Polarkoordinaten festzulegen und so einen Ersatz für die Becke sehe 

 Zeichenmethode zu erlangen. Man braucht ja , um die Polarkoordi- 

 naten eines beliebigen Punktes F zu bestimmen, nur die Mikrometer- 

 skala aus ihrer Anfaugsstellung soweit (etwa im Betrage a) zu drehen, 

 daß sie durch P hindurchgeht und alsdann den Abstand zwischen P 

 und dem Mittelpunkt des Gesichtsfeldes auf dieser Skala abzulesen ; 

 dieser Abstand nebst dem Drehungswinkel a sind die Polarkoordinaten 

 von P. 



Indessen werden die Interferenzerscheinungen sehr kleiner Kri- 

 stallplatten bei Mitbenutzung des Okulars so liehtschwach, daß dieses 

 Verfahren leiclit versagt, die von Lesaulx zuerst angegebene Beob- 

 achtuugsmethode beim herausgenommenen Okular liefert viel deut- 

 lichere Bilder , erlaubt aber ohne Aveiteres nur eine qualitative Be- 




XXII,3, Sommerfeldt: Achsenwinkelbestimmung b. Kristallpräparat. 357 



urteilung, nicht eine Ausmessung derselben. Die Zeichenmethode 

 Bkckes führt zwar auch hier zum Ziel, erfordert aber einige um- 



1. 



ständliche Zentrierungen und überdies die Anschaffung eines nicht 

 ganz billigen Mikroskopattributes , nämlich eines mit zentrierbarem 

 Drehtisch ausgestatteten Zeichenapparates. Die im Folgenden zu 




358 Sommerfeldt: Achsenwinkelbestimmnng b. Kristallpräparat. XXII, 3. 



bescbreibeucle Beobacbtungsmetbode erscheint mir sowohl in ein- 

 facherer Weise als auch mittels einfacherer Hilfsmittel ausführbar, 

 sie beruht auf dem Prinzip, daß eine Skala, wenn sie an geeigneter 

 Stelle unterhalb des Objekttisches und parallel demselben angebracht 

 ist, gleichzeitig mit dem nach Lasaulx' Methode erzeugten Achsen- 

 bilde scharf sichtbar sind. Auf meine Anregung hin hat die Firma 

 R. FuEss in Steglitz diese Skala mit dem Kondensor verbunden, und 

 zwar derart, daß der Kondensor aus drei Plankonvexlinsen besteht, 

 deren unterste auf ihrer planen Seite die Skala trägt ; der Kondensor 

 ist so berechnet, daß eine gerade dort befindliche Skala gleichzeitig 

 mit dem Achsenbild scharf erscheint. 



Als Objektiv ist besonders zweckmäßig das von Fuess eigens 

 für die Beobachtung von Achsenbildern in den Handel gebrachte 

 (vgl. z. B. C. Leiss, Die optischen Instrumente der Firma R. Fuess, 

 p. 359). Das mit Hilfe eines solchen erzeugte Interferenzbild ver- 

 trägt eine nicht unbeträchtliche Vergröße- 

 rung mittels der Laspeyres sehen Lupe ohne 

 an Lichtstärke wesentlich einzubüßen. 



Es läßt sich diese Lupe wohl für 

 subjektive als auch für objektive Er- 

 zeugungsmethode der Achsenbilder (d. h. 

 2- für Projektion resp. Mikrophotographie 



derselben) anwenden ; ihre Stellung inner- 

 halb des Mikroskoptubus ist jedoch in beiden Fälle eine verschiedene. 

 Man braucht indessen nicht eine oft störend große Zahl von Durch- 

 bohrungen des Tubus vorzunehmen , sondern kann sich folgender- 

 maßen helfen : Den „Objektivteller", mittels dessen das Objektiv im 

 „Zangenwechsler" festgehalten wird , habe ich mit einem schmalen 

 zylindrischen Ausatz (vgl. Fig. 2) versehen lassen, in dessen Durch- 

 bohrung die LASPYREssche Lupe eingeschoben werden kann. Die 

 Lupe selbst ist in Figur 3 dargestellt, und zwar trägt die Hälfte 

 a^b der doppelkreisförmigen Metallhülse diese Linse, die ihr kongruente 

 Hälfte a.^b dient als Handhabe bei eingesteckter Lupe, enthält aber 

 außerdem eine als Blende wirkende Höhlung und wird eingeschoben, 

 wenn ohne Lupe beobachtet wird und kein Nebenlicht durch den 

 Schlitz bei A eindringen darf. 



Es ist zweckmäßig der Laspeyres sehen Lupe eine solche Brenn- 

 weite zu verleihen, daß sie für Mikrophotographie ein wenig ober- 

 halb des Innennikols Platz findet ; ich benutze in diesem Fall zwei 

 vertikale Stäbchen, auf denen die Lupe auf- und abgeschoben werden 




XXII, 3. SomiuerfeUlt: Achsen\vinkolI)estiiuranng b. KristaIIpräp;irat. 359 



kann, zu ihrer Befestigung. Diese Stiibchen sind in die Schiebehülse 

 des Innennikols eingeschraubt und die Erweiterung der zur Aufnahme 

 des Innennikols dienenden Tubusdurchbohrung gestattet es die Stellung 

 der Laspeyres sehen Lupe bequem zu regulieren. 



Der Kondensor kann vollkommen unabhängig von dem Polari- 

 sator bequem aus- und eingeschaltet werden , entsprechend einer 

 kürzlich von Tschermak an die petrographischen Mikroskope ge- 

 stellten Forderung ; und muß für unsere Zwecke um die Instrument- 

 achse drehbar sein (vgl. Anmerk. 1); beide Möglichkeiten werden 

 dadurch erreicht, daß der Kondensor ähnlich dem von ten Siethoff^ 

 konstruierten in einer tellerförmigen Fassung sich befindet; diese 

 paßt in eine au der Unterseite des Objekttisches angebrachte Aus- 

 bohrung und wird in ihr durch Klammern festgehalten, die genau 

 so wie gewöhnliche Objektklammern beschaffen , aber zu ihnen ent- 

 gegengesetzt gestellt sind, nämlich gegen die Unter- 

 seite des Objekttisches drücken (vgl. Fig. 4).^ 



Die Drehung des Objekts ist in einer ähnlichen 

 Weise wie früher (vgl. diese Zeitschr. Bd. XXI, 1904, 

 p. 181) von mir beschrieben wurde, durch eine gleich- 

 zeitige Drehung der beiden Nikols ersetzt; da jedoch 

 für die vorliegenden Zwecke ein möglichst großes Ge- 

 sichtsfeld erwünscht ist, wurde nicht, wie damals ein 3. 

 auf den Mikroskoptubus aufsetzbarer Analysator, son- 

 dern ein „Innennikol" benutzt und drehbar gemacht, und zwar hierzu 

 ober- und unterhalb des Innennikols J der Tubus parallel der Objekt- 

 tischebene durchschnitten. Der so erhaltene drehbare Zylindermantel 

 wurde durch die Klammer K mit der Stange S verbunden, welche 

 auf dem drehbaren Ringe Z senkrecht steht '^ und anderseits den 

 Polarisator P trägt. 



^) TEN SiETHOFF, Beitrag zur Kristalluntersuchung im konvergenten 

 polarisierten Lichte fZentralbl. f. Min. 1903, p. 657; Ref. diese Zeitschr. 

 Bd. XXI, 1904, p. 109). 



-) Der Polarisator ist in dieser Figur fortgelassen, um den gesamten 

 Kondensor sichtbar zu machen , er würde bei Z in derselben Weise wie 

 Figur 1 zeigt, anzufügen sein. Will man auch bei gesenktem Kondensor 

 beobachten, so halte man ihn mit einem Ringel statt der Klammern fest, 

 welcher mittels der Stange D (Fig. 1) auf- und abschiebbar ist. 



^) Auf dem Ringe Z befindet sich eine Gradteilung, welche erstens 

 den Teilkreis eines gewöhnlichen Objekttisches ersetzt (vgl. meine früheren 

 Ausführungen in dieser Zeitschr. Bd. XXI, 1904, p. 183), zweitens aber auch 

 die mit dem Kondensor vorzunehmenden Drehungen zu messen gestattet. 




360 Sommerfeldt: Aclisenwinkelbestimmung b. Kristallpnäparat. XXII,3. 



Scliließlicli ist für die Ausmessung von Interferenzbildern ein 

 Kreuzsclilittentisch von Wichtigkeit; derselbe wird unentbelirlich, wenn 

 die Achseubilder , welche die beiden ungleich orientierten Partien 

 eines Kristallzwillings aufweisen, miteinander verglichen werden sollen. 

 Es kommt dieser Fall, in welchem eine Parallelverschiebung des 

 Präparats ohne jegliche Drehung auszuführen ist, bei der optischen 

 Untersuchung von Zwillingskristallen häufig vor, welche besonders 



zur Bestimmung der Feldspate und Pyroxene für die Petrographie 

 von Wichtigkeit ist. 



Die meisten Kreuzschlittentische würden nur derart an unserem 

 Mikroskopmodell angebracht werden kihmen , daß sie sich zugleich 

 mit dem äußeren Kinge B, drehen und daher für unseren Zweck 

 nicht verwendbar sein. Denn eine Änderung in der gegenseitigen 

 Stellung zwischen l'olarisatoren und Präparat, auf die allein es uns 



Letztere erfolgen um solche Beträge , daß die Mikrometerskala des Kon- 

 densors durch den jeweilig zu bestimmenden Punkt P hindurchgeht und 

 so der bei Z ablesbare Drehungswinkel und der alsdann an der Mikro- 

 raeterskala selbst sichtbare Centroabstand von P die anfangs erwähnten 

 Polarkoordinaten dieses Punktes ergeben. 




XXII,3. Soinmerfeldt: Achsenwinkelbestimmung b. Kristallpräparat. 3(31 



ankommt , würde durch die Anwendung eines solchen Kreuz- 

 schlittentisches unmöglich werden. Ein von R. Winkel (Göttingen) 

 bereits früher ausgeführtes Modell eines Kreuzschlittens läßt sich 

 jedoch ohne erhebliche Kosten unserem Zweck anpassen. Dieser 

 Kreuzschlittentisch wird bei T und U an denjenigen Teil des festen 

 (quadratischen) Objekttisches angeschraubt, welcher den Drehring R 

 überragt; indem der Kreuzschlittentisch über diesen Drehring hin- 

 übergreift, bietet er dem Objekt eine bei jeder Drehung von R fest- 

 bleibende Unterlage dar und kann durch Lösen der (nicht in der 

 Figur dargestellten) Schrauben bei T und U momentan entfernt 

 werden , sobald nur solche Beobachtungen angestellt werden , bei 

 denen es auf eine vollkommen exakte Parallelführung des Präparats 

 nicht ankommt. 



Ein besonderer Vorteil der Methode, statt der Präparate die 

 Polarisatoren zudrehen, besteht nun in unserem Falle in folgendem: 

 Befindet sich der Kristall, dessen Achsenwinkel bestimmt werden soll, 

 in einem Gesteiusschliff, aus welchem er nicht isoliert werden kann, so 

 müssen die angrenzenden Partien abgeblendet werden, um nicht durch 

 ihre eigenen Interferenzerscheinungen störend zu wirken, und man 

 bediente sich hierzu bisher ausschließlich kreisförmiger Blenden. 

 Da aber sehr kleine Kristalle meistens nadelförmig sind oder doch nur 

 höchst selten ungefähre Kreisform besitzen, geht durch derartige Blen- 

 den viel von der erreichbaren Lichtstärke der Interferenzerscheinung 

 verloren. In den meisten Fällen wären spaltförmige Blenden, die so 

 gestellt werden, daß ihre Längsrichtung mit derjenigen übereinstimmt, 

 welche die Kristalluadel darbietet, zweckmäßiger. Daß man dennoch 

 solche Blenden bisher nicht verwandte, hat seinen Grund otfenbar 

 darin, daß bei einer geringen Drehung des Präparats die Längs- 

 richtungen der Blendenöffnung und Kristallnadel sich bereits wechsel- 

 seitig verdecken und bei solchen Stellungen eine kreisförmige Blende 

 nahezu gleiches leistet. Wenn aber — wie bei dem hier beschriebenen 

 Verfahren — die Interferenzbilder am festbleibenden Präparat durch 

 gleichzeitige Drehung der gekreuzten Nikols geprüft werden, kann 

 man ohne weiteres die größte Lichtstärke, welche mit der Spaltblende 

 erreichbar ist, bei jeder Drehung ausnutzen, durch welche der Winkel 

 zwischen der Längsrichtung des Präparates und den Nikolhaupt- 

 schnitten geändert wird. 



Für diesen Zweck habe ich eine au anderem Ort zu beschrei- 

 bende Reguliervorrichtung des Spaltes konstruiert, welche ähnlich wie 

 bei dem Spalt eines Spektralapparates die Breite der LichtötFuung 




362 Arbeit: Der Leitzsche Universal -Projektions -Apparat. XXII, 3. 



zu verändern gestattet und auch die Länge des Spaltes zu variieren 

 erlaubt. Letzteres ist notwendig, da bei zu großer Spaltlänge durch 

 die neben dem üntersuchungsobjekt befindlichen Mineralien des Schlifts 

 die eigentliche Interferenzerscheinung gestört werden könnte. 



[Eingegangen am 2. August 1905.] 



Der Leitzsche Universal -Projektions -Apparat. 



Von 



E. Arbeit 



in Wetzlar. 



Hierzu vier Holzschnitte. 



Die Umstände, welche der vor mehr als 30 Jahren zuerst durch 

 JoH. CzERMAK geübtcu Lehrmethode — Einführung der Projektions- 

 kunst in die medizinischen Wissenschaften , beziehungsweise in die 

 Hörsäle überhaupt — im Laufe der Jahre mehr und mehr Anhänger 

 zugeführt haben , sind vornehmlich in der Vervollkommnung der 

 optischen Hilfsmittel, der bilderzeugenden Linsensj^steme und noch 

 mehr in der Verbesserung der verfügbaren Lichtquellen zu erblicken. 

 Die Mr)glichkeit einer glücklichen Verwendung aller dieser lilrruugen- 

 schaften zeitigte nach und nach Apparatkonstruktionen, welche sich 

 durch universale Verwertbarkeit auszeichneten , indem sie nicht nur 

 für diaskopische, sondern gleichzeitig auch für episkopische Projek- 

 tionen eingerichtet w^aren. 



Die Bemühungen um Universal-Apparate solcher Art sind fast 

 ebenso alt , wie die Projektionskunst selbst ; die ersten Versuche 

 wurden bereits vor einigen Jahrzehnten unter den Bezeichnungen 

 „Wundercamera" oder auch „Megaskop" bekannt, sie konnten in- 

 dessen nicht befriedigen, weil die i)rojizierten Bilder die notwendige 

 Helligkeit ganz vermissen ließen. 



Wenn auch spätere Konstruktionen bei aller Gediegenheit der 

 Ausführung und trotz Benutzung aller optischen und beleuchtungs- 

 technischen Errungenschaften auch noch immer nicht voll befriedigen 




XXII, 3. Arbeit: Der Leitzsche Universal-Projektions- Apparat. 363 



konnteu, so trug auch hier lediglich der in der ganzen Apparat- 

 anordnung begründete Lichtverlust die Schuld an dem nicht vollen 

 Erfolge ; überall nämlich war bisher die Anordnung eine derartige, 

 daß gerade bei der episkopischeu Projektion , wo es sich darum 

 handelt , opake Gegenstände gewissermaßen „selbstleuchtend" zu 

 machen , das Objekt von einem durch Reflexionen bereits 

 geschwächten Lichte erleuchtet wird. 



Wenn ich mich hier nicht einfach mit dem Hinweis darauf be- 

 gnügen will, daß es der optischen Werkstätte E. Leitz -Wetzlar 

 gelimgen ist, ihren neuen Universal-Projektions- Apparat von einem 

 solchen störenden Fehler so gut wie gänzlich zu befreien, so ge- 

 schieht es in gerechter Würdigung eines neuen, hier bei dem Leitz- 

 schen Apparate durchgeführten Konstruktionsprinzipes, das abgesehen 

 von dem tatsächlichen Nutzeffekt durch seine Einfachheit überraschen 

 muß: „Beleuchtung des zu projizierenden Gegenstandes mit direk- 

 tem, unr eflektiertem Licht." 



Es sei hier gleich vorweg genommen, daß der Schwerpunkt der 

 Leitz sehen Verbesserung in einer leicht und sicher funktionierenden 

 Einrichtung liegt , mittels welcher die Lichtquelle aus der optischen 

 Achse des Apparates gedreht werden kann , und zwar handelt es 

 sich um eine horizontale Drehung in seitlicher Richtung und um 

 eine Drehung in vertikaler Ebene ; die Ausführung der ersten Be- 

 wegung ermöglicht direkte Beleuchtung seitlich befindlicher Gegen- 

 stände , während bei letzterer Anordnung undurchsichtige auf einem 

 horizontalen Tische liegende Körper oder Illustrationen , Druck aus 

 Büchern etc. direktes Licht erhalten ; der erste Fall sieht also die 

 Projektion von Körpern in ihrer seitlichen Ansicht vor, im andern 

 Falle erscheinen die Körper A'On oben betrachtet. 



Bevor die Anordnung der einzelnen Apparatteile und die ver- 

 schiedenen Handgriffe besprochen werden , welche beim Übergang 

 von einer bestimmten Projektionsart zu irgendeiner andern auszuführen 

 sind , erscheinen zunächst einige Worte über die Hauptteile des 

 Apparates angebracht. 



Die Hauptteile des Apparates , Lichtquelle und optische Bank 

 sind von einem Gestell umgeben, über welches ein Dnnkeltuch ge- 

 breitet ist, um das Eindringen von störendem Lichte in den Pro- 

 jektionsraum zu verhindern. Als Lichtquelle dient eine sich automatisch 

 regulierende Bogenlampe von 30 Amp. Stromstärke , welche in ein 

 mit Asbest ausgelegtes Gehäuse eingebaut ist. Das an der Vorder- 

 seite des Gehäuses montierte Kondensorsystem hat einen Durchmesser 




364 Arbeit: Der Leitzsche Universal -Projektions -Apparat. XXII, 3. 



von 21 cm. Es besteht aus drei Sammellinsen, von denen zwei 

 durch seitliche Griffe gegen die dritte verschoben werden können, 

 um den Lichtkegel nach Bedarf regulieren zu können. Vor dem 

 Kondensor sitzt auf einem seitlichen Arme drehbar montiert ein 

 Kühlgefäß , welches auch gleichzeitig den Rahmen für Diapositive 

 trägt. Auf der optischen Bank befindet sich ein Halter, der mit 

 zwei rechtwinklig zueinander stehenden , drehbaren Armen versehen 

 ist. Der eine Arm trägt das Objektiv von 400 mm Brennweite für 

 episkopische Projektionen, der andere Arm ist zur Aufnahme von 



1. 



Objektiven für diaskopische , beziehungsweise des Beleuchtungs- 

 apparates für mikroskopische Projektionen bestimmt. Auf der op- 

 tischen Bank befindet sich ferner mittels eines Gelenkes zur Seite 

 geschlagen der Tisch für mikroskopische Präparate , sowie davor 

 in gleicher Stellung der die mikroskopischen Systeme tragende 

 Tubusständer. 



In dieser so kurz beschriebenen Stellung wird der Apparat durch 

 Figur 1 veranschaulicht und ist so gebrauchsfertig für diaskopische 

 Projektion. Zur Komplettierung dieser Ausrüstung gehört ein Wechsel- 

 rahraen zur Aufnahme der Diapositive, sowie Einsätze zu den ver- 

 schiedenen Plattengrößen, die dem Apparat beigegeben .sind. 




XXII, 3. Arbeit: Der Leitzsche Universal -Projektions -Apparat. 365 



Beim Übergang von dieser einfachsten zur mikroskopischen Pro- 

 jektion sind nur einige kleine Handgriffe auszuführen: das Objektiv 

 wird durch den mikroskopischen Beleuchtungsapparat ersetzt, die in 

 Figur 1 auf der optischen Bank nach unten geklappten Teile, Präparat- 

 tisch und Tubus mit den am Revolver sitzenden Objektiven, auf- 

 gericlitet, d. h. in die optische Achse des Apparates eingeschaltet 

 und die Vorrichtung für die mikroskopische Projektion ist fertig. 



Zur Projektion werden die bekannten Leitz sehen Mikroskop- 

 Objektive bis No. 6 sowohl mit, als auch ohne Projektionsokulare 

 verwendet. 



Man sieht in Figur 2 , welche den Apparat fertig für mikro- 

 skopische Projektion darstellt, die drei Projektionsokulare auf einer 

 Revolvervorrichtung zusammengefaßt derartig, daß die drei Augen- 

 linsen mit einer einzigen Kollektivlinse verwendet werden, wodurch 

 ein besonders bequemer Wechsel der Okularvergrößerung ermög- 

 licht wird. 



Für die Projektion größerer Präparate bei schwacher Ver- 

 größerung kommen noch besonders die Leitz sehen Mikrosummare 

 von 24, 35, 42 und 64 mm Brennweite in Betracht, eine Neu- 




;]66 Arbeit: Der Leitzsche Universal- Projektions -Apparat. XXII, 3. 



konstruktion , die mit dem Verzuge einer sehr liolien Lichtstärke 

 ausgezeichnete anastigmatische Bildfeldebuung weiter Ausdehnung 

 verbinden. 



Wendet man sich einer kurzen Betrachtung der Einrichtung für 

 episkopische Projektion zu, so sind zunächst an Apparatteilen noch 

 die beiden Tische zu erwähnen, die, verstellbar eingerichtet, zur 

 Aufnahme der Objekte dienen. Als Kernpunkt der für episkopische 



3. 



Projektion getroffenen Einrichtung ist bereits vorher die drehbare 

 Anordnung der Lichtquelle gekennzeichnet Avorden; die Stellung, 

 beziehungsweise Anordnung der einzelnen Api)aratteile für episkopische 

 Projektion, zunächst mit Beleuchtung von oben, veranschaulicht Figur o. 

 Um den Apparat für diese Projektionsart einzurichten, bedarf 

 es der Ausführung folgender Handgriffe : der auf einem Arm drehbar 

 montierte Kühler mit daran befindlichem Diapositivrahmen wird nach 

 der Seite geschlagen, so daß der Kondensor frei wird und die Lampe 

 an dem an der Hinterwänd angebrachten Hebel so gehoben werden 

 kann, dnß Kondensor und der an ihm angebrachte Spiegel gegen 

 den Objekttisch um 45^ geneigt sind. Das Bild des durch den 




XXII, 3. Arbeit: Der L'eitzsche Universal -Projektions -Apparat. 367 



Kondensor direkt beleucliteten Objektes wird nun von dem Spiegel 

 aufgenommen. 



Es ist jetzt nur noch nötig, auf der optischen Bank den Prä- 

 parattisch und den Tubus mit den Mikroskopobjektiven aus der 

 optischen Achse umzulegen in die schon aus Figur 1 ersichtliche 

 Stellung, sowie durch Drehung des auf der optischen Bank ruhenden 

 zweiarmigen Objektivträgers das große Projektionsobjektiv von 400 mm 



Brennweite in die optische Achse einzuschalten, so daß das von dem 

 Spiegel aufgenommene Objektbild durch dieses Objektiv zur Projek- 

 tion gelangt. Es muß an dieser Stelle noch besonders darauf hin- 

 gewiesen werden, daß die Anforderungen, die hier an einigermaßen 

 geeignetes Projektionsobjektiv gestellt w^erden, recht hohe sind, und 

 daß für diese Art der Projektion nur solche Objektive verwendbar 

 sind, welche Gegenstände von relativ sehr großer Ausdehnung eben 

 d. h. frei von Bildwölbung wiederzugeben vermögen ; das neue 

 LEiTZSche Projektionsobjektiv genügt bei höchster Lichtstärke dieser 

 Forderung in hochvollendeter Weise. 




368 Arbeit: Der Leitzsche Universal -Projektions -Apparat. XXII, 3. 



Besondere Erwälinimg verdient noch die von Leitz absiclitlich 

 getroffene Wahl der relativ großen Brennweite von 400 mm , um 

 für episkopische Projektionen eine möglichst große Tiefe erzielen zu 

 können, und in der Tat genügt das Leitz sehe Projektionsobjektiv 

 auch in dieser Hinsicht allen praktisch in Frage kommenden An- 

 sprüchen. 



Für episkopische Projektionen mit Beleuchtung von der Seite, 

 wie sie unter gewissen Umständen anzuwenden ist, behält die optische 

 Bank genau die gleiche Objektivstellung und Anordnung, nur die 

 Stellung der Lichtquelle ist eine andere aus Figur 4 ersichtliche. 

 Die Lampe wird wieder heruntergelassen, so daß sie die in Figur 1 

 veranschaulichte Stellung einnimmt, und dann durch Drehung auf 

 einer darunter befindlichen horizontalen Drehscheibe in die aus Figur 4 

 ersichtliche Lage gebracht. Die zu projizierenden Gegenstände finden 

 auf dem in die Höhe geschraubten vorderen Tische Platz, wo sie in 

 dieser Stellung direktes Licht vom Kondensor erhalten. Um die 

 Aufnahme dieser Gegenstände durch das Objektiv herbeizuführen, 

 wird der am Kondensor angebrachte Spiegel um 90^ gedreht, wie 

 aus der Figur ersichtlich ; der Spiegel bildet in dieser Lage mit der 

 optischen Achse einen seitlichen Winkel von 45^ und läßt so durch 

 das Objektiv das Objekt zur Projektion gelangen. 



Auf diese Art lassen sich nicht etwa nur die gerade auf den 

 Tisch zu placierenden Gegenstände projizieren , es können so auch 

 Körper zur Projektion gebracht werden, welche sich in der Rich- 

 tung des direkten Lichtes daneben aufgestellt befinden , also z. B. 

 ganz besonders Körperteile am Lebenden. 



Es ist nicht Zweck dieser Ausführung, eine erschöpfende Be- 

 schreibung von der I]inrichtung und der Vielseitigkeit, oder gar 

 ausführliche Handhabungsvorschriften für den Leitz sehen Universal- 

 Projektions-Apparat zu geben , es sollten vielmehr hier nur in mög- 

 lichst kurzen Worten die Vorzüge eines Apparates dargetan werden, 

 der gerechtermaßen Anspruch auf das weitestgehende Interesse hat. 



[Eingegangen am 11. Oktober 1905.] 




XXII, o. I\ichter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 369 



Die Fortschritte 



der l)otanischen Mikrochemie seit Zimmerinaims 



„Botanischer Mikrotechnik". 



Sammelreferat 



von 



Dr. OsAvald Richter 



in Prag. 



(Fortsetzunj? und Schluß. 



III. Abschnitt. 

 Zellmembran. 



1. Zelliiloseinembraii uud die 31eiiil)raneii der niederen 



Organismen. 



Man betrachtet sowolil in der Chemie wie in der Mii^rocliemie 

 die glücklich erfolgte Kristallisation eines Stoffes als einen wichtigen 

 Abschnitt in der Erkenntnis seiner Eigenschaften. Infolgedessen 

 muß man Gilsons Arbeit über die Kristallisation der Zellulose und 

 die chemische Zusammensetzung der vegetabilischen Zellmembran als 

 ein Ereignis der Zellwandliteratur betrachten. Gilson ist es gelungen, 

 durch Lösung und nachherige Fällung im Inneren der Zellen sphärit- 

 artige Kristalle von Zellulose zu erhalten. Als Lösungsmittel wurde 

 Kupferoxydammoniak, zur Fällung Ammoniak verwendet. Große Kri- 

 stallaggregate wurden mit 20- bis 2r)prozentigem Ammoniak erzielt; 

 sie sind löslich in Kupferoxydammoniak, tVirbbar mit Kongorot und 

 reagieren mit Chlorzinkjod. Die für die vorhandene Lösung bestehende 

 Unmöglichkeit, durch die Mittellamellc zu diosmieren, läßt die Sphärite 

 im Zellinneren entstehen, doch gelingt ihre Isolation nach r>ehand- 

 lung mit Salzsäure und Kalilauge oder Ammoniak. 



Es gibt nach Gilsox nur einen einheitlichen, in der Membran 

 vorhandenen, mit Chlorzinkjod färbbaren Körper, die kristallisierbare 

 Zellulose. Mit Ausnahme der Pilzmembranen, bei denen wir den 



Zt'itsfhr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 3. 24 




370 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 3. 



Grund des Mißlin^ens der Reaktion im Chiting-ehalte zu erblicken 

 haben (vgl. Chitin), erhielt Gilson bei allen Membranen von Pflanzen 

 Sphärite, desgleichen bei Tieren, z. B. aus dem Mantel einer Tunikate. 

 Johnson bestätigte die Befunde Gilson s, wendete sich aber gegen 

 den Ausdruck „Sphärite" wegen des passiven optischen Verhaltens 

 und schlug den Namen Kristallite vor , doch scheint sich derselbe 

 nicht eingebürgert zu haben, vermutlich deshalb, weil es zweckmäßiger 

 erscheint, das Kugelförmige der Gestalt als das optische Verhalten 

 im Namen zum Ausdruck zu bringen. Auch Love beschäftigte sich 

 mit diesem Gegenstande. 



Die GiLsoNSche Methode gab später v. Wjsselingh bei seinen be- 

 kannten „Mikrochemischen Untersuchungen über die Zellwände der 

 Fungi" eine vorzügliche Kontrolle seiner Beobachtungen über Dar- 

 stellung reiner Zelluloseskelette ab. v. Wisselinc4h hatte nämlich ge- 

 funden, daß pflanzliche Zellhäute nach sechsstündigem Verweilen in 

 auf 125*^ erwärmtem in zugeschmolzenen Röhren befindlichen Wasser 

 infolge der zersetzenden Wirkung desselben vollkommen reine Zellu- 

 loseskelette übrig lassen. Erzeugt man sich nun vor dem Kochen 

 nach GiLSON Zellulosesphärite , so bleiben in der Tat nach der 

 sechsstündigen Einwirkung des Wassers nur diese Sphärite übrig. 

 Erhitzung mit Glyzerin auf 300^ gibt dieselben Resultate nach 

 kürzerer Zeit. 



Das Wesentliclie der GiLsoNSchen Methode ist die Fällung der 

 Zellulosesphärite durch Ammoniak aus ihrer Lösung in Kupfer- 

 oxydammoniak. Behandelt man nun nach Correns Membranen von 

 Caulerpa prolifera mit konzentrierter Schwefelsäure und dann mit 

 Wasser, so entsteht auch ein Haufwerk von Sphäriten, die 100 bis 

 300 Prozent Wasser aufzunehmen vermögen , doppelbrechend sind 

 wie Stärkekörner, von Jod und Schwefelsäure gelbbraun gelöst werden, 

 in Chlorzinkjod gelbbraun verquellen, in konz. Essigsäure löslich sind 

 und noch andere Eigentümlichkeiten zeigen, die sie von gewöhnlicher 

 Zellulose unterscheiden und dadurch zu beweisen scheinen, daß die 

 Membranen der Caulerpa nicht aus Zellulose im engeren Sinne be- 

 stehen. Eine chemische Analyse wurde nicht ausgeführt. 



Reaktion und Färbung. Mangin hat als das wichtigste 

 Stadium der Membranumwandlung das der Bildung von Hydrozellu- 

 lose oder Amyloid bezeichnet. Zu dessen Erzeugung sind Säuren 

 ungeeignet, weil sie, verdünnt verwendet, das Ziel nicht erreichen, 

 und konzentriert, darüber hinausschießen. Am geeignetsten ist eine 

 gesättigte alkoholische Kali- oder Natronlauge. Nur auf so präpa- 




XXII, 3. Richter: Die Fortschritte der botanischen Milcrochemie. 371 



rierte Zellulose wirken die gewöhnlichen Zellulosereageutien unver- 

 züglich ein. Auch färben sich nur so vorbereitete Membranen mit 

 Mangins Azofarbstoffen. Es gibt übrigens eine ganze Anzahl von 

 empfohlenen Membrantinktionen, die auf Farbstotfaufnahrae durch 

 Zellulose beruhen, vgl. Busse, Roulet, Lemaire, die immer wieder 

 verwendeten Färbungen mit Kongorot und Hämatoxylin (Senn, Jäger), 

 und andere Färbeverfahren mehr. Um so beachtenswerter erscheint 

 der Rat v. Wisselinghs , auf Farbenreaktionen nicht zuviel Ge- 

 wicht zu legen. Noch in einer frühereu Arbeit war er geneigt, 

 auf Grund des Verhaltens von Membranen gegen Farbstoffe zwei 

 Körper als Begleiter der Zellulose anzunehmen , einen , der sich 

 mit Methylen- und Brillantblau und einen, der sich mit Ruthenium- 

 rot färbt. Nun aber zeigte er, daß die Dichtigkeit des Objektes, 

 also ein rein physikalischer Faktor (vgl. das Kapitel ,,Kern") , für 

 die Farbstoffaufnahme von ausschlaggebender Bedeutung ist. Eine 

 Baumwollfaser färbt sich mit Kongorot schwach , nach Behandlung 

 mit Kupferoxydammoniak intensiv , und bedeutend zelluloseärmere 

 Membranen können sich a priori besser färben. Noch sprechender 

 scheint der Beweis, daß Zellulosesphärite von bei 300^ in Glyzei'in 

 gereinigter Zellulose sieh mit Rutheniumrot nicht färben, es aber 

 tun , wenn man sie vor dem Eintragen in den Farbstoff einer Vor- 

 behandlung mit verdünnter Chromsäure unterzieht. Jedenfalls wird 

 man danach Ansichten, wie die Chalons, wonach Methylenblau ein 

 typischer Zellulosefarbstoft' sein soll, entsprechend vorsichtig auf- 

 nehmen müssen. Ob Love auch nur Farbstoftreaktionen empfiehlt, 

 und ob CuTOLOs^ „New test for cellulose" auch bloß auf einer Färb - 

 Stoffreaktion beruht, bin ich leider nicht in der Lage mitzuteilen, da 

 mir weder die Originale noch Referate über diese zur Verfügung- 

 Ständen. Es sind somit auch Fittings Befunde hinsichtlich der Farb- 

 stoffe Kongorot, Benzoazurin, Rutheniumrot, Methylenblau und Safranin 

 bloß als Kontrollergebnisse seiner mit Chlorcalciumjod und Kupfer- 

 oxydammoniak erhalteneu zu betrachten. Man vergleiche auch die 

 Angaben Lagerheims über die Verwendbarkeit von Brillantblau zum 

 Zelluloseuachweis und die von Forsch über die von essigsaurem 

 Anilinblau zu gleichen Zwecken. — Die beste Chlorzinkjodlösuug als 

 Reagens auf Zellulose ist nach v. Wisselingh eine mit 60prozentigem 

 Chlorzink. 



Eine gesonderte Besprechung verdienen die auf der Metallspeiche- 

 rung bezw. der Imbibitionsfähigkeit für Metallsalzlösungen beruhenden 

 Färbemethoden. Correns hat nachgewiesen, daß sich die von His- 



24* 




372 Richter: Die Fortschritte der botanischen Milcrochemie. XXII, 3. 



Recklingshausen für tierhistologische Zwecke empfolilene Versilberungs- 

 methotle auch auf die Pflanzenmembran anwenden lasse , um deren 

 feinere Struktur zu zeigen. Als sehr geeignet erwies sich eine 2pro- 

 zentigc Silbernitrat- und eine O*75prozentige Kochsalzlösung und Über- 

 tragen in Wasser mit darauf folgender Exposition. Je mehr Silbernitrat 

 eine Membranpartie aufgenommen hatte, desto mehr Chlorsilber mußte 

 sich bilden, desto dunkler mußte also die Membranpartie werden. 

 Es ist dies ein ganz ausgezeichnetes Mittel, Streifung und Schich- 

 tung zum Ausdruck zu bringen. An Stelle von Silbernitrat und Koch- 

 salz kann man auch eine lOprozentige Lösung von gelbem Blutlaugen- 

 salz und verdünntes Eisenchlorid verwenden. Um dieselbe Zeit 

 fallen Molisch s Erfahrungen mit ..maskiertem Eisen", die das enorme 

 Speicherungsvermögen auch von Membranen besonders für Eisensalze 

 nachwiesen (s. o.). Devaux hat neuerdings diese Versuche aufgenom- 

 men , erweitert , und den Beweis geliefert , daß die Fähigkeit der 

 Eisensalzspeicherung der Zellulose ohne Vorbehandlung mit Laugen 

 vollkommen abgehe, während Pektinstoffe sie in hervorragender Weise 

 besitzen; das steht auch im Einklang mit den Erfahrungen von Meyer, 

 der darauf aufmerksam gemacht hat, daß reinste Baumwolle die selbst 

 in reinster Kalilauge des Handels vorhandenen Spuren von Eisen 

 speichert und diese so nachweisbar macht. Desgleichen decken sich 

 seine Beobachtungen mit denen von Molisch. 



In einer neueren Arbeit hat sich Devaux besonders mit dem 

 Metallspeicherungsvermögen von mit Eau de Javelle vorbehandelten 

 Membranen beschäftigt und begründet geradezu auf dem Vermögen 

 der Zellulose, vornehmlich Kaliumbichromat aufzunehmen, sein Drei- 

 farbenverfahren. — Die von v. Tompa empfohlene Goldtinktion ist 

 analog dem Correns sehen Silberverfahren ausgearbeitet und be- 

 ruht auf der Reduktionsfälligkeit von Zinnchlorür auf Goldlösung. 

 Nach LuNDiE bleibt die Zelluloseschicht der Fucusmembran beim Silber- 

 verfahren farblos ; zwischen ihr und der Gallertschicht aber entsteht 

 ein dunkler Ring. 



Fälle des Ausbleibens d e r R e a k t i o n e n , ihre Gründe und 

 Beispiele abnormen Auftretens derselben. Schon GutJTTLER be- 

 merkt, daß in den Epidermiszellen und den Schleimhaaren Aon Lythrarien die 

 Zellulosereaktion nie direkt, sondern bei jenen z. B. erst nach Vorbeliandlung 

 mit Eau de Javelle gelingt. In der neueren Zeit häufen sich die Fälle, wo 

 auf reaktionshindernde Körper und auf Zellulo^eumwandlungen aufmerksam 

 gemacht wird. Tischler zeigt, daß die Zellulosebalken im Embryosack von 

 l^edicularis im Alter vermutlieh aus l*ektin bestehen, Czai'ek, daß „Sphagnol'" 

 und „Dicranumgerbsäure" bei Moosen reaktionshindernd wirken, Manoin, 




XXII, 3. Ricliter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 373 



daß Mucorineenzellulose sich erst nach Vorbehandlung- mit Salzsäure und 

 Kalilaug:e in ScHWEizERSchem Reagens löst, Rotiieut, daß die homogenen 

 Hüllen der Kristalle bei Pontederiaceen keine echte Zellulose sind etc. 



Bekannt ist das Ausbleiben der Zellulosereaktion bei verholzten Ele- 

 menten. Kaliumpermanganat läßt nun nach ^IÄule durch Zerstörung des 

 reaktionshemmenden „Hadromals" die reine Zellulose zutage treten. Analog 

 ist nach Yendo Zellulosereaktion bei den Wänden des Geniculums der 

 Corallineen möglich, wenn die Gelose durch Liisung entfernt worden ist. 

 Weiteres ^ielie bei Besprechung der Grün-, Blau- und Braunalgen. 



Eine besondere Behandlung erheischen noch die Ergebnisse des Re- 

 aktionswandels bei von Parasiten befallenen Pflanzen in der Umgebung der 

 Erkrankungsstelle und die in den Zellen und Zelhvänden der Parasiten. 

 So hat Heixiucher darauf aufmerksam gemacht, daß nur die Mittellamelle 

 der Membran des Schwellgewebes in den Kapselklappen von Lathraea 

 clandestina Zellulosereaktion liefert, die quellbaren Membranschichten aber 

 nicht, was an Hansens Befund bei Gracilaria erinnert. W. Macjnus weist 

 Zellulosebildung in den von der Mykorrhiza befallenen Zellen von Neottia 

 Nidus avis nach. Behandelt man nämlicli die aus Pilz- und Wirtspflanzen- 

 plasmaresten gebildeten „Klumpen" durch 24 Stunden mit Eau de Javelle 

 und unterzieht sie nachher der Zelluloseprobe mit Chlorzinkjod, so tritt 

 deutliehe Reaktion auf. Nach Entfernung der Zellulose mit Kupferoxyd- 

 ammoniak kann man mit Safranin noch Pektinstoffe nachweisen. Nach 

 Nawaschin bemerkt man in den Zellen der von Plasmodiophora Bras- 

 sicae befallenen Pflanzen feine Lamellen, die die Zellulosereaktion geben. 

 Czapek konnte feststellen, daß durch die Lebenstätigkeit des Merulius 

 lacrymans, des Pleurotus pulmonarius und anderer Pilze das „Hadromal" 

 frei und dadurch die Zellulose des Holzes nachweisbar wird, die nun die 

 Zellulosereaktionen zu liefern vermag. Man vgl. auch das einschlägige 

 Kapitel aus Lafars „Technischer Mykologie". 



Auch tierische Parasiten scheinen dieses Umwandlungs\ermögen zu 

 besitzen. Bekanntlich geben Vaucherienmembranen die Zellulosereaktion 

 im Alter nicht (vgl. Membran der Grünalgen). Wird aber eine Vaucheria 

 von der Rotatorie Notommata Werneckii befallen, so wird nach Roihert 

 ihre ]\lembran in der Umgelnmg des Parasiten so verändert, daß die „Kalotte" 

 mit Jodjodkalium und Schwefelsäure stark rotviolett, dann trüb-blau wird. 

 Nachher tritt Entfärbung auf, doch kann Bläuung durch verdünnte Schwefel- 

 säure wieder hervorgerufen werden. 



Weiterhin sei noch einiger abnormer Vorkommen der Zellulose gedacht. 

 Eines hat Schutt bei der Diatomee Cyclotella socialis beobachtet. Es 

 strahlen nämlich von der Membran dieser Alge eigenartige Büschel von 

 Fäden aus, die Schutt scIiließHch als kieselfreie Zellulosemodifikation er- 

 kannte, i'brigens hält auch Jahx die von ihm bei Myxomyceten beschrie- 

 benen Diktydinkörner für Zellulose (vgl. neue Stoffe). Weber van Bosse 

 hat schon viel früher stärkeähnliche Körner bei der neuentdeckten Phyllosi- 

 phonee Phytophysa Treubii beol)achtet. seine „grains de cellulose", die wirk- 

 lich Zellulosereaktionen gegeben halien, und Zalew.ski erbrachte den Be- 

 weis, daß die halbkugelförmigen Gebilde mit sphäritartigem Aussehen, die 

 ScHÜNXKTT „Resinocysten" genannt liat, aus einem Zellulosegerüste bestehen, 




374 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 3. 



dessen Kammern mit Harzsubstanz erfüllt sind. Kolkwitz schließlich hat 

 gefunden, daß die Zellulinkörner des Abwasserpilzes sich mit Kongorot 

 intensiv färben, was auf einen zelhxloseähnlichen Stoff schließen ließe. 



Schließlich seien noch einige Rezepte mitgeteilt, die sich auf die Deut- 

 lichmachung der CASPARYschen Streifen beziehen. Krömer empfiehlt 

 Plilorogluzin - Salzsäure, Chlorzinkjod, Chlorcalciumjod, Sudanglyzerin, 

 konzentrierte Schwefelsäure, Chromsäure und Kalilauge, Rumpf Mäules 

 Reaktion, Anilinhydrochlorat , Chloralphenol , Hämalaun, Jodjodkalium, 

 Methylgrünessigsäure, Anilin-. Methyl-, Spritblau. Jodgrün-Fuchsin. Ruthe- 

 niumrot läßt unter gleichzeitiger Färbung der Zellulose die Caspary sehen 

 Streifen farblos. 



Der Zellulose verwandte Körper. 



GiLsoN fand, daß es außer der kristallisierbaren Zellulose noch andere 

 Stoffe gibt , die ihr offenbar chemisch sehr nahe stehen : Das Paramannan 

 der Kaffeebohnen, das mit Zellulose die Mannoso-Zellulose Schulze s liefert. 

 Es ist auch in verdünnter Schwefelsäure löslich; und die Hemizellulose, 

 womit er alles das bezeichnet, was in der Membran vorhanden, sich aber 

 nicht mit Chlorzinkjod violett färbt. Später hat sich Schellenberg mit 

 der Hemizellulose bescliäftigt. 



Namenlos ist der von Corren.s bei Siphoneen entdeckte Körper ge- 

 blieben (vgl. Zellulose). 



Auch das „Fucin" von Wisselinghs scheint mit der Zellulose nahe 

 verwandt zu sein, „Fucin" ist ein Membranstoff der Braunalgen, der schon 

 nacli Vorbehandlung der Membranen mit bloß einprozentiger Schwefelsäure 

 mit Jod die typische intensive Bläuung gibt. 



Grüss unterscheidet nach der leichteren oder schwereren Hydroly- 

 sierung und Löslichkeit bei der Reservezellulose der Dattelkerne drei Be- 

 standteile: 1) Galaktan und die Hydrolysierungsstufen : 2) f<-Mannan und 

 3) /i-Mannan, beide gehen über verschiedene Manninstufen in Mannose über. 



Auch die Zwischenstufen, die durch Jod-Phosphorsäure unterschieden 

 -werden, erhalten Namen: Leuko- und Cyanomannin. 



In neuester Zeit hat Lemahie bei seinen Blaualgenstudien (vgl. diese) 

 das \on Correns studierte Scytonemin untersucht, einen Körper von Zellu- 

 losereaktion, der die Oscillarienmembran imprägniert und vor der eigent- 

 lichen Zelluloseprobe erst entfernt werden muß. Schizophykose nennt er 

 endlich, eine alkalisch reagierende, mit Rutheniumrot sich nicht färbende 

 Substanz und Schizopliycin, ein durch Laugen erzeugtes Abspaltungsprodukt 

 der Schizophykose. 



Membran der Algen. 



1) Peridineen. Unterwirft man, wie ScHtJTT, dem wir ungemein 

 wertvolle Mitteilungen ül)er Peridineen verdanken, gezeigt hat, die Peridi- 

 neen Ornithocercus quadratus und 0. Steinii, der Zelluloseprobe, so bemerkt 




XXII, o. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 375 



man. daß die Membranleisten die Violettfärbung mit Chlorzinkjod nicht 

 geben, daß auch die sonstigen Jodreaktionen zunäclist unterbleiben, sich 

 aber nach Vorbehandlung mit Säuren oder Laugen dennoch zeigen. Es 

 scheint also ein die Reaktion verdeckender, in Säuren ausziehbarer Stoff 

 in diesen Membranleisten vorhanden zu sein. 



2) Diatomeen. Bei seinen eingehenden Studien der Diatomeen fand 

 Benecke nach Entfernung des Zellinhaltes durch Eau de Javelle und Alkohol 

 Nelkenöl, Kanadabalsam oderStyrax, bezw. alkoholische Methylviolettlösung 

 und Nelkenöl zur Untersuchung der Membran ganz ausgezeichnet geeignet. 



3) Grünalgen. Nach Senn gibt Dictyosphaerium pulchellura keine Reak- 

 tion auf Zellulose, nach Debski unterbleibt sie auch im großen und ganzen 

 bei Characeen und Siphoneen, was übrigens auch schon Göppert und Cohn 

 festgestellt haben und was auch mit den Correns sehen Befunden harmonieren 

 würde. Nur bei den jüngsten Sproßspitzen kann man von Zellulosereaktion 

 sprechen, bei den alten versagt jedes Zellulosereagens, da aber auch die 

 charakteristischen Pektinstofiffärhungen nicht eintreten, glaubt Debski an 

 einen neuen Körper in der Characeen- und Siphoneenmembran. Schmidle 

 findet, daß sich die Haare und Membranhöcker der Alge Conochaete Kle- 

 bahnii mit Chlorzinkjod nicht färben, dagegen speichern sie Hämatoxylin. 

 Gerade umgekehrt verhalten sich die Haare von Aplianochaete pilosissima. 

 Bei Desmidiaceen ist endlich nach Lütkemüller Fuchsin, Methylviolett, 

 Bismarckbraun und nachträgliches Zuleiten von essigsaurem Kali anzuraten, 

 wenn man den Porenapparat besonders deutlich machen will. Zum Schluß 

 sei erwähnt, daß Senn zum Studium der Membran von koloniebildenden 

 einzelligen Algen Kongorot verwendet, nachdem er durch Natronlauge 

 Quellung und Lösung der Gallertschichte erzielt hat. 



4) Blaualgcn. Was die chemische Zusammensetzung der Membran 

 dieser Algengruppe anlangt, so scheint wesentlich für die Beurteilung der 

 Entwicklungszustand, in dem sich gerade die Alge bezw. deren Zellen be- 

 finden. Hegler zeigt z. B., daß die Heterocystenwände Zellulosereaktion 

 geben, was von ^Brand bestritten wird, die Wände der reifen Sporen 

 dagegen hält er für verkorkt (vgl. Kork). Iii den Zellmembranen und 

 Scheiden kann er endlicli auch Gehalt von Chitin nachweisen (vgl. Chitin), 

 auf das er auch die Anisotropie der stark doppelbrechenden Membranen 

 zurückführt. — Von Lemaires Angaben über die Cyanophyceenscheiden 

 war oben die Rede. — Nach Macallum löst Pikrinsäure die Membran- 

 scheiden und Querwände der Cyanophyceen. Zum' Schlüsse sei noch 

 bemerkt, daß Correns mit Hilfe von Karbolfuchsin nach Vorbehand- 

 lung mit Pepsin -Glyzerin -Salzsäure, Chromsäure und 2prozentiger Kali- 

 lauge ein rotes Netz auf farblosem Grunde innerhalb der Membran hat 

 darstellen können, das er dahin interpretiert, daß das Gefärbte die 

 dickere Membran, das Farblose aber Tüpfel mit Gallertausscheidung ge- 

 wesen sind. 



5) Rotalgen. Vornehmlich l)ei den Corallineen macht sich bei der 

 Membranuntersuchung der hohe Kalkgehalt unangenehm bemerkbar ; Yendo 

 macht Angaben über dessen rasche Entfernung. 



Auf eine eigenartige Reaktion der Membran von Gracilaria hat Haxsex 

 aufmerksam gemacht. Es färbte sich hier nämlich die Mittelschiclite (Intei*- 




376 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 3. 



Zellularsubstanz) mit Jocljodkaliuiii schön karminrot, mit .Jod in Seewasser 

 violett. Jod und Schwefelsäure färben dagegen die ganze Membran violett. 

 (Über Sphaerococcus vgl. den folgenden Abschnitt.) 



6) Braunalgen. Wille zeigte, daß die Laminarianiembran aus einer 

 dem Zellinhalte zugekehrten Zellulose- und aus einer vorzüglich Calcium- 

 pektat (vgl. Pektinstoflfe) enthaltenden Mittellamelle besteht, aus der durch 

 Säuren das Calcium gelöst werden kann, worauf in Sodalösung Mazeration 

 eintritt, v. WissELiNdH fand bei Fucus vesiculosus und Sphaerococcus 

 crispus neben Zellulose noch einen Stoff, der durch einprozentige Schwefel- 

 säure und Jodjodkalium gebläut wird, der sich bei 300" löst, und den er 

 ,,Fucin" nennt. Der Sitz des Stoffes ist vornehmlich die gequollene Mittel- 

 lamelle. Interessant ist die Tatsache, daß man bei Fucinblaufärbung 

 zeigenden Membranen mit TGprozentiger Schwefelsäure die Jodfärbung gerade 

 umzukehren vermag. Was blau war, wird weiß (Fucinmittellamelle), was 

 weiß war, wird blau (Zelluloselamelle): Die Konzenti-ation der verwendeten 

 Säure ist also ausschlaggebend für den Ausfall der Keaktion. 



Schröder emi)fiehlt zur Deutlichmachung der Algengallerthüllen Tusche 

 und die von Bütschli empfohlene Sepia, zur Färbung Klebs' und Haupt- 

 fleisch s Anilinwasser-Safranin, Dahlia, Karbolfuchsin und Neutralrot. 



Membran der Pilze und Bakterien. 



1) Pilze. GiLSON findet, daß die Membranen von Claviceps purpurea 

 und Agaricus cam])estris frei sind von Zellulose und an ihrer Stelle eine 

 stickstoft'haltige ^'erbindung besitzen , die beim Zusammenschmelzen mit 

 Kalihj-drat eine als Mykosin bezeichnete Substanz liefert, welche mit Säuren 

 echte kristallisierte Salze gibt. Das Mykosin ist eine amorphe, mehr oder 

 weniger hornartige Masse, die in der Pilzmembran nicht in freiem Zustande 

 vorkommt. Es färbt sich, und das sei besonders hervorgehoben, mit Jod- 

 jodkalium, das eine Spur Säure enthält, rosaviolett. Die gleiche Färbung 

 liefert Jod und Schwefelsäure und durch viel Wasser verdünntes Chlor- 

 zinkjod. Daraus dürften sich auch die so widersprechenden Angaben der 

 verschiedenen Autoren ül)er die Zellulosereaktion der Pilzmembran er- 

 klären. 



V. WisSELiNGHs „Mikrochemische Untersuchungen über die Zellwände 

 der Fungi" stellen einen Markstein in der Erkenntnis der chemischen Zu- 

 sammensetzung der Pilzmembran dar, indem sie die von Gilson an- 

 genommene, in iiirer chemiselien Natur aber noch nicht erfaßte N-haltige 

 Muttersubstanz des Mykosins als Chitin erkannte und damit der Forschung 

 wieder ein weites Arbeitsgebiet erschloß. Danach lautet der betreffende 

 Erkenntnissatz: „Es gibt Pilze mit Chitinmembranen." Doch ist die Ver- 

 allgemeinerung: „die Membran der Pilze l)estehe aus Chitin" durchaus un- 

 stattliaft, wie eine Reihe von Arbeiten zeigen, die der x. Wisselingh- 

 schen rasch nacheinander gefolgt sind. So beobachtete Jahn bei den 

 jungen Kapillitiumfasern von Comatricha obtusata Preuß, wie dies schon 

 DE Barv für Stemonitis gezeigt hat, Zellulosereaktion mit Jod und Schwefel- 

 säure, docli nur oben, während sie beim Stielansatze unterblieb. Nach 

 Bräunung des Ivapillitium geht die Reaktion unter keiner Bedingung mehr. 



'e 




XXII, o. Richter: Die Fortscliritte der botanisclien ^likrocheiuie. 377 



Ebenso mißlang- die Chitinprobe. Makgin bringt den Beweis vom Vor- 

 liandensein von Zellulose, Kailose und Pektinstoften bei Mucorineen. Die 

 vegetativen Hyphen bestehen aus Zellulose und Pektinstoften, Sitz der 

 Zellulose innen , die Fruchthyphen haben in den Öporangien außerdem in 

 späterem Alter Kallose innen und ersetzen die Zellulose durch Kalkablage- 

 rung-en, die Membran der endogenen Sporen reagiert nach Vorbehandlung 

 mit Kalilauge und Salzsäure deutlich auf Kallose. Vtillemix kann an 

 den Zygosporen der .Mukorineen sogar fünf Schichten unterscheiden je nach 

 deren Verhalten gegen Jod und Schwefelsäure und Hämatoxylin. Für Hefe 

 Öchizosaccharomyces octosporus hat Lindnek den Nachweis erbracht, daß 

 sich deren Sporenmembranen mit Jod allein bläuen. Ab und zu färben 

 sich auch die Membranen der Sporenmutterzellen. Dieser Befund schließt 

 sich an analoge von Sordakia bei Disco- und Pyrenomyceten und von 

 Hoffmann bei Dematiumzelhvänden: Kinuermanns Befund bei Stereum 

 sanguinolentum zeigt, daß sogar beim selben Pilze die verschiedenen Hyphen 

 verschieden ciiitinhaltig sein, l)ezw. reaktionshindernde Stott'e enthalten 

 können, wodurch ganz instruktive difterente Färbungen erzielt werden. 



2) Bakterien. Die Untersuchungen über die Membransul)stanz der 

 Bakterien haben neuerdings gezeigt, daß neben Zellulose auch N-haltige 

 Stofte, im besonderen Chitin, vorkommen (Emmerlixc;, Iwanofe). Doch 

 ist ein abschließendes Urteil ülier die Frage zurzeit noch nicht zu geben, 

 da die Meinungen der Autoren zu weit auseinander gehen. — Nach Hinze 

 färben sich die Membranen von Beggiatoa mirabilis mit Rutheniumrot, 

 Safranin und ^lethylenblau, was auf Pektingelialt deutet. Chlorzinkjod 

 und Chloralhydrat spalten die Membranen in zwei Teile. Später wies Hinze 

 auch bei Thiophysa volutans Pektinstofl'e nach. 



Weiterhin sei des Farblosbleibens von Bakterienmembranen gedacht, 

 das Matruchot bei seinen Vitalfärbungen von farblosen durch Farbstoff- 

 bakterien zu beobachten (jelegenheit hatte. (Vgl. auch Lafars technische 

 Mykologie und Czapeks Biochemie.) 



Membran der Moose. 



Schon RuüE hatte konstatiert, daß die mechanischen Zellelemente der 

 Moose erst nach der Behandlung mit Kalilauge Zellulosereaktionen geben, 

 daß sie mit Kalilauge vergilben und daß ein gerbstoft'artiger Körper in ihnen 

 vorkommt. Nach Cjokics Untersuchungen sind Moosmeihbranen unverholzt, 

 und zwar gelingen die Jodreaktionen auf Zellulose' bei Lebermoosen sofort, 

 bei Laubmoosen erst nach Vorbehandlung mit Chromsäure oder Schulze- 

 scher Mischung. Mit Rutheniumses(iuichlorür geben alle ^lembranen die 

 MANUiNsche Pektinprobe. Abgesehen von den kürzeren Notizen von 

 Krasser, Correns und Kamerling hal>en erst wieder durch Czapek die 

 Moose, im besonderen ihre Membranen, eine eingehende Behandlung er- 

 fahren, wobei zunächst die früheren Forschungsergebnisse bezüglich Unter- 

 bleiben und Auftreten der Zellulosereaktionen und der Gerbstoftprobe be- 

 stätigt werden konnten. Auch die Gelbfärbung mit Natronlauge wurde von 

 Czapek beobachtet und festgestellt, daß mit Mooszellhäuten auch Millons 

 Reaktion gelingt. Diese mit Millox reagierende Substanz ist isolierbar, 




378 Kicliter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 3- 



ist phenolartig und erhielt den Namen „Sphagnol". Auch die gerbstofif- 

 artige ist darstellbar und wurde „Dicranumgerbsäure" genannt. Sphagnol 

 dürfte in der Membran als Sphagnolzelluloseäther vorkommen. Mit starker 

 Natronlauge erhält man aus Sphagnum auch „Pektinsubstanz". Die Dicranum- 

 gerbsäure dürfte in clilorartiger Bindung vorliegen. Protonemata sind stets 

 sphagnol- und gerbstofifsäurefrei, sie geben daher immer die Zellulose- 

 reaktion. 



Endlich sei der Befunde Schaars gedacht, wonach sicli die Ver- 

 dickungsschichten der Antheridien mit Jodtinktur gelb färben und mit Jod 

 und Schwefelsäure zunächst gelbbraun, später erst blau werden. Bei der 

 Mittellamelle tritt die Eeaktion früher ein und wird die Bläuung dunkler. 

 Schwefelsäure lost die ganze Zellwand. Schaar deutet die Ergebnisse 

 seiner Untersuchungen auf Schleim. 



2. Die yerholzteii 31embraneii. 



Chemie. Im Mittelpunkte des Interesses steht bei der Be- 

 handlung der Verbolzung pflanzlicher Zellmembranen die Frage, welcher 

 Körper die Ursache der bekannten Farbenreaktionen mit Anilinsulfat 

 und Phloroglncin-Salzsänre sein mag. Man sieht, wie sie sich immer 

 weiter zuspitzt zur Formulierung der folgenden Frage : „Ist das 

 Vanillin die Ursache dieser Reaktionen oder nicht?" und man kann 

 sehen , wie in der Literatur ein energischer Kampf entbrennt , den 

 Singer 1882 mit seiner Vermutung, der liypothetische Körper sei 

 Vanillin, eröffnet und den nach heftigen Wogen des Kampfes Gräfe 

 1904 anscheinend endgültig zugunsten Singers beendet hat. Während 

 auf der einen Seite Hegler 1890 Singers Anschauungen unterstützte, 

 griff sie Nickel , der in Seliwänoff einen Bundesgenossen erhielt, 

 mit aller Energie an. 



In eine neue Phase trat der Streit nach zehnjähriger Pause, 

 während welcher die entscheidende Frage nur gelegentlich gestreift 

 wurde (vgl. Correns und Schellbnberg), durch das Erscheinen der 

 Arbeiten Czapeks „Über die sogenannten Ligninreaktionen des Holzes" 

 und Mäules „Das Verhalten verholzter Membranen gegen Kalium- 

 permanganat, eine Holzreaktion neuer Art". Nach einer eingehenden 

 Kritik der bisherigen Methoden des Ligninnaehweises, welche wiederum 

 die Phloroglucin- Salzsäureprobe als beste anerkennen muß, geht 

 Czapek zu der Besprechung seiner Versuche über Reindarstellung 

 des Holzstoffes über, den er mit Zinnchlorür extrahierte. Der er- 

 haltene Körper roch sehr stark , ähnlich , aber nicht ganz so wie 

 Vanillin und reagierte außerordentlich empfindlich mit Phloroglucin- 




XXII, 3. Riclitcr: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 379 



Salzsäure. Czapek gab ihm den Namen „Hadromal". Der Name hängt 

 mit Haberlandts „Hadrom" zusammen. Obwohl es Czapek „in ein- 

 zelnen Versuchen gelungen ist, ganz geringe Mengen farbloser nadei- 

 förmiger Kristalle des Körpers zu erhalten , so lieferten dennoch 

 sämtliche Darstellungen im größeren Maßstabe bisher keine tadel- 

 losen Produkte". Trotz dieser Mängel der isolierten Substanz, wird, 

 obwohl sie zweifellos als Aldehyd erkannt und das Vorhandensein 

 von Vanillin nicht ausgeschlossen war , die Möglichkeit einer Iden- 

 tität derselben mit Vanillin auf Grund der „Gelbfärbung mit Alka- 

 lien , dem starken Reduktionsvermögen gegenüber ammoniakalischer 

 Silberlösung, der braunvioletteu Eisenreaktion und der abweichend 

 nuancierten Ligninreaktion und den abweichenden Geruch", bestritten. 

 Schon wiederholt ist ausdrücklich darauf aufmerksam gemacht, daß 

 man beim Nachweis organischer Stoffe durch Farbenreaktionen auf 

 unendlich viele Nuancen einer Reaktion gefaßt sein muß , weil 

 man ja mit unendlich vielen Zufälligkeiten , zufällig vorhandenen 

 unkontrollierbaren Substanzen rechnen muß , die die Reaktion ver- 

 ändern können. Es kann daher die Nuance der Ligninreaktion 

 ebensowenig wie der „abweichende" Geruch die Möglichkeit der 

 SiNGERSchen Auffassung zurückw^eisen. Ich komme später noch auf 

 die neuesten von Gräfe in dieser Richtung angeführten, schlagenden 

 Beweise zurück. 



So schien denn durch Czapeks Untersuchungen über das „Hadro- 

 mal" das Vanillin aus seiner hypothetischen Rolle vollkommen ver- 

 drängt, und mai\ mußte nun an die Hypothese vom „Hadromal" auch 

 noch eine von der Bindung desselben mit der Zellulose anfügen. 

 Der Paarung des Hadromals soll nach Czapek Zellulose sein und 

 mit dem neuen Körper einen Hadromal-Zelluloseäther bilden. Doch 

 soll in sehr geringen Mengen Hadromal auch frei in der Membran 

 vorkommen. 



Mäule hat nun eine neue Reaktion angegeben, die im wesent- 

 lichen darauf beruht, daß Holz, dessen Reaktionsträger — nennen 

 wir ihn vorläufig mit Czapek Hadromal — zerstört ist , — mit 

 Ammoniak noch eine tiefrote Reaktion zu liefern vermag. Der Vor- 

 gang dabei ist der folgende: Man behandelt die Holzraembranen zu- 

 nächst mit Kaliumpermanganat , dadurch werden sie braun , danach 

 überträgt man sie in Salzsäure, — sie werden farblos, darauf in 

 Ammoniak, — es tritt eine tiefrote Farbe ein. Dabei vermeide man 

 eine zulange Einwirkung des Kaliumpermanganats , da sonst der 

 Zellulosecharakter der Membran entsteht und die Färbung unterbleibt. 




380 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 3. 



Dieser Ausfall der Reaktion gestattet die Annahme , daß der- 

 selben ein Zersetzungsprodukt des ..Hadromals" oder irgendein 

 anderer Körper zugrunde liegt , der aber jedenfalls ein ständiger 

 Begleiter verholzter Substanz zu sein scheint , da er auch in Bast- 

 bündeln vorkommt, die Wiesners Probe wenig oder gar nicht geben. 

 Dem „Hadromal" könne somit die verholzende Wirkung keineswegs 

 zugeschrieben werden. Merkwürdigerweise sind gerade die Gymno- 

 spermen für die neue Reaktion ungeeignet. 



Die wichtigen Resultate, die Czapek und Mäule erzielt hatten, 

 lassen es selbstverständlich erscheinen, daß nun das „Hadromal" und 

 „Mäule s Reaktion" im Mittelpunkt des Interesses standen. Das 

 Vanillin schien für eine Zeitlang vergessen. 



Geneau de Lamarliere überprüfte zunächst, inwieweit die P'ak- 

 toren der Mäule sehen Holzstotfreaktion durch andere ersetzbar sind, 

 und fand : 1) Das Kaliumpermanganat ist zur Reaktion nicht not- 

 wendig, doch ist unerläßlich die Anwendung eines Oxydationsmittels. 

 Das Kaliumpermanganat kann somit ersetzt werden durch Salpeter- 

 säure , und man erhält bei weiterer Behandlung nach Mäule Gelb- 

 färbung; Kaliumhypochlorid und Kalilauge erzeugen Gelbfärbung, 

 einprozentige Chromsäure ruft Rötung hervor. Hofmeisters Flüssig- 

 keit ist besonders empfehlenswert : bei größeren Mengen von Chlor 

 entsteht Rotfärbung. Bei Gymnospermen und Gefäßkryptogamen er- 

 zielt man nur mit dieser Flüssigkeit (gesättigtes Chlorkalium und 

 verdünnte Salzsäure) Mäule s Reaktion. 



2) Mäule s Salzsäure kann durch andere Säuren ersetzt werden, 

 doch ist sie am geeignetsten. 



3) Mäule s Ammoniak ist ersetzbar durch andere Alkalien. 



4) Alle Gewebe, die Wiesners Phloroglucinprobe geben, geben 

 Mäule s Probe auch, ein Resultat, durch das er sich mit Mäule 

 selbst in Widerspruch setzt, und mit dem auch Fabers sofort zu 

 besprechende Befunde nicht ganz stimmen , das aber die Tatsache 

 für sich hat, mit bedeutend verfeinerten Methoden gefunden zu sein. 



5) Je stärker die Oxydation, desto stärker die Mäule sehe, desto 

 schwächer aber die Wiesner sehe Probe. 



In dem Grade also, in dem der Träger der Mäule sehen Probe 

 auftritt, verschwindet der der WiESNERSchen , und Förderer dieses 

 Vorgangs ist der Sauerstoff, daher wird nach Geneau die Perman- 

 ganatreaktion durch ein „Ligninoxyd" bedingt. 



6) Die Färbung von verholzten Membranen mit Anilinfarbstoffen, 

 im besonderu mit Jodgrün, erfolgt noch, wenn die Mäule sehe Reaktion 




XXII, 3. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 381 



bereits versagt, wenn also Lignin und Ligninoxyd entfernt sind, hat 

 also mit der Verholzung gar nichts zu tun. Geneau de Lamakliere 

 vermutet, daß dieser Keaktion die Stickstoffverbindungen des Holzes 

 zugrunde liegen (man vgl. auch Allen s Bemerkung, nach der in 

 jugendlichen Holzmembranen die Pektiustoffe in reinster Form vor- 

 handen sein sollen). 



7) Die Xylanprobe mit Orcein- Salzsäure ist auf „Vanillin" zu- 

 rückzuführen. Geneau hat später auch einen Aldehyd in dicken 

 Kutikulahäuten entdeckt, der ., Schiffs Probe" gibt und schon wegen 

 seines Vorkommens Hadromal nicht sein kann. 



Faber konzentrierte seine Aufmerksamkeit auf jene Fälle , wo 

 WiicsNERS Probe nicht, Mäules dagegen gut gelingt und um- 

 gekehrt. Es muß hervorgehoben werden, daß er nur die MÄuLESche 

 Versuchsanordnung benutzte , nicht die verfeinerten Methoden von 

 Geneau. — Beispiele für Färbung nach Wiesnkr und Farblos- 

 bleiben nach Mäule sind Hydathoden von Anamirta Cocculus , Bast- 

 fasern von Boehmeria platyphylla, Beispiele für das entgegengesetzte 

 Verhalten Sklerenchymfasern von Anamirta Cocculus. Mit Geneau 

 müßten wir uns diese Beobachtungen von Faber in der Weise er- 

 klären , daß eben in dem einen Falle Lignin , im andern Falle sein 

 Oxyd vorlag. 



Wie wir gesehen haben , hat Geneau auf den alten Ausdruck 

 Lignin zurückgegriffen, vielleicht, um zu zeigen, wie wenig sich mit 

 den beiden Hypothesen vom Vanillin und Hadromal als Träger der 

 Wiesner sehen Probe erklären ließ, und dem „Vanillin" war bloß ein 

 Platz für die BERXRANDSche Xylanprobe eingeräumt worden. Faber 

 schließt mit der Meinung, die HolzstoftYrage sei eigentlich erst wieder 

 aufgerollt und nicht, wie man meinte, gelöst. Inzwischen hatte 

 Wiesner einen Chemiker angeregt, mit den neuen Erfahrungen aus- 

 gerüstet, sich der Holzuntersuchung zu widmen und besonders das 

 Czapek sehe Isolierungs verfahren genauer zu studieren. 



Sind nun zwar die Resultate der Arbeit Gräfes meist rein 

 chemischer Xatur, so ist diese Arbeit doch wegen ihrer allseits be- 

 friedigenden Antworten , die sie auf die Fülle von Fragen über 

 Wiesners und Mäules Probe, welche sich beim Verfolg der beiden 

 so wichtigen Holzstoffreaktionen aufdrängen, gibt, von solcher Be- 

 deutung, daß sie auch hier eine eingehende AVürdigung finden muß. 



Das nach Czapeks Verfahren dargestellte Hadromal erwies sich 

 für weitere Analysen, im besonderen zur Gewinnung kristallisierender 

 Substanzen als unzureichend. Den geeignetsten Weg gab erstens die 




382 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 3. 



Untersuchung' der Sullitablauge und zweitens die hydrolytische Spal- 

 tung und Erhitzung in Vakuumröhren auf 180^. 



Das Resultat dieser Untersuchungen war die Reindarstellung: 



1) von Vanillin C^Hj^O. (Schmelzpunkt bei 80^). 



2) von Brenzkatechin CgHgO.j (Schmelzpunkt bei 103 und 104" 

 — wird mit Eisenchlorid dunkelgrün). 



3) von 2 bis 5 Methylfurfurol CeHgO, (Schmelzpunkt bei 108^). 

 Bekannt war bereits das Vorhandensein von Koniferin im Holze, 



Nur das Vanillin gab von den drei neu dargestellten Produkten eine 

 Rotfärbung mit Phloroglucin und Salzsäure, es erscheint somit nur 

 dieses als Träger der Wiesner sehen Holzstoifreaktion. Ebenso ist 

 es aber auch die Ursache der violetten Nuance der Koniferinprobe, 

 indem bei starker Oxydation , z. B. mit Kaliumchlorat aus Koniferin 

 etwas Vanillin abgespalten wird , das die bekannte blauviolette 

 Farbe erzeugt. Damit erscheinen Czapeks diesbezügliche Befunde er- 

 klärt. Koniferin allein färbt in kleinen Mengen mit Phenol-Salzsäure 

 und chlorsaurem Kali blauviolett. Koniferin und Brenzkatechin liefern 

 unter gleichen Umständen eine grasgrüne Färbung ; die Gelbgrünfärbung 

 des Holzes mit Salzsäure, beziehungsweise die haltbare Grünfärbung 

 mit Bromwasserstoff hat ihre Ursache in der Wirkung von Koniferin 

 und Methylfurfurol. Von großer Bedeutung sind auch Gräfes Be- 

 merkungen über den Wert von Nuancen bei Farbenreaktionen und 

 seine Warnung, allzuviel auf die oft bemerkten Farbenverschieden- 

 heiteu zu geben. Man kann nach seinen Erfahrungen nach der 

 Reaktion in der Eprouvette nicht sofort auf den Farbenton im Schnitte 

 schließen, um so weniger als alle Versuchsbedingungen im Präparate 

 unbekannt erscheinen. Will man genau vergleichbare Farben er- 

 lialten , so muß man Baumwolle mit Vanillin , Methylfurfurol , Brenz- 

 katechin tränken , mit Salzsäure versetzen und am Wasserbade zur 

 Trockene eindampfen. 



Die Tatsache , daß das mittels Alkohol aus dem Holze aus- 

 gezogene Harz in ganz ausgezeichneter Weise Wiesners Rotfärbung 

 zeigt, veranlaßte Gräfe die Reindarstellung der Farbstoff liefernden 

 Substanz auch von dieser Seite her zu beginnen. Diesbezügliche 

 weitere Mitteilungen stehen noch bevor. 



Auf die Frage , woher die oben genannten drei Verbindungen 

 stammen , lautet nach Gräfe die Antwort : Vermutlich aus der Zel- 

 lulose des Holzes , wenigstens ist dies für Methylfurfurol durch 

 Fenton und Gostling sehr wahrscheinlich gemacht, die fanden, 

 dal.) aus Zellulose 33 Prozent dieses Körpers gewonnen werden 




XXII, o. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 383 



können, t^ber die beiden andern Substanzen sind Untersuchungen 

 noch im Gange. 



Es ist natürlich noch von großem Interesse, wie Gräfe sich zu 

 Mäules Reaktion stellt, nachdem er den Träger der WiESNERSchen 

 rein dargestellt hat. Gräfe erklärt den Vorgang bei Mäules Reaktion 

 ganz ähnlich wie Geneau. Das Perraanganat ist ein Oxydations- 

 mittel. Proportional zur fortschreitenden Oxydation muß Wiesners 

 Probe schwächer werden , um bei vollendeter Oxydation vollkom- 

 men auszubleiben , während die Rotfärbung mit Ammoniak besser 

 erfolgen muß entsprechend der größeren Menge mit Ammoniak sich 

 rötender Substanz. 



Wenn nun Vanillin der Träger der Wiesner sehen Probe ist, 

 dann muß man auch mit ihm dieselben Erscheinungen hervorrufen 

 können. Auch das gelang. Vanillin nach Mäule behandelt, liefert 

 purpurrote Farben , Koniferin ebenso , Methylfurfurol brannrote und 

 Rrenzkatechin bleibt farblos. Auch in dieser Frage hat Gräfe noch 

 nicht das letzte Wort gesprochen. Und man kann nur wünschen, 

 daß er noch recht zahlreiche Abhandlungen wie seine letzte dem 

 Holzstoffthema widmen möchte. 



Gehen wir auf Geneaus Erklärung der Mäule sehen Reaktion 

 zurück, so können wir sie jetzt, wie folgt, formulieren. Behandelt 

 man vanilliuhaltige Präparate mit Oxydationsmitteln irgendwelcher 

 Art, so bilden sich Vanillinoxydationsprodukte, die die Eigentümlich- 

 keit haben, sich mit Ammoniak purpurrot zu färben. Ist alles 

 Vanillin oxydiert, dann kann natürlich Wiesners Probe mit Phloro- 

 gluzin-Salzsäure, die vor der Oxydation prachtvoll gelang, nicht mehr 

 eintreten. 



Betrachten wir Czapeks Hadromal mit den neuen Erfahrungen, 

 so erweist es sich trotz der großen Bemühungen, es absolut rein zu 

 erhalten, noch als Gemenge der drei von Gräfe rein dargestellten Sub- 

 stanzen, wobei es natürlich von jeder etwas zeigt, vgl. die Aldehyd- 

 natur, den eigentümlichen Geruch nach Vanillin und die gewissen 

 Farbennuancen. 



Blicken wir endlich zurück auf den Beginn der Vanillin-Holz- 

 stoftrage, so hat sich doch Singers Vermutung als berechtigt heraus- 

 gestellt und lautet also nach dem heutigen Stande der Dinge die Antwort 

 in unserer Frage: Die beste Reaktion auf Holzsubstanz ist Wiesners 

 Probe mit Phlorogluzin-Salzsäure und ihr Träger ist das Vanillin. 



Dieses Kapitel war soweit abgeschlossen, als mir V. Gräfes neue 

 Publikation „Eine neue Reihe von Holzreaktionen" in die Hände kam. 




384 Riclitor: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 3. 



Er findet, daß primäre Alkohole mit der Gruppe (CH,0., = CH im Ver- 

 eine mit Sclnvefelsäure vom spec. Gew. 1-84 mit ^^1nillin oder Holzextrakt 

 eine dunkelrote Färbung- mit stark blauem Stiche liefern. 



Rezept: „30 cm*^ Isobutylalkohol werden mit 15 cm'' Schwefelsäure der 

 genannten Konzentration vorsichtig unter Kühlen in fließendem Wasser 

 überschichtet und nach und nach durchgeschüttelt. Die Mischung färbt 

 sich hellrot bis dunkelrot, und es entwickelt sich Schwefeldioxyd (am Ge- 

 ruch erkennbar). Setzt man von dieser Miscliung einige Tropfen zu einer 

 Spur Holzmehl, so wird dasselbe schwärzlich (offenl)ar infolge der Schwefel- 

 säurewirkung). Verdünnt man aber mit wenig Alkohol und schüttelt die 

 Eprouvette, so zeigen die an der Wand anhaftenden Holzteilclien eine schöne 

 blaue bis blaugrüne Farbe, in der Flüssigkeit ersclieint genau das Rotviolett, 

 welches man erzeugen kann, wenn man diesellie Probe mit Vanillinlüsung 

 vornimmt." Schnitte färben sich wie das Reagens deutlich violett, nach 

 weniger als einstündigem Liegen im Reagens in Gl^yzerin übertragen, wer- 

 den aber die verholzten Gewebe alsbald blau. Nuancen nach grün und 

 rotviolett glaubt Gräfe auf die Verholzungsintensität zurückführen zu 

 müssen. — Auch der Amj^l- und Hexylalkohol zeigt diese Reaktion. Die 

 Färbung ist G Tage haltbar. 



Nicht geben die Probe Kafifee- und Fei'ulasäure, die mit Wiesners 

 Reagens nach Czapek reagieren. — Außer Holz zeigen sie Vanillin und 

 dessen Verwandte. Alipliatische Aldehyde: Isobutylaldehyd analog wie 

 oben Isobutylalkohol verwendet, stellt mit Schwefelsäure auch wieder 

 ein Holzreagens vor. Beim Übertragen in Glyzerin tritt weinrote bis rot- 

 violette Farbe ein. — Einschlägige Versuche mit aliphatischen Aminen 

 werden noch eingeleitet werden. 



Die Färlmng ist auch bei starken ^Vergrößerungen sichtbar. 



Mikrochemisches Verhalten. Von den vorgeschlagenen 

 Holzstoftreaktlonen haben sich, wie bekannt, stets die beiden Wies- 

 ner sehen mit Anilinsulfat und Phoroglucin am geeignetsten erwiesen. 



Da nun, wie Singers und Heglers Untersuchungen dargetan 

 liatten, anscheinend Vanillin einen konstanten Begleiter des Holzes 

 bilden mochte, konnte dieses auch für eine mögliche Ursache der Rot- 

 färbung von verholzter Substanz mit Millons Reagens gelten. Correns 

 glaubte, diese Farbenreaktion wenigstens bei BegoniakoUenchym auf 

 Gerbstoff, bei Bromeliaceen auf Tyrosin zurückführen zu müssen, 

 auch soll Vanillin niclit allgemein im Holze verbreitet sein. Auf die 

 verholzten Zelhnembranen hat später auch W. Ellram bei seiner 

 Arbeit „Über den mikrochemischen Nachweis von Nitraten in Pflanzen" 

 Bezug genommen. Schellenrerg will die Gelbfärbung des Holzes 

 durcli Chlorzinkjod aus der Zahl der HolzstotFreagentien ausgeschieden 

 wissen. Er stimmt mit Zimmermann in der Bedeutung der Phloro- 

 glucin-Salzsäure-Probe überein, die er für das emptindlichste Holz- 

 reagens erklärt. Freilich ließe sich nicht beweisen, ob alles, was 




XXIT, .'). Richter: Die Fortsoliritte der botanischen Mikrochemie. 385 



diese Probe gäbe, auch wirklicli verholzt sei. Der Begriff der Ver- 

 holzung sei noch unklar. Auch Wundsekrete und Harze färbten sich 

 mit Phloroglucin-Salzsäure (vgl. diesbezüglicli auch H. Molisch und 

 die folg. Erörterungen über Wundgummi). Weitere „Beiträge zur 

 Untersuchung der verholzten Membran'' sind von Zetzsche geliefert 

 worden. Wieler fand , daß die Membranen und Verstopfungen der 

 von JosT beschriebenen Luftpneumathoden die Phloroglucin-Salzsäure- 

 Probe liefern. Bezüglich der Zweifel der Deutung vgl. das oben 

 Gesagte. 



F ä r b u n g. Wie bekannt, wird Fuchsin zur Holzfärbung sehr 

 empfohlen. Nach Heinricher soll Holzgummi deren Ursache sein. 

 Nach RouLET ist auch konzentrierte alkoholische Cyaninlösung mit 

 öprozentiger ammoniakalischer Kongorotlösung für schöne Doppel- 

 färbungen von Holz- und Zellulosegewebe sehr gut geeignet. Bei 

 dieser Versuchsanstellung wird Zellulose rot , Holz blau , wieder ein 

 Beispiel dafür, wie wenig man auf die Farbstoffe als Mittel zur Er- 

 kennung chemischer Substanzen geben darf. Eine neue Doppel- 

 färbung für Gewächse mit teilweise verholztem Gewebe verdanken 

 wir Hermann Pfeiffer. Sie hat den Vorzug der Haltbarkeit und 

 beruht auf der Verwendung von Hämalaun und Naphthylaraingelb. 

 Als Entwässerungsmethode wird die von Unna angegeben. Die 

 Farbenverteilung stellt sich dabei wie folgt: Holz gelb; unverholzte 

 Teile violett. Rezept vgl. im Original. 



Eine weitere Methode zur Herstellung haltbarer Holzfärbungen 

 rührt her von Arcangeli, nach dessen Versuchen eine 0*5prozentige 

 Methylgrün- und" eine .5prozentige Fuchsinli)sung, beide im Verhältnis 

 4 : 1 verwendet, sehr gute Resultate liefern sollen. Chalon verweist 

 auf Neutralrot, auf Crocein in saurer, Kongorot in alkoholischer 

 Lösung zur Holzfärbung. In wässriger Lösung ist Kongorot nicht ver- 

 wendbar. Rutheniumrot färbt Holz nicht. In späteren Arbeiten be- 

 richtet er von seinen Erfahrungen mit Farbstoffen vor und nach der 

 Behandlung mit Eau de.Iavelle und über zweckmäßige Doppelfärbungen 

 mit Preußisch-Blau-Safranin und Anilinblau-Magentarot. 



Nach Lagerheim färbt sich bei Anwendung des von ihm an- 

 gegebenen Farbstoffgemisches Sudan HI-Brillantblau-Chloranilin das Holz 

 blau ; Fettviolett, Fettgrün, Fettrot färben Kork, Kutikula und Holz. 



Devaux hat sich, wie schon wiederholt erwähnt, mit dem 

 auf Metallspeicheruug beruhenden Färbeverfahren beschäftigt. Nach 

 seinen Erfahrungen speichert Ilolzsubstanz Metall nicht. Erst Vor- 

 behandlung mit Eau de .lavelle befähigt sie dazu. Dann aber ist 



Zeitsclir. f. wiss. Mikroskopie. XXII, .8. 25 




386 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 3. 



dieses Speicherlingsvermögen auch staunenswert. Eisen und Kupfer 

 werden unter diesen Bedingungen noch im Verhältnis 1 : lO'OOO'OOO 

 aufgenommen. 



IIeinricher fand bei den Lathraea- Arten zwischen Saugfortsatz 

 und dem Gewebe der Wirtswurzeln gelbliche Massen liegen, die sich als 

 Reste verflüssigter, verholzter Membran erwiesen und besonders mit 

 Wiesners Phloroglucin-Salzsäure intensiv reagierten, so daß es den An- 

 schein hatte, als ob hier eine Anreicherung der färbbaren Substanz statt- 

 gefunden hätte. 25prozentige Chrorasäure vermag diese gelblichen Massen 

 zu entfernen, während Schwefelsäure sie ohne Ver(juellung verkohlt. 



Bei seinen Studien über Hadromal machte Czapek die interessante 

 Beobachtung, daß von Merulius lacrymans befallene Hölzer mit Alkohol 

 viel mehr „Hadromal" zu liefern vermögen als pilzfreie. Diese Eigentüm- 

 lichkeit der chemischen Veränderung ist dem Merulius lacrimans nicht allein 

 eigen, auch Pleurotus pulmonarius liefert die Hadromalprobe fördernde 

 Extrakte. Czapek führt diese Wirkung auf ein Enzym zurück, dem er 

 den Namen „Hadromase" gibt. Diese Befunde stimmen mit früheren von 

 Hartig gut überein, der vom Verschwinden des die Holzstoifprobe liefernden 

 Körpers unter der Einwirkung des Holzschwammes berichtete. Auch durch 

 Kulturen im Brautsclirank konnte er diesen Befund erhärten. Angeregt 

 durch C'ZAPek, beschäftigte sich Marpmann mit dem Leben, Natur und 

 Nachweis des Hausschwammes und ähnlicher Pilze unter Anwendung 

 biologischer und mikroskopisch-mikrochemischer Methoden, von denen er 

 sich nach berechtigter Kritik der in der Pliarmaz. Zentralhalle 1901 Nr. 3 

 angegebenen mikrochemischen Erkennungsmethoden endgültig für die bio- 

 logischen entscheidet. Eine neuere Arbeit auf diesem Gebiete hat Schorsten 

 zum Verfasser. Man vgl. auch Tubeufs Untersuchungen mit holzzerstören- 

 den Pilzen. 



Koniferin. Höhnel hat bekanntlich die von Tiemanns und Haar- 

 manns empfohlene Phenolsalzsäureprobe auf Koniferin mit Rücksicht auf 

 Hartig s Entdeckung des Stoffes im Holze der Koniferen, für mikrochemisch- 

 botanische Zwecke ausgenutzt. Molisch beschrieb später in einer 20pro- 

 zentigen alkoholischen Thymollösung, die mit chlorsaurem Kali versetzt 

 war, ein weiteres vorzügliches Koniferinreagens. Da sowohl nach Höhnel 

 wie nach Molisch die Reaktionen mit verholzten Membranen gelangen, 

 stand man nicht an, um so mehr als schon makrochemische Analysen es 

 wahrscheinlich machten, den Holzzellen Koniferingehalt zuzuschreiben. Auch 

 Hegler war von der angegebenen Verbreitung des Koniferins überzeugt. 

 Czapek hat sich nun in seiner früher zitierten Arbeit gegen diese allge- 

 mein verbreitete Anschauung gewendet. Es sind abermals Farbenverschieden- 

 heiten, auf die er sich dabei stützt. Indem ich nun noch auf das im Kapitel 

 Chemie der verholzten Zellmembranen Gesagte verweise, wo jedesmal an 

 passender Stelle des Koniferins gedacht ist, hebe ich nur noch Gräfes 

 Arbeit hervor, welche durch makrochemische Analysen auch den Konferin- 

 gehalt des Holzes zweifellos macht und die Czapek sehen Befunde in der 

 geeigneten Weise richtig stellt bezw. erklärt. — Kristallisation. Bis- 

 her gelang es leider noch nicht, das Koniferin innerhalb der Zelle zur 




XXll, 3. Riehtpr: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 387 



Kristallisation zu bringen, doch sind unschwer aus einer wässrigen reinen 

 Koniferinlösung mikroskopische Kristalle zu erhalten. Daß es aus Holz- 

 zellenextrakt nach makrochemischen Methoden zur Kristallisation gebraclit 

 wurde, habe ich Ijereits erwähnt. 



3. Die Kutikula und die verkorkten Membranen. 



Chemie. Auf Grund der Untersuchungen von Höhnel und 

 GiLsoN war die Auffassung von der nahen Verwandtschaft der Kuti- 

 kula und der verkorkten Membranen so gang und gäbe geworden, 

 daß man die Ausdrücke „kutinisiert" und „kutikularisiert" überhaupt 

 für überflüssig ansah und das Wort „Kutikula" bloß behufs leichterer 

 topographisclier Bestimmung beibehielt. Daß nun aber doch entgegen 

 der herrschenden Anschauung auch Avesentliche chemische Unter- 

 schiede bestehen, gelang v. Wisselingh zu zeigen, der für acht ver- 

 schiedene Gewächse die chemischen und physikalischen Eigenschaften 

 der Kutikula auf mikrochemischem Wege festzustellen suchte. Als 

 Reaktionen benutzte er dieselben, die er seinerzeit beim Studium der 

 Verkorkung anwandte. Die sich ergebenden Zersetzungsprodukte der 

 Kutikula wurden namentlich auf Phellonsäure geprüft , wobei natür- 

 lich in erster Linie die Violettfärbung durch Chlorzinkjod in Be- 

 tracht kam. Das Ergebnis dieser Untersuchungen lautet: Zwischen 

 Kutikula und Suberinlamelle gibt es zwar Übereinstimmungen (beide 

 sind frei von Zellulose und beide enthalten teilweise verüüssig- 

 bare Substanzen) , doch bestehen so erhebliche Verschiedenheiten 

 zwischen ihnen, daß ein Durcheinanderwerfen beider unzulässig ist, 

 denn der Kutikula fehlt die in der Suberinlamelle stets vorhandene 

 Phellonsäure und sie widersteht der Kalilauge besser , ob diese 

 nun in Wasser, Alkohol oder Glyzerin gelöst erscheint. Man wird 

 daher nicht nur die alten Worte , weil glücklich gewählt , wieder 

 herausholen müssen , sondern auch mit v. Wisselingh noch neue zu 

 bilden haben, um diesen einschneidenden Unterschieden gerecht zu 

 werden. So nennt er die aus der Kutikula isolierten Säuren : „Acides 

 cutogeniques". Es sei auch erwähnt , daß die Kutikularschichten 

 weniger widerstandsfähig sind als die Kutikula. 



Eine weitere chemische Charakterisierung erfuhr diese in der 

 allerjüngsten Zeit durch Geneau de Lamarliere, der verschieden dicke 

 Kutikulae miteinander verglich, besonders im Verhalten gegen Schiffs 

 Reagens (Fuchsin , entfärbt mittels schwefeliger Säure) und dabei 

 noch die Wirkungen von Jod, Sudan III und andern Stoffen mit zum 



2.Ö* 




388 dichter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXTI. 3. 



Vergleiche heranzog. Es zeigte sich, daß starke Kiitikulae einen reak- 

 tionsliindernden Stoff enthalten. Die Reaktion bedingt vermutlich ein 

 Aldehydstoff, der auch dieToLLENSSche und PASxEURSche Probe liefert. 



Dieses Verhalten kutiknlarisierter Membranen gegen Fuchsin 

 ist nur ein Beispiel von den vielen Möglichkeiten , die Kutikula und 

 verkorkte Membranen durch Farbstoffe zu differenzieren. 



Färbung. Abgesehen von dem von Correns angegebenen 

 Chlorophyllfarbstoff' kann man die von den verschiedenen Forschern 

 zur Färbung empfohlenen Farbstoffe unterscheiden, 1) in solche, die 

 von Fett aufgenommen werden , 2) solche , die man gewöhnlich zur 

 Differenzierung von Plasma und Kern benutzt, und 3) pektinfärbende. 



Zimmermann wurde zur Verwertung von Alkannin und Cyauin 

 für Korkfiirbung vornehmlich durch den Gedanken veranlaßt, daß 

 das Suberin oder Eutin als Fett eben ein analoges Speicherungs- 

 vermögen für diese Farbstoffe besitzen müsse, und seither haben sich 

 die Angaben über neue Korkreagentien, d. h. neu verwendete P"'arb- 

 stoffe außerordentlicli vermehrt. 



I. Fettfarbstoff c als Korkreagentien: 



1) Prodigiosin, den Farbstoff des Bac. prodigiosus und andere 



Bakterienfarbstoffe, z. B. den des Bakt. kiliense, empfiehlt 



R0.SEN13BR(;. 



2) Sudan III, eingeführt in die botanische ^likrocheuiie von Bus- 



CALiONi, empfohlen von Kroemer und für Doppelfärbungen 

 mit Brillantblau und Chloranilin von Lagerheim. 



3) Scliarlach R. eingeführt von Machaelis, empfohlen von Lager- 



heim, Kroemer und Rumpf. 



4) Fettblau, Buttergelb, Meyers Gelb, zum ersten Male verwendet 



von Lagerheim. 



5) A. Meyers Dimetliylparaidienylendiamin und «-Naphtol in ein- 



prozentiger Sodalösung, eingeführt von Rumpf. 



II. Plasma- und Kernfarbstoffe als Korkreagentien. 



1) Neutralrot, verwendet von Chalün. 



2) Mit Anunoniak entfärbte konzentrierte Lösungen von Gentiana- 



violett, Dahlia und Methylgrün nach Vorbehandlung der Ob- 

 jekte mit Eau de Javelle und Eintragen in 5 — lOprozentige 

 Salz-, Schwefel- oder Salpetersäure empfiehlt Tison. Dabei 

 werden die Korkmembranen violett. 



3) Essigsaures Anilinblau, eingeführt von Forsch. 



4) Fuchsin, emijfohlen von Darbishire. 



5) „ entfärbt durch schwefelige Säure (Schiffs Reagens), 

 eingeführt von L. Geneau de Lamaruiere. 



III. Pektinfarbstoffe. 



1) Mangins Säuregrün / beide empfohlen von Tisox. Versuchs- 



2) Pariser Violett \ anstellung wie in II. 2). 




XXII, 3. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 389 



Devaux teilt mit , daß sich Kutiii und Snberin bei seiner auf 

 Metallspeicherung basierenden Methode der Färbung nicht färben 

 lassen, da ihnen das Vermögen der Metallspeicherung abgeht. — 



Überblicken wir den letzten Abschnitt , so zeigt er uns nicht 

 weniger als dreierlei, anderweitig häufig verwendete Farbstoffe im 

 Dienste des Suberiunachweises und mahnt uns damit zur ent- 

 sprechenden Vorsicht bezüglich der Schlüsse, die man aus Farbstoff- 

 speicherungen ziehen darf. So scheint es mir jedenfalls unzulässig, 

 aus der bei reifen Sporen von Phycochromaceen gelungenen Färbung 

 nach Gram auf deren Suberingehalt zu schließen. 



Man wird daher beim mikrochemischen Nachweise außer den 

 Färbungen , die ja gewiß bezüglich Deutlichmachung ganz hervor- 

 ragende Vorteile bieten, schließlich und endlich doch noch v. Hühnels 

 Verseifungsprobe durchführen. Kroemer empfiehlt vor deren Aus- 

 führung Mazeration mit Eau de Javelle , die bei der genauen Fest- 

 stellung der Verkorkung ausgezeichnete Dienste leisten soll. 



Verwertung- der Reaktionen. Zunächst machten es die im 

 Vorhergehenden erwähnten verfeinerten Methoden des Suberinnachweises 

 möglich , einen Irrtum zu berichtigen , der sich in diesem Gebiete einge- 

 schlichen hatte. Mattikolo und Buscalioni hatten nämlich behauptet, 

 daß bei den Samenschalen der Papilionaceen die Kutikula chemisch mit 

 der doppelten Auskleidung der Interzellularen übereinstimme. Schips 

 konnte zeigen, daß wohl zwei Begrenzungsschichten der Interzellularen 

 vorkommen, daß aber die median gelegene unter keinen Umständen als 

 Kutikula gedeutet werden könne, löse sie sich ja doch schon in Eau de 

 Javelle. Derselbe beobachtete in Fruchtepidermen von Rohdea japonica 

 eigenartige Kutikularbildungen , die in Form von mehr oder minder recht- 

 eckig gestalteten Lamellen mit abgerundeten Ecken zwischen die Wände 

 der Zellen eingelagert sind. Wieler weist bei den Zellmembranen und bei 

 den Verstopfungen der Interzellularen in Luftpneumathoden typische Ver- 

 korkung nach, Kroemer hat Wurzelhaut, Hypodermis und Endodermis der 

 angiospermen Wurzel untersucht. Neue dem Suberin verwandte Körper 

 fand V. WissELiNGH bei Umbelliferen. So zeigte er, -daß die die großen 

 und kleinen Kammern der in den Umbellif er enf rückten enthaltenen Ülgänge 

 umkleidende ^lembran aus einer mit Suberin oder Kutin nahe verwandten 

 Substanz besteht, auch in den den Ülgängeu zugekelu-ten Epithelzellen 

 findet sie sich zum Teil neben Zellulose, v. Wisselingh nennt sie Vittin. 

 Bei Astrantia major sind die Ülgänge von korkartigen Zellschichten um- 

 geben, aus denen sich aber Phellonsäure nicht isolieren läßt. 



4. Gallerte, Gummi, Schleim. 



Gallerte. — In) allgemeinen sind heute noch Klebs', Hauptfleisch s 

 und Erreras Untersuchungsmethoden der Gallerte maßgebend. So hat 




390 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 3. 



CoRRENs zum Studium des Wachstums der Gallertblasen von Apiocystis 

 Brauniana Naeg. behufs „Verdickung" die von Klebs angegebene Fütterung 

 mit Glykose und Pepton versucht, doch ohne den gewünschten Erfolg ; Senn 

 verwendet Natronlauge zur Quellung der Gallertschichte koloniebildender 

 einzelliger Algen. 



Wie bekannt, sind Öafranin und Methylenblau zum Färben der Gallert- 

 scheiden von Oszillarien beliebt. Daß Pektinstoffe der Grund dieser leichten 

 Färltbarkeit sein könnten, hat aber erst Hegler ausgespi'ochen und durch 

 die Rutheniumrotprobe nachzuweisen gesucht. Von Schröders Arbeit 

 war schon oben die Rede. 



Es wurde früher schon auf die von Klebs beobachtete Fähigkeit der 

 Gallertscheiden aufmerksam gemacht, auf Fütterung mit Glykose und Pepton 

 durch Verdickung zu reagieren. Clautriau kommt nun auf Grund seiner 

 Untersuchungen zum Schlüsse, die gallertartigen Membranen der Braun- 

 und Rotalgen wären bei der Kohlehydratspeicherung mit beteiligt. 



Daß übrigens Bakterienmembrangallerten in hohem Grade gewisse 

 Stoffe zu speichern vermögen, ist schon von Molisch für Eisenbakterien 

 in bezug auf Mangan festgestellt und in jüngster Zeit von Adler für den 

 gleichen Stoff bei dem Protozoon Anthophysa vegetans bestätigt worden. 

 Es verbreitert sich im ferrura mangano citricum die zentrale Zone des 

 Stieles der Anthophysa-Kolonie etwa um das Dreifache. 



Gelose. Mit der Algengelose hatte sich zunächst noch Mangix zu 

 beschäftigen, als er seine bekannten Reaktionen der Pektinstoffe zu be- 

 schreiben gedachte. Er fand, daß sie sich ebenso wie diese mit seinen 

 Farbstoffen färbte, meint aber, daß eine Verwechslung wegen aller andern 

 charakteristischen Eigenschaften ausgeschlossen sei. — Daß Gelose auch im 

 Geniculum von Corallineen vorkommt, ist später von Yendo gezeigt 

 Avorden. 



Gummi. Man wußte bisher, daß das chemische Verhalten der Gummi- 

 arten ein auffallend verschiedenes ist. Die einen bläuen sich schon mit Jod 

 allein, andere erst mit Jod und Schwefelsäure oder Chlorzinkjod, wieder 

 andere werden durch Jodpräparate gelb und noch andere färben sich über- 

 haupt nicht, ähnlich verschieden ist ihr Verhalten gegen Kupferoxyd- 

 amraoniak. Diese merkwürdige Verschiedenheit hat nun durch Mangins 

 Untersuchungen über die Verwendung des Rutheniumrots in der Pflanzen- 

 anatomie eine entsj^rechende Erklärung gefunden. Wie noch im Kapitel 

 „Pektinstoflfe" hervorgehoben werden wird, hat das ammoniakalische Ruthe- 

 niumses(iuichlorid die Eigentümlichkeit, von Gummiarten und Schleimen nur 

 die zu färben, die von Pektinstoffen abstammen, Zelluloseschleime aber nicht. 

 Dadurch ist man in den Stand gesetzt, den Grund des oben erwähnten ver- 

 schiedenen Verhaltens gegen Jod und Kupferoxydammoniak zu ermitteln. 

 Mangins Methode des Gumminachweises hat später vielfache Verwendung 

 gefunden. Mangin selbst benutzte sie bei seiner Arbeit „Sur la gommose 

 de la vigne", Lutz in der seinen „Sur la marche de la gommose dans les 

 Acacias". Rutheniumrot ist ein vorzügliches Gummireagens. Daß Mangins 

 Neutralrot sich hier auch sehr gut verwerten lasse, beweisen die Unter- 

 suchungen von T^i'TZ. Färbt man nämlich mit Rouge neutre von Gasella 

 und Vert acid JEEE (Poirrier), so wird die Zellulosemembran grün, Gummi 




XXII, 3. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 391 



aber rot gefärbt. Dabei ist sofortige Beobachtung notwendig. Aus dem 

 Gesagten geht hervor, daß Pektinstoflf ein steter Begleiter des Cxummi ist. 



Wundgurami. Nach den bisherigen Untersuchungen von Temme 

 und Mf)LiscH erschien es niclit unwahrsclieinlich, daß im Wundgumrai 

 Vanillin aufgelöst sei. Daß auch noch andere Stoffe darin vorkommen, 

 haben M^Cngin und Lutz gezeigt. Von einem typischen Beispiele berichtet 

 WiELER in seiner Arbeit „Die gummösen Verstopfungen des serehkranken 

 Zuckerrohres". 



Schleim. Die große Unannehmlichkeit bei der Beobachtung von ver- 

 schleimten Membranen lag, wie bekannt, hauptsächlich in der raschen 

 Verquellbarkeit im Wasser, es wurde daher zunächst Untersuchung im 

 Alkohol empfohlen, die aber wegen des raschen Verdampfens dieses Stoffes 

 mit großen Schwierigkeiten verbunden ist. Diesem Übelstande sclieinen fast 

 gleichzeitig Mangin und Walliczek durch die Einführung von Bleiacetat als 

 Beobachtungs- bezw. Untersuchungsflüssigkeit abgeholfen zu haben. Um näm- 

 lich die feinere Struktur der Samenschalen-Epidermis von Linum usitatissimum 

 genauer als bisher untersuchen zu kcinnen, übertrug Mangin die Schnitte 

 in eine lOprozentige neutrale Lösung von Bleiacetat und färbte mit einem 

 Gemisch von Säurefuchsin und Neutralrot. Dabei gelang es ihm sogar, in 

 den Schleiraschichten noch Zellulose nachzuweisen, wenn er die Schnitte 

 aus dem Bleiacetat in Kali- oder Natronlauge übertrug und dann mit Kongo- 

 brillant 4 R, Kongokorinth oder Benzoazurin ausfärbte. Bei Vorhandensein 

 von Zellulose tritt Färbung ein, auch verrät sich die Zellulose im polarisierten 

 Lichte. Walliczek hatte sich auch eine ganz interessante Aufgabe ge- 

 stellt, nämlich den Stärkenachweis durch Verkleisterung zu erbringen, ohne 

 dabei den Schleim zerfließen zu lassen. Die Lösung des Problems war 

 durch die Verwendung des Bleiacetats gegeben. Er fand , daß mit Aus- 

 nahme von Kakteen-, Barosma- und Cassiaschleim kein einziger, mit Alkohol 

 gehärtet, in Bleiacetat gelegt, verquillt, auch wenn er gekocht wird. Sämtliche 

 von ihm beobachteten Schleime färbten sich mit Jod und Schwefelsäure gelb 

 oder nicht. Von angeblich günstigen Schleirafarbstoffen erwähnt Mangin noch 

 Naphthylenblau, Säuregrün, Safranin, Methylenblau und die anderen Mangin- 

 schen Pektinfarb Stoffe. Doch meint Walliczek, daß die Schleimfärbungen 

 keinen praktischen Wert haben. Die Protoplasten werden nach ihm inner- 

 halb der Schleimmembranen mit Eosin und Nigrosin und Pikrinsäure deut- 

 lich gemacht. Bei Untersuchung von Drogen Avurden diese in feuchten 

 Kammern zunächst Wasserdämpfen ausgesetzt, bis jener Feuchtigkeitsgehalt 

 erzielt war, den frische Blätter besitzen, dann wurden sie in Alkohol ge- 

 härtet und den weiteren Prozeduren unterworfen. 



5. Chitin. 



Die genauen cliemiscben Analysen v. W^isselinghs über die Cliitin- 

 und Pilzmembranderivate machen das Vorkommen von Chitin im 

 rilzreicbe zweifellos. Zum mikrochemischen Nachweise werden die 

 in KOH auf 160^ erwärmten Membranen zunächst in OOprozentigen 




392 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXll, o. 



Alkohol übertragen und nachher in Wasser gebracht , worauf eine 

 schwache Lösung von Jodjodkalium, die mit Schwefelsäure angesäuert 

 ist , zugesetzt wird. Es färben sich die jetzt mykosin-, also früher 

 chitinhaltigen Pilzmembranen deutlich violett. Diese Reaktion hat 

 nun bei Untersuchungen von Pilzen und Bakterien wiederholt An- 

 wendung gefunden. A"gl. oben die Besprechung der Pilz- und 

 Bakterienmembranen. 



Auch bei Untersuchungen überPhycochromaceen hat v.Wisselings 

 Methode positive Resultate gezeitigt. Heglek empfiehlt für diesen 

 Zweck Vorbehandlung mit Salzsäure , Kalilauge und Kaliumperman- 

 ganat oder mit Salpetersäure und chlorsaurem Kali. Jüngst hat auch 

 Kohl Heulers Befund über das Vorkommen von Chitin in der Os- 

 cillarienmembran bestätigen können. 



6. Kallose. 



So wie in der Geschichte der Pektinstoffe nimmt auch in der der Kallose 

 der Name Mangin einen hervorragenden Platz ein. Die Untersuchungen 

 dieses Forschers haben gezeigt, daß man zwei wesentlicli voneinander unter- 

 schiedene Modifikationen der Kallose unterscheiden kann, von denen die 

 erste ohne weiteres die für die Kallose charakteristischen Reaktionen zeigt, 

 während die zweite eine vorherige Behandlung mit kaustischen Alkalien 

 oder Oxydationsmitteln oder mit beiden benötigt. Vgl. dazu die chemisch- 

 analytischen Untersuchungen in Moores Arbeit: „Reactions of callus and 

 paracallus." — Nach v. Wisselingh wird Kallose durch Brülantblau ohne 

 Essigsäure gefärbt, von Chalon wird Benzoazurin, Benzopurpurin, Korallin 

 und Kongorot zur P'ärbung empfohlen. 



7. Pektinstoffe. 



Mit der Geschichte unserer Kenntnis von den Pektinstoffen ist 

 der Name Mangin eng verknüpft. Seine ersten ausführlichen Mit- 

 teilungen über sie behandeln „Proprietes et reactions des composes 

 pectiques." Behandlung der Schnitte mit Eau de Javelle, l'öprozentiger 

 Essigsäure behufs Neutralisierung und Färbung mit Safranin, Methylen- 

 oder Naphthylenblau macht Pektinstoffe besonders deutlich. Der Be- 

 weis von der Leistungsfähigkeit der drei Farbstoffe wird durch lang- 

 dauernde Einwirkung von Kupferoxydammoniak, bei der nur die 

 färbbaren Skelette bleiben, und dadurch erbracht, daß durch Lösung 

 die färbbaren Mittellamellen entfernt werden, worauf natürlich eine 

 Reaktion unterl)leibt. Die l'ektinsäure soll als Calciumpektat die Mittel- 




XXII, 2. Richter: Die Foitschritte der botanisclien Mikrochemie. 393 



lamelle zusammensetzen. Auch ist Pektose neben Pektinsäure nach- 

 weisbar. Zwar zeigen auch Algengelose, Gummi und Pflanzenschleime 

 die oben genannten Färbungen , docli sind sie anderweitig genug 

 unterschieden, um eine Verwechslung auszuschließen. Somit blieben 

 Safranin, Methylen- und Xaphthylenblau , wie schon nach früheren 

 Untersuchungen des Autors (vgl. Lit. in Z. M. und Mangins Angaben 

 über die Zelluloseraembran) die besten Reagentieu auf Pektinstoffe. 



1893 empfahl Mangin Neutralrot; es färbt Pektinstotfe und 

 koagulierte Schleime gelborange. Im selben Jahre stellte er die 

 Verwendbarkeit von Rutheniumrot für den Pektinstoft'uachweis fest, 

 das seither in allen Arbeiten dieses Untersuchungsgebietes ver- 

 wendet wurde. Das von Joly dargestellte Reagens hat vor den 

 früher empfohlenen Auilinfarbstoffen voraus, daß es einen Schluß 

 auf den Ursprung auch von Gummi- und Schleimarten gestattet und 

 nur die aus Pektinstotfen hervorgegangenen Gummiarten oder Schleime 

 färbt (s. 0.). Freilich färbt es auch kutinisierte Membranen und plasma- 

 tische Bestandteile, doch sind diese anderweitig so gut charakterisiert, 

 daß eine Verwechslung bei genügender Vorsicht nicht zu erwarten ist. 

 Verholzte Membranen färben sich nur nach Vorbehandlung mit Alkali 

 lebhaft rosa. Fiu großer Vorteil besteht bei seiner Verwendung auch 

 darin, daß es weder durch Glyzerin noch durch Alkohol oder Nelkenöl 

 ausgewaschen wird. — 



NoACK vermag bei den „Stäbchen" der Orchideenmembranen 

 (d.h. Fortsätzen jderselben in die Interzellularen des Rindenparenchyms) 

 mit Bismarckbraun Pektin nachzuweisen. Nach G. Tischler verwan- 

 deln sich die Zeflulosebalken des Embryosackes von Pedicularis an- 

 scheinend in Pektin. Chalon empfiehlt mehrere der von Mangin schon 

 angegebenen Farbstoffe zum Nachweis der Pektinstotfe. Rosenberg 

 macht darauf aufmerksam, daß die Exinen von Pollenkörnern ver- 

 schiedener Antheren bei Drosera rotundifolia bei der liehandlung mit 

 Farbstoffen je nach dem Wechsel der Alkaleszenz verschiedene Farben 

 liefern. Parmentier schlägt Pheuolsafranin-Methylenblau für Intinen- 

 iärbung vor. Avetta berichtet von vermutlichen Pektincystolithen. 

 BuscALioNi weist in Kalkoxalatdrusen einen zentralen Körper nach, 

 der die Pektinreaktionen Uefert, Magnus Pektinstotfe in den „Zellu- 

 loseklumpen" der von der Mykorrhiza befallenen Zellen von Neottia 

 Nidus avis. Allen vermag Hoftüpfeltori durch Rutheniumrot nach 

 Vorbehandlung mit Salzsäurealkohol deutlich zu machen u. a. m. 

 B. Schröder erwies die chemische Verwandtschaft der tierischen 

 Mucine mit den pflanzlichen Pektinen. 




394 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 3. 



Mittellamelle. Mazeration. Schon in seiner Arbeit „Sur la sub- 

 stance intercellulaire" hat Mangin die Ansicht vertreten, „daß die Mittel- 

 lamelle der sogenannten Zellulosemembranen aus Pektinsäure resp. einem 

 unlöslichen Salze derselben besteht" und sich vornehmlich darauf gestützt, 

 daß nach 24 stündiger Vorbehandlung mit alkoholischer Salzsäure und Waschen 

 in Wasser lOprozentiges Ammoniak die Schnitte zu mazerieren imstande ist. 

 Später präzisierte er seine Ansicht dahin, daß er Calciumpektat als wesent- 

 lichen Bestandteil der Mittellamelle ansah, immer in der Meinung, die Vor- 

 behandlung mit Salzsäure sei unumgänglich nötig. Wille schloß sich dieser 

 Ansicht auf Grund seiner Algenuntersuchungen an. Mir ist es nun gelungen, 

 Mazeration einer Menge von pflanzlichen Objekten durch konzentrierte 

 Ammoniak allein zu erzielen — ein Analogon zur Verwendung von Ammo- 

 niak für Mazerationszwecke im Tierreich. Dabei hatte sich gezeigt, daß 

 Stärke-, Aleuronkörner, diese mit Globoid und Kristalloid, Siebröhren, Choro- 

 phyllkörner, Kalkoxalatki'istalle u. v. a. in den getrennten Zellen gut er- 

 halten bleiben. Dieses Verfahren läßt nun Mangin s Ansicht fraglich erscheinen. 

 In neuester Zeit hat Devaux die Mangin sehen Befunde einer genauen 

 chemischen und miki'ochemischen Nachprüfung unterzogen, nachdem schon 

 Allen die Mangin sehen Pektinstoflffarbenreaktionen überprüft und als sehr 

 geeignet gefunden hatte. Nur die weitgehende Anwendung des Methylen- 

 blaus zum Pektinnachweise hatte Allen eingeschränkt, da auch die stick- 

 stoffhaltigen Verbindungen gleich gut damit reagieren, und dahin ergänzt, 

 daß er nachwies, wie bei Pteris und Tilia in älteren Geweben Pektinverbin- 

 dungen ganz verschwinden und durch andere ersetzt werden. Vgl. auch 

 Chalons Untersuchungen aus dem Jahre 1899. 



Was nun Devaux' Arbeiten anlangt, so vei'dienen sie, besonders im 

 Hinblick auf den Widerspruch zwischen den Mangin sehen Befunden und 

 denen über die Mazeration, hervorgerufen von Ammoniak allein, eine ein- 

 gehende Besprechung. Das wesentliche Ergebnis der Devaux sehen Arbeit 

 ist die Negierung der Mangin sehen Anschauung von der Zusammensetzung 

 der Mittellamelle aus Calciumpektat. Denn läge Calciumpektat vor, dann 

 müßte alkoholische Salzsäure Calciumchlorid und Pektinsäure erzeugen, die 

 in Wasser sozusagen unlöslich ist, und Schnitte aus alkoholischer Salzsäure 

 dürften im warmen Wasser nicht zerfallen. Sie zerfallen aber in der Tat, 

 wie Devaux gezeigt hat. War aber die Mittellamelle Pektose, so wird diese 

 in Pektin verwandelt, das seinerseits wieder in Wasser löslich ist. Nun zer- 

 fallen, wie gesagt, mit alkoholischer Salzsäure gekochte Schnitte in warmem 

 Wasser, wodurch die Devaux sehe Anschauung viel an Wahrscheinlichkeit 

 gewinnt, und diese muß um so größer werden, wenn es gelingt, durch 

 Alkalien den Zerfall mit alkoholischer Salzsäure gekochter Schnitte in 

 Wasser zu verhindern. Dies gelingt tatsächlich durch Natronlauge. Es 

 hat sich eben nach Devaux das aus der Pektose gebildete Pektin in Pektin- 

 säure verwandelt, die in Wasser fast unlöslich ist. 



Bei diesen Untersuchungen kam Devaux besonders Mangin s Ruthe- 

 niumrot zustatten, sowie die reichliche Verwendung von Alkohol als Zusatz 

 zu Säuren, bei der Waschung u. dgl. mehr, wodurch Lokalisation des Stoffes 

 und gute Reinigung der Reagentien ermöglicht wurde. Die Zeit für das Kochen 

 mit alkoholischer Salzsäure ist bei den verschiedenen Pflanzen verschieden. 




XXII, 8. Richter: Die Fortschritte der botanischen Milvrochemie. 395 



Devaux konnte auf diese Weise zeigen, daß es verschiedene Pei<^tosen 

 gibt, wodurch sicli das Verhalten der verschiedenen Membranteile erklärt. 

 Die Pektose der Mittellamelle wird am raschesten angegriffen, ja Säuren 

 greifen sie schon in der Kälte an, wobei ein Ubergangskörper zwischen 

 Pektose und Pektin entsteht. 



Um nun auf den Widersi^ruch zwischen den Befunden Mangins und 

 meinen zurückzukommen, so scheinen mir die Devaux sehen nicht die Klä- 

 rung zu bringen, um so weniger als das verwendete Alkali bei den jeweiligen 

 Untersuchungen nicht das gleiche war, lO^^/oNH^, konz. NH.„ Na OH. In 

 den zwei ersten Fällen bewirkt, in dem letzteren verhindert das Alkali 

 den Zerfall. Wenn sich zeigen ließe, daß reine Pektose in konz. NHg 

 allein löslich ist, dann würde in Anbetracht des Devaux sehen Nachweises, 

 daß die von Mangin verwendete alkoholische Salzsäure ohne Hilfe von 

 10^/0 NH3, also allein, mazeriert, die Devaux sehe Ansicht von der Pektose- 

 natur der Mittellamelle eine neue, M-ertvolle Stütze erhalten. — Weiterhin sei 

 noch der praktischen Ergebnisse gedacht, die Devaux mit seiner Methode, 

 Pektinverbindungen durch Metallsalze nachzuweisen, erzielt hat. Pektin- 

 verbindungen haben nämlich die Eigentümlichkeit, Metalle in hervorragender 

 Menge zu speichern. Um diese Metallanreicherungen, denen die Sinnfällig- 

 keit abgeht, sichtbar zu machen, werden chemische Reaktionen zu Hilfe 

 genommen. So färben sich mit Eisensulfat imprägnierte Wände mit Ferro- 

 cyankaliura und Salzsäure intensiv blau. Tompa hat diese Eigentümlich- 

 keit jüngst für sein Dreifarbenverfahren „Safflor- Berlinerblau -Alkanna" 

 verwertet. 



Weitere Angaben über Mazeration : Wille mazeriert Laminariagewebe 

 mit Säuren und Sodalösung, Kroemer Kork mit Eau de Javelle, Molisch 

 empfiehlt konzentriertes Ammoniak zur Mazeration von Milchröhren, lOpro- 

 zentiges Kaliumnitrat zu der von Aphanizomenon tlos aquae, nach Macallum 

 ist für die Cyanophyceen Pikrinsäure sehr vorteilhaft. 



IV. Abschnitt. 

 Der Plasmakörper und Zellsaft. 



1. Leukoplasten. 



Von allen bekannten Fixlerimgs- und Färbemethoden, die zur 

 Sichtbarmachung- der Leukoplasten empfohlen worden sind, hält 

 Zimmermann Altmanns Säurefuchsinmethode, die er auf Leukoplasten 

 übertragen hat, für die geeignetste. Als Versuchsobjekte dienten 

 Leukoplasten von Tradescautia. Die in ihnen sichtbaren Körnchen 

 deutete er als Eiweißkörner. Salter konnte den Wert der Zimmer- 

 mann sehen Methode durchaus bestätigen. Zur Fixierung empfiehlt er 

 SubUmatalkohol (nach Altmann), Pikrinalkohol und die Zimmermann sehe 




396 Riebt er: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 3. 



Kombination beider, auch Flemmings Gemisch, zur Färbung: Säure- 

 fuchsin oder Heidenhains Eisenhämatoxylin, zur gleichzeitigen Färbung 

 derselben und der Stärkekörner : »Säurefuchsiu und Gentiana- oder 

 Methylviolett. Nach H. Fischer sind Nigrosin, Hessisch Purpur, Diamin- 

 Echtrot , Karmin in ammoniakalischer Litsung , Anilinblau , Kongorot 

 und (,'yauin zur Färbung stärkehaltiger Leukoplasten besonders ge- 

 eignet, da sich mit diesen Farbstoften Stärke selbst nicht färbt. 

 Außer Shaw s Arbeit : „Detection of blepharoplastes in Onoclea and 

 Marsilia", verdienen die Prowazeks und Beneckes Erwähnung, die 

 sich mit Leukoplasten kryptogamer Gewächse beschäftigen. Nach 

 Prowazek fehlen solche der Synedra hyalina, auch Benecke beob- 

 achtete bei der Diatome bloß Inhaltskörper, die mit Jod und Osmium- 

 säure stets farblos bleiben, mit Sublimateisessig-Hämalaim-Methylviolett 

 aber deutlich unterschieden werden können. Vür echte Leukoplasten 

 war von Prowazek eiuprozentige Chromessigsäure und Geutiaua- 

 violett empfohlen worden. 



Nach Molisch können Leukoplasten durch Wasserzutritt sehr 

 leicht sichtbar werden, ihre äußerste Membran ist färbbar und diffe- 

 renzierbar mittels Säurefuchsin und Anilinblau. Kohl fand grana- 

 führenden Leukoplasten in der Epidermis von Agave americana und 

 dem Steugelparenchym von Equisetum arvense, die mit alkoholischer 

 Kalilauge Phytosterinsphärite geben, es scheinen Fettbildner zu sein. 



2. Elaioplasteu. 



Die von Wakker beschriebenen Ölbildner oder Elaioplasten bestehen 

 aus einer Grundmasse, einer Proteinsubstanz, und einer Einlagerung von 

 einem fettartigen Kcirper. Zijimermann, der in eingehender Weise Wakker s 

 Befunde übei-prüft hat. konnte diese Auffassung von der Natur der Ölbildner 

 im vollen Umfange bestätigen und zu dem relativ beschränkten Vorkommen 

 der neuen Gebilde, wie es in der Arbeit Wakker s zum Ausdruck kommt, 

 noch einige weitere Fundorte namhaft machen. 



Zu den Elaioplasten werden oder wurden auch gCAvisse strittige 

 Objekte gezählt, die heute entweder noch hierher gerechnet werden 

 oder anderswo untergebracht worden sind, z. 1>. die Ölkörper der Leber- 

 moose (s. 0. und Z. M. p. 205, 200). 



Bei den Algen hat G(jlenkin die von Berthuld als Liehtschutzorgane, 

 von Hansen als Glykogen beschriebenen Inhaltskörper der Florideen für 

 echte Elaioplasten erklärt. Für diese Anschauung spreche, abgesehen von 

 ihren sonstigen Reaktionen, auch deren Färbbarkeit mit Toluidin. 



Wie bekannt, hat Crato bei Dictyota dicliotoma eigenartige Körper, 

 die „rhysoden" beschrieben, welche zu Verwechslungen Anlaß geben 

 könnten. Zur Unterscheidung emptiehlt Golenkin schwache Lösungen 



I 




XXIT, 8. Richter: Die Fortschritte der hotanisehen Mikrochemie. 397 



von Methylgrün in Seewasser, in dem die kleinen Kugeln (Cratos Physoden) 

 nach 24 Stunden prachtvoll grün werden, während die großen (Golenkin s 

 Elaioplasten) fai'blos bleiben. 



Elaioplastenartige Körper fand Golexrix auch bei Sebdenia Monar- 

 diana, die sieh mikrochemisch dadurch wesentlich von den Ölbildnern unter, 

 scheiden, daß sie beim Glühen ein Skelett zurücklassen. Doch konnte der 

 anorganische Partner nicht ermittelt werden. Als Elaioi)lasten werden 

 ferner aufgefaßt die von Lundström bescliriebenen ölbildnerähnlichen Ge- 

 bilde in den Epidermiszellen von Potamogetonarten. Lidforss hat sich 

 neuerlich wieder mit ihnen beschäftigt und beschreibt als Inhalt derselben 

 einen aromatischen Aldehyd und Calciumoxalat. 



3. Proteosoiuen. 



LoEW und BoKORNY nennen Proteosomen diejenigen Ausscheidungen, 

 die in verschiedenen Pflanzenzellen durch Coftein oder Antipyrin hervor- 

 gerufen werden. In ihrer Arbeit „Zur Chemie der Proteosomen" besprechen 

 sie die Mittel zur Herstellung von Dauerpräparaten und das Verhalten dieser 

 Körper bei den gewöhnlichen Eiweißreaktionen, gegen verdünnte Säuren, 

 kochendes Wasser, 10— 20prozentigen Alkohol und Pepsin-Salzsäure und 

 kommen zu dem Schlüsse, daß die Proteosomen aus Eiweiß, aber aus einem 

 besonderen, bestehen, welches sich vom gewöhnlichen dadurch unterscheidet, 

 daß es durch O'lprozentiges Ammoniak in feste Kugeln umgewandelt wird, 

 die durch Druck in Stücke zerbrechen, und durch lOprozentige Salzsäure 

 erst nach längerer Digestion bei 80'' in Lösung gebracht werden können. 

 Beachtenswert ist, daß die in abgestorbenen Zellen enthaltenen Proteosomen 

 alle Eigenschaften des gewöhnlichen Eiweißes l)esitzen. Gerbstoft'kügelchen 

 seien diese Fällungsgebilde nicht. Dazu vgl. die Kritik Klemm s im Abschnitt 

 „Das Löw-BoKORxvsche Reagens auf aktives Albumin" des Kapitels „Ei- 

 weiß". — Nach jener Kritik erscheint es doch am besten, bei den alten 

 Lebensreaktionen zu bleiben und Plasmolyse und Färbung heranzuziehen. 



Aggregation. — Schon Huoo De Vries hat darauf aufmerksam 

 gemacht, daß man unrichtigerweise zwei getrennte Prozesse, die Zerklüftung 

 der Vakuole und die auftretenden Fällungen, mit Darwin als Aggregation- 

 Körnchenbildung zusammenfasse, der Referent von Kleinims Arbeit „Beitrag 

 zur Erforschung der Aggregationsvorgänge in lebenden Pflanzenzellen", 

 A. Zimmermanx', scheint nun die passenden Bezeichnungen gefunden zu haben. 

 Die von Klemm angedeutete und von Zimmermann geprägte scharf unter- 

 scheidende Benennung lautet wie folgt: Granulation = die durch Ammon- 

 salze und ähnliche Stoffe bewirkte Fällung, — Aggregation = physiologische 

 Aggregation im Sinne Hugo de Vuies' ist Vakuolenzerklüftung und Proto- 

 plastenvergrößerung. 



Zur Erzeugung der Granulation sind Ammonsalze und Coffein be- 

 sonders geeignet. Die entstandenen Körnchen enthalten zumeist Gerbstoff". 

 Ihre Entstehung hat übrigens mit dem Leben, wie Bokorny annimmt, gar 

 nichts zu tun (s. 0.). 




398 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 3. 



Anhang. 

 1. Die quantitative Analyse in der 31ikroclieniie. 



Sowie in der Chemie überhaupt der quantitativen Analyse die quali- 

 tative vorausgegangen ist und erst nach deren Ausbau zur quantitativen 

 übergegangen werden konnte, so auch bei der Mikrochemie. Erst mußte 

 H. Behrens in seinem bekannten Werke die Methode der qualitativen 

 Analyse niedergelegt haben, ehe an eine quantitative zu denken war. Und 

 wurde nun der Schritt zur quantitaven Analyse getan, so ist er natürlich 

 eben als der erste derartige Schritt zu betrachten, als erster tastender Ver- 

 such, dem andere vielleicht sicherere folgen werden. 



Vor einigen Jahren habe ich mich mit der Überprüfung der Methoden 

 des Magnesium-Nachweises beschäftigt, und zwar mit besonderer Bezugnahme 

 auf die Anwendbarkeit derselben für den Magnesium-Nachweis in der 

 Pflanze. Die Bestimmung der Empfindlichkeitsgrenzen, die eine ganze Skala 

 empfindlicher und weniger empfindlicher Reaktionen ergab, drängte mir 

 damals den Gedanken auf, nach dem „Gabelverfahren" (Ermittelung des 

 Reagens, mit dem eben noch eine, und jenes, mit dem keine Reaktion melir 

 eintritt), die Menge des in mineralischen Lösungen, Preß-, ]Milch- und Schleim- 

 säften u. s. f. enthaltenen Magnesiums mikrochemisch quantitativ zu bestim- 

 men. Bei diesen Untersuchungen hat sich auch herausgestellt, daß entgegen 

 der Anschauung von Behrens, wonach die Lösungen der Reagentien so kon- 

 zentriert wie möglich verwendet werden sollen, gerade verdünnte Lösungen 

 dei'selben die besten Resultate geben, denn es ist nicht so sehr die Kon- 

 zentration maßgebend für normale schöne und reicliliche Entwicklung von 

 Fällungen, als daß man die reagierenden Substanzen im Verhältnisse ihrer 

 Verbindungsgewichte verwendet. 



GössL konnte In seiner Arbeit über das Mangan in seinen Beziehungen 

 zur Pflanze für die Bildung des Manganammoniumpliosphates dieses Ergebnis 

 bestätigen. 



Als quantitative Analyse im weiteren Sinne kann man auch jene 

 Methoden ansehen, die aus den Größenverhältnissen Aon mikroskopischen 

 Objekten bestimmter Gestalt mit Hilfe der geometrisclien Formeln eine Vor- 

 stellung von dem Volumen geben, das mit Berücksichtigung des spezi- 

 fischen Gewichtes des untersuchten Stoffes auch dessen Quantität wenigstens 

 annäherungsweise bestimmen läßt. Auf diese Weise bestimmte Mesnard 

 die Menge fetten Öls bei der Keimung fetthaltiger Samen. Hierher gehört 

 auch Kohl s volumetrische Bläschenzälilmethode. Eine andere sehr inter- 

 essante quantitative volumetrische Analyse mikroskopischer Natur gab 

 Gerassimoff an. Er sieht den Kern als Rotationsellipsoid an , bestimmt 

 dessen große und kleine Achse und berechnet nachher nach bekannter 



4 

 Formel (V = ~ n a^h) das Volumen. Auf diese Weise konnte er zeigen, daß 

 o 



das Volumen und damit die Masse eines Kernes aus einer Zygotenfadenzelle 



von Spirogyra das des gewöhnlichen Kernes um ein Bedeutendes übertrift't 

 (V :v== 1240,9,1 ^3: 745,5,5 /.s^ 




XXII, 3. Richter: Die Fortschritte der botanischen Milirocheraie. 399 



2. Vitalfärbung des Protoplasmas. 



Seit der Entdeckung Pfeffers von der Aufnahme von Farbstoffen 

 seitens des lebenden Plasmas sind eine ganze Reihe interessanter Beobach- 

 tungen veröffentlicht worden, die die PFEFFERschen vollauf bestätigen und 

 den Beweis erbringen, daß diese Fähigkeit des lebenden Plasmas, aus 

 mehr minder ^•erdiinnten Lösungen Farbstoffe aufzunehmen, nicht ein 

 Charakteristikon einiger weniger Pflanzen, sondern eine allgemeine Eigen- 

 tümlichkeit ist. 



Man kann dabei Fälle unterscheiden, wo speziell die (lerbstoffzellen 

 oder überhaupt vorhandene Gerbstoffe gierig den Farbstoff speichern, und 

 solche, wo das ganze Plasma oder Partien desselben, ohne daß man von 

 Gerbstoffimbibition reden könnte, den gebotenen Farbstoff' aufnehmen. 



Die Fälle der ersten Kategorie habe ich bereits hn Kapitel Gerbstoff" 

 erledigt. Hierher dürften auch die Angaben von Nestler über die Lebend- 

 färbung der Blasenzellen von Antithamnion Plumula mit arsenfreiera Ani- 

 linblau zu rechnen sein, wenn man auch bisher den Träger dieser Idioblasten- 

 färbung nicht genau ermitteln konnte. Interessant ist dabei, daß man bei 

 sehr verdünntem Farbstoffe die Speicherung nicht direkt sieht, wohl aber 

 nach Zusatz von Säuren oder Chloralhydrat, ebenso macht erst Eisenchlorid 

 das intravital gespeicherte Tannin sichtbar. Die Fälle der zweiten Kate- 

 gorie mögen an der Hand des Pflanzensystems angeführt sein. 



Bakterien und Pilze. Matruchot kultivierte neben chromogenen 

 auf demselben Substrate farblose Bakterien. Dabei zeigte sich, daß das 

 Plasma der farblosen das Chromogen der farbigen aufnahm. 



Weitere Arbeiten haben gezeigt, daß sich gewisse Schimmelpilze, z. B. 

 Fusarium und Penicillium sp., ganz analog verhielten wie die oben erwähnten 

 Bakterien. In der Folge baute Matruchot seine Methode noch weiter aus 

 und hat sie wie Rosenberg auch in den Dienst der Mikrotechnik gestellt. 

 „Violacein", der Farbstoff' des Bacterium violaceum und der von Fusarium 

 polyraorphum können für Vitalfärbungen verwendet werden. Den tingier- 

 baren Teil des Plasmas nennt Matruchot Enchylema, den nicht färbbaren 

 Hyaloplasma. In seiner Arbeit „Sur le protoplasme des Schizophytes" em- 

 pfiehlt Massart Methylenblau zur Lebendfärbung. Die brauchbare Kon- 

 zentration muß nach ihm für jeden Organismus ermittelt werden. 



Ein vorzügliches Versuchsobjekt für Vitalfärbungen ist die Bierhefe. 

 Küster empfiehlt zur Untersuchung der in den Vakuolen der Bierhefe 

 herumschwimmenden Körnchen Neutralrot, mit dem sie sich im lebenden 

 Zustande intensiv färben. Meine Angabe über die Vortrefflichkeit der 

 Hefe als Versuchsobjekt für Vitalfärbung basiert jedoch vornehmlich auf 

 Rosesstiehls Arbeit, der bewies, daß die Hefe Fuchsin aus wässrigen 

 Lösungen bis zu 8 Prozent, Malachitgrün bis 5 bis 6 Prozent des eigenen 

 Gewichtes aufzunehmen imstande ist, ohne abzusterben. Ebenso werden von 

 ihr Rosanilin, Safranin und Thioninfarben gierig gespeichert. Auch Tannin 

 kann reichlich aufgenommen werden. 



Der Frage, ob die Farbstoft'e als solche, oder als Leukoprodukte in 

 das Plasma eintreten, und dort erst reoxydiert werden, haben sich unter 

 anderen Fragen Plato und Guth in ihrer interessanten Arbeit „Über den 




400 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXII, 3. 



Nachweis feinerer Wachstumsvorgänge in Trichophj' ten und anderen Faden- 

 pilzen mittels Neutralrot" gewidmet und für Neutralrot im zweiten Sinne 

 beantwortet. Bekanntlich kultivierten die beiden Forscher Penicillium 

 brevicaule auf arsenhaltigen N;ihrl)oden. Dabei verwendeten sie Neutral- 

 rot zur Vitalfärbung des Pilzes und einer aus einer Pustel gezüchteten 

 Trichophyton-Art. Besonders stark färbten sich die Granula, die im ab- 

 getöteten Zustande der Pilze Neutralrot nicht aufzunehmen vermögen. 



Die Granulafärbung gelang auch mit dem NeissI^.r sehen Diphtherie- 

 bazillenfärbe verfahren. 



Algen. Wie schon angeben, hat Nestler Vitalfärbung bei Anti- 

 thamnion erzielt. Provazek führte sie bei Synedra hyalina, einer apo- 

 chlorotischen Bazillarie, mit Neutralrot durch. Die FärVtung ültertrug sich 

 vom Zellsaft auf das Plasma. 



Höhere Pflanzen. Nemec gelang es durch Vitalfärbung mit 

 Methylenblau und durch geeignete Fixierungs- und Färbemethoden in den 

 Wurzelspitzen von Allium Cepa etc., vgl. dazu Habem-andt und Koerxicke. 

 deutlich differenzierte Stränge nachzuweisen, die er für reizleitend hielt. 



Eine Art Monographie der Vitalfärbung hat Overton in seiner usa- 

 führlichen Arbeit „Studien über die Aufnahme der Anilinfarben durch die 

 lebende Zelle" geliefert, deren Hauptergebnis lautet: Alle Farbstoffe, die 

 in fetten Ölen oder ähnlichen Lösungsmitteln leicht löslich sind , werden 

 auch von der lebenden Zelle rasch, dagegen die in Ölen schwer oder nicht 

 löslichen nicht aufgenommen, vgl. dazu diese Zeitschr. Bd. XVH, p. .335. 



BibHographie. 



Die Abkürzungen der Zeitschriftennamen sind die üblichen und im 

 allgemeinen ohne weiteres verständlieh. Zu beachten : Ann. Belg. (Ann. de 

 la soc. belg. de microsc), Ann. Roma (Ann. del R. Ist. bot. di Roma), 

 Ann. Soc. Roy. (Ann. de la Soc. roy. des Sc. med. et nat.), Bibl. V. Stockh. 

 (Biol. Versuchsanst. Stockholm), Bull. H. B. (Bull, de l'herb. Boissier), K. 

 A. A. (Kon. Akad. Wetensch. Amsterdam), Mitt. f. W. u. A. (Mitteil. kgl. 

 Prüfungsanstalt f. Wasserversorgung u. Abwasserbeseitigung Berlin), — 

 Arbeiten, die bereits in Z. M. genannt worden sind, werden hier nicht mehr 

 angeführt. Wegen der in dieser Zeitschrift erschienenen Referate vgl. bes. 

 Register H (Bd. XI— XX), 1904. 



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XXII, 3. Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. ^01 



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Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 3. 26 




402 Richter: Die r'ortscliritte der botanischen Mikrochemie. XXIT, ij. 



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26='= 




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b. Pfl. (Jena 1901); Üb. vorübergeh. Rotfärb. d. Chlorophyllk. etc. (B. d. d. 

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I 




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 Bd. VI, 1900, p. 141). 




408 Richter: Die Fortschritte der botanisciien Mikrochemie. XXII, 3. 



Raciborski, M., Krit. Ref. üb. Lilienfeld u. A. Monti etc. (Bot. Ztg. 

 1893, p. 245); Inhaltsk. d. Myrioph. trieb. (B. d. d. b. G. Bd. XI, 1893, 

 p. 348); Inhaltsk. d. Leptoms (ibid. Bd. XVI, 1898, p. 52); Weitere Mitteil, 

 üb. d, Leptomin (ibid. p. 119); Deiuonstr. v. m. Lept. (Fl. LXXXV. 1898, 

 p. 36). — Radlkofer, L., Tonerdek. i. PÜanzenz. (B. d. d. b. G. Bd. XXII, 

 1904, p. 216). — Räthay, E., Auftr. v. Gummi in d. Rebe etc. (Jahresb. 

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 Vork. V. Sphäriten b. Agave am. (Ann. di Roma vol. V, p. 38). — Re- 

 chinger, K., Trichom. d. Gesneriac (Ö. b. Z Bd. V, p. 89 ff.). — Rein- 

 bold, B., Molisch-Udränszkysche «-Naphthol-Schwefels. Reakt. (A. ges. Fh. 

 Bd. cm, 1904, p.581). — Reinke, J., u. Braunmüller, E., Einfl. d. Licht, 

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 ((>. b. Z. Bd. LV, 1900, p. 5); Mikroch. Nachw. d. Kobalts a. Ammonium- 

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 Beitr. z. K. d. Magnesium -Ammonium -Phosphats Mg (NHj) PO^ 6 OH., (ibid. 

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 Bern. z. A. Meyers „Unters, üb. d. Stärkek." (B. d. d. b. G. Bd. XV, 1897, 

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 Membr. d. pflzl. Gef. (W. Krakowie 1899). — R o t h e r t , W., u. Z a 1 en s k i , W., 

 Bes. Kateg. v. Kristallbeh. (B. Zbl. Bd. LXXX, 1899, p. 1). — Roulet, Ch., 

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 Per 3 vol. XXIX, 1893, p. 100). — Rumpf, G., Rhizod., Ilypod. u. Endo- 

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 d. verh. Zeil. (Pr. Jb. Bd. XXIX, 1896, p. 237); Hemicellulosen etc. (B. d. d. b. G. 

 Bd. XXIII, 1905, p. M). — Schimper, A. F. W., Anleit. z. mikr. Unters, 

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 Eigenart. Cuticularbild. (Beitr. z. Morph, u. Phys. v. Pflanzenz. 1893, H. 3, 

 p. 318). — Schlagdenliauffcn, Fr., vgl. lleckcl, E. — Seh lock ow, A., 




XXII, 3. Rl eilt er: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 409 



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 Haarins. v. Batrachosp. (Bot. Ztg. Bd. LVH, 1899, p. 125). — Schmied, H., 

 Karotin i. d. Würz. v. Dracaena etc. (Ö. b. Z. Bd. LIII, 1903, p. 313). — 

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 p. 113). — Schor stein, J. , Z. Biochemie d. Holzpilze (C. f. B. u. P. 

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 Bd. XXIX, 1896, p. 12). — Schutt, F., Centrif. Dickenw. d. Membr. etc. 

 (Pr. Jb. Bd. XXXIII, 1899, p. 594); Centrif. u. simult. Membranverdick, (ibid. 

 Bd. XXXV, 1900, p. 470)-, Porenfrage d. Diät. (B. d. d. b. G. Bd. XVIII, 

 1900, p. 202). — Schwabach, E. , Harzabscheid. in Conifnadeln (B. d. 

 d. b. G. Bd. XVII, 1899, p. 291). — Senn, G., Ein. kolonieb. einz. Algen 

 (Bot.. Ztg. Bd. LXVII, 1899, p. 39). — Shaw, N., Fertilis. of Onoclea (Ann. 

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 (Chem. Phys. u. Path. Bd. V, 1904, p. 384); Cytol. Stud. üb. d. endotr. 

 Mykorrh. (Pr. Jb. Bd. XXXVII, 1902, p. 643). — Siim-Jensen, J., Bot. 

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 Auftret. u. phys. Bedeut. d. Myrosins (Pr. Jb. Bd. XXV, 1893, p. 39). — 

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410 Richter: Die Fortschritte der botanischen Mikrochemie. XXll, 3. 



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 membr d. Zygosp. (Ann. rayc. T. II, 1904, p. 483). 



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 rungsflüssigk. i. d. bot. Mikrot. (Diese Zeitschr. Bd. XVI, 1899, p. 303). — 

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 Schizophyllura lob. (B. d. d. b. G. 1896, p. 158; Ref. C. f. B. u. P. Bd. II, 

 Abt. 2, 1896, p. 528). — Wesels ky, F., Nachw. d. Phlorogl. u. d. sal- 

 petrigs. S. (B. d. d. eh. G. Bd. IX, 1876, No. 3). — Wevre, A. de, Rech, 

 techn. microch. d. albumin. (Bull, de la Soc. Beige de Microsc. T. XX, 1894, 

 p. 91); Local. d. l'Atropiu; Alka!, d. narcisses (ibid. 1887). — Weevers, 

 Th., Phys. Bedeut. einig. Glykoside (Pr. Jb. Bd. XXXIX, 1903, p. 229). 



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 techn. Mikr. etc. (Wien 1867); Mikrosk. Nachw. d. Kohle etc. (Sb. Wien 

 Bd. Gl, Abt. 1, 1892, p. 379). — Wildemann, E. de, Alcal. d. qu. orch. 

 (Bull. Soc. Beige Micr. vol. XVIII, 1892, p. 101). — Wille, N., Phys. Anat. 

 d. Lamin. (Christiania 1897); Gasvak. b. e. Bakt. (Biol. Zbl. 1902, p. 257). 



— Winter st ein, E., Pilzzellulose (B. d. d. b. G. Bd. XI, 1893, p. 520). — 

 Wisselingh, C. van, Lamelle suber. etc. (Arch. Neerland. 2. Sect. 1892, 

 No. 1); Cuticularis. et la cutine (ibid. t. XXVIII, 1895, p. 373): Band. d. 

 Ombellif. (ibid. XXIX, 1895, p. 199); Mikroch. Unters, üb. d. Zellw. d. 

 Fungi (Pr. Jb. Bd. XXXI, 1898, p. 619); Nucleolus v. Spirog. etc. (Bot. Ztg. 

 Bd. LVI, 1898, p. 196); Kerngerüst (ibid. Bd. LVII, 1899, p. 155); Kern- 

 teilung b. Spirog. (Flora Bd. LXXXVII, 1900, p. 355) ; Unters, üb. Spirog. ■ 

 4. Beitr. (Bot. Ztg. Bd. LX, 1902, p. 115) ; Abnorm. Kernteil., 5. Beitr. (ibid. 

 Bd. LXI, 1903, p. 201).— Wittlin, J., Bild. d. Kalkoxalttaschen (B. Zbl. 

 Bd. LXV, 1896, p. 33). — Wurster, Eiweiß- u. Tyrosinreakt. (Zbl. f. Phys. 

 1887, No. 9). 



Yendo, K. , Corall. verae japon. (J. Coli. Tokyo vol. XVI, 1902); 

 Genicula of Corallinae (ibid. vol. XIX). 



Zacharias, E., Mikroch. Untersuchungsmeth. (B. d. d. b. G. Bd.. XIV. 

 1896, p. 270) Nachw. u. Vork. v. Nuklein (ibid. Bd. XVI, 1898, p. 185); 




XXII, 8. Ui eilt er: Dio Fortschritte der botanischen Mikrochemie. 4H 



Cyanoph\ ceen (Abh. ;i. d. Geb. d. Natiirw. Hamburg Bd. XVI , 11)00, 

 No. 2); Beitr. z. K. d. Sexualz. (B. d. d. b. G. Bd. XIX, 1901, p. 377); 

 Achrom. Bestandt. d Zelllv. (ibid. Bd. XX, 1902, p. 298). — Zaiewski, A., 

 Schönnetts llesinocyst. (B. Zbl. Bd. LXX, 1897, p. 50). — Z atz sehe, F., 

 Unters, d. verh. Membr. (Z. f. a. M. Bd. II, 189G, p. 225). — Zimmer- 

 mann, A.. Morph, u. Pliys. d. pfianzl. Zellk. (Jena 1896)-, Mikroch. Keakt. 

 V. Kork u. Cut. (Diese "Zeitschr. Bd. IX, 1892, p. 58); Tinkt. Verh. d. 

 Zellkernkristalloide (ibid. Bd. X, 1893, p. 211); Chem. Zusammensetz. d. 

 Zellk. I. (ibid. Bd. XII, 1895, p. 458); Beitr. z. Morph, u. Phys. d. 

 Pflanzenz. Stuttff. 1890—1893. 



'■&• 



[Eingegangen am 4. Juni 1905.] 




412 Referate. XXII, 3. 



Referate. 



1. Lehr- und Handbücher. 



3IÖller, J. , Mikroskopie der Nahrungs- und Geiiiiß- 

 m i 1 1 e 1 aus de m P f 1 a ii z e ii r e i c li. Berlin (Jul. Springer) 

 1905; XVI u. 599 pp., 599 Figg. 2., gänzl. nmgearb. u. 

 unter Mitwirkung A. L. Wintons vermehrte Aufl. 18 M. 



Die zweite Auflage des bekannten, anerkannten Handbuchs weist 

 gegenüber der ersten zahlreiche wichtige Verbesserungen auf. Viele 

 Kapitel haben textlich starke Veränderungen und Ergänzungen er- 

 fahren, die Disposition ist vielfach (z. B. in den Kapiteln Stärke, 

 Mehl und Mahlprodukte , Früchte und Samen) vorteilhaft geändert 

 worden. Besondere Anerkennung verdient der reiche Schatz an 

 Illustrationen : die Autophotogramme sind sehr wohlgelungen und der 

 zeichnerische aus Wintons Originalabhandlungen her bekannte Stil 

 seiner Textliguren bewährt sich auch hier. 



Die Einleitung handelt von Präparation, Reagentien, von Messen 

 und Zeichnen. Es folgen Besprechungen der Blätter und Kräuter, 

 Blüten, Stärke, Mehl und Mahlprodukte, Früchte und Samen, Hölzer, 

 Rinden, unterirdische Pflanzenteile, Pilze, Algen und Flechten. 



Küster {Halle a. S.). 



Senft, E., Mikroskopische Untersuchung des Wassers 

 mit bezug auf die in Abwässern und Schmutz- 

 wässern vorkommenden Mikroorganismen und 

 V e r u n r e i n i g u n g c n. 1 80 Figg. im Text u. 1 lithogr. 

 Tfln., 19G pp. Wien (Jos. Safar) 1905. 9-GO M. 




XXII, 3. Refenite. 413 



Der allgemeine Teil gibt eine Schildernng von Mikroskop- und 

 Nebenapparaten und einige Winke für Sammeln, Aufbewahren und 

 Untersuchung der Wasserproben und behandelt die saproben Orga- 

 nismen und die Selbstreinigung des Wassers. Der spezielle Teil 

 behandelt die im verunreinigten Wasser auftretenden anorganischen 

 Bestandteile und die in ihm enthaltenen Bakterien , Pilze , Algen, 

 Protozoen, Würmer und Arthropoden. Die zahlreichen Textabbildungen 

 und besonders die sauber ausgeführten farbigen Tafeln werden das 

 Buch zur Bestimmung der in Frage kommenden Lebewesen geeignet 

 machen. Küster {Halle a. S.). 



Merck, E., Prüfung der chemischen Ueagentien auf 

 Reinheit. Darmstadt 1905; 281 pp. 

 Das treffliche, sehr übersichtlich angelegte Nachschlagebuch sei 

 auch an dieser Stelle empfohlen , da unter den in ihm behandelten 

 Stoffen zahlreiche für mikroskopische Färbungen und mikrochemische 

 Reaktionen wichtige sich befinden. Küster {Halle a. S.). 



2. Mikrophotographie und Projektion. 



König, E., Über Bade platten (Photogr. Korrespond. Bd. XLII, 

 1905, p. .399 — 406). 

 Da bekanntlich die durch Baden farbenempfindlich gemachten 

 Platten den in der Emulsion gefärbten an Empfindlichkeit überlegen 

 sind, scheint es in gewissen Fällen öfters geboten, sich orthochro- 

 matische Platten durch Baden selbst herzustellen. Man pflegt den 

 Sensibilisierungsbädern Ammoniak zuzusetzen , was auch bei einigen 

 Farbstoffen durchaus erforderlich ist, um eine nennenswerte Sensibi- 

 lisierung zu erhalten. In vielen Fällen Avirkt aber Ammoniakzusatz 

 geradezu schädlich. Den schlechten Ruf, zur Sensibilisierung mit 

 Isocyaninen nicht geeignet zu sein, weil Neigung zur Schleierbildung 

 eintritt , verdanken gewisse Plattensorten auch nur dem Ammoniak- 

 zusatz. Verf. konnte durch zahlreiche Versuche nachweisen , daß 

 alle jene Plattensorten monatelang tadellos klar arbeitend bleiben, 

 wenn in neutraler Lösung sensibilisiert wird. Die Empfindlichkeit 

 der mit Orthochrom oder Pinach rom in neutraler Lösung sensibili- 

 sierten Platten ist bei praktischen Dreifarbenauf'nalimcn in der 




414 Referate. XXIl. ?,. 



Kamera liintor Grünfilter gleicli , hinter Kotfilter etwa ^/-, der der 

 araraoniakalisch sensibilisierten. Verf. empfiehlt demnach bei Anwen- 

 dung von Pinachrom oder Orthochrom die Platten im Dunkeln 2 bis 

 3 Minuten lang in 200 cc Wasser -|- 3 bis 4 cc Farblösung 1 : 1000 

 zu baden , dann etwa 2 Minuten zu waschen und schließlich zu 

 trocknen. Ein besonders rasches Trocknen durch starken Luftzug 

 ist nicht erforderlich ; die Platten schieiern auch bei freiwilligem 

 Trocknen nicht. Ein weiterer Vorteil des ammoniakfreien Sensibili- 

 sierungsbades besteht darin, daß man zum Verdünnen der Farblösung 

 gewöhnliches Brunnenwasser nehmen kann. Die unzweifelhaft günstige 

 Wirkung des Waschens der gebadeten Platten besteht nach Ansicht 

 des Verf. lediglich darin, daß die anhängende Farblösung, die leicht 

 in Flecken und Streifen auf den Platten eintrocknen würde, entfernt 

 wird. Da durch bloßes Abspülen die anhängende Farblösung nicht 

 genügend entfernt werden kann, weil das etwas alkoholhaltige Farb- 

 bad nicht sofort gleichmäßig durch das Wasser verdrängt wird, muß 

 man deshalb so lange w^aschen, bis die sogenannten Fettstreifen ver- 

 schwunden sind. Verf. weist hierbei noch auf die vielleicht nicht 

 allgemein bekannte Tatsache hin , daß diese Fettstreifen nicht oder 

 doch nur in ganz geringem Maße auftreten , wenn man zum Lösen 

 der Farbstoffe nicht den gewöhnlichen Äthylalkohol, sondern Methyl- 

 alkohol verwendet. Besonders auffällig zeigt sich die Wirkung des 

 Ammoniaks bei den ScHLEussNER-Platten, die nach dem Sensibilisieren 

 im amnioniakalischen Pinachrombade meist schieiern, jedoch vorzüg- 

 liche Resultate geben und monatelang haltbar bleiben, wenn man sie 

 ohne Ammoniak sensibilisiert. Die neue Spezialrapidplatte ist be- 

 sonders gut geeignet. — Daß Cyanin gewöhnlich als ein Sensibili- 

 sator gilt, der außer andern Untugenden die Allgemeinempfindlichkeit 

 ganz außerordentlich herabsetzt, hat seinen Grund darin, daß ge- 

 wöhnlieh unreine Farbstoffe verwandt wurden. Die mit sorgfältig 

 gereinigtem Cyanin (Amylcyanin) mit oder ohne Zusatz von Ammo- 

 niak sensibilisierten Platten erwiesen sich nach Versuchen des Verf. 

 ohne Filter bei Tageslicht , sowohl im Sensitometer wie in der 

 Kamera nicht merklich unempfindlicher als die ungebadeten Platten. 



E. Schoebel {Neapel). 




XXII, 3. Referate. 41 5 



3. Präparationsmethoden im allgemeinen. 



Scholz , F. , Über Aceton-CeUoidin-Sclinelleinbettung- 

 (Deutsche med. Wochenschr. Jahrg. XXXI, 190.5, No. 11, 

 p. 419—420). 

 Die ersten erfolgreichen Versuche , die zur Celloidineinbettung 

 erforderliche Zeit abzukürzen, rühren, wie Verf. bemerkt, von E. Kauf- 

 mann her. Wenngleich die Methode dieses schon eine wesentliche 

 Verbesserung darstellte , so hat Verf. sie jetzt nochs erheblich ver- 

 vollkommnet. Er basierte bei seinen Versuchen auf der Arbeit von 

 Henke und Zeller^ über „Aceton-Paraffin-Schnelleinbettung"'. Das 

 Aceton ist ein Körper, der in hohem Grade die Eigenschaft besitzt, 

 Wasser anzuziehen und Eiweißkörper zu fällen , also zu fixieren. 

 Der Preis des Acetons ist allerdings etwas höher (1'25 Mk. per kg) 

 als der des Alkohols , doch besitzt es vor dem letzteren große Vor- 

 züge: 1) Ist die dadurch bewirkte Schrumpfung der Gewebsstücke 

 geringer , 2) läßt sich das Aceton leicht wieder verwenden , sobald 

 man nur in üblicher Weise mittels geglühten Kupfersulfates dafür 

 sorgt , das Wasser wieder daraus zu entfernen. Verf. ist zurzeit 

 imstande mit Hilfe des Acetons von jedem Objekte spätestens inner- 

 halb 24 Stunden schnittfähige Celloidinblöcke herzustellen. Methode: 

 Die kleinen Gewebsstückchen (nicht dicker als o mm) kommen direkt 

 in reines Aceton. ^ Hierbei ist es für den Erfolg gleichgültig, ob sie 

 frisch in dieses eingelegt werden, oder nachdem sie zuvor, z. B. in 

 Formol oder Alkohol gelegen haben. Im Aceton bleiben sie in der 

 Wärme (der Siedepunkt des Acetons liegt bei 56") eine halbe bis 

 eine Stunde liegen , ohne daß es unbedingt nötig wäre , dasselbe 

 während dieser Zeit zu erneuern. Nach Ablauf dieser Frist sind 

 die Stückchen genügend gehärtet. Meistens werden sie hierauf direkt 

 in dünnes Celloidin übertragen. Nur für Auskratzungsprodukte und 

 ähnliche Dinge empfiehlt es sich, zwischen Aceton und Celloidin einen 

 Aufenthalt in Äther -Alkohol von 15 Minuten einzuschieben. Unter- 

 läßt man dieses, so vermischt sich trotz sorgfältigen Abgießens leicht 

 das in den Kitzen und Maschen der kleinen Stückchen zurückgebliebene 

 Aceton mit dem Celloidin zu einer milchig aussehenden Flüssigkeit, 



') Zentralbl. f. allgem. Patliol. 11. pathol. Anat. Bd. XVI, 1905, H. 1. 




416 Referate. XXII, 3. 



welche die Härtung- verzi>gert. In der dünnen Celloi'dinlösung ver- 

 bleiben die Stückchen bei 37^ bis 40*^ etwa 4 bis 5 Stunden. Dann 

 setze man etwas dickes Celloidin zu und gieße die Präparate nach 

 weiteren 2 bis 3 Stunden in dickes Celloidin so aus , daß dieses 

 sie von allen Seiten eben bedeckt. Unter einer Glasglocke werden 

 die Präparate nun der trocknenden Wirkung von Chloroform aus- 

 gesetzt, das man in oftenen Schälchen verdampfen läßt. Gewöhnlich 

 schon nach 3 bis 4 Stunden kann man die festgewordene Oberfläche 

 des Celloidins vom Rande aus loslösen, um die austrocknende Wirkung 

 der Chloroformdämpfe auch den tieferen Schichten der Celloidin- 

 lösung zuzuführen. Dies ist nicht durchaus erforderlich ; meist hat 

 sich auch ohne dieses der Celloidinblock nach 12- bis 14stündigem 

 Aufenthalt unter der Glasglocke zur Knorpelhärte verdichtet. Jetzt 

 kommt der Block zur Nachhärtung für einige Stunden in verdünnten 

 Alkohol. Meist waren Schnitte von 8 bis 10 fi möglich, mindestens 

 solche von 16 fi. — Verf. hat diese Methode mit bestem Erfolge 

 auch bei fetthaltigen Organen versucht, die mit PYemming scher Lö- 

 sung fixiert waren. Während bei der bisherigen Äther- Alkohol- 

 behandlung das Fett gelöst wurde, kann man es nach Aceton-Celloidin- 

 behandlung ebenfalls nachweisen. Bedingung für das Gelingen der 

 Methode ist, daß man 1) tadelloses, wasserfreies Celloidin zur Ver- 

 fügung hat; man darf also zur Herstellung der Lösung nur voll- 

 kommen wasserfreien Alkohol verwenden , sonst wird das Celloidin 

 in der angegebenen Zeit nicht hart, sondern bleibt gummiartig, 

 2) muß das einzubettende Objekt absolut wasserfrei sein. 



Schiefferdecker {Bonn). 



Sternberg, K. , P^ine Schnittfärbung nach der PtOMA- 

 No wsK I s c h e n Methode (Zentralbl. f. allgem. Pathol. u. 

 pathol. Anat. Bd. XVI, 1905, No. 8, p. 293—294). 

 Seit die RoinANOWSKische Färbung durch Vereinfachung der 

 Methode leicht und sicher ausführbar geworden ist, findet sie immer 

 ausgedehntere Verwendung, da sie für das Studium der Protozoen 

 und für die Blutuntersuclmng ganz ausgezeichnete Resultate ergibt. 

 Man hat daher auch schon oft versucht, Schnittpräparate nach dieser 

 Methode zu färben, doch ist dies bisher nicht in genügender Weise 

 gelungen. Nach den Versuchen des Verf. scheint nun für diesen 

 Zweck die „GiEMSASche Lösung für Romanowski sehe Färbung recht 

 empfehlenswert zu sein. Bei Färbung von Ausstrichpräparaten er- 

 gibt sie ganz ausgezeichnete Resultate und stellt wohl die einfachste 




XXII, 3. Referate. 417 



uml brauchbarste unter allen Modifikationen der Romakowski sehen 

 Methode dar. Verf. hat diese Lösung in folgender Weise zur Schnitt- 

 färbung verwendet : Fixierung der Organstückchen am besten in 

 Alkohol, weniger geeignet ist Sublimat-, Pikrin- oder Forraolfixierung. 

 Einbettung in Paraffin und Anfertigung dünner Schnitte von 5 bis 8 // 

 Dicke. Färbung in der Giemsa sehen Lösung, die unmittelbar vor 

 dem Gebrauche ungefähr der Vorschrift Giemsa s entsprechend ver- 

 dünnt wird (etwa 0*4 bis 0'.5 cc der Farblösung auf 20 cc ge- 

 kochten destillierten Wassers ; die Mischung wird gut durchgeschüttelt), 

 20 bis 24 Stunden, abspülen in Wasser, kurze Differenzierung in 

 0"5prozentiger Essigsäure, wobei bläuliche Wolken abgehen und der 

 Schnitt rötlich wird, abwaschen in Wasser und abtrocknen, kurze 

 Differenzierung und Entwässerung in absolutem Alkohol, wobei die 

 Präparate wieder einen bläulichen Farbenton annehmen, abtrocknen, 

 Xylol, Balsam. Die Resultate waren zufriedenstellend. Sehr schön 

 fielen Schnittfärbungen aus von den Organen solcher Tiere, die mit 

 Trypanosomen infiziert worden waren. Auch Malariaplasmodien in 

 Gehirnschnitten wurden sehr deutlich. Außerdem wurde eine schöne 

 Färbung der verschiedenen Gewebselemente erzielt: Zellkerne (nach 

 Alkoholkonservierung) ebenso wie die Leukocytenkerne in Blut- 

 präparaten, die nach Giemsa gefärbt sind, in verschiedenen Nuancen 

 rot, meist satt dunkelrot. Einzelne Zellkerne (z. B, Leberzellen) 

 zeigen eine zierliche Struktur infolge distinkter Färbung der Kern- 

 körperchen. Besonders macht Verf. auf die I-'ärbung der Ganglien- 

 zellen aufmerksam , die ähnliche Bilder darbieten , wie in Nissl- 

 präparaten. Was " die Leukocytengranulation anlangt , so sind die 

 eosinophilen und basophilen Granula sehr gut darstellbar, eine Fär- 

 bung der neutrophilen Granula gelang bisher noch nicht recht. Bis- 

 weilen glaubte Verf. in den Leukocyten einzelne Granula zu sehen, 

 die den Wolff-Miciiaelis scheu Azurgranula entsprechen könnten. 



Sckiefferd'ecker {Bonn) . 



Courniout, J., et Andre, Ch., T e c h n i q u e h i s t o 1 o g i q u e p e r - 



mettant de deceler sur les coupes les sub- 



s t a n c e s du g r o u p e de 1 a Purine, n o t a m m e n t 



Tacide uriciue (C. R. Soc. Biol. Paris t. LVII , 1904, 



p. 1.31— 132j. 



Das Organ wird in absolutem Alkohol fixiert. Auf die Schnitte 



läßt man eine Silbernitratlösung einwirken. So erhält man mit zwei 



Gruppen von Substanzen Niederschläge: 1) Mit Kochsalz: Chlorsilber ; 



Ziitselir. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 3. 27 




418 Referate. XXII, 3. 



2) mit den Substanzen der Puringruppe, so namentlich mit der Harn- 

 säure : harnsaures Silber. Sowohl das Chlorsilber wie das harnsaure 

 Silber sind in Wasser unlöslich. Beliandelt man solche Schnitte mit 

 einem photographischen P^ntwickler, so werden die Silbersalze redu- 

 ziert und erscheinen im Schnitte, den man in gewöhnlicher Weise 

 färben kann, als schwarze Körner. Um das Kochsalz zu entfernen, 

 kann man verschiedene Prozesse anwenden: 1) Mau bringt die 

 Schnitte nach ihrer Behandlung mit dem Silbernitrate in ammonia- 

 kalisches Wasser oder in eine sehr stark verdünnte Lösung von 

 unterschwefligsaurem Natron. Das Chlorsilber löst sich hierbei 

 schneller als das harnsaure Silber, doch muß man sehr vorsichtig 

 operieren. 2) Man bringt die Schnitte vor der Behandlung mit dem 

 Silbernitrate in ammoniakalisches Wasser (einprozentig) : das Koch- 

 salz löst sich, die Harnsäure löst sich nicht. Infolge ihrer Erfah- 

 rungen raten die VertF. zu folgender Methode : Man fixiert das Organ 

 in absolutem Alkohol oder noch besser mit der Mischung von Carnoy- 

 Sauer. Paraffineinschluß. Die Schnitte kommen, nachdem sie vom 

 Parafftn befreit sind , für eine halbe Stunde in eine einprozentige 

 wässerige Ammoniaklösung, dann in eine einprozentige Silbernitrat- 

 lösung. Sehr sorgfältiges Auswaschen. Behandlung mit einem photo- 

 graphischen Entwickler. Erneutes Auswaschen. Doppelfärbung 

 (Hämatein-Eosin oder Bismarckbraun-Eosin). Die Harnsäure erscheint 

 dann als schwarze Körnchen. Die Verff. heben den wesentlichen 

 Unterschied zwischen ihrer Methode und der von Anten hervor. 

 Dieser läßt die Reagentien auf den lebenden Hund einwirken , um 

 sie in die Zirkulation einzuführen, wodurch die Harnsäureausscheidung 

 erheblich verändert wird und wodurch fremde Substanzen in die Ge- 

 webe eingeführt werden. Bei der Methode der Verff. zeigen die 

 schwarzen Körnchen die Lage und die genaue Menge der Harnsäure 

 an, wie sie im Momente des Todes vorhanden waren. 



Schiefferdecker {Bonn). 



Regaild, Cl. , et Diibreuil, 0., Sur un nouveau procede 

 d ' a r g e n t a t i n des e p i t h e 1 i u m s au m o y e n du 

 protargol (C. R. de l'Assoc. des Anat. V. Sess. Liege 

 190:3. Bibliogr. Anat. Suppl. 1903, p. 121 — 123). 

 Das Silbernitrat und die sonst bisher zum Versilbern angewen- 

 deten Salze geben mit den Chloriden und anderen organischen Sub- 

 stanzen in den Geweben leicht Niederschläge. Man kann diese 

 Schwierigkeit allerdings überwinden, wenn man ein künstliches iso- 




XXII, 3. Referate. 419 



tonisches Serum herstellt mit Hilfe von Substanzen, die mit Silber- 

 salzen keine Niederschläge bilden, so mit Nitraten und alkalischen 

 Sulfaten (Deekhursen 1889). Verf. hat einen anderen Weg einge- 

 schlagen und hat verschiedene neuere organische Silberverbindungen 

 versucht: Das Protargol, Argentamin, Largin, Itrol, Nargol, Argyrol, 

 Collargol und das Argonin. Von diesen erwies sieh das Protargol 

 als das günstigste. Das Protargol ist ein gelbes Pulver, leicht 

 löslich in Wasser und gibt eine Lösung, die an Licht und Luft 

 ziemlich rasch sich bräunt. Das Protargol ist eine Verbindung des 

 Silbers mit einem PHanzenalbumin und enthält 8'3 Prozent Silber. 

 Es wird verwendet in einer einprozentigen Lösung in destilliertem 

 Wasser. Diese Lösung gibt weder mit Chloriden noch mit Eiweiß- 

 lösungen Niederschläge. Das Verfahren ist das folgende : 1) Man 

 wäscht die Oberfläche der serösen Membran in physiologischer Koch- 

 salzlösung möglichst kurz ab (um die eventuell darauf befindlichen 

 Körper : Leukocyten , Blutkörperchen zu entfernen) , nachdem man 

 die Membran irgendwie ausgespannt hat, überträgt sie dann in die 

 frisch bereitete ProtargoUösung (2 bis 3 Minuten), wäscht von 

 neuem in dem Serum schnell ab , fixiert die Membran durch Ein- 

 tauchen in Alkohol, einprozentige Osmiumsäure etc., färbt dann even- 

 tuell noch, dann Entwässerung, Aufhellung, Lack. 2) Statt der 

 ProtargoUösung kann man auch eine Mischung einer einprozentigen 

 ProtargoUösung mit einer einprozentigen Osmiumsäurelösung zu gleichen 

 Teilen nehmen. Die Mischung ist nicht haltbar und muß daher jedes- 

 mal frisch zubereitet werden. Das weitere Verfahren , wie oben, 

 man fixiert mit Aüvobol. Dieses zweite Verfahren liefert eine voll- 

 ständige Fixierung und eine sehr schöne feine Imprägnierung. Für 

 Kurse reicht aber auch das erste Verfahren vollkommen aus und 

 die Präparate werden im allgemeinen besser als die mit Silbernitrat 

 angefertigten. Die Abwaschung mit der physiologischen Kochsalz- 

 lösung kann man auch wegfallen lasseu, während man bei Anwendung 

 des Silbernitrates zuerst mit destilliertem Wasser abwaschen muß, 

 wenn man eine gute Imprägnation erhalten will (das ist meiner Er- 

 fahrung nach nicht nötig. Ref.). Nach der Imprägnation mit Protargol 

 kann man z. B. mit Pikrokarmin, Alauukarmin, Hämalaun etc. ebenso- 

 gut färben wie sonst, was nach Silbernitrat nicht der Fall ist. Man 

 setzt die Präparate einige Stunden lang auf einer weißen Unterlage 



dem Lichte aus, nicht der Sonne. r> 7 • /v 77 / 7-. \ 



öchiefferaecker [Bonn). 



2T 




420 Referate. XXII, 3. 



m 



Dubreilil , 0. , L e P i c r o - B 1 e u , n o t e s u r 1' e m p 1 o i de c e 



r e a c t i f p o u r 1 a c o 1 o r a t i o n s p e c i f i q u e des 

 f i b r i II e s c o ii j o n c t i v e s. Application a l ' e t u d e 

 du t i s s u r e t i c u 1 e du g- a n g 1 i o u 1 y in p li a t i q ii e 

 (C. R. Assüc. Anatom. Yl. Sess. Toulouse 1904, Bibliogr. 

 anat. Suppl. 1904, p. 62—66). 

 Man hat bis jetzt zur Darstellung- der Bindegewebsfibrillen ge- 

 wöhnlich die Methode von van Gieson (eventuell die Modifikation 

 von Hansen) oder die von Calleja benutzt. Ein neues Färbemittel, 

 das saure Methylblau (Bleu de methyle acide ou bleu pour micro- 

 graphie, no. 1), wurde von Zacchauiades empfohlen. Die Färbung 

 damit war indessen noch nicht elektiv genug. Verf. hat daher eine 

 Verbesserung versucht. Es zeigte sich zunächst, daß ein nahe ver- 

 wandter Farbstoff, das „bleu pour micrographie no. 2" (Usine des 

 produits cliimiques et matieres colorantes de Saint-Deuis, Paris) gün- 

 stiger für die Färbung sich erwies. Sodann ergab sich als bestes 

 Zusatzmittel Pikrinsäure. Verf. nennt daher die neue Farbmischung 

 „Picro-bleu no. 2". Dieselbe besteht aus: 



Bleu pour micrographie no. 2, 0*5prozentige wäs- 

 serige Lösung 4 cc 



Pikrinsäure, gesättigte wässerige Lösung ... 4(3 „ 



Die Stücke können beliebig tixiert sein; die Schnitte werden, z.B. 

 nach Paraftineiubettung, auf dem Objektträger festgeklebt, nach Ent- 

 fernung des Paraffins (Xylol , Alkohol , Wasser) bedeckt man den 

 Objektträger mit der Färbeflüssigkeit. Die Färbung dauert etwa 

 15 bis 20 Minuten. Man muß dabei, um eine gute Färbung zu er- 

 ■lialten, den Objektträger hin- und herneigen. In der Farbflüssigkeit 

 schwimmende Celloidinschnitte färben sich weit schneller. Nachdem 

 man unter dem Mikroskope die Färbung als genügend festgestellt hat, 

 wäscht man mit Wasser ab , dann absoluter Alkohol , Karbolxylol, 

 Balsam. Pikrinsäurealkohol darf man nicht anwenden, da er sehr 

 schnell das in den Geweben befindliche Blau auflöst. Bindegewebs- 

 fibrillen dunkelblau , auch die feinsten Fibrillen treten sehr scharf 

 hervor, Protoplasma hellgrün, fast gelb, Kerne etwas dunkler grün. 

 — Noch schöner als diese einfache Färbung sind indessen die folgen- 

 den Doppelfärbungen: 1) Acridinrot (rouge d'acridine) 

 und Picro-bleu no. 2. Man färbt mit einer einprozentigen 

 wässerigen Lösung von Acridinrot 5 Minuten , dann Abwaschen in 

 Wasser, dann Färbung mit Picro-bleu wie oben. Man muß die Ent- 




XXII, 3. Referate. 421 



iarbunj;' iu absolutem Alkohol genau überwachen , da das Eot hier 

 leicht ausgezogen wird , und darf nicht Karbolxylol verwenden. 

 2) Safranin und Picro-bleu no. 2. Man färbt 24 Stunden 

 mit der Safraninl()sung von Zwaardemaker, dann Abwaschen in 60pro- 

 zentigem Alkohol , dann in Wasser. Färbung mit Picro-bleu. Man 

 muß ebenfalls die Entfärbung in absolutem Alkohol überwachen und 

 darf kein Karbolxylol verwenden. Nach beiden Methoden erscheinen 

 die Bindegewebstibrillen tiefblau , das Protoplasma im allgemeinen 

 hellviolett und die Kerne rot. Statt des Safranins kann man auch 

 das Korallin in einer wässerig-alkoholischen Lösung verwenden. 



Seh iefferdecker {Bonn) . 



Fischer , A. , Eine neue G 1 y k o g e n f ä r b u n g (Anat. Anz. 

 Bd. XXVI, 1905, No. i;}, 14, p. 399—400). 

 Bei einer Untersuchung über die Cyanopliyceen hat Verf. eine 

 haltbare Glykogenreaktion gefunden , die auch für die medizinische 

 Histologie von Wert sein könnte. Die Methode geht davon aus, daß 

 Glykogen aus wässeriger Lösung durch Gerbsäure gefällt wird und 

 daß durch Alkohol gefälltes Glykogen ebenfalls Gerbsäure bindet. 

 Methode : Fixierung in Alkohol ; die Paraffinsclmitte werden bis in 

 Alkohol gebracht und gelangen, mit Vermeidung von Wasser, direkt 

 mit dem anhaftenden Alkohol in eine lOprozentige wässerige Lösung 

 von Tannin auf 10 bis 15 Minuten. Das Tannin darf nicht mit 

 Wasser abgespült werden : Man verwende eine einprozentige Lösung 

 von Kaliumbichromat, die mit Tannin so langsam eine Fällung gibt, 

 daß man Zeit geniig hat alles überflüssige Tannin von den Objekt- 

 trägern zu entfernen. Dann kommen die Präparate für 10 bis 

 15 Minuten in lOprozentige Kaliumbichroniatlösung, um darin sekundär 

 fixiert zu werden. Die Glykogenmassen sind jetzt fast unlöslich, ver- 

 tragen Abspülen mit Wasser und Färbung mit wässerigen Lösungen. 

 Die schönsten Bilder ergibt 10 Minuten langes Färben mit der be- 

 kannten Safranin-Anilinwasserlösung ; dann Abspülen mit Wasser und 

 möglichst schnell durch Alkohol und Xylol in Balsam. Die Färbung 

 ist durchaus elektiv : Glykogen allein leuchtend rot, behält die Form, 

 die es in der Alkoholiixierung zeigte. Die Zellkerne sind durch die 

 Tanninbehandlung völlig gegen Farbstoffe verstopft und erscheinen 

 durch die Chromierung schwach gelblich , Protoplasma der Leber- 

 zellen mit leicht rötlichem Stich ; alles was intensiv rot ist, ist Gly- 

 kogen. Färbung ist haltbar. Statt des Safranins kann man auch 

 alle andern basischen Farbstoffe verwenden : Sehr schöne, besonders 




422 Referate. XXII, 3. 



fiir Muskeln zu empfelüeiule Färbung ergibt Anilinwassergentiana, 

 ferner wässeriges Metliylcublau, sogenanntes Jodgriin. Bisraarckbrann 

 färbt nur gelbbraun. Alle diese basischen Farben färben, wie das 

 Safranin , nur die Glykogenmassen. Saure Farben , wie Liclitgrün, 

 Säurefuelisiu, Eosin sprechen nicht an, auch Häraatoxylin (Delafield) 

 färbt nicht. Eisenalauuhämatoxylin färbt zwar, bietet aber keine 

 Vierteile. Mit Alkoliol fixierte Kaninchen- und Pferdemuskeln ergaben 

 recht gute Resultate , die wohl dazu ermuntern könnten , die Ver- 

 teilung des Glykogens im Muskel damit zu demonstrieren. Bei 

 Diabetesleber unterblieb die Färbung. Prof. Schmorl in Dresden 

 hat dem Verf. mitgeteilt , daß die Färbung an pathologischen Prä- 

 paraten versagt habe. Schiefferdecker {Bonn). 



Driessen, L. F., Zur Glykogen färbung (Zentralbl. f. allgem. 

 Pathol. u. pathol. Anat. Bd. XVI, 1905, No. 4, p. 129—1.31). 

 Seit etwa 10 Jahren bedient sich Verf. bei seinen Unter- 

 suchungen auf Glykogen in Geschwülsten, entzündeten Organen, 

 Schleimhäuten, Plazenten etc. der folgenden Methode, welche den 

 Vorteil besitzt, die kleinsten Glykogenkörner scharf hervorzuheben, 

 ohne dabei das Bild der histologischen Struktur der Gewebe zu ver- 

 schleiern. Verf. bespricht zunächst die Nachteile der bisher gebräuch- 

 lichen Methoden, weswegen auf das Original verwiesen wird. M e - 

 t h d e : Der Celloidin- oder Paraffinschnitt kommt aus dem Alkohol 

 1) in alkoholische Cochenillelösung oder in saure Mayer sehe Karmin- 

 lösung. 2) Entfärben in 96prozentigem Alkohol. 3) Absoluter Alko- 

 hol 3 Minuten. 4) Jod-Karbol-Xylollösung 3 bis 5 Minuten. 5) Bei 

 Überfärbnng Ausspülen in Karbol -Xylol. 6) Kanadabalsam. Die 

 eben erwähnte Jod-Karbol-Xylollösung wird in folgender Weise her- 

 gestellt: Bringt man gleiche Teile von LuGOLScher Lösung und Xylol 

 (resp. Karbolxylol) in ein Reagenzglas und mischt man beide Hüssig- 

 keiten durch energisches Schütteln, so scheidet sich das leichtere 

 und jetzt Jod enthaltende Xylol als obere Flüssigkeit von dem 

 schwereren Wasser ab : Es treibt oben im Reagenzglase eine pur- 

 purrote Xyloljodlösung ; mit einer Pipette werden einige wenige 

 Tropfen dieser Lösung entnommen und damit der Schnitt aufgehellt 

 und zugleich das Glykogen entfärbt. Ist die Färbung eine ge- 

 nügende , so entfernt man das überschüssige Jodxylol durch Fließ- 

 papier und bedeckt den Schnitt mit einem Deckgläschen, auf welches 

 ein Tropfen Kanadabalsam kommt. Schieff'erdeckcr {Bonn). 




XXIl, 3. Referate. 423 



Michaelis, L. , Ultramikroskopische Untersuchungen 

 (ViRCHOws Arch. Bd. CLXXIX, 1905, H. 2, p. 195—208 

 ra. 1 TU. 

 Verf. behandelt 1) das Verhalten von Farbstoff lösungen. Besser 

 als die Farbstoffe selbst teilt man die Farbstofflösungen ein, da ein 

 und derselbe Farbstoff je nach dem Lösungsmittel oder den sonstigen 

 näheren Nebeuuraständen zu jedem der drei Typen gehören kann. 

 Verf. unterscheidet drei Klassen. Die in diesen Klassen enthaltenen 

 Farbstoffe unterscheiden sich auch in bezug auf ihr Färbevermögen 

 in histologischen Präparaten; 2) behandelt Verf. das Verhalten der 

 Farbstoffe in gefärbten Zellpräparaten ; 3) gibt er einige orientierende 

 Bemerkungen über die Beeinflussung der Eigenfarbe durch das Ultra- 

 mikroskop. Farbstoffe , welche in wässeriger Lösung fluoreszieren, 

 scheinen immer in der Farbe der Fluoreszenz aufzutreten. Nicht 

 fluoreszierende Farbstoffe, wie das Fuchsin , zeigen ein wechselndes 

 Verhalten. Bei Anwendung der Abbe sehen Zentralblende mit axialer 

 Beleuchtung erscheint das Fuchsin gelbgrün bis grün, also in derselben 

 Farbe , wie sie als Oberflächenfarbe bei den trockenen Kristallen 

 des Farbstoffes auftritt. Dagegen erscheinen bei der senkrechten 

 Beleuchtung und Anwendung der Siedentopf sehen Küvette die Teil- 

 chen einer Fuchsinlösung rot. Manche, wie es scheint, die violetten 

 Farbstoffe, zeigen in der Küvette nicht eine einheitliche Farbe, son- 

 dern Körnchen von verschiedener Färbung ; 4) bespricht Verf. das 

 Verhalten von Eiweißlösungen im Ultramikroskope. In jeder Eiweiß- 

 lösung ist das Eiweiß in zwei verschiedenen Zustandsphasen ent- 

 halten : in auflösbarer Form und als unauflösbare Trübung. Ob es 

 zu einem dritten Teile nicht in noch feinerer Form enthalten ist, 

 derart, daß etwa zwischen den hypothetischen feinsten Körnchen, 

 aus welchen sich die unauflösbare Trübung zusammensetzen muß, 

 noch feinere Teilchen enthalten sind, welche gar keine optische Er- 

 scheinung machen , wie etwa die Moleküle irgendeines Salzes in 

 wässeriger Lösung, von denen das Ultramikroskop gar nichts zeigt, 

 ist zurzeit noch nicht zu entscheiden. Aus den vom Verf. ent- 

 wickelten Anschauungen über die Natur einer Eiweißlösung folgt 

 ohne weiteres, daß die von Römer, Much und Siebert beschriebene 

 Methode der quantitativen Eiweißbestimmung auf ultramikroskopischem 

 Wege in ihrer Allgemeinheit nicht zu hai 

 muß auf das Original verwiesen werden. 



Wege in ihrer Allgemeinheit nicht zu halten ist. Wegen des näheren 



Schiefferdecker {Bonn) . 




424 



Referate. XXII, 3. 



4. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. 



A. Niedere Tiere. 



Schröder, 0., Beiträge zur Kenntuis der Baiichsin nes- 

 organe [Bauch au gen] von Euuice virides Graj' 

 sp. [Palolo] (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXXIX, 1905, 

 p. 1.32—149 m. 2 Figg. u. 2 Ttln.). 

 Das Material war in Osmiumsäure, Sublimatlösung, Cliromsäure 

 oder Formol fixiert und in starkem Alkohol konserviert worden. 

 Gefärbt wurde unter anderm mit gutem Erfolg auf folgende Arten: 

 Nach Vorfärbung mit Boraxkarmin und Differenzierung mit schwach 

 angesäuertem Alkohol wurden die Wurmstücke ungefähr für 12 Stun- 

 den in eine ^/gprozentige Lösung von Hämatoxylin übertragen und 

 dann eine gleiche Zeit mit einer einprozentigen Lösung von chrom- 

 saurem Kali behandelt. Eine andere Färbemethode bestand darin, 

 daß die ebenfalls mit Boraxkarmin vorgefärbten Objekte 24 Stunden 

 in einprozentige Osmiumsäure gebracht und dann die gleiche Zeit 

 mit Holzessig behandelt wurden. Nach längerem Wässern wurde in 

 gewöhnlicher Weise in Paraffin eingebettet. Von Schnittfärbuugen 

 gab Eisenhämatoxylin recht gute Resultate, ferner kam noch die 

 VAN GiESONSche Methode und eine Doppelfärbung mit Boraxkarmin 

 und einer O'Olprozentigen Lösung von triphenylrosanilintrisulfosaurem 

 Natrium in gesättigter, wässeriger Pikrinsäurelösung zur Verwendung. 



E. Schoebel (Neapel). 



Heinemami , Ph., Untersuchungen über die Entwick- 

 lung des M e s d e r m s u n d den Bau des R u d e r - 

 Schwanzes bei den A scidi enlar v en (Zeitschr. f. 

 wiss. Zool. Bd. LXXIX, 1905, p. 1—72 m. 4 Tfln.). 

 Zur Untersuchung dienten Embryonen und Larven von Ciona 

 intestinalis, Clavelina lepadiformis und Molgula nana. Die Fixierung 

 der ersteren geschah in Alkohol -Essigsäure, Platinchlorid -Osmium- 

 Pikrinsäure, Formol, Sublimat, Pikrin-Essigsäure, Platinchlorid- Chrom- 

 Osraiumsäure, der zweiten in Alkohol oder Pikrinschwefelsäure , der 

 dritten schließlich zusammen mit dem Muttertier in 96prozentigem 




XXII, 3. Referate. 425 



Alkohol. Alkohol - Essigsäure glitt für Schnittpriiparate recht gutes 

 Material. Für Totalpräparate freischwimmender Larven ist unter 

 anderm auch Platinchlorid-Osmium-Pikrinsäure empfehlenswert, indem 

 durch die Osmiumsäure die Konturen der Muskelzellen und die 

 Fibrillen derselben, ohne jede weitere Färbung deutlich werden. Ein- 

 fache Alkoholtixierung gibt äußerst befriedigende Resultate , indes 

 dürfte sie nur dann zu empfehlen sein, wenn das Material bald zur 

 Verarbeitung kommt. Eingebettet wurde in gewöhnlicher Weise in 

 ParafHn , und zwar blieben die Objekte etwa 6 Stunden im ge- 

 schmolzenen Paraftin. Beim Einschluß der Schnitte in Balsam muß 

 äußerst vorsichtig zu Werke gegangen werden, da leicht Trennung 

 und Verlagerung einzelner histologischer Elemente eintritt. Über- 

 führen der Schnitte vom absoluten Alkohol in Xylol erwies sich oft 

 als schädlich. Es ist deshalb besser beim Einschluß zwischen Alkohol 

 und Balsam Nelkenöl als Zwischenmedium zu benutzen. Die besten 

 Färbungen gab DELAFiELDSches Hämatoxylin, kombiniert mit Alaun- 

 karmin, oder Methylenblau, kombiniert mit Hämatoxylin nach Heidex- 

 HAiN. Bei ersterer Tinktion wurden die Objekte in toto in Alaun- 

 karmin gefärbt (Boraxkarmin gibt ähnliche Resultate), dann die 

 Schnitte mit alter schwacher Del afield scher Hämatoxylinlösung stark 

 überfärbt, eine Stunde lang in Leitungswasser gestellt, mit 70pro- 

 zentigem salzsaurem Alkohol differenziert , ferner in TOprozentigem 

 ammoniakhaltigem Alkohol neutralisiert und dann durch steigenden 

 Alkohol und Nelkenöl in Kanadabalsam übergeführt. Um bei Total- 

 präparaten der freischwimmenden Larven das Detail der Muskel- 

 zellen des Schwanzanhanges zur Darstellung zu bringen, wurden die 

 Objekte mit Methylenblau gefärbt und in Glyzerin eingeschlossen. 

 Das Glyzerin zieht das Methylenblau immer mehr und mehr aus und 

 auf einem gewissen Zeitpunkte lassen sich Zellkonturen, Fibrillen etc. 

 deutlich erkennen, E. Schoebel (Neapel). 



Laß , M. , Beiträge zur Kenntnis des histologisch- 

 an atomischen Baues des weiblichen Hunde- 

 flohes [Pulex canis Duo es s. Pulex serraticeps 

 Taschen beug] (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXXIX, 1905, 

 p. 73—131 m. 2 Tfln.). 

 Die Fixierung bietet gewisse Schwierigkeiten, besonders die der 

 erwachsenen Tiere. Larven und Puppen fixiert man am besten durch 

 Übergießen mit einem auf 55 bis 60^ C. erwärmten Gemisch aus 

 konzentrierter Sublimatlösung und absolutem Alkohol. Nach 5 bis 




426 Referate. XXII, 3. 



10 Minuten sticht man die Objekte mit einer feinen Nadel an, bringt 

 sie in 43prozentigen Alkohol und behandelt sie dann in üblicher 

 Weise weiter. Auch durch Abtöten mit 50 bis 60*^ warmem Wasser 

 erhält man recht gute Präparate. Schwimmen die Objekte beim 

 Fixieren aut der Flüssigkeit , so hilft meist alles Schütteln nichts, 

 und die Fixierung ist dann immer schlecht. Die erwachsenen Tiere 

 fixiert man am besten in einem ebenfalls auf 55 bis 60^ C. er- 

 wärmten Gemisch aus gleichen Teilen Sublimatlösung und absolutem 

 Alkohol mit einem Zusatz von 2 Prozent konzentrierter Essigsäure. 

 Kopf und Thorax wurden immer entfernt. Zur Herausnahme einzelner 

 Organe aus dem Körper der Imago wendet man vorteilhaft eine 

 starke Alkohol-Essigsäuremischung (Essigsäure ÖOprozeutig, 20 Teile, 

 Alkohol 95prozentig, 20 Teile, Wasser 100 Teile) an. Durch diese 

 Flüssigkeiten werden die bindegewebigen Teile sehr stark angegriffen, 

 so daß sich das Chitin entfernen läßt. Zur Färbung der Schnitte 

 diente Alaunkarmin, Boraxkarmin oder GRENACHERSches Hämatoxylin. 



E. Schoehel {Neapel). 



Böseuberg, H., Beiträge zur Kenntnis der Spermato- 

 genese bei den Arachnoiden (Zool. Jahrb., Abt. 

 f. Anat. u. Ontogen. Bd. XXI, 1905, p. 515—570 m. 

 ,3 Tfin.). 

 Zur Materialgewinnung wurden die geschlechtsreifen Tiere unter 

 physiologischer Kochsalzlösung vom Bauch aus geöffnet und ihre 

 Hoden mit den Vasa deferentia , nach Zurückschlagen der Leber- 

 lappen, mittels feinen Nadeln herausgehoben. Zur ersten notwendigen 

 Orientierung wurden in üblicher Weise Ausstrichpräparate angefertigt. 

 Der Hauptsache nach wurden weiter aber Schnitte untersucht. Das 

 Material für diese Präparate wurde im wesentlichen in einem Sublimat- 

 Alkohol -Eisessig -Gemisch fixiert, außerdem zum Teil noch in Her- 

 MANNScher oder ZENKERScher Flüssigkeit. Wird beim Herauspräparieren 

 der Organe jede, auch die geringste Austrocknung vermieden, so tritt 

 keine Schrumpfung in den Fixierungsflüssigkeiten, in den man sie 

 am besten eine bis 2 Stunden beläßt, ein. Die weitaus beste Fixie- 

 rung lieferte die Hermann sehe Flüssigkeit. Zur Färbung zeigte sich 

 vor allem die Heidenhain sehe Eisenhämatoxylinmethode als Einfach- 

 färbung oder kombiniert mit Bordeaux-Rot als Doppelfärbung gut ge- 

 eignet. Ebenfalls gute Bilder wurden noch mit Hämatoxylin und 

 Hämalaun-Orange erzielt. E. Schoehel {Neapel). 




XXII, 3. Referate. 427 



B. Wirheitiere. 



(xias , E. , Zur F rn i;- e der S a r k o 1 y s e. [Erste Mitteilung 

 über quergestreifte Muskeln und deren 'Zer- 

 fallsprodukte im f 1 1 i k u 1 ä r e n G e w e b e d e r T o n - 

 sille] (Anat. Anz. Bd. XXVI, 1905, No. 6, p. 155—171 

 m. 1 Ttl.). 

 Verf. fand in der Tonsille eigenartige Körpercheu, welche sich 

 bei näherer Untersuchung als Sarkolyten erwiesen. Die Färbung 

 nach VAN Gieson ergab Gelbfärbung dieser Körperchen , eine Blau- 

 färbung trat bei der von Paulsen für pjiweißkristalle in Pflanzen- 

 zellen angegebenen Färbung auf, welche zu einer tiefblauen Färbung 

 der Kristalle führt: l) Beizung in 25prozentiger, wässeriger Tannin- 

 lösung (eine Stunde). 2) Auswaschen. 3) Behandlung mit 20prozen- 

 tiger Eisenvitriollösung (eine Stunde). 4) Wasser, Alkohol, Nelkenöl, 

 Balsam. Schiefferdeclrr {Bonn). 



Erclely , A, , Untersuchungen über die E i g e n s c h a f t e }i 

 und die Entstehung der Lymphe. Fünfte Mit- 

 teilung. Über die Beziehung zwischen Bau 

 und Funktion des lymphatischen Apparates 

 des Darmes (Zeitschr. f. Biol. Bd. LXVI, 1904, H. 2, 

 p. 119—152 m. 1 TU.). 

 Verf. hat am Darme der weißen Ratte das Auftreten von ver- 

 schieden beschaffenen Lymphzellen untersucht, die je nach der Art 

 der Nahrung sich zeigten. Verf. hat ira ganzen acht Versuchsreihen 

 durchgeführt, von denen jede in der Regel bestand aus je einer 

 llungerratte, einer Fleischratte, einer Speckratte und einer Kartoti'el- 

 ratte. Den Tieren wurde reichlich Wasser geboten. Die Hunger- 

 perioden dauerten 3 bis 6 Tage, die Fütterungsperioden 3 bis 8 Tage. 

 Die Tiere wurden durch Chloroform getötet. Sofort nach dem Tode 

 Fixierung der Därme: Konzentrierte Sublimatlösung, pLEMMiNGSches 

 Osmiumgemisch, Flüssigkeit von Mingazzini (konzentrierte Sublimat- 

 lösung 50 cc, Alkohol 25 cc, konzentrierte Essigsäure 25 ccj. Vor 

 der Einbringung in die Fixierungsflüssigkeit wurde zuerst das Darm- 

 lumen mit derselben erfüllt. Die besten Resultate hinsichtlich der 

 Erhaltung der Formen und der Färbefähigkeit ergab die einfache 

 Sublimatfixierung, insofern nur das lymphatische Gewebe der Zotte 




428 Referate. XXII, 3. 



und der Mucosa in Frage kam. Für andere Teile, nameutlicli für 

 bestimmte Abschnitte des Darmepithels , erhcält man sehr schöne 

 Bilder mit der Flüssigkeit von Mingazzini. Verf. hat diese letztere 

 bei seinen Untersuchungen, welche nur dem lymphatischen Gewebe 

 galten, nur da mit Vorteil benutzt, wo es sich darum handelte, 

 die genauere Lage der Leukocyten und deren Beziehung zum Epithel 

 festzustellen, sowie für einige Strukturverhältnisse des Kernes. 

 Paraffineinbettung. Die folgenden Färbungen wurden verwendet: 

 Ehrlichs Triacid für neutrophile Granulationen, Eisenhämatoxylin 

 (M. Heidenhain) mit Fuchsinfärbuug, Hämatoxylin-Eosin , Methylen- 

 blau-Eosin (Willebrandt), gelegentlich auch die Ehrlich sehen Drei- 

 farbgemische für eosinophile und basophile Zellen und das Ehrlich- 

 BiONDische Dreifarbeugemisch. Die besten Bilder ergab das Ehr- 

 LicHSche Triacid. Verf. bemerkt hierzu, daß manche Autoren mit 

 dieser für Blutpräparate allgemein günstig beurteilten Farbmischung 

 bei Gewebsschnitten weniger zufrieden sind. Verf. hat alles das, 

 was man der Biondi-Heidenhain sehen Dreifarbenlösung nachrühmt, 

 mit Triacid erzielt und meint, daß dieses noch schönere Bilder gibt, 

 als gut gelungene BioNDipräparate. Verf. teilt mit, daß auf Ver- 

 anlassung von Professor Asher Herr Dr. Hollborn (Inhaber des 

 mikroskopisch-chemischen Laboratoriums von Dr. G. Grlbler) mehrere 

 Modifikationen des Biondi- Ehrlich -Heidenhain sehen Dreifarbenge- 

 misches angefertigt hat. Die neuerdings gelieferte Trockensubstanz, 

 zu welcher man selbst nach Vorschrift Fuchsin hinzufügen muß, 

 liefert die besten Bilder. Diese stehen aber den von Triacid ge- 

 lieferten nach, nur das bindegewebige Stroma und besonders die 

 Endothelien der Kapillaren werden besser. Die Technik der Triacid- 

 färbung ist einfach : Nach Entfernung des Paraffins kommen die 

 Präparate in die käufliche konzentrierte Lösung und verbleiben in 

 dieser, je nach der Schnittdicke und der sonstigen Beschaffenheit 

 des Präparates, 2 bis 15 Minuten, dann werden sie mit Wasser 

 und Alkohol nacheinander differenziert : die Erfahrung lehrt , wie 

 lange in jeder Flüssigkeit. Die Eisenhämatoxylinmethode von Heiden- 

 hain diente zur Ergänzung der Triacidbilder, besonders hinsichtlich 

 der Kernverhältnisse ; irgendwelche wesentliche , neue Aufschlüsse 

 gegenüber der Triacidmethode bietet sich aber bei den Leukocyten 

 des Rattendarmes zumal dann nicht, wenn es auf die Beziehungen 

 derselben zu verschiedenen funktionellen Zuständen ankommt. 



Schieferdecker ( Bo?m) . 




XXII, 3. Referate. 429 



Zietzscbniaiin , 0. , Über die a c i d o p h i 1 e n L e u k o c y t e ii 



( K ö r n e r z 6 1 1 e n ) des Pferdes (Intern. Monatsschr. f. 



Anat. n. Physiol. Bd. XXII, 1905, H. 1—3, p. 1—90 ui. 



1 Tri.). 

 Um Körnclienbildiingen in Zellen zur Klasse der a-Granulationen 

 rechnen zu können , genügt es nach Ehrlich , wenn sich dieselben 

 nach folgenden Methoden färben : 1) Mit stark rotem Eosin-Glyzerin. 

 2) Mit einem in Indulin gesättigten Glyzerin, und o) mit einer kon- 

 zentrierten wässerigen Lösung von Orange. Diese drei Methoden hat 

 Verf. angewendet, dazu aber noch viele andere Färbemittel auf ihr 

 Verhalten zu den acidophilen Granula untersucht, einesteils, um schon 

 Gefundenes nachzuprüfen (ob Funde bei Zellen von Menschen oder 

 Tieren speziell auf die Einhufer übertragen werden können), andern- 

 teils, um neue Farben oder Farbmischuugen in ihrer chemisch tink- 

 toriellen Affinität zu den a-Granulationen der Pferdeleukocyten kennen 

 zu lernen. Verf. gibt nun eine sehr eingehende Beschreibung seiner 

 Färbungen, derentwegen bei ihrer großen Reichhaltigkeit auf das 

 Original verwiesen werden muß. Er kommt dann zu dem Schlüsse, 

 daß aus seinen Färbeversuchen hervorgehe, daß die acidophilen Gra- 

 nula der Leukocyten des Pferdes, wie schon längst bekannt, mit den 

 gewöhnlichen Kernfarben sich nicht färben lassen. Auch die Schleim- 

 farben und die Reagentien für das elastische Gewebe und andere 

 spezifische Tinktionsmittel zeigen keine Affinität zu diesen Körnchen. 

 Dagegen färben sich die Granula mit Hämatoxylin-Eisenalaun nach 

 Heidenhain , mit Methylgrün , mit Osmiumsäure und Indigkarmin. 

 Eine besondere Affinität besitzen die Körnchen zu allen sauren Farben 

 (Eosin, Erythrosin, Säurefuchsin, Orange G, Indulin, Aurantia, Pikrin- 

 säure). Es sind diese Zellelemente also acidophil im Sinne Ehr- 

 lich s. Xach neueren Untersuchungen aber klassifiziert man die 

 acidophilen Granulationen in den Leukocyten der Säugetiere in 

 mehrere Unterabteilungen , je nachdem sie aus einem Gemische ver- 

 schiedener saurer Farben die eine oder die andere aufnehmen. Die 

 Farbmischung , die zur Unterscheidung dieser Unterabteilungen an- 

 gewendet wird, besteht aus gleichen Teilen einer wässerig-glyzerinigen 

 Lösung von Indulin, Eosin und Aurantia und man unterscheidet nach 

 dem Elektivvermögen zwischen indulino-, eosino- und aurantiophilen 

 Körnchen in den Leukocyten. Verf. geht dann weiter auf seine Färbungs- 

 resultate ein, derentwegen wieder auf das Original verwiesen wird, und 

 dann auf die Chemie der Körnchen. Schiefferdecker {Bonn). 




430 Referate. XXII, 3. 



Meves, F., Über die Wirkung gefärbter Jodsäure auf 

 die roten Blutkörperchen der Amphibien. Vor- 

 läufige Mitteilung (Anat. Anz. Bd. XXVI, 1905, 

 No. 4 u. 5, S. 97 — 103 ni. 4 Abb.). 

 Lawdowsky^ hat 1893 mitgeteilt, daß Jodsäure in Verbindung 

 mit einigen Farbstoffen, besonders Neuviktoriagrlin oder Methylviolett 

 6 B, in eigenartiger Weise auf die Blutkörperchen einwirkt. Verf. 

 hat nun diese Methode nachgeprüft; weiter gibt er folgendes an. 

 Jodsäure, ungefärbt, in 2- bis 3prozentiger Lösung, am besten mit 

 einem Kochsalzzusatze von etwa ein Prozent, wirkt in ähnlicher Weise 

 wie eine Salpetersäure-Kochsalzlösung (30 Tropfen Salpetersäure von 

 1'4 spezifischem Gewichte auf 100 cc einer 0*9 bis einprozentigen 

 Chlornatriumlösung), d. h. sie ist, wie diese, ein geeignetes Mittel, 

 um die Quermembranen des Randreifens (unter Quellung desselben) 

 darzustellen. Die Darstellung der Quermembranen durch Salpeter- 

 säure-Kochsalz scheint noch leichter bei Anwesenheit von etwas 

 Sublimat zu gelingen. Verf. hat in letzter Zeit mit besonders gutem 

 Erfolge folgende Mischung angewendet: Salpetersäure von 1'4 spezi- 

 fischem Gewichte 24 bis 30 Tropfen, Chlornatrium 1"8- bis 2prozentige 

 Lösung 50 cc, Sublimat einprozeutige Lösung 50 cc. Ferner werden 

 bei der oben angegebenen Jodsäuremischung in zahlreichen Blutzellen 

 (Salamandra) die unregelmäßig gewundenen (zuweilen ringförmigen) 

 intracellulären Fäden sichtbar, die Verf. ebenfalls schon mit Salpeter- 

 säure-Kochsalz erhalten hatte. — Durch 4prozentige Jodsäure, der 

 man Neuviktoriagrün oder Methylviolett zusetzt (wenn man Dahlia 

 zusetzt, darf man der Jodsäure kein Kochsalz zufügen , da dieses 

 mit Dahlia einen Niederschlag gibt), kann man die erwähnten Quer- 

 membranen und intracellulären Fäden gefärbt erhalten, am konstan- 

 testen aber wird das Körnerband gefärbt, welches Verf. bei Sala- 

 mander schon früher nach Behandlung der roten Blutkörperchen mit 

 einer stärker verdünnten Salpetersäure (3 bis 4 Tropfen Salpetersäure 

 auf 100 cc einer 0*9- bis einprozentigen Chlornatriumlösung) als ein 

 körniges Aussehen des Randreifens wahrgenommen hatte. — Wenn 

 man zu 20 cc einer 4prozentigen Jodsäurelösung, welche 1,5 Pro- 

 zent Chlornatrium enthält, 5 cc einer 2prozentigen Osmiumsäure- 

 lösung hinzufügt , einen Tropfen dieser Mischung auf dem Objekt- 

 träger mit einem etwas kleineren Tropfen einer 0'5prozentigen Lösung 

 von Malachitgrün vermischt und einen kleinen Tropfen Salamander- 



1) Vgl. diese Zeitsclir. \U\. X, 1893, p. 4—35 m. 2 Tfln. 




XXII, 3. Referate. 431 



bliit liineinrülirt, das Präparat dann eindeckt und mit einem Paraffin- 

 reifen umzieht, so sieht man meistens nach einigen Augenblicken an 

 fast sämtliclien Blutkörperchen ein scharf gefärbtes Fadennetz auf- 

 treten, welches unmittelbar au der Oberfläche liegt. An Blutkörper- 

 chen des Frosches gelingt dies nicht. Das hier genannte Malachit- 

 grün ist, wie Verf. bemerkt, der chemischen Formel nach identisch 

 mit Neuviktoriagrün, es wurde als Malachitgrün von Grübler in 

 Leipzig bezogen. Seine ff erdecker {Bonn). 



Leuziiianil, R., Über eine vereinfachte Methode der Fär- 

 bung von Bluttrockenpräparaten (Rheinisch- West- 

 fälische Ges. f. innere Med. u. Nervenheilkunde. IV. Vers. 

 6. Nov. 1904 zu Duisburg; Ref. in Münchener med. Wochen- 

 schr. Jahrg. LI, 1904, No. 50, p. 2250—22.51). 

 Nur sehr dünne (0'08 bis O'l mm), tadellos mit Alkohol und 

 Äther gereinigte Deckgläschen dürfen verwendet werden uud sind 

 nicht mit den Fingern , sondern nur mit Pincetteu zu führen. 

 Die Fingerkuppe des Patienten, aus der das Blut entnommen wird, 

 muß auf das sorgfältigste gereinigt werden. Die lufttrockenen 

 Präparate müssen zunächst fixiert werden. Die Fixierung durch 

 Hitze nach Ehrlich ist für den Praktiker nicht durchführbar , die 

 Fixierung in Formolalkohol oder in Alkohol und Äther zu gleichen 

 Teilen braucht wenigstens 5 bis 10 Minuten und ist unsicher. Ver- 

 fasser hat daher versucht, die Fixierung mit der Färbung zu ver- 

 binden. Was die Färbung anlangt, so ist es für den Praktiker am 

 bequemsten, wenn er solche Lösungen benutzt, die alle körperlichen 

 Elemente des Blutes zugleich zur Anschauung bringen: die eosino- 

 philen , die neutrophilen uud die basophilen. Dieses leisten das 

 Ehrlich sehe Dreifarbengemisch und die Ziemann sehe Lösung (eiu 

 Gemisch von 4 Teilen Eosinlösuug [O'l : 100] uud ein Teil Methyleu- 

 blaulösung [l : lOO] und 2 '5 Borax). Diese sogenannten panchro- 

 matischen Farblösungen färben aber nicht so gleichmäßig, wie es 

 wünschenswert ist. Verf. hat deshalb zunächst mit einem Eosin- 

 Methylenblaugemisch gefärbt , das die eosinophilen und neutrophilen 

 Elemente vorzüglich darstellt und hat dann zur Färbung der baso- 

 philen Elemente mit einer gesättigten Methylenblaulösuug nachgefärbt. 

 Die Lösung des Verf. besteht aus: Eosin 1"2; absoluter Alkohol lOO'O; 

 Formol 5*0; Sublimat 0*3; dann filtrieren. Zu 10 cc dieser Lösung 

 wird zugesetzt 1 cc der folgenden Methylenblaulösung: Methylen- 

 blau 0'8 ; absoluter Alkohol 100*0 ; .Sprozentige Essigsäurelösung 




432 Referate. XXII, 3. 



20 Tropfen , filtrieren. Die sclion filtrierten einzelneu Lösungen 

 müssen nach der Mischung nochmals filtriert werden. Von diesem 

 fertigen, lange Zeit haltbaren Farbengemische werden etwa 10 Tropfen 

 auf das in einem ührschälchen mit der beschickten Seite nach oben 

 liegende lufttrockene Deckgläschen, am besten wieder durch ein 

 Filter, geträufelt. Nach einer Minute ist das Präparat vorzüglich 

 fixiert, die neutrophilen Elemente sind deutlich gefärbt, die eosino- 

 phileu Elemente könnten aber intensiver gefärbt sein. Da sie sich 

 in wässerigen Lösungen am besten färben, so setzt Verf., nachdem 

 das Präparat eine Minute mit dem Farbgemisch bedeckt war, aus einer 

 Spritzflasche destilliertes Wasser hinzu , so daß das in Form einer 

 Kuppe das Deckglas bedeckende Farbgemisch zerfließt und hellrot 

 wird. Man braucht dazu etwa die fünffache Menge von Wasser. 

 Das Deckglas liegt nun auf dem Boden des Uhrschälchens in dem 

 mit destilliertem Wasser verdünntem Farbengemische, man muß es 

 durchschimmern sehen. Es verbleibt in dieser verdünnten Mischung 

 etwa 1*5 Minute. Betraclitet man es jetzt nach Abspülen im Leitungs- 

 wasser mit Ölimmersion, so findet man die eosinophilen und neutro- 

 philen Elemente sehr scharf gefärbt, die basophilen müssen noch 

 nachgefärbt werden. Dies macht man in folgender Mischung: 

 Methylenblau 2*4; absoluter Alkohol 100*0 ; Borax 2*5; filtrieren. 

 Von dieser Lösung träufele man durch ein Filter einige Tropfen auf 

 das vorgefärbte und in Wasser abgespülte Deckglas, belasse diese 

 20 bis 30 Sekunden darauf, spüle gründlich ab, bis die zunächst 

 etwas blaue beschickte Fläche eine violette Farbe angenommen hat: 

 alle eosinophilen Elemente sind jetzt rot, die neutrophilen deutlich 

 violett, die basophilen tiefblau, die Blutplättchen dunkelviolett. Die 

 Form der Blutkörperchen ist tadellos erhalten. Die Methode würde 

 also kurz die folgende sein : Die Farblösungen No. 1 und 2 sind 

 fertig, man träufelt No. 1 auf das lufttrockene, mit der beschickten 

 Seite nach oben gekehrte Deckglas, setzt aus der Spritzfläche nach 

 einer Minute etwa die fünffache Menge destillierten Wassers zu ; 

 nimmt nach 1'5 Minute das Deckglas aus dieser Farblösung, spült 

 in Leitungswasser ab, färbt mit Lösung No. 2, die auf das mit der 

 Pincette gehaltene Deckglas aufgeträufelt wird, 20 bis 30 Sekunden 

 nach, spült wieder ab, trocknet auf Fließi)apier, dann Kanadabalsam. 

 Die ganze Behandlung dauert 3 Minuten. — Trotzdem die Methode 

 einfach ist, bedarf es einer gewissen Übung, um tadellose Präparate 

 zu erhalten. Am schwersten ist es, Farbstotfniederschläge zu ver- 

 meiden. Verf. rät, den Farbstoff immer durch ein feuchtes Filter 




XXII, 3. Referate. 433 



auf das Deckglas zu träufeln. Die Filter müssen von tadelloser Be- 

 schafFeuheit sein. Die besten sind die von der Firma Schleicher 

 und ScHÜLL in Düren (zu beziehen durch Marquakt, Bonn). Dem 

 Verf. wurden von sachverständiger Seite die sogenannten gehärteten 

 Filter empfohlen. Für die Filtrierung der Lösung No. 1 sind diese 

 vorzüglich ; für die Lösung No. 2 muß das Filter noch dichter sein. 

 Auf Empfehlung der Firma hat Verf. für diese letztere Lösung ein 

 besonders dichtes Filter (Firmanummer 589) benutzt. Erst seitdem 

 Verf. in dieser Weise verfuhr, hat er tadellose Präparate erhalten. 

 — Aus der Diskussion ist das Folgende hervorzuheben: Hoffmann 

 (Düsseldorf) macht auf die Jenner sehe Färbung aufmerksam. Die 

 P^'irma Burroughs and Wellcome bringt kleine Tabletten in den 

 Handel, die in 10 cc Methylalkohol gelöst, in ähnlicher Weise gleich- 

 zeitig fixieren und färben. Dieselben geben gute Übersichtsbilder. 

 Für feinere Untersuchungen wird man die Triacidfärbung und Eosin- 

 Methylenblau färbung nach Wärmefixierung vorziehen. Auch die May- 

 GRtJNWALDSche Färbung gibt gute Resultate. Minkowski benutzt 

 gleichfalls für praktische Zwecke die eben erwähnten Soloids von 

 BouRROUGHS and Wellcome nach Jenner, und ist mit den Resultaten 

 sehr zufrieden. Die Methode ist im wesentlichen identisch mit der 

 von May-Grünwald. Für die Ausbreitung der Blutschicht ist 4as 

 PLEHNSche Verfahren des Ausziehens eines Bluttropfens mittels eines 

 schräg gehaltenen Deckglases sehr empfehlenswert. 



Scläcfferdccker {Bonn). 



Haiiseii; F. C. C, Untersuchungen über die Gruppe der 

 Bindesubstanzeu. I. Der Hyalinknorpel (Anat. 

 Hefte, H. 83 [Bd. XXVII, H. :?] 1905, p. 537—820 m. 

 5 Figg. im Text u. 10 Tfln.). 

 Verf. bespricht in dieser sehr umfangreichen Arbeit zunächst 

 sehr eingehend die bisher von anderen Autoren angewendeten Knorpel- 

 färbimgen. Er hat eine sehr große Anzahl von Färbungen durch- 

 probiert, führt dieselben aber nicht besonders auf. Er gibt zunächst 

 einige allgemeine Sätze in bezug auf die Acidophilie und Basophilie 

 der Grundsubstanz des hyalinen Knorpels. 1) Die Knorpelgruud- 

 substanz enthält überall eine Mischung basophiler und acidophiler 

 Stoffe. 2) Diese können sich gegenseitig maskieren. 3) In der Regel 

 ist im frischen oder gut fixierten Knorpel (am besten mit Alkohol, 

 Formol-Alkohol, Sublimat, Sublimat-Essigsäure, Zenker scher Flüssig- 

 keit) die Basophilie dominierend und erstreckt sich über das ganze 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 8. 28 




434 Referate. XXII, 3. 



Gebiet, das morphologisch betrachtet, die Knorpelgrnndsubstanz ist. Die 

 Basophilie als Totalität ist am stärksten mitten im Innern des Knorpels 

 und nimmt nach dem Perichondrium oder der Geleukoberfläohe hin 

 mehr oder weniger ab. 4) Die Acidophilie ist gewöhnlich am meisten 

 ausgesprochen nach außen unter dem Perichondrium und den freien 

 Oberflächen, wie auch um die Gefäße des Knorpels. Von hier nimmt 

 die Acidophilie ab, während die Basophilie zunimmt. In der Tiefe 

 des Knorpels sind die acidophilen Stofl:e oft total von den basophilen 

 maskiert, so daß oft gar keine Acidophilie mehr angetroffen wird. 

 5) Gewisse Strecken der Grundsubstauz sind mithin basophil und 

 acidophil zugleich, d. h. die Stoffe haben einander nicht völlig mas- 

 kiert. 6) Durch gewisse Behandlungen der Knorpelgrundsubstanz 

 kann man bewirken , daß diese ihre Basophilie verliert , und (an- 

 scheinend ziemlich unverändert) überall stark acidophil wird, selbst 

 da, wo vorher keine Spur der Acidophilie vorhanden war (Demas- 

 kierung des acidophilen Stoffes). 7) Die verschiedenen sauren und 

 basischen Farbstoffe zeigen in ihrem Verhalten gegen die Knorpel- 

 grundsubstanz bedeutende Verschiedenheiten. Nicht alle Kom- 

 binationen sind gleich gut geeignet. Die Verschiedenheiten der Farb- 

 stoffe lassen sich mit Erfolg zu einer feineren Analyse benutzen. 

 8) Die Knorpelgruud Substanz färbt sich in der nicht zu starken 

 wässerigen Lösung gewisser basischer Farbstoft'e metachromatisch 5 

 die wichtigsten sind : Methylviolett, Thionin, Toluidinblau, polychromes 

 Methylenblau (oder eine Lösung von Methylenblau, die „Methylen- 

 rot" enthält), in diesen färbt sie sich nämlich mehr oder weniger 

 rot, bezw. purpurn, oft der Metachromasie der Mucine analog. Durch 

 gewisse Maßregeln läßt die Metachromasie sich aufliebeu. Wegen 

 alles weiteren muß auf die sehr eingehenden Auseinandersetzungen 

 des Originals verwiesen werden. Schiefferdecker {Bonn). 



Schwarz, G., Studien über im großen Netz des Kanin- 

 chens vorkommende Zell formen (Virchows Arch. 

 Bd. CLXXIX, 1905, H. 2, p. 209—265 m. 1 Tfl.). 

 Die Tiere wurden durch Chloroform getötet, die Bauchhöhle 

 unter Vermeidung von Blutung in dieselbe geöffnet , sodann ver- 

 schiedene Teile des Netzes nach Maximow über abgeschnittene, mittel- 

 weite Flaschenhälse gespannt und so in die Fixierungsflüssigkeit 

 gebracht. Fixierung des Netzes in situ liefert infolge von Schrumpfung 

 minderwertige Präparate. Bei Netzen, die zu klein waren, um über 

 Flaschenhälse gezogen zu werden , suchte sich Verf. durch vorsieh- 




XXII, 3. Referate. 435 



tiges Unterlegen von kleinen Glasplättchen zu lielfen und spannte S(» 

 die Präparate auf. Zur Fixierung erwies sich am besten warme 

 ZENKERsclie Flüssigkeit. Nach Auswaschen in Wasser, Behandlung 

 mit Jodalkohül von steigender Konzentration, wurden die Präparate 

 von dem Flaschenhalse gelöst und in beliebig große Stücke zer- 

 schnitten. Färbung nach verschiedenen Methoden, hauptsächlich mit 

 Unnas polychromem Methylenblau und nachfolgender Difterenzierung 

 in Glyzerinäther, mit Eisenhämatoxylin nach Heidenhain, mit Pappen- 

 iiEiMS Methylgrün-Pyronin, modifiziert nach Unna, Ehrlichs Triacid 

 und Hämatoxylin- Eosin. Schiefferdecker {Bonn). 



Karak.aclieft*, K. Iv. , Über das Verhalten der Langer- 

 HANSSchen Inseln des Pankreas bei Diabetes 

 mellitus (Deutsches Arch. f. klin. Med. Bd. LXXXII, 

 1904, H. 1, 2, p. 60—89 m. 1 TU. u. 3 Figg. im Text). 

 Stücke von Kopf, Körper und Schwanz des Pankreas wurden 

 in MüLLER-Formol (10 Prozent) gelegt, nur bei einigen Fällen in 

 FLBMMiNGSche Flüssigkcit, dann steigender Alkohol, Celloidin. Färbung 

 der Schnitte mit Hämatoxylin-Eosin, nach van Gieson, mit polychromem 

 Methylenblau und Safranin. Besonders geeignet schien die Färbung 

 mit polychromem Methylenblau zu sein, mit welchem die Zymogen- 

 körnchen sich dunkel färben, so daß die Zellen der Drüsenacini ganz 

 dunkel erscheinen, während die der Langerhans sehen Inseln hell- 

 blau bleiben. Aber auch die Hämatoxylin-Eosinfärbung leistete gute 

 Dienste. Schiefferdecker {Bonn). 



Leyeu , E. von der , Über die Schleimzone des mensch- 

 lichen Magen- und D a r m e p i t h e 1 s vor und nach 

 der Geburt (Virchows Arch. Bd. CLXXX, 1905, No. 1, 

 p. 99—107). 

 Es wurde der Magen eines P^'ötus von '21 cm Länge untersucht, 

 ferner der von Neugeborenen und etwas älteren Kindern bis zu 

 einem Jahre hin. Der Magen des Fötus kam etwa 16 Stunden nach 

 dem Abort in die Konservierungsflüssigkeit. Den Kindern wurde, so- 

 weit es möglich war, möglichst bald nach dem Tode eine lOpro- 

 zentige FormoUösung in die Bauchhöhle eingespritzt und es wurde 

 mittels eines Nelaton- Katheters Formol in den Magen durch den 

 Mund eingeführt. Bei andern Fällen, die bald nach dem Tode 

 seziert wurden, wurde ein Teil des Magens in lOprozentige Formol- 

 lösung, ein anderer in ein Gemisch von Sublimat- Chromsäure und 



28* 




436 Referate. XXII, 3. 



Eisessig gelegt. Nachgebärtet wurde in Alkohol , eingebettet in 

 Paraffin. Scbuitte meist 10 fx. Färbung mit Hämatoxylin- Eosin 

 und nach van Gieson. Außerdem wurden sämtliche der Verfasserin 

 bekannte Schleimfärbemethoden durchprobiert. Gute Resultate nur 

 mit Thionin und Toluidinblau, die DissEsche Färbung gelang nicht 

 (Ursache wahrscheinlich die etwas verschiedene Konservierungsmethode). 

 Toluidinblau färbte sowohl nach Sublimat wie nach Formol, nach 

 letzterem intensiver. Mit Thionin gefärbte Präparate zeigten in Wasser 

 betrachtet eine blaurote Färbung des oberen Endes der Epithelzellen; 

 durch Alkohol wurde die Farbe sofort ausgezogen. Färbt man die 

 Schnitte mindestens 24 Stunden in einer verdünnten wässerigen Lö- 

 sung von Toluidinblau, entfärbt in verdünntem Alkohol, hellt mit 

 BergamottiU (nicht mit Xylol) auf und bettet in Kanadabalsam ein, 

 so färbt die Schleimschicht der Epithelzellen sich dunkelrot-violett 

 bis beinahe schwarz , die Zellkerne und das übrige Gewebe werden 

 blau, die Mastzellen rotviolett. Die Becherzellen des Darms färbten 

 sich prachtvoll schwarzviolett. Schiefferdecker (Bonn). 



Illing, Gr., Vergleichende histologische Untersuchungen 

 über die Leber der Haussäugetiere (Anat. Anz. Bd. 

 XXVI, 1905, No. 7, 8, p. 177 — 193 m. 1 Fig.). 

 Die Untersuchungen erstreckten sich auf eine größere Anzahl 

 verschiedener Haussäugetiere. Den soeben getöteten Tieren wurde 

 die Leber lebenswarm entnommen und es wurden würfelförmige 

 Stücke von nicht mehr als 0*5 cm Seite sofort in die Fixierungs- 

 flüssigkeit gebracht: Heiß gesättigte Sublimat-Kochsalzlösung, Zen- 

 ker sehe und Müller sehe Flüssigkeit. Die erste war die geeignetste, 

 die zweite ging auch noch an, die dritte ergab keine guten Resultate. 

 Nachhärtung in Alkohol. Paraffineinbettung. Schnitte von 5 jii Dicke. 

 Färbung mit Hämatoxylin-Eosin oder Hämatoxylin -Kongorot. 



Schiefferdecker (Bonn). 



Wllttig, H., Experimentelle Untersuchungen über F e 1 1 - 



aufnähme und Fettablage r ung (Beitr. z. pathol. 



Anat. u. z. allgem. PathoL Bd. XXXVII, 1905, H. 2, p. 378 



—410 m. 1 Tri. u. 3 Figg. im Text). 



Ausgewachsenen großen Kaninchen wurden in Chloralhydrat- 



narkose je 2 cc sterilisiertes auf 37^ erwärmtes Olivenöl in eine 



mittelgroße Mesenterialvene, einmal auch in die Vena lienalis injiziert. 



Nach 5 bis 12 Tagen Tötung der Tiere durch Nackenschlag, l'in 




XXII, 3. Referate. 437 



die Leber möglichst ihres physiologischen Fettgehaltes zu entledigen, 

 wurden die Tiere mit Ausnahme eines Kontrolltieres 3 Tage vor 

 dem Tode dem Hunger ausgesetzt. Unmittelbar nach dem Tode 

 wurden Stücke in Formol und Flemming scher Flüssigkeit fixiert, 

 erstere wurden gefroren geschnitten , letztere in Celloidin oder Pa- 

 raffin eingebettet. Gefärbt wurde mit Sudan III und Scharlach R in 

 konzentrierter alkoholischer (70prozentiger) Lösung, die Fixierung in 

 Osmiumsäure wurde mehr zum Vergleiche verwendet. Scharlach und 

 Sudan III sind vollständig gleichwertig; die Schnitte wurden her- 

 gestellt mit einem Jung sehen sogenannten Studentenmikrotome mit 

 Kohlensäure -Gefrierkammer. Bei guter Formolhärtuug und darauf- 

 folgender Auswässerung gelingt es so , von jedem Organ genügend 

 dünne Schnitte herzustellen, um eine Ölimmersion zu verwenden. 



Schieffei'decker {Bonn). 



Srdillko, 0. T., Eine sichere Methode zur Differen- 

 zierung der Rinden- und Markelemente der 

 Nebenniere, besonders bei Säugetieren und 

 Menschen (Anat. Anz. Bd. XXVI, 1905, No. 6, p. 172 

 —174 m. 1 Fig.). 

 Verf. hebt hervor, daß die Chromreaktion bei der Untersuchung 

 der Nebenniere von Säugetieren und vom Menschen vollständig im 

 Stiche läßt, da die dritte Schicht der Rinde (die Zona reticularis) 

 von Natur braun gefärbt ist, gerade so wie die Zellen der Mark- 

 substanz nach Chrom-Salzsäurelösung. Verf. hat seine früher schon 

 angegebene Hämatoxylinmethode infolgedessen soweit vervollkommnet, 

 daß man selbst Gruppen oder einzelne in der Rindenschicht ein- 

 gestreute Markzellen sicher unterscheiden kann. Methode: Die 

 Nebenniere des Menschen wird sobald als möglich nach dem Tode 

 herauspräpariert (längstens 24 Stunden) und in eine 4- bis öprozen- 

 tige Formollösung gebracht für 7 bis 14 Tage, Erneuerung der 

 Lösung alle 2 Tage. Kurzes Auswaschen (etwa 30 Minuten) in 

 destilliertem Wasser, 70prozentiger Alkohol 24 Stunden, 90prozen- 

 tiger Alkohol für die Dauer, bis zur Einbettung in Celloidin oder 

 Paraffin. Färbung der Celloidinschnitte mit der reifen Böhmer sehen 

 Hämatoxylinlösung (nach dem Rezept der Friedländer sehen Technik, 

 p. 104), die Zeit der Färbung schwankt zwischen einer bis 10 Mi- 

 nuten. Die überfärbten Schnitte zeigen zwar schon makroskopisch 

 eine Differenzierung zwischen Mark- und Rindensubstanz, eignen sich 

 aber nicht zu histologischen Untersuchungen. Am zweckmäßigsten 




438 Referate. XXII, 3. 



färbt man in einer Mischung- der genannten Häraatoxylinlösnng mit 

 destilliertem Wasser zu gleichen Teilen etwa 5 Minuten , dann Aus- 

 waschen von 5 Minuten in destilliertem Wasser, dann schließlich 

 Einschluß in Kanadabalsam. f]ventuell kann man solche Präparate 

 auch noch mit Eosin färben. Diese Hämatoxylinlösung kann man 

 auch nach andern Fixierungsflüssigkeiten verwenden, so nach Sublimat 

 oder Lösung von Carnoy, nach Formol wirkt sie aber am besten. 



Schiefferdecker {Bon n) . 



Pensa, A., Osservazioni sulla distribuzione dei vasi 

 sanguigni e dei nervi nel pancreas (Intern. Monats- 

 schr. f. Anat. u. Physiol. Bd. XXII, 1905, H. 1— 3, p. 90—126 

 m. 6 Tfln. u. 5 Figg.). 

 Verf. hat Tiere aus allen Wirbeltierklassen untersucht. Die 

 Blutgefäße wurden entweder an dem injizierten Pankreas studiert 

 oder besonders , um die Beziehungen zwischen den Blutgefäßen und 

 den Elementen der Langerhans sehen Inseln festzustellen, einfach 

 nach Fixierung und Färbung mit den gewöhnlichen Methoden. Zur 

 Fixierung wurden verwendet: die Flüssigkeit von Mingazzini, die 

 von GiLSON, die von Rabl, Sublimat- Essigsäure (5- bis lOprozentige 

 Essigsäure), Zenker sehe Flüssigkeit, Hermann sehe Flüssigkeit, Flem- 

 MiNGSche Flüssigkeit, die vier letzten erwiesen sich als die besten. 

 Gefärbt wurde außer mit den gewöhnlichen Methoden mit dem Eisen- 

 hämatoxylin von Heidenhain, nach der Methode von Mann, der von 

 BiONDi, der von Galeotti. Injiziert wurde mit der Karmingelatine 

 von Ranvier (Traite teclinique d'histologie , p. 103) der Karmin- 

 gelatine von Fol (Zeitschr. f. wiss. Zoologie 1883), der Berlinerblau- 

 Gelatinemasse von Ranvier (Traite technique d'histologie , p. 106), 

 der blauen Leiminjektionsmasse von Grübler , der roten Leiminjek- 

 tionsmasse (nach Spalteholz) von Grübler. Die Injektionen wurden 

 ausgeführt bei den Fischen vom Bulbus arteriosus aus , bei den 

 Reptilien und Vögeln direkt vom Herzen aus , bei den Säugetieren 

 vom letzten Ende der Aorta abdominalis aus. Die Veneninjektionen 

 wurden ausgeführt von einigen Ästen der Venae meseutericae aus. 

 Alkoholhärtung und Celloidineinbettung. Um die Langerhans sehen 

 Inseln deutlich zu machen, bediente sich Verf. der Thionin- Karbol- 

 färbung von Grand- Mourcel und Tribondeau^ oder der aufeinander- 

 folgenden Färbung mit Thionin und Pikrinsäure von Perdigeat und 



1) C. R. de hl Soc. d. Biol. t. LIII, no. 7, Paris. 




XXII, 3. Referate. 439 



Triboxdeau. ^ Gute Gefäßinjektionen wurden auch erhalten durch 

 ziemlich allmähliche Injektion von Leinöl und darauffolgende Fixierung 

 in osmiumhaltigen Flüssigkeiten (Hermann scher und Flemming scher 

 Flüssigkeit). Auch diese Stücke können in Paraffin eingeschlossen, 

 geschnitten und mit allen jenen Färbungen behandelt werden, welche 

 nach diesen F'ixierungsflüssigkeiten anwendbar sind. Diese Methode, 

 welche eine ausgezeichnete Fixierung und gute Färl)ungen gestattet, 

 erwies sich besonders vorteilhaft bei der Untersuchung der genauen 

 Beziehungen zwischen den Blutgefäßen und den Elementen der Langer- 

 hans sehen Inseln. — Zum Studium der Nerven verwandte Verf. die 

 direkte und die indirekte schnelle GoLGische Chromsilbermethode. 

 Mit der schnellen indirekten Methode waren die Resultate feiner und 

 vollständiger. Am praktischsten erwies sich dabei die Behandlung 

 mit einer halbgesättigten Lösung von Kupfersulfat und darauffolgender 

 Übertragung der Stücke in Kaliumbichromat vor der Übertragung in 

 Silbernitrat. Scliiefferdecker {Bonn). 



Schmidt, J. E. , Beiträge zur normalen und pathologi- 

 schen Histologie einiger Zellarten der Schleim- 

 haut des menschlichen Darmkanales (Arch. f. 

 mikrosk. Anat. Bd. LXVI, 1905, p. 12 — 40 m. 1 Tfl.). 

 Außer Sublimatmaterial wurde hauptsächlich das in einem Ge- 

 misch aus MtJLLER scher Flüssigkeit und Formol fixierte untersucht, 

 daneben solches aus 10- oder 4prozentigem Formol und aus Alko- 

 hol. Die mit Glyzerin- Eiweiß aufgeklebten Schnitte wurden meist 

 mit Hämatoxylin-Eosiu , Hämatoxylin-Mucikarmin , Alaunkarmin oder 

 nach VAN Gieson gefärbt. E. Schoebel {Neapel). 



Abrikossoff, A. J. , Über die ersten anatomischen Ver- 

 änderungen bei Luugenphthise (Virchow s Arch. 

 Bd. CLXXVIII, 1904, H. 2, p. 173— 263' m. 1 Tfl.). 

 Es wurden Stückchen aus den Lungen und Lymphknoten ein- 

 gelegt. Zum Zwecke des Studiums der Verbreitung der Tuberkel- 

 bazillen aus den tuberkulösen Drüsen wurden Stücke aus letzteren 

 zusammen mit den anliegenden Bronchial- und Gefäßwänden ent- 

 nommen ; Härtung in öprozentiger FormoUösuug , Celloidin-, seltener 

 Paraffineinbettung; Färbung der Schnitte mit Hämatein und Eosin, 



^) Extrait des proces verbaux de la Soe. Linneenne de Bordeaux, 

 t. LV, seance, 26 oct. 1900. 




440 



Referate. XXII, 3. 



sowie auf Tuberkelbazillen nach Ziehl. Lungeiistückchen wurden in 

 der ersten Zeit gehärtet in der von Arrigo und Stampachia speziell 

 für tuberkulös affizierte Gewebe empfohlenen Flüssigkeit: Nach der 

 Ansicht dieser Autoren wird durch Härtung in 2prozentiger spiri- 

 tuöser (90prozentiger) Pyrogallussäurelösung eine vollendetere Färbung 

 der Tuberkelbazillen erzielt und weniger als mit andern fixierenden 

 (Spirituosen) Flüssigkeiten das Gewebe zur Schrumpfung gebracht. 

 Verf. überzeugte sich indessen, daß bei Verwendung der genannten 

 Flüssigkeit das Pyrogallol die Eigenschaft besitzt, die Gewebe braun 

 zu färben ; diese Färbung bleibt sogar nach gründlicher Spülung mit 

 Alkohol zurück und ist bei der nachfolgenden Färbung der Schnitte 

 sehr störend; ferner erhält man bei Einbettung der Stücke, welche 

 eine käsige Masse enthalten und in der PyrogalloUösung fixiert 

 worden sind, in Paraffin eine so feste Konsistenz, daß Schnitte 

 schwer herzustellen sind. Die HAVEMSche Sublimatlösung ist nur 

 für sehr kleine Stückchen brauchbar und unterscheidet sich in ihrer 

 Wirkung nicht von der gewöhnlichen Sublimatlösung in physiologi- 

 scher Kochsalzlösung. Verf. hat weiter die Methode von Aufrecht 

 geprüft : Härtung in öprozentiger Lösung von Kaliumbichromat, Auf- 

 leimen des Stückchens zum Schneiden auf einem Kork; diese ist 

 (ohne Einbettung in Celloidin oder Paraffin) völlig untauglich für 

 feine Schnitte oder Serienschnitte. Da Verf. häufig Stücke von be- 

 deutender Dicke zu härten hatte, benutzte er am häufigsten eine 

 ,'iprozentige Formollösung: Nur wo es möglich war, ein sehr kleines 

 Stückchen zu nehmen, verwandte er eine gesättigte Sublimatli)sung 

 in Kochsalzlösung (24 Stunden im Ofen bei 37*^). Verf. hebt her- 

 vor, daß bei vergleichender Bazillenfärbung ein Unterschied zwischen 

 der Härtung nach Arrigo und Stampachia und der einfachen Formol- 

 härtung nicht zu finden war. Sämtliche Lungenstückchen wurden in 

 Paraffin eingebettet, die Serienschnitte auf den Objektträgern nach 

 Gaule aufgeklebt, das Paraffin mit Xylol entfernt. Zur Probefärbung 

 wurde Hämatein und Eosin verwendet. Um die Strukturverhältnisse 

 in dem von dem tuberkulösen Prozesse befallenen Bezirke des Lungen- 

 gewebes mögliclist klar zu stellen, wurden die Serienschnitte mit 

 Methoden zur Färbung des elastischen Gewebes behandelt : Entweder 

 der Weigert sehe Farbstotf mit vorhergehender Karminfärbung der 

 Kerne oder weit häufiger der von Minervini. Bei letzterem entfärbt 

 sich bei der Differenzierung das übrige Gewebe viel vollkommener 

 als bei der WEiGEUTSchen Methode, -es treten daher die elastischen 

 Fasern sehr deutlich bis zu ihren feinsten Verzweigungen hervor. 




XXIT, 3. Referate. 441 



Ferner werden die Kerne bei der Minervini sehen Methode vorlier 

 mit HämateVn gefärbt, wodurch ein weit deutlicheres Bild entsteht 

 als bei der Karrainfärbung mit der WEiGERx-Methode. Ferner färbte 

 Verf. auf Tuberkelbazillen : Aus der nach Minervini gefärbten Serie 

 Avurde jeder 10. bis 20. Schnitt genommen, der Reihe nach auf den 

 Objektträger gebracht .und nach Ziehl gefärbt. Sehr schöne Prä- 

 parate wurden bei kombinierter Färbung der elastischen Fasern, Ba- 

 zillen und Zellkerne erhalten : Färbung der Serienschnitte (auf Objekt- 

 trägern) in Karbolfuchsin nach Ziehl (30 Minuten im Ofen bei 37''), 

 Entfärbung mit 25prozentiger Schwefelsäurelösung, gründliches Aus- 

 waschen in Wasser, Färbung in der Lösung von Minervini (4.5 bis 

 60 Minuten), Differenzierung in 85prozentigem Alkohol, Kernfärbung 

 in wässeriger Methylenblaulösung. Die rosarot gefärbten, elastischen 

 Fasern waren gut von den himbeerrot gefärbten Bazillen zu unter- 

 scheiden. Schiefferdecker {Bonn). 



Pigllini, G. , Sur l'origine et la formation des ceUules 

 nerve uses chez les embryons des Selaciens 

 (Bibliogr. anat. t. XIV, 1905, fasc. 1, p. 94—105 av. 

 3 figg.). 

 Die Untersuchungen des Verf. beziehen sich auf folgende 

 sechs Arten: Pristiurus melanostomus , Torpedo ocellata, Scyllium 

 canicula, Scyllium catulus, Mustelus vulgaris, Mustelus laevis. Fixiert 

 wurde stets mit einer gesättigten Sublimatlösung. In dieser ver- 

 blieben die kleinsten Embryonen (nicht größer als 6 bis 7 mm) 

 eine halbe Stunde'; die größeren (von 8 bis 14 m) eine Stunde; 

 solche über 2 cm höchstens 3 Stunden; diese letzteren wurden außer- 

 dem der Quere nach in Stücke von 3 bis 4 mm Dicke zerlegt, um 

 die Fixierungsflüssigkeit besser eindringen zu lassen. Was die Färbung 

 anlangt , so wird diese verschieden ausgeführt , je nach der Größe 

 der Embryonen. Die Embryonen, welche nicht größer als 3 cm 

 sind , werden in toto gebeizt , bei denen über 3 cm beizt man die 

 Schnitte. Weitere Behandlung: 1) Embryonen von 4 bis 

 30 m ra. Aus dem Jodalkohol überträgt man in destilliertes Wasser, 

 das man während der 15 bis 30 Minuten des Auswaschens zweimal 

 wechselt. Dann überträgt man in die folgende Beize : 



Sublimat, 4prozentige Lösung 10 cc 



Ammonluramolybdat (Merck), 4proz6ntige 



Lösung 40 ,, 



Salzsäure 12 Tropfen. 




442 Referate. XXII, 3. 



Je nach ihrer Länge verbleiben die Elmbryonen darin 2 bis 6 Stun- 

 den; dann gründliches Auswaschen in destilliertem Wasser (1 bis 

 3 Stunden), dann steigender Alkohol, Xylol, Einschluß in Paraffin 

 (Temperatur nicht über 52*^), Färbung der Schnitte in einer Lösung 

 von Thionin oder Toluidinbhiu von 1 : 5000. Die Thioninlösung ist 

 vorziehbar. Nachdem die Präparate 15 Minuten in der Farbflüssig- 

 keit gewesen sind , muß man die weitere Färbung mit dem Mikro- 

 skope kontrollieren. Ist die Färbung genügend, so werden die Schnitte 

 schnell in Wasser abgewaschen und für einige Sekunden in gewöhn- 

 lichen Alkohol (alcool ordinaire) gebracht, um eine schärfere Differen- 

 zierung zu erhalten. Neues Eintauchen in Wasser und Übertragen 

 für 15 Minuten in eine 4prozentige Lösung von Ammoniummolybdat, 

 der man 2 bis 3 Tropfen Salzsäure zusetzt; hierdurch wird die 

 Farbe stark fixiert ; dann sorgfältiges Auswaschen in Wasser , Ent- 

 wässerung in steigendem Alkohol, Xylol, Balsam. 2) Embryonen 

 von mehr als 3 cm Länge. Nach Jodalkohol steigender Alkohol 

 und Paraffineinschluß. Die mit Wasser auf deu Objektträger auf- 

 geklebten Schnitte kommen für wenigstens 18 Stunden in die 

 fols'ende Beize : 



*o 



Sublimat, 4prozentige Lösung 50 cc 



Ammoniummolybdat (Merck), 4prozentige 



Lösung 100 „ 



Salzsäure 25 Tropfen. 



Nach gründlichem Auswaschen in destilliertem Wasser färbt man 

 wie oben. — Bei dieser Methode werden alle Elemente des Nerven- 

 systems samt ihren Fortsätzen gefärbt, und man vermag diese letz- 

 teren zu verfolgen von dem ersten Stadium der bipolaren, spindel- 

 förmigen Zelle an (von den Zellen , welche zuerst die Nervenrinne 

 bilden) bis zu der Differenzierung in Nerven- oder Neurogliafasern. 



Schiefferdecker {Bonn). 



Valedinsky, I. A., Zur Frage über die Nervenknoten im 



Herzventrikel einiger Säugetiere. Vorläufige 



Mitteilung (Anat. Hefte, Heft 81 [Bd. XX VH, H. 1] 



1904, p. 287—293 m. 2 Tfln.). 



Es ist immer noch zweifelhaft, ob und in welcher Ausdehnung 



sich Nervenknoten im Herzen finden. Verf. hat daher von neuem 



diese Frage in Angriff genommen. Das Herz eines eben getöteten 



Tieres wurde in Tprozentige wässerige KarboUösuug getan (nach 



Shuk). Diese Prozentzahl entspricht nicht der Löslichkeit des Phenols, 




XXII, 3. Referate. 443 



die etwas niedriger liegt. So wurden die Nerven des Ventrikels ge- 

 liärtet nnd traten auf der ganzen Oberfläche sehr deutlich hervor. 

 In ihrem Verlaufe teilen sich die Nerven vielfach und bilden Anasto- 

 mosen mit benachbarten Nervenstämmen. Im Verlaufe der Stämme 

 und häutiger noch an den Stellen der Anastomosen können mit 

 bloßem Auge sichtbare Verdickungen wahrgenommen werden. Nach 

 genügender Einwirkung der Karbolsäurelösung (die Zeitdauer ist nicht 

 angegeben) befreite Verf. in einem Teile der Fälle mittels einer 

 anatomischen Pincette irgendeinen Nervenstamm von dem ihn um- 

 gebenden Gewebe des Perikards, zog ihn hervor und legte ihn auf 

 24 Stunden in Pikrokarmin, dann leichtes Abspülen in Wasser, an- 

 gesäuertes Glyzerin, Zerzupfen in diesem mit Nadeln, Aufheben in 

 demselben Glyzerin. In einem anderen Teile der Fälle schnitt Verf. 

 den Nerven mit einem Teile des Perikardiums und Myokardiums 

 aus und bettete die Stückchen in Celloidin ein ; dann Mikrotomschnitte 

 parallel der Oberfläche des Perikards, Färbung mit Hämatoxylin-Eosin. 

 Die erstere Behandlung wurde da angewendet , wo die Nerven des 

 Ventrikels mehr oder weniger dick waren, häufige Verdickungen auf- 

 wiesen und sich leicht zerzupfen ließen , wie dieses in den oberen 

 Teilen des Ventrikels der Fall ist. Die zweite Art der Behandlung 

 wurde angewendet bei der Untersuchung der Herzspitze, wo die Nerven 

 dünn sind und der Herstellung von mikroskopischen Zupfpräparaten 

 größere Schwierigkeiten bieten. Schiefferdecker [Bonn). 



Ramöu y Cajal, S., y Grarcia, D. D., Las lesiones del reti- 

 culo de las c einlas nerviosas en la rabia (Trab. 

 Labor. Investig. Biol. Madrid t. III, 1904, fasc. 4, p. 213 

 —266 c. 28 figg.). 

 Um die Veränderungen in den Nervenzellen bei der Hundswut 

 (Kaninchen, Hund) festzustellen, kann man zunächst die gewöhnliche 

 von Cajal angegebene Methode benutzen : Die Stücke kommen für 

 3 Tage in eine Silberlösung von 1*5 Prozent (im Ofen bei 28 *' bis 

 40*^), kurzes Abwaschen in destilliertem Wasser, 24 Stunden in die 

 Pyrogallol-Formolmischung, dann Abwaschen in Wasser ein paar Mi- 

 nuten lang, 6 Stunden in Alkohol, dann Aufkleben der Stücke, ohne 

 sie in Celloidin einzubetten, mit einem heißen Skalpell auf einen 

 Parafiinblock. Von den Schnitten, die man auf diese Weise erhält, 

 soll man weder die oberflächlichen noch die tiefen, sondern die mitt- 

 leren untersuchen, welche hellbraun gefärbt sind. Auf diese Weise 

 färben sich die hypertrophischen Neurofibrillen bis zu den kleinen 




444 Referate. XXII, 3. 



Nervenzellen liin. Indessen muß man , um gute Präparate zu er- 

 halten, die folgenden Regeln beobachten: 1) Die Stücke des Nerven- 

 gewebes dürfen höchstens 2 bis 3 mm dick sein, und es dürfen nicht 

 mehr als 5 bis 6 in die Silberlösung eingelegt werden. 2) Die 

 Menge der Silberlösung soll groß sein im Verhältnis zu den Stücken; 

 so soll man z. B. für 4 bis 6 Nervenstückchen 150 bis 200 cc der 

 Silberlösung verwenden. 3) Wenn man am Hunde arbeitet, und die 

 Nervenstücke verhältnismäßig groß sind , so soll man dieselben in 

 verschiedene Stücke zerlegen und die Einwirkungszeit der Silber- 

 lösung vergrößern (um einen bis 2 Tage). — Wenn man nicht sehr 

 rasch arbeiten muß, ist die Methode mit Fixierung in Alkohol noch 

 vorziehbar. Man erhält mit dieser eine größere Anzahl von brauch- 

 baren Schnitten , fast durch das ganze Stück durch , mit einziger 

 Ausnahme der oberflächlichsten. Man erhält ferner neben dem Zell- 

 netze auch alle markhaltigen und einen großen Teil der marklosen 

 Nervenfasern gefärbt. Man erhält weiter in vielen Zellen eine sehr 

 scharfe und ausschließliche Färbung der hypertrophischen Neuro- 

 fibrillen. Endlich, und das ist ein unschätzbarer Vorteil, kann man 

 für diese Färbung auch Stücke verwenden , die schon eine Reihe 

 von Tagen in Alkohol gelegen haben , und das ist bei den Verhält- 

 nissen, welche notwendigerweise in den zur Heilung der Hundswut 

 errichteten Instituten herrschen, sehr wichtig. Die Organe des Nerven- 

 systems werden am besten in einem Alkohol von 40^ (Cartier) oder 

 in absolutem Alkohol gehärtet. Im übrigen wird nach den früher von 

 Cajal gemachten Angaben verfahren. ScMefferdecker {Bonn). 



ßamon y Cajal, S., N e u r o g 1 i a y n e u r o f i b r i 1 1 a s d e 1 l u m - 

 bricus (Trab. Labor. Investig. Biol. Madrid t. III, 1904, 

 fasc. 4, p. 277—285 c. 4 iigg.). 

 Die nervösen Organe von Lumbricus müssen eine andere che- 

 mische Beschaffenheit besitzen als die von Hirudo, denn sie ergeben 

 mit der von Cajal angegebenen Silbermethode nieüaals eine Färbung 

 der Neurofibrillen, wie sie bei Hirudo so gut gelingt. Die gewöhn- 

 liche Methode (direkte Silberfärbung in 3- bis Gprozentiger Lösung, 

 3 Tage im Ofen) läßt nur die Holmgren sehen Kanälchen vortreten. 

 Dagegen ergibt sich eine schöne Neurogliafärbung, wenn man vorher 

 mit P^ormol oder mit Formol und Ammoniak fixiert: 1) Stücke vom 

 Regenwurm kommen für 24 Stunden bei Stubentemperatur in die 

 folgende Mischung: Destilliertes Wasser 40 cc ; Formol 10 cc; Am- 

 moniak 4 bis 6 Tropfen. 2j Mehrstündiges Auswaschen der Stücke 




XXII, 3. Referate. 445 



ia destilliertem Wasser. 3) Übertragen in eine Sprozentige Silber- 

 lösimg, 4 bis 5 Tage im Ofen bei 30*' bis 35**. 4) Reduktion in 

 der Pyrogallol-Formolmisclmng etc. Wenn man die Stücke nach 

 Behandlung mit der für die Forraol -Ammoniakfixierung angegebenen 

 PyrogalloUösung 6 bis 24 Stunden lang in Alkohol legt, und dann 

 in eine 0"2prozentige Lösung von neutralem Goldchlorid (für 2 Tage), 

 so erhält mau eine violette Imprägnierung der Neurofibrillen in 

 den Clanglienzellen. Diese Reaktion entsteht durch den Nieder- 

 schlag des Goldes durch den Rest des Pyrogallols , der von dem 

 Alkohol aus den Stücken nicht ausgezogen worden ist. Wie alle 

 Goldfärbungen der Neurofibrillen, so ist auch diese unsicher. In den 

 wenigen Fällen, in denen Verf. gute Präparate erhalten hat, handelte 

 es sich immer um kleine oder junge Regenwürmer. Verf. ist noch 

 dabei , die Bedingungen zu untersuchen , welche für die Herstellung 

 guter Präparate nötig sind. ScMefferdecker [Bonn). 



Tarela de la Iglesia , ß. , C o n t r i b u c i ('> n a 1 e s t u d i o d e 1 a 



medula espinal (102 pp., c. 22 laminas en fototipia. 

 Madrid 1904, Ricardo Fe [Der Text ist spanisch und fran- 

 zösisch]). 

 Verf. hat versucht das Nervenmark aufzulösen und dann die 

 gewöhnlichen Färbungsmethoden mehr oder weniger modifiziert an- 

 zuwenden. Die Rückenraarkstücke wurden fixiert in MtJLLER scher 

 Flüssigkeit und dann in steigendem Alkohol gehärtet in gewöhnlicher 

 Weise ; noch besser wirkt die Fixierung in der Kultschizky sehen 

 Flüssigkeit. Auch "kann man in einer gesättigten Lösung von Kupfer- 

 acetat und Kaliumbichromat in 50prozentigem Alkohol fixieren und 

 dann in steigendem Alkohol nachhärten , wobei man jede Lichtein- 

 wirkung vermeidet. Auch die Methode von IIaug^ liefert sehr schöne 

 Resultate. Alle Flüssigkeiten, bei denen Kupfersalze verwendet wer- 

 den , sind brauchbar. Die fixierten , gehärteten und entwässerten 

 Objekte wurden für einige Tage in Schwefelkohlenstoff oder Chloro- 

 form gebracht. Sodann Avurden die Stücke in immer stärker kon- 

 zentrierte Lösungen der Einbettungsmasse gebracht , schließlich in 

 diese in reinem Zustande bis sie durchtränkt waren. Als Eiubettungs- 

 masse wurde im allgemeinen Pfianzenwachs („Gera vegetal", „cire 

 vegetale"), welches in bestimmter Weise behandelt war, verwendet. 

 Verf. gibt verschiedene Methoden an , um dieses Pflanzenwachs in 



1' Vgl. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890. p. 154. 




446 Referate. XXII, 3. 



richtiger Weise herzustellen. Er hat jene Sorte genommen, welche 

 in seiner Heimat (Santiago) als „cera del Japon" bezeichnet wird. 

 Eine sehr gute Masse wurde aus diesem Stoife erhalten durch Be- 

 handlung derselben mit Chloroform. Welche Methode der Behand- 

 lung dieses Pflanzenwachses auch angewandt wurde, so wurde schließ- 

 lich die Masse von ihren flüssigen Teilen durch Auspressen befreit 

 und auf ein Schälchen gebracht, das man, bis zur völligen Verdunstung 

 der Flüssigkeit, in den Ofen stellte. Wurde Paraffin angewendet, 

 so wurde Schwefelkohlenstoff als Lösungsmittel gebraucht, bei Pflanzen- 

 wachs dagegen Chloroform. Die 5 bis 10 ju dicken Schnitte wurden 

 auf dem Deckgläschen befestigt, bald mittels des STRASSERschen 

 Kollodiums No. 0^, bald mittels der Methode von Fraenzel^ (Lösung 

 von Gummi arabicum mit Zusatz von wässeriger Lösung von Chrom- 

 alaun). Die so behandelten Deckgläschen wurden in Chloroform 

 gebracht zur Härtung des Kollodiums, zur Lösung des Pflauzeuwachses 

 und hauptsächlich zur Einwirkung auf das Nervenmark (12 bis 24 Stun- 

 den mit zwei- bis dreimaliger Erneuerung der Flüssigkeit, ein längerer 

 Aufenthalt schadet nichts). Mit Schwefelkohlenstoff wurde ebenso 

 verfahren, und zwar noch nach der Behandlung mit Chloroform. 

 Dann wurden die Deckgläschen an der Luft liegen gelassen, bis der 

 Schwefelkohlenstoff vollständig verdunstet war, darauf wurden sie 

 mit einer Mischung von gleichen Teilen von 96- bis 98prozentigem 

 Alkohol und Benzin befeuchtet und darauf mit 95prozentigem Alkohol. 

 Hierauf übertragen durch immer schwächere Alkohole bis in die zur 

 Beizung nötige Flüssigkeit. Gebeizt und gefärbt wurde nach der 

 Methode von Wolters^ (Vanadiumchlorid mit Aluminiumacetat, Hä- 

 matoxylin-Essigsäure, Salzsäurealkohol). Verf. bespricht dann weiter 

 eingehend die Behandlung und Aufbewahrung von Serienschuitten in 

 verschiedener Weise , weswegen auf das Original verwiesen wird. 



ScMefferdecker ( Bonn) . 



Donaldsoll, H. H. , a. Hoke, G. W. , On the Areas of the 

 A X i s C i 1 i n d e r and m e d u 1 1 a r y S h e a t h a s s e e n in 

 cross Sectio US of the Spinal Nerves of Verte- 

 b rat es (Journ. Compar. Neurol. and Psychol. vol. XV, 

 1905, no. 1, p. 1—16 w. 1 flg.). 



1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 309. 



-) BoLLES Lee et Henneguy, Traite des methodes techniques. 



•') Vgl. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 471. 




XXII, 3. Referate. 447 



Die Nerven wurden Tieren aus allen Wirbeltierklassen ent- 

 nommen , welche durch Chloroform getötet wurden. Die Nerven, 

 gewöhnlich vom Armijlexus , wurden freigelegt und teilweise in situ 

 mit einprozentiger Osmiumsäurelösung fixiert. Nach einer halben 

 Stunde wurde der Nerv herausgenommen und auf ein Stück Karton 

 übertragen, um Schrumpfung zu verhindern, und wieder in eine ein- 

 prozeutige Osmiumsäurelösung für 24 Stunden gebracht. Die 3 bis 

 5 im. dicken Schnitte wurden in Kolophonium aufgehoben. 



Seh iefferdecker ( Bonn) . 



Ruf fini , A, , Di u n a n u v a g u a i n a [ g u a i n a s u s s i d i a r i a ] 

 nel tratto terminale delle fibre nervöse di 

 senso nell'uomo (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXXIX, 

 1905, p. 150—170 c. 2 tavv.). 

 Zur Darstellung der neuen Nerveuscheide bringt man am besten 

 kleine Stücke Haut oder Muskeln für wenigstens eine halbe Stunde 

 in ein frisch bereitetes Gemisch aus 66 Teilen lOprozentiger Ameisen- 

 säure (oder falls die vorhandene Säure keine konzentrierte ist, der 

 Verdünnung entsprechend höhere Prozente), und 34 Teile gesättigter 

 Sublimatlösung und dann nach flüchtigem Waschen in fließendem 

 Wasser für 20 oder 40 Minuten in eine einprozentige Lösung von 

 Goldchlorid. Nach sorgfältigem Abtrocknen der Stücke mit Fließ- 

 papier oder einem reinen Tuch werden sie 12 bis 15 Stunden mit 

 einprozentiger Ameisensäure in einem Glasgefäß behandelt und dann, 

 ohne die Flüssigkeit zu wechseln , 6 bis 8 Stunden den direkten 

 Sonnenstrahlen ausgesetzt; hierbei dreht man das Gefäß von Zeit 

 zu Zeit , damit die Stücke gleichmäßig von allen Seiten besonnt 

 werden. Nach Ablauf der entsprechenden Zeit trocknet mau wieder 

 sorgfältig mit Fließpapier ab und bringt die Objekte für 8 bis 10 Tage 

 in Glyzerin, um sie nachher zu zerzupfen und in Glyzerin einzuschließen. 

 Bei gelungener Färbung ist die Markscheide dunkelviolett, bei stär- 

 kerer Färbung fast schwarz , bei leichter Färbung rötlichviolett , die 

 Hilfsscheide hellviolett , stellenweise mit einem Stich ins Rosa , die 

 HENLESche Scheide rosa mit einem leichten Schein ins Violett. 



E. Schoebel {Neapel). 



London, E. S. , Zur Lehre von dem feineren Bau des 

 Nervensystems (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXVI, 

 1905, p. 111—115 m. 1 Tfl.). 

 Als Untersuchsmaterial wurden Blutegel, Maus und Hund benutzt. 




448 Referate. XXII, P,. 



Außer der Ap.athy sehen Goldmethode, die leider nur selten be- 

 friedigende Resultate gab, kam vor allem die neue Ramon y CAjALsche 

 Fibrillenraethode zur Anwendung, die nach den Erfahrungen des Verf. 

 am besten in folgender Weise ausgeführt wird : Stücke beliebiger 

 Größe, sogar ganze Tiere, wenn es sich um embryologische Studien 

 handelt, kommen in ammoniakhaltigen Alkohol (4 cc Ammoniak, 96 cc 

 Alkohol). Nach 24 Stunden werden die Stücke in Scheiben von 

 2 bis 3 mm Dicke zerlegt und in frischen ammoniakhaltigen Alkohol 

 gebracht, wo sie weitere 24 bis 48 Stunden verbleiben. Nach 5 bis 

 10 Minuten langem Auswaschen in destilliertem Wasser wird im 

 Brutschrank bei 35 bis 37^ C. 3 bis 6 Tage mit l^/^prozentiger 

 Silbernitratlösung imprägniert , dann nach sorgfältigem Abtrocknen 

 mit Fließpapier bei diffusem Licht mit PyrogalloUösuug (2 g Pyro- 

 gallol, 5 cc Formol, 100 destilliertes Wasser) behandelt und dann 

 durch die verschiedenen Alkohole und Chloroform in Paraffin über- 

 geführt und eingebettet. Die vom Paraffin befreiten Schnitte werden 

 dann 5 bis 10 Minuten mit einprozentiger Goldchloridlösung ver- 

 goldet und schließlich noch die gleiche Zeit mit einer öprozentigen 

 Lösung von unterschwef ligsaurem Natron behandelt und in üblicher 

 Weise eingeschlossen. So bearbeitete Stücke sind frei von Nieder- 

 schlägen und liefern fast durch die ganze Dicke des Stückes be- 

 friedigend gefärbte Schnitte. E. Schoebel (Neapel). 



C. Bakterien, 



Koch , A. , Jahresbericht über die Fortschritte in der 

 Lehre von den Gärungsorganismen. Jahrg. XIII, 

 1902. Leipzig (S. Hirzel) 1905; VIII u. 672 pp. 16 M. 

 Der vielseitige Inhalt des Jahresberichts berührt die Interessen 

 unserer Zeitschrift vornehmlich in dem Abschnitt, der über „Arbeits- 

 verfahren , Apparate etc." handelt und in dem einige neue Färbe- 

 verfahren zur Sprache kommen. Auf die betreffenden Referate sei 

 um so mehr verwiesen , als nicht über alle im „Jahresbericht" be- 

 sprochenen Arbeiten in den Bänden dieser Zeitschrift berichtet worden 

 ist. Im besonderen machen wir aufmerksam auf v. Wendts Methode 

 „Bakterien ohne Trocknen an Deck- und Objektgläser zu fixieren" 

 (Zentralbl. f. Bakteriol. Bd. XXXI), bei welcher die Bakterien durch 

 koagulierendes Eiweiß , das als Eiweißglyzerin auf die Gläser auf- 




XXII, 3. Referate. 449 



g-etrageii wird , befestigt werden und iiiclit solche Struktiirverände- 

 riingen erfahren, wie beim Fixieren durcli Trocknen. Ficicer (Hygien. 

 Kund seh.) färbt die Körnchen der Bakterien mit Methylenblau-Milcli- 

 säure, die durch Kampferzusatz haltbar gemacht wird. Guiraud und 

 Gautie (C. R. Soc. Biol. 1901) beschreiben eine Methode zur Färbung 

 alten schwer tingierbaren Bakterienmaterials. — Auch auf die Kapitel 

 Nährböden, Sterilisation, Thermostaten, Züchtung von Anaerobien sei 

 verwiesen. Küster (Halle a. S.). 



Giemsa, G., Eine Vereinfachung und Vervollkommnung 

 meiner M e t h y 1 e n a z u r - Methylenblau - E o s i n - 

 Färbemethode zur Erzielung der Romakowsky- 

 NocHTSchen - Chromatinfärbung (Zentralbl. f. Bak- 

 teriol, Abt. 1, Orig. Bd. XXXVII, H. 2, p. 308). 

 Die bisher von dem Verf. angegebenen Färbemethoden waren 

 — auch nach seiner eigenen Ansicht — nicht frei von störenden 

 Niederschlägen und Ungenauigkeiten, so daß auch nicht allseitig gute 

 Resultate bei der Chromatinfärbung erzielt wurden. Durch zweck- 

 mäßiges Ausprobieren empfiehlt jetzt Giemsa seine neue Farblösung 

 unter dem Namen „GiEMSASche Lösung für die RoMANOwsKv-Färbung"; 

 sie wird folgendermaßen hergestellt: 



Azur II- Eosin 3-0 g- und 



Azur II 0-8 „ 



werden im Exsikkator unter Schwefelsäure getrocknet, aufs feinste 

 gepulvert, durch ein feines Sieb getrieben und in 



Glyzerin (Merck ehem. rein) 250-0 g 



bei 60 ^^ unter Schütteln gelöst, hierauf wird 



Methylalkohol (Kahlbaum I) 250 g 



hinzugefügt, den man vorher auf 60*^ erwärmt hat, gut geschüttelt, 

 24 Stunden bei Zimmertemperatur stehen gelassen und filtriert. Die 

 Ausführung der Färbung geht dann folgendermaßen vor sich : 



1) Härtung des lufttrockenen Ausstrichs in Äthyl oder — 2 bis 

 3 Minuten — Methylalkohol. 



2) Verdünnung der fertigen Farblösung mit Wasser in einem 

 weiten graduierten Reagensglas (1 Tropfen der Farblösung auf etwa 

 1 cc Aq. dest.), wobei man am besten eine TropfHasche benutzt. 



3) Übergießen der Präparate mit der frischen verdünnten Lö- 

 sung (10 bis 15 Minuten). 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 3. 29 




450 Referate. XXII, 3. 



4) Abwaschen in «charfem Wasserstrahl, 



5) Abtupfen mit Fließpapier, trocken werden lassen und ein- 

 betten in Kanadabalsam. W. Hoffmanu (Berlin). 



Zlatogoroif, S. J. , Zur Mikrobiologie der Masern (Zen- 

 tralbl. f. BakterioL, Abt. 1, Orig. Bd. XXXVII, H. 2, p. 249). 



Obwohl schon von einer größeren Zahl von Autoren bei Masern- 

 erkrankungeu teils Protozoen, teils Bakterien gefunden sind, ist doch 

 eine Einigung auf diesem Gebiete bisher noch nicht erfolgt. Verf. 

 hat sich deshalb erneut der Ätiologie der Masern zugewendet und 

 bei ca. 30 Masernkrauken den Nasenschleim, das Konjunktivalsekret 

 und das Blut untersucht, und zwar in demjenigen Krankheitsstadium, wo 

 Fieber und die katharrhalischen Erscheinungen auf dem Höhepunkt waren. 

 Er benutzte neben Glyzerinagar auch Blut- und Ascitesnährböden. 



In dem Nasenschleim fand er nur einmal eine Bakterienart, 

 die dem im Blut und im Konjunktivalsekret gefundenen ähnlich war. 

 Aus dem Augenbindehautsack wuchs gewöhnlich das Xerosestäbchen, 

 sowie ein diesem sehr ähnlicher, aber sehr wenig widerstandsfähiger 

 Bacillus , der auf den Nährböden äußerst kümmerlich wuchs und 

 bald einging. 



Von dem Blut wurde stets 1 cc auf 25 bis 150 cc Nährflüssig- 

 keit geimpft. 17 mal konnte ein Bacillus von folgenden Eigenschaften 

 isoliert werden. Färbbarkeit mit den gewöhnlichen Anilinfarbstoffen 

 und nach Gkam. Er ist wenig beweglich, liegt gewöhnlich in Doppel- 

 exemplaren oder in Gruppen , zeigt hier und da Polfärbung. Er 

 wächst in flüssigen Nährböden als feinflockiger Niederschlag, am 

 besten zwischen 36 und 37 '^ C. Er ist wenig beweglich und bildet 

 keine Sporen. Er geht auf den Nährböden, selbst den optimalsten, 

 leicht zugrunde. Die Tierversuche sind nicht eindeutig. Bei Kontroll- 

 untersuchungen konnte diese Bakterienart niemals gefunden werden. 



Verf. ist hiernach nicht in der Lage , ohne weiteres diesen 

 Bacillus mit den Masernerkrankungen in ätiologische Beziehung zu 

 bringen und behält sich eine kritische Würdigung seiner Befunde 

 im Vergleich mit den bisher erhobenen für eine spätere Verötfent- 

 lichung vor. W. Hoffma7in {Berlin). 



Dworetzky, A. , Erfahrungen mit der SpENGLEuschen 

 F r m a 1 i n m e t h d e z u r R e i n z ü c h t u n g von Tu 1 ) e r - 

 kelbazillen aus Rakteriengemischen (Zentralbl. f. 

 BakterioL, Abt. 1, Orig. Bd. XXX VII, H. 4, p. 626). 




XXII, 3. Referate. 451 



Die von Spengler angegebene Methode — Zeitschr. f. Hygiene 

 u. Infektionskrankli. Bd. XLII — mittels Forraalin die Begleitbakte- 

 rien in einem tuberkulösen Sputum abzutöten und dann die dem 

 Formalin gegenüber resistentereu Tuberkelbazillen auf einem be- 

 stimmten Somatose-HEYDEN-Glyzerinagar zu kultivieren, ist von dem 

 Verf. in einer größeren Anzahl von Versuchen mit negativem Er- 

 gebnis nachgeprüft worden. Auch selbst, wenn er mit der Formalin- 

 menge weit unter die von Spengler angegebene Dosis ging, ver- 

 mochte er niemals ein Wachstum von Tuberkelbazillen zu konstatieren. 

 Nach seiner Ansicht werden auch die etwas resistentereu Tuberkel- 

 bazillen durch das Formalin auch derartig alteriert , daß sie sich 

 auf festen Nährböden nicht mehr zu vermehren vermögen. Von 

 anderer Seite wird die Methode besser bewertet. 



W\ Hoffmann (Berlin). 



Ücker-Blom, M., Bestimmung der elektrischen Leit- 

 fähigkeit mit Bezug auf bakteriologische 

 Zwecke (Zentralbl. f. Bakteriol., Abt. 1, Orig. Bd. XXXVII, 

 H. 1, p. 150). 

 Verf. gibt eine Methode an, um in bakterienhaltigen Nährböden 

 die elektrische Leitfähigkeit zu bestimmen , nachdem er früher an 

 anderer Stelle auf ähnliche Weise interessante Mitteilungen über die 

 elektrische Leitfähigkeit der Eiweißspaltung bei Verdauungserschei- 

 nungen gemacht hat. Der Apparat ist, wie folgt, zusammengesetzt: 

 Das mit einem gut geschliftenen Glasstöpsel versehene Widerstands- 

 gefäß nebst seinen Platinelektroden wird mit zwei in den Stöpsel 

 eingeschmolzenen Zuleitungsröhren, welche, mit Quecksilber gefüllt, 

 die Leitung zu diesen vermitteln, ausgestattet. Ein drittes, ebenfalls 

 durch den Stöpsel gehendes Glasrohr ist der Zugang zu der Nähr- 

 flüssigkeit behufs bakterieller Impfung derselben. . Der mit dem 

 Nährboden beschickte Apparat kann mit Dampf sterilisiert werden. 

 Verf. teilt seine mit diesem Apparat angestellten Versuche nicht mit 

 und will hauptsächlich zu derartigen Versuchen über die elektrische 

 Leitfähigkeit der Nährböden unter dem Einfluß — auch pathogener 

 Bakterien — die Anregung geben. W. Hoffmann (Berlm). 



Schüller, 31., Über die Chromati nkörper der Krebs- 

 und Sarkomparasiten des Menschen (Zentralbl. f. 

 Bakteriol., Abt. 1 , Orig. Bd. XXXVII, H. 4, p. 547). 

 Verf. hat durch sorgfältige Färbungen die von ihm als angeb- 



29* 




452 Referate. XXII, 3. 



liehe ätiologische Momente für Krebs- und Sarkomgeschwülste ge- 

 fundenen Parasiten in bezng auf ihre innere Struktur untersucht. 

 Er fand, daß überall im Carcinom- und Sarkomgewebe des Menschen 

 kleinste runde, blasen- oder scheibenartige und keulenförmige Gebilde 

 mit typischer, höchst eigenartiger Anordnung der Chromatinsubstanz 

 verbreitet sind , und zwar als wesentliclie Bestandteile der früher 

 von ihm beschriebenen Parasiten. Er sieht hierin einen Beweis, daß 

 diese Parasiten zu derjenigen Gruppe von Protozoen gehören, bei 

 welchen typische Chromatinverteihmg in den kleinsten , einfach ge- 

 bauten Entwicklungsformen ein wesentliches Kriterium ist und spricht 

 seine Ansicht hierüber dahin aus, daß in diesen Parasiten die erste 

 und wichtigste Ursache der Krebs- und Sarkomentwicklung beim 

 Menschen gefunden ist. Trotz des langen Bekauntseins der „Schll- 

 LER scheu Parasiten" haben sie eine allgemeine Anerkennung nicht 

 finden können. W. Hoffmann {Berlin). 



Zlatogoroif, S. J. , Zur Morphologie und Biologie des 

 Mikroben der Bubonenpest und des Pseudo- 

 tuberkulosebacillus der Nagetiere [Bac. pseudo- 

 tuberculosis rodentium] (Zentralbl. f. Bakteriol., Abt. 1, 

 Orig. Bd. XXXVII, H. 3, p. 345). 



Verf. unterzog sich der Aufgabe, an einer größeren Anzahl von 

 in den verschiedensten Ländern isolierten Peststämmen festzustellen, 

 ob sie morphologisch, kulturell und biologisch in ihren charakteristi- 

 schen Eigentümlichkeiten übereinstimmen und stellt in dem letzten 

 Teil seiner ausführlichen Arbeit dem Pestbacillus den Erreger der 

 Pseudotuberkulose der Nagetiere in seinem Verhalten denselben Nähr- 

 böden und demselben Immunserum gegenüber. 



Zlatogoroff wies nach , daß sämtliche 22 Peststämme sich 

 durchaus gleichmäßig auf den verschiedenen Nährböden verhielten 

 und da er Abweichungen von dem normalen, allgemein bekannten Ver- 

 halten nicht konstatierte, erübrigt es sich, hierauf näher einzugehen. 



Von Interesse dürfte es aber sein, die beiden Bakterienarten in 

 ihrem kulturell-biologischen Verhalten miteinander zu vergleichen. 



In Bouillon ist das Wachstum völlig gleich (keine Trübung, 

 kleine Flocken) , beide verflüssigen die Gelatine nicht , die Kolo- 

 nien sind nur wenig am Band verschieden, jedoch tritt das sichtbare 

 Wachstum bei der Pest einen Tag später ein, auf Agar sind die 

 Pestkolonien stärker gekörnt und ihre Ränder spielen im Gegensatz 

 zur Pseudotuberkulose in allen Regenbogenfarben, beide bilden auf 




XXII, 3. Referate. 453 



Agar mit oprozeiitigem Koclisalzzusatz Involutionsformeii, Während 

 das Wachstum des Pestbacillus auf der Kartoffel kaum wahrzunehmen 

 ist, bildet der Pseudotuberkulosebacillus häutig eine blaßgelbe Membran, 

 Verhalten in Milch, zuckerhaltigen Nährböden und Indolbildung — 

 negativ — ist beiderseits gleich, ebenso ilir färberisches Verhalten. 

 In der Pathogenität jedoch besteht ein deutlicher Unterschied, indem 

 der Mensch , Atfe und die Ratte von Pest infiziert werden können, 

 während die Pseudotuberkulose Hühner, Kaninchen, Meerschweinchen, 

 Hasen, selten den Menschen befällt. Beide Bakterienarten werden 

 von dem Pestheilserum agglutiniert , während die Präcipitinreaktion 

 nur mit einem Pestbazillenfiltrat eintritt. Der Hauptunterschied be- 

 steht aber darin, daß Pestheilserum gegen eine Pestinfektion schützen 

 kann, während dies bei der Pseudotuberkulose der Nager nicht der 

 Fall ist. W. Hoffmann {Berlin). 



Nowack, K., Über die Grenzen der Verwertbarkeit des 

 Malachitgrünagars (Arch. f. Hygiene Bd. LIII, H. 4, 

 p. 374). 

 Verf. prüfte im Anschluß an die Veröft'entlichungen von Klinger 

 und Jörns den Malachitgrünagar zum Nachweis von Typhusbazillen 

 in den menschlichen Stuhlentleerungeu, indem er neben dem Drigalski- 

 CoNRADi sehen Lakmusnutrosemilchzuckeragar auch den Endo sehen 

 Fuclisinagar in den Bereich seiner Untersuchungen vergleichsweise 

 zog. Was die Konzentration des zu verwendenden Malachitgrüns 

 betrifft, so fand er in Übereinstimmung mit den obigen Autoren, daß 

 die Konzentration von 1 : 2000 bis 1 : 2500 von Malachitgrün No. 120 

 die besten Resultate liefert. Auch das Malachitgrün superfein be- 

 nutzte er für seine Versuche , was er in entsprechend stärkerer 

 Verdünnung ebenfalls ebensogut brauchbar fand. Ein Vorteil des 

 Malachitgrünnährbodens den andern Kulturmethoden gegenüber be- 

 steht nach den Erfahrungen des Verf. besonders darin, daß man 

 erheblich mehr Stuhlmaterial auf den Platten ausstreichen kann, wo- 

 durch die Aussicht, den Typhusbacillus auch in quantitativ geringer 

 Verteilung noch aufzufinden , eine bessere wird ; allerdings besteht 

 auch hierin eine Grenze und in Fällen, wo man nur auf einige und 

 vielleicht noch geschädigte Typhusbazillen in der Aussaat rechnen 

 muß, versagt auch der Malachitgrünnährboden, auch, wenn die Zahl 

 der Begleitbakterien eine verhältnismäßig geringe ist. 



Auch der ENDOSche Nährboden erwies sich dem Verf. als sehr 

 brauchbar. W. Hoff mann (Berlin). 




454 Referate. XXII, 3. 



Bordet, J., U n e m e t h o d e de c u 1 1 u r e des m i c r o b e s a n a e r o - 

 bies (Ann. de Tlust. Pasteur t. XVIII, 1904, p. 332). 

 Verf. verbindet die beiden bisher üblichen Methoden zur Her- 

 stellung eines Sauerstoff-freien Raumes. Nachdem die Kulturen in 

 ein zylindrisches Grlasgefäß gestellt sind, wird auf dieses eine Glas- 

 glocke , deren Boden in der Mitte eine Ofinung mit nach innen er- 

 höhtem Rande hat, und die einen mit einem Hahne versehenen Stopfen 

 besitzt, gestülpt, nachdem ein Stück mit Pyrogallussäure getränktes 

 Fließpapier auf den Boden der Glocke gelegt ist. Der Apparat wird 

 schief gestellt, das Fließpapier an die höchste Stelle des Bodens 

 gebracht , Ätzkali in die Glocke gegossen , so daß das Fließpapier 

 nicht getroft'en wird, und nun wird die Luft möglichst ausgepumpt. 

 Wird dann das Gefäß horizontal gestellt , so mischen sich Ätzkali 

 und Pyrogallussäure und jede Spur Sauerstoff wird absorbiert. 



Freund {Halle a. S.). 



Triollet, M., D i s p o s i t i f p o u r s t e r i 1 i s e r 1 e c a t g u t ä 1' a u t o - 

 clave (Ann. de l'Inst. Pasteur t. XVIII, 1904, p. 267). 

 Um Catgut wasserfrei zu sterilisieren, nach der Sterilisation 

 aber mit Wasser ohne Luftzutritt in Berührung zu bringen, wickelt 

 Verf. den Catgut um eine offene, mit Wasser gefüllte Flasche, setzt 

 diese in eine andere mit Essigsäure gefüllte Flasche , verschließt 

 hermetisch und sterilisiert bei 120^ 40 Minuten lang. Nach dem 

 Erkalten kehrt er den Apparat um , wobei Wasser und Essigsäure 

 sich mischen. Freund {Halle a. S.). 



Nicolle, F., S u i t c d ' e X p e r i e n c e s relatives au p h e n o m e n e 

 de l'agglutination des raicrobes (Ann. de l'Inst. 

 Pasteur t. XVIII, 1904, p. 210). 

 Verf. wünscht für die Untersuchung der Agglutination eine ein- 

 heitliche Methode. Für die Untersuchung der Agglutination bei 

 Typhusbazillen schlägt er als Reagens eine Mischung von 5 Tropfen 

 einer einprozentigen neutralen Bleiacetatlösung in 100 cc einprozen- 

 tiger Kaliumbikarbonatlösung vor, die im Reagierrohr einer 16 bis 

 18 Stunden alten Typhusbazillenkultur in Bouillon sehr ähnlicli sieht. 

 Stets werden Bouillonkulturen von 35^ und 16 bis 18 Stunden alt 

 benutzt. Eine Bildung eines Schleiers oder spontaner Häufchen ver- 

 hütet Verf. durch Anwendung neutraler Bouillon , die allerdings 

 weniger Mikroben enthält als eine alkalische. Die Versuche werden 

 stets eingestellt , wenn das Serum eine Stunde auf die Kultur ge- 




XXII, 3. Referate. 455 



wirkt hat. Zur Beurteilung des Agglutinatiousvermögens stellt man 

 fest, bei welcher maximalen Verdünnung bereits unter dem Mikroskop 

 Bakterienhäufchen von 5 bis 10 Individuen sichtbar sind. 



Freund (Halle a. S.). 



D. Botanisches. 



Fischer, A., Die Zelle der Cyanophyceen (Bot. Zeitg. 

 Abt. 1, Orig. Bd. LXIII, 1905, H. 4 u. 6, p. 51). 

 Schon früher^ hat Verf. eine Methode angegeben, die Chro- 

 matophoren der Cyanophyceen mit Flußsäure zu isolieren. 

 Nachdem verschiedene Autoreu — Kohl, "Wager, Zacharias — sich 

 abfällig über das Verfahren ausgesprochen haben, kommt Fischer in 

 der vorliegenden Abhandlung ausführlich auf seine Methode und deren 

 Begründung zurück. — Verf. verwendet 30- bis 40prozentige Fluß- 

 säure, am besten ist 45prozentige. Die Algenmassen , die auf ihre 

 Chromatophoren hin untersucht werden sollen, werden auf Fließpapier 

 abgetupft und in den mit Flußsäure gefüllten Platintiegel gebracht, 

 dann wird dieser mit seinem Deckel bedeckt und vorsichtig erwärmt: 

 „Man hält den Bunsenbrenner in der Hand und fährt mit der großen 

 Flamme rhythmisch unter den Tiegel, bis drei bis vier (fünf) kurze 

 Aufstöße der Flüssigkeit hörbar gewesen sind. Sofort nimmt man 

 mit Platiudraht oder geeigneter Pinzette das Material heraus und 

 wäscht es in einer großen Schale mit ruhigem Wasser gut aus. Um 

 schöne Färbungen zu erhalten, empfiehlt es sich, mehrere Stunden 

 bis einen Tag lang auszuwaschen. Bei richtiger Behandlung bleiben 

 die Algenfäden, weil die Cellulose nicht zerstört wird, ganz und lassen 

 sich bequem weiter, bearbeiten. Das ausgewaschene Material gelangt 

 in eine ein- bis zweiprozentige wässerige Lösung von Lichtgrün, 

 wodurch die Chromatophoren eine fast natürliche Färbung annehmen . . . 

 In Lichtgrün darf nicht kürzer als 2 Stunden gefärbt werden, nicht 

 länger als 4 Stunden, damit die Zellwände sich nicht zu stark färben 

 und beim langsamen Entwässern in Alkohol wieder ganz entfärben. 

 Überführung durch steigenden Alkohol, Alkohol-Xylol, Xylol, Balsam. 

 Statt mit Lichtgrün kann auch mit Säurefuchsin oder mit basischen 

 Farben, wie Gentianaviolett, gefärbt werden. Methylgrün mit Amyl- 



') Vgl. diese Zeitschr. Bd. XIV, 1897, p. 2(31, 262. 




456 Referate. XXII, 3. 



alkoliol gereinigt, spricht nur au, wenn er mit Borax . . . versetzt 

 ist, liefert aber dann Präparate, deren Färbung bei blaugrünen Algen 

 durch größte Natürlichkeit überrascht." Behandelt man die Objekte 

 längere Zeit mit kalter Flußsäure (Spirogyra bis 30 Minuten) , so 

 bleiben die Chromatophoren zwar gut erhalten , doch das Plasma 

 verschwindet nicht völlig. — Der Schutz gegen die Flußsäure, den 

 das plasmatische Stroma der Chromatophoren durch den Chlorophyll- 

 Farbstoff erfährt, ist nach Verf. dadurch zu erklären, daß das Chloro- 

 phyll eine durch Flußsäure nicht lösliche Verbindung ist, die durch 

 das Erhitzen noch besonders gleichmäßig über den Chromatophoren 

 verteilt wird: der Schmelzpunkt von Hoppe-Sevlers Chlorophyllan 

 liegt bei 110^, Flußsäure von 35 Prozent Fl H siedet bei 120^. 

 So schützt das Pigment die Chromatophoren vor der Ätzung, wie 

 ein Wachsüberzug das Glas. — Verf. erprobte seine Methode nicht 

 nur an Cyanophyceen und Conjugaten, sondern auch an den Chro- 

 matophoren von Diatomeen und Moosblättern. 



Die Untersuchung des Glykogen in den Zellen der Cyanophyceen 

 führte zur Auffindung einer neuen mikrochemischen Gly- 

 kogenr e akti n („Tannin-Safraninfärbung des Glykogens"), über 

 die Verf. in einer besonderen Arbeit gleichzeitig noch berichtet hat.^ 

 Auf die m i 1 s e n ä h n 1 i c h e n Zustände des Zentral- 

 körpers werfen mikrochemische Reaktionen neues Licht. Vor allem 

 ist wichtig, daß Jodpräparate keine Gelbfärbung der „Pseudomitosen" 

 hervorrufen. Vergleichende Färbungsversuche an Mikrotomschnitten 

 durch Oscillariamaterial und Antheren von Lilium (Fixierung in Alkohol, 

 auch in Pikrinschwefelsäure) zeigten, daß die mitosenähnlichen Figuren 

 der Oscillarien im Gegensatz zu den Chromosomen von Lilium mit 

 Karminlösungen (Essigkarmin, Pikrokarmin, Ammoniakkarmin) nicht 

 gefärbt werden können. Ebenso versagt an ihnen Delafields Häma- 

 toxylin nahezu. Außer den genannten und einigen anderen Farb- 

 stoffen bringt Verf. noch zahlreiche weitere Medien zur Anwendung 

 — Kochsalz, Soda, -Kupferoxydammoniak, Millons Reagens, Säuren, 

 Ammoniak, Pepsin- und Pankreatinglyzerin, kochendes Wasser u. v. a. 

 fvergl. p. 100 ff.) — und kommt zu dem Schluß, daß die „Pseudo- 

 mitosen" ebenso wie die Zentralkörper der Cyanophyceen nicht aus 

 Proteinstoft'en bestehen, sondern aus einem Kohlehydrat : „Anabaenin". 

 Außer den bereits angeführten Resultaten der Färbungsversuche 

 waren für diese Schlußfolgerung bestimmend die Unverdaulichkeit 



>) Vgl. diese Zeitsclir. Bd. XXII, 1905, p. l'il. 




XXII, 3. Referate. 



457 



der Gebilde in Pepsin und Trypsin im Verein mit den vom Verf. 

 aufgeführten Lösiiugsrealctionen, die Niclitfällbarkeit der autolytisclien 

 Lösungsprodukte mit Fälliingsmitteln für P:iweißki3rper und die Um- 

 wandlung von Pseudomitosen in Glykogen, als dessen Kondensations- 

 produkt das Anabaenin zu betrachten ist. — Als Fixierungsmittel 

 der Pseudomitosen nennt Verf. Alkohol, Jodalkohol, wässrige und 

 alkoholische Sublimatlösung, Pikrinsäure, Pikrinschwefelsäure, Formal- 

 dehyd, FLEMMiNGSche uud Hermann sehe Lösung. „Es bedarf nicht ein- 

 mal der Fixierung, schon einfaches Auftrocknen der unverriebenen oder 

 verriebenen Fäden konserviert die Pseudomitosen vollständig. Da sie 

 aus einem in Wasser unlöslichen Kohlehydrat bestehen, so ist die ,scliwie- 

 rige' Aufgabe ihrer Fixierung — [Hegler] — keine andere als die, 

 Stärkekörner oder Zellmembranen zu fixieren. Auch die Färbung 

 bietet keine Schwierigkeiten, gut ist Methylenblau bei rechter Differen- 

 zierung in Alkohol. Viel besser ist Heidenhains Eisenhämatoxylin." 



Die physikalischen Eigentümlichkeiten der Ana- 

 baeninkörper werden dadurch bedeutungsvoll, daß diese zwischen 

 gekreuzten Nikols aufleuchten: die sog. Gasvakuolen sind nichts 

 anderes „als das luterferenzbild der aus anisotropem Anabaenin be- 

 stehenden Pseudomitosen, deren knäuelig verschlungene Massen in 

 komplizierter Weise auf das durchgehende Licht einwirken. Neben 

 völligen Auslöschungen erscheinen auch rote Interferenzfarben, und 

 alles das mischt sich zu den sonderbaren Bildern, die als Gasvakuolen 

 gedeutet worden sind." Die von Klebahn und Molisuh in den viel- 

 umstrittenen Gebilden beobachteten Erscheinungen werden von diesem 

 Gesichtspunkte aus vom Verf. überzeugend erklärt : so erklärt sich 

 das Schwinden der „Gasvakuolen" nach kräftigem Drücken daraus, 

 daß der Druck die Anisotropie der Pseudomitosen zerstört; daß ge- 

 ringe Mengen von Äther etc. die „Gasvakuolen" zum Schwinden 

 bringen, beruht vermutlich darauf, daß nach der Tötung der Zellen 

 durch Äther etc. die autolytische Zersetzung der Anabaeuinkörper 

 beginnt, die schon nach wenigen Minuten weit genug vorgeschritten 

 ist, um das Zustandekommen eines Interferenzbildes auszuschließen. 

 — Angaben von Klbbahn und Molisch über die „Fixierung" der 

 Gasvakuolen durch einprozentige Osmiumsäure werden widerlegt. 



Schließlich sei noch auf die Kritik der K o h l s c h e n Metho- 

 den^ verwiesen, die Verf. besonders bei Besprechung der Chroma. 

 tophoren und der Pseudomitosen gibt. Küster (Halle a. S.). 



1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XX, 1903, p. 240. 




458 Referate. XXII, 3. 



Brand, F., Über die sogenannten Gasvakuolen und die 

 differenten Spitze nzellen der Cyanopliyceen, 

 sowie über Sehne II färbung (Hedwigia Bd. XLV, 

 1905, p. 1). 

 Im letzten Abschnitt seiner Arbeit kommt Verf. auf die schon 

 früher empfohlene „Schnellfärbung" zurück,^ d, h. zu seiner Methode, 

 lebendes Material durch kurz dauerude Behandlung mit konzentrierten 

 Farbstoff lösuugen (Eosin, Kongorot, Methylenblau, Methylviolett) zu 

 fäi'ben und dabei pathologisch verändertes Material oder tote Anteile 

 an ihrer intensiven Farbstoffspeicherung erkennen zu können. Die- 

 selbe Methode wird auch gestatten, kleine, schlecht auffindbare Formen 

 bei der Durchmusterung irgendwelcher Algengemische leicht nach- 

 weisbar zu machen. Küster {Halle a. S.). 



Fischer , H. , Über die kolloidale Natur der Stärke- 

 k ö r n e r und ihr Verhalten gegen Farbstoffe. 

 Ein Beitrag zur Theorie der Färbung (Beih. z. 

 Botan. Zentrabi. Bd. XVIII, 1905, Abt. 1, p. 409). 

 Farbstofflösungen gegenüber verhalten sich Stärkeköruer (Kar- 

 toffelstärke) verschieden : manche Farbstoffe dringen überhaupt nicht 

 oder erst nach wochenlanger Einwirkung in die Stärkekörner ein 

 (Karmin, Hessisch Purpur, Diamin- Echtrot, Kougorot, Anilinblau, 

 Cyanin , Benzoschwarzblau , wasserlösliches Nigrosin) , andere färben 

 langsam , aber nicht sehr intensiv , so daß auch nach Tagen die 

 Stärkekörner kaum stärker gefärbt sind als die umgebende Hüssig- 

 keit (Fuchsin S, Korallin, Eosin, Crocein, Tropaeolin 00 und 000, 

 Pikrinsäure , Methylblau , Methylenblau , Indigkarmin , Hämatoxylin, 

 Bismarckbraun) , noch andere Farbstoffe werden von den Stärke- 

 körnern sehr schnell und sehr reichlich aufgenommen (Fuchsin, Neu- 

 tralrot , Safranin , Chrysoidin , Malacliitgrün , Methylgrün , Jodgrün, 

 Brillantgrün, Nilblau, Gentianaviolett, Thionin, spritlösliches Indulin). 

 Unter den Farbstoffen der letzten Gruppe verdient das spritlösliche 

 besondere Beachtung, weil es der einzige wasserunlösliche Farbstoff 

 ist, der von den Stärkekörnern intensiv gespeichert wird. — Verf. 

 schließt an die Mitteilung seiner experimentellen Resultate ausführ- 

 liche Erwägungen über die kolloidale Natur der Stärkekörner und 

 den Vorgang der Färbung, kritisiert die Micellentheorie und die 

 Versuche, die Färbungserscheinungen auf Adsorption zurückzuführen. 



1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XX, 1903, p. 244. 




XXII, 3. Referate. 459 



Nach des Verf. Ansicht handelt es sich bei der Färbung der Stärke- 

 körner um Lösungsvorgänge und um chemische Reaktionen : „Der 

 Farbstotf wird von dem zu färbenden Kolloid in Lösung aufgenommen 

 oder nicht ; je nach der chemischen Natur beider kann in den Fällen 

 der ersteren Art dann auch eine chemische Verbindung eintreten." 



Küster {Halle a. 8.). 



Harz , C. 0. , A m y 1 u m , A m y 1 o d e x t r i n und Erythro- 

 d e X t r i n in ihrem Verhalten gegen C h r o m s ä u r e 

 (Beih. z. Botan. Zentralbl. Bd. XIX, 1905, Abt. 1, p. 45). 

 Durch Behandlung mit Chromsäure (einen bis 20 Prozent) und 

 Chromschwefelsäure verlieren die Stärkekörner nicht nur die Eigen- 

 tümlichkeit mit Jod sich blau zu färben, sondern auch die, in kochen- 

 dem Wasser zu verkleistern. Über die Färbungserscheinungen , die 

 sich gelegentlich bei vorzeitig unterbrochener Chromsäurewirkung an 

 den Stärkekörnern wahrnehmen ließen , vergleiclie im einzelnen das 

 Original. Küster {Halle a. 8.). 



Moliscli , H. , Über amorphes und kristallisiertes An- 

 thokyan (Botan. Zeitg. Bd. LXIII, 1905, Abt. 1, H. 7, 8, 

 p. 145). 

 Verf. macht mit einigen neuen Fällen , die durch Vorkommen 

 von amorphem oder kristallisiertem Anthokyan gekennzeichnet werden, 

 bekannt. Auch in weitverbreiteten, oft untersuchten Ptlanzen konnte 

 Verf. mikroskopische Anthokyankristalle nachweisen , z. B. in den 

 Blättern des Rotkrautes (Brassica oleracea capitata) , wofern das 

 Material vor der Untersuchung in niedriger Temperatur sich befunden 

 hat. — Besonders verwiesen sei auf die Angaben über „die Kristal- 

 lisation des Anthokyans außerhalb der Zelle". Bei den Blumen- 

 blättern von Pellargonium zonale (Scharlachpelargonium) beispielsweise 

 gelingt die Erzeugung mikroskopischer Anthokyankristalle dann, wenn 

 man unter dem Deckglas den roten Zellsaft aus einem zerquetschten 

 Blumenblatt austreten und langsam eindiinsten läßt. Noch vor- 

 teilhafter ist es, sich dabei der reinen Essigsäure zu bedienen: diese 

 tötet die Zellen , nimmt den Farbstoff auf und „läßt ihn beim Ver- 

 dampfen namentlich unter dem Rande des Deckglases in Form von 

 mehr minder feinen Nädelchen, Pinseln, Doppelpinseln, Garben, 

 Nerven, Drüsen und Sphärokristallen von tief karminroter Farbe aus- 

 fallen". Küster {Halle a. 8.). 




460 Referate. XXII, 3. 



Strasl)urger, E., T y p i s c h e und a 1 1 o t y p i s c h e K e r n t e i 1 u n g. 



Ergebnisse und Erörterungen (Pringsheims Jahrb. 



f. wiss. Bot. Bd. XVII, 1905, p. 1). 

 Für das Studium von Kernstrukturen ist Färbung der 

 Scliuitte mit Eisenhämatoxylin nach Heidenhain zu bevorzugen, be- 

 sonders wenn die Objekte mit Chroraosmiumessigsäure fixiert worden 

 sind. Die aufgeklebten Paraffinschnitte läßt Verf. 1-^/., Stunde im 

 Wärmeschrank bei 52 ^^ C, dann gelangen sie noch warm in Xylol 

 zur Beseitigung des Paraffins, dann in Alkohol und Wasser. Es folgt 

 einstündige Behandlung mit Wasserstoffsuperoxyd, dessen Einwirkung 

 zu kontrollieren und so lange fortzusetzen ist, bis die Schwärzung der 

 Schnitte beseitigt ist. Hiernach werden die Schnitte wieder aus- 

 gewaschen und kommen auf etwa eine Stunde in 4prozentige Lösung 

 von schwefelsaurem Eisenoxydammon nach Heidenhain. Dann wird 

 einige Minuten in Wasser gespült und etwa eine Stunde lang mit 

 Hämatoxylinlösung (Grübler & Co.) gefärbt. Dann werden die 

 Schnitte abermals mit Wasser ausgewaschen und kommen wiederum 

 in die Eisenammonlösung, in der sie bleiben, bis der gewünschte 

 Grad von Differenzierung erreicht ist ; schließlich Wasser , 90pro- 

 zentigen Alkohol^ Nelkenöl, Kanadabalsam. 



Küste?- {Halle a. S.). 



Oyertoil, J. B., Über R e d u k t i o n s t e i 1 u n g in den Pollen- 

 mutterzellen einiger Dikotylen (Prtngsheim s Jahrb. 

 f. wiss. Bot. Bd. XLII, 1905, p. 121). 

 Verf. fixierte mit Flemmings Chromosmiumessigsäure, mit ein- 

 prozentiger Chromessigsäure und Carnoys Alkoholeisessig. Zur Fär- 

 bung dienten die üblichen Methoden nach Flemming und Heidenhain. 

 Die Struktur des ruhenden Kerns und des Synapsisstadiums wird durch 

 Behandlung mit P^isenhämatoxylin hervorragend klar. — Läßt sich 

 das Synapsisstadium schlecht färben , so werden die Präparate zu- 

 nächst mit Eisenhämatoxylin behandelt, dann entfjirbt , bis der 

 Synapsisknäuel hell erscheint und dann mit Gentianaviolett gegen- 

 gefärbt. Küster {Halle a. S.). 



Miyake , K. , Über R e d u k t i o n s t e i 1 u n g in den Pollen- 

 mutterzellen einiger Monokotylen (Pringsheims 

 Jahrb. f. wiss. Bot. Bd. XLH, 1905, p. 83). 

 Bei Untersuchung des Knäuelstadiums , besonders der Segmen- 

 tierung des Knäuels, sind Schnitte von üblicher Dicke zu dünn, so 




XXII, 3. Referate. 461 



(laß solclie von 12 bis 15 /< mul mehr hergestellt wurden. — Verf. 

 färbte mit Flemmixos Dreifarbengemisch und Heidenhains Eisen- 

 alaunhämatoxylin. Küster [Halle a. S.). 



Allen, Ch. E., N u c 1 e a r d i v i s i o n in t h e p o 1 1 e n m o t h e r - 

 ceUs of Lilium canadense (Ann. of Bot. vol. XIX, 

 1905, p. 198). 

 Es kamen die üblichen Methoden zur Anwendung. Zu Fixie- 

 rungen empfiehlt Verf. besonders Elemmings stärkere Mischung und 

 MoTTiERs Rezept \ Küste?' (Halle a. S.). 



o 



Leake, H. M., T li e 1 o c a 1 i z a t i o n o f t h e i n d i g o - p r o d u c i n g 

 substance in indigo-yielding plants (Ann. of Bot. 

 vol. XIX, 1905, p. 297). 

 Bei der Untersuchung verschiedener Indigopflanzen verfuhr Verf. 



in der Weise , daß er kleine Stücke des Materials in folgender 



Lösung fixierte : 



'o 



Eisessig 2 cc 



Konz. Schwefelsäure 1 „ 



Ammoniumpersulfat 0*5 g 



Wasser 100 cc. 



Gewebstücke mit kleinen lutercellularräumen müssen entsprechend 

 länger in der Fixierungsflüssigkeit verbleiben , da sie nur langsam 

 von ihr durchdrungen werden: man richte die Größe der Gewebs- 

 stücke so ein , daß nach 4 bis 6 Stunden , allerhöchstens nach 

 12 Stunden eine völlige Durchdringung der Objekte erreicht ist. 

 Nach der Fixierung werden sie in täglich gewechseltem 50prozentigem 

 Alkohol 3 — 4 Tage lang gewaschen. — Die Dicke der Schnitte ist in 

 Einklang mit der Zellengröße der Objekte zu bringen ; bei ludigofera 

 sind 4 — 5 jli erforderlich, bei Polygonum tinctoriunv 8 ju^ bei Isatis, 

 Strobilanthes, Phajus und Calanthe 10 — 12 //. 



Die vom Paraffin befreiten , mit Alkohol schnell gespülten 

 Schnitte kommen in Delafields Hämatoxylin (50 cc, hierzu .300 cc 

 Wasser), in dem sie mindestens 12 Stunden verbleiben, hiernach in 

 Salzsäurealkohol (1 Prozent NCl in 50prozentigen Alkohol). Er- 

 scheinen die Schnitte dann für das unbewaftnete Auge farblos , so 

 werden sie auf mindestens eine Stunde in eine einprozentige Lösung 



^) Vgl. diese Zeitscbr. Bd. XV, 1898, p. 269. 




462 Referate. XXII, 3. 



des Grübler sehen wasserlöslichen Eosins gebracht. Dann Entwässe- 

 rung in absolutem Alkohol ; Xylol, Kanadabalsam. — 



Die nach der geschilderten Methode behandelten Schnitte zeigen 

 sehr deutlich den Indigogehalt der Zellen. Küster {Halle a. 8.). 



York, Harlan H., The Agar-Agar and Paraffin Method 

 for imbedding Plant Tissues (The Ohio Naturalist 

 vol. V, p. .344 — 345. May 1905. 

 Man bereite zwei Lösungen von Agar-Agar mit folgender Zu- 

 sammensetzung : 



1) Agar-Agar 2 Teile auf Wasser 100 Teile. 



2) Agar-Agar 5 „ „ „ 100 ,, 



Zu jeder Lösung setze man nach dem Filtrieren für 9 Volumteile 

 einen Volumteil Formalin zu. Wenn das zu schneidende Material trocken 

 ist, läßt man es in heißem (70^ C.) Wasser eine Stunde lang, und dann, 

 wenn es kieselhaltig ist, 12 Stunden in einer lOprozentigen Fluß- 

 säurelösung liegen. Man bringe es dann in die 2prozentige Agar- 

 lösung bei einer Temperatur von 70*^. Wenn das Material frisch 

 und lebendig ist, bringe man es direkt in den Agar. Nach zwei 

 Stunden werden die Objekte in die 5prozeutige Lösung übertragen, 

 in dem sie noch eine Stunde liegen bleiben. Man bestreiche ein 

 kleines Stückchen Holz mit dem 5prozentigen Agar, lege ein Stück des 

 Untersuchungsobjektes darauf und bedecke mit Agar. Nach dem Ab- 

 kühlen wird der feste Agar und das eingeschlossene Objekt vom Holz 

 losgemacht und in 70prozentigen Alkohol eingetaucht. Es wird jetzt 

 entwässert und in Paraffin eingebettet und in gewöhnlicher Weise 

 geschnitten. Zum Kleben auf dem Objektträger ist nichts nötig. Es 

 wird mit DELAFiELDSchem Hämatoxylin oder Safranin-Gentianaviolett 

 oder einem anderem Färbmittel gefärbt , wobei der Agar gefärbt 

 (DELAFiELDSches Hämatoxyliu) oder nicht gefärbt wird. 



Ernst A. Besseij {Washington). 



Shoemaker, D. N., On the Development of Hamamelis 



Virginia na (Botanical Gaz. vol. XXXIX, p. 248 — 266, 



plates VI and VII, April 1905). 



Die angewandte Fixierungslösung wurde folgendermaßen zubereitet: 



Zu einer gesättigten wässerigen Lösung von Sublimat wurden 5 Teile 



pro Hundert Eisessig zugesetzt. Diese Flüssigkeit wurde sowohl kalt 



als heiß verwandt. Als bestes Färbemittel ließ sich das FlemmingscIic 



Dreifarbengemisch bezeichnen. Der Autor hat Keimung der Pollen- 




XXII, 3. Referate. 463 



körner in einer IGprozentigen Rohrzuokerlösimg mit Zusatz von 

 1^/2 Teilen pro Hundert Gelatine bekommen. Die Poüeuscbläuehe 

 wurden durch Metliylgriin-Essigsäure fixiert und gefärbt. 



Ernst Ä. Bessey {Washington). 



Shattuck, Charles H., A morphological Study of Ulmus 

 americana (Botanical Gaz. vol. XL, p. 209 — 223, pl. 

 VII— IX, Sept. 1905). 

 Beim Fixieren muß man die Samenknospen wegen ihrer zahl- 

 reichen Haare in Oöprozentigen Alkohol eintauchen, um die Luft zu 

 entfernen, und dann sogleich in die Fixierungsflüssigkeit übertragen. 

 Eine 2prozentige Chromessigsäure-Lösung ergab sich als die beste 

 für alle Stadien, außer den ältesten. Um die Schnitte an den Objekt- 

 träger anzukleben , benutzte Autor ein Gemisch von 40 Teilen 

 Leim („Le Pages"), 10 Teilen Wasser und 50 Teilen Glyzerin. 

 Das Meyer sehe Eiweißfixativ hat keine guten Resultate gegeben. 

 Das Leim-Glyzeringemisch klebt die Schnitte fester an das Glas, 

 bleibt länger verwendbar, und wird nicht so leicht durch die Hitze 

 koaguliert. 



Für Färbung der Samenknospen zeigte sich Safraningeutiana- 

 violett als die beste Kombination. Beim Zusatz von Orange G 

 wurden die Pollenschläuche und männliche Zellen am besten gefärbt. 



Ernst A. Bessey {Washington), 



E, Mineralogisch - Petrographisches. 



Doelter, C. , Die Silikat schmelzen (Sitzber. d, k. Akad. d. 



Wiss. Wien, math.-naturw. Kl., Bd. CXIII, 1904, Abt. 1, 



p. 177—249, 495—511). 

 Für die mikroskopischen Beobachtungen des Verf. wurde von 

 demselben auf den Objekttisch eines Kristallisationsmikroskopes ein 

 kleines elektrisches Widerstandsöfchen aufgesetzt, welches von Heraeus 

 speziell für diesen Zweck konstruiert und mit Endflächen aus Quarz- 

 glas versehen war. Auch die Objektträger bestanden aus Quarzglas. 

 Die Vorrichtung gestattet Temperaturen bis 1400 ^^ zu erreichen und 

 ermöglichte dem Verf. seine zahlreichen früheren Untersuchungen über 

 die Schmelzung der Silikatmaterialien und -gesteine wesentlich zu 

 erweitern. Kürzlich hat der Verf. auch in einem zusammenfassenden 




464 Referate. XXII, S. 



Werk (betitelt Pliysikaliscli-chemisclie Mineralogie, Leipzig 1905) 

 seine Ergebnisse nebst dem mit ihnen zusammenhängenden Arbeits- 

 gebiet dargestellt und die einschlägige Literatur sehr vollständig 

 berücksichtigt. E. Sommerfeldt (Tübingen). 



Becke, F., Messung des Winkels der optischen Achsen 

 aus der H y p e r b e I k r ü m m u n g (Tschermak s mineral. 

 u. petr. Mitt. Bd. XXIV, 1905, p. 35 — 44 m. 3 Figg.). 

 Um den Achsenwinkel zweiachsiger Mineralien, welche im Gesichts- 

 feld des Mikroskopes nur eine der optischen Achsen zeigen, zu bestim- 

 men, wendet der Verf. folgende Methode an : Unter Benutzung eines 

 Zeichenapparats wird der Ort der einen Achse, ferner der Kreisbogen, 

 welcher der Ebene der optischen Achsen entspricht, und die Isogyre 

 in ihrer Diagonalstellung markiert. Wird für einen Punkt der letz- 

 teren der FRESNELSche Satz — welcher den Winkel der von ihm 

 durch die beiden Achsen gelegten Ebenen in Beziehung setzt zu der 

 Schwingungsrichtung — angewandt, so läßt sich der Ort der anderen 

 Achse in diesem Diagramm konstruieren. 



E. Sonimerfeldt {Tübingen). 



Luczizky, W., t^ber die Dispersion der optischen Ach- 

 sen bei den rhombischen P y r o x e n e n (Tscher- 

 MACKS min. u. petr. Mitt. Bd. XXIV, 1905, p. 140 — 143). 

 Durch Anwendung der mikrokonoskopischen Methoden Becke s 

 (vgl. d. vor. Ref.) ermittelt der Verf. die Abhängigkeit der optischen 

 Eigenschaften der rhombischen Pyroxene von ihrem Fundort und 

 stellt fest, daß als physikalische Ursache für die auffallenden Än- 

 derungen in der Dispersion bei diesen Mineralien die Beimischungen 

 zu betrachten sein dürften , welche aus Aluminium-, Calcium- und 

 Eisenoxyd, z. T. auch aus Manganoxyd bestehen. 



E. Sommerfeldt {Tübingen). 



Stead, J. E., Micro-Metallography with practical De- 

 monstration (Journ. of the Roy. micr. Soc. 1905, pt. 2, 

 p. 274—283 w. 1 Fig.). 

 Der Verf. gibt Methoden zur Auswahl geeigneter Proben für die 

 mikroskopische Untersuchung von Metallen an und beschreibt die- 

 jenigen Apparate zur Bearbeitung (Schneiden , Schleifen , Polieren) 

 derselben, welche sich nach seinen Erfahrungen bewährten. Auch 

 Angaben über die besten Ätzungsmethoden und über Mikroskoptypen 




XXII, 3. Referate. 465 



und Illuminatoren, welche zur Beobachtung- undurchsichtiger Objekte 

 im auffallenden Licht geeignet sind, werden beigefügt. 



E. Sommer feldt {Tübingen). 



Stead, J. E., Methods for Detecting the more Highly 

 Phosphorised Portious in Iron and Steel (Journ. 

 of the Pioy. micr. Soc. 190.5, pt. 2, p. 284—289 w. 2 THn. j. 

 Zur Unterscheidung der an Phosphor reicheren Arten des Stahles 

 und Eisens benutzt der Verf. zwei Methoden : Die erste beruht auf 

 der Beobachtung der Anlauffarbe , welche die betr. Probe beim Er- 

 hitzen in bestimmten Temperaturen annimmt, die andere auf der 

 Erzeugung von Ätzfiguren; und zwar werden als Ätzungsmittel be- 

 nutzt: Jod in Jodkalium gelöst, Pikrinsäure, Salpetersäure. Die Be- 

 schreibung der Ätzungsgebilde wird durch die Wiedergabe von elf 

 Mikrophotographien vervollständigt. E. Sommer feldt {Tübingen). 



Seddig, 31., Über „Wachstums" - Er s cheinuugen an 



Quecksilbertropfen (Physikal. Zeitschr. Bd. VI, 1905, 



p. 153—154). 



Winzige Quecksilbertröpfchen besitzen, wie der Verf. beobachtete, 



die Tendenz, pilzförmige Wachstumsbildungen anzunehmen, deren 



Gestalt stark davon abhängt, ob im Sonnenschein oder Schatten das 



Wachstum stattfindet. Diese Erscheinung ist jedoch nicht der Licht-. 



sondern der Wärmewirkung der Sonne zuzuschreiben , indem ein 



Hinüberneigen der Gebilde nach der Seite der stärkeren Verdunstung 



(also der Lichtseite) wegen der dort stattfindenden Kontraktion erfolgt. 



E. Sommerfeldt {Tiibiyigen). 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 3. 30 




466 ^'eiie Literatur. XXII, 3. 



Neue Literatur 



1. Lehr- und Handbücher. 



Abel, Riid., Bakteriologisches Taschenbuch, entli. die wichtigsten techn. 

 Vorschriften zur bakteriolog. Laboratoriumsarbeit. 9. Aufi. (VI, 117 pp.j 

 8». Würzburg (A. Stuber) 1905. Geb. 2 M. 



Böhm, A. A., a. DaTidoff, M. , Textbook of Histology including Micro- 

 scopic Technics. Translated by II. A. Cushing. M. Fig. 2. revised 

 and enlarged edition. Philadelphia 1904. 528 pp. 8*^. 17-50 M. 



Hall, Walker, J., a. Herxheimer, G., Methods of morbid Histology and 

 clinical Pathology. Edinburgh and London (Green a. Sons); XVI a. 

 290 pp. 8'\ 9 Sh. 



Merck, E., Prüfung der chemischen Reagentien auf Reinheit. Darmstadt 

 1905; 281 pp. (Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 413.) 



Möller, J., Mikroskopie der Nahrungs- und Genußmittel aus dem Pflanzen- 

 reich. Berhn (Jul. Springer) 1905; XVI u. 599 pp., 599 Figg. 2., ganzl. 

 umgearb. u. unter Mitwirkung A. L. Wixtons vermehrte Aufl. (Vgl. 

 diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 412.) 18 M. 



Scales, F. S., Elementary Microscopy. Handbook for Beginners. W. Fig. 

 London. 192 pp. 8". 3-20 M. 



Schuster, A., Introduction to Theory of Optics. London iE. Arnold) 1904. 

 356 pp. 



Senft, E. , Mikroskopische Untersuchung des Wassers mit bezug auf die 

 in Abwässern und Schmutzwässern vorkommenden Mikroorganismen 

 und Verunreinigungen. 180 Figg. im Text und 10 lithogr. Tfln., 

 19G pp. Wien (Jos. Safäf) 1905. (Vgl diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, 

 p. 412.) 9-60 M. 



Zsigiiiondy, R., Zur Erkenntnis der Kolloide. Über irreversible Hydrosole 

 und Ultramikroskopie. (VI, 18G pp. m. 6 Figg. u. 4 Tfln.) gr. 8". Jena 

 (G. Fischer) 1905. 4 M. 




XXII, o. Neue Literatur. 4(57 



2. Mikroskop und mikroskopische Apparate. 



a. Nene Mikroskope. 



Finlaysou, D., The Ashe-Finlayson „Comparoscope" (Journ. R. Microsc. 



Soe. 1904, pt. 4, p. 414). 

 Studnicka, F. K. , Über eine neue Konstruktion des Präpariermikroskops 



(Sitzber. Böhm. Ges. d. Wiss. 1905, 4 pp. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXI, 



1904, p. 440). 



Kohistka's Large Model mineralogic:d ]Microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 



190.5, pt. 4, p. 492; vgl. Koristka's Katalog, No. 12, 1905, p. 31, 



Fig. 15). 

 Leitz' Demonstrations Microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 1905 , pt. 4, 



p. 495; vgl. Leitz' Katalog, No. 41, 1905). 

 Leitz' Mechanical Stage (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 4, p. 497; vgl. 



Leitz' Katalog 1905, No. 41). 

 Leitz' Mineralogical Stand No. I (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 4, p. 492 ; 



vgl. Leitz' Katalog 1905, No. 41). 

 Leitz' Mineralogical Stand II (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 4, p. 495; 



vgl. Leitz' Katalog 1905, No. 41). 

 Reichert's Medium dissecting Microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, 



pt. 3, p. 3G6; vgl. C. Reicherts Katalog 1904, No. 25, Fig. 19). 

 Reichert's new Microscope for Brain Sections (Journ. R. Microsc. Soc. 



1905, pt. 3, p. 367; vgl. C. Reicherts Katalog 1904, No. 25, p. 36, 

 Fig. 17 d). 



.1. E. Stead's Engineer's metallurgical Microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 



1905, pt. o, p. 364; vgl. J. Swift and Son's Catalogue 1904, p. 35). 

 Svvift's new Compound metallurgical Microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 



1905, pt. 3, p. 366: vgl. J. Swift and Sox's Catalogue 1904, p. 36). 

 Tafner's new Preparation Stand (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 3, p. 368; 



vgl. Reichert's Katalog 1904, No. 25, p. 41, Fig. 20a). 



b. Objektive und Okulare. 



(Chalmers, S. D.,) Theory of symmetrical optical Objectives (Journ. R. 



Microsc. Soc. 1905, pt. 4, p. 501; vgl. Proc. R. Soc. vol. LXXIV, 



no. 482, p. 267, no. 504, p. 396). 

 Conrady, Ä. E. , On the chromatic correction of Object-glasses (Monthly 



Not. R. Astron, Soc. vol. LXIX, 1904, p. 274). 

 Dowdy, S. E., Attachable Object-finder (Engl. Mech. vol. LXXIX, 1904, 



p. 410). 



30* 




468 Neue Literatur. XXII, 3. 



H. , Construction of aplanatic Combinations of Lenses with or without 

 Achromatism (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 4, p. 501; vgl. Engl. 

 Mechan. nn. -JOIJS. p. 321; no. 2069, p. 340; no. 2072, p. 400; no. 2080, 

 p. 595). 



Trozewitsch, S. E., Anfertigung von Objektiven für Teleskope, Mikro- 

 skope und pliotograpliische Apparate, die optische Technik der Mikro- 

 skope und Teleskope [Russisch]. Warschau 1903. 322 pp. 



Trozewitsch, S. E., Zur Frage über das aplanatische System (Zeitschr. f. 

 Math. u. Phys. Bd. LI, 1904, p. 100). 



Leitz' New Objectives (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 4, p. 500; vgl. 

 Leitz' Katalog 1905, No. 41). 



Leitz' triple Revolver with lai'ge Protection Diaphragm Mourn. R. Microsc. 

 Soc. 1905, pt. 4, p. 507; vgl. Liaxz' Katalog 1905, No. 41, p. 110). 



New formula Object-glass (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 4, p. 499; vgl. 

 Leitz' Katalog 1905, No. 41). 



Reichert's new erect Image Preparation System for Preparation Micro- 

 scopes (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 3, p. 3G8; vgl. C. Reicherts 

 Katalog 1904, No. 25, p. 40, Fig. 20). 



c. Linsen. 



Berger, E. , Über das bei meiner binokularen Lupe verwendete Linsen- 

 system (Deutsche Mechan.-Zeitg. 1905, p. 155). 



Blakesley, T. H., Single-piece lenses (Proc. Phys. Soc. London vol. XVIII, 

 1903," p. 591). 



d. Beleuchtungs- und Heizapparate. 



Davis, D. J. A., A method of microscopic Observation by means of lateral 



Illumination (Trans. Chicago Pathol. Soc. vol. VI, 1904, p. 90). 

 Greil, Beleuchtungsapparate mit NERNSTSchera Glühlicht (Anat. Anz. 



Ergänzungsh. Bd. XXV, 1904, p. 178). 

 Kalälme, A. , Über das WooDsche Lichtfilter für ultraviolette Strahlen 



(Phys. Zeitschr. Bd. V, 1904, p. 415). 

 Pflüger, A., Die Quecksilberlarape als ultraviolette Lichtquelle (Phys. 



Zeitschr. Bd. V, 1904, p. 414). 

 Studnicka, F. K., Über eine neue Anwendung des Abbe sehen Kondensors 



(Sitzber. Böhm. Ges. d. Wiss. 1905, 4pp.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXI, 



1904, p. 432). 

 Koristka's Illuminator for opaque Objects (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, 



pt. 4, p. 510; vgl. Leitz' Katalog 1905, No. 41, p. 50). 




XXII, 3. Neue Literatur. 469 



Leitz' Thermometric Stages ( Journ. 1\. Mierosc. Soc. 1905 , pt. 4 , p. 507 • 



vgl. Leitz' Katalog 1905, No. 41, p. 85). 

 Monochrumatic Trough (Journ. R. Mierosc. Soc. 1905, pt. 4, p. 507; vgl. 



K. a. J. Beck's Special Catalogue 1905). 

 New vertical lUuiuinator for metallurgical Examinations (Journ. R. Mierosc. 



Soc. 1905, pt. 4, p. 506 ; vgl. Knowledge vol. II, 1905, p. 43 und R. a. 



J. Beck's Special Catalogue 1905). 

 Pfeiffer's Hot-Air Chamber (Journ. R. Mierosc. Soc. 1905, pt. 3, p. 371 ; 



vgl. Reichert s Katalog 1904, No. 25, p. 53, Fig. 2Gb). 

 Reichert's new chromatic Condensor (Journ. R. Mierosc. Soc. 1905, pt. 3, 



p. 371; vgl. Reicherts Katalog 1904, No. 25, p. 13). 

 J. E. Stead's Illuminator for opaque Objects (Journ. R. ^licrosc. Soc. 1905, 



pt. 3, p. 372; vgl. J. Swift and Son's Catalogue 1904, p. 35), 



e. Polarisationsmikroskop. 



(Holmes, E.,) Polariscope (Journ. R. Mierosc. Soc. 1905, pt. 4, p. 509 ; vgl. 



Engl. Median, vol. LXXXI, 1905, p. 383). 

 Rinne, F., Le Microscope polarisant (Trad. par L. Pervinguiere av. pre- 



face par A. de Lapparent, Paris 1904, 160 pp.). 



f. Zeiclienapparate. 



Bausch and Lomb's -adjustable Drawing Board (Journ. R. Mierosc. Soc. 



1905, pt. 4, p. 512; vgl. Bausch a. Lomb's Catalogue 1904, p. 70). 

 Bausch and Lomb's improved Form of Camera lucida (Journ. R. Mierosc. 



Soc. 1905, pt. 4, p. 511 ; vgl. Bausch a. Lomb's Catalogue 1904, p. 68). 

 Leitz' Drawing Board [simple Form] (Journ. R. ]\Iicrosc. Soc. 1905, pt. 4, 



p. 508; vgl. Leitz' Katalog 1905, No. 41, p. Sl). 



g. Ultramikroskop. 



3Ieyer, Das Ultramikroskop (Kosmos Bd. I, No. I). 



Siedentopf a. Zsigraondy, New microscopic Apparatus for rendering 



visible ultra-microscopic Particles in Glasses and Liquids (Reichert"s 



special circular). 




470 ^^eue Literatur. XXII, 3. 



3. Mikrophotographie und Projektion. 



Köhler, A., Eine mikroskupische Einrichtung' für ultraviolettes Licht 

 (>. = 27.5 ^u/u) und damit angestellte Untersuchungen organischer Ge- 

 webe (Verh. 76. Vers. D. Naturf. u. Ärzte, Breslau 1904, Bd. II [1], 

 1905, p. 29—33). 



(Köhler, A. , a. Rohr, M. v.,) Photomicrograph\- with ultra-violet Light 

 (Journ. R. Microsc. See. 1905, pt. 4, p. 513; vgl. Zeitschr. f. Instru- 

 mentenk. Bd. XXIV, 1904, p. 341). 



König, E., Über Badeplatten (Photogr. Korrespond. Bd. XLII, 1905, 

 p. 399—406: vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 413). 



Langlet, E., Methodes employees au Laboratoire d'Essais du Conservatoire 

 national des Arts et Metiers pour l'Etude des Objectifs photographiques 

 (Sog. Franc, de Phys. no. 233, 1905, p. 2—3). 



Leitz' Universal Projection Apparatus (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 4, 

 p. 504-, vgl. Leitz' Katalog 1905, No. 41, u. diese Zeitschr. Bd. XXI, 



1904, p. 30.5). 



Vorrichtung zum Wechseln der Bilder im Projektionsapparat (Deutsche 

 Mechan.-Zeitg. 1905, p. 127: vgl. Bayr. Ind.- u. Gew.-Bl. Bd. XXXVII, 



1905, p. 114). 



4. Präparationsniethoden im allgemeinen. 



Barnabö, Valentino. Liquidi fissatori alcalini: Contributo alla tecnica 



istologica (Boll- Soc. Zool. Ital, Anno XIV [8er. 2, vol. VI], fasc. 1 3, 



p. 55—73). 

 Bethe, Albr., Die Einwirkung von Säuren und Alkalien auf die Färbung 



und Färbbarkeit tierischer Gewebe (Beitr. z. ehem. Physiol. u. Pathol. 



Bd. VI, 1905, H. 9, 10, p. 399—425). 

 (Breuil, P.,) Examining Caoutchouc by the Aid of the Microscope (Journ. 



R. Microsc. Soc. 1905, pt. 3, p. 389; vgl. C. R. Acad. Sc. Paris t. CXL, 



1905, p. 1142). 

 Courmont, J. , et Andre, Ch. , Teehnique histologique permettant de 



deceler sur les coupes les substances du groupe de la Purine, notam- 



ment l'acide urique (C. R. Soc. Biol. Paris t. LVII, 1904, p. 131—132: 



vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 417). 

 Curreri, Giuseppe , Metodi nuovi e semplici per tissare e ritrovare dei 



punti interessanti di preparati microscopici (Atti Accad. Peloritana 



vol. XIX, fasc. 2, 8 pp. 8«). 

 (Curtis a. Lemoult, P.,) Affinity of artificial colouring Matters for con- 



nective Tissue (Journ. R. Microsc. Soc. 1905. pt. 4, p. 530; vgl. C. R. 



Acad. Sc. Paris t. CXL, 1905, p. 1606). 




XXII, 3. Neue Literatur. 471 



Delamare, Gabriel, Melange tetrachrome [coloration elective et simultanee 



des noyaux cellulaires, des fibres conjonctives, elastiques et luusculaires] 



(C. R. Süc. Biol. t. LVIII, no. 18, p. 828—829). 

 Dixon, W. E., a. Inchley, O., The Cilioscribe, an Instrument for recording 



the Activity of Cilia, 4 figg-. (Journ. of Phys. vol. XXXII, no. 5, tj, 



p. 395—400). 

 Dubreuil, G., Le Picro-Bleu, nute sur remploi de ce reactif pour la colo- 

 ration specifique des tibrilles conjonctives. Application ä l'etude du 



tissu reticule du ganglion lymphatique (C. R. Assoc. Anat. VI. Sess. 



Toulouse 1904, Bibliogr. anat. Suppl. 1904, p. 62—66 : vgl. diese Zeitschr. 



Bd. XXII, 1905, p. 420). 

 Fick, Job., Aufklebemethode und Scliälclienmethode bei der Färbung von 



Paraftinschnitten (Zentralbl. f. allgem. Pathol. u. patliol. Anat. Bd. X\'I. 



1905, No. 15, p. 596). 

 Fischer, A. , Eine neue Glj^kogenfärbung (Anat. Anz. Bd. XXYI, 1905, 



No. 13, 14, p. 399—400: vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 421). 

 Forster, W. H. C. , A simple technique for the enumeration of organisms 



in any fluid (Lancet vol. I, 1905, no. 24, p. 1641—1642). 

 Fuld , E. , Über einen neuen Indikator (München, med. Wochenschr. 1905, 



No. 25, p. 1197). 

 Halphen , G. , et Riebe, A. , Cuntribution ä Tetude des teintures liisto- 



logiques (Corapt. rend. Acad. Sc. t. CXL, no. 21, p. 1408—1410). 

 (Halijheu, G., a. Riebe, A.,) Theory of histological Staining (Journ. R. 



Microsc. Soc. 1905, pt. 4, p. 530; vgl. C. R. Acad. Sc. Paris t. CXL, 



1905, p. 1408). 

 (Harnian, N. B.,) Accessory for freezing Microtomes (Journ. R. Microsc. 



Soc. 1905, pt. 4, p. 528; vgl. Lancet vol. I, 1905, p. 1505). 

 ( Josepb, F. H.,) Fugent: a new Stain (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 3, 



p. 384; vgl. Brit. Med. Journ. vol. L 1905, p. 136). 

 Julius, W. H. , Bemerkungen über erschütterungsfreie Aufstellung (Ann. 



d. Phys. Bd. XYIII [4], 1905, p. 206—209). 

 Lemanissier, J. , L'etude des corps iiltramicroscopiques (These de Pari:^ 



1905, 80). 

 (Mair, W.,) Method for freeing Paraffin from Cedarwood Oil (Journ. R. 



Microsc. Soc. 1905, pt. 4, p. 533; vgl. Brit. Med. Journ. vol. I, 1905, 



p. 1381). 

 Medea, E. , L'applicazione del nuovo metodo di Ramön y Ca.jal alio 



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cliir. di Pavia, 14. gennaio 1905). 

 (Merlin, A. A. C. E.,) Modification of the Rousselet Live-box (Journ. R. 



Microsc. Soc. 1905, pt. 4, p. 532; vgl. Journ. Quekett Microsc. Club 



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 Michaelis, L. , Ultramikroskopische Untersuchungen (V^irchows Arch- 



Bd. CLXXIX, 1905, H. 2, p. 195-208 m. 1 Tft.; vgl. diese Zeitschr. 



Bd. XXII, 1905, p. 413). 

 (Miller, E. F.,) Multiplex Slide-holding Device for staining Sections (Journ. 



R. Microsc. Soc. 1905, pt. 4, p. 530; vgl. John Hopkins Hosp. Bull. 



vol. XV\, \^05, p. 132). 




472 Neue Literatur. XXII, 3. 



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Soc. 1905, pt. 4, p. 528 : vgl. Univ. California Publ. Bot. vol. II, 1904. 



p. 73 u. diese Zeitschr. Bd. XXI, 1904, p. 527). 

 (Osterhout, W. J. V.,) Fixation in Vacuo (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, 



pt. 4, p. 527; vgl. Univ. California Publ. Bot. vol. II, 1904, p. 78 u. 



diese Zeitschr. Bd. XXI, 1904, p. 527). 

 (Osterhout, W. J. V.,) Rapid Method of Mounting in aqueous Media 



(Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 4, p. 532; vgl. Univ. California Publ. 



Bot. vol. II, 1904, p. 83 u. diese Zeitschr. Bd. XXI, 1904, p. 527). 

 (Osterhout, W. J. V.,) Simple Slide-holder (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, 



pt. 4, p. 532; vgl. Univ. California Publ. Bot. vol. II, 1904, p. 81 u. 



diese Zeitschr. Bd. XXI, 1904, p. 527). 

 l^Powell, J. G. R.,) Copal as a mounting Medium (Journ. R. Microsc. Soc. 



1905, pt. 3, p. 387; vgl. Engl. Mechan. vol. LXXXI, 1905, p. 133). 

 Regaud, Cl., et Dubreuil, G., Sur un nouveau procede d'argentation des 



epitheliums au moyen du protargol (C. R. de l'Assoc. des Anat. V. Sess. 



Liege 1903, Bibliugr. anat. Suppl. 1903, p. 121 — 123; vgl. diese Zeitschr. 



Bd. XXII, 1905, p. 418). 

 Ribadeau-Dumas, Application de la methode ä l'argent de Ramön y Cajal 



ä Tetude de la rate (Bull, et Mem. de la Soc. anat. de Paris, Annee LXXX, 



Ser. 6, T. 7, No. 4, p. 281-222). 

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menti delle urine, dei liquidi ascitici, pleurici ecc. (BoU. d. Soc. Lanci- 



siana degli Ospedali di Roma Anno XXV, 1905, fasc. 3, 11 p. 2 figg.). 

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(Zentralbl. f. allgem. Pathol. u. pathol. Anat. Bd. XVI, 1905, No. 8, 



p. 293—294; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 41G). 

 Wederhake, Zur mikroskopischen Schnelldiagnose (Zentralbl. f. Gynäkol. 



Jahrg. XXIX, No. 25, p. 785—790). 

 Wolfrum, Celloi'dintrockenmethode (Klin. MonatsbL f, Augenheilk. Jahrg. 



XLIII, Bd. II, p. 61—64). 

 Reichert's Medium Microtome (Journ. R. Microsc. Soc. 1905, pt. 3, p. 382; 



vgl. Reichert s Katalog 1904, No. 25, p. 58). 



5. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. 



a. Niedere Tiere. 



Bösenberg, H., Beiträge zur Kenntnis der Spermatogenese bei den 

 Arachnoiden (Zool. Jahrb., Abt. f. Anat. u. üntogen. Bd. XXI, 1905, 

 p. 515—570 m. 3 Tfln; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 426). 




XXII, 3. Neue Literatur. 473 



Gemelli , Fra A. , Su di una fine particolaritä di struttura delle cellule 



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e Scienze nat. Pavia, Anno VI, no. (J6, p. 518 — 532). 

 (rienisa, G. , Coloration des protozoaires (Ann. de l'Inst. Pasteur, Annee 



XIX, 1905, no. 5, p. 34G-352). 

 Heluemann , Ph. , Untersuchungen über die Entwicklung des Mesoderms 



und den Bau des Ruderschwanzes bei den Ascidienlarven (Zeitschr. f. 



wiss. Zool. Bd. LXXIX, 1905, p. 1—72 ra. 4 Ttin. ; vgl. diese Zeitschr. 



Bd. XXll, 1905, p. 424). 

 Laß, M. , Beiträge zur Kenntnis des histologisch-anatomischen Baues des 



weiblichen Hundeflohes [Pulex canis Duges s. Pulex serraticeps 



TaschexbergJ (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXXIX, 1905, p. 73—131 



m. 2 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 425). 

 Lewis, J., a. Williams, H. U. , The results of attempt to cultivate try- 



panosomes from frogs (American med. t. IX, 1905, p. 491). 

 Montgomery, Th. H., The Spermatogenesis of Syrbula and Lycosa, with 



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vol. LXVII, pt. 1, p. 162—205). 

 Schröder, O., Beiträge zur Kenntnis der Bauchsinnesorgane [Bauchaugen] 



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1905, p. 132—149 m. 2 Figg. u. 2 Tfln. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 



1905, p. 424 t. 

 Schuberg, A. , Über Cihen und Trichocysten einiger Infusorien. 2 Tfln. 



(Arch. f. Protistenk. Bd. VI, H. 1, p. 61—110). 

 Thon, K., Über den feineren Bau von Didinium nasutum 0. F. M. 2 Tfln. 



u. 3 Figg. (Arch. f. Protistenk. Bd. V, H. 3, p. 281—321). 



b. Wirbeltiere. 



Abrikossoll", A. J, , Über die ersten anatomischen Veränderungen bei 

 Lungenphthise (Virchows Arch. Bd. CLXXVIII, 1904, H. 2, p. 173 

 —263 m. 1 Tfl.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 439). 



Asahi , K. , Beitrag zur Untersuchung auf Hyphomyceten (Prager med. 

 Wochenschr. 1905, No. 12). 



Davis, D. J., Ultramicroscop observations on cerebrospinal fluid and blood. 

 1 flg. (Trans, of the Chicago Pathol. Soc. vol. VI, no. 7, p. 225—229). 



Donaldson, H. H., a. Hoke, G. AV., On the Areas of the Axis Cihnder 

 and meduUary Sheath as seen in cross Sections of the Spinal Nerves 

 of Vertebrates (Journ. Compar. Neurol. and Psychol. vol. XV, 1905, 

 no. 1, p. 1—16 w. 1 flg.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 446). 



Erdely, A. , Untersuchungen über die Eigenschaften und die Entstehung 

 der Lymphe. Fünfte Mitteilung. Über die Beziehung zwischen Bau 

 und Funktion des lymphatischen Apparates des Darmes (Zeitschr. f. 




474 Neue Literatur. XXII, 3. 



Biol. LXVI, 1904, H. 2, p. 119—152 m. 1 Tri.; vgl. diese Zeitsclir 



Bd. XXII, 1905, p. 427). 

 Ferrata, Ad., Sul nucleolo della cellula nervosa (Monit. Zool. Ital., Anno 



XVI, no. G, p. 170—171). 

 Fischel, R., Zur Teclmik der KROMAYERsclien Epithelfasern (Zentralbl. f. 



allgem. Pathol. u. pathol. Anat. Bd. XVI, 1905, No. 15, p. 593). 

 Glas, E., Zur Frage der Sarkolyse. [Erste Mitteilung- über quergestreifte 



Muskeln und deren Zerfallsprodukte im follikulären Gewebe der Ton- 

 sille] (Anat. Anz. Bd. XXVI, 1905, No. Ü, p. 155—171 m. 1 Tri.; vgl. 



diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 427). 

 Hansen, F. C. C, Untersuchungen über die Gruppe der Bindesubstanzen. 



I. Der Hyalinknorpel (Anat. Hefte, H. 83 [Bd. XXVII, H. 3] 1905. 



p. 537—820 m. 5 Figg. i. Text u. 10 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII. 



1905, p. 433). 

 Homburger, A., Über die Gründe der mangelhaften Haltbarkeit und 



die Wiederherstellung abgeblaßter Weigert scher Neurogliapräparate 



(Zentralbl. f. allgem. Pathol. u. pathol. Anat. Bd. XVI, 1905, No. 15, 



p. 600). 

 Illing, G., Vergleichende histologische Untersuchungen üb^r die Leber der 



Haussäugetiere (Anat. Anz. Bd. XXVI, 1905, No. 7, 8, p. 177—193 m- 



1 Fig.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 436). 

 Karakaeheff, K. Iy., Über das Verhalten der Lagerhans sehen Inseln dos 



Pankreas bei Diabetes mellitus (Deutsches Ar eh. f. klin. Med. Bd.LXXXll. 



1904, H. 1, 2, p. 60—89 m. 1 Tfl. u. 3 Figg. i. Text; vgl. diese Zeitschr. 

 Bd. XXH, 1905, p. 4.35). 



Lenzniauu, R. , Über eine vereinfachte Methode der Färbung von Blur- 

 trockenpräparaten (Rheinisch-Westfälische Ges. f. inn. Med. u. Nerven- 

 heilkunde. IV. Vers. 6. Nov. 1904 zu Duisburg; Ref. in München, med. 

 Wochenschr. Jahrg. LI, 1904. No. 50, p. 2250—2251; vgl. diese Zeitschr. 

 Bd. XXII, 1905. p. 431). 



Leyen, E. von der, Über die Schleimzone des menschlichen Magen- und 

 Darmepithels vor und nach der Geburt (Virchows Arch. Bd. CLXXX, 



1905, No. 1, p. 99—107; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 435 1. 

 London, E. S., Zur Lehre von dem feineren Bau des Nervensystems (Arcli. 



f. mikrosk. Anat. Bd. LXVI, 1905. p. 111—115 m. 1 Tfl.: vgl. diese 

 Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 447) 



Mahaim, A. , Les terminaisons cylindraxiles pericellulaires de Held (Bull, 

 de l'Acad. R. de Med. de Belgique, ser. 4, t. XIX, no. 4, 5, p. 256—268 



Maresch, R., Über Gitterfasern der Leber und die Verwendbarkeit der 

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 (Zentralbl. f. allgem. Pathol. u. pathol. Anat. Bd. XVI, 1905, No. 16, 17, 

 p. 641). 



Meves, F., Über die Wirkung gefärbter Jodsäure auf die roten Blut- 

 körperchen der Amphibien. Vorläufige Mitteilung (Anat. Anz. Bd. XXVI, 

 1905, No. 4,5, p. 97—103 m. 4 Abb.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 

 1905, p. 430). 



Michotte, A., Contribution h l'etude de l'histologie fine de la cellule 

 nerveuse (Le Nevraxe t. VI, fasc. 3). 




XXII, o. Neue Literatur. 475 



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 t. LVIII, no. 16, p. 760—762). 



Pascucci, 0., Die Zusammensetzung des Blutscheibenstromas und die Hä- 

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 sterin (Beitr. z. ehem. Phj^siol. u. Pathol. Bd. VI, H. 11, 12, p. 543—566). 



Pensa, A., Osservazioni suUa distribuzione dei vasi sanguigni e doi nervi 

 nel pancreas (Intern. Monatsschr. f. Anat. u. Physiol. Bd. XXII, 1905, 

 H. 1—3, p. 90—126 m. 6 Tfln. u. 5 Figg. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 

 1905, p. 438). 



Pighini, G. , Sur l'origine et la formation des cellules nerveuses chez les 

 embryons des Selaciens (Bibliogr. anat. t. XIV, 1905, fasc. 1, p. 94—105 

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Pighini, G. , Sulla struttura dei globuli rossi [Anfibi, Uccelli, Mammiferi 

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 Bd. XXII, 1905, p. 444). 



Ramöu y Cajal, S. , y Garcia, D. D. , Las lesiones dei reticulo de las 

 celulas nerviosas en la rabia (Trab. Labor. Invest. Biol. Madrid t. III, 



1904, fasc. 4, p. 213—266 c. 29 figg.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII. 



1905, p. 443). 



Rufflni, A., Di una nuova guaina [guaina sussidiaria] nel tratto terminale 



delle fibre nervöse di senso nell'uomo (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXXIX, 



1905, p. 150—170 c. 2 tavv. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, 



p. 447). 

 Schmidt, J. E., Beiträge zur normalen und pathologischen Histologie einiger 



Zellarten der Schleimhaut des menschlichen Darmkanales (Arch. f. 



mikrosk. Anat. Bd. LXVI, 1905, p. 12— 40 m. ITA.; vgl. diese Zeitschr. 



Bd. XXII, 1905, p. 439). 

 Schridde , H. , Die Darstellung der Leukocytenkörnelungen im Gewebe 



(Zentralbl. f. allgem. Pathol. u. pathol. Anat. Bd. XVI, 1905, No. 19, 



p. 769). 

 Schwarz, G., Studien über im großen Netz des Kaninchens vorkommende 



Zellformen (Vmciiows Arch. Bd. CLXXIX, 1905, H. 2, p. 209—265 



m. 1 Tfl. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 434). 

 Srdinko, O. V., Eine sichere Methode zur Differenzierung der Rinden- und 



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470 Neue Literatur. XXII, 3. 



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 ist spanisch u. französisch] ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 445). 



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 Zlatogoroff, S. J. , Zur Mikrobiologie der Glasern (Zentralbl. f. Bakteriol. 



Abt. 1, Orig. Bd. XXXVII, H. 2, p. 249; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 



1905, p. 4501 



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 1905, p. 461). 



Brand, F., Über die sogenannten Gasvakuolen und die differenten Spitzen- 

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Fischer, A., Die Zelle der Cyanophyceen (Bot. Zeitg. Abt. 1, Orig. Bd. LXIII, 

 1905, H. 4 u. 6, p. 51 ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 455). 



Fischer, H., Über die kolloidale Natur der Stärkekörner und ihr Verhalten 

 gegen Farbstoffe (Beih. z. Bot. Zentralbl. Bd. XVIII, 1905, Abt. 1, 

 p. 409; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 458). 



Harz, C. 0., Amylum, Amylodextrin und Erythrodextrin in ihrem Ver- 

 halten gegen Chromsäure (Beih. z. Botan. Zentralbl. Bd. XIX, 1905, 

 Abt. 1, p. 45; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 459). 



Leake, H. M., The locaUzation of the indigo-producing substance in indigo- 

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 Bd. XXII, 1905, p. 461). 



Miyake, K., Über Reduktionsteilung in den Pollenmutterzellen einiger 

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 vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 460). 



Molisch, H. , Über amorphes und kristallisiertes Anthokyan (Botan. Zeitg. 

 Bd. LXIII, 1905, Abt. 1, H. 7, 8, p. 145 ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 

 1905, p. 459). 




480 ^eue Literatur. XXII, 3. 



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p. 8") u. diese Zeitschr. ßd. XXI, 1904, p. 527). 

 Overton, J. B., Über Reduktionsteilung in den Pollenmutterzellen einiger 



Dikotylen (Pringsheims Jahrb. f. wiss. Bot. Bd. XLII, 1905, p. 121; 



vgl. diese Zeitschr. XXII, 1905, p. 460). 

 Shattuck, eil. H. , A morphological Study of Ulmus americana (Bot. Gaz. 



vol. XL, 1905, p. 209: vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 4(53). 

 Shoemaker, D. N., On the Development of Hamamelis virginiana (Botan. 



Gaz. vol. XXXIX, p. 248—266, plates VI a. YII, April 1905; vgl. diese 



Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 462). 

 Strasburger, E., Typische und allotypische Kernteilung. Ergebnisse und 



Erörterungen (Pringsheims Jahrb. f. wiss. Bot. Bd. XVII, 1905, p. 1: 



vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 460). 

 AVichniauu u. Zikes, Ein neues Verfahren zur Reinzüchtung von Hefe 



(Zeitschr. f. Spiritusindustr. Bd. XXVIII, 1905, No. 31, p. 303). 

 York, H. H. , The Agar-Agar and Paraffin Method for imbedding Plant 



Tissues (Ohio Naturalist vol. V, 1905, p. 344; vgl. diese Zeitschr. 



Bd. XXII, 1905, p. 462). 



e. Mineralogisch - Petrographisches. 



Becke, F., Messung des Winkels der optischen Achsen aus der Hj^perbel- 

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 p. 35—44 m. 3 Figg.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 4(54). 



Doelter, C, Die Silikatschmelzen (Sitzber. d. k. Akad. d. Wiss. Wien, 

 math.-naturw. Kl., Bd. CXIII, 1904, Abt. 1, p. 177—249, 495-511: vgl. 

 diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 463). 



Luczizky, AV. , Über die Dispersion der optischen Achsen bei den rhom- 

 bischen Pyroxenen (Tschermaks mineral. u. petr. Mitteil. Bd. XXIV, 

 1905, p. 140—143; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 464). 



Seddig, M. , Über „Wachstums" -Erscheinungen an Quecksilbertropfen 

 (Physikal. Zeitschr. Bd. VI, 1905, p. 154—154; vgl. diese Zeitschr. 

 Bd. XXII, 1905, p. 465). 



Stead, J. E., Methods for Detecting the more Highly Phosphorised Por- 

 tions in Iron and Steel (Journ. of the Roy. micr. Soc. 1905, pt. 2, 

 p. 284—289 w. 2 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 465). 



Stead, J. E., Micro-Metallography with practical Demonstration (Journ. of 

 the Roy. micr. Soc. 1905, pt. 2, p. 274—283 w. 1 tig. ; vgl. diese Zeit- 

 schr. Bd. XXII, 1905, p. 464). 




Band XXII. Heft 4. 



Ultramikroskopie der Oleosole. 



Von 



Josef Schneider u. J.iroslav Just^ 



in Prag. 

 I. 



Bei den bisherigen nltraniikroskopisclien Arl)eiten mit fein- 

 verteiltem Golde wurden wässerige Verteilungen und gefärbtes Glas 

 untersucht. Bei den ersteren verhindert die sogenannte Molekular- 

 bewegung ein genaueres Beobachten der den Goldteilchen entsprechen- 

 den Scheibchen , bei dem Glase ist der Umstand imangenehm , daß 

 das Gold quantitativ schwer zu bestimmen ist und daß an der Lage 

 und Gruppierung der Teilchen nichts geändert werden kann. Dies 

 führte mich dazu, Gold und andere edle Metalle in einer viskosen, 

 jedoch vollständig gleichmäßigen und durchsichtigen , verbrennlichen 

 Flüssigkeit zu fällen und dann ultramikroskopisch zu untersuchen. 



Zu diesem Zwecke eignen sich besonders gut sowohl fette, 

 als auch ätherische Öle, da dieselben sehr leicht Edelmetalle redu- 

 zieren und sich mit den Reduktionsprodukten lebhaft färben. 



Das Goldchlorid reagiert schon in wässeriger Lösung sehr gut 

 mit Fetten und fetten Ölen und , wenn diese Reaktion in der tech- 

 nischen Analyse als eine zu wenig verläßliche keine große Beachtimg 

 gefunden hat, so ist der Grund davon darin zu suchen, daß die 

 Färbung, welche von einer bestimmten Feinheit des Goldes abhängt, 

 sich sehr rasch ändert infolge der Gruppierung der Teilchen. 



Zu dieser Reaktion genügen sehr kleine Mengen des Öles oder 



^) Der erste Abschnitt ist von Josef Schneider, der zweite von 

 Jaroslav Just. 



Zeitsclir. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 4. 31 




482 Sclineider-Just: Ultiamikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



Fettes. Man kann auf Deckgläser mittels einer Sclireibfeder feine 

 Tröpfclien von Öl oder geschmolzenem Fett auftragen, das Deckglas 

 auf der Goldchloridlösung schwimmen lassen und man wird sehen, 

 wie bei manchen Fetten die Reaktion fortschreitet. Auf manche 

 Öle und Fette, z.B.: Paraffin, Vaseline, Walrat, Wollschweißfett 

 und Kokosnußöl hat die Goldlösung keinen Einfluß. Bei Wachs, 

 Stearin, Talg und Degras sehen wir, daß die Einwirkung zwar sehr 

 schwach ist und erst nach einer Woche bemerkbar wird , daß aber 

 doch an der 01)erfläche wolkenfih-mige , oder kristallinische blaue, 

 violette oder graue Goldniederschläge sich zeigen. Einen hiUieren 

 Grad der Einwirkung können wir beim Olivenöl, Elai'n und Eizinusöl 

 finden, wo sich durch die tiefere Einwirkung eine blaue, oder violett- 

 graue gleichmäßige , oder aus sichtbaren Punkten bestehende Haut 

 bildet, die später in eine grobkörnige, kristallinische Kruste über- 

 geht. Besonders interessant sind jedoch diejenigen Öle, welche sich 

 in der ganzen Masse diffus färben. Das Walratöl färbt sich licht- 

 purpurrot bis schwarz ; die Färbung sammelt sich jedoch mit der 

 Zeit und bildet einen blauen , violetten bis schwarzen Niederschlag. 

 Das Leinöl färbt sich rotviolett bis schwarz. Die schönsten Färbungen 

 traten beim Lebertran und bei dem Leinölfirnisse ein. Der Leber- 

 trau färbte sich dunkelrot, später blau bis schwarz und man konnte 

 bei einem und demselben Tropfen alle Stufen der Färbung beobachten. 

 Während das Zentrum noch farblos war^ war das Öl weiter vom 

 Zentrum rosarot bis rubinrot, an der Oberfläche war schon die blaue 

 Haut und eine schwarze Kruste von grob niedergeschlagenem Golde. 

 Der Leinölfirnis war indigoblau gefärbt ; wenn sich jedoch diese blaue 

 Färbung als blauer Schlamm kranzartig in dem Tropfen sammelte, 

 blieb eine rote ditFuse Färbung zurück. 



Ähnliche Färbungen ergaben nach derselben Methode ätherische 

 Öle und Harze. Bei diesen ist die Oberflächenfärbung sehr bunt 

 und es tritt nicht nur die blaue und rote , sondern an manchen 

 Stellen auch die gelbe Färbung ein. 



Nocli viel größere Unterschiede in der Färbung, jedoch nicht 

 so schöne Farben finden wir bei Osmiumsäure. Bei Silber und Platin 

 ist dagegen die Zahl der sich färbenden Fette und Öle sehr klein. 



Die genannten Reaktionen zeigen, daß sich Öle und Fette diftus 

 durch ultramikroskopisches Gold, resp. andere Metalle färben lassen, 

 und daß sich die ultramikroskopischen Teilchen mit der Zeit mikro- 

 skopisch als Punkte und Krusten ausscheiden. Wenn auch die 

 mikrochemischen Reaktionen der einzelnen Öle an demselben Nach- 




XXII, 4. Schneider- Just : Ultramikroskopie der Oleosole. 433 



teil leiden, wie die in der Histologie verwendeten Goldraethoden, 

 d.i. der Unverläßlichkeit, so war doch zu hotten, daß bei diesen 

 einfacheren Körpern, d. i. Fetten und Ölen, durch die uitramikro- 

 skopische Kontrolle der Reaktionen die Prüfung mit Goldchlorid zu 

 einer verläßlicheren ausgearbeitet werden könnte. 



Bei der Ausführung der Reaktionen für die ultramikroskopische 

 Kontrolle finden wir zwei Hindernisse. Bei großen ()lmengen tritt, 

 wie man unten sehen wird , zu leicht die Gruppierung von ultra- 

 mikroskopischen Teilchen zu groben Ausscheidungen ein ; kleine 

 Mengen von Ol, z. B. Tropfen, werden bei den bisherigen Küvetten 

 zur Füllung derselben nicht reichen. Es mußte deshalb zur Reaktion 

 etwa 1 cm'' genommen werden; zur Aufnahme des untersuchten 

 Öles wurden besondere von der optischen Werkstätte Carl Zeiss 

 ausgeführte Küvetten verwendet. Dieselben bestehen aus einem 

 niedrigen, oben und unten abgeschliffenen Glaszylinder von 2 mm 

 Höhe und 18 mm Durchmesser, welcher in der Mitte hohl ist, und 

 zwar so, daß die zylindrische Höhlung 3 mm Durchmesser hat. Dieser 

 Glaszylinder ist der Achse parallel so abgeschliffen, daß in den 

 inneren Raum durch eine angekittete Quarzplatte von 1 mm Dicke 

 das Licht zugeführt werden kann. Der Glaszylinder ist wie bei 

 einer feuchten Kammer, jedoch am Rande, an ein Objektglas an- 

 gekittet, und wird nach dem Füllen mit einem gewöhnlichen, oder 

 mit einem von der Firma Carl Zeiss vorgeschlagenen, versteiften 

 Deckglase bedeckt. Das Quarzfensterchen, d. i. der Teil der Quarz- 

 platte, welcher die Höhlung des Zylinders von der Seite abschließt, 

 ist ebenso breit wie hoch (2 mm). 



Diese Küvette eignet sich sowohl für die Untersuchung der 

 Oleosole, als auch für die der Hydrosole. Ein Absetzen von Nieder- 

 schlägen während der Beobachtung wurde selbst bei langen Beob- 

 achtungen nicht bemerkt. Der größte Vorteil ist aber der, daß zur 

 ultramikroskopischen Beobachtung ein Tropfen von jeder Flüssigkeit 

 genügt. Die Diuiensionen des für das Ol bestimmten Raumes könnten 

 noch etwas kleiner gewählt werden; ebenso könnte die Konstruktion 

 vielfach abgeändert Averden und haben wir der Firma Zeiss außer 

 der beschriebenen Konstruktion besonders vorgeschlagen, in Metall - 

 platten an einer Seite eine kleine Höhlung ausdrehen und mit 

 einem eingefaßtem Quarzfensterchen versehen zu lassen, um ein Ver- 

 kitten der Bestandteile zu vermeiden. Die Wahl des Kittes bei 

 Glasküvetten muß sich nach dem untersuchten Materiale, sowie nach 

 der nötigen Spültlüssigkeit richten. 



31* 




484 Schneid er- Just: Ultramikroskopie der Oleosole. XXII. 4. 



Bei der Verwendimg- dieser Küvetten muß man sich ebenso wie 

 bei den bisherigen für Durchfluß eingerichteten am meisten vor 

 Luftblasen hüten, da dieselben das Licht seitlich brechen und 

 dann Teilchen sichtbar maclien, welche sonst unsichtbar wären. INIan 

 muß deshalb einen so großen Tropfen der untersuchten Flüssigkeit 

 in den Glaszylinder fallen lassen, daß die Flüssigkeit an der Ober- 

 tläche einen in die Höhe kappenförmig steigenden Kugelabschnitt 

 bildet, auf welchen man das Deckglas langsam legt. Das ausfließende Öl 

 muß dann von dem Fensterchen durch Filtrierpapier entfernt werden. 



Zur Untersuchung der Öle eignen sich besser Trockensysteme 

 als diejenigen mit Wasserimmersion, weil das Öl leicht zum Wasser 

 kommt und dann auf demselben in die Höhe steigt. Bei der Ver- 

 wendung dieser Küvette ist noch darauf zu schauen, daß das Licht 

 genau senkrecht auf das Glasfensterchen falle, weshalb es angezeigt 

 wäre, anstatt des hochstellbaren Objekttisches No. 26 des Zeiss sehen 

 Preisverzeichnisses, M. 163, einen solchen zu verwenden, der eine 

 Neigung nach rückwärts und vorwärts erlauben würde. Bei 

 wenig durchsichtigen PTüssigkeiten kann es auch darauf ankommen, 

 ob der Lichtkegel dem Deckglase näher, oder von demselben ent- 

 fernter steht. Die andern Vorsichtsmaßregeln ergeben sich aus der 

 Beschreibung der Arbeit im zweiten Teile. 



um auch feste Fette, Wachs, Harze etc. ultramikroskopisch 

 untersuchen zu können , wurde die Firma Carl Zeiss um die An- 

 fertigung einer heizbaren Küvette in Form der oben genannten, 

 mit Höhlung und Fensterchen verseheneu, jedoch auch für Durchfluß 

 von heißem Wasser eingerichteten Metallplatten gebeten. Diese heiz- 

 bare Küvette hat sich im Laufe der Arbeit auch für Öle notwendig 

 gezeigt, um die festen, leichtsclimelzenden Ausscheidungen von Fett- 

 teilchen aus Ölen zum Verschwinden zu bringen. 



Endlich mußte derselben Firma der Antrag gestellt werden, 

 Doppelultramikroskope mit einer Lampe zu bauen, um die 

 Reaktionen zweier Körper bei derselben Lichtintensität vergleichen 

 zu können, da sehr oft das Resultat von Zählungen und Messungen 

 bei einem und demselben Öle nach der Intensität des Lichtbogens 

 variiert und durch die angeführte Konstruktion dieser Einfluß be- 

 seitigt werden könnte. Es genügt nicht in dem Leitungsdraht den- 

 selben Strom zu erhalten. 



Das Studium der ersten und einfachsten bei Fett- und Harz- 

 körpern sich darbietenden Aufgabe, die Prüfung der Reaktionen mit 

 Edelmetallsalzen und besonders mit Goldchlorid bei fetten Ölen über- 




XXII, 4. Sclineider-Just: Ultramikroskopie der Oleosole. 435 



nahm mein Schüler Jaroslav Just und führte dieselben in meinem 

 Laboratorium aus. Seine Resultate und Schlüsse sind im nachfolgen- 

 den beschrieben. Es sei nur noch bemerkt, daß alle Zahlen von 

 mir nachkontrolliert und richtig befunden wurden ; die Kontrolle war 

 deshalb wichtig, um jedes Bedenken, daß die Zahlen von der Emp- 

 tindlichkeit des Auges abhängen könnten, zu beseitigen. 



IL 



Li der chemischen Technologie und besonders in deren Hilfs- 

 wissenschaft, der technischen Analyse, ötfnet sich ein weites Arbeits- 

 feld dadurch, daß man eine große Zahl von unerklärten Erscheinungen 

 mit Hilfe des Ultramikroskopes von Siedentopp und Zsigmondy stu- 

 dieren kann, und daß man dort, wo die bisherigen Prüfungsmethoden 

 nicht ausreichten, über eine neue Kontrolle verfügt. 



Die gegenwärtige Arbeit ist ein Vei'such, eine sehr interessante, 

 jedoch wenig erklärte , und wenig verläßliche makroskopische und 

 mikroskopische Reaktion der fetten Öle ultramikroskopisch zu über- 

 prüfen : die Reaktion mit dem Goldchloride. Die fetten Öle müssen 

 ihrer chemischen Zusammensetzung entsprechend im Goldchloride und 

 den Edelmetallsalzen überhaupt eine Reduktion hervorrufen , bei der 

 man erwarten kann , daß die reduzierte Menge und die Heftigkeit 

 der Reduktion mit der Jodzahl steigen wird. Es wird jedoch jedes 

 Ol nach seinen besonderen physikalischen Eigenschaften verschieden 

 fähig sein, das Reduktionsprodukt, d. i. das Gold in sich schwebend 

 zu erhalten. Wirkt die Goldchloridlösuug auf Öle ein, so tritt ent- 

 weder ein Ausscheiden von metallglänzendem Golde ein, oder eine 

 Blaufärbung durch mehr oder weniger grobe , leicht zum Absetzen 

 geneigte Teilchen, oder eine Rotfärbung durch ultramikroskopisches 

 Gold, in besonderen Fällen eine Gelbfärbung, oder es ist keine Ver- 

 änderung sichtbar. Daß diese, bei manchen Ölen besonders schön 

 auftretende Reaktion praktisch wenig geschätzt ist und selbst in der 

 Analyse der Fette und Wachsarten von Benedikt und Ulzer nicht 

 berücksichtigt wurde, hat seine Ursache darin, daß die Resultate 

 der Reaktion von den Bedingungen zu sehr abhängig sind. Je nach 

 dem Lösungsmittel , der Temperatur , der Zeit , der Bewegung und 

 der Ölmenge bleibt die Reaktion auf einer immer anderen Stufe 

 stehen und man kann deshalb aus derselben nur dann Schlüsse 

 ziehen , wenn man durch vergleichende Versuche die, den betreffen- 




486 Schneider-Just: Ultramikroskopie der Oleosole. XXII. 4, 



den Bedingungen zugehörige Reaktionsstiife auch bei sicheren Typen- 

 mustern hervorgerufen hatte. 



Sehr interessant ist aueli die mikrochemische Reaktion, wo nicht 

 nur die verschiedenen Formen der makroskopischen Reaktion be- 

 trachtet, sondern auch deren Übergang verfolgt werden kann. 

 Es ist jedoch wichtig, hier der prinzipiellen Unterschiede zwischen 

 den mikrochemischen Reaktionen der Ole und solchen in der Histo- 

 logie bei der Prüfung von Zellgeweben vorkommenden Reaktionen 

 zu gedenken. Bei den Ölen hängt das Resultat, von den oben ge- 

 nannten Bedingungen abgesehen, nur von zwei Faktoren ab, d. i. von 

 der Reduktion durch das Ol und von der, der lihysikalischen Zu- 

 sammensetzung entsprechenden Fähigkeit des Öles, Goldteilchen in 

 Verteilung zu erhalten. 



Die Reaktion bei komplizierten Geweben ist dagegen abhängig- 

 von der Reduktionsfähigkeit sämtlicher in den Zellen vorkommenden 

 Stoffe, von dem Quellungsgrade , welcher nach der Anwendung von 

 Fixier- und Aufhellungsmitteln eingetreten ist, von der Lichtwirkung 

 und von den Reagentien mit welclien man nach der Tränkung mit 

 den Lösungen von Goldverbindungen die Reduktion im untersuchten 

 Gegenstande vollendet, manchmal auch mäßigt oder einstellt. Es 

 kann sich auch das Gold der verschiedenen Goldpräparate und 

 Goldlösungen, welche oft auch Auroverbindungen enthalten, von den 

 zahlreichen vorhandenen Eiweißstoffen nicht gleichmäßig sammeln, 

 binden und reduzieren. 



Um die Goldreaktion der fetten Öle mit Hilfe des Ultra mikro- 

 skopes aufzuklären, wurde eine Anzahl derselben aus der Reihe der 

 industriell wichtigsten Öle zur Prüfung gewählt, und zwar so, damit 

 jede chemisch charakterisierte Gruppe vertreten sei. Außerdem 

 wurden auch einige Fabriksprodukte untersucht. Die ausgewählten 

 Ole und öligen Fabrikate hatten folgende Farbe und Beschaffenheit ; 



1. Leinöl war gelb, klar. 



2. Leinölfirnis braunorangegelb, schwach trüb. 



3. Hanföl gelb, klar. 



4. Nußöl gelb, schwach trüb. 



5. Mohnöl farblos, klar. 



(i. Japanisches Holzöl lichtgelb, klar. 



7. OHvenöl gelblich, ganz schwach trüb, 



8. Arachisöl gelblich, klar. 



9. BaumwoUsamenöl gelb, trüb. 



10. Sesaiuöl röthch, klar. 



11. Rapsöl gelblich, schwach getrübt. 




XXII, 4. Sclineider-Just: Ultraiuikroskopie der Oleosole. 437 



12. Rizinusöl furblos, klar. 



13. Pferdeöl lichtgelb, fast klar. 



14. Elain- Destillat orungegelb, fast klar. 



15. Ela'in-Saponifikat ... . . orangegelb, getrübt. 



16. Lebertran gelb, klar. 



17. Dreikronentran rotbraun, klar. 



18. Walratöl orangegelb, klar. 



19. Gelbes Mineralöl gelb, klar. 



20. Paraffinöl farblos, klar. 



Es sei ausdrücklich bemerkt , daß bei diesen Versuchen ab- 

 sichtlich auch getrübte Handelsöle , oder Öle , die beim Stehen und 

 geringer Abkühlung Trübungen ausschieden, in die Arbeit genommen 

 wurden, und zwar aus dem Grunde, weil die Versuche auch den 

 Einfluß der Trübungen auf die Reaktionen zeigen sollten und 

 überhaupt die Handels öle und nicht durcli Ausfrieren und Pressen 

 präparierte Öle untersuclit werden sollten. 



Bei der mikroskopischen Untersuchung der genannten 

 ( >le wurden bei Sesam-, Rizinus- und Rapsöl keine Verunreinigungen 

 gefunden, bei Leinöl, Leinölfirnis, japanischem Holzöl, Hanf-, Oliven-, 

 Arachis-, Walrat-, Mineral- und Paraffinöl fand man nur ausnahms- 

 weise Teilchen von Verunreinigungen, dagegen bei Nuß-, Mohn-, 

 Baumwollsamen und Pferdeöl , bei Elain - Destillat und Saponifikat 

 wurden zahlreiche Klumpen von Fettkristallen, bei Leber- und Drei- 

 kronentran wurden einzelne und zu 2 oder 3 gruppierte etwa 2 f.t 

 lange Stäbclien aus Fett gefunden. 



Bei der ultramikroskopischen Prüfung wui'de folgender 

 Vorgang eingehalten : Noch vor dem Einstellen des Mikroskopes 

 wurde notiert, in welcher Farbe und Lichtintensität der Lichtkegel 

 dem freien Auge erscheint, und zwar wie er gleich hinter dem 

 Fensterchen und wie er rückwärts beschaffen ist ; nach Bedarf 

 wurde auch sichergestellt, welches Licht sich hinter der beobachteten 

 Flüssigkeit in den Glaszylinder ausbreitet. Nach der Einstellung 

 des Mikroskopes auf den Kegel wurde die Farbe und Lichtintensität 

 des Kegels im Mikroskop notiert, dann die Anzahl, die Farbe, die 

 Leuchtkraft und Größe respektive Sichtbarkeit der leuchtenden 

 Punkte, der m i t I n t e r f e r e n z k r e i s e n u m g e b e n e n P u n k t e 

 und der Punktegruppen. Mit Rücksicht darauf, daß die An- 

 zahl der Punkte und Gruppen, die im Ultramikroskope sichtbar 

 sind, oft sehr klein ist, wurde für diesen Fall neben den 18 Qua- 

 draten des Okularzählapparates, die zusammen als Flächeneinheit beim 

 Zählen dienen, noch eine größere Einheit eingeführt, und zwar der 




488 Schneider-Just: Ultraiuikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



ganze Lichtkegel, soweit er im Sehfelde sichtbar ist, bei einer 

 solchen Einstellung des Spaltes , daß die engste Stelle des Kegels 

 der dreifachen Seite eines Zählquadrates gleich sei , wobei noch zu 

 bemerken ist, daß sämtliche Zählungen mit dem Objektive C und 

 Okulare 4 (Zelss) vorgenommen wurden. Ein Quadrat des Zähl- 

 okulares entspricht im l>bjekte einer Fläche von 225 /i^, die 

 18 Quadrate 4050 /t-^, der ganze Kegelschnitt etwa 45 000 //"-. Es 

 ist also die genannte neue Einheit elfmal größer als die 18 Quadrate 

 zusammen, was auch bei Zählungen bestätigt wurde. Die Höhe des 

 Spaltes wurde auf 0*2 mm eingestellt. 



Beim Heben des Tubus mittelst der feinen Einsteilvorrichtung 

 umgeben sich manchmal die Punkte und Gruppen mit luterferenz- 

 ringen in verschiedener Zahl ; die Ringe werden immer größer, dabei 

 jedoch auch lichtschwächer, bis sie dem Auge verschwinden. Beim 

 Senken des Tubus verschwinden die Punkte und Gruppen ohne die 

 Bildung von Ringen. Die Höhendifferenz zwischen jener 

 Einstellung, wo die Punkte und Gruppen bei der 

 Senkung d e s T u b u s verschwanden und z w i s c h e n j e n e r 

 Einstellung, wo der letzte größte Kreis bei der 

 Hebung des Tubus v e r s c h w and, ist c h a r a k t e r i s t i s c h 

 für die Feinheit der Goldteilchen und Gruppen. Diese 

 Höhendifferenz, in /t ausgedrückt, ist im folgenden mit dem Buch- 

 staben J bezeichnet. Mit diesem Werte hängt zusammen der Durch- 

 messer des größten Kreises vor dem Verschwinden ; soweit nur diese 

 Größe bestimmt wurde, ist sie angeführt und ist mit dem Buchstaben 

 $ bezeichnet, u. zw. wurde bei deren Ermittlung als Längeneinheit 

 die Seite eines Quadrates des Zählokulars gewählt. Durch die 

 Division aller bestimmten J durch die zugehörigen CP wurde ge- 

 funden, daß z/ meistens 22 bis 25 ^ gleich ist. Bei beweglichen 

 Teilchen in Hydrosolen mußten wir uns mit der Bestimmung von 

 begnügen ; ist dagegen der Kegel und mit ihm auch die Quadrate 

 unsichtbar, so ist wieder die Bestimmung von _/ verläßlicher. Außer 

 den durchschnittlichen Werten von A und wurden , wo es be- 

 lehrender zu sein schien, deren Maxima bestimmt. 



Da die mit Kreisen umgebenen Punkte verschiedenen Teilchen 

 und Gruppen angehören können , so wurden neue Unterscheidungs- 

 merkmale gesucht. Bei den Interferenzringen , die sich um Punkte 

 und Gruppen bilden, wurde die Anzahl, die Farbe und die Licht- 

 intensität, angegeben, u. zw. nicht nur bei der scharfen Einstellung 

 auf den Kegel resp. auf die Mehrzahl der Punkte , sondern auch 




XXII, 4. Schneider- Just: Ultrauiikroskopie der Oleosole. 489 



bei einer um 20 jii liiiheren Einstellung-. Es wurde auch der mittlere 

 Durchmesser der äußersten Ringe bei den mit Kreisen umgebenen 

 Punkten nach der Hebung des Tubus von 20 /< durch Messungen 

 bestimmt. Bei diesem letzten zeigte sich jedoch kein praktischer 

 Wert : derselbe war in keiner Beziehung zu anderen Befunden und 

 Eigenschaften, weshalb diese Zahlen bei den Yersuchsergebnissen 

 nicht angeführt werden. Dagegen bewähi'te sich die Sicherstelluug 

 der Anzahl der mit Ringen umgebenen Punkte , sowie die Sicher- 

 stellung der Zahl, der Farben, der Lichtintensität und der Schärfe 

 der Kreise nach dem Heben des Tubus um 20 ju als sehr belehrend 

 und wichtig. 



Bei den Zählungen wurden die mit Interferenzkreisen umgebenen 

 ]*unkte oder Systeme konzentrischer Kreise ohne sichtbare Mittel- 

 punkte überall zu den Punkten gezählt, obzwar man annehmen muß 

 und es sich auch oft durch die scharfe Einstellung beweisen läßt, 

 daß sich die Kreise nur um Punktepaare und Gruppen bilden. 



Den letzten Teil der ultramikroskopischeu Untersuchung eines 

 jeden Öles bildete die Sicherstellung des Befundes bei Anwendung 

 des Polarisations-Analysators. Bei den Angaben, wie sich die Farben 

 durch das Drehen des Analysators verändern , bedeutet die erste 

 Farbe diejenige, die zu sehen ist, wenn der beleuchtende und der 

 abgebeugte Strahl in der Symmetrieebene des Zeiss sehen Analy- 

 sators liegen. 



Da zu erwarten war , daß die vorerwähnten Öle und Fabriks- 

 produkte im normalen Zustande auch ultramikroskopische Teilchen 

 enthalten werden , so wurde die ultramikroskopische Untersuchung 

 zuerst bei den Ölen selbst, d. i. vor der Reaktion vorgenommen. 



Ultramikroskopisehe Befunde bei den Ölen vor der 



Reaktion. 



1. Leinöl. Das treie Auge sah einen lichtschwachen, blassen Kegel, 

 im Ultramikroskope war derselbe bläulich weiß, wenig hell, und man sah 

 meistens keine Punkte, ausnahmsweise 1 oder 2 im ganzen Kegel. Die 

 Punkte waren weiß oder oi-angegelb ohne Hinge oder mit bis 3 Ringen. _/(30. 

 Bei der Beobachtung mittels des Analysators verdunkelte sich beim Drehen 

 desselben der Kegel, die Farbe der Punkte veränderte sich und sciiwankte 

 zwischen der roten und der grauen. 



2. Leinölfirnis. Das freie Auge sali einen grünlichweißen Kegel: 

 auch im ültramikroskope war der Kegel grünlichgelbweiß, gewöhnlich ohne 

 Punkte. Ausnahmsweise wurden im ganzen Kegel 2 bis o Punkte ohne 




490 Schneider-Just: Ulti-amikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



Kreise oder mit denselben oder auch Doppelpunkte und Gruppen von 18 

 stark leuchtenden Punkten gefunden. J bei Punkten 44. Durch den 

 Analysator trat keine Veränderung in der Farbe ein , beim Drehen des- 

 selben verdunkelte sich der Kegel, die einzelnen Punkte, sowie diejenigen 

 in den Gruppen verblaßten, veränderten aber nicht auffallend die Farbe. 



3. Hanföl. Das freie Auge sah einen blaugrünlichen Kegel. Im 

 Ultramikroskope war derselbe hell, milchweiß und enthielt feine weiße 

 Punkte, etwa 10 auf ein Quadrat; außerdem fand man im ganzen Kegel 

 8 weiße, größere Punkte ohne Kreise, oder mit einem Kreise, und aus- 

 nahmsweise Gruppen z. B. von 11 Punkten. J 60. Durch den Analysator 

 wurde die Farbe nicht verändert, beim Drehen desselben verdunkelte sich 

 der Kegel, die kleinen Punkte und diejenigen in den Gruppen verschwan- 

 den, die größeren verblaßten. 



4. Nußöl. Das freie Auge sah einen weißen Kegel. Im Ultramikro- 

 skope war derselbe milchweiß, wenig hell, und enthielt 40 Gruppen von 

 verschiedener Größe, von solchen, welche 6 Punkte zählten bis zu solchen, 

 welche sich über G Quadrate ausbreiteten und in einem Quadrate 32 weiße 

 Punkte enthielten. Zwischen den Gruppen waren aucli einzelne Punkte. 

 Durchschnittlich kommen auf 18 Quadrate im ganzen 30 Punkte. Beim 

 Heben des Tubus umgaben sich nur die einzelnen Punkte mit Kreisen. Die 

 Kreise waren nur lichtschwach ; J 54. Im Analysator erschien die weiße 

 Farbe der Punkte nicht verändert, beim Drehen desselben verdunkelte sich 

 der Kegel, die feinen Punkte verschwanden, <lie hellen verblaßten. 



5. Mohnöl. Das freie Auge sah einen bläulichen Kegel; im Ultra- 

 mikroskope war der Kegel bläulich , wenig hell , und enthielt höchstens 

 14 Punkte, welche teilweise mit bis 4 bunten Kreisen umgeben waren. 

 J 44. Beim Drehen des Analysators verdunkelte sich der Kegel, die feinen 

 Punkte verschwanden, die mit Kreisen umgebenen veränderten die Farbe. 



6. Japanisches Holzöl. Das freie Auge sah einen weißen Kegel ; 

 im Ultramikroskope war der Kegel hell , blauweiß und enthielt 18 Punkte 

 mit 3 bis 5 Kreisen und eine Gruppe von 10 Punkten. J 174. Im Analy- 

 sator erschienen die Punkte bunter, beim Drehen desselben verdunkelte 

 sich ein wenig der Kegel und die Punkte verschwanden. — Wenn sich 

 das Öl in der Kälte trübte, so fand man im Kegel 1 bis 2 Gruppen von 

 gelben , sternartig gruppierten Nadeln , die mit lichteren Punkten bedeckt 

 waren. Im Analysator veränderten diese Punkte die Farbe, die Nadeln 

 verschwanden. 



7. Olivenöl. Das freie Auge sah einen weißen Kegel; im Ultra- 

 mikroskope war derselbe dunkel und enthielt 85 Punkte , von denen die 

 Mehrzahl mit 6 Kreisen umgeben war. Auffallend war die bunte Färbung. 

 J 174. Außerdem fand man im ganzen Kegel 2 Gruppen von 3 und 

 7 Punkten. Beim Drehen des Analysators verdunkelte sich der Kegel ganz, 

 und die Farben der Punkte und der Kreise veränderten sich z. B. von 

 hellrot in blaßgrünlich. — Für die Reaktionen mit den Verbindungen 

 anderer Metalle als Gold wurde ein anderes gelberes Öl verwendet, bei 

 welchem das freie Auge einen rosaroten Kegel sah und dieser im Ultra- 

 mikroskope dunkelrot, wenig leuchtend war. Der Kegel enthielt 8 bis 12 

 verschieden gefärbte Punkte ohne Kreise oder mit bis 2 Kreisen. J 5(). 




XXII. 4. Schneider-. I iist: Ultramikroskopie der Oleosole. 491 



8. A r a c h i s ö l. Das freie Auge sah einen kauiu deutlichen , bläu- 

 lichen Kegel; im Ultramikroskope war derselbe dunkel und bläulich und 

 enthielt 13 Punkte ohne Kreise oder mit farbigen Kreisen und eine Gruppe 

 von 13 Tunkten. Jmax 86. Beim Drehen des Analysators verschwanden 

 sowohl der Kegel als auch die Punkte und Kreise. 



9. Baum wollsamcnr)!. Infolge der Trübung war der Kegel nicht 

 scharf abgegrenzt und man sah nur das Sehfeld durch einen lichteren 

 Streifen geteilt. In den 18 Quadraten waren 6 bis 10 Kreise schwach sicht- 

 bar; ihr Durchmesser betrug eine halbe bis anderthalb Quadratseiten. 



10. Sesam öl. Das freie Auge sah einen weißen Kegel; im Ultra- 

 mikroskope war derselbe milchweiß und verdunkelte sich beim Drehen des 

 Analysators in grau. Es waren keine Punkte zu sehen. 



11. Rapsöl. Das freie Auge sah einen bläulichen Kegel; im Ultra- 

 mikroskope war derselbe bläulichweiß und enthielt 110 Punkte, die teil- 

 weise mit bis 4 sehr bunten Kreisen umgeben waren. Unter den Farben 

 war auch die violette vertreten. Die großen Kreise waren auf jeder Seite 

 verschieden gefärbt, z. B. die eine Hälfte rot, die andere grün. A 84. Beim 

 Drehen des Analysators verdunkelte sich der Kegel und veränderte die 

 bläuliche Farbe in grau. Die Punkte verblaßten, die Kreise verschwanden. 



12. Rizinusöl. Das freie Auge sah einen grauen, wenig leuchtenden 

 Kegel; im Ultramikroskope war derselbe milchweiß, jedoch nicht hell und 

 enthielt höchstens 25 weiße Punkte, von denen einige mit bis 4 farbigen 

 Kreisen umgeben waren. J 240. Beim Drehen des Analysators verdunkelte 

 sich der Kegel, die Punkte verblaßten, die Kreise verschwanden fast und 

 veränderten die Farbe. 



13. Pferdeöl. Das freie Auge sah einen weißen Kegel; im Ultra- 

 mikroskoi^e war derselbe fast unsichtbar. Nur wo die Punkte dichter 

 waren, war er schwach weiß. Man sah in demselben etwa 35 weiße Punkte 

 von J GO und 20 bis 40 Gruppen, davon eine oder 2 besonders leuchtende. 

 Die Gruppen waren, bis 4 Quadrate groß und enthielten in einem Quadrate 

 etwa 20 weiße Punkte ohne Kreise. Die Punkte der Gruppen schienen 

 auf nadelförmigcn Kristallen zu liegen. Im Analysator waren die Punkte 

 nicht bunter, beim Drehen desselben verdunkelte sich der Kegel fast bis 

 zur Unsichtbarkeit und die Punkte verblaßten. 



14. Elain-Destillat. Das freie Auge sah einen hellblauen, sehr 

 lichten Kegel; im Ultramikroskope war derselbe milchweiß und enthielt 

 etwa 12 weiße, stärker leuchtende Punkte, davon einen mit 1 Kreise, J 140, 

 außerdem etwa 50 kaum sichtbare Punkte. Im Analysator blieb alles weiß, 

 beim Drehen desselben verdunkelte sich der Kegel und die Punkte ver- 

 schwanden. 



15. Elain-Saponifikat. Das freie Auge sah einen lichtblauen, 

 hellen Kegel; im Ultramikroskope war derselbe milchweiß, jedoch nicht 

 besonders lichtstark. Er enthielt etwa 20 weiße, blasse und 20 schwach 

 gefärbte, helle Punkte; die letzteren hatten bis (3 farbige Kreise, z.B. rote 

 und grüne oder violette und gelbe. J IGO. Im Analysator erschienen die 

 Farben bunter, beim Drehen desselben verdunkelte sich der Kegel, die 

 feinen Punkte verschwanden , die hellen und die Kreise veränderten die 

 Farbe und H-elligkeit. 




492 Öchneider-Just: Ultramikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



16. L e b e r t r a n. Das freie Auge sah einen hellen, blaugriinen Kegel ; 

 im Ultramikroskope war derselbe weiß, lichtschwach und enthielt 7 weiße 

 Punkte von verschiedener Größe. 1 Punkt hatte 2 farbige Kreise. _/ 50. Beim 

 Drehen des Analysators verdunkelte sich der Kegel, die blassen Punkte 

 verschwanden, die stark leuchtenden verblaßten, bei den Kreisen veränderte 

 sich die Farbe und Helligkeit. 



17. Drei k ronen trän. Dem freien Auge erschien der Kegel grün- 

 lich weiß , rückwärts orangegelb ; im Ultramikroskope war derselbe hell- 

 gelbbraun, ohne Punkte. Beim Drehen des Analj'sators verdunkelte er 

 sich. Ausnahmsweise fand man im ganzen Kegel 1 oder 2 Punkte ohne 

 Kreise, oder eine Gruppe von 40 Punkten, welche beim Drehen des Ana- 

 lysators nacheinander verschwanden. 



18. Walratöl. Das freie Auge sah einen liellen, blaugrünen Kegel : 

 im Ultramikroskope war derselbe hell, gelbgrün und enthielt entweder keine 

 Punkte oder höchstens 10 sehr schwach sichtbare, ausnahmsweise Punkte 

 mit Kreisen. J 20. Einmal wurde eine Gruppe von 30 Punkten gefunden. 

 Beim Drehen des Analysators verdunkelte sich der Kegel, die helleren 

 Punkte verblaßten, die andern, sowie auch die Kreise und die Gruppe 

 verschwanden. 



19. Gelbes Mineralöl. Dem freien Auge erschien der Kegel vorne 

 blau, rückwärts grün ; im Ultramikroskope war derselbe deutlich und blau, 

 und enthielt 1 bis 10 weiße, wenig helle Punkte ohne Kreise. J 12. Aus- 

 nahmsweise erschien eine Gruppe von 20 Punkten und einzelne hellere 

 Punkte mit bunten Kreisen. J 70. Beim Drehen des Analysators ver- 

 dunkelte sich der Kegel, die Punkte und die Kreise verschwanden. 



20. Paraffin öl. Das freie Auge sah einen himmelblauen Kegel; 

 dieselbe Farbe hatte der Kegel im Ultramikroskope und war frei von 

 Punkten. Beim Drehen des Analysators blieb er blau. Ausnahmsweise 

 wurden im ganzen Kegel bis 25 Punkte gefunden, welche fast durchwegs 

 mit farbigen Kreisen umgeben waren und beim Drehen des Analysators 

 verschwanden. Ein andermal kam eine Gruppe von 40 hell leuchtenden, 

 schwach gefärbten Punkten vor , welche beim Drelien des Analysators 

 verblaßten. — 



Fassen wir die vorerwähnten Befunde zusammen, so sehen wir 

 folgendes : Der Kegel erscheint dem freien Auge nm so weißer, 

 je mehr Fettgruppen er enthält. Wo nur Punkte vorkommen, dort 

 ist der Kegel blaß , bhin oder nach der Farbe des ()les blaugrün 

 bis orangegelb gefärbt. Die einzelnen den Fettteilclien entsprechen- 

 den Punkte sind weiß. Sind sie fein , so verschwinden sie schnell 

 beim Heben des Tubus , ohne sich mit Kreisen zu imigeben , und 

 auch beim Drehen des Analysators verschwinden sie, ohne die Farbe 

 zu verändern. Am zaldreichsteu sind sie beim Hanföle, 10 in 

 1 Quadrat. Umgeben sich die dem Fette entsprechenden Punkte 

 beim Heben des Tubus mit Kreisen, so sind diese Kreise entweder 

 undeutlich blaß, wenig gefärbt, von kleinem J und ^, und es 




XXII, 4. Sclineider-Just: Ultraraikroskopie der Oleusole. 493 



werden diese Kreise beim Drehen des Analysators nicht bunter und 

 verändern dieselben nicht die Farbe, sondern verblnssen oder ver- 

 schwinden , — oder es sind die Kreise bunt , deutlich , hell , von 

 großem zl und ^, ihre Farbe erscheint im Analysator noch buntir 

 und es wechselt beim Drehen desselben die gelbe und die violette, 

 die rote und die grüne Farbe ab. Diese Farbenveränderung sehen 

 wir manchmal auch ohne den Analysator beim langsamen Heben des 

 Tubus. Ein Beispiel der ersteren ist das Nuß-, Hanf- und Pferdeöl, 

 ein Beispiel der anderen ist das Oliven-, Raps- und Rizinusöl, sowie 

 das Elain - Saponifikat. Die den Fettteilchengruppen entsprechenden 

 Punktegruppen bestehen entweder aus blassen oder aus hellen, aus 

 weißen oder aus bunten Punkten, die zu ,3 bis 200 beisammen sind 

 und sich beim Heben des Tubus entweder mit Kreisen umgeben oder 

 nicht. Die feinen Punkte der Gruppen verschwinden gewöhnlich 

 beim Drehen des Analysators, die hellen ändern meistens die Farbe. 

 Diese dem gefällten Fette entsprechenden Befunde sind überall von 

 den nach der Reaktion sichergestellten ultramikroskopischen Befunden 

 abzurechnen. 



Vergleichende Versuche zur Sicherstellung des Einflusses 

 des Goldchlorids auf verschiedene Öle. 



Bei diesen Versuchen war zuerst zu entscheiden, welches 

 Lösungsmittel für das Goldchlorid genommen werden sollte. Bei 

 wässerigen Lösungen war zu befürchten , daß sich dieselben mit 

 den Ölen absolut nicht mischen und deshalb auch unvollkommen ein- 

 wirken werden ; anderseits lösen wieder die Fettlösungsmittel nicht 

 das Goldchlorid. Bei alkoholischen Lösungen konnte wenigstens 

 eine geringe Mischbarkeit mit den Fettölen erwartet werden, dafür 

 aber wurde die Reaktion bei Gegenwart eines dritten Körpers, d. i. 

 des Alkohols, ausgeführt, der bei günstigen Verhältnissen selbst eine 

 Reaktion verursachen oder unterstützen konnte. Infolgedessen und 

 auf Grund von Vorversuchen wurde die Reaktion sowohl mit einer 

 alkoholischen als auch mit einer wässerigen Goldchloridlösung aus- 

 geführt. Zu diesen Grundversuchen wurde je ein Gramm eines 

 jeden Öles abgewogen und 0*05 cm ■' einer Lösung von 6 g Gold- 

 chlorid per Liter zugesetzt. 



Bei den mit der alkoholischen Lösung versetzten Ölen trat 

 schon nach einem halbstündigen Erwärmen im Wasserbade ohne 




494 Schneicler-Just: Ultrainikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



Schütteln eine deutliche Veränderung ein , weshalb die Reaktion 

 unterbrochen wurde. 



Makroskopischer Befund. Die beim Vergleiche mit der 

 ursprünglichen Farbe der Öle gefundenen Farbenveränderungen lassen 

 sich nach der Deutlichkeit in die folgende Skala zusammenstellen : 

 Am meisten färbte sich das Mohnöl , u. zw. blauviolett , dann das 

 Olivenöl rotviolett , das Sesamöl violett , das Hanföl und der Leber- 

 tran rot, der Leinölfirnis und das Walrätöl blutrot, das japanische 

 Holzöl grauviolett , das Rizinusöl grau , das Leinöl orangegelb (mit 

 einem schwarzen Niederschlage) , das BaumwoUsamenöl bräunlich, 

 das gelbe Mineralöl ein wenig orangegelber, das Pferdeöl und die 

 Elaine grünlicher, das Rapsöl gelblich ; der Dreikronentran war etwas 

 dunkler und trüber, das Arachisöl etwas lichter. Es traten keine 

 Veränderungen ein beim Nußöle und dem Paraffinöle. 



Nach 14 Tagen wurden dann folgende Veränderungen des vor- 

 erwähnten Befundes beobachtet : Aus dem Mohnöle setzte sich ein 

 blauschwarzes Pulver ab und das Öl war fast entfärbt ; aus dem 

 Olivenöle setzte sich auch ein blauer Niederschlag ab , und das Ol 

 blieb bläulich rosa ; aus dem Sesamöle setzte sich ein blauer Nieder- 

 schlag ab und das Öl blieb rosa , die Farbe entsprach dann einer 

 coupierten Farbe des Rubinglases. Aus dem Lebertrane setzte sich 

 ein purpurroter Niederschlag ab und das Öl behielt die Farbe des 

 Rubinglases. Aus dem Firnis setzte sieh nur ganz wenig eines 

 blauen Niederschlages an der Wand ab, und die Farbe blieb un- 

 verändert. Das Rapsöl wurde grünlich und zeigte einen schwachen 

 Goldscliimmer. Beim Nußöle trat eine rosarote Färbung ein ; die 

 anderen Öle blieben unverändert. 



Weil bei einem ähnlichen Erwärmen mit der av ä s s e r i g e n 

 Ooldchloridlösung ohne Schütteln nur eine schwache Reaktion, u. zw. 

 bei dem Mohnöle in Form einer Blaufärbung, beim Olivenöle als 

 ■eine rotviolette und beim Rizinusöle als eine graue Färbung eintrat, 

 so wurde noch weiter, im ganzen zwei Stunden lang, ohne Schütteln 

 erwärmt. Die Reaktion trat nun auch bei einigen Ölen ein, wo sie 

 früher fehlte. 



M a k r o s k o p i s c h e r Befund. Am deutlichsten war die 

 Färbung beim Olivenöle , u. zw. rotviolett ; bei den anderen Ölen 

 wurden in folgender Reihe abnehmende Veränderungen gefunden : 

 eine Violettfärbung beim Mohn-, Pferde-, Nuß-, Sesam-, Rizinus- und 

 Baumwollsamenöle ; eine Färbung ins Grünliche beim Leinöle (mit 

 einem schwarzen Niederschlage) , bei den Elainen und dem Leber- 




XXII, 4. Schneider-Just: Ultramikroskopie der Oleosole. 49;") 



träne ; eine Färbung- in orangegelb bei dem Walrat- und dem Hanf- 

 öle. Beim Aracliisöle trat eine Entfärbung, beim Dreikronentrane 

 eine schwache Verdunkelung ein. Das Rapsöl, das japanische Holz- 

 öl, das Mineralöl und das Paraffinöl waren unverändert. 



Nach 14 Tagen wurden folgende Veränderungen beobachtet: 

 Aus der roten Farbe des Olivenöles blieb nur das Kot zurück , es 

 zeigte sich ein goldener Schimmer und es setzte sich ein gold- 

 glänzender Niederschlag ab. Beim Hanf- und AValratöle zeigte sich 

 auch der goldene Schimmer und der goldglänzende Niederschlag, 

 beide waren jedoch dunkler als beim Olivenöle. Das Mohnöl ent- 

 färbte sich und die Wand überzog sich mit einem goldglänzenden 

 Belage. Aus der Farbe des Pferdeöles blieb nur die rote Kompo- 

 nente zurück und es setzte sich ein goldglänzender Niederschlag ab. 

 Im Nußöle blieb ebenso nur die rote Komponente der Farbe zurück 

 und es setzte sich ein goldglänzender Niederschlag ab. Das Sesamöl 

 bekam die ursprüngliche Farbe und schied einen schwarzen Nieder- 

 schlag aus. Das Rizinusöl bekam eine lichtgraue Farbe , es trat 

 Goldschimmer ein und an der Wand setzte sich ein goldgläiTzender 

 Belag ab. Die Elaiue bekamen ihre ursprüngliche Farbe und es 

 bildete sich ein geringer, schwarzer Niederschlag. Beim Lebertrane 

 blieb nur ein roter Strich der Färbung deutlich und es setzte sich 

 ein geringer , goldglänzender Niederschlag ab. Beim japanischen 

 Holzöle blieb nur ein rötlicher Stich zurück, das Paraffinöl färbte 

 sich bräunlich -weiß durch ausgeschiedene P"'ettteilchen. 



Ultramikroskopischer Befund. Bei den nachfolgenden 

 Befunden sind dre bei der alkoholischen Goldchloridlösung sicher- 

 gestellten Befunde mit dem Buchstaben A , bei der wässerigen mit 

 dem Buchstaben W bezeichnet. Es ist hier nur dasjenige be- 

 schrieben, was sich von dem Befunde beim ursprünglichen Ole unter- 

 scheidet oder was besonders hervorzuheben war. 



1. Leinöl. A. Das freie Auge sah einen weißen, rückwärts gelb- 

 lichen Kegel; im Ultramikroskope war der Kegel weiß, jedoch sehr wenig 

 hell und enthielt 36 orangegelbe Punkte; hiervon waren 31 mit Ringen. 

 Jnvix 140. Nach dem Heben des Tubus um 20 /x waren im ganzen Kegel 

 40 Punkte mit Kreisen. Beim Drehen des Analysators war die Farben- 

 veränderung der Ringe etwas deutlicher als vor der Reaktion. 



W. Das freie Auge sah einen weißen Kegel; im Ultramikroskope war 

 derselbe milchweiß und enthielt t) Punkte, davon 7 mit 1 bis 3 Kreisen, 

 außerdem eine Gruppe von "28 Punkten. Die Kreise waren bunter, rötlich 

 und grünlich. Jmax 212. Nach dem Heben des Tubus um 20 fi waren im 

 ganzen Kegel 12 Punkte mit Kreisen sichtbar; die Farbenveränderung beim 

 Drehen des Analysators war noch auffallender als im vorigen Falle A. 




496 Schneidei-Just: Ultramikroskopie der Oledsole. XXII, 4. 



2. Leinölfirnis. A. Das freie Auge sah einen orangeroten Kegel; 

 derselbe war im Ultramikroskope licht orangegelb. In 18 Quadraten waren 

 40 Punkte. Nach 14tägigem Stehen, als sich ein blanschwarzer Xieder- 

 sclilag absetzte, waren im ganzen Kegel nur ö Punkte, davon einer mit 

 1 Kreise und außerdem eine Gruppe von G Punkten zu sehen. Jnmx 80. 

 Beim Drehen des Analysators veränderte sich die Farbe der Punkte; die 

 Farbe des Kegels veränderte sich zwischen einem gelblichen Rosa und 

 einem Grau mit einem rötlichen Stiche. 



W. Das freie Aiage sah einen bläulichen, rückwärts grünlichen Kegel ; 

 im Ultramikroskope war derselbe weiß, wenig hell und enthielt 32 Punkte 

 und 10 Gruppen zu 3 bis 8 Punkten. Jaws IGO. Nach dem Heben des 

 Tubus um 20 ,m waren im ganzen Kegel 17 Punkte mit undeutlichen Kreisen 

 zu sehen. Beim Drehen des Analysators verdunkelte sich der Kegel, die 

 Punkte, die Kreise und die Gruppen verschwanden. 



3. Hanföl. A. Das freie Auge sah einen roten Kegel; im Ultra- 

 mikroskope war derselbe orangerot; die Zahl der feinen Punkte (10 im 

 Quadrat) veränderte sich nicht. Die Farbe war jedoch nicht mehr weiß, 

 sondern orangegelb. Außerdem verschwanden alle Punkte mit Kreisen und 

 Punktegruppen. Beim Drehen des Analysators war der Kegel abwechselnd 

 hellgelb und dunkelrot. Die Punkte verschwanden. 



W. Das freie Auge sah einen gelben Kegel ; im Ultramikroskope sah 

 man nur einen gelblich schimmernden Kegel. In 18 Quadraten wurden nur 

 128 Punkte gefunden. Diese Verminderung läßt sich dadurch erklären, 

 (laß viele feine Punkte durch hellleuchtende Punkte mit 1 bis 3 Kreisen 

 verdeckt wurden. Von diesen letzteren Punkten wurden in 18 Quadraten 

 40 gefunden ; ihre Kreise waren zum Teil bunt und es kamen auch rote 

 Kreise vor. Außej;dem wurde im ganzen Kegel eine Gruppe mit 5 Punkten 

 gefunden. Jmax 3G0 ist der höchste Wert , der bei den Ölreaktionen mit 

 Goldchlorid gefunden wurde. Nach dem Heben des Tubus um 20 ,« waren 

 in 18 Quadraten 57 Punkte mit gelben oder orangegellien Kreisen zu sehen. 

 Beim Drehen des Analysators verdunkelte sich der Kegel, die Kreise ver- 

 änderten die Farbe und die feinen Punkte verschwanden. 



4. Nuß öl. A. Das freie Auge sah einen gelben Kegel; im Ultra- 

 mikroskope war derselbe grünlichgelb. In 18 Quadraten fand man 12G Punkte, 

 davon 27 mit Kreisen. Jma.c 160. Die Punkte waren nicht weiß, sondern 

 gelb oder orangegelb. Auch nach dem Heben des Tubus um 20 (x fand 

 man in 18 Quadraten 24 Punkte mit Kreisen. Beim Drehen des Anal^^- 

 sators veränderte sich die P^'arbe des Kegels in Dunkelrot. Da das 'U an 

 dem betreffenden Tage klar war, fand man keine (iruppen. 



W. Makroskopisch zeigte sich dieselbe Veränderung, jedoch in er- 

 höhtem Grade. Der ultramikroskopiscbe Befund war aber weniger ab- 

 weichend von dem ursprünglichen, da das Ol bei der Beobachtung getrübt 

 war und deshalb die Reaktion durch große , weiße Gruppen von hellen 

 Punkten verdeckt war , welche beim Drehen des Analysators die Farbe 

 zwischen einer hellen gelblichweißen und einer dunkleren violettweißen 

 Farbe veränderten. — Das freie Auge sah einen rosagefärbten Kegel mit 

 gelbem Stich; im Ultramikroskope war der Kegel weiß. In 18 Quadraten 

 wurden 87 orangegelbe oder gelbe Punkte gefunden, davon .') mit 1 Kreise. 




XXII, 4. Sclineider-Just: Ultriimikroskopie der Oleosole. 497 



^max 190. Nach dem Heben des Tubus um 20 ^ wurden 23 Punkte mit 

 Kreisen in 18 Quadraten gefunden. Beim Drehen des Analysators ver- 

 dunkelte sich der Kegel und wurde rot, die Farbe der Punkte und Kreise 

 veränderte sich deutlich. 



5. Mohnöl. A. Das freie Auge sieht einen weißen Kegel; im Ultra- 

 mikroskope ist derselbe weiß, wenig intensiv. Gleich nach der Reaktion 

 enthielt der ganze Kegel 170 Punkte , die Mehrzahl ohne Kreise. Nach 

 14 Tagen wurden nur 38 Punkte gefunden, davon 32 mit Kreisen. Die 

 Zahl der Kreise stieg bei den Punkten von 5 auf 7 und deren Farbe wurde 

 so bunt, daß alle Regenbogenfarben bei einem Punkte gefunden wurden. 

 Die Farbe der Punkte, die nach der Reaktion orangegelb oder gelb war, 

 war jetzt meistens weiß und wurde auch eine Gruppe von (3 weißen Punkten 

 gefunden. Jmax 200. Bei Drehen des Analysators wurde der Kegel ganz 

 schwarz und die Kreise veränderten die Farbe. 



W. Die Reaktion war schwächer als im Falle A, wie der Befund am 

 ersten Tage zeigte. Einen noch größeren Unterschied konnte man nach 

 14 Tagen beobachten. — Das freie Auge sah einen weißen Kegel ; derselbe 

 war im Ultramikroskope blauweiß. Der Kegel enthielt zuerst 96 Punkte, 

 deren Mehrzahl mit bis 4 Kreisen umgeben war; diese Zahl sank auf 62 

 und waren dann nur 20 Punkte mit Kreisen umgeben, dafür aber mit bis 

 5 sehr bunten , in allen Regenbogenfarben gefärbten Kreisen. Jmax 326. 

 Nach dem Heben des Tubus hatten 31 von den 62 Punkten Kreise. Beim 

 Drehen des Analysators wurde der Kegel fast schwarz, die feinen Punkte 

 verschwanden. Die Kreise veränderten auffallend die Farbe. 



6. Japanisches Holzöl. A. Das freie Auge sah einen rosagefärbten 

 Kegel; im Ultramikroskope war derselbe hellorangegelb gefärbt. In 18 Qua- 

 draten wurden 127 gelbe und orangegelbe Punkte gefunden, davon 2 mit 

 je einem Kreise. Jmax 64. Auch nach dem Heben des Tubus um 20 jx 

 waren in 18 Quadraten nur 4 Punkte mit einem unbestimmten Kreise zu 

 sehen. Beim Dreheii des Analysators veränderte sich die hellgelbe Farbe 

 des Kegels in Dunkelorangegelb , die feinen Punkte verschwanden , die 

 großen verblaßten, aber die Farbe veränderte sich nicht. 



W. Das freie Auge sah einen weißen Kegel ; im Ultramikroskope war 

 derselbe milchweiß. In 18 Quadraten wurden 3(j orangegelbe Punkte ge- 

 funden, von denen 16 mit 1 oder 2 deutlichen Kreisen umgeben waren. 

 Jmax 308. Nach dem Heben des Tubus um 2() ,i< wurden 18 Punkte mit 

 Kreisen in 18 Quadraten gefunden. Beim Drehen des Analysators ver- 

 dunkelte sich der Kegel, die feinen Punkte verschwanden, bei den hellen, 

 sowie bei den Kreisen verblaßte die orangegelbe Farbe. 



7. Olivenöl. A. Das freie Auge sah einen weißen Kegel mit einem 

 schwachen roten Stich; im Ultramikroskope war derselbe dunkel, schwach 

 rötlich gefärbt. In 18 Quadraten fand man nur 12 Punkte, davon 6 mit 

 einem oder 2 Kreisen. Außerdem waren im ganzen Kegel 5 Gruppen zu 

 3 bis 7 Punkten, J durchschnittlich 60, _/,««.?• 268. Nach dem Heben des 

 Tubus um 20 u fand man in 18 Quadraten 9 Punkte mit bis 4 Kreisen. 

 Auffallend ist außer der kleinen Punktezahl und der Verminderung des 

 durchschnittlichen J die geringe Färbung der Mehrzahl der Punkte selbst 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 4. o2 




498 Schneider-Just: Ultraraikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



l)eim Drehen des Anah^sators. Die Farbe des Kegels bewegte sich zwischen 

 Grau und Dunkelrot. 



W. Das freie Auge sah einen rosagefärbten Kegel mit Gelbstich; im 

 Ultramikroskope war derselbe ziemlich dunkel, gelblich. In 18 Quadraten 

 fand man IGO Punkte, davon G4 hellere, und unter diesen 33 mit 1 oder 

 2 undeutlichen Kreisen. Die Punkte waren auch weit außerhalb des Kegels 

 zu seilen. Die Farbe der Punkte war orangegelb. Jmax 124. Nach dem 

 Heben des Tubus um 20 ^ wurden in 18 Quadraten 30 Punkte mit Kreisen 

 gefunden. Im Analysator erschienen die Punkte nur wenig bunter, beim 

 Drehen desselben bewegte sich die Farbe des Kegels zwischen gelb und rot. 



8. A r a c h i s ö 1. A. Das freie Auge sah einen sehr schwachen, weiß- 

 lichen Kegel; im Ultramikroskope war derselbe kaum deutlich, bläulich 

 und enthielt 6 bis 11 Punkte, davon die Hälfte mit bis 2 deutlichen bunten 

 Kreisen. Jmox 220. Nach dem Heben des Tubus um 20 fx wurden nur 

 5 Punkte mit weniger bunten Kreisen gefunden. Beim Drehen des Analy- 

 sators veränderte sich der Kegel nicht, die Punkte und die Kreise nur 

 wenig. 



W. Das freie Auge sah einen blassen, gelblichen Kegel; im Ultra- 

 mikroskope war derselbe dunkel, bläulich. In 18 Quadraten waren 5 bunte 

 Punkte zu sehen, davon 4 mit bis 5 Kreisen. Nach dem Heben des Tubus 

 um 20 fi, waren 2 Punkte mit Kreisen umgeben. Jmax 256. Beim Drehen 

 des Analysators wurde der Kegel fast schwarz, die Farbe der Punkte und 

 der Kreise veränderte sich. 



9. Baumwollsaraenöl. A und W. Der Befund wich von dem- 

 jenigen vor der Reaktion nicht ab. Das freie Auge sah einen rosastichigen, 

 nicht genau begrenzten Kegel; im Ultramikroskope war das ganze Sehfeld 

 weiß, lind dort, wo der Kegel zu sein pflegt, war es heller. Beim Drehen 

 des Analysators wechselte ein rötlicher und ein orangegelber Stich ab. 



10. Sesam öl. A. Untersuchte man das Öl bald nach der Reaktion, 

 so sah das freie Auge einen roten Kegel ; im Ultramikroskojie war derselbe 

 fast schwarz und enthielt 150 ziemlich bunte, zum Teil rote Punkte, die 

 höchstens mit einem breiten Kreise umgeben waren. _/ 72. Nach 14 l'agen, 

 als sich die blaue Farbe abgesetzt hatte und das Öl nur mt war, sah das 

 freie Auge einen schwach rosagefärbten Kegel; im Ultrauiikroskope war 

 derselbe dunkel und rötlich, und enthielt 25 gelbe oder orangegelbe Punkte, 

 davon 14 mit Kreisen, Jmax 174, und eine Gruppe von 7 Punkten. Nach 

 dem Heben des Tubus um 20 ja waren jetzt 15 mit Kreisen umgebene 

 Punkte im Kegel sichtbar. Im Analysator sah man auch violette Punkte 

 und Kreise, beim Drehen desselben verdunkelte sich der Kegel, die Farb<t 

 der Punkte und Kreise veränderte sich auffallend : im verdunkelten Kegel 

 traten rotleuchtende Punkte hervor. 



W. Das freie Auge sah bei der Prüfung des <>les gleich nach der 

 Reaktion einen weißen Kegel ; derselbe war im Ultramikroskope fast schwarz 

 und enthielt 55 Gruppen von 2 bis 9 orangegelben Punkten , die teilweise 

 mit Kreisen umgeben waren. Jmax 124. Nach 14 Tagen, als sich die blau(* 

 Farbe absetzte und <lie ursprüngliche Färbung eintrat, sah das freie Auge 

 einen blassen Kegel, derselbe war im Ultramikroskope grau und enthielt 

 7 Punkte ohne Kreise, (> mit Kreisen, und (5 Gruppen von 3 bis <! Punkten. 



I 




XXII, 4. Schneider-Just: Ultruiuikroskopie der Oleosole. 499 



Jmax 15G. Nach dem Heben des Tubus um 20 ^ waren im ganzen Kegel 

 21 Punkte mit Kreisen zu sehen. Beim Drehen des Analysators verdunkelte 

 sich der Kegel nur wenig und die Punkte, die Kreise und die Gruppen 

 veränderten nur wenig die Farbe. 



11. Rapsöl. A. Das freie Auge sah einen rosagefärbten Kegel ; der- 

 selbe war im Ultramikroskope fast schwarz. In 18 Quadraten waren 81 

 (»rangegelbe Punkte zu sehen, davon 40 mit 1 bis 2 Kreisen. Anmx 124. 

 Auch nach dem Heben des Tubus um 20 ,m wurde dieselbe Zahl von Punkten 

 mit Kreisen gefunden. Beim Drehen des Analj^sators verdunkelte sich der 

 Kegel, die Farbe der Punkte und Kreise bewegte sich zwischen Orange- 

 gelb und blassem Grün. 



W. Das freie Auge sah einen weißen Kegel; im ültramikroskope war 

 derselbe blaß, blaugrau und enthielt 166 orangegelbe Punkte, davon 137 

 mit 1 bis 2 bunten , auch violetten Kreisen. Jmax 320. Nach dem Heben 

 des Tubus um 20 fx wurden nur 94 Punkte mit Kreisen im ganzen Kegel 

 gefunden. Beim Drehen des Analysators verdunkelte sich der Kegel ein 

 wenig, die Punkte und die Kreise veränderten ihre Farbe. 



12. Rizinusöl. A. Das freie Auge sah einen schwach rosagefärbten, 

 gelbstichigen Kegel; im Ultramikroskope war derselbe orangegelb. In 

 18 Quadraten waren 98 Punkte enthalten, davon war die Mehrzahl gelb, 

 8 rot, die anderen blaß grünlich. Die Mehrzahl war mit 1 oder 2 unbe- 

 stimmten verschwommenen gelben Kreisen umgeben; nach dem Heben des 

 Tubus um 20 jx sind fast bei allen Punkten Kreise zu sehen. Jmax 180. 

 Beim Drehen des Analysators bewegte sich die Farbe des Kegels, der 

 Punkte und der Kreise zwischen Rot und Grüngelb. 



W. Das freie Auge sah einen gelbstichig rosagefärbten Kegel. Im 

 Ultramikroskope war derselbe gelb ins Orangegelbe. In 18 Quadraten 

 fand man 52 orangegelbe oder rote Punkte mit 3 deutlichen Kreisen. 

 Jmax 200. Beim Drehen des Analysators bewegte sich die Farbe der 

 Kreise zwischen Rot und Gelbgrün und der Kegel wurde fast schwarz 

 und zeigte nur kleine Unterschiede zwischen einem schwachen roten und 

 einem gelben Scheine. 



13. Pferde öl. A. Das freie Auge sah einen gelblichen Kegel: der- 

 selbe war im Ultramikroskope kaum sichtbar und enthielt 63 weiße Punkte: 

 davon waren 51 mit 1 bis 3 bunten Kreisen umgeben. Jmax 250. Auch 

 nach dem Heben des Tubus befanden sich 65 Punkte mit Kreisen im 

 Kegel. Wurde auf die mit Kreisen umgebenen Punkte scharf eingestellt, 

 so zeigten sich an derselben Stelle 2 bis 3 Punkte beisammen. Beim Drehen 

 des Analysators verdunkelte sich der Kegel, die Farbenveränderung war 

 nur bei jenen Kreisen so deutlich, welche durch Punktegruppen gebildet 

 wurden. 



W. Das freie Auge sah einen rosagefärbten Kegel. Im Ultramikro- 

 skope war derselbe, wenn man seine engste Stelle nahe dem Quarzfenster- 

 chen entstehen ließ, gelb, wenn dies im rückwärtigen Teile der Küvette 

 geschah, rosa. Gleich nach der Reaktion wurden im Kegel 70 Punkte mit 

 4 Kreisen gefunden, Jmar 240, nach 14 Tagen nur 6 Punkte ohne Kreise, 

 7 mit 1 bis 3 Kreisen und 7 Gruppen mit 3 bis 5 Punkten; Jmax 140. 

 Beim Drohen des Analvsators bewegte sich die Farbe zwischen Gelbweiß 




500 Schneider- Just: Ultramikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



und dunklem Rot. Die Punkte veränderten gleich nach der Reaktion 

 die Farbe, später nur unbedeutend. 



14. Elain- Destillat. A. Das freie Auge sah einen vorne blauen, 

 rückwärts grünlichen Kegel; im Ultramikroskope war derselbe blaugrau 

 und enthielt GG orangegelbe Punkte, von welchen 52 (nach dem Heben 

 des Tubus um 20 [x 42) mit 1 bis 3 Kreisen umgeben waren. Jmnx IGO. 

 Beim Drehen des Analysators verdunkelte sich der Kegel, die Farbe der 

 Punkte und der Kreise veränderte sich auffallend. 



W. Das freie Auge sah einen vorne blauen, rückwärts grünen Kegel. 

 Im Ultramikroskope war derselbe bläulichgrau und enthielt 47 meistens 

 mit Kreisen umgebene, orangegelbe Punkte. Amux 248. Beim Drehen des 

 Analysators wurde der Kegel dunkler, bei den Kreisen wechselte die rote 

 und die grüne Farbe ab. 



15. Elain-Saponif ika t. A. Das freie Auge sah bei einer inten- 

 siven Beobachtung einen roten, bei einer schwächeren einen rosagefärbten 

 Kegel. Im Ultramikroskope war derselbe blaß, bläulich grün und enthielt 

 122 Punkte, davon 34 (nach dem Heben des Tubus um 20 jj. 16) mit 1 bis 

 i] Kreisen. Jmux 130. Beim Drehen des Analysators verdunkelte sich der 

 Kegel, die Punkte und die Kreise veränderten ein wenig die Farbe. 



W. Das freie Auge sah einen vorne blauen, rückwärts grünen Kegel. 

 Im Ultramikroskope war derselbe grau , und enthielt 22 Punkte , von wel- 

 chen 7 mit 1 bis 4 bunten Kreisen umgeben waren. Außerdem wurde 

 1 Gruppe von G Punkten gefunden. Nach dem Heben des Tubus um 20 ^/ 

 wurden 27 Punkte mit Kreisen gefunden. Jinax 200. Beim Drehen des 

 Analysators veränderte sich der Kegel fast gar nicht, die Farbe der Punkte 

 und der Kreise veränderte sich auffallend. 



IG. Lebertran. A. Das freie Auge sah einen vorne weißen, rück- 

 wärts rosagefärbten Kegel; im Ultramikroskope war derselbe hellrosa ge- 

 färbt und enthielt 59 Punkte und Gruppen zusammen. Einzelne Punkte 

 sind nur selten, die Gruppen enthalten 4 bis 32 Punkte. Beim Heben des 

 Tubus um 20 ,u umgeben sich die Gruppen nur mit 1 unbestimmten Kreise, 

 der bald verschwindet und die Farbe des Kegels besitzt. Jmax 84. Rot- 

 leuchtende Punkte kommen nicht vor. Beim Drehen des Analysators ver- 

 ändert sich die Intensität des Kegels und der Punkte, dagegen nicht die 

 Farbe. — Nach 14 Tagen , als sich eine große Menge eines roten Belages 

 an der Wand ausgeschieden hatte, war der Kegel nur noch grau und ent- 

 hielt 17 einzelne Punkte und 13 Gruppen zu 3 bis 40 Punkten. Jnnix 144. 

 Nach dem Heben des Tubus um 20 ,« wurden IG mit verschwommenen 

 Kreisen umgebene Punkte gefunden. Beim Drehen des Analysators ver- 

 dunkelten sich sowohl der Kegel als auch die Punkte. Der genannte rote 

 Fettniederschlag schmolz nicht beim Erwärmen und löste sich in der Hitze 

 nur sehr langsam. 



W. Das freie Auge sah einen weißen Kegel; im Ultramikroskope war 

 derselbe schwarzgrau und enthielt 47 Punkte und 3 Gruppen von 5 bis 

 11 Punkten. Von den Punkten waren 3G (nach dem Heben des Tubus 

 um 20 t/ 22) mit bis 5 bunten Kreisen umgeben. Jmax 314. Beim Drehen 

 des Analysators wurde der Kegel fast schwarz; die Farbe der Punkte und 

 der Ringe veränderte sich auffallend. 




XXII, 4. Sclincitler-J iist: Ultraniikro.skoijio der Uleosolo. 501 



17. Dreik ronen t ran. A. Das freie Auge sali einen vorne weißen, 

 rückwärts orangegelben Kegel; im Ultramikroskope war derselbe licht- 

 orangegelb. Gleich nach der Reaktion wurden im ganzen Kegel zusammen 

 80 Punkte und Gruppen gefunden. Die Gruppen zählten 3 bis 5 Punkte. 

 Nach 14 Tagen war der Kegel im Ultramikroskope nur grau mit rosa Stich 

 und zählte nur 4 rote oder orangegelbe Punkte und 1 oder 2 Gruppen 

 zu 9 bis 24 roten Punkten; von den Punkten waren 3 (nach dem Heben 

 des Tubus um 20 fx 1) mit 1 oder 2 Kreisen umgeben. Jmax 114. Charak- 

 teristisch ist, daß beim Drehen des Analysators die Farben nicht bunter 

 wurden und sich nicht veränderten, sondern rot blieben; es trat nur eine 

 Verdunkelung des Kegels, der Punkte und der Gruppen ein. 



W. Der Befund war derselbe wie bei A, nitr wurden gleich nach der 

 Reaktion 28 Punkte und Gruppen zu 2 bis 3 Punkten im Kegel gefunden, 

 nach 14 Tagen nur 4 Punkte, davon einer mit 1 Kreise (nach dem Heben 

 des Tubus um 20 ,« 4 mit Kreisen), außerdem ausnahmsweise eine Gruppe 

 von 33 Punkten. Jma.r 128. 



18. Walrat öl. A. Das freie Auge sah einen orangegelben Kegel; 

 ein ebensolcher war auch im Ultramikroskope zu sehen. In 18 Quadraten 

 wurden 70 orangegelbe Punkte ohne Kreise gefunden; diese Zahl ist je- 

 doch nicht ganz verläßlich, denn die Punkte waren meistens so klein, daß 

 sie in den Quadraten nur schwer zu unterscheiden waren. Infolge der 

 Feinheit gaben die Punkte beim Heben des Tubus nur ausnahmsweise 

 Kreise. Jmax 42. Nach dem Heben des Tubus um 20 [x wurden in 

 18 Quadraten nur 2 Punkte mit Kreisen gefunden. Beim Drehen des 

 Analysators schwankte die Farbe des Kegels zwischen einer gelb- und einer 

 rotstichigen; die Punkte verschwanden bis auf 4 in 18 Quadraten und 

 diese 4 veränderten dann die Farbe wie der Kegel. 



W. Das freie Auge sah einen orangegelben Kegel; im Ultramikro- 

 skope war derselbe gelb. In 18 Quadraten wurden 146 Punkte gefunden, 

 jedoch waren auch hier die Punkte so fein, daß sie zwischen den Qua- 

 draten nicht genau zählbar waren. 9 von ihnen waren mit einem unbe- 

 stimmten Kreise umgeben (nach dem lieben des Tubus um 20 [x 11); 

 Jmax 140. Beim Drehen des Analysators verdunkelte sich der Tubus, die 

 feinen Punkte verschwanden, die mit den Kreisen sich umgebenden wurden 

 etwas bunter. — Die feinen Punkte bei den beiden letzten Versuchen 

 rühren von dem durch Abkühlung sich ausscheidenden Fette her. 



19. Gelbes Mineralöl. A. Der Befund stimmte mit demjenigen 

 vor der Reaktion überein. 



W. Das freie Auge sah einen vorne blauen, rückwärts grüngelben 

 Kegel. Im Ultramikroskope war derselbe lichtgrau, das übrige Sehfeld 

 grau. In 18 Quadraten waren 172 weiße, wenig helle Punkte zu sehen, 

 welche nicht mit Kreisen umgeben waren und von denen nach dem Heben 

 des Tubus um 20 [x 5 mit Kreisen umgeben waren. Jmax 54. Beim Drehen 

 des Analysators verdunkelte sich der Kegel vollkommen, alle Punkte und 

 Kreise verschwanden. — Wurde das Öl erwärmt und der Niederschlag 

 aufgelöst, war der Befund derselbe wie vor der Reaktion und es wurden 

 nur ausnahmsweise 3 bis 8 Punkte im ganzen Kegel, davon höchstens einer 

 mit einem Kreise gefunden. 




502 Schnei der-Just: Ultramikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



20. Paraffin öl. A. Das freie Auge sah einen blauen Kegel; der- 

 selbe war im Ultramikroskope bläulichweiß und enthielt 19 sehr verschieden 

 lichte Punkte mit bis 4 auffallend, auch blau- und violettgefärbten Kreisen, 

 außerdem eine Gruppe von 20 Punkten. Beim Drehen des Analysators 

 verdunkelte sich der Kegel und die Kreise veränderten die Farbe. Nach 

 14 Tagen war der Kegel noch blau und undeutHch, und enthielt 12 Punkte, 

 davon 8 mit höchstens 3 Kreisen. Jmax 106, außerdem eine Gruppe von 

 4 Punkten ; beim Drehen des Analysators verschwanden sowohl die Punkte 

 als auch die Kreise. 



W. Das freie Auge sah einen blauen, wenig deutlichen Kegel; im 

 Ultramikroskope war derselbe bläulich weiß und enthielt 111 Punkte mit 

 höchstens 2 Kreisen und seltene Gruppen zu 3 bis 4 Punkten. Unter den 

 Punkten kamen zahlreich blaue vor. Beim Drehen des Analysators ver- 

 dunkelte sich der Kegel, die Punkte und die Kreise verschwanden. -~ 

 Nachdem sich mit der Zeit die Fetttrübung in Form von Häutchen an 

 der Wand und auf dem Tropfen der wässerigen Goldlösung ausgeschieden 

 hatte, war der Kegel nur noch dunkelblau und enthielt 43 Punkte, davon 

 3G mit bis 5 Kreisen und eine Gruppe von G Punkten. Die Kreise waren 

 auffallend bunt, vorherrschend violett; schwach vertreten war Rot. Nach 

 dem Heben des Tubus um 20 fx wurden im Kegel 18 Punkte mit Kreisen 

 gefunden. Wurde auf die mit Kreisen umgebenen Zentren scharf ein- 

 gestellt, so zeigten sich Punktegruppen. Jiimx 236. Auch hier verschwanden 

 beim Drehen des Analysators die feinen Punkte ; die hellen, besonders die- 

 jenigen in den Gruppen, verblaßten nur. — 



Die in den vorangehenden Befunden beschriebenen Beobach- 

 tungen können entweder als Kesultate der Reaktion mit Goldchlorid 

 oder als Folgen einer, von dem Charakter des Öles abhängenden 

 Fettausscheidung erklärt werden. Bei dem Mineral- und Paraffinöle 

 wurde durch das wässerige Reagens die Bildung von Fettkörperu 

 unterstützt, die sich als eine Trübung oder als ein Niederschlag oder 

 als eine Haut ausschieden. Eine solche Fettausscheidung zeigte sich 

 im Ultramikroskope ebenso wie vor der Reaktion entweder in der 

 Form von Gruppen von hellleuchtenden Punkten, deren Farbe sich 

 zwischen violettweiß und gelblichweiß bewegte (siehe z. B. Nußöl W), 

 oder in Form von Punkten mit Kreisen, die im Analysator die Farbe 

 veränderten (siehe z. B. Rapsöl A), oder in Form von Punkten ohne 

 Kreise (siehe z. B. japanisches Holzöl A und Walratöl W). Beim 

 Ausscheiden des Fettes kann auch der Fettfarbstoff mitgerissen 

 werden , so daß das Öl mehr oder weniger entfärbt wird (siehe 

 Leinöllirnis W). 



Was die eigentliche Reaktion betrifl't , so wurde das Gold auf 

 dreifache Weise ausgeschieden. Entweder blieb es amikroskopisch und 

 färbte rot, oder es wurde submikroskopisch ausgeschieden ; in diesem 

 Falle verlieh es den Ölen entweder eine blaue P'arbe oder es bildete 




XXII, 4. Schneider -Just: Ultramikroskopie der Uleosule. 503 



einen Goldscliimmer im Ole. In den beiden letzten Fällen scheidet 

 sich das anfangs verteilte Gold leicht aus, und zwar als ein blau- 

 schwarzer Niederschlag, resp. als ein goldglänzender Belag an der 

 Wand. Die Entscheidung, welche von den beobachteten Punkten 

 submikroskopischeil Teilchen , und welche mikroskopischen Teilchen 

 entsprechen , stößt wider Erwarten auf große Hindernisse bei der 

 mikroskopischen Untersuchung , weil sich bei der Untersuchung des 

 (Mes in dünner Schicht die Teilchen auf einer Seite sammelten, so 

 daß ihre Anzahl nur dann bestimmbar wäre , wenn alle in einem 

 Tropfen vorkommenden gezählt und auf die Einheit umgerechnet 

 werden könnten. Zählt man sie auf die gewöhnliche Weise, so findet 

 mau an einer Stelle deren mehr, als man im Ultramikroskope Punkte 

 und Gruppen im ganzen gefunden hat, an einer anderen Stelle 

 weniger als man Gruppen und mit Kreisen umgebene Punkte ge- 

 sehen hat. So viel geht aber aus den mikroskopischen Beobachtungen 

 hervor, daß in denjenigen Fällen, wo im Ultramikroskope Punkte 

 mit Kreisen gesehen wurden , im Mikroskope auch schwarze Punkte 

 zu sehen waren , dagegen scheinen die feinen Punkte ohne Kreise 

 eher submikroskopischen Teilchen zu gehören. 



Die rote Färbung, oder der Eintritt einer roten Kompo- 

 nente in die Farbe, wurde überhaupt bei dem Leinöllirnisse A, dem 

 Hanföle A, dem Nußöle A und W, dem japanischen Holzöle A, dem 

 Olivenöle A und W, dem Baumwollsamenöle AV, dem Sesamöle A, 

 dem Pferdeöle W, dem Lebertran A und dem Walratöle A gefunden. 

 Diese Färbung wurde begleitet durch eine entsprechende Rotfärbnng 

 des mit dem freien Auge betrachteten Kegels und durch eine eben- 

 solche Färbung des Kegels im Ultramikroskope. Diese letztere ver- 

 schwand nicht beim Drehen des Analysators, so daß die Farbe des 

 Kegels bei allen Ölen sich beim Drehen des Analysators in eine, 

 wenn auch sehr dunkle und schwache Rotfärbung verwandelte. 

 Nirgends konnte konstatiert werden, daß mit dem .Eintritte der roten 

 Färbung oder eines roten Stiches bei der Reaktion sich irgendwelche 

 besondere charakteristische Punkte oder Punktegruppen gezeigt hätten, 

 und wo in den eben angeführten Ölen Punkte und Gruppen zu sehen 

 waren, konnten dieselben immer mit einer andern Ursache z. B. mit 

 der gleichzeitigen Blaufärbung, mit dem Goldschimmer oder mit der 

 Fettausscheidung in Zusammenhang gebracht werden. 



Die genannten drei Merkmale traten bei dem Leinölfirnisse A, 

 dem Hanföle A, dem Olivenöle A, dem Banmwollsaraenöle W, dem 

 Lebertran A und dem Walratöle A alle deutlich hervor. Beim Hanf- 




-)04 Schneider- Just: ültramikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



öle A waren die iirsprüngiieli weißen Punkte infolge der Bestralilung 

 mit dem durch das rote Öl kommenden Lichte orangerot. Ebenso 

 wurden auch bei Lebertran A die der Fettausscheidung entsprechen- 

 den Punktegruppen mit einem roten Liclite beleuchtet, und es be- 

 währte sich nicht die Vermutung, daß in dem Niederschlage auch 

 die rote Farbe niedergeschlagen sein wird , und daß es noch eine 

 andere, als amikroskopisehe rote Farbe geben wird. Audi bei dem 

 Walratöle, wo beim Stehen eine durch Wärme verschwindende Trübung 

 eintrat, waren die feinen Punkte durcli das, die rotgefärbte 01- 

 schicht passierende Licht, orangegelb gefärbt. — Beim Olivenöle W 

 war die rote Farbe des Kegels durch die dem Goldschimmer ent- 

 spreclienden gelbleuchtenden Punkte verdeckt, und zwar sowold bei 

 der Betrachtung mit freiem Auge, als auch im ITltramikroskope ; 

 man konnte jedoch mit dem freien Auge sehen, wie sich in die 

 Glaswand der Küvette hinter dem Kegel rosa Licht ausbreitet, und 

 auch beim Drehen des Analysators bewegte sich die Farbe zwischen 

 gelb und rot. Beim Nußöle A konnte weder bei der Betrachtung 

 mit dem freien Auge, noch im Ultramikroskope die rote Farbe ge- 

 sehen werden , und zwar deshalb , weil die zahlreichen , dem aus- 

 geschiedenen Fette angehörenden Punkte und Gruppen ein sehr 

 helles , weißes Licht ausbreiteten ; dafür konnte aber wieder beim 

 Drehen des Analysators die rote Farbe entdeckt werden. Beim 

 Nußöle W und dem japanischen Holzöle A, war aus demselben 

 Grunde die rote Farbe im Ultramikroskope erst beim Drehen des 

 Analysators sichtbar, sie trat jedoch auch beim Beobachten mit freiem 

 Auge hervor. Beim Pferdeöle W war die rote Farbe im Ultramikro- 

 skope nur dann sichtbar, wenn auf eine tiefere, d. i. vom Quarz- 

 fensterchen entferntere Stelle, eingestellt wurde. Beim Sesamöle A 

 war es unmöglich, sicher zu stellen, ob der Kegel beim Drehen des 

 Analysators rötlich gefärbt bleibt, weil der Kegel selbst bei der 

 größten Verdunkelung noch ziemlich hell war und darin rotleuchtende, 

 der Blaufärbung des Öles zugehörende Punkte hervorragten. 



Die Blaufärbung oder der Zutritt der blauen Komponente 

 zur Farbe des Öles Avurde bei dem Mohnöle A und W, bei dem 

 Rizinusöle A und W, bei dem Leinöle A und W und bei den Elainen 

 A und W konstatiert. Bei dem Dreikronentrane A wurde ein ge- 

 ringer blauer Satz gefunden, eine Veränderung der dunkeln Farbe 

 war nicht sichtbar. 



Die Blaufärbung wurde mit folgenden Erscheinungen begleitet: 

 Es zeigten sich gelbe, orangegelbe, zum großen Teile aber auch 




XXII, 4. Seil neider- Just : Ultramikroskopie der Oleosolc. 505 



rote Punkte , welche entweder schon bei der schärfsten Einstellung 

 auf den Kegel mit bis 7 gelben, rötlichen oder grünlichen Kreisen um- 

 geben waren oder sich beim Heben des Tubus durcli die feine Ein- 

 stellvorrichtung, mit solchen umgaben. J und (Z» waren sehr groß. 

 Beim Drehen des Anal.ysators veränderte sich die Farbe der Punkte 

 und der Kreise zwischen rot und blaßgrüu , die Lichtintensität ver- 

 änderte sich jedoch nur unbedeutend. Punktegruppeu waren manch- 

 mal in größerer Anzalil vorhanden. Bei allen Ölen außer dem 

 Rizinusöle verschwand wieder die blaue Farbe und es setzte sich 

 ein pulveriger blauschwarzer Niederschlag ab. Dieser Verändeining 

 entsprach die Bildung von Gruppen mit einer immer größeren Punkte- 

 zahl und die Zunahme von J und <Z>. Aus dem was durch das Ab- 

 setzen der Farbe im ultramikroskopischen Bilde verschwand, ist am 

 besten zu selien, was die blaue Färbung verursacht hat, und zwar 

 um so deutlicher, je blauer die Farbe nach der Reaktion war; am 

 deutlichsten also bei dem Mohn- und dem Sesamöle. Eine stärkere 

 Blaufärbung war gewöhnlich durch eine größere Anzahl von Punkten 

 mit Kreisen , durch eine verhältnismäßige Anzahl von roten und 

 orangegelben Punkten, durch größeres J und ^, durch eine größere 

 Buntheit der Ringe bei der Betrachtung mit dem Analysator und 

 auch olnie ihn , und endlich durch eine auffallendere Veränderung 

 der Farbe der Puukte und der Ringe, beim Drehen des Analysators 

 ausgezeichnet. Die Buntheit der Ringe konnte am besten an dem 

 Auffallen der roten Farbe gemessen werden. — Wenn bei einem 

 blaueren Öle eine geringere Anzahl von Punkten gefunden wurde 

 als bei einem weniger blauen (z. B. beim Leinöl W mehr als bei A), 

 so war diese Abnahme des einen Merkmals hinreichend durch höhere 

 Stufen der anderen Merkmale ausgewogen. Daß manchmal, je 

 schwächer die Blaufärbung war, desto größeres A und <D und eine 

 um so größere Anzahl von mit Kreisen umgebenen Punkten gefunden 

 Avurde , läßt sich dadurch erklären , daß das Gold schon nahe der 

 gänzlichen Ausscheidung und deshalb auch in Form von schweren, 

 mehr Punkte zählenden Gruppen gesammelt war. Deshalb war auch 

 die Bildung von Kreisen bei den Pimkten nach 14 Tagen auffallen- 

 der, als gleich nach der Reaktion und deshalb wurden auch bei der 

 Blaufärbung manchmal Gruppen gefunden , manchmal nicht. Das 

 Vorkommen von größeren Gruppen weist auf eine größere Ge- 

 schwindigkeit im Absetzen und einen baldigen Eintritt der voll- 

 kommenen Ausscheidung hin. 



Das ursprünglich gelblichweiße Arachisöl entfärbte sich in beiden 




506 Schneider-Just: Ultramikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



Fällen gänzlich. Diese Veränderung ist mit einer Veränderung von 

 ultramikroskopiseben Erscheinungen begleitet , welche für die Blau- 

 färbung charakteristisch sind; daraus ist zu sehen, daß die Blau- 

 färbung durch sehr auffallende ultramikroskopische Merkmale aus- 

 gezeichnet ist und daß eine geringe, ultramikroskopisch schon nach- 

 weisbare Ausscheidung der blaufärbenden Teilchen mit dem freien 

 Auge noch nicht sichtbar ist. 



Der Goldschimmer war deutlich bei dem Hanföle W, bei 

 dem japanischen Holzöle A, bei dem Olivenöle A, bei dem Eapsöle 

 A, bei dem Rizinusöle W und am auffallendsten bei dem Walrat- 

 öle W. Bei allen diesen Ölen wurde eine wenn auch schwache 

 Blaufärbung beobachtet, am deutlichsten bei dem japanischen Holz- 

 öle , dann in Form eines Blaustiches bei dem Olivenöle , in Form 

 einer grauen Farbe bei dem Rizinusöle , als ein Umschlag in gelb- 

 grün bei dem Rapsöle und als eine Verdunkelung der Farbe bei 

 dem Hanf- und Walratöle. Bei dem Olivenöle und dem japanischen 

 Holzöle war auch eine ziemlich starke Rotfärbung zu sehen. Der 

 Goldschimmer wurde begleitet durch eine sowohl beim Betrachten 

 mit dem freien Auge als auch im Ultramikroskope sichtbare starke 

 gelbe Färbung des Kegels und durch das Auftreten von großen, 

 deutlichen, gelben, mit 1 bis 3 schwachen, gelben Kreisen umgebenen 

 Punkten. Beim Drehen des Analysators verlor sich die gelbe Farbe 

 des Kegels ; die genannten hellen Punkte verschwanden nicht und 

 veränderten die Farbe entweder gar nicht oder nicht auffallend. 

 Von diesen Merkmalen wurden diejenigen , welche die Punkte , die 

 Kreise , sowie deren Verhalten beim Drehen des Analysators be- 

 treffen, leicht durch solche Erscheinungen verdeckt, welche für andere 

 Reaktionsformen charakteristisch sind , u. zw. schon bei einem sehr 

 geringen Grade dieser anderen Formen. Deshalb veränderten sich 

 z. B. beim Hanföle die Farben beim Drehen des Analysators, und 

 bei dem Rizinusöle, wo der Goldschimmer am schwächsten war, war 

 der Befund überhaupt für die Blaufärbung charakteristisch. 



Der Umstand , daß mit dem Goldschimmer immer eine Blau- 

 färbung, nie aber ein blauschwarzer Niederschlag verbunden war, 

 läßt sich so erklären, daß sich die blauen Teilchen mit den gold- 

 schimmernden zusammen absetzten und daß in dem metallglänzen- 

 den Wand- und Bodenbelage der blauschwarze Niederschlag ein- 

 geschlossen war. Es ist nicht anzunehmen , daß sich die blauen 

 Teilchen in die gelben umwandelten, weil selbst die hellsten, den 

 Goldschimmer bildenden Punkte nach den maximalen J und <I> 




XXII, 4. Öchneider-Just: Ultramikroskopie der Oleosole. 507 



nicht gröber zu sein scheinen als die der Blaiifärbung entsprechen- 

 den Punkte. 



Zu den angeführten Resultaten ist zuzufügen , daß es vorläufig 

 ohne eine Heizküvette nicht gut möglich war, das Verhalten von 

 Staub und anderen Verunreinigungen der Öle neben den Fettteilchen 

 zu verfolgen. Als dem Staube entsprechend können im Olivenöle 

 die Punkte angesehen werden , welche im Analysator die rote und 

 die grüne P\irbe vertauschten. Es war ein älteres Muster, in wel- 

 ches beim oftmaligen Öffnen der Flasche der Staub gelangte ; die 

 anderen Muster waren frisch. Die genannten Punkte zeigten keinen 

 Finfluß auf die Reaktion und setzten sich wahrscheinlich gleich am 

 Anfange mit dem ersten grob ausgeschiedenen Golde zum Boden. 

 Beim Olivenöle verschwanden die mit bis 6 Ringen umgebenen 

 Punkte und das -Imax sank (bei A stieg dasselbe, weil sich Gruppen 

 bildeten). 



Der Einfluß der Umstände auf die Reaktion von fetten Ölen 



mit Goldchlorid. 



Bei den im vorhergehenden beschriebenen Versuchen war der 

 große Einfluß des Lösungsmittels des Goldchlorids auf den Verlauf 

 und das Resultat der Reaktion deutlich. Zur Sicherstelhmg der 

 Einflüsse anderer Umstände wurde das Olivenöl gewählt, und zwar 

 deshalb, weil bei demselben alle drei Formen der Reaktion, d. i. die 

 Rotfärbung, die Blaufärbung und der Goldschimmer zugleich auf- 

 treten. Die ultramikroskopischen Bilder enthielten nichts Neues, und 

 die am Schlüsse der vorigen Versuchsreihe zusammengefaßten Resul- 

 tate gelten auch hier. Interessant war jedoch der Zusammenhang 

 zwischen der eingetretenen Reaktionsform und den Umständen, unter 

 welchen die Reaktion ausgeführt wurde, das ist : der Temperatur, der 

 Erhitzungsdauer, der Bewegung und der Verdünnung mit Äther. 

 Dagegen ergaben alle Beobachtungen, die zu dem Zwecke ausgeführt 

 wurden , um den Einfluß des Lichtes zu ermitteln , bei Gold nur 

 negative Resultate und es zeigte sich, daß das Licht eine Ölfärbung 

 und Reaktion nicht hervorrufen kann. 



Zu 1 g Olivenöl wurde zugesetzt: 1) 0"05 cm^ einer alkoholi- 

 schen Goldchloridlösung (6 g per 1) und es wurde eine Stunde ohne 

 zu schütteln im Wasserbade so erhitzt, daß das Proberöhrchen durch 

 die Stöße des siedenden Wassers nicht erschüttert wurde. 2) Mit 




508 Schneider-Just: ültramikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



dem gleichen Zusätze wurde eine Stunde ebenfalls im Wasserbade 

 erhitzt und das Proberöhrchen beständig geschüttelt. 3) u. 4) Es 

 wurden die beiden beschriebenen Versuche mit dem wässerigen Reagens 

 Aviederholt. 5) Es wurde nach dem Zusätze von O'Oö cm^ der 

 alkoholischen Goldchloridlösung und 1 cm^ Äther eine Stunde im 

 Wasserbade auf 50 '^ C. ohne zu schütteln erwärmt. Bei den letzten 

 zwei Versuchen sollte der Äther während der Zeit bis zu seiner 

 Verflüchtigung in den Ölen eine Art Umrührung hervorrufen. 



Die rote Farbe entwickelte sich am meisten bei einem 

 längeren Erwärmen mit einer alkoholischen Goldchloridlösung, und 

 zwar sowohl beim Umschütteln, als auch ohne dasselbe. Geringer 

 war die rote Färbung bei dem wässerigen Reagens und am ge- 

 ringsten bei den nur auf 50^ erwärmten Ölen. Diese waren direkt 

 nach den Erwärmen farblos und erst nach dem Stehen über die 

 Nacht zeigte sich eine blasse Rosafärbung, und zwar bei dem nicht- 

 geschüttelten Öle eine stärkere als bei dem geschüttelten. Auch 

 diese Reihe von Versuchen zeigte, daß die rote Färbung mit keinen 

 mikroskopischen oder submikroskopischen Teilchen im Zusammen- 

 hange ist, denn alle beobachteten Punkte konnten entweder durch 

 die zugleich eintretende Blaufärbung oder den Goldschimmer erklärt 

 werden , und besonders hat darauf das mit der alkoholischen Gold- 

 chloridlösung ohne Umschütteln erwärmte Öl, welches sehr wenig 

 Punkte überhaupt (12 in 18 Quadraten) und keine feinen enthielt, 

 hingewiesen. 



Die blaue Färbung trat besonders bei dem mit dem wässe- 

 rigen Reagens geschüttelten Öle hervor, weniger bei dem mit der alko- 

 holischen Lösung geschüttelten, noch weniger bei dem mit Äther ver- 

 setzten und geschüttelten. Eine viel schwächere Blaufärbung fand 

 man bei dem mit dem wässerigen Reagens ohne Schütteln erwärmten, 

 noch schwächer bei dem unter Zusatz von Äther ohne Umschütteln 

 erwärmten und die schwächste Blaufärbung trat bei dem mit der 

 alkoholischen Goldchloridlösung ohne Schütteln erwärmten Öle ein. 



Rücksichtlich des ultramikroskopischen Befundes ist zu bemerken, 

 das die blaue Farbe mit der Zahl der Punkte überhaupt , mit der 

 Zahl der mit Kreisen umgebenen hellen Punkte und der Zahl der 

 Gruppen zunahm. Bei dem mit dem wässerigen Reagens geschüttel- 

 ten Öle Avurden in 18 Quadraten 222 Punkte gefunden, davon 

 110 stark leuchtende und von diesen 37 mit Kreisen umgebene; 

 das hier sichergestellte ^mnx ^06 ist die kleinste für diesen Wert 

 bei Olivenöl gefundene Zahl. Das am schwächsten blaugefärbte mit 




XXII, 4. Schneid er- Just: Ultraiuikroskopie der Oleosole. 509 



der alkoholischen Lösung geschüttelte Ol zeigte in 18 Quadraten nur 

 12 Punkte, u. zw. durchgängig helle, davon 6 mit Kreisen. Das 

 hier gefundene Jmax. 268 ist die für diesen AVert bei Olivenöl ge- 

 fundene höchste Zahl. Als die Öle nach der zunehmenden Blaufärbung 

 zusammengestellt wurden und die Anzahl der Punkte überhaupt, die- 

 jenige der hellen Punkte und die der kaum sichtbaren, mit der 

 Färbung verglichen wurde, so wurde allerdings gefimden, daß diese 

 Zahlen nicht genau mit der Blaufärbung steigen ; dies läßt sich aber 

 dadurch erklären, daß unter den hellen Punkten auch solche, welche 

 den Goldschimmer bilden, gezählt wurden und unter den feinen auch 

 solche, welche den sich ausscheidenden Fettteilchen gehören. End- 

 lich sei bemerkt, daß neben den hellleuchtenden Punkten die feinen 

 in der Nähe liegenden wenig leuchtenden Punkte dem Auge ent- 

 gangen sind. 



Der größte Goldschimmer kam bei denjenigen Ölen vor, 

 welche mit der wässerigen Goldchloridlösung ohne Schütteln er- 

 wärmt wurden, dann bei denjenigen, welche mit derselben Lösung 

 geschüttelt wurden. Der starke Goldschimmer wurde von einer ent- 

 sprechenden Undurchsichtigkeit begleitet. Ein schwächerer Schimmer 

 kam bei den nur auf 50 " erwärmten (mit Äther verdünnten Ölen) 

 vor ; hier entstand jedoch mit der Zeit am Boden ein pulveriger 

 goldgiänzeuder Niederschlag. Bei den mit der alkoholischen Gold- 

 chloridlösung erwärmten Ölen trat weder der Goldschimmer noch 

 eine Verminderung der Durchsichtigkeit ein. Aus den ultramikro- 

 skopischen Befunden ist hier hervorzuheben, daß in Übereinstimmung 

 mit der vorigen Tersuchsreihe die am meisten goldschimmernden, 

 das sind die ohne Schütteln mit der wässerigen Goldchloridlösung 

 erwärmten (He, eine große Anzahl hellleuchtender Punkte (bis 96 in 

 18 Quadraten) gezeigt haben, wcilche im Analysator die Farbe 

 meistens nur wenig veränderten und beim Heben des Tubus keine 

 Piinge bildeten ; als dann nach dem Heben um 20 ;« die genannten 

 Punkte nur undeutlich zu sehen waren, traten die sich um die roten 

 und orangegelben Punkte bildenden und auf die Blaufärbung deuten- 

 den Kreise hervor, und beim Drehen des Analysators war das 

 Schwanken der Ringe zwischen der roten und blaßgrünen Farbe viel 

 besser zu sehen. Es war auch die gelbe Färbung des Kegels durch 

 die goldschimmernden Teilchen und das Verdecken der roten Farbe 

 des Kegels durch die gelbe sehr schön zu sehen, u. zw. sowohl bei 

 der Betrachtung mit dem freien Auge als auch im Ultraniikroskope. 

 Die letzte Erscheinung zeigte besonders ein Öl , bei welchem die 




510 Schnei<ler-.Iust: Ultraraikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



Reaktion vor 4 Monaten MXisgeführt wurde ; der Kegel leuchtete im 

 Ultraniikroskope mit einem schönen, gelbgrünen Lichte. 



Zu der eben beschriebenen Versuchsreihe ist noch folgendes 

 zuzufügen : Der Unterschied zwischen der Färbung nach dem Er- 

 hitzen auf 50 '^ und 100^ und das Nichtfärben bei gewöhnlicher 

 Temperatur selbst im Lichte zeigt, dal.) wir ohne eine größere Tem- 

 peraturerh(>hung keine von den drei Formen der Reaktion im höhe- 

 ren Grade erreichen können. Als sehr günstig für die Reaktion 

 zeigte sich das Schütteln, denn selbst beim Erhitzen mit dem wässe- 

 rigen Reagens trat in 5 Minuten eine blauviolette Färbung ein und 

 schon nach einer Viertelstunde konnte der Anfang des Goldschimmers 

 im reflektierten Lichte konstatiert werden, wogegen ohne das Schüt- 

 teln selbst nach einer Stunde die Farbe nur rosarot war. — Der 

 oben erwähnte Zusatz von Äther sollte beim P^rwärmen im lauwarmen 

 Wasser am Anfange eine Strömung des Öles hervorrufen , welche 

 die Berührung der beiden einwirkenden Körper, d. i. des Öles und 

 des Goldchlorids , unterstützen sollte. Daraus , daß hier die Öle 

 gleich nach der Reaktion noch ungefärbt waren, geht hervor, daß 

 hier die niedrige Temperatur entscheidend war und daß bei der- 

 selben weder das Schütteln noch die genannte Strömung nichts 

 nützte. — Sehr vorteilhaft ist die Verwendung der alkoholischen 

 Goldchloridlösung. Selbst wenn man nicht scliüttelt, tritt bald eine 

 deutliche Färbung ein, woraus man ersieht, daß sich das Reagens 

 mit der Mehrzahl der Öle gut mischt; der vollkommenen Verteilung 

 ist zuzuschreiben , daß bei der alkoholischen Goldchloridlösung die 

 schönsten roten Farben vorkamen, dagegen die blaue Farbe, welche 

 in der Fällung von mikroskopischen und submikroskopischen Teil- 

 chen ihren Ursprung hat, nur im geringen Maße und der Gold- 

 schimmer überhaupt nicht vorkam. 



Endlich ist zu bemerken , daß auch die Ölmenge einen großen 

 Kintluß auf die Reaktion hatte. Beim Ausführen der Reaktion im 

 großen gelang es nie, unter den bei 1 g ausprobierten Bedingungen 

 eine Rotfärbung zu bekommen , es trat immer eine blaue Trübung 

 oder ein blauer Niederschlag oder die plötzliche Ausscheidung eines 

 goldglänzenden Belages am Boden und an den Wänden ein. 




XXII, 4. Schneider-Just: Ultraniikroskoyie der Oleosole. 511 



Reaktionen von Fettölgemischen mit Goldchlorid. 



Weil es sich bei der Ölanalyse für den Handel und die In- 

 dustrie auch um die Prüfung von Ölgemischen, z. B. von mit fremden 

 Ölen verfälschten Ölen, handeln wird, so war es notwendig, wenigstens 

 nur teilweise den Einfluß des Mischens auf die Reaktion und ihre 

 drei Hauptformen : die Rot-, die Blaufärbung und den Goldschimmer, 

 durchzuprüfen. Es wurden deshalb solche Öle ausgesucht, bei wel- 

 chen die Goldreaktion charakteristisch hervortritt und es wurden die 

 (lemische von je 1 g Öl eine Stunde im siedenden Wasserbade mit 

 Ol cm'' der alkoholischen Gohlchloridlösung (6 g per 1) ohne Schüt- 

 teln erwärmt. 



2 -j- .5. Das Geraisch des Leinölfirnisses , der sich durch eine starke, 

 dem llubinglase entsprechende Rotfärbung auszeichnete, und des Mohn- 

 öles, bei dem eine besonders starke Blaufärbung und eine schnelle 

 Ausscheidung des blauschwarzen Niederschlages hervortrat, gab eine 

 dunkelrubinrote Färbung und nur Spuren eines blauen und violetten Nieder- 

 schlages. 



2 + 14. Das Gemisch des Leinölfirnisses mit dem Elain- Destillate, 

 das sich allein nur sehr schwach grünlich färbte, gab keine rote Färbuno^ 

 mehr, sondern einen reichHchen blauen Niederschlag. 



2 -\- 20. Das Gemisch des Leinölfirnisses mit dem Paraffinöle, bei dem 

 die Reaktion makroskopisch überhaupt nicht sichtbar war, färbte sich dunkel- 

 oran^'egelb, trübte sich, und schied an der Wand bei der Oberfläche einen 

 geringen violetten und schwarzen Niederschlag aus. 



3 -j- 5. Das Gemisch des Hanföles, welches eine Rotfärbung, jedoch 

 eine blauere als das Rubinglas zeigte, und des Mohnöles gab keine Rot- 

 färbung, sondern eine schnell sich setzende, grünliche, im reflektierten 

 Lichte hellbraune Färbung. 



3 + 10. Das Gemisch des Hanföles mit dem Sesamöle, welches außer 

 dem blauen Niederschlage noch eine Blaufärbung gab, zeigte nur eine 

 grüne Färbung durch einen sich lan.2:sam an die Wand ausscheidenden 

 Niederschla«;-. 



4 -p 7. Das Gemisch des Nußöles, welches sich schwach rosa färbte 

 und lichtvioletten Niederschlag bildete, mit dem OHvenöle, welches allein 

 eine rote Färbung und einen blauschwarzen Niederschlag gab, zeigte eine 

 starke rubinrote Färbung ohne jeden Niederschlag. 



4 -|- 8. Das Gemisch des Nußöles mit dem Arachisöle , bei welchem 

 fast gar keine Reaktion eintrat, gab eine stärkere Rosafärbung und einen 

 reichlicheren dunkler violetten Niederschlag als das Nußöl allein. 



.^) + G. Das Gemisch des Mohnöles mit dem japanischen Holzöle, bei 

 welchem ein starker Goldschimmer und Rosafärbung eintraten, gab eine 

 graue Färbung (wie das Rizinusfil allein) , dann Spuren eines schwarzen 

 Niederschlages und einen starken, aber dunklen bronzeglänzenden Schimmer. 




512 Schneider-. Tust: Ultramikroskopie der Oleosole. XXII, -1. 



5 + 12. Das Gemisch des Mohnöles mit dem Rizinusöle, welches sich 

 durch eine graue Färbung auszeichnete, gab eine blaugraue Färbung und 

 an der Wand einen goldglänzenden, im durchgehenden Lichte roten Belag. 



.') J- 14. Das Gemisch des Mohnöles mit dem Elain- Destillate gab 

 eine rotbraune Färbung und einen geringen schwarzen Niederschlag. Das 

 Resultat ist deshalb interessant, weil die einzelnen Öle keine Rotfärbung 

 zeigten ; deshalb ist auch der ultramikroskopische Befund unten beschrieben. 



5 + 20, Das Gemisch des Mohnöles mit dem Paraffinöle gab an 

 der Wand einen geringen goldglänzenden, im durchgehenden Lichte 

 blauen Belag. 



7 + 18- Das Gemisch des Olivenöles mit dem Walratöle, welche 

 beide starke Rotfärbungen gaben und das Olivenöl außerdem ein sich ab- 

 setzendes Blau, färbte sich rein blau und enthielt keinen Niederschlag. 



10 + 12. Das Gemisch des Rizinusöles mit dem Sesaraöle gab eine 

 Graufärbung , in welcher schichtenweise ein .blauer Niederschlag zu sehen 

 war; dieser war auch am Boden abgesetzt zu sehen. 



12-1-14. Das Gemisch des Rizinusöles mit dem Elain -Destillate 

 gab eine Färbung, die der Summe der Färbungen bei den einzelnen Ölen 

 entspricht. 



12 -\- 20. Beim Erwärmen des Rizinusöles mit dem Paraffinöle und 

 dem Reagens mischten sich die Öle nicht, das Paraffinöl blieb farblos, das 

 Rizinusöl darunter färbte sich bräunlichgelb. 



14 -\- 16. Das Gemisch des Lebertranes, welcher sich allein rot färbte 

 und einen rosagefärbten Niederschlag ausschied, mit dem Elain -Destillate, 

 gab eine rubinrote Färbung, wie der Lebertran allein, jedoch ohne jeden 

 Niederschlag. 



16 -f- 20. Das Gemisch des Lebertranes mit dem Paraffinöle gab nur 

 eine rosarote Färbung und an der Wand einen geringen blauen Nieder- 

 schlag. 



Diese Resultate zeigen, daß die Reaktion des Gemisches 

 nicht der 8 u ni ni e der R e a Iv t i o n e n mit den einzelne n 

 Ölen gleich ist, außer in dem Falle, wo das eine Ol fast keine 

 Reaktion gibt und die P^igenschaften des anderen wenig verändert, 

 wie bei 12 -|- 14. Gewöhnlich verändert sich die Fähigkeit, das 

 Gold in einer bestimmten Form zu fällen, und es dann in Verteilung 

 zu erhalten, selir stark. 



Bei dem Mohn- nnd dem Sesamöle konnte man erwarten , daß 

 dieselben ein Niedersclilagen der Färbungen bei den anderen Ölen 

 liervorrufen werden. Dieser Einfluß kam wirklich bei dem Mohnöle 

 vor, und zwar stark, wenn dasselbe mit Hanföl, und schwach, wenn 

 es mit Rizinusöl gemischt war ; bei dem Leinöltirnisse und dem ja- 

 panischen Holzöle hat sich dieser EinHuß nicht verwirklicht. Bei 

 dem Sesamöle ist er ebenso wie beim Mohnöle im Hanf- und Rizinus- 

 itle eingetreten. 




XXII, 4. Schneider- Just: Ultramikroskopie der Oleosole. 51;^ 



Beim Elain - Destillate war mir eine Abschwäcbiing , nicht aber 

 eine Verhinderung oder eine Verstärkung der Reaktion zu erwarten. 

 Bei den Mischungen mit dem Lebertrane und dem Rizinusöle trat 

 auch wirklich dieselbe oder eine abgeschwächte Färbung ein ; im 

 Leinölfirnisse verhinderte dagegen das Elain-Destillat die Rotfärbung 

 (es entstand nur ein schwarzer Niederschlag) und beim Mohnöle 

 entstand fast gar kein blauschwarzer Niederschlag, dafür aber eine 

 rotbraune Färbung. 



Bei dem Paraffinöle war zu erwarten , daß dasselbe die Misch- 

 barkeit der anderen Öle mit dem alkoholischen Reagens vermindern 

 und deshalb die Reaktionen stark abschwächen wird. Diese Er- 

 wartung erfüllte sich; der Leinölfirnis wurde nicht rot, das Mohnöl 

 gab nur einen ganz geringen blauen, im reflektierten Lichte bronze- 

 glänzenden Belag an der Wand, das Rizinusöl gab nur eine schwache 

 gelbe Färbung, welche sich nach 24 Stunden deutlich in den Gold- 

 schimmer verwandelte, der Lebertran gab nur eine Rosafärbung und 

 einen geringen blauen Niederschlag. 



Was die nach der Reaktion sich ausscheidenden festen Fett- 

 körper betrifft, so ist hervorzuheben, daß der Lebertran die cha- 

 rakteristische schwersehmelzende Fettausscheidung nach dem Ver- 

 mischen mit dem Elain -Destillate oder dem Paraffinöle nicht gab, 

 und ebenso das Nußöl hei Gegenwart von Olivenöl den violetten 



t 



Niederschlag nicht bildete, wohl aber, und zwar im erhöhten Maße, 

 in der Mischung mit dem Arachisöle. 



Von allen bei den Mischungen ausgeführten Reaktionen war 

 besonders diejenige interessant , wo eine neue, b i s d a h i n 

 nicht beobachtete Färbung eintrat, nämlich die Gelb- 

 färbung des Rizinusöles, welches mit dem Paraf f inöl e 

 und der alkoholischen G 1 d c h 1 r i d 1 ö s u n g erwärmt 

 wurde. Der ultramikroskopische Befund, der sich bei dem mit 

 einer Pipette von dem Paraffinöle getrennten Rizinusöle ergab , ist 

 deshalb hier ausführlich wiedergegeben : 



Das freie Auge sah einen goldgelben Kegel ; in das Glas ver- 

 breitete sich hinter dem Kegel ein weißes Licht. Im Ultramikroskope 

 ist der Kegel schwarz. In 18 Quadraten wurden 278 Punkte ge- 

 funden, davon 1.5 besonders helle, gelbe, etwas mehr rote, noch 

 mehr lichtgrüne , am zahlreichsten waren blasse , blaugrünlichgraue 

 Punkte. Gruppen kamen nicht vor. Die Punkte sind fast durch- 

 gängig frei von Kreisen. Im mittleren Teile des Kegels wurde aus- 

 nahmsweise ein Punkt mit einem undeutlichen Kreise gesehen , am 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 4. b'o 




514 Schneider-Just: Ultraraikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



Rande sind die Kreise weniger selten. /J„(„.r: 180. Nach dem Heben 

 des Tubus um 20 [x sind alle dann sichtbaren Punkte mit 1 bis 3 

 blassen verschwommenen Kreisen umgeben , die meisten Kreise sind 

 grünlichgelb, seltener sind orangegelbe, sehr selten rote Kreise. Im 

 Analysator waren die P'arben dieser Kreise bunter und beim Drehen 

 desselben verdunkelten sich oder verschwanden die Kreise, nur 6 hellste 

 Punkte zeigten die Kreise in unveränderter Helligkeit. Bei der 

 scharfen Einstellung blieb der Kegel beim Drehen des Analysators 

 beständig schwarz, der gelbe Schein bei den hellsten Punkten verlor 

 sich, die Farbe derselben bewegte sich zwischen einer rötlichen und 

 <?iner grünlichen, bei den anders gefärbten Punkten war die Farben- 

 veränderung weniger auffallend, die blassen Punkte verschwanden 

 gänzlich. 



Bei einer Rizinusölprobe , in welcher dieselbe Reaktion unter 

 denselben Verhältnissen schon vor 4 Tagen ausgeführt wurde und 

 bei welcher sich die gelbe Färbung schon in einen Goldschimmer 

 und zum großen Teile in einen goldglänzenden Belag an der Wand 

 umgewandelt hatte, ergab sich folgender ultramikroskopischer Befund : 



Das freie Auge sah einen goldglänzenden Kegel ; hinter dem- 

 selben verbreitete sich in das Glas ein weißes Licht. Im ültra- 

 mikroskope war der Kegel nur ganz schwach grünlichgrau beleuchtet. 

 In 18 Quadraten sah man nur noch 110 Punkte, davon waren nur 

 10 hellleuchtend und gelb, die andern waren meistens rot oder 

 orangegelb , seltener waren grünlichgraue Punkte. Bei keiner Ein- 

 stellung Avaren die Punkte so frei von Kreisen wie gleich nach der 

 Reaktion. In 18 Quadraten wurden 20 Punkte mit einem Kreise ge- 

 funden. Am Tnifange des Sehfeldes hatten die Punkte bis 3 Kreise, 

 diese waren jedoch nie so deutlich abgegrenzt, wie bei den blau- 

 gefärbten Ölen. A„Mx 460. Nach dem Heben des Tubus um 20 a 

 wurden in 18 Quadraten 22 Punkte mit bis 4, zum Teil rot-, zum 

 'J\'il grünstichig gelben Kreisen gefunden. Beim Drehen des Analy- 

 sators verdunkelte sich der Kegel vollkommen , die blassen Punkte 

 und Kreise verschwanden , bei den hellen trat in einer Lage die 

 rotgelbe, in einer darauf senkrechten Lage die grüngelbe Farbe auf, 

 die Farbe wechselte aber nicht zwischen der roten und grünen ab. 



in diesem Falle wurde also eine Methode gefunden, wie man 

 den in den früheren Versuchen schon beobachteten Goldschimmer 

 selbständig hervorrufen kann und wie man sogar dessen Anfang, 

 d.i. eine gelbe, jedes jMetallglanzes freie Färbung erhalten kann, 

 und es wurde gefunden, daß auch feine bunte Punkte dieser gelben 



I 




XXn, 4. Schneider-Just: Ultramikroskopie der Oleosole. 515 



Färbung zugeliören , was aus den Reaktionen , welche in zwei oder 

 drei Formen auftraten, nicht entnommen werden konnte. 



Es sei noch der Befund beschrieben, den das Gemisch von 

 Mohnöl und Elain-Destillat ergeben hat: 



Das freie Auge sah einen bläulichen , rückwärts gelbweißen 

 Kegel. Im Ultramikroskope war derselbe milchweiß. In 18 Qua- 

 draten wurden 6 Punkte gefunden, davon ein auffallend heller und 

 gelber, 2 weniger helle und 3 kaum sichtbare blaßgrüne. zJ„,rta; 340. 

 Nach dem Heben des Tubus um 20 /t umgaben sich die ersten 

 3 Punkte mit bis 4 Kreisen, welche beim Drehen des Analysators 

 ihre Farbe zwischen rötlichgelb und grünlichgelb veränderten ; der 

 Kegel verdunkelte sich ein wenig. Dieser Befund entspricht einer 

 schwachen gelben Färbung ; die Zeichen einer roten Färbung wurden 

 nicht gefunden; vielleicht waren dieselben sehr schwach und durch 

 die auffallende blaue Farbe des Kegels verdeckt. 



Versuche zur Sicherstellung des Einflusses von Verbindungen 

 der andern edlen Metalle auf verschiedene Öle. 



Um zu sehen, wie weit auch die Ölreaktionen mit den Ver- 

 bindungen anderer edlen Metalle ultraraikroskopisch verfolgt werden 

 ki»nnen , wurden zuerst bei ausgewählten Ölen parallele Reak- 

 tionen mit wässerigen Lösungen von Platinchlorid, Silber- 

 nitrat, Osmiumsäure und Rutheniumchlorid ausgeführt. Es wurde 

 dazu das Olivenöl gewählt, weil es alle drei Formen der Goldreak- 

 tion gab, dann das Leinöl, weil es die höchste Jodzahl aufweist, 

 das Mohnöl, weil es sich am stärksten blau färbte und die Farbe 

 am schnellsten ausschied, das Hanföl, weil es sich nur wenig orange- 

 gelb färbte und schon vor der Reaktion durch eine große Anzahl 

 von feinen Punkten ausgezeichnet war und endlich das Paraffinöl, 

 auf welches die Goldchloridlösung keinen Einfluß ausübte. Es wurden 

 wässerige Lösungen der Metallverbindungeu benutzt, um einem even- 

 tuellen Einfluß von Alkohol vorzubeugen •, dafür wurde die Berührung 

 des Öles mit dem Reagens durch Schütteln unterstützt. Es wurden 

 so wie bei Goldchlorid 0'6prozentige Lösungen dargestellt, und eben- 

 falls 1 g Öl mit 0*0.5 cm"^ der Lösungen im Wasserbade erhitzt. 

 Da nach einer halben Stunde die Reaktion nur beim Leinöle als 

 eine Dunkelfärbung mit Silbernitrat und eine Weißfärbuug mit Os- 



• 33* 




516 Schneider-Just: Ultramikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



miumsäure eintrat, so wurde die Menge des Reagens auf 1 cm"^ 

 ergänzt und weitere 2 Stunden erhitzt. 



Reaktionen mit Osmium säure. Makr oskopiscli 



wurden dreierlei Veränderungen beobachtet: 1) eine schwache Braun- 

 färbung; dieselbe trat am stärksten beim Olivenöle hervor, dann 

 beim Mohnöle, am schwächsten, grünlichbrauu färbte sich das Leinöl; 

 2) eine schwache Graufärbung und die Ausscheidung eines schwarzen 

 Niederschlages an der Berührungsstelle des Öles mit der Lösung ; 

 dieselbe trat ein beim Paraftinöle ; 3) die Ausscheidung eines weißen 

 Fettniederschlages ; diese Reaktionsform trat beim Leinöle (ein grün- 

 lichweißer Satz) und beim Hanföle (ein gelbweißer Satz) ein. 



Der ultramikroskopische Befund war infolge der Fett- 

 niederschläge beim Lein- und Hanföle und der Trübungen durch 

 Fett beim Oliven- und Mohnöle nur beim Paraffinöle belehrend. Der 

 Kegel enthielt 33 Aveiße, mit bis 3 Kreisen umgebene Punkte von 

 A„,a.v 200 ; ausnahmsweise wurden auch Gruppen von Punkten be- 

 obachtet. Im Analysator trat trotz des großen _/ keine Färbung 

 bei den Punkten und Kreisen ein, beim Drehen desselben verschwand 

 alles, bis auf die hellsten Punkte ; der Kegel verdunkelte sich, blieb 

 jedoch blau. Dieser Befund bei den Punkten kann dem gefällten 

 Osmium zugeschrieben werden, weil das Öl nach der Reaktion klar 

 blieb und weil Fettteilchen eher auffallende Gruppen und bunte, im 

 Analysator zwischen blauviolett imd gelb die Farbe verändernde 

 Kreise gebildet hätten. Das Hanföl konnte infolge der großen 

 Emulsion mit der wässerigen Lösung gar nicht untersucht werden. 

 Beim Lein-, Mohn- und Olivenöle wurden in sehr großer Zahl so 

 feine Punkte gefunden, daß sie gar nicht gezählt werden konnten. 

 Außerdem kamen auch Punkte mit Kreisen vor, die sich ebenso 

 verhielten, wie die beim Paraffinöle beschriebenen Kreise und des- 

 halb auf die hellbraune Färbung mit Osmiumsäure zurückgeführt 

 werden können. Mit Rücksicht darauf, daß die Osmiumsäure be- 

 sonders in dem Hanf- und Leinöle Fettkörper bildete, welche selbst 

 bei 100^ nicht schmolzen und welche dem Ole eine außerordentliche 

 Emulsionsfähigkeit erteilten, ist es hier nicht zu hoifen, daß die 

 Frage , welche von den Punkten dem gefällten Osmium und welche 

 dem ausgeschiedenen Fette angehören , selbst mit einem auf Er- 

 wärmung eingerichteten Ultramikroskope gelöst werden könnte. 



Reaktionen mit Platinchlorid. Makroskopisch wurde 

 außer der Entfärbung von Leinöl keine Veränderung in der Farbe 

 beobachtet. Es traten aber Fettausscheidungen ein ; beim Paraffin- 




XXII, 4. Schneider- Just: Ultramikroskopie der Oleosole. 517 



öle setzte sich die Trübung in Form eines Häiitchens an der Be- 

 rührungsstelle des Öles und der Lösung ab. Das Mohnöl blieb 

 deutlich getrübt , ohne einen Niederschlag zu bilden. Das Olivenöl 

 trübte sich bis zur Undurchsichtigkeit, und -zwar nicht nur infolge 

 der Fettausscheidung, sondern auch infolge der Emulsion. Das Leinöl 

 trübte sich und schied einen Niederschlag an der Wand aus. Beim 

 Hanföle sammelte sich auch das ausgeschiedene Fett, es konnte sich 

 jedoch infolge der zu großen Dickflüssigkeit nicht absetzen und bil- 

 dete nur Streifen und Häutchen, die im Öle schwammen. Bei diesem 

 letzten Öle war allein eine Reduktion von Platin sichtbar, und zwar 

 setzte sich aus der wässerigen Lösung ein schwarzer Niederschlag 

 am Boden und an der Wand ab. 



Der ultramikroskopische Befund entspricht nur Fettaus- 

 scheidungen. Am kompliziertesten war derselbe beim Hanföle , wo 

 wir viererlei Erscheinungen sahen : 1) feine weiße Punkte, die sowohl 

 beim Drehen der feinen Einstellung als auch beim Drehen des 

 Analysators sofort verschwinden ; 2) größere weiße mit bis 

 4 Kreisen umgebene Punkte von Amax 106, welche sich beim Drehen 

 des Analysators nicht färben, sondern nur verblassen; .3) Gruppen 

 von 6 bis 18 weißen Punkten , welche beim Drehen der feinen 

 Einstellungsvorrichtung ohne Kreisbildung verschwinden und deren 

 Farbe sich beim Drehen des Analysators zwischen einer orangegelb- 

 stichigen und einer rotstichigen bewegt; 4) breite Ströme heller 

 orangegelber Punkte, von welchen auf ein Quadrat etwa 20 kommen 

 und welche sich wie die Punkte der Gruppen verhalten. Der Kegel 

 ist im Ultramikroskope milchweiß und seine Farbe schwankt beim 

 Drehen des Analysators zwischen einer helleren gelblichen und einer 

 dunkleren bläulichen. 



Beim Oliven-, Lein- und Mohnöle sehen wir auch große und 

 kleine Punkte und Gruppen, jedoch keine Ströme von Punkten. Das 

 Paraffinöl zeigte im ganzen Kegel 39 Punkte, einige davon mit bis 

 3 Kreisen und seltene Gruppen zu etwa 7 Punkten. Als sehr wich- 

 tig muß hier hervorgehoben werden, daß die Kreise trotz eines 

 kleineren Jmnx (HO) gefärbt waren, und zwar meistens violett und 

 gelb, seltener rot und grün. 



Beim Olivenöle und dem Paraffinöle scheint es, daß sich die 

 ursprünglichen, große Kreise bildenden und wahrscheinlich den Staub- 

 teilchen zugehörigen Punkte mit Kreisen trotz der Fettausscheidung er- 

 halten haben. Das Olivenöl zählte ursprünglich im ganzen Kegel 85 helle 

 gelbe bis rote Punkte mit bis 4 Kreisen, welche im Analysator sehr bunt 




518 Schneider- Just: Ultramikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



waren und beim Drehen desselben die Farbe veränderten. Nach 

 der Reaktion fand man noch 14 solche Punkte. Das Paraffinöl 

 zeigte derartige Punkte vor der Reaktion nur stellenweise ; nach der 

 Reaktion wurden dieselben zwischen den Punkten mit violetten und 

 gelben Kreisen wiedergefunden. Beim Lein-, Hanf- imd Mohnöle 

 verschwanden solche Punkte nach der Reaktion. Daß sich die be- 

 treifenden Punkte in den zwei Fällen erhalten haben, würde auch 

 beweisen, daß hier eine Reduktion des Metalles im Öle und eine 

 Ausscheidung desselben nicht eintrat. 



Reaktionen mit Silbe rnitrat. Makroskopisch wurde 

 eine Farbenveränderung nur beim Leinöle konstatiert, welches sich 

 bräunte und an der Wand, sowie an der Berührungsstelle mit der 

 wässerigen Lösung einen schwarzen Niederschlag absetzte. Das 

 Hanföl trübte sich; am Boden, unter der wässerigen Lösung schied 

 sich ein kleiner schwarzer Niederschlag aus. Das Mohnöl trübte 

 sich weiß ; an der Berührungsstelle mit der wässerigen Lösung 

 bildete sich ein weißes Häutchen. Das Olivenöl trübte sich stark 

 weiß und an der Berührungsstelle mit der wässerigen Lösung bildete 

 sich ein schwarzes Häutchen. Das Paraffinöl blieb klar, aber an 

 der Wand und an der Berührungsstelle mit der wässerigen Lösung 

 bildete sich ein schwarzes Häutchen. 



Bei der Beurteilung der Fettniederschläge ist nicht zu vergessen, 

 daß alle Öle, am meisten jedoch das Lein- und Hanföl, schon beim 

 Erhitzen im Wasserbäde mit bloßem Wasser weiße Fettniederschläge 

 oder Häutchen bilden, und daß diese Ausscheidungen ein Fällen von 

 Silber mit dem Fette und eine Verhinderung der Gruppierung des 

 Silbers zur Folge haben können. 



Der ultramikroskopische Befund unterscheidet sich in 

 einigen Fällen von dem Bilde, welches das durch Formaldehyd 

 aus dem Silbernitrat ausgeschiedene Silber darbietet. In diesem 

 Falle sieht das freie Auge einen auffallenden blauen Kegel. Im 

 Ultramikroskope ist derselbe milchweiß und wird beim Drehen des 

 Analysators dunkler. Er enthält feine weiße Punkte ; bei einer 

 heftigen Reaktion sind dieselben grünlichweiß, zum Teil auch orange- 

 gelb und selten rot. Fast alle Punkte umgeben sich beim Heben 

 des Tubus mit Kreisen. zJ„,«:r 70. Beim Drehen des Analysators 

 veränderte sich die Farbe nicht. 



Bei manchen Ölen sahen wir keine bläulichweißen Kegel und 

 es kommen auch Punkte mit mehr und größeren, bunter gefärbten 

 Kreisen vor, was darauf hindeutet, daß das Gruppieren von Silber- 



I 




XXII, 4. Schneider-.) ust : Ultrauiikruskupie der Oleosole. 519 



teilchen vorgeschritten ist. Deutlich sieht man dieses in den folgen- 

 den Befunden , in welchen natürlich das abzusondern ist , was Fett- 

 teilchen entspricht und was sich schon nach dem Erwärmen mit 

 bloßem Wasser zeigen könnte. 



1. Leinöl. Der Kegel war nur schwach beleuchtet und enthielt iiu 

 ganzen 173 Punkte; die Mehrzahl davon hatte bis 5 Kreise. Jmax 1^0. Die 

 Färbung der Punkte und Kreise war auffallend bunt. Im Analysator wurde 

 sie nicht bunter; beim Drehen desselben veränderte sich die Farbe von 

 Rosa in Blaßgrün, die feinen Punkte verschwanden dabei und der Kegel 

 verdunkelte sich vollkommen. Im ganzen Kegel wurden auch 7 Gruppen 

 zu 8 bis 12 Punkten gefunden. 



0. Hanföl. Der Kegel war milchweiß, beim Drehen des Analysators 

 wurde er blasser. Man sah drei Arten von Punkten. Die ersten waren 

 mäßig licht, blaßblaugrün oder rot. Im ganzen Kegel fand man von den- 

 selben 13G; beim Heben des Tubus bildeten sie durchwegs Kreise, jedoch 

 schwache, verschwommene, welche sich bald verloren und beim Drehen des 

 Analysators die Farbe wenig veränderten, ^max 76. <Pmax 2^jo. Die zweite 

 Art waren einzelne auffallende Punkte, mit 0max 6. Zwischen beiden diesen 

 Arten von Punkten waren lichtere Stellen zu sehen, welche den ganz feinen 

 Punkten vor der Reaktion entsprechen würden. 



5. Mohnöl. Der Kegel war nur durch einen ganz schwachen bläu- 

 lichen Schein beleuchtet, der beim Drehen des Analj'^ators noch abnahm. 

 Im ganzen Kegel waren 270 Punkte zu sehen, zum Teil weiße, zum Teil 

 gefärbte , und zwar kamen alle Regenbogenfarben vor. Fast durchwegs 

 waren bei den Punkten 1 bis 4 Kreise zu sehen. Beim Drehen des Analy- 

 sators zeigte sich bei den Punkten und Kreisen auffallend häufig die 

 violette und grünliche Farbe. Punktegruppen kamen unregelmäßig vor, 

 dieselben waren groß und entsprachen der Fettausscheidung. 



7. Olivenöl. Der Kegel war im Ultramikroskope milchweiß und 

 bestand aus lauter feinen unzählbaren Punkten. Unter denselben waren 

 nur etwa 29 Punkte in 18 Quadraten etwas deutlicher, sie bildeten aber 

 keine Kreise. Im ganzen Kegel kamen noch 28 helle Punkte mit Kreisen 

 vor. Im Analysator wurden die hellen Punkte rot oder grün; beim Drehen 

 des Analysators vertauschten sich diese Farben, die feineren Punkte ver- 

 änderten die Farbe zwischen silberweiß und rosa, die feinsten verschwanden 

 gänzlich, der Kegel verblaßte. 



20. Paraffinöl. Der Kegel war undeutlich weiß mit einem Stiche 

 in blauviolett und enthielt 160 deuthche Punkte, fast durchwegs mit 

 Kreisen, und zwar mit bis 7 Kreisen. Die Farben waren ziemlich bunt 

 und auffallend war die Menge der violetten Punkte und Kreise. Gruppen 

 kamen nicht vor. Beim Drehen des Analysators nahm die Helligkeit der 

 Punkte und Gruppen stark ab. 



Diese Befunde unterscheiden sich sowohl von denjenigen bei 

 dem ursprünglichen Öle, als auch von den Befunden bei Goldchlorid. 

 Da sich das Silber mit Metallgiauz oder als schwarzer Niederschlag 




~)20 Schneider-Just: Ultramikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



aus den Ölen und nicht aus der darunter liegenden wässerigen Lösung 

 4iusscliied , so muß man daraus schließen , daß die oben erwähnten 

 Punkte Avenigstens zum Teil zu dem Silber gehören. 



Aus den beschriebenen Befunden geht hervor, daß alle ,') unter- 

 suchten Öle Abweichungen von den Befunden vor der Reaktion 

 aufweisen , und daß sich diese Abweichungen von denjenigen Er- 

 scheinungen unterscheiden , welche Fettausscheidungen begleiten ; es 

 sprechen deshalb die angeführten Befunde für eine Reduktion von 

 Silber. Beim Olivenöle könnten die submikroskopischen, noch keine 

 Kreise beim Heben des Tubus bildenden und zwischen den Quadraten 

 des Zählapparates imdeutlichen Punkte für Silberteilchen gehalten 

 werden , die einen Übergang zwischen den beiden Formen , unter 

 Avelchen das Silber bei der Reaktion des Silbernitrates mit Formal- 

 dehyd auftritt, bilden, nämlich zwischen den amikroskopischen Teil- 

 chen, welche die Blaufärbung des Kegels verursachen und zwischen 

 den submikroskopischen Teilchen, welchen bunte beim Heben des 

 Tubus Kreise bildende Punkte entsprechen. Wie weit alle an- 

 geführten Befunde dem Silber und wie weit dieselben dem Fett- 

 niederschlage zuzurechnen wären, könnte jedenfalls nur mit Hilfe des 

 Ultramikroskopes mit Heizvorrichtung genau entscliieden werden. 



Reaktionen mit R u t h e n i u m c h 1 o r i d. Ob zwar die charak- 

 teristischen Reaktionen bei Schleimen mit einer ammoniakalischen 

 Lösung ausgeführt werden, wurde doch der Einfluß der nicht am- 

 moniakalischen geprüft, um das Reaktionsergebnis durch die Bildung 

 von Ammoniakseifen und die dadurch erhöhte Emulsionsfähigkeit 

 nicht zu ändern. Daß bei einem Reagens , welches so außerordent- 

 lich die Verteilung und Vermischung der wirkenden Körper erhöht, 

 wie die ammoniakalische Lösung, eine Reaktion eintreten muß, Avar 

 schon im voraus sicher. Bei der Prüfung mit der nichtammoniaka- 

 lischen Lösung mußte die Reaktion zwar schwächer ausfallen, sie 

 Avar aber dann charakteristisch nur für das Ol und wurde nicht 

 durch Nebenumstände, z. B. durch die Menge der beim Ranzigwerden 

 freigewordenen Fettsäuren beeinflußt. 



Um den Charakter der Rutheniumteilchen im Ultramikroskope 

 sicherzustellen, wurde zuerst eine, durch Kochen mit Formal- 

 dehyd reduzierte Rutheniumchloridlösung untersucht und dabei 

 folgendes beobachtet : 



Das freie Auge sah keinen Kegel und auch im Ultramikroskope 

 war derselbe nicht sichtbar. An seiner Stelle schwammen weiße, 

 gelbliche, grünliche und orangegelbliche Punkte, welche sich beim 




XXII, 4. Sclineider- J ust : Ultramikroskopie der Oleosole. 521 



Heben des Tubus mit Kreisen umgaben. Es Avaren auch Gruppen 

 von '} bis 4 Punkten siclitbar. Die Kreise waren bei den Punkten 

 weiß , bei den Gruppen ein wenig gefärbt, ^max 4. Beim Drehen 

 des Analysators verschwanden die blassen Kreise, die hellen wurden 

 abgescliwächt. Farbenveränderungen sind höchstens bei den, den 

 größeren Gruppen zugehörenden Kreisen deutlich , und nur gering. 



Makroskopisch war nur eine Färbung bei dem Mohnöle zu 

 sehen, und zwar eine Brannfärbung. Die anderen Ole blieben un- 

 verändert. Die ultramikroskopische Untersuchung zeigte, so- 

 weit man dieselbe vornehmen konnte, nur Veränderungen, welche 

 Fettkörpern entsprechen, die sich auch durch zweistündiges Erhitzen 

 mit bloßem Wasser und Auskühlen ausscheiden. Das Hanföl war 

 so trüb und dick , daß es gar nicht untersucht werden konnte ; erst 

 nach vielen Tagen konnte eine Scheidung in eine braune ölige, in 

 eine lichtbraune feste und in eine wässerige Schicht beobachtet 

 werden. 



Reaktionen mit a m m o n i a k a 1 i s c h e n Lösungen, 

 a. mit a mm oniakali scher Silb ernitratlösung. Da sich 

 bei der Reaktion mit der wässerigen Silbernitratlösung außer beim 

 Leinöle trotz des Schütteins und der langen Erhitzung keine makro- 

 skopischen Veränderungen zeigten, wurde der Versuch bei allen 

 anfangs genannten 20 Ölen mit 0'05 cm^ einer ammoniakalischen 

 Lösung wiederholt. Bei der Darstellung der letzteren wurden 6 g 

 ^Nitrat per 1 verwendet und nur soviel Ammoniak zugesetzt , als 

 davon zum Fällen des Nitrates und zum Wiederlösen des Nieder- 

 schlages nötig war. Dieses geschah, um nicht durch einen größeren 

 Ammoniakzusatz eine Verseifung von größeren Mengen freier Fett- 

 säuren hervorzurufen, da dann das Ergebnis mehr die Folge der 

 Verseifung als die der charakteristischen Öleigenschaften hätte sein 

 müssen. 



Makroskopischer Befund. Bei den Elainen und dem 

 Nußöle konnten keine Veränderungen beobachtet werden. Der Drei- 

 kronentran trübte sich schwach. Das Paraffinöl setzte schwarze 

 Silberhäutchen ab. Das Mineralöl war gleich nach der Reaktion 

 klar , trübte sich aber mit der Zeit ; die Silberlösung am Boden 

 wurde ebenso wie beim Paraffinöl braun imd schied einen schwarzen 

 Niederschlag aus. Das Mohnöl setzte weiße Flocken ab ; beim 

 Pferdeöl wurde die Farbe nur unbedeutend grünlicher; bei Rizinusöl 

 gelblicher. 5 Öle färbten sich orangegelb, und zwar am meisten 

 der Leinölfirnis (dunkel und bräunlich), dann das japanische Holzöl, 




522 Schneider -Just: Ultramikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



das Walratöl, das Leinöl, am schwächsten das Hanföl. Das Baiim- 

 wollsameuöl färbte sich braun; das Olivenöl wurde gelber und 

 schied einen braunen Niederschlag aus ; braune Färbungen und 

 Niederschläge gaben noch das Arachisöl, das Sesamöl und natürlich 

 besonders stark das Rapsöl. Der Lebertran ergab eine Braunfärbimg 

 mit starker grüner Fluoreszenz und einen dunklen, am Lichte schnell 

 schwarz werdenden Niederschlag. 



Bei der ultramikroskopischen Beobachtung wurde leider 

 bis auf zweifelhafte Ausnahmen nichts gefunden, was auf reduziertes 

 Silber hingedeutet hätte. Der für Silber charakteristische blaue 

 Kegel wurde nur beim Nuß-, Sesam- und Rizinusöl gefunden , und 

 zwar auch hier nur blaß. Eine Vermehrung von Punkten um solche, 

 welche sich beim Heben des Tubus mit undeutlichen Kreisen um- 

 geben, trat nur beim Hanföle ein. Es waren aber nicht rote, son- 

 dern nur weiße Punkte. Beim Lebertrane , der allein eine grüne 

 Fluoreszenz , später einen schwarzen Niederschlag gab , zeigten sicli 

 in 18 Quadraten 67 feine, wenig gefärbte Punkte, davon 7 mit bis 

 4 Kreisen und im ganzen Kegel 2 Gruppen von 3 bis 4 Punkten ; 

 Jniax 170. Beim Heben des Tubus um 20 /< nahm aber die Anzahl 

 der mit Kreisen umgebenen Punkte nicht zu, wie es hätte nach dem 

 Befunde bei der mit Formaldehyd reduzierten Silberlösung geschehen 

 sollen. Wo eine Gelb- oder Orangegelbfärbung eintrat , war dies 

 nicht vom Silber, sondern schon von dem bloßen Erhitzen mit einer 

 Nitratlösung überhaupt und mit Ammoniak. Im Ultramikroskope 

 war hier nur eine gelbe Färbung des Kegels auffallend , und zwar 

 wenigstens , wenn man an den rückwärtigen Teil der Küvette ein- 

 gestellt hatte; beim Leinölfirnis war der Kegel graubraun, beim ja- 

 panischen Holzöle gelb. Die Braunfärbung, welche durch die Fällung 

 von Schwefelsilber verursacht wird und deshalb beim Rapsöl, welches 

 den meisten Schwefel enthält, am stärksten hervortritt , wurde auch 

 nur durch eine orangegelbe Färbung des Kegels bei der Betrachtung 

 desselben mit freiem Auge begleitet ; beim Baumwollsamenöle war 

 diese Kegelfärbung nur gelb. In dem nach der Reaktion dunklen 

 und trüben Dreikronentrane war sowohl bei der Betrachtung mit 

 dem freien Auge als auch im Ultramikroskope die starke Rotfärbung 

 des Kegels auffallend; beim Paraffinöle nahm die Zahl der Punkte 

 in 18 Quadraten um 40 zu, dieselben entsprachen aber den Fett- 

 teilchen, die sich schon nach dem Kochen mit Wasser und Aus- 

 kühlen ausscheiden und stimmten deshalb mit den bei der wässerigen 

 Goldchloridlösung gesehenen Punkten überein. Außer dem Hanf- und 




XXII, 4. Schneider- Just: Ultramikroskopie der Uleosole. 523 



Walratüle zeigten alle Öle mehr oder weniger Gruppen, bis 18 in 

 18 Quadraten, manche Gruppen hatten bis 160 Punkte; bei allen 

 war aber klar, daß sie Fett- und öeifenteilchen darstellen. Das 

 Fett und die Seife zeigten sich jedoch auch in Form von feinen 

 Punkten und Punkten mit Kreisen, wie z. B. bei Walratöl. Der 

 Kegel war der Zahl dieser Gruppen und Punkte entsprechend weiß 

 und hell. 



Aus dem Vorangehenden ist zu sehen, daß bei dieser Versuchs- 

 reihe der Fett- und Seifenniederschlag die Beobachtung des redu- 

 zierten oder in Verbindungen gefällten Silbers verhindert hatte, und 

 daß man nur mit Anwendung eines Ultramikroskopes mit Heizvor- 

 richtung die den Fettniederschlägen entsprechenden Eindrücke be- 

 seitigen und die eigentliche Silberreaktion erkennen könnte. 



b. Reaktionen mit ammoniakalischer Ruthenium- 

 chloridlösung. Die mit 1 cm^ einer ammoniakalischen Ruthenium- 

 chloridlösung wie bei den nichtammouiakalischen Lösungen der anderen 

 Edelmetalle ausgeführte Reaktion hatte außer bei dem Paraffinöle 

 eine solche Schwarzfärbung zur Folge und es entstand selbst bei 

 dem Olivenöle eine so starke Emulsion, daß man diese Öle der 

 ultramikroskopischen Beobachtung gar nicht unterwerfen konnte. Die 

 Reaktion bei dem Mohnöle war deshalb sehr interessant, weil sich 

 in der unter dem Öle gesammelten wässerigen Flüssigkeit ein durch 

 Rutheniumrot wie bei den Schleimen satt gefärbter Niederschlag ab- 

 gesetzt hat. Die Versuche mußten mit 0*05 cm^ wiederholt werden. 

 Dabei wurden die Öle zwei Stunden erwärmt, und zweimal, nämlich 

 am Anfang und in der Mitte des Erhitzens mit dem Reagens um- 

 geschüttelt. 



Der makroskopische Befund war der folgende : Das Paraffinöl 

 veränderte sich gar nicht; aus dem Reagens setzte sich ein schwarzer 

 Niederschlag ab. Das gelbe Mineralöl verdunkelte sich kaum merk- 

 lich in Orangegelb ; das Reagens schied ebenfalls einen schwarzen 

 Niederschlag aus. Bei allen anderen Ölen sehen wir auffallende 

 Veränderungen in dreierlei Richtung, und zwar entweder rotbraune 

 oder schwarzbraune oder schwarze Färbungen. Die rotbraune Fär- 

 bung ist am schwächsten beim Dreikronentrane und fortschreitend 

 deutlicher beim Nußöle, Sesamöle, dem Lebertrane, dem Leinölfirnis, 

 dem japanischen Holzöle , dem Lein-, Baumwollsamen-, Hanf- und 

 Walratöle. Die schwarzbraune Färbung ist am schwächsten beim 

 Mohnöle, steigt dann beim Rizinus- und Pferdeöle und ist am größten 

 beim Rapsöle. Eine schwarze Färbung finden wir beim Oliven- und 




524 Schneider- Just: Ultramikroskopie der Oloosole. XXII, 4. 



Aracliisöle ; bei dem ersteren ist noch ein branner Sticli sichtbar, 

 das andere ist rein schwarz nnd zeigt außerdem einen reichlichen 

 schwarzen Niederschlag. Einen deutlichen blassen Fettsatz schied 

 das Pferde-, Nuß- und Sesamöl aus, das Elain-Sapouifikat, der Leinöl- 

 firnis, das japanische Holzöl , das Leinöl und das Baumwollsamenöl, 

 welches überhaupt erstarrte. Getrübt waren die Trane. 



Der ultramikroskopische Befund war trotz der hervor- 

 tretenden Niederschläge sehr interessant, weshalb er hier ausführlich 

 wiedergegeben ist. 



1. Leinöl. Das freie Auge sah einen vorne blauweißen, rückwärts 

 g'elben Kegel. Im Ultramikroskope war derselbe blauweiß und enthielt 

 41 Punkte , von welchen 22 mit bis 5 Kreisen umgeben waren , außerdem 

 22 Gruppen von 3 bis 14 Punkten; die Punkte waren gelb, die Kreise 

 und Gruppen bunt. Größere Kreise waren aus radialen Strichen zu- 

 sammengesetzt. Jmax 400. Nach dem Heben des Tubus um 20 /,< waren 

 im ganzen Kegel nur noch G Punkte mit Kreisen sichtbar; diese Kreise 

 waren weder bunt noch deutlich. Beim Drehen des Analysators verdunkelte 

 sich der Kegel, die Kreise und die Punkte verschwanden vollkommen, die 

 Gruppen verblaßten. 



2. Leinölfirnis. Das freie Auge sah einen vorne weißen, rück- 

 wärts dunkelorangegelben Kegel. Im Ultramikroskope war derselbe hell 

 und gelbweiß und enthielt 35 gelbweiße Punkte, von welchen 3 mit einem 

 blassen Kreise umgeben waren, außerdem 10 Gruppen zu 8 Punkten. 

 ^')im'.r 80. Nach dem Heben des Tubus um 20 /x sah man ebenfalls 3 Punkte 

 mit blassen, gelbweißen Kreisen. Beim Drehen des Analysators verdunkelte 

 sich der Kegel, die Punkte, die Gruppen und die Kreise verschwanden. 



3. Hanföl. Das freie Auge sah einen vorne gelben, rückwärts 

 dunkelorangegelben Kegel; im Ultramikroskope war derselbe orangegelb, 

 sehr hell und man sah deshalb in ihm nur 15 sehr undeutliche, ebenfalls 

 orangegelbe Punkte, davon einen mit einem undeutlichen Kreise. Jmax 76. 

 Auch nach dem Heben des Tubus um 20 ft sah man bei einem Punkte einen 

 undeutlichen Kreis von der Farbe des Kegels. Gruppen kamen nicht vor. 

 Beim Drehen des Analysators verdunkelte sich der Kegel, die Punkte und 

 die Kreise verschwanden. 



4. Nuß öl. Das freie Auge sah einen vorne blaugrünen, rückwärts 

 grünen Kegel; im Ultramikroskope war derselbe blaß blaugrün. In 18 Qua- 

 draten waren 18 weiße Punkte; im ganzen Kegel waren 5 Punkte mit bis 

 4 in allen Regenbogenfarben gefärbten Kreisen und 10 sehr blasse und 

 undeutliche Gruppen; ausnahmsweise waren auch große, hellleuchtende, 

 6 Quadrate große Gruppen zu sehen. Jinax 130. Auch nach dem Heben 

 des Tubus um 20 fA kamen im ganzen Kegel nur 5 Punkte mit Kreisen 

 vor, teilweise mit bunten und deutlichen, teilweise mit blassen, undeut- 

 lichen. Beim Drehen des Analysators verdunkelte sich der Kegel, die 

 blassen Punkte und Kreise verschwanden, bei den hellen, sowohl einzelnen 

 als auch gruppierten Punkten, vertauschten sich die Farben, vorzugsweise 

 die gelbe und die violette. 




XXII, 4. Schneider-.] ust: Ultramikroskopie der Oleosole. 525 



5. Mohnöl. Das freie Auge sah einen blassen, bläulichen Kegel ; im 

 Ultramikroskope war derselbe blaß, blauweiß. In 18 Quadraten wurden 

 55 weiße, ungleich dicht verteilte Punkte gefunden; 4 davon hatten 1 bis 

 2 undeutliche weiße Ivreise. Jmax V.'A. Nach dem Heben des Tubus um 

 20 fx wurden in 18 Quadraten 7 Funkte mit Kreisen gefunden ; bei 5 Punkten 

 waren die Kreise blaß, bei 2 bunt. Beim Drehen des Analysators ver- 

 dunkelte sich der Kegel, die Punkte und die Kreise verschwanden. 



G. Japanisches Holzöl. Der Kegel erscheint dem freien Auge 

 blaßgrün, rückwärts grün ; im Ultramikroskope war derselbe hell, blauweiß. 

 In 18 Quadraten wurden 9 Punkte gefunden, davon 3 mit bis 4 wenig 

 bunten Kreisen; außerdem waren im ganzen Kegel 2 Gruppen mit 5 bis 

 7 hellen Punkten. Jmax 120. Nach dem Heben des Tubus um 20 fi wurden 

 in 18 Quadraten nur 3 Punkte mit Kreisen gesehen; dieselben waren ent- 

 weder blaß und undeutlich oder etwas bunter und deutlicher. Beim Drehen 

 des Analysators verdunkelte sich der Kegel, die Kreise verschwanden, von 

 den Punkten blieben nur die hellsten Punkte in den Gruppen sichtbar. 



7. Olivenöl. Das freie Auge sah einen bläulichweißen Kegel; im 

 Ultramikroskope war derselbe bläulich, sehr wenig hell. In 18 Quadraten 

 wurden 32 Punkte gefunden, 7 davon mit bis 3 nicht sehr deutlichen in 

 allen Regenbogenfarben gefärbten Kreisen. Rote Punkte gab es im ganzen 

 Kegel 2. Auch waren in demselben (3 Gruppen mit 3 bis 11 Punkten. 

 Jmax 136. Nach dem Heben des Tubus um 20 (x waren in 18 Quadraten 

 13 Punkte mit wenig deutlichen, aber ziemlich bunten Kreisen. Beim 

 Drehen des Analysators verdunkelte sich der Kegel, die hellsten Punkte 

 der Gruppen verblaßten, alles übrige verschwand. 



8. Arachisöl. Das freie Auge sah einen wenig hellen, weißen 

 Kegel: im Ultramikroskope war derselbe dunkel. In 18 Quadraten waren 

 9 einzelne Punkte zu sehen, davon 3 mit 1 unbestimmten, blassen Kreise, 

 und 7 Gruppen mit 3 oder 4 Punkten. Die Punkte sind meistens weiß, 

 nur einige, besonders in den Gruppen waren blaßgefärbt; in 18 Quadraten 

 war ein Punkt rot. Nach dem Heben des Tubus um 20 ^ waren in 18 Qua- 

 draten 14 Punkte mit Kreisen zu sehen, und zwar mit wenig deutlichen 

 und schwach aber buntgefärbteu Kreisen. Beim Drehen des Analysators 

 wurde der Kegel vollkommen dunkel, einige Punkte in den Gruppen ver- 

 blaßten nur, alles übrige verschwand. 



9. Baumwollsamenöl. Das freie Auge sah einen roten Kegel; 

 im Ultramikroskope war derselbe orangegelb, undeutlich begrenzt; beim 

 Drehen des Analysators verdunkelte er sich bedeutend. Anderes konnte 

 infolge der Trübung nicht bestimmt werden. 



10. Öesamöl. Das freie Auge sah einen Idaßbläulichen, rückwärts 

 grünen Kegel; im Ultramikroskope war derselbe grau. In 18 Quadraten 

 waren 4 weiße Punkte und 3 Gruppen mit 3 bis 4 Punkten zu sehen, 

 Punkte mit Kreisen kamen im ganzen Kegel 8 vor, nach dem Heben des 

 Tubus um 20 u 12 ; die Kreise waren undeutlich blaß. Jmax <>4. Beim 

 Drehen des Analysators verdunkelte sich der Kegel (ebenso bei allen nach- 

 folgenden Ölen), die hellsten Punkte verblaßten, alles übrige verschwand. 



11. Rapsöl. Das freie Auge sah einen blauen, rückwärts grünlichen 

 Kegel; im Ultramikroskope war derselbe bläulichweiß. In 18 Quadraten 




526 Schneider- Just: Ultramikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



wurden 38 weiße oder gelbliche Punkte , welche samtlich frei von Kreisen 

 waren , gefunden und im ganzen Kegel 4 Gruppen mit 3 bis 4 Punkten. 

 Nach dem Heben des Tubus um 20 fx fand man im ganzen Kegel 8 Punkte 

 mit Kreisen. Soweit diese Punkte bei der scharfen Einstellung Punkte- 

 gruppen gaben, waren sie bunt gefärbt ; die übrigen waren ganz blaß, un- 

 deutlich, ^max 80. Beim Heben des Analysators verschwanden die Punkte, 

 die von Gruppen gebildeten Kreise verblaßten. 



12. Rizinusöl. Das freie Auge sah einen bläulichen, rückwärts 

 grünlichen Kegel; im Ultramikroskope war derselbe blaßblau. In 18 Qua- 

 draten befanden sich 4 weiße oder gelbliche Punkte; im ganzen Kegel 

 5 Punkte mit einem sehr undeutlichen Kreise und 2 Gruppen mit 3 bis 6 

 teilweise hellen Punkten. Jmax 154. Nach dem Heben des Tubus um 20 fx 

 fand man im ganzen Kegel 17 Punkte mit Kreisen. Diejenigen Kreise, 

 welche bei der scharfen Einstellung helle Gruppen zeigten, waren bunt 

 gefärbt, die andern blaß, undeuthch. Beim Drehen des Analysators ver- 

 schwanden die blassen Punkte und Kreise, die hellen Punkte und die 

 bunten Kreise verblaßten. 



13. Pferdeöl. Das freie Auge sah einen blaugrünen Kegel; im 

 Ultramikroskope war derselbe blauweiß. In 18 Quadraten fand man 3 weiße 

 Punkte, im ganzen Kegel 4 Punkte mit sehr unbestimmten, blassen, un- 

 gefärbten Kreisen und 2 Gruppen mit 3 bis 6 Punkten. Jmax 88. Nach 

 dem Heben des Tubus um 20 ^/ sah man im ganzen Kegel 9 Punkte mit 

 ebensolclien Kreisen wie früher. Beim Drehen des Analysators verschwand 

 alles vollkommen. 



14. Ela'i n-Destillat. Das freie Auge sah einen weißen, rückwärts 

 orangegelben Kegel; im Ultramikroskope war derselbe gelb und enthielt 

 entweder keine Punkte oder nur einen gelben mit einem undeutlichen 

 Kreise umgebenen Punkt. Ausnahmsweise fand man 1 bis 6 Gruppen mit 

 etwa 12 Punkten. Beim Drehen des Analysators verschwand fast alles, die 

 hellsten Punkte verblaßten nur. 



15. Elain-Saponifikat. Das freie Auge sah einen wenig hellen, 

 weißen, rückwärts gelblichen Kegel ; im Ultramikroskope war derselbe blaß- 

 gelb und enthielt 41 gelbe Punkte, und zwar 15 hellere und 26 kaum 

 sichtbare, ausnahmsweise auch eine Gruppe mit 5 Punkten. Im ganzen 

 Kegel waren nur 2 Punkte mit einem sehr vindeutlichen gelben Kreise zu 

 sehen; dasselbe fand man auch beim Heben des Tubus um 20 ^u. JmaxlO. 

 Beim Drehen des Analysators verblaßten die hellsten Punkte in den Grup- 

 pen, alles andere verschwand. 



16. Lebertran. Das freie Auge sah einen vorne weißen, rückwärts 

 gelben Kegel ; im Ultramikroskope war derselbe gelbweiß. In 18 Quadraten 

 wurden 34 gelblichweiße Punkte gesehen, davon einer mit einem sehr un- 

 <leutlichen Kreise. Nach dem Heben des Tubus um 20 // wurden im ganzen 

 Kegel 13 Punkte mit ebensolchen Kreisen gefunden. Jmax 54. Gruppen 

 kamen nicht vor. Beim Drehen des Analysators verblaßten stark die 

 hellsten Punkte, alles übrige verschwand. 



17. Dreikronen trän. Das freie Auge sah einen vorne weißen, 

 rückwärts orangegelben Kegel; im Ultramikroskope war derselbe orange- 

 gelb. In 18 Quadraten befanden sich 5 orangegelbe Punkte; im ganzen 




XXII, 4. Schnei der -Just: Ultraiuikroskopie der Oleosole. 527 



Kegel war nur ein Punkt mit einem sehr schwachen Kreise zu sehen und 

 ebenso auch nach dem Heben des Tubus um 20 ja. Jma.r 18. Gruppen 

 kamen nicht vor. Beim Drehen des Analysators verschwanden sowohl die 

 Punkte als auch die Kreise.' 



18. Walrat öl. Das freie Auge sah einen vorne orangegelben, rück- 

 wärts dunkelroten Kegel; im Ultramikroskope war derselbe schön rot. 

 Punkte waren entweder gar nicht zu sehen oder höchstens 3 im ganzen 

 Kegel, und zwar ohne Kreise und von derselben Farbe wie der Kegel. 

 Ausnahmsweise fand man im ganzen Kegel eine Gruppe von 10 Punkten. 

 Jmax 4G. Beim Drehen des Analysators verblaßten die Punkte in der 

 Gruppe, alles andere verschwand. 



19. Gelbes Mineralöl. Das freie Auge sah einen vorne blauen, 

 rückwärts grünen Kegel; im Ultramikroskope war derselbe blaßblau. In 

 18 Quadraten sah man IG weiße Punkte durchwegs ohne Kreise und im 

 ganzen Kegel 2 Gruppen mit 8 und 30 hellleuchtenden, wenig bunten 

 Punkten. Nach dem Heben des Tubus um 20 fx sah man im ganzen Kegel 

 nur einen Punkt mit ganz undeutlichen schwachen Kreisen. Beim Drehen 

 des Analysators verblaßten die Gruppen, veränderten jedoch die Farbe 

 nicht; die Punkte verscliwanden. 



20. Paraffin öl. Das freie Auge sah einen blaßblauen Kegel: im 

 Ultramikroskope war derselbe kaum sichtbar und enthielt bis 10 weiße oder 

 wenig gefärbte Punkte ohne Kreise ; ausnahmsweise fand man kleine Gruppen 

 von undeutlichen Punkten und ganze Streifen von Punkten; diese Streifen 

 waren 4 Quadrate breit und hatten etwa 12 Punkte in einem Quadrate. 

 Nach dem Heben des Tubus um 20 ^m fand man im ganzen Kegel 3 Punkte 

 mit undeutlichen gelblichen Kreisen. Jmax 66. Beim Drehen des Analysators 

 verschwand alles bis auf die hellsten Punkte und die aus denselben sich 

 bildenden Kreise. — 



Die in diesen Befunden enthaltenen Resultate kiinnen wir im 

 folgenden ziisamme'ufnssen : 



Das Mineral- und das Paraffinöl, die sich fast gar nicht ver- 

 änderten, die sich aber sonst bei anderen wässerigen Reagentien 

 mehr oder weniger trübten, zeigten Punkte ohne Kreise und Gruppen, 

 die ausgeschiedenem Fette entsprechen. Reim lieben des Tubus 

 zeigten sich Punkte mit Kreisen ; bei Drehen des Analysators traten 

 keine Farbenveränderungen ein. 



Die sich rotbraun färbenden Ole (vom Dreikronentran bis zum 

 Walratöle) zeigten dem freien Auge und auch im Ultramikroskope 

 einen immer gelberen und röteren Kegel ; die Farbe des Kegels war 

 um so gelber und röter, je mehr diese Farben sclion makroskopisch 

 hervortraten. In keinem Falle konnte eine Zunahme der Punkte mit 

 Kreisen nach dem Heben des Tubus sichergestellt werden (bei dem 

 Sesamöle umgaben sich mit neuen Kreisen nur die Gruppen). Eine 

 Zunahme von Punkten überhaupt nach der Reaktion kam nur bei 




528 Schneid er- Just: Ultramikroskopie der Oleosole. XXII, 4. 



solchen Ölen vor, welche eine Trübung oder einen Satz abschieden 

 und es stellten diese Punkte auch ihrem Charakter nach Fettteilchen 

 vor. Auch wo bei der Reaktion Punkte mit Kreisen zunahmen, ent- 

 sprechen dieselben der Fetttrübung. Daß die Rotbraunfärbung bei 

 Ruthenium nur durch mikroskopische Teilchen erzeugt wurde , be- 

 weist am besten das Elain-Destillat, welches bei einer starken Bräunung 

 keine Punkte zeigte. 



Die anderen Öle, bei welchen entweder nur eine Schwarzfärbuug 

 oder außerdem auch eine Braunfärbung makroskopisch sichtbar war, 

 zeigten im Ultramikroskope eine Vermehrung der Punkte. Bei dem 

 Pferdeöle nahmen zwar die Punkte überhaupt ab, weil weniger Fett- 

 teilchen ausgeschieden waren , dafür nahmen die mit Kreisen um- 

 gebenen Punkte zu. Auch in dem Mohn- und Arachisöle ist eine 

 Zunahme der Punkte mit Kreisen nach der Reaktion eingetreten. 

 Alle Öle, bei welchen eine Schwarzfärbung sichtbar war, hatten das 

 Gemeinsame , daß bei ihnen nach dem Heben des Tubus um 20 [x 

 mehr Punkte mit Kreisen gefunden wurden als vor der Reaktion, 

 was auch mit dem Befunde bei mit Formaldehyd reduzierter 

 Rutheniumchloridlösung in Übereinstimmung war. Die beim Heben 

 des Tubus sich bildenden Kreise waren außer beim Pferdeöl mäßig 

 bunt. Obzwar diese Öle bis auf das Pferdeöl klar waren, so wurden 

 doch bei ihnen zahlreiche Gruppen gefunden ; beim Mohnöle kam 

 anstatt der Gruppen eine auffallend ungleiche Verteilung der Punkte 

 vor, was als ein Anfang des Gruppierens angesehen werden kann. 

 — - Das Raps-, Rizinus- und Pferdeöl, welche außer der schwarzen 

 Farbe auch deutlich eine braune angenommen haben , zeigten dem 

 freien Auge eine Färbung des Kegels in Gelb ; im Ultramikroskope 

 war keine Gelbfärbung zu sehen; eine Färbung des Kegels in Rot 

 war bei diesen Ölen überhaupt nicht zu bemerken. 



Zusammenfassung. 



1) Das Ultramikroskop eignet sich zur Sicherstellung der Iden- 

 tität und der Reinlieit der Öle und zur Prüfung von Ölgemischen. 



2j Man prüft die Öle mit dem Ultramikroskope, nachdem man 

 sie durch die Reaktionen mit Edelmetallverbindungen in Oleosole 

 dieser Metalle umgewandelt hat. 



3) Bei dem ultramikroskopischen Studium bewährte sich das 

 Zählen der spärlich vorkommenden Punkte und Gruppen im ganzen 




XXII, 4- Schnei der -Just: Ultramikroskopie der Oleosole. 529 



Kegel , die Bestimmung von a und <?, das Zählen der mit Kreisen 

 umgebenen Punkte nach dem Heben des Tubus um 20 jli und die 

 gesonderte Untersuchung der ohne Kreise vorkommenden Punkte, 

 der mit Kreisen umgebenen Punkte und der Gruppen, und zwar 

 sowohl ohne den Analysator als auch mit demselben, 



4) Bei den ausgeführten Untersuchungen der Handelsöle waren 

 die verschiedenen Formen, unter welchen sich im Ultramikroskope 

 das aus dem Öle ausgeschiedene Fett zeigt, der Betrachtung der 

 Metallteilchen sehr hinderlich und es zeigte sich für die weiteren 

 Arbeiten die Verwendung von Ultramikroskopen mit Heizvorrichtuug 

 notwendig. 



5) Das Ergebnis der Reaktion wird durch viele Umstände be- 

 einflußt, hauptsächlich durch das Lösungsmittel, die Temperatur, die 

 Bewegung, die Zeit und die Ölmenge. Ein Einfluß von Licht wurde 

 nur bei Silber beobachtet, und zwar ein selbständiger, und keine 

 bloße Abänderung des Verlaufes, der Form und des Grades der 

 Ölreaktion. 



6) Die besten Resultate werden beim ultramikroskopischen 

 Prüfen der Öle nach der Reaktion mit Goldchlorid gefunden. Es 

 tritt entweder eine Rotfärbung durch amikroskopische Teilchen ein, 

 oder eine Blaufärbung durch submikro- und mikroskopische Teilchen, 

 welche sich zu einem blauschwarzen Niederschlage sammeln, oder 

 eine Gelbfärbung durch submikro- und mikroskopische Teilchen, 

 welche sich zu einem Goldschimmer und einem goldglänzeuden Satze 

 sammeln. Es kann entweder nur eine Form oder zwei oder alle 

 drei zugleich vorkommen. 



7) Aus Silberlösungen werden entweder amikroskopische Teil- 

 chen gefällt, welche ein Blaufärben des Kegels verursachen, oder 

 submikro- und mikroskopische Teilchen. Außer der Silberreduktion 

 gibt auch die Reaktion mit dem in manchen Ölen enthaltenen Schwefel 

 Kegelfärbungen durch amikroskopische Teilchen. 



8) Bei den Reaktionen mit dem Rutheniumchloride kommt ent- 

 weder eine gelbe oder auch eine rote Kegelfärbung durch amikro- 

 skopische Teilchen vor oder es scheiden sich submikro- und mikro- 

 skopische Teilchen aus. 



9) Die mit Osmiumsäure und mit Platinchlorid ausgeführten 

 Versuche ergaben keine praktisch brauchbaren Resultate und es sind 

 andere günstigere Verhältnisse für die Reaktion und die Prüfung 

 zu suchen. 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 4. 34 




530 Peter: Der Anstrich der Richtebene. XXII, 4. 



10) Der gesuchte Zusammenhang des ultramikroskopischen Be- 

 fundes mit einer in Ziffern ausdrückbaren Eigenschaft oder quanti- 

 tativen Reaktion wurde nicht gefunden und es zeigte sich , daß es 

 vor allem darauf ankommt, wie fein die Emulsion ist, deren ein Öl 

 mit dem betreffenden Reagens unter den obwaltenden Verhältnissen 

 fähig ist. 



[Eingegangen am 5. Dezember 1905.] 



[Aus dem Anatomischen Institut der Universität Würzburg.] 



Der Anstrich der Eichtebene. 



Von 

 Dr. Karl Peter, 



a. o. Professor in Greifswakl. 



Mit Tafel III und IV. 



Die Technik der Rieht- oder Definierzeichen, welche 

 ein exaktes Aufeinanderlegen der Zeichnungen von Serienschnitten 

 behufs graphischer oder plastischer Rekonstruktion gestatten, ist fast 

 so alt, wie die Rekoustruktionsmethoden selbst. 



Ihre Einführung geschah durch Kaschtschenko und Strasser. 

 Anfangs wurden zu diesem Zwecke sehr verschiedenartige Verfahren 

 empfohlen, doch hat sich allein die Idee als lebensfähig erwiesen, 

 den Kontur des Blockes selbst, welcher das Präparat eingebettet 

 enthält, als Richtebene zu benutzen. Nicht als ob die älteren Me- 

 thoden, über welche Strasser (1887) ausführlich Bericht erstattet, 

 nicht auch zum Ziele führten, — ich selbst habe bei der Herstellung 

 eines Modells aus einer Serie, welche nach Borns Angabe einen 

 Eiweißstreifen als Richtzeichen trug, die Exaktheit dieses Verfahrens 

 sehr schätzen gelernt, — aber sie waren umständlich , nicht leicht 

 zu handhaben und ergaben teilweise recht unvollkommene Resultate. 

 Jetzt wird also allgemein eine zur Schnittrichtung senk- 

 rechtstehende, mit Leisten oder Ritzen versehene 

 Fläche des Blockes selbst zur Definierebene gemacht. 




XXII, 4. Peter: Der Anstrich der Richtebene. 531 



Nur selten wird diese Definierebene in das Objekt selbst hinein- 

 verlegt; in diesem Falle gibt der Kontur des Schnittes das Richt- 

 merkmal ab , und ein besonderes Hervorheben dieser Linie durch 

 Auftragen einer Farbe ist natürlich unnötig. Meist wird man aber 

 das Präparat nicht verletzen dürfen und muß dann die Richtebene 

 an dem Paraffin- oder Celloi'dinblock in einiger Entfernung von dem 

 eingebetteten Objekt anbringen. Dann muß die Definierfläche, um 

 in den Schnitten nach Auflösung des Paraffins oder Eindecken des 

 Celloidins sichtbar zu sein, mit einem farbigen Überzug ver- 

 sehen werden. 



Solcher Farbmasseu sind eine große Menge empfohlen worden. 

 Doch konnte bisher kein Anstrich alle Anforderungen erfüllen ; ein 

 solcher soll nämlich : 



1) im Schnitt eine scharfe, saubere, dunkle Linie geben, 



2) die Prozeduren des Nachfärbens der Schnitte aushalten 

 können, und 



3) ist größtmögliche Einfachheit der Anwendung erwünscht. 

 Ich habe nun für eine Technik der Rekonstruktionsmethoden 



die in der Literatur empfohlenen Verfahren des Färbens der Richt- 

 ebene sämtlich selbst versucht und bin dabei auf einen für alle Fälle 

 anzuwendenden Anstrich gekommen, der allen drei Forderungen ge- 

 nügen dürfte. Doch bevor ich diesen und seine Vorzüge beschreibe, 

 möchte ich kurz meine Erfahrungen mit den bekannten Farbmasseu, 

 die in ihrer Brauchbarkeit durchaus nicht gleichwertig sind , vor- 

 legen. Genügende Resultate geben sie alle , das beweisen schon 

 die vielen , mit ihrer Hilfe angefertigten Modelle ; doch sind die 

 meisten nur für Paraffinblöcke verwendbar, einige gestatten das Nach- 

 färben nicht, andere liefern keine scharfen Linien u. s. f. Die Be- 

 rechtigung einer solchen Zusammenstellung sehe ich in der Kritik 

 der Resultate der Verfahren ; die Methoden sind beschrieben worden, 

 der Effekt ist aber meist nicht oder nur kurz erwähnt worden. 



Die empfohlenen Farbmassen sind sehr verschiedenartiger Natur. 

 Ich zähle sie nach ihrer Brauchbarkeit auf, wobei Exaktheit der 

 Linie, Einfachheit der Anwendung und Haltbarkeit den Ausschlag 

 geben. 



1) Schwarzer Alkohollack für mikroskopische 

 Zwecke von der Firma Hutstein, Breslau, Schmiedebrücke 

 (Born und Peter 1898). Die genaue Zusammensetzung dieser 

 Flüssigkeit ist uns nicht bekannt ; es soll eine Lösung von Nigrosin 

 in alkoholischer, mit Dammar versetzter Schellacklösung sein. Vor 



34* 




532 Peter: Der Anstrich der Richtebene. XXII, 4. 



dem Gebraucli verdünnt man einige Tropfen mit dem gleichen Quan- 

 tum absoluten Alkohols. Mit weichem Pinsel, der in die Flüssigkeit 

 getaucht wurde , fahre man einmal über die Richtebeue. Dieser 

 Farbüberzug darf nur ganz dünn sein, das Paraffin soll bläulich 

 durchscheinen , und auch das eingeschlossene , der Definierebene 

 nahe anliegende Objekt muß sichtbar bleiben. Je dünner man den 

 Lack aufträgt, desto zarter ist im Schnitt die Linie. Der Lack 

 trocknet schnell , doch habe ich es für gut befunden , den Block 

 einige Stunden stehen zu lassen, ehe ich ihn wieder in erhitztes 

 Paraffin tauche, um den sekundären, schützenden Paraffinüberzug 

 herzustellen. Dieser haftet der Ebene gut an. 



Die Definierlinie ist im Schnitt sehr dunkel, scharf und sauber, 

 übertriö't an Zartheit sogar noch den unten zu erwähnenden eng- 

 lischen Lack. 



Leider ist diese schwarze Farbe außerordentlich empfindlich 

 gegen Alkohol und Wasser; ihre Anwendung beschränkt sich dem- 

 nach auf nicht nachzufärbende Präparate. Aber auch für diese Fälle 

 habe ich eine Anzahl von Vorsichtsmaßregeln , welche ein Gelingen 

 garantieren, ausprobieren müssen. Denn einige Male blich mir die 

 Richtebene im Xylol oder gar erst noch im Kanadabalsam aus. Es 

 stellte sich heraus, daß das Xylol nicht rein war, und daß der Balsam 

 in nicht ganz reinem Xylol geliist war. Seitdem ich die Schnitte 

 in reinem Xylol von Paraffin befreie und in demselben auch den 

 Balsam oder das Dammarharz auflöse , habe ich keine Mißerfolge 

 mehr zu verzeichnen gehabt ; die Richtlinie hat Jahre hindurch ihre 

 tiefschwarze Farbe behalten. 



Diese Flüssigkeit ergibt also die schönsten Definierlinien, dürfte 

 aber wegen der Empfindlichkeit und beschränkten Anwendungs- 

 mögliclikeit durch den unten zu besprechenden Nubian Blacking ver- 

 drängt werden. 



2) Die Schuhlacke Indian Blacking und Nubian Blacking 

 empfahl ich (1899 und 1903), Aveil leichter zu erhalten, an Stelle 

 des Alkohollacks von Hutstein. Ersteren habe ich nicht mehr be- 

 kommen , über Nubian Blacking siehe unten ; da ich diesen damals 

 nur als Ersatz für den Alkohollack gebrauchte, so machte ich keine 

 Versuche mit nachgefärbten Schnitten und wurde auf seine allgemeine 

 Verwendbarkeit nicht aufmerksam. 



3) Eine saubere Richtlinie erhält man auch , wenn man nach 

 Borns (1888) Vorschlag Bismarck braun in eine dünne, alkoho- 

 lische S c h e 1 1 a c k 1 ö s u n g schüttelt und die Farbe auf die Definier- 




XXII, 4. Peter: Der Anstrich der Kiclitebene. 533 



tläche aufträgt. Der Überzug löst sich iu Alkohol , verträgt also 

 kein Nachfärben der Schnitte. 



4) Str^^sser (1887) füllte die Ritzen der Richtebene mit der 

 Paste der blauen Glasschreibstifte von Faber aus. 

 Diese Masse gab mir sehr gute Resultate ; ich schnitt sie aus den 

 Stiften heraus, löste sie in Chloroform und bestrich damit dünn die 

 Definierfläche. Es ist noch nötig, wie Strasser auch angibt, die 

 Paste mit einer dünnen alkoholischen Schellackli)sung zu fixieren, 

 da sonst die Farbe nicht hält. Hat man aber die Fixierung vor- 

 genommen, so erhält man im Schnitt eine sehr scharfe, dunkelblaue 

 Linie. Die Schnitte lassen sich nachfärben, ohne Schädigung für 

 die Richtlinie ; auch auf Celloidin haftet die Farbmasse, die man auf 

 die abgetrocknete Fläche des Blockes aufstreicht ; die Celloidiuschnitte 

 können ebenfalls nachgefärbt werden. 



Ein wenig umständlicher als die Lackarten ist die Verwendung 

 dieser Paste doch, da sie erst gelöst und dann fixiert werden muß. 



5) Schwarze Ölfarbe ist von Kaschtschenko (1886 und 

 1887) und von Strasser (1887) angewendet Avorden. 



a. Der russische Forscher verdünnte die Ölfarbe „Lam- 

 pe n s c h w a r z " mit Terpentin (anfangs empfahl er aufs zehnfache 

 zu verdünnen , später nur einen geringen Zusatz zu nehmen) oder 

 Xylol. Mit dieser Masse bestrich er die Richtebene, ließ trocknen 

 und hüllte sie in den sekundären Paraffiuttberzug ein. Fixation wird 

 nicht erwähnt. Diese Richtlinie hält das Nachfärben der Schnitte 

 unverändert aus, ist aber nicht besonders scharf, sondern ähnelt den 

 mit Ruß hergestellten Definierlinien. Auch bleibt die Farbe, wenn 

 der sekundäre Paraffinüberzug sich beim Schneiden ablöst, was mir 

 hier vorgekommen ist, nicht völlig auf der Richtebene haften, sondern 

 klebt zum Teil an dem abgehobenen I'araffin, so daß die Linie 

 doppelt erscheint ; dies ist wohl auf Rechnung des mangelnden 

 Fixierens zu schieben. 



b. Komplizierter ist Strassers Vorschrift : „Einreiben der Ab- 

 guß-(Richt-)fläche mit dunkler Ölfarbe (Lithographenschwarz 

 z. B.) von der Konsistenz der Tubenfarben ; Reinigen der Haupt- 

 fläche durch vorsichtiges Abwaschen mit einer Mischung von Glyzerin 

 und Alkohol, Trocknenlassen, Firnissen mit sehr verdünnter alko- 

 holischer Schellacklösung." Das Einreiben der Definierfläche wird 

 man wohl besser durch das schonendere Bestreichen mit einem 

 weichen Pinsel ersetzen. Das Resultat ist das gleiche wie bei 

 Kaschtschenko s Methode: eine bri^ckelige , unscharfe Richtlinie, 




534 Peter: Der Anstrich der Richtebene. XXII, 4. 



welche das Nachfärben aushält ; ein Vorzug vor derselben ist das 

 Firnissen , wodurch die Farbe au der Fläche festgehalten wird , ein 

 Nachteil die Umständlichkeit des Verfahrens. 



6) Auch schwarze Temperafarbe (N eutr alschwarzi 

 ist empfohlen worden. Ich habe selbst eine brauchbare Anwendungs- 

 weise beschrieben (1898), die ich mit Professor Born ausprobiert 

 hatte. Es werden 10 Tropfen Mayer scher Klebmasse aus frischem 

 Hülmereiweiß, 1 Tropfen einprozentige Essigsäure und Neutralschwarz 

 soviel , daß die Mischung dünnflüssige Konsistenz erhält , verrieben 

 und auf die Richtfläche aufgetragen. ^/^ Stunde Trocknen auf dem 

 Wärmeschrank, Tauchen in absoluten Alkohol, abermaliges Trocknen 

 ^1^ Stunde lang, Firnissen mit Schellackfixativ, Trocknen, sekundärer 

 Paraffinüberzug. Die Methode hat mir beim Modellieren gute Dienste 

 geleistet; beim Nachfärben leidet die Richtlinie nicht. Doch ist 

 dieselbe auch nicht sehr sauber, wenngleich etwas exakter als bei 

 Anwendung der Ölfarbe, und so habe ich das komplizierte Verfahren 

 verlassen zugunsten anderer einfacherer. 



7) Vielfach ist Ruß zur Herstellung einer Definierlinie, welche 

 beim Nachfärben der Schnitte nicht leidet, benutzt worden. Alle 

 diese Verfahren leiden darunter, daß ein Hantieren mit Ruß immer 

 Unsauberkeiten im Gefolge hat. Auch kann die Linie sich an 

 Exaktheit nicht mit der durch Lack hergestellten messen. Es ist 

 nicht immer zu vermeiden, daß Partikelchen des Rußes sich los- 

 lösen und die Schnitte verunreinigen. Zumal beim Nachfärben geht 

 stets etwas von dem Ruß verloren und macht die Linie unvollständig. 

 Die Schnitte müssen übrigens mit Eiweiß-Cllyzerin aufgeklebt werden, 

 da der Ruß sonst nicht haftet. 



Ruß stellt man sich nach der „Enzyklopädie der mikroskopi- 

 schen Technik" am besten selbst her, indem man Terpentinöl oder 

 Kampfer verbrennt und den Ruß mittels einer Glas- oder Metall- 

 glocke auffängt. 



a. Am saubersten und beständigsten wird die Richtlinie noch, 

 wenn man mit Neumayer (1890) den Ruß mit etwas Zaponlack 

 mischt. So läßt sich eine zarte, ziemlich gleichmäßige, das Nachfärben 

 gut aushaltende Richtlinie herstellen. Ein in Zaponlack getauchter Pinsel 

 mengt die Flüssigkeit mit dem auf der Platte befindlichen Kohlenstaub 

 und trägt die Farbe in dünner Schicht auf die Richtebene auf. 



b. RoETHiG (1904) nimmt in gleicher Weise Kampferruß mit 

 Chloroform auf. Die angestrichene Richtebene läßt er 24 Stimden 

 trocknen. Die Linie ähnelt der mit Zaponlack hergestellten. 




XXII, 4. Peter: Der Anstrich der Richtebene. 535 



c. Born (1888) brachte anfangs den Ruß trocken, mittels eines 

 quer abgestutzten dicken Pinsels, auf die Riclitfläclie , bestäubte die 

 Ebene mit einer dünneu alkoholischen Schellacklösung und bestrich 

 sie dann noch einmal mit derselben Flüssigkeit. Das Schellack- 

 häutchen trocknet in 5 — 10 Minuten. Die Richtlinie, welche ich 

 auf diese Weise hergestellt habe — nur habe ich den Schellack 

 gleich vorsichtig aufgestrichen — gibt den eben erwähnten wenig nach. 



d. Später zog Born (Born und Peter 1898) eine Auf- 

 schwemmung von Ruß in e i n p r o z e n 1 1 g e r C e 1 1 o i d i u - 

 lösung vor, nach Gaupps Vorschrift. Entweder wird Ruß mit 

 einem Pinsel im Uhrschälchen mit Celloidinlösung, die durch Alkohol 

 absolutus verdünnt ist, gemischt und damit die Richtebene bestrichen, 

 oder Ruß wird in einprozentige Celloidinlösung geschüttet, ordentlich 

 umgeschüttelt und mittels Zerstäubers auf die Definierfläche geblasen. 

 In beiden Fällen empfiehlt es sich die angetrocknete Fläche noch 

 mit einer Schicht Schellackfixativ zu bedecken, welche das Anhaften 

 des sekundären Paraffinüberzugs begünstigt. Die Richtlinie ist ziem- 

 lich grob und bröckelig, teilt also die Nachteile jeder Rußlinie. 



8) Endlich muß ich noch eine Farbmasse erwähnen, die Pro- 

 fessor Born und ich anwandten, um die Richtfläche von Celloidin- 

 blöcken anzustreichen, (Born und Peter 1898) übrigens ist dieselbe 

 auch für Paraffinblöcke verwendbar. 10 Teile Preußischblau 

 werden mit 50 Teilen Terpentinöl verrieben und mit 150 Teilen 

 Äther aufgenommen. Die etwas getrocknete Definierebene wird 

 damit dünn bestrichen. Da es uns früher nicht gelingen wollte, einen 

 anderen brauchbaren Anstrich für Celloidin zu erhalten, so benutzten 

 Avir diese Farbe trotz zweier Unannehmlichkeiten : bei der Herstellung 

 ist nämlich ein Verstreuen des Preußischblau nicht zu vermeiden; 

 auch setzt sich der Farbstoff nach einigen Monaten ab, ohne daß 

 man durch Schütteln wieder die ursprüngliche Flüssigkeit herstellen 

 könnte. Die Linie ist scharf und ähnelt der mit der Faber sehen 

 Glasstiftpaste angefertigten. 



Zählen wir die besprochenen Farbmasseu nach dem Grade ihrer 

 Anwendbarkeit auf, so sind: 



1) für alle Fälle , für Paraffin und Celloidin empfohlen worden 



a. die Paste der blauen Faber scheu Glasstifte, 



b. Preußischblau in Äther. 



2) Nur für Paraffinblöcke ist verwendbar : 

 a. mit Möglichkeit des Nachfärbens 




536 Peter: Der Anstrich der Richtebene. XXII, 4. 



n. Ölfarbe nach Kaschtschenko oder Strasser, 



/)'. Temperafarbe, 



y. Ruß in verschiedenen Anwendungsformeu. 



b. ohne Möglichkeit des Nachfärbens 

 a. Alkohollack, 

 ß. Schellacklösung mit Bismarckbraun. 



Die Flüssigkeit nun , welche ich für alle Zwecke , für Paraftin- 

 oder Celloidinblöcke geeignet halte , ist ein Schuhlack „ N u b i a n 

 Waterproof Blacking", den ich schon früher an Stelle des 

 Hutstein sehen Alkohollackes empfohlen hatte. Das Präparat ist 

 englischer Herkunft (prepared by the Nubian Manufacturing Co., 

 Ltd. , Lorrimore Buildings , Lorrimore St. , London S. E.) und in 

 den größeren Scliuhwarengeschäften zu haben ; auch hat sich Herr 

 Dr. Gtrübler- Leipzig auf meine Bitte hin freundlichst bereit erklärt, 

 den Lack vorrätig zu halten. Wegen des schnellen Trocknens be- 

 wahre man den Lack luftdicht verschlossen auf, gieße ihn also aus 

 der Originalflasche in eine andere mit engem Hals, welche fest ver- 

 korkt wird. 



Die Anwendungsweise ist höchst einfach. Man taucht einen 

 feinen, weichen Pinsel in die Flasche , streicht ihn etwas ab und 

 fährt schnell einmal über die Definierebene des Paraffinblocks oder 

 des etwas abgetrockneten Celloidinblocks herüber. Der Überzug soll 

 ganz dünn sein — auch hier wird die Richtlinie um so eleganter, 

 je feiner der Lack aufgetragen wird — , er soll das Paraffin durch- 

 scheinen lassen, darf also nur grau erscheinen. Er trocknet fast 

 augenblicklich, und schon nach wenigen (5) Minuten kann man den 

 sekundären Paraffinüberzug über den Block anfertigen. Derselbe 

 haftet, wenn das Paraffin die richtige Temperatur (75*^) hat, fest 

 an Block und Definierebene. Vor dem Auflösen des Paraffins aus 

 den Schnitten muß der Objektträger in absoluten Alkohol getaucht 

 werden, da die Linie sich sonst kräuseln kann. Im übrigen ist die 

 Behandlung der Schnitte durchaus die gewöhnliche. 



Im Schnitt erscheint die so hergestellte Richtlinie als scharfe, 

 schwarze Zackenlinie, welche sehr genau nachgezeichnet werden kann. 

 Sie ist ein wenig dicker, vielleicht auch etwas heller, als die mit 

 dem Hutstein sehen Alkohollack angefertigte, so daß letztere für nicht 

 nachzufärbende Präparate noch vorzuziehen wäre ; indes bestimmt 

 mich die Empfindlichkeit des Hutstein sehen Lackes und der Wunsch, 

 einen für alle Fälle anwendbaren und allen Ansprüchen genügenden 




XXII, 4. Peter: Der Anstrich der Richtebene. 537 



Anstrich der Richtebene zn besitzen, den Nubian Waterproof Blacking 

 als allgemein brauchbaren Überzug der Definierebene zu empfehlen. 

 Dies wird bewiesen durch die Verscbiedenartigkeit der Behand- 

 lung, der ich die Präparate unterwerfen konnte, ohne daß die Richt- 

 linie gelitten hatte. Icli habe sowohl Versuche an Paraffin- als auch 

 an Celloidinblöcken angestellt. 



I. Paraffinblöcke. Die Schnitte wurden mit Wasser oder 

 mit Eiweiß - Glyzerin und Wasser auf den Objektträger aufgeklebt. 

 Darauf wurde das Präparat ohne Nachfärbung eingedeckt oder mit 

 Hämatoxylin-Eosin oder Pikrokarmin iiachgefärbt. Ich ließ die Schnitte 

 absichtlich tagelang in Alkohol oder Wasser, ohne eine Veränderung 

 an der Linie wahrzunehmen. Dabei sei bemerkt, daß ich das früher 

 empfohlene Überstreichen der angeklebten Schnittserien mit Strassers 

 Rizinusöl-Kollodium jetzt unterlasse. 



II. Ce Heidin. Auch die Celloidinschnitte deckte ich ohne 

 Färbung ein oder führte sie durch Hämatoxylin-Eosin. Die Linie 

 behielt ihre Farbe. Eigentlich bedarf ja nach einer Hämatoxylin- 

 färbung der Celloidinblock keinen Anstrich mehr, da durch dieselbe 

 das Celloidin selbst einen leichten Ton erhält , und sein Rand deut- 

 lich sichtbar ist, doch kann man der Sicherheit wegen noch den 

 Lack auftragen. 



Figur 1 und 2 auf Tafel III und IV zeigen Schnitte durch 

 Eidechsenembryonen, welche Richtlinien, mittels Nubian Blacking 

 hergestellt, besitzen. Die Embryonen wurden mit Boraxkarmiu durch- 

 gefärbt und in Paraffin eingebettet. In Figur 1 sind bei etwa zwölf- 

 facher Vergrößerung mehrere Schnitte einer Sagittalserie abgebildet, 

 welche mit Eiweiß-Glyzerin-Wasser aufgeklebt und mit Hämatoxylin- 

 Orange nachgefärbt wurden. Jeder Schnitt besitzt eine gleich scharfe 

 Definierlinie. Figur 2 zeigt einen Schnitt durch eine andere Serie bei 

 stärkerer Vergrößerung ; er ist nicht nachgefärbt worden. Die Photo- 

 gramme zu diesen Abbildungen verdanke ich der Freundlichkeit von 

 Herrn Professor Sobotta , dem ich auch hier für seine bereitwillige 

 Hilfe herzlich danke. 



Nubian Waterproof Blacking empfiehlt sich also : 



1) Durch die Schärfe und Sauberkeit der Richt- 

 linie, welche besonders die der R u ß s u s p e n - 

 s i n e n bedeutend übertrifft; 



2) Der Lack ist für alle Fälle anwendbar: für 

 Paraffin- wie für Celloidinblöcke, bei Stück- 

 färbung, wie Schnittfärbung, bei Aufkleben 




538 Peter: Der Anstrich der Richtebene. XXII, 4. 



der Paraffiuscliui tte mittels Wasser oder Ei- 

 weiß-Glyzerin nnd Wasser; 

 3) Endlich ist die A n w e n d u n g s w e 1 s e die denkbar 



einfachste. 

 Somit erfüllt dieser Lack die eingangs aufgestellte Forderung ; 

 speziell möchte ich noch darauf aufmerksam machen, wie einfach 

 die Prozedur bei nachzufärbenden Objekten wird, welche früher 

 einen umständlichen und schmutzenden Kußüberzug verlangten. 



Verzeichnis der zitierten Literatur. 



1888. Bork, G. , Noch einmal die PlattenmodeUiermethode (Zeitschr. f. 

 wiss. Mikrosk. Bd. V). 



1898. Born, G., u. Peter, K., Zur Herstellung von Richtebenen und Richt- 



linien (Ebenda Bd. XV). 



1886. Kaschtschenko , N. , Methode zur genauen Rekonstruktion kleiner 



makroskopischer Gegenstände (Arch. f. Anat. u. phys.-anat. Abt.). 



1887. Derselbe. Die graphische Isolierung (Anat. Anz. Bd. II). 



1899. Neumayer, L. , Studie zur Entwicklungsgeschichte des Gehirnes der 



Säugetiere (Festschrift f. Kupffer). 



1898. Peter, K. , Die Entwicklung und funktionelle Gestaltung des Schä- 



dels von Ichthyophis glutinosus (Morph. Jahrb. Bd. XXV). 



1899. Derselbe. Demonstration des Bors-Peter sehen Verfahrens zur Her- 



stellung von Richtebenen und Richtlinien (Verhandl. Anat. Gesellsch. 

 Tübingen). 



1903. Derselbe. Artikel „Plastische Rekonstruktion" in Enzyklopädie der 



mikroskopischen Technik. 



1904. RoETHiG, P., Handbuch der embryologischen Technik. Wiesbaden. 

 1887. Strasser, H. , Über die Methoden der plastischen Rekonstruktion 



(Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. IV). 



Greifswald, den '20. Oktober 1905. 



[Eingegangen am 21. Oktober 1905.] 




XXII, 4. Cagnetto: Per la colorazioiie delle cellule ciomofile etc. 539 



[Istituto di Anatomia Patologica della R. Universitä di Padova. Diretto dal 



Prof. A. BoNOME.l 



Per la colorazioiie delle cellule cromofile 

 delFHypopliysis cerebri. 



Nota di tecnica istologica 



del 

 Dr. Giovauni Cagiietto, 



aiuto e liboro docente. 



L'estensione acquistata in questi Ultimi tempi dalle ricerche 

 auatomiclie e sperimentali sull' hy popliy sis cerebri ha fatto 

 sentire negli istologi piii vivo il bisogno di un metodo facile e ra- 

 pido, che serva alla dimostrazione di quelle cellule cromofile, 

 suUa cui presenza sembra imperniarsi, per consenso orraai generale, la 

 funzione della parte glandolare di quest'orgauo tuttora cosi enigmatico. 



II piü semplice degli artifici ancora in uso e quello stesso che ha 

 servito al Flesch, ^ nei suoi vecchi studi sulla glandola pituitaria, per 

 differenziare l'una dall'altra le due varieta fondamentali di cellule del 

 lobo glandolare: iB cellule cromofile e le cromofobe. E il 

 metodo molto elementare e comodo della colorazione del tessuto con 

 Teraatossilina- eosina . 



Col perfezionarsi della tecnica microscopica altri metodi piii 

 delicati e piü spiccatamente specific! entrarono nell'uso comune degli 

 istologi. In Italia, ad es., ebbero larga applicazione e buona for- 

 tuna quelli del Vassale'- e del Galeotti^; in Germania particolar- 

 mente il metodo di Benda*, il quäle del resto ha trovata auche nel 

 nostro paese tutt'affatto recentemente la migliore accoglienza. 



1) Flesch, Tageblatt der 57. Versammlung deutscher Naturforscher 

 und Ärzte in Magdeburg, 1884. 



^) Vassale, Rivista sperimentale di J'reniatria, 1901, Fase. 3—4, 



p. 1078. 



ä) Galeotti, Arch. f. mikrosk. Anatomie Bd. XLVIII, 1896, p. 305. 

 *) Benda, Neurologisches Zentralblatt, 1900, p. 78G. 




540 Cagnetto: Per la colorazione delle cellule cromofile etc. XXII, 4. 



Impegnato da qualclie tempo in alcune ricerche sistematiclie di 

 fina anatomia sul lobo glandolare della pituitaria nello stato normale 

 e patologico, lio cercato apportare ai metodi tecnici ora in uso modi- 

 iicazione tale, che conciliasse in essi l'economia dei reagenti con la 

 celeritii del procedimeuto di colorazione. Di questa desiderata 

 semplificazione di metodo ho avuto modo di valiitare particolar- 

 mente i vantaggi in quei casi nei qiiali gli artifici di colorazione 

 universalmente adottati non rispondevano perfettamente allo scopo o 

 in quelli altri nei qiiali mi premeva il bisogno di uu raggnaglio 

 soUecito e siciiro intorno allo stato di maggiore o minore attivitä 

 funziouale del tessuto glandolare deiripofisi su preparati in serie. 

 Siccome penso che molti di coloro che si occnpano al di d'oggi di 

 questioni attinenti Tistologia della glandola pituitaria si sieno giä 

 trovati o possano trovarsi, nei corso delle loro indagini, in circostanze 

 analoghe alle mie, non credo del tutto superfluo il dedicare poche 

 parole all' esposizione del metodo ch' io da qnalche tempo segiio 

 nelle mie ricerche. 



Io soglio tissare uua meta delF ipofisi umana in soliizione di 

 formolo commerciale al 10 ^/^ per 3 — 4 giorni, rinnovando il liqnido 

 dopo le prime 24 ore ed anche prima, se si e fatto rossigno. II 

 pezzo tolto dal formolo e lavato in acqiia corrente per qualche mi- 

 niito , viene tosto immerso in una soliizione acqnosa dihiita di acido 

 cromico al 0,1 ^/^ per dne giorni e in nuova soliizione cromica al 

 0,25 ^/q per altri diie giorni, possibilmente esponendo il liquido, du- 

 rante qiiesto tempo, in termostato alla temperatiira di 37°. La for- 

 miila di fissazione non varia dal metodo gia ricordato del Benda, se 

 non per qiianto riguarda la titolazione della soliizione cromica, ch'io 

 credo eccessiva se portata al 0,50°/o, come il Benda prescrive. 

 L'acido cromico molto dihiito penetra piii profondamente nei tessuto, 

 poiche non determina , alla superficie del pezzo , la formazione di 

 quella crosticina coriacea, impermeabile, che inevitabilmente si costi- 

 tiiisce allorquando il titolo della soliizione cromica e im po'alto : in 

 tal caso e facile infatti constatare che l'impregnazione del pezzo si 

 limita al solo strato piü superficiale, senza raggiungere le parti pro- 

 fonde. AI contrario, con l'acido cromico diluito si ottiene in ogni 

 caso una uniforme e completa impregnazione del tessuto anche 

 se il pezzo e discretamente vohiminoso (2 — 3 cm quadrati di larghezza 

 per 3 — 4 mm di spessore). 



Dopo la cromizzazione il pezzo va lavato in acqua fiuo a 

 che non ceda quasi piü acido cromico (30 — 40 ore), ed in seguito 




XXII, 4. Cagnetto: Per la colonizione delle cellule cromofile etc. 541 



vien passato attraverso alla serie degli alcool fino a disiclratazione^ 

 chiariiicato in xilolo ed incluso in paraffina. 



A tal pnnto l'ipofisi sarebbe pronta per applicarvi la colorazione 

 del Benda airalizariuato di soda e bleu di toluidina : pero io pre- 

 ferisco procedere diversamente. 



Le sezioni microtomiche sottili, attaccate al portaoggetti con 

 albume glicerinato molto diluito (goccie 2 in un ditale d'acqua), son 

 colorite per 5' — 10' con ima soluzione satura acquoso-anilinata di fuxina 

 acida e riscaldate nel frattempo cautamente alla iiamma di una lampada 

 a spirito tincbe si soUevauo i primi vapori. Quando il portaoggetti e 

 freddo , si toglie la fuxina con un filo d'acqua e si differenzia per 

 4' — 5' mediaute una soluzione acquosa, satura a freddo, di acido 

 picrico. E opportuno, durante il differenziamento, impartire al porta- 

 oggetti leggieri movimenti di oscillazione laterale cosi da agevolare 

 la decolorazione della sezione, procurando che essa rimanga bagnata 

 costantemente da soluzione picrica fresca. Disponendo di sezioni un 

 po' spesse e utile procedere al differenziamento sotto l'azione di un 

 temperato calore , tenendo il preparato, ad es. , sopra una lampada 

 BuNSEN ad ima certa altezza dalla fiamma : lo stesso risultato con un 

 po' di pazienza, impiegando qualche minuto di piü, lo si ottieue del 

 resto anche col differenziamento a freddo. AUorquando la sezione 

 ha acquistato un color rosso-mattone leggermente tendente al gial- 

 liccio , si toglie la soluzione picrica sotto il filo d'acqua e si vede 

 tosto, durante il lavaggio, il color rosso-mattone trasformarsi in rosso 

 chiaro. E questa la tinta confaciente : qualora il preparato dopo il 

 lavaggio risultasse colorito ancoi'a troppo intensamente , converrebbe 

 prolungare il differenziamento fino ad offenere la tinta voluta. 



In seguito si disidrata rapidamente con alcool assoluto, 

 asciugando la sezione con carta bibula, si rischiara con lo xilolo e 

 si monta in balsamo. 



10 sento di poter affermare con tutta sicurezza che Tapplica- 

 zione del metodo di colorazione suesposto all'ipofisi fissata in formolo- 

 acido cromico rappresenta , per il rilievo delle cellule cro- 

 mofile, un procedimento meno infido sia del metodo originale del 

 Benda che di quello stesso del Galeotti, eh' e cosi prezioso per 

 altri dettagli citologici dell'ipofisi. A me , ripeto, e accaduto spesso 

 di veder colorite distintamente le cellule cromofile di ipofisi, nelle 

 quali i suindicati metodi mi avevan dato risultato incerto e pre- 

 parazioni di complesso poco dimostrative. 



11 procedimento da me adottato, oltre che avere il doppio pregio 




542 Cagnetto: Per la colorazione clelle cellule cromofile etc. XXII, 4. 



deU'economia nel fissatore e della rapidita nella colorazione, ha sugli 

 altri due sopradetti una decisa superioritji : quella di dare a colpo 

 d'occhio all'osservatore una sicura nozione del n u m e r o delle cellule 

 cromofile esistenti in una data sezione di ipofisi. Con esso si colo- 

 rano, infatti, specificamente in rosso-vivo brillante 

 le sole cellule cromofile: le cellule pallide, prive di granula- 

 zioni protoplasmatiche , prendono una tinta caffe-latte , il connettivo 

 una tinta rosa, come nel metodo di v. Gieson, e le emazie un colore 

 aranciato cupo. La constatazione della quantitä, sia pur approssima- 

 tiva, degli epiteli granulosi presenti in un preparato di ipotisi riesce 

 perciö oltremodo facile , impiegando a tal uopo un obbiettivo di 

 media potenza, come, ad es., il No. 5 Koristka o anche un obbiet- 

 tivo di minor forza. 



Questo trattamento ha eziandio il vantaggio di dare buoni 

 risultati anche nelle mani di un tecnicista poco esperto : esso riduce 

 il metodo di colorazione delle cellule cromofile ad una pratica asso- 

 lutamente elementare, evitando le lungaggini e le difficolta del me- 

 todo di Benda, che abbisogna di una certa maturita nel preparatore, 

 e quelle non sempre facilmente superabili del metodo originale del 

 Galeotti alla fuxina e verde di metile. 



Riassumo qui in forma cronologica e sintetica il procedimento. 



1*^ Fissazione di una metji dell'ipofisi in formolo 

 commerciale al IO^/q per 3 — 4 giorni. 



2^ Passaggio in soluzione cromica al 0,10% per 

 due giorni ed al 0,25% per altri due giorni. 



3^^ Lavaggio prolungato in acqua. 



4*^ Serie degli alcool fino a disidratazione. 



5^ Xilolo. 



6° Par a f finazione. 



7^ Trattamento delle sezionisparaffinate,acaldo, 

 per 5'^ — -10' con soluzione acquoso-anilinata satura di 

 fuxina acida. Si prepara il liquido in questo modo. 

 Si sciolgono a caldo (70^ — 80**) in una Capsula di por- 

 cellana, cc3 di olio di anilina in cc 100 di acqua dis- 

 tillata e, lasciata raffreddare la soluzione, la si versa 

 a poco a poco in un mortaio contenente gr 2 di fuxina 

 acida finemente polverizzata. Si adopera la miscela 

 colorante dopo 24 ore, previa filtrazione. 



8° Lavaggio in acqua corrente. 




XXII, 4. Cagnetto: Per la colorazione delle cellule cromofile etc. 543 



9^ Diff er enziamento per 4' — o' con una soluzione 

 acquosa satura a freddo di acido picrico. 



10^ Nuovo lavaggio in acqua corrente. 



11*^ Rapida disidratazione in alcool assoluto; 

 xilolo e balsamo del Canad;i. 



II metodo si presta bene anche pel rilievo, nella tiroide, delle 

 cosidette Kolloidzellen di Langendorff ed inoltre per lo studio 

 delle isole di Langerhans del pancreas, le. quali spiccano sul 

 resto del tessuto per un bei color rosso-vivo, al pari dei nidi di 

 cellule cromofile dell' ipofisi. 



[Eingegangen am 30. Dezember 1905.] 




544 Referate. XXII, 4. 



Referate. 



1. Mikroskop und mikroskopische Apparate. 



Abbe , E., Gesammelte Abhandlungen. Band II. (Wissen- 

 schaftliche Abhandlungen aus verschiedenen Gebieten, Patent- 

 schriften, Gedächtnisreden.) Jena (Gustav Fischer) 1906; 

 IV + 346 pp., 7 Tfln. u. 16 Fig. i. Text. geb. 9 M. 



Der Herausgeber Dr. E. Wandersleb hat in diesem Bande die 

 wissenschaftlichen Arbeiten Abbes gesammelt, die im Gegensatze zu 

 den Abhandlungen des ersten Bandes nicht speziell dem Gebiete der 

 Mikroskopie angehören. Neben Abbes erster wissenschaftlicher Publi- 

 kation, seiner Dissertation, enthält der vorliegende Band eine Reihe 

 von Veröffentlichungen astronomischen und astrophysikalischen Inhalts, 

 Arbeiten über einige für den Physiker, speziell für den Optiker be- 

 stimmte Meßinstrumente ; so z. B. die Beschreibung des Spektro- 

 meters, des Refraktometers und des Fokometers ; ferner zehn Patent- 

 schriften, die zwar von der Firma C. Zeiss eingereicht worden sind, 

 aber von Abbe herrühren, und schließlich drei Gedächtnisreden, näm- 

 lich auf Joseph Fraunhofer , Carl Zeiss und Hermann Schäffer. 

 Für den Mikroskopiker von besonderem Interesse ist eine Arbeit über 

 die Berechnung des wahrscheinlichen Fehlers bei der Bestimmung 

 von Mittelwerten durch Abzählen. 



Henker {Jena). 




XXII, 4. Referate. 545 



2. Präparationsmethoden im allgemeinen. 



Böhmer , C. , Anleitung zur Untersuchung landwirt- 

 schaftlich wichtiger Stoffe. Zum Gebrauch 

 in landwirtschaftlichen und agrikulturchemi- 

 schen Laboratorien und für die Praxis zu- 

 sammengestellt und bearbeitet. Berlin (P. Parey) 

 1906. 135 pp. ,3-50 M. 



Ein vielseitiges Büchlein, das in anerkennenswerter Kürze über 

 erprobte Methoden zur Untersuchung landwirtschaftlich wichtiger Stoffe 

 berichtet. Mechanische und chemische Bodenanalyse , die Unter- 

 suchung der künstlichen Düngemittel (Phosphorsäure- , Stickstoff-, 

 Kalk-, Kalibestimmung), der Futtermittel und der Milch und die Be- 

 stimmung des Zuckergehalts der Rübe werden besprochen. ■ — Hier 

 und da wird auch das Mikroskop zu Rate gezogen. 



Küster {Halle a. S.). 



Stoeltzuer, W., Über Metallfärbungen verkalkter Ge- 

 webet eile (ViRCHOws Arch. Bd. CLXXX, 1905, H. 2, 

 p. 362 — 365). 

 Verf. hat im Jahre 1900 zusammen mit Salge Untersuchungen 

 darüber angestellt, welche Resultate man erhält, wenn man histo 

 logische Schnitte denjenigen Manipulationen unterwirft, die man in 

 der Photographie anwendet, um an belichteten Chromsilberplatten 

 das photographische Bild hervorzurufen. In der damaligen Veröffent- 

 lichung ist es unterlassen worden, mitzuteilen, was die Methode für 

 Verkalkungen leistet. Da die Resultate hierbei gerade sehr gute 

 waren, so veröffentlicht Verf. jetzt die Methode : Die Schnitte kommen 

 aus destilliertem Wasser auf 5 Minuten in ein zweites Schälchen 

 mit destilliertem Wasser , in dem man einige Tropfen einer Lösung 

 von Silbernitrat verteilt hat. Nach Abspülen in destilliertem Wasser 

 überträgt man die Schnitte in eine dünne Lösung von z. B. Pyro- 

 gallol, in welcher augenblicklich die Silberfärbung der verkalkten 

 Stellen hervortritt. Verf. hat .^un diese früheren Untersuchungen 

 dadurch ausgedehnt, daß er versuchte, ob nur das Silber oder auch 

 andere Metalle eine ähnliche Affinität besitzen. Es wurden zu diesem 

 Zwecke die Schnitte mit der wässerigen Lösung irgendeiner Metall- 

 verbindung behandelt und dann nach gründlichem Auswaschen in 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, -1. 35 




546 Referate. XXII, 4. 



destilliertem Wasser der Einwirkung eines Reagens ausgesetzt, das 

 mit der betreffenden Metallverbindung einen charakteristischen, mög- 

 lichst dunklen Niederschlag gibt. Es ergab sich , daß alle unter- 

 suchten Metalle (Silber, Blei, Kobalt, Kupfer, Eisen) eine starke 

 Affinität zu verkalktem Gewebe haben, daß also die Affinität des 

 Silbers nur einen speziellen Fall einer viel allgemeineren Erscheinung 

 darstellt. ScMefferdeckefr {Bonn). 



Halphen, G., et Riebe, A., Contribution a l'etude des 

 teintures histologiques (C. R. Acad. Sciences Paris 

 t. CXL, 1905, no. 21, p. 1408—1410). 

 Die Verfi", haben versucht, unsere jetzigen Färbungsprozesse 

 durch Versuche vom chemischen Staudpunkte aus zu erklären. Zu 

 diesem Zwecke haben sie die Einwirkung von Farbstofien auf Schnitte 

 von verschiedenen tierischen Geweben nach Alkoholhärtung unter- 

 sucht, indem sie immer auf dieselbe Weise arbeiteten : der Farbstoff 

 wurde in dem Tausendfachen seines Gewichtes an Wasser gelöst und 

 die Färbung wurde direkt in dieser Farblösung, bei gewöhnlicher 

 Temperatur ausgeführt. Der Überschuß an Farbstoff" wurde durch 

 Wasser entfernt ; entwässert wurde nicht mit Alkohol , welcher die 

 Farbstoffe' löst, sondern mit einer Mischung von einem Volumenteil 

 absoluten Alkohols und 3 bis 4 Volumeuteilen Petroläther, eine 

 Mischung, die das Wasser auszieht, ohne den Farbstoff in merkbarer 

 Weise zu lösen. Es ergab sich , daß die Zufügung von geringen 

 Säuremengen zu Lösungen von „sauren" Farbstoffen deren färberische 

 Fähigkeit erhöht; ebenso wurde bei den basischen Farbstoffen die 

 Färbbarkeit durch geringe Mengen von Alkali erhöht. Indem die 

 Verff. diese Tatsachen praktisch verwendeten, gelang es ihnen , mit 

 demselben Farbstoffe verschiedene elektive Färbungen auszuführen 

 und auch mit sauren Farbstofien Färbungen zu erhalten, welche man 

 gewöhnlich nur mit basischen Farbstoffen erhält, besonders eine 

 elektive Färbung der Nucleinsäuren der Zellkerne .mit sauren Farb- 

 stoffen. Diese Resultate erklären sich leicht, wenn man an die 

 gleichzeitig sauren und basischen Eigenschaften (proprietes) der 

 Albuminoide denkt. Da jeder Farbstoff ein Salz des färbenden 

 Prinzipes ist , je nachdem sauer oder basisch , so muß das Prinzip 

 sich unter bestimmten Bedingungen auf der wirksamen basischen 

 oder sauren Gruppe des Albuminpids fixieren können, und diese Be- 

 dingungen hängen ab von der resp. Kraft dieser wirksamen Gruppen, 

 von ihrem gegenseitigen Einflüsse "und von dem Stabilitätsgrade des 




XXII, 4. Referate. 547 



Salzes , welches den Farbstoft' darstellt. Diese Stabilität aber des 

 Farbstoffes kann leicht verändert werden, wenn man die Zusammen- 

 setzung des Farbstoffbades ändert. Wenn man z. B. eine minera- 

 lische Base auf eine basische Farbe einwirken läßt, so wird das 

 färbende Prinzip frei zu werden suchen und infolgedessen leichter 

 eine Verbindung mit dem sauren Radikal des Albuminoids eingehen, 

 daher dann eine stärkere Färbung. Wenn man umgekehrt die Lösung 

 eines sauren Farbstoffes ansäuert , so wird das frei gewordene 

 Prinzip sich leichter auf dem basischen Teile des Albuminoids 

 fixieren. Legt man in dasselbe Farbbad die die tierischen Gewebe 

 bildenden Stoffe, so kann man feststellen, daß sie in verschiedenem 

 Maße die Fähigkeit besitzen den Farbstoff zu fixieren. Man kann 

 daraus schließen, daß die sauren und basischen Gruppen der ver- 

 schiedenen Albumiuoide verschiedene chemische Kraft besitzen. Es 

 folgt daraus, daß die Untersuchung der Färbungsbedingungen zu der 

 Feststellung ihrer relativen Werte führen muß. Um diese Werte 

 abzuschätzen, haben die Verff. die Wirkung festzustellen versucht, 

 welche die Fixierungs- und Härtungsflüssigkeiten, die gewöhnlich ver- 

 wendet werden , auf die Gewebe ausüben. Sie haben so gefunden, 

 daß das Formol und die Müller sehe Flüssigkeit die Kraft der 

 Einwirkung der sauren und basischen Gruppen der Albuminoide 

 wesentlich verändern ; dasselbe gilt, wenn auch in geringerem Grade, 

 für den Alkohol und die Wärme. Man mußte daher versuchen, die 

 Gewebe auf andere Weise zu härten als mau es gewöhnlich in der 

 Histologie tut. Die Verff. haben die Organstückchen daher bei ge- 

 wöhnlicher Temperatur unter Glocken getrocknet, indem sie Wasser 

 anziehende Substanzen wie Glyzerin oder noch besser Schwefelsäure 

 gleichzeitig unterstellen und eventuell noch Chloroform , um durch 

 dieses die Mikroben zu töten. Von solchen Präparaten augefertigte 

 Schnitte unterscheiden sich wesentlich von denen, die man nach den 

 gewöhnlichen Methoden erhält. Einige von ihnen entfärben all- 

 mählich das Fuchsin, mit welchem sie zuerst gefärbt worden sind; 

 sie verlieren diese Eigenschaft, wenn man sie vor der Färbung in 

 Alkohol legt. Diese Erscheinungen scheinen abhängig zu sein von 

 der Gegenwart von proteolytischen Fermenten in den Präparaten, 

 welche fehlen, wenn man die Härtung durch Alkohol bewirkt hat. 

 Die Verff. heben schließlich hervor , daß in den Schnitten von in 

 der oben angegebenen Weise getrockneten Präparaten weder Kerne 

 noch Zellen irgendwelcher Art direkt oder nach Färbung zu sehen 

 sind, während diese Elemente in den nämlichen Schnitten sofort auf- 



35* 




548 Referate. XXII, 4. 



treten, wenn mau sie vorher mit Alkohol behandelt. Die Verflf. werden 

 ihre Studien fortsetzen. Schiefferdecker (Bonn). 



Mark, E. L. , A paraffine bath heated by electricity 

 (American Natural, vol. XXXVII, 1903, no. 434, p. 115—119 

 w. 2 figg.). 

 Verf. beschreibt ein durch Elektrizität erwärmtes Paraffinwasser- 

 bad, dessen Konstruktion durch zwei Abbildungen erklärt wird. Es 

 muß hier dieserhalb auf das Original verwiesen werden. Es kostet 

 ein solches Bad inklusive der zur Erwärmung dienenden elektrischen 

 Rollen 25 bis 30 Dollar. Geliefert werden solche Apparate von 

 Clark and Mills 23 Church St. , Cambridge und 543 Boylston 

 St., Boston. Schiefferdecker (Bonn). 



Ruzicka, V., Über tinktorielle Differenzen zwischen 

 lebendem und abgestorbenem Protoplasma 

 (Pflügers Arch. Bd. CVII, 1905, H. 10—12, p. 497 

 —534). 

 Verf. hebt hervor, daß bis jetzt zwei Methoden angegeben worden 

 sind, die zur tinktoriellen Differenzierung zwischen lebendem und 

 totem Protoplasma dienen sollen: von Mosso^ und von Rhumbler.- 

 Beide beruhen auf der Färbung mit Methylgrüu. Beide genügen 

 nicht : Es geht aus ihnen hervor, daß das Methylgrün imter gewissen 

 Bedingungen zur tinktoriellen Veranschaulichung des Todes der Zellen 

 herangezogen werden kann, doch wird der Zweck, eine tinktorielle 

 Unterscheidung der lebenden von der toten zu ermöglichen, nicht 

 erreicht. Bei der Methode von Mosso färben sich nicht die lebenden 

 Zellen, sondern erst die absterbenden und toten, weil das Methylgrün 

 eine rasche Giftwirkung entfaltet ; daß abgestorbenes und totes Proto- 

 plasma der Färbung zugänglich ist, ist aber nichts Neues. Neu ist 

 nur, was jedoch Mosso nicht hervorhob, daß sich bei seinem Ver- 

 fahren schließlich die ganze Zelle diffus mit dem Methylgrün tingiert, 

 während sonst nur die Kerne Verwandtschaft mit demselben zeigen. 

 Bei der Methode von Rhumbler wird überhaupt totes Substrat ge- 

 färbt. Früher nahm man an, daß sich die lebende Substanz im 

 Gegensatze zu der abgestorbenen nicht färbe. Heute wissen wir, 

 daß die lebende Substanz gefärbt werden kann. Vorzugsweise ist 



1) Vgl. ViRCHOAVs Arch. Bd. CXIII, 1888, p. 397. 

 -) Vgl. diese Zeitschr. Bd. X, 1893, p. 473—474. 




XXII, 4, Referate. 549 



es das Cytophisma , welches in gewissen Teilen färbbar erscheint, 

 doch besitzt nach Verf. auch der Zellkern die Fähigkeit der intra- 

 vitalen Färbbarkeit. Während man aber behaupten kann, daß sich 

 die Körnungen des Cytoplasmas bei der Anwendung gewisser Farb- 

 stoife regelmäßig färben, sind wir heute noch nicht in der Lage, die 

 Bedingungen, unter welchen eine intravitale Färbung des Kernes 

 zustande kommt , auch nur annäherungsweise präzisieren zu können. 

 Das Verfahren, welches Verf. angewendet hat, nach vielfachen Ver- 

 suchen, ist das folgende : Mau mische O'Oöprozentige Lösungen von 

 Neutralrot und Methylenblau (medic. Höchst) in destilliertem Wasser 

 zu gleichen Teilen. Von dem Gemische, welches dauerhaft ist, tropfe 

 man auf gut gereinigte Objektträger und lasse die Tropfen bei 35^ 

 im Thermostaten verdampfen. War der Tropfen nicht zu groß, so 

 bildet sich eine gleichmäßige Farbschicht, die man einige Zeit auf- 

 bewahren kann. Besser ist es, frisch bereitete Schichten anzuwenden 

 (höchstens 3 Tage alt). Die Objektträger und Deckgläser müssen 

 stets aufs sorgfältigste gereinigt werden , um allen (eventuell Meta- 

 chromasie verursachenden) schädigenden Einfluß auszuschalten. Verf. 

 geht dann auf die Resultate ein, welche er bei Rhizopoden, Flagel- 

 laten , Diatomeen, Chlorophyceen, Würmern, am Flimmerepithel des 

 Frosches und bei Muskelfasern erhalten hat. Es ergab sich , daß 

 die Methode in der Tat geeignet war, einen Unterschied zwischen 

 der Farbenauswahl der toten und lebenden Substanz festzustellen. 

 Verf. hat dann weiter untersucht, wie sich konserviertes Material 

 seinem Verfahren gegenüber verhielt. Es wird dieserhalb auf das 

 Original verwiesen. Das lebende Protoplasma färbt sich bei der 

 Methode des Verf. rot, das tote blau. Verf. hält sich für berechtigt 

 anzunehmen, daß diese rote Färbung einer tatsächlichen vitalen Reak- 

 tion gleichkommt. Er sucht dann eine Erklärung zu finden für die 

 von ihm festgestellten färberischen Unterschiede zwischen lebendem 

 und totem Protoplasma. Es muß wegen des Nähereh auf das Original 

 verwiesen werden. Er kommt zu dem Schlüsse , daß die von ihm 

 beobachteten Färbeerscheinungen auf chemische Beziehungen zwischen 

 dem Protoplasma und den angewandten Farbstoften zurückzuführen 

 sind. Diese Beziehungen konnten so weit verfolgt werden, daß durch 

 die Supposition von zwei verschiedenen reduktionsfähigen Gruppen 

 im Protoplasma die Resultate am leichtesten erklärt werden konnten. 

 Wenn wir diese supponierten Gruppen des Eiweißmoleküls kennen 

 würden, so würden wir auch imstande sein, den chemischen Unter- 

 schied zwischen dem lebenden und toten Protoplasma zu präzisieren. 




550 Referate. XXII, 4. 



Hierübei" lassen sich aber vorläufig noch keine Vermutungen auf- 

 stellen. Schiefferdecker {Bonn). 



Schridde, H., Beiträge zur Lehre von den Zeilkörne - 

 lungen. Die Körueluugen der Plasmazellen 

 (Anat. Hefte, H. 85, 86 [Bd. XXV'III, H. 2, 3], 1905, 

 p. 691—768 m. 1 Tfl.). 

 Verf. unterzieht zuerst die Altmann sehe Methode einer Be- 

 sprechung, berichtet über seine Versuche, mit andern Fixierimgen 

 die gleichen Resultate zu erhalten und veröffentlicht dann eine von 

 ihm angewendete Fixierungs- undBeizungsmethode, die sich im wesent- 

 lichen auf den Altmann sehen Prinzipien aufbaut, sich aber durch 

 Vermeidung der Nachteile dieser Methode imd durch Einfachheit und 

 Billigkeit von dieser unterscheidet. Die nach der Altmann sehen 

 Methode fixierten Stücke werden nach Einbettung in einem Paraffin 

 von 58*^ Schmelzpunkt in Schnitte zerlegt, die nicht dicker als 2 /i 

 sein sollen und dann auf eine von Metzner angegebene Weise ge- 

 färbt (Anilinwasser - Säiirefuchsin , differenzieren mit Pikrinalkohol). 

 Ist die Färbung in der richtigen Weise gelungen, so treten die 

 Granula, welche überhaupt mit dieser Methode erreichbar sind, durch 

 ihren spezifisch roten Ton scharf gefärbt hervor, während die übrigen 

 Teile keinen oder nur einen graugelblichen Farbenton zeigen. Die 

 Altmann sehe Methode hat nun die folgenden Nachteile: 1) Ist es 

 sehr schwer, ohne Schädigung der einzelnen Gewebsbestandteile von 

 frischen Organen so kleine Stückchen zu gewinnen, wie sie die 

 Methode erfordert (1 — 2 mm dick). Es lassen sich hierbei Zerrungen 

 und Quetschungen nicht vermeiden. 2) Bringt die bei der Färbung 

 angewandte Erwärmung auch bei längerer Übung doch häufig störende 

 Veränderungen und falsche Bilder hervor. Wollte man diese Nach- 

 teile verbessern , so mußte man vor allem eine Fixierungsflüssigkeit 

 nehmen , die sowohl in bezug auf die Schnelligkeit des Eindringens 

 in die Gewebe , wie auch in bezug auf die einwandfreie Fixierung 

 der einzelnen Elemente den höchsten Anforderungen entsprach. Man 

 durfte daher auf keinen Fall ein Osmiumsäuregemisch nehmen, da 

 ein solches nur wenig und langsam eindringt. Verf. hat daher als 

 Fixierungsflüssigkeit Formol-MtJLLER gewählt und nachträglich osmiert. 

 Die Methode ist so die folgende: 1) Fixierung in Formol - Müller 

 (1:9); 2) gründliches Auswaschen in fließendem Wasser; 3) 6stün- 

 diges Verweilen in destilliertem Wasser; 4) Einlegen auf 24 Stunden 

 in eine einprozentige Osmiumlösung bei Lichtabschluß ; 5) gründliches 




XXII, 4. Referate. 551 



Auswascheu in fließendem Wasser ; 6) steigender Alkohol (50prozentig 

 bis absolut) ; 7) Alkohol-Chloroform, Chloroform (6 und 7 im Dunklen) ; 

 8) Chloroform - Paraffin , Paraffin 58 o. Von diesen Paraffiublöcken 

 werden Schnitte von 1 bis 2 /^ Dicke angefertigt und auf einen mit 

 einer sehr dünnen Lage von Eiweißglyzerin versehenen Objektträger 

 entweder direkt oder mit Hilfe von erwärmtem Wasser aufgeklebt. 

 Die Färbung kann entweder mit der Altmann scheu Methode durch 

 Erwärmung oder auf kaltem Wege geschehen. Nach seineu Ver- 

 suchen empfiehlt Verf. die Objektträger mit den Präparaten aus 

 85prozentigem Alkohol heraus 2 bis 24 Stunden in die Anilinwasser- 

 Säurefuchsinlösung senkrecht zu stellen. Diese Lösung wird in folgen 

 der Weise hergestellt : Zu 100 cc einer kalt gesättigten und filtrierten 

 Lösung von Anilin in destilliertem Wasser . setzt man 20 g Säure- 

 fuchsin und filtriert. Dann diiferenziert man in Pikrinalkohol. Am 

 sichersten verfährt mau, wenn man die von Metzner ungegebene 

 Lösung II verwendet, die aus einem Teile gesättigter, alkoholischer 

 Pikrinsäurelösung und 7 Teilen 20prozentigen Alkohols besteht. Von 

 dieser gießt man etwas auf den Objektträger und wiegt das Präparat 

 hin und her ; man gießt so lange Pikrinalkohol nach und differenziert, 

 bis die Schnitte einen hellgelblichroten Farbenton bekommen. Das 

 Eesultat soll eine vorzügliche Darstellung der Zeilkörnelungen sein, 

 wobei die Körner der verschiedeneu Zellen in einem voneinander so 

 abweichenden und charakteristischen Farbentone erscheinen, daß auch 

 für den weniger Geübten die Unterscheidung der Zellen nach der 

 Färbung der Körner sehr leicht fällt. So färben sich die Körner 

 der Belegzellen violettrot, die der Hauptzellen rotbraun, die der 

 eosinophilen Zellen schwarzrot, die der Plasmazellen ziegelrot, die 

 der neutrophilen Leukocyten bräunlichrot, während die der Mastzellen 

 kein Rot aufweisen, sondern einen grauschwarzen Ton besitzen. — 

 Ganz die gleichen Resultate erhält man, wenn man Paraffinschnitte, 

 die von Präparaten aus MüixER-Formol herstammen. (natürlich lebens- 

 warm fixiert) 2 Stunden oder länger in einprozentige Osmiumsäure 

 stellt, dann kurz in destilliertem Wasser abspült und in der an- 

 gegebenen Weise färbt. Dieses Verfahren ist insofern noch vorteil- 

 hafter, als mau an den Schnitten des gleichen Blockes außer der 

 Färbung der in Rede stehenden Körnelung auch jede andere Zell- 

 körnelung mit jeder Farbe darstellen kann, während an osmierten 

 Präparaten die Färbung mehr oder weniger schwierig ist. — Auch 

 in einfacher Formollösung (1 Teil Formol, 9 Teile Wasser) lebeus- 

 frisch fixierte Präparate geben nach der Doppelbeizung mit Kalium 




552 Referate. XXII, 4. 



bichromat (12 bis 24 Stunden bei 30*^) imd Osmiumsäure ganz die 

 gleichen Resultate. Will man indessen von vornherein die Organ- 

 stücke zum Studium der Zeilkörnelungen verwenden, so ist die erste 

 Methode die sicherste und beste , da hier die Details am feinsten 

 und deutlichsten herauskommen. Über die Theorie der Vorgänge bei 

 diesen Fixierungsmethoden sagt Verf. das Folgende. Die Fixierung 

 geschieht durch das Formol -Kaliumbichromatgemisch; beide Stoffe 

 können zu den besten Fixierungsmitteln gerechnet werden, und be- 

 wirken beide eine homogene Gerinnung mit bester Formerhaltung. 

 Das Kaliumbichromat, das nach Tellyesniczky als ein Plasmakonser- 

 vierer bester Art bezeichnet werden muß, wirkt außerdem als Beize 

 und wird hierin durch die nachfolgende Osmiumsäure unterstützt. 

 Durch diese letztere wird eine Veränderung in keiner Weise hervor- 

 gerufen. Bei der nun folgenden Färbung mit Anilinwasser -Säure- 

 fuchsin wirkt das Osmium einesteils oxydierend auf das Anilin und 

 gibt so durch die Bildung von Anilinschwarz die üntertönung, ander- 

 seits stellt es auch ein Fixierungsmittel des Farbstoffes dar. Die 

 Affinität der Zeilkörnelungen gegenüber dem Säurefuchsin wird da- 

 durch erhöht, daß sich die basischen Eigenschaften des Anilinschwarz 

 zu den in den Körnelungen schon vorhandenen hinzuaddieren. — 

 Verf. hat dann weiter durch vergleichende Untersuchungen mit ver- 

 schiedenen andern Methoden festzustellen versucht, ob die durch die 

 oben angegebene Methode erzielten Resultate uns ein richtiges Bild 

 der wirklichen Verhältnisse geben, oder ob sie eventuell als Kunst- 

 produkt anzusehen sind. Er entscheidet sich für das erstere : Ein 

 wahrheitsgetreues Spiegelbild des natürlichen Aufbaues der Zelle, so 

 weit das überhaupt mit den uns zu Gebote stehenden Mitteln mög- 

 lich ist. Schiefferdecker {Bonn). 



Degen , A. , Untersuchungen über die kontraktile Va- 

 kuole und die Wabenstruktur des Protoplasmas 

 (Botan. Zeitg. Bd. LXIII, 1905, p. 163). 

 Von großem Interesse für den Mikroskopiker ist der Nachweis, 

 daß Schaumstrukturen, wie sie von Bütschli beschrieben worden 

 sind, sich an Objekten der verschiedensten Art — Protozoen, Bak- 

 terien, Pilzhyphen, Wurzelspitzen, Wurzelhaaren, Brennhaaren etc. — 

 durch Behandlung mit bestimmten Reagentien hervorrufen lassen. Als 

 Wabenbildner ersten Ranges haben die Basen zu gelten : 



Kalilauge bei 001 Prozent 



Natronlauge 0-02 „ 




XXII, 4. Referate. 553 



Amraoniumhydroxycl 0"02 Prozent 



Calciumliydroxyd 0-02 „ 



Baryumhydroxyd O'Oö „ 



Kaliumkarbunat O'l bis 0"05 „ 



Natriumkarbonat 0-1 „ 005 



» 



geben schöne Wabenbilder. Besonders deutlich werden die Schäume, 

 wenn man die Alkalien mit Wasser auswäscht. Tannin und Säuren 

 (Essig-, Salz-, Salpeter-, Schwefelsäure) geben weder vor noch nach 

 dem Auswaschen mit Wasser Waben, sondern erst bei nachfolgender 

 Behandlung mit Alkali. Verf. nimmt an, daß durch Behandlung mit 

 diesem im Plasma kleine Mengen von Niederschlägen entstehen, die 

 sich dann wieder lösen und die Bildung zahlreicher kleiner Lösungs- 

 vakuolen hervorrufen. — Von Interesse ist, daß dieselben Schaum- 

 strukturen auch durch Deckglasdruck und bei Behandlung mit hypo- 

 tonischen Lösungen (Übertragen der Objekte aus der Kulturflüssigkeit 

 in reinfcs Wasser) erzielt werden können. In beiden Fällen liegt 

 vielleicht eine Entmischung im Protoplasma vor — bedingt durch 

 allzu reichliche Wasseraufnahme. 



Sehr ausführlich äußert sich Verf. über die Fixierung wabigen 

 Protoplasmas (Untersuchungen an Glaucoma colpidium). Besonders 

 wirksam sind Osmiumsäure , wässerige Sublimatlösung und Formal- 

 dehyd. Osmiumsäure kam in einprozentiger Lösung zur Anwendung, 

 doch genügen oftenbar auch noch viel schwächere Konzentrationen. 

 Osmiumsäure „gelatiniert die Objekte, was besonders für die Konser- 

 vierung unwabiger Protoplasten von Vorteil ist , indem eine stark 

 körnige oder gerüstige Fällung , wie sie z. B. Platinchlorid , Jod, 

 Pikrinsäure imd Pikriuschwefelsäure , überhaupt die meisten andern 

 Fixierungsmittel hervorbringen, leicht den Eindruck einer Waben- 

 struktur erzeugen kann. Es empfiehlt sich jedoch mit einprozentigem 

 Platinchlorid nachzufixiereu , was keine Nachteile bringt , aber die 

 Fällungen haltbarer macht." — Sublimat in Tprozentiger Lösung 

 fixiert gut, aber außerordentlich stark körnig; dieser Übelstand tritt 

 bei Anwendung ein- oder 2prozentiger Lösung weniger hervor. 

 Formaldehyd ist besonders in 2prozentiger Lösung sehr leistungs- 

 fähig. Empfehlenswert sind auch die osmiumsäurehaltigen Fixierungs- 

 gemische. — Die Angaben des Verf. über wenig geeignete Fixierungs- 

 flüssigkeiten sind im Original (p. 203) nachzulesen. 



Zur Färbung empfiehlt sich nach Verf. Säurefuchsin -Lichtgrün, 

 mit dem sich das Plasmagerüst gut färbt. 



Beim Entwässern wurden die .Tiere in Alkohol verschiedener 




554 Referate. XXII, 4. 



Konzentration — von 5 zu 5 Prozent ansteigend in absoluten über- 

 tragen , wobei die Zentrifuge gute Dienste leistet. Aus Alkohol 

 absolutus überträgt man direkt in venezianischen Terpentin — oder 

 nach zwei vermittelnden Alkohol - Xylolkonzentrationen und reinem 

 Xylol in Kanadabalsam. Küster {Halle a. 8.). 



3. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. 



A, Wirheitiere. 



Liebreich, 0., tlber Blutkörperchenzählung mit dem 

 TnoMA-ZEissschen Apparat (Physiol. Ges. Berlin, 

 Sitzung 24. Febr. 1905; Ref. in Arch. f. Anat, u. Physiol. 

 1905, Physiol. Abt., H. 3, 4, p. 385—389). 

 Verf. hebt hervor, daß mittels des Thoma-Zeiss sehen Blut- 

 körperchenzählapparates mit Sicherheit festgestellt worden ist, daß 

 eine Vermehrung der Blutkörperchen beim Aufstieg zu einem hoch 

 gelegenen Orte sofort eintritt und ebenso ein Herabsinken der ur- 

 sprünglichen Zahl unmittelbar nach der Rückkunft in die Ebene. Er 

 bespricht die Versuche, diese Beobachtungen durch irgendwelche mit 

 dem Apparate verbundene Fehlerquellen zu erklären und stellt eine 

 neue Theorie auf, welche sich auf die Veränderlichkeit der Schwer- 

 kraft in verschiedener Höhe und an verschiedenen Stellen der Erdober- 

 fläche in gleicher Höhe gründet. Diese Verschiedenheiten der Schwer- 

 kraft wirken durch die Oberflächenspannung wieder auf die Verteilung 

 der Blutkörperchen in dem Apparate ein. Wegen des Näheren der 

 sehr interessanten Ausführungen muß auf das Original verwiesen 

 werden. Schiefferdecker {Bonn). 



Bürker , K. , Notiz über eine neue Form der Zähl- 

 kammer (Münchn. med. Wochenschr., Jahrg. LH, No. 19, 

 p. 912). 

 Verf. stellt zuerst die Mängel der Thoma-Zeiss sehen Zählkammer 

 kurz zusammen: 1) Die Schwierigkeit tadelloser Zusammensetzung 

 der Kammer ; 2) Die leicht eintretende ungleichmäßige Verteilung 

 der Blutkörperchen auf der Zählfläche ; 3) Die Abhängigkeit der 

 Zählkammer vom Luftdruck, wenn dieser sich plötzlich verändert; 




XXII, 4. Referate. 555 



4) Es macht das Zählnetz mir einen kleinen Bruchteil (etwa ein 

 Fünfzigstel) der gesamten Zählfläche aus. Eine neue Zählkammer, 

 auf welche schon in einer Arbeit von E. Meissen^ hingewiesen worden 

 ist, vermeidet diese Mängel: Den ersten dadurch, daß das Deckglas 

 schon vor dem Einbringen der Blutmischung aufgelegt wird, wodurch 

 sich in aller Kühe Newton sehe Streifen sogar 0. bis 1. Ordnung 

 erzeugen lassen, dabei haftet das Deckglas fest. Der zweite Fehler 

 wird dadurch beseitigt, daß die Blutmischung durch Kapillarität nahezu 

 momentan in den Zählraum eindringt, wodurch auch eine sehr gleich- 

 mäßige Verteilung der Blutkörperchen aut der Zählfläche zustande 

 kommt. Der dritte Mangel, die Abhängigkeit der Zählkammer vom 

 Luftdruck, kommt nicht mehr in Betracht, weil die Zählkammer an 

 zwei Seiten völlig offen, also mehr Schlitzkammer ist als die Meis- 

 SENSche Kammer. Der vierte Fehler wird dadurch vermieden, daß 

 entweder überhaupt kein Zählnetz eingegraben ist, oder daß dieses 

 9 Quadratraillimeter statt 1 Quadratmillimeter, wie in der alten 

 Kammer, beträgt. Die neue Zählkammer wird in zwei Formen geliefert: 

 Bei der einen ist ein Zählnetz überhaupt nicht eingegraben, der 

 Zählraum wird bei dieser Form vielmehr durch entsprechende Blenden 

 im Okular abgegrenzt, welche mit Hilfe eines beigegebenen Objekt- 

 mikrometers ausgewertet werden können. Diese Form ist für sehr 

 genaue Zählungen bestimmt. Für den Praktiker eignet sich besser 

 die zweite Form, mit dem Zählnetz, welches sowohl zur Zählung 

 roter wie weißer Blutkörperchen benutzt werden kann. Die neue 

 Kammer ist viel leichter zusammen zu setzen als die alte; die 

 Zählungen werden "bei der viel gleichmäßigeren Verteilung der Blut- 

 körperchen auf der Zählfläche genauer. Statt 200 Quadrate und 

 mehr, wie bei der alten Kammer, braucht man bei der neuen nur 

 80 durchzuzählen, um einen gut verwendbaren Mittelwert zu erhalten. 

 Dazu kommt noch, daß bei ein und derselben Deckglasauflage zwei 

 Zählungen vorgenommen werden können, weil die Zählfläche in zwei 

 getrennte Abschnitte geschieden ist. Die .Firma C. Zeiss in Jena 

 liefert beide Formen der Zählkammer. Schiefferdecker {Bonn). 



Myers, B. D., Fixation of tissues by injection into the 

 arteries (Johns Hopkins Hosp. Bull. vol. XVI, 1905, no. 167, 

 6 pp. w. 1 flg.). 

 Verf. rühmt die gute Wirkung der von Mc Farland angegebenen 



1) Vgl. Münehn. med. Wochenschr. 1905, No. 12, p, 655. 




556 Referate. XXII, 4. 



Inj ektionsm etil ocle. Immerhin ist die Vorrichtung für dieselbe etwas 

 umständlich und erlaubt keine ganz genaue Abmessung des Druckes. 

 Außerdem ist die Methode mehr für billigere Injektionsmassen zu 

 benutzen. Verf. beschreibt nun eine Vorrichtung, bei welcher der 

 Druck geliefert wird von einem Wasserluftdruckapparat. Dieser trägt 

 ein Rohr , welches sich T-förmig teilt : Der eine Schenkel geht zu 

 einem Quecksilbermanometer hin, der andere mündet durch einen 

 durchbohrten Stopfen in die obere Öffnung einer Flasche, aus deren 

 unterem Ende der Injektiousschlauch abtritt. Man füllt die Flasche 

 zuerst mit der erwärmten physiologischen Kochsalzlösung, spült das 

 Gefäßsystem des Tieres mit dieser durch, entleert dann die Flasche 

 und gießt die ebenfalls erwärmte Injektionsmasse hinein. Es ist nicht 

 immer nötig das Gefäßsystem zuerst auszuwaschen, doch wird die 

 Fixierung im allgemeinen besser, wenn es geschieht ; bei Anwendung 

 von Sublimat macht es nicht viel aus, bei Formol und Hermann scher 

 Flüssigkeit dagegen ist es für eine gute Fixierung vorteilhaft. Als 

 beste Fixierungsmittel erwiesen sich Sublimat, Formol, Hermann sehe 

 Flüssigkeit und Alkohol. Sckiefferdecker {Bonn). 



Meves, F., Über die Wirkung von Ammoniakdämpfen 

 auf die roten Blutkörperchen von Amphibien 

 (Anat. Anz. Bd. XXVII, 1905, No. 8, 9, p. 177 — 186 m. 

 17 Abb.). 

 Um über den Konzeutrationsgrad des augewendeten Ammoniak 

 genauere Angaben machen zu können, ist Verf. in der Weise ver- 

 fahren, daß er die käufliche konzentrierte Ammoniaklösung (mit etwa 

 25prozentigem Ammoniak) in bestimmtem Verhältnisse mit Wasser 

 verdünnte und den Dampf, der aus einer abgemessenen Menge der 

 Mischung aufstieg, auf die Blutkörperchen wirken ließ. Er gab jedes- 

 mal 6 Tropfen der Mischung in eine Böttcher sehe feuchte Kammer, 

 welche aus einem 5 mm hohen, dickwandigen Glasringe bestand 

 (innerer Durchmesser 18 mm), der auf einem Objektträger aufgekittet 

 war und oben mit Hilfe von Vaselin durch ein Deckglas geschlossen 

 wurde, an dessen untere Seite das Blut gebracht war. Die Unter- 

 suchungen wurden ausgeführt an dem Blute vom Frosch (Rana 

 esculenta) und Feuersalamander (Salamandra maculosa). Der Am- 

 moniakdampf übte eine höchst eigenartige Wirkung auf den Rand- 

 reifen der roten Blutkörperchen, besonders des Salamanders aus. 

 1) Salamander. Setzt man rote Blutkörperchen den Dämpfen 

 aus, welche von einigen Tropfen einer Mischung von einem Teil 




XXII, 4. Referate. 557 



Ammoniak und 20 bis 40 Teilen Wasser aufsteigen, so wickeln sich 

 die beiden Längshälften des Randreifens spiralig umeinander. Bringt 

 man in die feuchte Kammer eine stärkere Ammoniakmischung (1 Teil 

 Ammoniaklösung auf 6 bis 10 Teile Wasser), so bleibt die Zusammeu- 

 drehung des Randreifens zu einem Strange aus. Dagegen tritt, wie 

 auch bei der vorigen Lösung , eine Zuspitzung der Blutscheibe an 

 dem einen Pole ein. Später rundet sich dieser Pol wieder ab und 

 es werden im Innern der Zelle der Randreifen und eine Anzahl 

 glänzender Körner oder Vakuolen sichtbar. Die Dämpfe von einigen 

 Tropfen konzentrierter Ammoniaklösung oder von solcher, die nur 

 mit einem bis 3 Teilen Wasser verdünnt ist, bewirken, daß die roten 

 Blutkörperchen sofort kugelig werden. Im Zellleibe tritt ein reich- 

 licher körniger Niederschlag auf. Der Kern bläht sich auf, noch 

 bevor der Zellleib sein Hämoglobin abgegeben hat. 2) Frosch. 

 Die Erscheinungen sind hier ähnlich , aber nicht so ausgeprägt. — 

 Dieselben Wirkungen , welche man durch Ammoniak dampf erhält, 

 erhält man auch, wenn man Blut und Ammoniak 1 ö s u n g zusammen 

 eindeckt. Zusatz von Kalilauge dagegen ruft solche Erscheinungen 

 nicht hervor. Schiefferdecker {Bonn). 



Takayaina, M., Beiträge zur Toxikologie und gericht- 

 lichen Medizin, nebst einem Vorwort von Prof. 

 Dr. R. KoBERT. 4 Tfln. Stuttgart (Ferdinand Enke) 1905. 



Das vorliegende Buch bringt im wesentlichen neue Untersuchungen 

 über die Chemie des Blutfarbstoftes. Zwei Abschnitte sind auch für 

 Anatomen und Mikroskopiker von großem Interesse ; es sind dies der 

 fünfte und siebente Teil. 



Der fünfte Teil behandelt die Frage , warum die mit Formalin 

 konservierten Leichenorgane beim Eintragen in Alkohol rot werden 

 und hat besonders für die Forscher Bedeutung, die sich mit dem 

 Problem befassen, Museumsstücke in ihren natürlichen Farben nach 

 den Methoden vouJores, Melnikow-Raswedenkow, Kayseuling u. a. zu 

 konservieren. 



Durch eine Reihe von Versuchen wird festgestellt, daß das 

 Formaldehyd, gleichgültig ob es schwach sauer od^r neutral reagiert, 

 auf das geuinne Blut, sowie auf Blutlösungen erst methämoglobin- 

 bildend (bräunend) einwirkt. Durch Mischung dieses Formol-Methämo- 

 globin-Blutes mit Alkohol entsteht nach Verf. nicht, wie von anderer 

 Seite behauptet worden ist , Hämatin, sondern K a t h ä m g 1 o b i n , 

 das ist eine Zwischenstufe zwischen Methämoglobin und Hämatin, und 




558 Referate. XXII, 4. 



bedingt die bei diesem Versuch im Reagenzglas und in den lege artis 

 konservierten, anatomischen Präparaten auftretende rote Farbe. 



Im siebenten Teil teilt der Verf. eine Verbesserung der so- 

 genannten Floeence sehen Spermareaktion mit. Die FLORENCE-Kristalle, 

 die zwar für Sperma durchaus nicht spezifisch sind, sondern auch 

 von Vaginal- und Uterinsekret, faulenden Organen der verschiedensten 

 Art etc. gegeben werden, entstehen nach Verf. am schönsten mit seinem 

 neuen Reagenz: 2prozentige Kaliumjodat- , 2prozentige Jodkalium- 

 lösung ana (erst vor dem Gebrauch mischen oder das fertige Gemisch 

 mit verdünnter Sodalösung schwach alkalisieren). Damit wird das 

 zu untersuchende Objekt behandelt ; dann sehr vorsichtige Ansäuerung, 

 dann Mikroskopieren. Handelt es sich um Sperma, so sieht man hell- 

 braune, ganz regelmäßig erscheinende rhombische Stäbchen, d. h. 

 FLORENCESche Kristalle, in enormen Mengen herausschießen. 



Die zunächst kleineu Kristalle wandeln sich nach einigen Stunden 

 in schöne Kristalle um, welche in bezug auf die Farbe und auf die 

 Kristallform mit Teichmann sehen Häminkristallen fast vollkommen 

 identisch sind. Die Kristallformen sind auf einer Tafel wieder- 

 gegeben. Levij {Halle a. S.). 



Edens, Über Amyloidfärbung und Amyloid degener a- 

 tion (ViRCHOws Arch. Bd. CLXXX, 1905, H. 2, p. 346 

 —359 m. 1 Tfl.). 

 Verf. hebt hervor, daß der Untersuchung der feineren histo- 

 logischen Vorgänge bei der Amyloiddegeneration bisher die Schwierig- 

 keit der Herstellung einwandfrei spezifisch gefärbter und aufgehellter 

 Präparate entgegenstand. Verf. geht dann auf die einzelnen Schwierig- 

 keiten ein und empfiehlt die folgende Methode : Die noch in Paraffin 

 eingeschlossenen Schnitte (5 bis 10 fx dick) werden 24 Stunden in der 

 folgenden salzsauren Methylviolettlösung gefärbt. Man setzt zu 100 cc 

 absoluten Alkohols Methylviolett 5 B (Grübler, Leipzig) im Überschusse 

 hinzu, schüttelt durch, läßt absetzen und filtriert nach 24 Stunden. Mit 

 Hilfe dieser Stammlösung stellt man sich folgende Farbflüssigkeit her : 



Salzsäm-e (spez. Gew. 1-124) l'O 



DestilUertes Wasser bis zu 300-0. 



Dieser Lösung setzt man hinzu : 



Konzentrierte, alkoholische Methylviolettlösung- . . lO'O. 



Nach der Färbung läßt man die Schnitte gerade lufttrocken 

 werden, bringt sie in Xylol zur Entfernung des Paraffins und bettet 




XXII, 4. Referate. 559 



in Kanadabalsam ein. Es wird eine sehr distinkte Kernfärbung er- 

 halten , die im wesentlichen abhängig ist von dem Salzsäiiregehalte 

 der Lösung; bei hohem Gehalte wird die Kernditferenzierung ver- 

 wischt, bei zu geringem Gehalte tritt keine ganz scharfe Metachromasie 

 ein. Innerhalb dieser Grenzen besteht ein ziemlich breiter Spiel- 

 raum für den Salzsäuregehalt. Die oben angegebene Zusammen- 

 setzung der Farbflüssigkeit hat Verf. die besten Resultate ergeben. 

 Die Kerndifferenzierung wird bei Benutzung einer alkoholischen Stamm- 

 lösimg schärfer als bei einer wässerigen. Unter den von Grübler 

 in den Handel gebrachten Methylviolettsorten scheint bei dem an- 

 gegebenen Salzsäuregehalte Methylviolett 5 B am geeignetsten zu sein. 

 — Man kann auch von Paraffin befreite Schnitte färben , nach der 

 Färbung mit Fließpapier trocknen und mit Oleum linaloes aufhellen, 

 dann Einschluß in Kanadabalsam. Die Schönheit der Farben leidet 

 allerdings etwas unter der Einwirkung des Öls , doch bleibt eine 

 scharfe Metachromasie bestehen an gut gefärbten Präparaten. Es 

 ist unnötig, die in der salzsauren Lösung gefärbten Schnitte zu 

 wässern, kurzes Abspülen genügt; bei längerem Wässern leidet die 

 Schönheit der Färbung. Paraffinschnitte in Lävulose eingebettet, 

 nachdem die überschüssige Farblösung durch ein kleines Glasrohr 

 abgeblasen war, und solche in Kanadabalsam haben nach Monaten 

 bis jetzt völlig unveränderte, scharfe Metachromasie gezeigt. Um 

 rasch ein sicheres Urteil über Amyloiddegeneratiou frischer Präparate 

 zu erhalten, genügt es, einen Tropfen der Lösung auf den Schnitt 

 zu bringen, in einer Minute ist die Reaktion da. Man kann jetzt in 

 Lävulose einschließen oder den Schnitt in der Farblösung auflegen, 

 absaugen und umranden. Für den makroskopischen Amyloidnachweis 

 ist die Lösung nicht geeignet. Eine Doppelfärbung, wie die von 

 BiRCH- Hirschfeld angegebene, hält Verf. für unzweckmäßig, da sie 

 die Amyloidreaktion der Kerne verdecken kann. Eine Überfärbung 

 der entparaffinierten oder frischen Schnitte ist auch bei tagelanger 

 Einwirkung der Lösung ausgeschlossen. Ein der Methylviolettfärbung 

 überhaupt anhaftender Mangel, die metachromatische Färbung von 

 Schleim und Knorpel, tritt auch bei der vom Verf. angegebenen 

 Methode ein. Verf. geht näher auf diesen Mangel der Färbung ein, 

 weshalb auf das Original verwiesen wird. Wesentlich ist, daß immer 

 eine frisch hergestellte Lösung benutzt wird, da alte Lösungen selbst 

 in einen roten Farbenton umschlagen und die Präparate diflus rot 

 färben. Schiefferdecker {Bonn). 




560 



Referate. XXII, 4. 



Bllimstein-Judilia, B., Die Pneumatisation des Markes 

 der Vogelknoclien (Anat. Hefte, H. 87, [Bd. XXIX]. 

 1905, p. 1—52 m. 3 Tfln.). 

 Die Untersuchungen wurden ausgeführt an der Taube, und zwar 

 an verschiedenen Knochen derselben, da sich verschiedene Modi- 

 fikationen in den einzehien Fällen ergaben. Die jüngsten Tiere 

 waren 3 Wochen alt; sie werden um diese Zeit ßü^ge und befinden 

 sich gerade in dem Stadium, in welchem die Knochenpneuraatisation 

 im Humerus und Sternum beginnt. Es wurde sorgfältig darauf ge- 

 achtet, daß beim Herausschneiden der Knochen Blut nicht in die 

 Lufträume eindrang. Das Tier wurde durch Dekapitation getötet, 

 die Haut von Brust und Rücken, Schulter, Oberarm und Oberschenkel 

 wurde entfernt, das Schulterblatt vom Paimpfe abgelöst, und es 

 wurde, indem man bei nach oben gewendeter Brustseite des Tieres 

 vorne zu schneiden begann, der ganze für die Lokomotion besonders 

 wichtige Komplex: Flügel, Schultergürtel und Brustbein mit den zu- 

 gehörigen Muskeln, sowie mit Herz und Herzbeutel vom Reste ge- 

 trennt, wobei die Achselarterie sowie die Rippen (letztere ungefähr 

 an der Knickungsstelle) durchtrennt werden mußten. Dabei ent- 

 bluteten die Brustmuskeln in genügender Weise, um bei nachträg- 

 licher Entfernung derselben weder eine Verunreinigung des Humerus 

 noch des Sternums und Coracoides mit Blut befürchten zu lassen. 

 Beim Herausschneiden des Humerus wurde darauf geachtet, daß die 

 um den Porus pneumaticus herum endigenden Muskeln im Niveau 

 der Ränder der dort liegenden Nische möglichst glatt durchschnitten 

 wurden. Wegen der weiteren makroskopischen Manipulationen wird 

 auf das Original verwiesen. Fixiert wurde vorzugsweise mit einer 

 lOprozentigen Formollösung in 90prozentigem Alkohol; entkalkt 

 wurde mit 5prozentiger Salpetersäurelösung. Es ergab sich hierbei 

 als wichtig, schon bei Beginn dieser Prozedur auf irgendeine Weise 

 für möglichste Verdrängung der Luft aus den Knochen zu sorgen. 

 Man kann das auf verschiedene Weise bewirken, besonders durch 

 die Eröffnung größerer Lufthöhlen, so daß beim Untertauchen der 

 Knochen in die Flüssigkeit die Luft in Blasen heraustreten kann. 

 Wenigstens müssen die Knochen bald nach der Entkalkung soviel 

 als möglich zerlegt werden. Dann Auswaschen in destilliertem 

 Wasser, steigender Alkohol, Einbettung in Celloidin oder Paraffin. 

 Letztere Einbettung wird für den Knochen meist als unbrauchbar 

 bezeichnet, für Knochen (auch Humerus, Femur) halbwüchsiger und 

 erwachsener Tauben ergibt sie indessen ganz brauchbare Resultate. 




XXII, 4. Referate. 561 



Verfahren für die Paraffineiubettimg : Die entkalkten Knoclieu 

 müssen möglichst weitgehend zerschnitten sein, am besten in der Rich- 

 tung der gewünschten Schnittebene, z. B. bei Längsschnitten durch den 

 Humerus durch Längsspaltung. Die Objekte kommen dabei aus 

 absolutem (oder auch 95prozentigem) Alkohol in Karbolxylol, nach 

 völliger Aufhellung in Xylol , dann in X3dol - Paraffin (24 Stunden 

 und mehr auf dem Brutofen) , dann in reines Paraffin (6 bis 

 12 Stunden im Brutofen), Wechseln des Paraffins nach einer Viertel- 

 stunde , erstnrren lassen (fingerhoch mit Paraffin bedeckt) , in einem 

 Blechgefäße, das auf kaltem Wasser schwimmt, schneiden, Auf- 

 kleben der Schnitte mit sehr dünner Schicht Strasser scher Klebe- 

 masse (CoUodium duplex und Rizinusöl zu gleichen Teilen) auf 

 reines Glas, Xylol, 90prozentiger Alkohol mit Chloroform, verdünnte 

 Hämalaunlösung, Auswaschen in destilliertem Wasser, 90prozentiger 

 Alkohol, Karbolxylol, dem Kreosoteosin zugesetzt ist, Xylol, Kanada- 

 balsam, Deckglas. Zwischen den letzten Manipulationen , von dem 

 Auswaschen in destilliertem Wasser an, jeweilen Abtrocknen mit 

 Filtrierpapier. Die Schnitte können auch auf Naturpauspapier ge- 

 klebt und in vollständig analoger Weise nachbehandelt werden, bis 

 zum Einlegen der gefärbten Schnitte in Xylol. Eine besondere Vor- 

 behandlung des Papiers , um seine Färbbarkeit herabzusetzen , war 

 nicht nötig. Nach dem Xylol werden die Bänder, mit den Schnitten 

 nach unten , auf Glas gebracht , das mit einer Mischung von einem 

 Volumteil Damarharz (Damarharz 3 und Xylol 2 Teile) mit ^/- Volum- 

 teil gesättigter Guttapercha-Schwefelkohlenstofflösimg dick bestrichen 

 ist. Man läßt daim 24 Stunden am Fenster und 24 Stunden im 

 warmen Ofen trocknen, dann Abziehen des Papierbandes vom Glase 

 auf der heißen Metallplatte , Überstreichen der Schnittseite mit ver- 

 dünnter Harz-Guttaperchalösung, Trocknen auf dem Nagelbrett, Auf- 

 heben zwischen Filtrierpapier. Nachträgliches Abklatschen beliebiger 

 herausgeschnittener Schnitte von der Papierunterlage auf Glas ist 

 jederzeit möglich. Strasser verfährt dabei neuerdings folgender- 

 maßen: Auflösen des Harzes in Xylol oder Chloroform, Abtrocknen 

 des Papierstückes mit Filtrierpapier, Aufkleben der Platte, mit dem 

 Schnitte nach unten, auf den Objektträger, welcher mit einer ziem- 

 lich dickfiüssigen Lösung von Kautschuk in Xylol - Chloroform be- 

 strichen ist. Die Platte muß sorgfältig aufgepreßt werden, so lange 

 die Klebeschicht noch feucht ist. Sofortiges Einlegen in ein Acetonbad. 

 Nach einigen Minuten läßt sich das Papier abziehen, während der 

 Schnitt auf dem Objektträger zurückbleibt. Man nimmt den Objekt- 



Zeitsehr. f. -n-iss. Mikroskopie. XXII, i. 36 




562 Referate. XXII, 4. 



träger aus dem Bade , läßt das Aceton etwas abdimsten und über- 

 gießt mit Kollodium oder überstreicht mit der Strasser sehen Klebe- 

 masse. Einlegen in ein Bad von Karbolxylol und Chloroform für 

 eine Viertelstunde, Kanadabalsam, Deckglas. Verfahren bei 

 der C e 1 1 i d i n e i n b 6 1 1 u n g (nach dem von Strasser besonders 

 für den vorliegenden Zweck ausprobierten Verfahren). Die Knochen 

 müssen möglichst weitgehend zerschnitten sein, so daß das Celloidin 

 in die früher mit Luft erfüllten Höhlen eintreten kann. Aus abso- 

 lutem Alkohol kommen die Stücke in dünnes Celloidin und dann in 

 dickertlüssiges , in welchem sie wochenlang unter Verschluß ver- 

 bleiben. Eingebettet wird in kleiner Photographenschale ; in diese 

 Schale legt man ein Papierkästchen. In dieses kann mau eine 

 Mehrzahl von Objekten, z.B. alle Stücke eines Humerus oder Sternum, 

 nebeneinander in genügenden Abständen hineinlegen, eventuell jedes 

 Stück auf ein mit einer Nummer bezeichnetes Papierchen. Über- 

 gießen mit dickflüssigem Celloidin. Die Schale wird dann nicht 

 ganz luftdicht bedeckt , so daß allmähliche Erstarrung fast ohne 

 Krustenbildung stattfindet. Sobald eine Kruste sich bilden will, oder 

 die Objekte aus der sich zusammenziehenden Masse aufzutauchen 

 beginnen. Nachgießen von Celloidin. Erst wenn alles gleichmäßig 

 durch und durch bis zur Schneidbarkeit erstarrt ist und die Objekte 

 dabei genügend dick bedeckt sind , wird das ganze Papierkästchen 

 mit Inhalt in 85prozentigen Alkohol zur völligen gleichmäßigen Er- 

 härtung gebracht und nach Zerschneiden in Stücke weiter darin be- 

 lassen. Später kann man die Blöcke zurechtschneiden , abtrocknen 

 und mit ganz dickflüssigem Celloidin auf eine Schiefer- oder Stabilit- 

 platte aufkleben. Erstarrenlassen der Klebmasse an der Luft, Wieder- 

 einlegen des Ganzen in 85 prozentigen Alkohol. Zum Schneiden 

 wurde das gewöhnliche Paraffinmikrotom mit Objekttisch (nicht 

 Klammer) und breitem STRASSERSchen Messer und Messerhalter be- 

 nutzt. Die Schieferplatte des Blockes wird unten abgetrocknet und 

 mit heißem Spatel und Paraffin auf den Objekttisch aufgeklebt. 

 Nach wenigen Minuten kann geschnitten werden. Bei Unterbrechung 

 der Arbeit wird das Objekt mit der Stabilitplatte vom Objekttische 

 abgelöst und wieder in Alkohol von 85 Prozent gebracht. Es wurde 

 trocken geschnitten, d. h. ohne wiederholte Befeuchtung des Blockes 

 oder des Messers. Die Weiterbehandlung der auf Glas oder Papier 

 aufgeklebten Celloidinschnitte geschieht ganz so, wie bei den Paraffin- 

 schnitten , nur daß sie zuerst statt in Xylol in Karbolxylol und von 

 da in 90 prozentigen Alkohol kommen. Das Übertragen der Schnitte 




XXII, 4. Referate. 563 



von der Papierimterlage auf eine Glasunterlage kann ganz wie bei 

 Paraffinschnitten gescliehen. Es gibt für Cello Tdinschnitte 

 ein noch einfacheres A b k 1 a t s c h v e r f a h r e u : Man entfernt 

 im Xylolbade das Harz , trocknet die Platte gut ab und klebt sie, 

 den Schnitt nach unten, auf den mit Strasser scher Klebemasse be- 

 strichenen Objektträger. Das Ganze kommt sofort in ein Bad von 

 Karbolxylol. Nach Erstarrung der Klebeschicht trocknet man wieder 

 ab und bringt nun den Objektträger ins Acetonbad , aber nur für 

 eine halbe , längstens für eine Minute. Man kann jetzt das Papier 

 vom Schnitte abziehen , läßt abdunsten , überstreicht allenfalls noch 

 mit Klebemasse und bringt den Objektträger auf einige Zeit ins 

 Karbolxylolbad. Xylol, Kanadabalsam, Deckglas. Wie Verf. hervor- 

 hebt, hat sich selbst für die relativ kleinen Objekte, mit denen sie 

 arbeitete , bei denen sofortiges Montieren aller Schnitte auf Glas 

 sich allenfalls durchführen läßt , das Aufkleben der Schnitte auf 

 Papier doch als ein besonderer Vorteil erwiesen, und zwar ganz be- 

 sonders im Anfange der Arbeit , bis die besonders wichtigen und 

 brauchbaren Färbungen, Schnittführungen, die günstigen Objekte und 

 Objektstellen gefunden sind, und bis die erste topographische Über- 

 sicht gewonnen ist. Handelt es sich dann weiter aber um die feine 

 histologische Untersuchung bestimmter, bekannter, eigens ausgesuchter 

 Objekte und Objektstellen mit erprobten Färbungsmethoden , dann 

 werden mit Vorteil von vornherein alle Schnitte direkt auf Glas 

 montiert. Schiefferdecker (Bonn). 



Donaggio, A., Cblorazione positiva delle fibre nervöse 

 nella fase iniziale della degenerazione prima- 

 ria e secondaria, sistematica or diffusa del 

 sistema nervoso centrale (Riv. Sperim. di Freniatr. 

 t. XXX, fasc. 1). 

 Lugiato, L., Degenerazionisecondarie spe-rimentali [da 

 strappo dello sciatico] st u diäte col metodo di 

 DoNAGGio per le degenerazioni — prima e se- 

 conda note (Riv. Sperim. di Freniatr. t. XXX, p. 135. 

 Beide Arbeiten ref. n. Ref. in Neurol. Zentralbl. Jahrg. XXIV, 

 1905, No. 11, p. 522—523). 

 DoNAGGio hat die empirisch gefundene Tatsache, daß degenerie- 

 rende Fasern nach intensiver Färbung weit resistender gegen alle 

 Prozesse der Entfärbung sind, benutzt, um eine neue Methode auf- 

 zustellen, die scheinbar recht gute Resultate geliefert hat. Die in 



36* 




564 Referate, XXII, 4. 



Chromsalzen gehärteten Stücke werden in wässeriger Hämatoxylin- 

 lösung gefärbt, mit einem Metallsalze (am besten mit ammoniakalischem 

 Zinncblorür) gebeizt und nach Pal differenziert. Beizung und Diiferen- 

 zierung können gleichzeitig- vorgenommen werden, wenn man nach 

 der Färbung mit Hämatoxylin die Schnitte in eine 10- bis 20pro- 

 zentige Eisenchloridlösung bringt (Modifikation III des Verf.). Die 

 Methode soll folgende Vorzüge besitzen : 1) Gibt sie schon dann 

 Resultate, wenn die MARcm-Methode noch versagt; 2) ist sie eine 

 positive Methode ; 3) ist sie die einzige Methode, die Veränderungen 

 an den Nervenfasern zeigt, die einer langsamen Atrophie unterliegen, 

 also keinen Zerfall zeigen ; ein Prozeß , den mau als Wirkung ge- 

 wisser Intoxikationen auftreten sieht ; die Atrophie sieht Verf. als 

 das erste Stadium der primären Degeneration an ; 4) ist die Methode 

 auch bei Material anwendbar , das monatelang in Chromsalzen ge- 

 härtet worden ist. 



LuGiATO hat die eben beschriebene Methode von Donaggio an 

 Kaninchen geprüft, denen der Ischiadicus der einen Seite heraus- 

 gerissen war. Er kommt zu dem Resultate, daß die neue Methode 

 bereits 32 Stunden nach der Operation deutliche positive Resultate 

 ergibt, während die Marchi - Methode erst nach 72 Stunden Ver- 

 änderungen erkennen läßt. Bis zum 30. Tage nach der Operation 

 liefern beide Methoden identische Bilder; von da ab wird der Wert 

 der DoNAGGioschen Methode geringer, während die MARCHi-Methode 

 bis zum 90. Tage gute Resultate liefert. Schi e ff er decke r (Bonn). 



SchaiFer , K. , N e u r o f i b r i 1 1 e n p r ä p a r a t e nach der B i e l - 

 s c H o w s K y s c h e n Methode (Psychiatrisch - neurologische 

 Sektion d. königl. Ärztevereins Budapest, Sitz. 16. Jan. 1905, 

 Ref. in Neurol. Zentralbl. Jahrg. XXIV, 1905, No. 12, 

 p. 588—589). 

 Die Methode ist nach Verf. nicht nur bei normalem, sondern, 

 was sie besonders wertvoll macht, auch bei krankhaft verändertem 

 Materiale ausgezeichnet brauchbar, wodurch sie der im übrigen vor- 

 züglichen Fibrillenmethode von Ramon y Cajal, welche nur eine be- 

 stimmte gürtelartige Partie des Präparates imprägniert, überlegen 

 ist. Die Imprägnation erscheint voller , wenn man statt der von 

 BiELSCHOwsKY vorgeschricbeüen 2prozentigeu Silbernitratlösung eine 

 4prozentige benutzt und die Schnitte nicht 24, sondern 48 Stunden 

 lang in der Flüssigkeit beläßt.». Schiefferdecker {Bonn). 




XXII, 4. Referate. 565 



Dogiel, A. S. , Der fibrilläre Bau der Nervenend- 

 apparate in der Haut des Menschen und der 

 Säugetiere und die Neuronentheorie (Anat. Anz. 

 Bd. XXVII, 1905, No. 4, 5, p. 97—118, ni. 3 Tfln.). 

 Es ist dem Verf. gelungen , mit der Silbermethode die Endi- 

 gung der Neurofibrillen in den im Epithel gelegenen Tastscheiben, 

 in den typischen und modifizierten Vater-Pacini sehen Körperchen, 

 in den typischen und modifizierten Meissner sehen Körperchen und 

 schließlich in den „papillären Büscheln" von Ruffini genau zu stu- 

 dieren. Als Material diente die Haut der Finger- und Zehenkuppen 

 vom Menschen , die von Haaren befreiten Hautteile der Finger und 

 Zehen der Katze, sowie das Mesenterium der letzteren. P^ine hin- 

 reichende Färbung der Neurofibrillen in diesen Nervenendapparateu 

 bei der Bearbeitung der Haut mit Silber nach dem Verfahren von 

 Ramön y Cajal wird nur dann erhalten, wenn das Material vollkommen 

 frisch ist. Von den verschiedenen von Cajal angegebenen Verfahren 

 eignet sich für diesen Zweck am besten das von ihm in der Arbeit 

 „Un sencillo metodo de coloracion selectiva del reticulo protoplasmico 

 etc." (Trab. Labor. Investig. Biol. Univ. Madrid, t. 2, 1903 fasc. 4) 

 beschriebene. Verf. verwendete gewöhnlich eine ein- bis 2 prozentige 

 Lösung von salpetersaurem Silber , in der kleine Hautstückchen bei 

 34 bis 36^ C. 3 bis 5 Tage verblieben, worauf dieselben nach 

 raschem Auswaschen in destilliertem Wasser in das reduzierende 

 Gemisch von Formol und Pyrogallol für einen bis 2 Tage übertragen 

 wurden. Dann abermaliges kurzes AusspiUen in destilliertem Wasser, 

 Härtung in absoluleiu Alkohol, Celloidineinbettung. 



Schiefferdecker (Bonn). 



(xOldstein , K. , Untersuchungen über das V o r d e r h i r n 

 und Zwischeuhirn einiger Knochenfische [nebst 

 einigen Beiträgen über Mittelhirn und Klein- 

 hirn derselben]. (Arcli. f. mikrosk. Anat. Bd. LXVI, 

 1905, p. 135 — 219 m. 23 Fig. u. 5 Tfln.). 

 Außer der Degenerationsmethode, die nur selten befriedigende 

 Resultate gab und der WEiGERTSchen Markscheidenfärbung kamen 

 noch eine Reihe anderer Methoden zur Anwendung, so Färbung der 

 Fasern mit Osmium. Sie zeigt viel reichhaltigere Fasermassen als 

 die WEiGERTSche Methode, läßt aber bei stärkerer Vergrößerung 

 und besonders in Faserfilzen weg^n der starken Körnung keine 

 sicheren Schlüsse zu. Weiter kam zur Verwendung Silberimprägnation 




566 Referate. XXII, 4. 



der Achseuzylincler nach Ramon y Cajal (Fixierung- in Ammoniak- 

 alkohol ; Beliandlung mit Sibernitrat, Reduktion mit Hydrocbiuon). Die 

 Resultate waren äußerst zufriedenstellend. Die Vorzüge der Methode 

 gegenüber der WEiGERTSchen bestehen darin, daß sie einerseits auch 

 die marklosen Fasern zur Anschauung bringt, anderseits neben den 

 Fasern auch die Zellen färbt, so daß man die Faserzüge viel deut- 

 licher bis in ihre Kerne verfolgen kann. Ein Nachteil der Methode 

 liegt jedoch zweifellos in der großen Fülle des Gefärbten, die be- 

 sonders die Abgrenzung der größeren Systeme, die bei der Weigert- 

 schen Färbung so gut zum Ausdruck kommen, erschwert. Schließ- 

 lich wurden noch Zellfärbungen mit Thionin nach Nissl und mit 

 Alaunkocheuille nach Fixation in Zenker scher Flüssigkeit gemacht. 



E. Schoehel {Neapel). 



Berliner, K., lieiträge zur Histologie und Entwick- 

 lungsgeschichte des Kleinhirns, nebst Be- 

 merkungen über die Entwicklung der Funk- 

 tionstüchtigkeit derselben (Arch. f. mikrosk. Anat. 

 Bd. LXVI, 1905, p. 220—269 m. 19 Figg. u. 1 TU.). 

 Der erste Teil der Arbeit ist den von Denissenko als Eosin- 

 zellen bezeichneten Gebilden der Körnerschicht des Kleinhirns ge- 

 widmet. Was die Technik der diesbezüglichen Untersuchungen be- 

 trifft, so lieferten zur Fixierung Alkohol, ZENKERsche Flüssigkeit, 

 Pikrinsublimatlösung, Chromoxalsäure nach Graf, 5prozeutige Lösung 

 von doppelt chromsaurem Kali, Müller sehe Flüssigkeit, das Erlicki- 

 sche Gemisch und Formol brauchbare und prinzipiell übereinstimmende 

 Resultate ; allerdings erwies sich das letztgenannte Reagens nicht 

 immer als zuverlässig. Das hauptsächlichste Charakteristikum für 

 das Verhalten der eosinophilen Körper bei der Färbung ist die aus- 

 gesprochene Affinität zu sauren Farbstoffen : Eosin , Bleu de Lyon, 

 Orange G, Rubin S, sowie zu besonderen Farbgemischen, wie z. B. 

 dem von Mallory angegebenen phosphor-wolframsaurem Plämatoxylin. 

 Für die Doppelfärbung mit Eosin und polychromem Methylenblau 

 nach Unna erwies sich folgendes Vorgehen als bestes : Fixierung in 

 Zenker scher Flüssigkeit, Paraftineinbettung , Färbung erst etwa 

 15 Minuten in einer konzentrierten wässerigen Eosinlösung und dann 

 6 bis 12 Stunden bis zur Durchsichtigkeit (ca. 1 : 50) verdünnten 

 Lösung von Unnas polychromem Methylenblau, schließlich Differen- 

 zierung in 96prozentigem Alkohol bis das Präparat eine rotviolette 

 Farbe zeigt. E. Schoehel {Neapel). 




XXII, 4 Referate. 567 



Porta, A., 1^ i c e r c h e a n a t o m i c h e s u 11 ' a p }) a r e c c li i o v e I e - 

 nifero di alciini pesci (Anat. Anz. Bd. XXVI, 1905, 

 No. 9, 10, p. 232—247 c. 2 tavv.). 

 Es wurde eine Anzahl verschiedener Arten von Phigiostomen 

 und Teleostiern untersucht. Zur Fixation wurden verwandt: Subli- 

 mat in gesättigter, wässeriger Lösung, alkoholische Subliniatlösung 

 mit Eisessig, Pikrinsäure und Chromsäure. Entkalkt wurde mit 2pro- 

 zentiger Chromsäurelösung und mit der Methode von Rousseau: Die 

 fixierten und gut in Celloidin eingebetteten Stücke kommen in 90prozen- 

 tigen Alkohol, dem 20 Prozent Salpetersäure zugesetzt sind, für 12 bis 

 24 Stunden , dann in 90prozentigen Alkohol mit Zusatz von kohlen- 

 saurem Kalk zur Neutralisierung (aber allmählich bis ungelöste Stückchen 

 übrig bleiben). Dann Übertragen in reinen 90prozentigeu Alkohol und 

 Schneiden. Verf. hat gute Resultate mit der gemischten Einbettung er- 

 halten. Die Serienschnitte wurden gefärbt mit dem Neapeler Borax- 

 karmin, mit HämalauH und mit Thionin. Schiefferdecker (Bonn). 



Haaiie , (x. , Über die C a r d i a d r ü s e n und C a r d i a d r ü s e n - 

 zone des Magens der Haussäugetiere (Arch. f. 

 Anat. u. Physiol. 1905, Anat. Abt., H. 1, p. 1—32 m. 1 Tfl.). 

 Der den eben getöteten Tieren rasch entnommene Magen wurde 

 sofort aufgeschnitten und entleert ; dann wurden Stücke ausgeschnitten : 

 längere Schleimhautstreifen aus verschiedenen Stellen der Cardiaregion, 

 besonders aber von den Grenzpartien derselben : Cardia - Pylorus- 

 grenzregion , Cardia - Fundusgrenzregion , Cardia - Oesophagusgrenz- 

 region; beim Schweine auch Schleimhautstücke aus dem Diverticulum 

 ventriculi. Die vorsichtig und rasch gereinigten Schleimhautstreifen 

 ■wurden in die Fixierungsflüssigkeit gebracht: heiß gesättigte Sublimat- 

 Kochsalzlösung mit einigen Tropfen Eisessig. Nach 24 Stunden Aus- 

 waschen in fließendem Wasser ; steigender Alkohol ; Paraffineinbettung. 

 Färbung gewöhnlich mit Hämatein und Eosin ; für Mucin: Ij Häma- 

 toxylin - Delafield und Eosin; 2) Hämatein und Mucikarrain oder 

 Bismarckbraun ; 3) Muchämatein und Erythrosin ; 4) Toluidinblau. 

 Für elastische Fasern Fuchsin-Resorzin ; für M u s k e I g e w e b e 

 Hämatein mit Säurefuchsin - Pikrinsäure ; für S e k r e t k a p i 1 1 a r e n , 

 Kitt- und Schlußleisten Eisenalaunhämatoxylin mit Erythrosin. 

 Zur Feststellung der mikrochemischen Eigenschaften der Cardiadrüsen- 

 zelle wurde noch eine Reihe weiterer, neutraler, basischer und saurer 

 Anilinfarben verwendet, wie Aurantia, Indulin, Orange etc. 



Schiefferdecker (Bonn) . 




568 Referate. XXII, 4. 



Bartel, J. , u. Stein, R. , Lymphdrüsenban und Tuber- 

 kulose (Arch. f. Anat, u. Pliysiol. 1905, Anat. Abt., H. 2, 3, 

 p. 141—158 m. 1 Tfl.). 

 Die Methode, welche die Verf. angewendet haben, um das binde- 

 gewebige Gerüst in den Lymphdrüsen zu studieren, beruht im wesent- 

 lichen auf einer modifizierten Mallory scheu Methode, wie sie bereits 

 von WoöLLEY^ angewendet worden ist. Die Methode war die folgende: 

 Die in ZENKERScher Flüssigkeit fixierten Objekte werden in Paraffin 

 eingebettet. Die Schnitte werden in gewöhnlicher Weise auf dem 

 Objektträger durch Antrocknen fixiert und nach Entfennmg des 

 Paraffins durch Xylol mit Alkohol und Wasser abgespült. Dann 

 werden sie mit einer O'lprozeutigen wässerigen Säurefuchsinlösung 

 2 bis 3 Minuten gefärbt und dann in Wasser ausgewaschen. Sie 

 verbleiben in einer einprozentigen Lösung von Phosphor -Molybdän- 

 säure 5 bis 7 Minuten , werden sorgfältig in Wasser abgespült und 

 kommen dann in ein Farbgemisch bestehend aus : 



Anilinblau 0-5 g 



Orange G 0-2 „ 



Oxalsäure 2*0 „ 



Destilliertes Wasser 100 cc 



Hierin bleiben die Präparate etwa 20 Minuten , dann kurzes 

 Abspülen in Wasser, absoluter Alkohol, Ditt'erenzierung in ein paar 

 Tropfen Anilinöl , Xylol , Kanadabalsam. Man tut gut daran , die 

 Phosphor - Molybdänsäurelösung möglichst oft zu erneuern , da sich 

 dieselbe leicht zersetzt und dann eine grünliche Färbung annimmt. 

 Die Differenzierung mit reinem Anilinöl ist ferner nicht so gut als 

 eine solche mit Anilin und Xylol zu gleichen Teilen , da die mit 

 reinem Anilinöl behandelten Schnitte sich leichter falten und ferner 

 dadurch, daß sie Spuren von Anilin in sich zurückbehalten, rasch 

 abblassen. Die so gefärbten Lymphdrüsenschnitte zeigen die Kapsel, 

 die Trabekel, das Reticulum der Follikel und Markstränge und end- 

 lich das in den Rindensinus und tiefen Lymphbahnen ausgespannte 

 Fasernetz vollständig deutlich, bis zu den feinsten Fäserchen hin 

 leuchtend blau gefärbt. Die Lymphocyten zeigen die braunrote Kontrast- 

 farbe des Fuchsins und heben sich von dem blauen Reticulum besser 

 ab, als dies nach der Mallory sehen Hämatoxylinfärbung der Fall 



^) WoOLLEY, F. G., A study of the reticular supporting network in 

 malignant neoplasms (Johns Hopkins Hospital Bull., Jan. 1903, vol. XIV, 

 no. 142). 




XXII, 4. Referate. 509 



ist. Die roten Blutkörperclien liegen deutlich orangegelb gefärbt in 

 den Blutgefäßen , von welchen auch die feinsten noch durch die 

 deutliche Blaufärbung ihrer Wand plastisch hervortreten. Das elastische 

 Gewebe, Colloid und Schleim werden ebenfalls intensiv blau gefärbt 

 und lassen sich von dem rotgefärbten Protoplasma deutlich unter- 

 scheiden. Die Verflf. machen im allgemeinen auf die außerordentliche 

 Verwendbarkeit dieser modifizierten MALLOUY-Färbung zur Darstellung 

 bindegewebiger Substanzen und Fasernetze aufmerksam. 



Schiefferclecker (Bonn) . 



Petersen , 0. , Über sekretorische Änderungen im Epi- 

 thel der ableitenden Haruwege bei einigen 

 Säugetiereu (Anat. Anz. Bd. XXVII, 1905, No. 8, 9, 

 p. 187 — 199 m. 4 Tflu.). 

 Das Material wurde teils im frischen Zustande untersucht, teils 

 in Formol -MtJLLER, Sublimat, 50- bis 20prozentiger Formollösung, 

 absolutem Alkohol, einprozentiger Osmiunisäure fixiert. Die Paraffiu- 

 schnitte wurden gefärbt mit Hämatoxylin (Hansen) , Eosin , Eisen- 

 hämatoxylin, Mucikarmin, der Ehrlich-Biondi sehen Dreifarbenmischung, 

 Toluidinblau und Thionin (beide in wässeriger Lösung). 



Schiefferdecker (Bonn). 



Steril , M. , Histologische Beiträge zur Sekretion der 

 Bürzeldrüse (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXVI, 1905, 

 p. 299—311 m. 1 Tri.). 

 Fixiert wurde meist mit lOprozentigem Formol. Nach ein- bis 

 2stündigem Wässern wurden die Drüsen dann mit dem Gefriermikro- 

 tom geschnitten. Die Färbung erfolgte sofort darauf entweder mit 

 Scharlachrot nach Herxheimer allein (eventuell kombiniert mit Häm- 

 alaun-Kernfärbung) oder mit einer Mischung von gleichen Teilen 

 Scharlachrot und einprozentiger Osmiumsäurelösung.- In diesem, un- 

 mittelbar vor dem Gebrauch herzustellenden Geraisch, blieben die 

 Schnitte 6 bis 24 Stunden ; wurden dann für eine bis 2 Stunden in 

 mehrmals gewechseltes, destilliertes Wasser gebracht, auf dem Objekt- 

 träger mit Fließpapier abgetrocknet und in Glyzerinleim eingeschlossen. 

 Die Osmium -Scharlachrot -Mischung, die nicht filtriert werden darf, 

 obgleich sich beim Zusammengießen beider Flüssigkeiten ein starker 

 Niederschlag bildet, ergab die besten Resultate. Versuche, die gleichen 

 färberischen Effekte mit getrennter Behandlung (zuerst Scharlachrot 

 und nachher Osmium und umgekehrt) zu einhalten, blieben ohne Er- 




570 Referate. XXII, 4. 



folg. Um Niederschläge im Scliuitt tunlichst zu vermeiden , wurden 

 die Gefriei'ßchnitte häufig vor und nach der Behandlung mit Osmium- 

 Scharlachrot, die übrigens immer in dunkeln Flaschen vorgenommen 

 wurde, auf einige Minuten in öOprozentigen Alkohol gelegt. Außerdem 

 wurden Schnitte, die 9 bis 16 Tage mit Osmium oder Osmiumalaun 

 behandelt und nachher 24 Stunden in destilliertem Wasser gewässert 

 worden waren, in Cllyzerinleim untersucht. Zum Studium der lipoiden 

 Körnchen wurden die Gefrierschuitte nach Behandlung mit öOpro- 

 zentigera Alkohol 24 Stunden mit einprozentigem, wässerigem Safranin 

 gefärbt, mit angesäuertem, absolutem Alkohol ditferenziert, dann für 

 24 Stunden in 96prozentigen Alkohol gebracht, schließlich entwässert 

 und in Xylol-Balsam eingeschlossen. E. Sehoebel {Neapel). 



lUing, Cr., Über einen eigenartigen Befund in den 

 Glandulae v e s i c u 1 a r e s und den Glandulae 

 ductus deferentis des Rindes (Arch. f. mikrosk. 

 Anat. Bd. LXVI, 1905, p. 121 — 127 m. 1 Tfl.). 

 Um zu zeigen, daß die eigentümlichen bläschenförmigen Gebilde, 

 wie sie nach Fixierung in Sublimatkochsalzlösung und Färbung mit 

 Hämatoxylin und Eosin, basal von den hohen zylindrisclien Zellen 

 des sekretorischen Epithels der betreffenden Organe zu konstatieren 

 sind, nicht etwa Hohlräume sind , sondern daß es sich vielmehr um 

 eigenartige Zellen, etwa Fettzellen, handelt, wurden zunächst die 

 Resultate verschiedener Fixationsmittel geprüft. Sublimateisessig, 

 Formol und ZENKERSche Flüssigkeit gaben keinen weiteren Aufschluß; 

 wohl aber die in Podwyssotzki scher Lösung (einprozentige Chrom- 

 säure 15 cc, ^/^prozentige Sublimatlösung 15 cc, 2prozentige Osmium- 

 säure 4 cc und Eisessig 6 bis 8 Tropfen) fixierten, mit Chloroform 

 behandelten und in Paraffin eingebetteten Präparate, die die basalen 

 Kugelzellen intensiv schwarz gefärbt zeigen. Zur definitiven Fest- 

 stellung, daß der Zelleninhalt tatsächlich Fett sei, wurden noch die 

 gebräuchlichen Fettfarben Scharlach R, Sudan III und Indophenol 

 angewendet. Für die Färbung mit Scharlach R wurden die Organ- 

 stücke in lOprozentiger Formollösung 24 Stunden fixiert, in fließen- 

 dem Wasser mehrere Stunden ausgewaschen und mit dem Gefrier- 

 mikrotom geschnitten. Die Schnitte kamen vom Mikrotom ins Wasser, 

 wurden dann kurz mit 70prozentigem Alkohol abgespült und in die 

 von Herxheimer angegebene Farblösung (absoluter Alkohol 70, 

 lOprozentige Natronlauge 10, destilliertes Wasser 10, Scharlach R 

 zur Sättigung) 2 bis 3 Minuten eingelegt. Dann wurde wieder mit 




XXII, 4. Referate. 57 1 



TOprozentigem Alkohol kurz abgespült und mit einer dünnen wässe- 

 rigen Hämatoxylin-, Tohiidinblau- oder Methylenblaulösung nach- 

 gefärbt , mit Wasser abgespült und in Lävulose oder Glyzerin ein- 

 gelegt. Die fraglichen basalen Kugelzellen erscheinen bei dieser 

 Methode intensiv rot gefärbt. Sudan III wurde in ganz gleicher 

 Weise angewandt, auch die Farblösuug ganz analog der von Schar- 

 lach R hergestellt, nur betrug die P'ärbdauer etwa 5 bis 10 Minuten. 

 Die Resultate waren die gleich guten. Indophenol kam in einer, in 

 TOprozentigem Alkohol gesättigten Lösung bei einer Einwirkung von 

 ca. 20 Minuten zur Verwendung. Die Resultate waren weniger gut. 



E. Schoebel (Neapel). 



Meyer, P. , Ein Verfahren zur Erzielung haltbarer 

 Amyloid Präparate (Virchows Arch. Bd. CLXXX, 1905, 

 p. 359—361). 

 Verf. hebt hervor, daß es sehr schwer ist, Amyloidpräparate 

 als brauchbare D a n e r p r ä p a r a t e (Xylol , Kanadabalsam) herzu- 

 stellen. Die Herstellung eines solchen Präparates scheitert daran, 

 daß die Anilinfarben, insbesondere das Methylviolett, welches für 

 Kurszwecke am prägnantesten die Metachromasie zeigt, durch die 

 der Färbung folgende entwässernde Alkoholbehandlung ausgezogen 

 werden. Ebenso löst bei der Jodreaktion der Alkohol das Jod auf. 

 Allerdings kann man mittels der Methode, die Schnitte vor der Ent- 

 paraffinierung zu färben , sehr leicht Balsampräparate herstellen , in 

 denen die rote Metachromasie der amyloiden Teile sehr deutlich 

 hervortritt und beschränkt haltbar bleibt (Schmorl), aber für Kurs- 

 zwecke ist diese Methode nicht geeignet. Nach verschiedenen Ver- 

 suchen hat Verf. die Trocknung angewendet. Das mit Methylviolett 

 gefärbte, mit stark verdünnter Essigsäure in bekannter AVeise diffe- 

 renzierte und in Wasser abgespülte Präparat wird an der Luft ge- 

 trocknet, dann sofort in Xylol mit nachfolgendem Kanadabalsam ge- 

 bracht. Auf diese Weise bleibt die Metachromasie deutlich erhalten: 

 in intensiv leuchtend roter, fast rubinroter Farbe treten die amyloiden 

 Teile hervor. Die Gewebsstruktur leidet allerdings etwas, doch ist 

 diese bei Methylviolettfärbung immer nur undeutlich. Kommt es 

 darauf an , den Farbenunterschied festzuhalten , wie dies für Kurs- 

 zwecke der P'all ist, dann sind die Bilder genügend. Die Jodreaktion 

 auf diese Weise dauernd zu erhalten , war leider nicht möglich ; 

 Verf. schreibt dies der Paraffineinbettung zu. Dagegen gelingt es, 

 Corpora amylacea der Prostata durch die Trocknung dauernd gelb- 




572 Referate. XXII, 4. 



brauu zu erlialteu, während das übrige Gewebe kaum durch die 

 Jodierung gefärbt erscheint. Das von Harz für Stärkekörner an- 

 gegebene Jodparaffinöl hat Verf. bisher ohne Erfolg versucht zur 

 Amyloidrealvtion zu benutzen. Die Trockenmethode ist natürlich nur 

 für aufgeklebte Parafünschnitte verwendbar; Gefrierschnitte und 

 Celloidiupräparate können nicht getrocknet werden. 



Schieferdecker {Bonn). 



Kraus, A. , Zur Färbung der Hyphomyceten im Horn- 

 gewebe (Zentralbl. f. Bakteriol. Orig. Bd. XXXVII, 1904, 

 H. 1, p. 153—155). 

 Verf. stellt sich aus Methylenblau medicinale die nötige Farb- 

 stofflösung — nach Michaelis — derart her, daß 2 g Farbstoff in 

 100 ccm Wasser gelöst, dann zur Lösung 10 ccm ^/^^ Normal-Natron- 

 lauge zugefügt werden und die Flüssigkeit zum Sieden erhitzt und 

 eine Viertelstunde im Sieden erhalten wird. Dann läßt man erkalten 

 und setzt, um eine vollständige Neutralisation zu erreichen, 10 ccm 

 ^\^Q Normal-Schwefelsäure hinzu. Mit der so gewonnenen „Methylen- 

 azur"-Lösung färbt Verf. die pilzhaltigen Schuppen 5 Minuten lang 

 und wäscht aus bis keine Farbwolken mehr abgehen; hiernach 

 Alkohol, Xylol, Kanadabalsam. Verf. erprobte sein einfaches Ver- 

 fahren, bei dem die Hyphomyceten sich blau färben, an Favus-Haaren 

 bei Pityriasis versicolor, Herpes tonsurans , Eczema marginatum und 

 Erythrasma. — Brauchbare, doch minder zuverlässige Färbungen 

 der Pilze erhielt Verf. mit Methylgrünpyronin. 



Küster {Halle a. S.). 



B. Bakterien, 



IJoit, H., Einfache und sichere Identifizierung des 

 T y p h u s b a c i 1 1 u s. Jena (G . P^ischer) 1 905 ; 48 pp. 1 M. 

 Nach einem etwas weit ausgeholten historischen Überblick über 

 die zahlreichen Nährböden, die zur leichteren Isolierung von Typhus- 

 bazillen im Laufe der Jahre angegeben worden sind^ geht Verf. zur 

 Behandlung seines Themas über. Er benutzte eine größere Anzahl 

 von Typhusstämmen, die er auf dem Lakmusnutroseagar von Drigalski- 

 CoNRADi prüfte im Vergleich zu andern dem Typhusbacillus nahe- 

 stehenden Bakterien (hauptsächlich der Gruppe der Paratyphusbazillen). 




XXII, 4. Referate. 57 



o 



Zur genaueren Identifizierung benutzte er dann die Agglutination und 

 außerdem noch die Kultur in der Petrüschky sehen Lakmusmolke. 

 Die andern Differeuzierungsnährböden , welche häufig bei Unter- 

 suchungen auf Typhusbazillen zur Sicherstellung der wahren Typhus- 

 bazillennatur der isolierten Mikroorganismen noch herangezogen werden, 

 glaubt Verf. bei Anwendung des Drigalski Conradi sehen Nährbodens, 

 spezifischer einwandfreier Agglutination und der PETRUscHKYSchen Lak- 

 musmolke bei der praktischen Typhusdiagnose entbehren zu können. Eine 

 besondere Behandlung erfährt noch das Bacterium faecale alkaligeues 

 Petrüschky, welches von allen typhusähnlichen Bakterien demTyphus- 

 bacillus selbst kulturell wohl am meisten ähnelt , so daß in letzter 

 Zeit Versuche angestellt wurden , den Alkaligenes in den Typhus- 

 bacillus überzuführen, wie nunmehr aber von Berghaus nachgewiesen 

 ist, mit negativem Erfolg. Durch spezifische Agglutination und die 

 Kultur in Lakmusmolke wird sich der „Alkaligenes" — ■ selbstverständ- 

 lich eine Reinkultur vorausgesetzt — stets vom Typhusbacillus unter- 

 scheiden lassen. W. Hoffmann {Berlin). 



Seiter, Über Sporenbildung bei Milzbrand und andern 

 sp or en b ii d e n d en Bakterien fZentralbl. f. Bakteriol. 

 Abt. 1, Orig. Bd. XXXVIL H. 2, p. 186). 



Über die Sporenbildung der Milzbrandbazillen und dir not- 

 wendigen Ursachen hierfür sind bisher trotz vielfacher diesbezüglicher 

 Untersuchungen übereinstimmende Resultate nicht erzielt worden, be- 

 sonders ist die Frage, ob der Milzbrandbaeillus auch unter anaeroben 

 Bedingungen sporifizieren könne, einwandsfrei noch nicht erledigt. 



Selter hat «ich diesen Untersuchungen erneut zugewandt und 

 systematisch die Sporenbildung in flüssigen und auf festen Nährböden 

 und die Sporenbilduug einiger Anaerobier untersucht. Die Resultate 

 seiner ausgedehnten Experimente sind folgende: 



1) Die günstigsten Nährböden zur Erzielung einer reichlichen 

 Sporenbildung bei Aerobiern sind einfache Bouillon und Agar und 

 besonders nach Zusatz von 2prozentigem Milchzucker. 



2) .5prozentiger Glyzerinzusatz zu den Nährböden übt auf die 

 Sporeubildung einen hindernden Einfluß aus, in nicht so erheblichem 

 Maße auch 2prozeutiger Traubenzucker. 



3) Es gelingt schon durch einige wiederholte Überimpfungen 

 auf Glyzerinagar asporogene Stämme zu erzeugen. 



4) Die Sporenbildung kommt bei eintretendem Ernährungs- 

 mangel zustande, aber nur, wenn die Bazillen auf der Höhe ihrer 




574 Referate. XXII, 4. 



Entwicklung stehen , d, h. noch keinen regressiven Veränderungen 

 unterlegen sind. 



5) Die Spore bei Milzbrand wird durch Zusammenziehung des 

 Protoplasmas gebildet. 



6) Auch in unverdünntem Blutserum kann Sporenbildung bei 

 Milzbrand eintreten. 



7) Je reichlicher die Sauerstotfzufuhr, um so besser die Sporen- 

 bildung. 



8) Bei Sauerstoffabschluß ist bei Milzbrand keine Sporenbildung 

 zu erzielen. 



9) Quitten- und Eibischschleim sind nicht imstande, den Sauer- 

 stoff zu ersetzen — was früher von Weil behauptet worden war. [Ref.] 



10) Die Sporenbildung der Anaerobier wird durch Zusätze von 

 Traubenzucker und Glyzerin nicht beeinträchtigt, sondern im Gegen- 

 teil begünstigt. 



Die Arbeiten Selters sind mit großer Sorgfalt durchgeführt, 

 immerhin wäre eine Bestätigung seiner Resultate besonders betreffs 

 Absatz 10) auch von anderer Seite wünschenswert. 



W. Ho ff mann {Beiiin). 



Turban, Demonstration und Erläuterung mikrosko- 

 pischer Präparate von Tuberkulose (Verhandl. d. 

 22. Kongresses f. innere Med., 1905, p. 438). 

 Der Verf. demonstrierte auf dem obengenannten Kongresse fol- 

 gende Präparate von Tuberkulose, indem er sich anschließend über 

 die angewandten Färbemethoden eingehender aussprach. Die ersten 

 Präparate dienten dem Versuch, „Sporen" in dem Tuberkelbazillus 

 nachzuweisen. Um zu einem Resultate zu kommen , wandte der 

 Verf. eine äußerst intensive Färbemethode an, da der Tuberkel- 

 bazillus, an sich schon ziemUch resistent gegen Farbstoffe, wenn über- 

 haupt, dann solche Sporen bilden dürfte, die hochgradig widerstands- 

 fähig gegen den Färbeprozeß sind. Zu diesem Zweck wandte Verf. 

 längere Zeit heißes alkalisches Karbolfuclisin an. Färbte man hier- 

 mit 1^/2 Stunden, ohne es aber zum Kochen kommen zu lassen, 

 dann färbten sich in den Tuberkuloseerregern auch die sonst un- 

 gefärbt bleibenden Lücken und außerdem wurden sowohl an den 

 Enden, als auch im Verlauf des Stäbchens dunkelrote große Kugeln 

 oder Körner sichtbar : diese Körner überragten den Bazillenleib meist 

 an Dicke und waren auch intensiver gefärbt. Der Verf. läßt die 

 Frage aber unentschieden, ob die Körner als „Sporen" oder nur 




XXIT, 4. Referate. 575 



als ERNSTSche Körpercbeu aufzufassen sind; er neigt der Ansicht 

 zu, daß es sich um eine Chromatindifferenzierung im Bakterienplasma 

 handehi könnte, aus der — bei anderen Arten — dann später 

 Sporen hervorgehen. Der Tuberkelbazillus läßt es hiernach vielleicht 

 bei diesem Anlauf zur Sporenbildung bewenden. Läßt man längere 

 Zeit trockene Hitze einwirken , so werden nur noch vereinzelte 

 Kugeln gefärbt, während der Bazillenkörper vernichtet ist. Hiernach 

 wäre diesen Kugeln eine höhere Widerstandsfähigkeit zuzusprechen. 

 Weiter machte Verf. darauf aufmerksam , daß Tuberkelbazillen in 

 Trockenpräparaten , welche 1 ^j.^ Stunden im Trockenschrank bei 

 180^ gehalten wurden, sich mit gewöhnlichen wässerigen oder ver- 

 dünnt alkoholischen Anilinfarben tingieren und ihre Säurefestigkeit 

 bei der Entfärbung verloren haben. 



Ferner konnte der Verf. mit Delafields Hämatoxylin in Prä- 

 paraten von ein bis 2 Jahre alten Reinkulturen Hüllen um die 

 Tuberkelbazillen nachweisen; letztere selbst konnten mit einer Kon- 

 trastfarbe gefärbt werden. 



In Sputis lassen sich Tuberkelbazillen und elastische Fasern 

 getrennt färben durch folgende Färbemethoden. Das Präparat wird 

 mit gewöhnlichem Karbolfuchsin gefärbt, mit .3prozentigem salzsauren 

 Alkohol entfärbt und mit Weigert s Färbung nachbehandelt. Die 

 Tuberkelbazillen sind rot, die elastischen Fasern grau -blau. In an- 

 deren Präparaten demonstrierte der Verf. Auflagerungen auf ela- 

 stischen Fasern , welche durch „Ansintern" von Fett an die elasti- 

 schen Fasern entstanden sind. In einem mit Hämatoxylin-Eosin ge- 

 färbten Schnitt konnte Turban eine Mischinfektion von Tuberkulose 

 und Karzinom — in Alveolen benachbart — demonstrieren. 



W. Hoffmann {Beo'lin). 



Herxheimer, K., u. Hübner, H., Über Dar st ellungs weise 

 und Befund der bei Lues v r k m m' e n d e n S p i r - 

 chaete pallida (Deutsche med. Wochenschr. 1905, No. 26, 

 p. 1023). 

 Obgleich von Schaudinn betreffs Färbung der Spirochaete pallida 

 mitgeteilt worden ist, daß Präparate mit dem Romanowsky sehen 

 Eosin -Methylenblaugemisch gefärbt, wenig günstig ausfallen, haben 

 die Verflf. mit dieser Farblösung häufiger gut gefärbte Spirochäten 

 gesehen ; diese Spirochäten wurden aber von Schaudinn nicht als 

 die Syphiliserreger, sondern als die nicht selten zu findenden Spiro- 

 chaete refringentes gedeutet. Die Verff. färbten hierauf nach der 




576 Referate. XXII, 4. 



modifizierten Giem.sa sehen Färbemethode (Färbung über Nacht in 

 einer Mischung von 12 Teilen Eosinlösung — 2,5 cc einer einpro- 

 zentigen wässerigen Eosinlösung in 500 cc Wasser — 3 Teilen 

 Azur I — Lösung 1 : 1000 Wasser - — 3 Teile Azur II — Lösung 

 0,8 : 1000 Wasser — ) und erhielten trotz Farbstoftniederschlägen 

 gute Bilder, wenn die Niederschläge das Aufsuchen auch erschwerten. 

 Sie versuchten Modifikationen und benutzten eine filtrierte wässerige 

 Lösung von Nilblau BR oder Capriblau je 1 : 1000 über Nacht 

 16 bis 24 Stunden. Mit Nilblau sind die Spirochäten dunkell)lau 

 und scharf gefärbt , mit Capriblau grau ; jedoch stellen die Verfi'. 

 über diese Methode noch weitere Mitteilungen in Aussicht. Sie emp- 

 fehlen ferner, die Giemsa- Lösung nicht fertig zu beziehen, sondern 

 sie aus den Stammlösungen jedesmal frisch herzustellen. 



W. Hoffm.ann {Berlin). 



Giemsa, G., Bemerkungen zur Färbung der S p i r o c h a e t e 

 pallida (Deutsche med. Wochenschr. 1905, No. 26, 

 p. 1026). 

 Da über die von dem Verf. angegebeneu Methoden der Roma- 

 NOwsKYSchen Färbung, wie aus Publikationen hervorgeht, verschiedene 

 irrtümliche Auffassungen bestanden , hält Verf. einige Aufklärungen 

 über die zu verwendenden Farbstotfe für notwendig. Während die ur- 

 sprüngliche RoMANOwsKYSche Färbung zur Darstellung der Chromatin- 

 substanz in blutschmarotzenden Protozoen aus einem Gemisch von 

 Eosin und alter Methylenblaulösung bestand, hat Verf., nachdem von 

 anderer Seite das wirksame Agens in dieser Farbmischung erkannt, 

 dieses Färbemittel dargestellt und als Azur eingeführt. Darauf baute 

 sich seine erste Färbemethode auf, die in der Anwendung zweier 

 wässerigen Lösungen bestand , von denen die eine die basischen 

 Farbstoffe (Azur II -reines Methylenazur -|- reines Methylenblau ää), 

 die andere den sauren Farbstoff des Eosin enthielt. Diese Methode 

 gab und gibt bei einiger Übung gute Präparate, doch verderben die 

 Lösungen leicht und die Herstellung des richtigen Mischungsverhält- 

 nisses ist infolgedessen mit einigen Schwierigkeiten verbunden. Eine 

 einzige, gebrauchsfertige Lösung war hiernach sehr erwünscht. Giemsa 

 empfahl hierauf folgende Lösung: 



Azur II -Eosin 30 



Azur II 0-8 



Glyzerin (Merck) 250-0 



Methylalkohol (Kahlbaum I) 250-0 




XXII, 4. Referate. 577 



Ausführung der Färbuug : Härten des sehr dünnen Ausstrichs 

 in Alkohol absolutus (15 bis 20 Minuten). Verdünnung der Farb- 

 lösung mit destilliertem Wasser in einem weiten graduierten Reagens- 

 glas unter Umschütteln , wobei man die Farblösung am besten aus 

 einer Tropfflasche hinzufließen läßt. Übergießen der Präparate mit 

 der soeben hergestellten Farblösung. Fäi-bedauer 10 bis 15 Minuten. 

 Abwaschen im scharfen Wasserstrahl etc. 



Für manche Zwecke — auch für die Spirochätenfärbung — ist 

 es empfehlenswert, zu dem Wasser vor der Mischung mit dem Farb- 

 stoff etwas Kaliumkarbonat (1 bis 10 Tropfen einer einprozentigen 

 Lösung) hinzuzufügen. 



Die Spirochaete pallida ist nach dieser Methode schon nach 

 15 Minuten gefärbt, am schönsten und schärfsten aber nach einer 



^*""*^^®- W. Hoffmann {Berlin). 



Reitmann , K. , Zur Färbung der Spirochaete pallida 

 (Deutsche med. Wochenschr. 1905, No. 25, p. 997). 



Da sowohl mit der Giemsa sehen Azur-Eosinmischung als mit 

 anderen Farbstofl'en die Darstellung der Spirochaete pallida besonders 

 für den in diesen Untersuchungen noch nicht Geübten manchmal 

 mit Schwierigkeiten verbunden ist, suchte Verf. eine Färbemethode 

 auszuarbeiten, mit der sich die Spirochäte schnell und intensiv färbt, 

 so daß sie sich auch von dem „Anfänger" leicht auffinden läßt. Die 

 Methode besteht in folgendem : Die gutgereinigten Deckgläser werden 

 mit dem Untersuchungsmaterial in möglichst dünner Schicht beschickt, 

 und , nachdem sie lufttrocken geworden sind , in reichlicher Menge 

 absoluten Alkohols fixiert, und dann durch aqua destillata auf 5 Mi- 

 nuten in 2 prozentige Phosphorwolframsäurelösuug übergeführt. Hier- 

 auf wird diese Beize mit destilliertem Wasser und 70prozentigem 

 Alkohol gründlich abgespült, das Präparat wieder in destilliertes 

 Wasser gebracht und dann, nach Abtrocknung der nicht beschickten 

 Fläche mit Karbolfuchsin unter Erwärmen über der Flamme bis 

 zur intensiven Dampfbildung, wobei aber ein Aufwallen der Lösung 

 möglichst zu vermeiden ist , gefärbt. Dann folgt Abspülen mit 

 Leitungswasser^ Schwenken in 70prozentigem Alkohol, Waschen in 

 Wasser — bis keine Farbwolken mehr abgehen — und schließlich 

 Trocknen. 



Zellkerne erscheinen dunkel, die Spirochäten intensiv rot. 



W. Hoffmann {Berlin). 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 4. 37 




578 Referate. XXII, 4. 



Thesing", C, Ein Wort zu dem Aufs atze von Dr. Giemsa 

 „Bemerkungen zur Färbung der Spirochaete 

 pallida" (Deutsche med. Wochensclir. 1905, No. 32, 

 p. 1279). 

 Der Verf. wendet sich gegen Äußerungen von Dr. Giemsa über 

 Bemerkungen, die der Verf. über das leichte Verderben etc. von 

 Farblösungen gemacht hat, indem er anführt, daß er die neue Farb- 

 stofflösung Giemsa s nicht erwähnt habe, welche sich aus absolutem 

 Methylalkohol und konzentriertem Glyzerin zusammensetze. Er habe 

 nur behauptet, daß die „alte" GiEMSA-Lösung leicht zur Verschimme- 

 lung neige , wofür vielleicht der Zusatz von Dextrin , der von den 

 Händlern des leichten Abwägens wegen zugesetzt werde, anzuschul- 

 digen sei. — Weiter wendet er sich gegen Giemsa s Behauptung, daß die 

 von dem Verf. in den Farblösungen gesehenen Bakterien Kristalle (!) 

 gewesen wären. W. Hoffmann (Berlin). 



(xiemsa, G., Erwiderung zu vorstehenden Bemerkungen 

 (Deutsche med. Wochensclir. 1905, No. 32, p. 1279). 

 In einigen kurzen Sätzen nimmt Giemsa Stellung zu den The- 

 siNGSchen Behauptungen und schließt mit den Worten, daß sich die 

 Einwände Thesings durch die inzwischen von den verschiedensten 

 Seiten eingetroffenen Bestätigungen über die mit Giemsa -Lösung 

 färberisch dargestellten Erreger des Syphilis — Spirochaete pallida 

 — als grundlos erwiesen hätten. W. Hoffmann (Berlin). 



Noeggerath u. Staehelin, Zum Nachweis der Spirochaete 

 pallida im Blut Syphilitischer (Münchener med. 

 Wochensclir. 1905, No. 31, p. 1481). 

 Zum Nachweis der Spirochaete pallida im Blut sekundär syphili- 

 tischer Menschen, was für die Entscheidung der von Schaudinn und 

 Hofpmann entdeckten Spirochaete pallida als Ätiologie des Syphilis 

 von eminenter Bedeutung war, empfehlen Noeggerath und StachelIxX 

 folgendes Verfahren. Mindestens 1 cc Blut (aus einer Vene oder 

 aus dem Ohrläppchen) wird in einer ungefähr zehnfachen Menge 

 ^gprozentiger Essigsäure aufgefangen, die Flüssigkeit zentrifugiert 

 und die mit dem Bodensatz hergestellten Ausstrichpräparate nach 

 Giemsa gefärbt. Diese Färbungsmethode wird durch die Vorbehand- 

 lung mit der stark verdünnten Essigsäure nicht merkbar beeinträch- 

 tigt, wenn man die Farblösung frisch herstellt und sie mehrere 

 Stunden einwirken läßt. 




XXII, 4. Referate. 579 



Auf diese Weise fanden die Autoren die Syphiliserreger leicht 

 und meist in großer Anzahl in luetischem Blut, während Kontroll- 

 untersuchungen bei Nicht-Syphilitikern stets negative Resultate ergab. 



W. Hoffmann (Berlin). 



Baudi u. Simonelli, Über die Anwesenheit der Spiro- 

 chaete pallida in sekundär syphilitischen Mani- 

 festationen und über die zu ihrem Nachweis 

 angewendeten Färbungsmethoden (Münchener med. 

 Wochenschr. 1905, No. 35, p. 1668). 

 Bei der Färbung der Schaudinn- Hoffmann sehen Spirochäten 

 wandten die Verff. außer der gewöhnlichen GiEMSASchen Methode 

 mehrere andere Färbemethoden an, die sogar meistens bessere Bilder 

 boten, so die ZiEHLSche Flüssigkeit und die in der bakteriologischen 

 Praxis gebräuchlichen alkoholischen Lösungen der gewöhnlichen 

 Anilinfarben, und zwar fixierten sie die Präparate zuerst in^ Alkohol 

 oder mittels Hitze und ließen dann die Farblösungen bei Hitze 

 wenige Sekunden einwirken. Besonders heben die Verif. hervor, daß 

 sie häufig die Spirochäten innerhalb der Zellen vorgefunden haben, 

 und zwar meist innerhalb der Kernsubstanz, weswegen sie von einem 

 Zellparasitismus sprechen. Letztere Beobachtung ist von anderen 

 Spirochätenforscheru nicht gemacht worden. [Ref.] 



W. Hoffniann {Berlin). 



Oppenheim, M., u. Sachs, 0., Eine einfache und schnelle 



Methode zur deutlichen Darstellung der Spiro- 



chaete pallida (Deutsche med. Wochenschr. 1905, No. 29, 



p. 1156). 



Die Verff. empfehlen folgende Färbemethode zur Darstellung 



der Spirochaete pallida : 



Die dünnen, trocknen, nicht vorher fixierten Deckglasausstrich- 

 präparate werden mit einer alkoholischen Karbol-Gentianaviolettlösung 

 (5prozentige wässerige Karbolsäurelösung 100 cc, konzentrierte alko- 

 holische Gentianaviolettlösung 10 cc) übergössen und über einer 

 Bunsenflamme bis zur Dampfbildung vorsichtig erwärmt. Dann werden 

 die Präparate vorsichtig mit Wasser abgespült, mit Filtrierpapier 

 getrocknet , in Kanadabalsam eingeschlossen und dann untersucht. 

 Die Spirochaete pallida ist deutlich blau. 



Die Vertf. empfehlen die Methode wegen ihrer leichten Ausführ- 

 barkeit. W. Hoffmann {Berlin). 



37* 




580 Referate. XXII, 4. 



Suiith , E. F. , B a c t e r i a in r e 1 a t i o u t o plant diseases. 

 Vol. 1. Methods of work and general literature 

 of bacteriology exclusive of plant diseases. 

 Washington D. C, 1905. 

 In einem Kapitel gibt Verf. eine Reihe von Färbungsrezepten. 

 Von Geißelfärbungsmethoden erwähnen wir: 1) V. A. Moores Geißel- 

 färbung. Nachdem man das Bakterienhäutchen auf dem Deckglas 

 dadurch befestigt hat, daß man es 5 bis 10 Minuten lang einer 

 Temperatur von 120^ bis 140^ ausgesetzt hat, bringt man das Objekt 

 zur Beize in ein Reagierrohr, das folgende Beize enthält: 10 cc 

 20prozentige Tanninlösung, 5 cc kalte, gesättigte, wässerige Eisen- 

 sulfatlösung , 1 cc gesättigte , alkoholische Lösung von basischem 

 Fuchsin, oft vorteilhaft auch ^/.^ cc einprozentige Natronlauge. Man 

 erhitzt bis zur Dampfentwicklung und läßt das Objekt 5 bis 10 Mi- 

 nuten lang in der heißen Flüssigkeit. Dann wäscht man das Objekt 

 in Wasser aus und färbt wieder in einem Reagierrohr mit Ziehls 

 Karbol-Fuchsin , indem man 1 bis 3 Minuten lang bis zur Dampf- 

 entwicklung erhitzt. Ein gekrümmter Platin draht dient zum Heraus- 

 holen des Objektes aus dem Reagierrohr. 2) Hugh Williams Me- 

 thode. Bakterium und Geißel werden schwarz gefärbt. Man beizt, 

 indem man das Deckglas nicht ganz eine Minute lang mit folgender 

 Beize bedeckt : 1 Teil einprozentige Aliimnollösung (Meister, Lucius 

 und Brüning), 1 Teil 2prozentige Osmiumsäure, 3 Teile 20prozen- 

 tige Tanninlösung. Nach Schütteln der Mischung muß man 3 Tropfen 

 Eisessig zufügen und wieder schütteln. Dann bedeckt man das Ob- 

 jekt mit einprozentiger Silbernitratlösung, der einige Tropfen Ammoniak- 

 wasser zugefügt sind. Dabei werden die Geißeln mit Silber imprägniert. 

 Auswaschen mit Wasser. Um den Austritt von Silber und ein Fest- 

 setzen austretender Silberteilchen auf dem Deckglas zu verhüten, 

 wäscht man aus mit 0"6prozentiger Chlornatriumlösung, mit 30pro- 

 zentigem Ammoniakwasser , dann mit Wasser. Nun verstärkt man 

 die Luprägnation durch Gold und Quecksilber auf folgende Weise. 

 Nachdem man einige Tropfen photographischen Entwickler Ortol 

 hinzugefügt hat , wäscht man mit Wasser , bedeckt einige Sekunden 

 mit einprozentiger Chlorgoldlösuug, wäscht, gibt Entwickler zu, wäscht, 

 bedeckt einige Sekunden mit Quecksilberchlorid (einprozentige Lösung), 

 wäscht und fügt wieder Entwickler hinzu. Das Waschen, Bedecken 

 mit Chlorgold und Entwickler muß zwei oder mehrere Male wieder- 

 holt werden. Nach jeder Behandlung mit Chlorgold muß man den 

 Verlauf der Färbung mit starken Vergrößerungen kontrollieren. 




XXII, 4. Referate. 581 



3) Duckwalls Metliode, Ausstriche auf 2prozentigem Agar in Petri- 

 Schalen von jungen Bouillonkulturen. Suspensionen in Wasser. Pigment 

 und Schleim werden durch Schütteln mit Chloroform entfernt. Die 

 Beize muß stets frisch verwendet werden. Färbung nach Löffler 

 ohne Überhitzuug. Vorsichtig in Alkohol und Wasser waschen, in 

 Xylol aufhellen und ohne vorhergehende Prüfung einbetten. 



Von den Kapselfärbungen teilen wir mit: Richard Muirs Kapsel- 

 färbung. Die getrockneten Häutchen werden 2 Minuten gebeizt mit : 

 Gesättigte, wässerige Quecksilberchloridlösung 2 Teile, 20prozentige, 

 wässerige Tanninlösung 2 Teile, gesättigte, wässerige Kaliumalaun- 

 lösung 5 Teile. Dann waschen mit Wasser , Alkohol , wieder mit 

 Wasser, 2 bis 3 Minuten lang bei leiser Hitze mit Karbolfuchsin 

 färben , waschen mit Wasser , 2 bis 3 Minuten wiederum beizen, 

 wieder waschen. Dann färben mit gesättigter, wässeriger Lösung 

 von Methylenblau 2 Minuten lang , bleichen in Methylalkohol , auf- 

 hellen in Xylol. Freund {Halle a. 8.). 



C. Botanisches. 



Gräfe, V. , Eine neue Reihe von H o 1 z r e a k t i o n e n (( Jsterr. 

 Botan. Zeitschr. Bd. LV, 1905, p. 174). 



Das Interesse der vorliegenden Mitteilung liegt darin , daß sie 

 mit einigen neuen, der aliphatischen Reihe entstammenden Holz- 

 reagentien bekannt macht. 



Verf. setzt zu einer Lösung von Vanillin einige Tropfen Iso- 

 butylalkohol und läßt an der Reagenzglaswand ein wenig 

 Schwefelsäure (spez. Gew. 1'84) hinabfließen. unter starkem Er- 

 wärmen färbt sich dabei die Probe dunkelrot mit starkem Stich ins 

 Blaue. Nach kurzer Zeit erscheint die Flüssigkeit im durchfallenden 

 Licht violett, im auffallenden blau, nach längerem Stehen wird sie 

 durchaus blau ; nach entsprechender Verdünnung mit Alkohol und 

 abermaligem Säurezusatz blaugrün bis hellgrün. Die Nuance ist 

 übrigens weniger von der Probenkonzentration als von der Menge 

 des zugesetzten Reagenz abhängig. Verf. empfiehlt ein einheitliches 

 Reagenz sich herzustellen: Auf 30 cc Isobutylalkohol 15 cc Schwefel- 

 säure. Die Mischung färbt sich hell- bis dunkelrot , es entwickelt 

 sich Schwefeldioxyd. Behandelt man Holzmehl mit einigen Tropfen 

 der Reagenzmischung, so färbt sich das Holz (infolge der Schwefel- 




582 Referate. XXII, 4. 



Sälire Wirkung) schwärzlich ; verdünnt man mit wenig Alkohol und 

 schüttelt man das Reagenzglas, so zeigen die an der Wand anhaften- 

 den Holzteilchen hlaue bis blaugrüne Färbung, die Flüssigkeit nimmt 

 dasselbe Rotviolett an, wie es vorhin für die Vanillinlösung angegeben 

 wurde. — Behandelt man mikroskoijische Schnitte durch verholzte 

 Gewebe mit dem Reagenz , so färben sich diese zunächst rotviolett 

 und erst nach längerer Zeit blau. Verf. hält es für ratsam , die 

 Schnitte nicht länger als etwa eine Stunde in dem Reagenz liegen 

 zu lassen, uud sie dann in Glyzerin zu übertragen. Im allgemeinen 

 erscheinen dann die Zellen prächtig blau, einige aber auch grün und 

 rotviolett; vielleicht hängt die Verschiedenheit in der Färbung mit 

 dem Grad der Verholzung zusammen ; es wäre möglich , daß das 

 Reagenz die Verholzungs Intensität zu beurteilen gestattet. Warum 

 die Blaufärbung erst im Glyzerin deutlich wird , ist noch nicht er- 

 mittelt. 



Ebenso wie Butylalkohol wirken auch Amyl- und Hexylalkohol. 

 Verf. hebt hervor, daß einige Substanzen, die keinen „Holzstoff" ent- 

 halten und gleichwohl mit den WiESNERSchen Reagentien sich färben 

 (Katfeesäure, Ferulasäure), mit dem neuen Reagenz keine Färbung 

 geben. Pikronat liefert zwar ein intensives Rotviolett, das aber 

 schnell in Grasgrün übergeht. — Die mit Isobutylalkohol- Schwefel- 

 säure gefärbten Schnitte sind nur für 5 bis 6 Tage haltbar. 



Weiterhin findet Verf., daß Isobutylaldehyd, mit Schwefel- 

 säure zusammengebracht , ebenfalls ein brauchbares Holzreagenz ab- 

 gibt. Bringt man mikroskopische Schnitte in einen Tropfen der 

 Mischung , so färben sie sich nach und nach rötlich ; legt man sie 

 nach etwa einer Stunde in Glyzerin, so werden sie weinrot bis rot- 

 violett. Küster {Halle a. S.). 



Hus, Henri T. A., Spind le Formation in the Pollen- 



M 1 h e r - C e 1 1 s o f C a s s i a t o m e n t o s a B. (Proc. of 



the California Acad. of Sei. 3. Ser. Bot. vol. II, 1904, 



110. 11, p. 329 — 354). 



Beim Fixieren hat Verf. 36 verschiedene Lösungen verwendet. 



Am besten wirkte konzentrierte FLEMMiNGSche Lösung, wenn nicht 



länger als 10 bis 12 Stunden fixiert wurde. Bei längerem Fixieren 



und bei allen andern Lösungen (außer der Telliesniczky sehen 



Flüssigkeit) schrumpfte das Gewebe etwas. Sogleich beim Sammeln 



muß fixiert werden. Das Waschen darf nicht länger als 6 bis 



8 Stunden dauern ; langer Aufenthalt in den schwächeren Alkohol- 




XXII, 4. Referate. 583 



lösiingen ist gloichfalls schädlich. Zum Einbetten wurde Paraffin 

 mit einem Schmelzpunkt von 71^ C. verwendet. Beim Färben ver- 

 fährt Verf. folgendermaßen : Nach Ablösen des Paraffins durch Xj'lol 

 und zweimaligem Waschen mit 95prozentigem Alkohol wurde in 

 Safraninlösung (gleiche Teile von gesättigter alkoholischer und ge- 

 sättigter wässeriger Lösungen) £ Minuten gefärbt , danach mit ab- 

 solutem Alkohol (Zusatz von O'lprozentiger Salzsäure) entfärbt und 

 mit Wasser abgespült , bis keine Spur mehr von Salzsäure blieb. 

 Dann wurde 5 Minuten in gesättigter wässeriger Gentianaviolett- 

 lösung gefärbt, 20 Sekunden mit Jodjodkalilösung (Jod 1 Teil, 

 Jodkali 4 Teile, Wasser 3000 Teile) differenziert, eine Sekunde mit 

 absolutem Alkohol entwässert und in Nelkenöl aufgehellt. So bleiben 

 die achromatischen Fäden blaugefärbt; bei Zusatz von Orange Gr, 

 statt Jodjodkalilösung, werden sie total entfärbt. 



Ernst A. Bessey ( Miami). 



ThomsOU, ß. B., The Megaspore-membrane of the Gym- 

 n s p e r m s (University of Toronto Studios, Biological Series, 

 1905, no. 4). 

 Außer bei den Taxaceen besitzt bei jeder Gruppe der Gymno- 

 spermen das Prothallium (Makrospore) eine Sporenmembran. Bei 

 den Araucarien ist sie einfach ; bei den übrigen Familien besteJjt sie, 

 wie bei den Pteridophyten , aus zwei Schichten (Exine und Intine). 

 Durch Chlorzinkjod wird die Exine gelbbraun, die Intine dagegen 

 äußerlich braun, mitten violett und innerlich weniger intensiv violett 

 gefärbt. Durch Schwefelsäure und Jod wird die Exine dunkel gelb- 

 braun gefärbt. Von außen nach innen nimmt die Intine folgende 

 Farben an : gelblichbraun, gelb, grüngelb, blau und wieder grüngelb. 

 Diese Farben sind bezw. dunkelrot, rötlichviolett, violett, dunkel- 

 und hellgelb nach Behandlung mit einer sehr verdünnten Lösung 

 von EHRLiCHsehem saurem Häraatoxylin und Alaunlösung und danach 

 mit verdünnter wässeriger Safraninlösung. Dabei wird die Exine 

 kirschrot gefärbt. 



Verf. schließt aus diesen verschiedenen Reaktionen, daß die 

 Exine verkorkt ist; die Intine dagegen soll nur äußerlich verkorkt, 

 mitten reine Zellulose sein und innen aus Pektinverbindungen be- 

 stehen. Ernst A. Bessey (Miami). 



Ferguson, Marg-aret C. , C o n t r i b u t i o n s t o the k n o w 1 e d g e 

 of the life history of Pinus with special re- 




584 Referate. XXII, 4. 



f e r e n c e t o s p o r o g e n e s i s , t h e d e v e 1 o p m e n t o f 

 tlie gametophytes and fertilization (Proc. Wash- 

 ington Acad. Sei. vol. VI, 1904, p. 1—202, pls. 1—24), 

 Das zu fixierende Material wurde von mehreren Bäumen ge- 

 nommen, um irgendwelche individuelle Eigentümlichkeiten bei einzelnen 

 Bäumen auszuschließen. Folgende FixierungsÜlissigkeiten wurden 

 probiert: Chromosraiumessigsäure, Chromessigsäure, Sublimat (wässe- 

 rige Lösung), absoluter Alkohol und das CARNOvsche Gemisch. Die 

 beste Formel war folgende , die fast ausschließlich von der Ver- 

 fasserin verwendet worden ist : 



Cbromsäure (Kristalle) 1'3 g 



Osminrasäure 0"5 „ 



Eisessig 8'3 „ 



Destilliertes Wasser 160"0 cc 



Beim Fixieren vom Prothallium mit nur noch einer wandstän- 

 digen Plasmaschicht mit freien Kernen wurde diese Flüssigkeit auf 

 die Hälfte verdünnt und nur 15 Stunden lang angewendet; für andere 

 Entwicklungsstadien wurde sie unverdünnt 24 Stunden lang benutzt. 

 Bei Schwarzwerden der Lösung wurde frische zugesetzt. Das Waschen 

 hat 2 bis 12, meistens 6 Stunden gedauert. Es wurden 8 Konzentra- 

 tionsstufen des Alkohols beim Entwässern benutzt. In den niederen 

 Stufen, sowie im absoluten Alkohol darf man das Material nicht über 

 6 Stunden liegen lassen. Nach 12 stündigem Entwässern in 85pro- 

 zentigem Alkohol wurde durch folgende Lösung entfärbt: 35 Teile 

 pro Hundert Wasserstoffsuperoxydlösung in 95prozentigem Alkohol. 

 Das Aufhellen in Zedernöl dauerte mitunter 3 bis 4 Wochen ohne 

 Nachteil. Beim Einbetten benutzte Verf. Gemische von 25, 50 und 

 75 Teilen pro Hundert Paraffin mit Zedernöl und endlich Paraffin 

 mit einem Schmelzpunkt von 54^ C. Der FLEMMiNGSche Dreifarben- 

 prozeß und das Heidenhain sehe Hämatoxylin erwiesen sich als die 

 besten beim Färben. Beim Gebrauch des letzteren wurde oft nach- 

 träglich mit Orange G, Bismarckbraun, FLEiiMiNGSchem Gemisch oder 

 Gentianaviolett und Orange G gefärbt, um den kinoplasmatischen Bau 

 deutlich sichtbar zu machen. Ernst A. Bessey {Miami). 



Haberlandt, 0., Über die P 1 a s m a h a u t der C h 1 o r o p 1 a s t e n 



in den A s s i m i l a t i o n s z e 1 1 e n von S e 1 a g i n e 1 1 a 

 Martensii Spring. (Ber. d. deutseh. bot. Ges. Bd. XXIII, 

 1905, H. 9, p. 441). 




XXII, 4. Referate. 585 



Auf den muldenförmigen Cliloroplasten der Trichterzellen von 

 Selaginella Martensii findet Verf. eine besondere Plasmaliaut, die 

 durch ihr starkes Lichtbrechungsvermögen und ihre scharfe Um- 

 grenzung auffällt. — Besonders wenn man frische Schnitte mit Alkohol 

 fixiert und entfärbt. Parakarmiu und Boraxkarmin, Eosin, Safranin 

 und F'uchsin färben die Plasmahaut nur schwach, besser färben Pikrin- 

 anilinblau, Methylenblau und Methylgrün. Verf. empfiehlt die Schnitte 

 unter dem Deckglas mit Alkohol zu fixieren und zu entfärben, dann 

 mit Fließpapier einige Tropfen ziemlich stark verdünnter Pikrinanilin- 

 blaulösuug durchzuziehen und diese einige Minuten wirken zu lassen. 

 Wenn das Cytoplasma sich bläut, die Chloroplasten aber noch ungefärbt 

 sind, ersetzt man die Farblösung durch Glyzerin. Von dem violettblauen 

 Cytoplasma hebt sich dann in Zellen, deren Färbung gut gelungen 

 ist, die Plasmahaut grünlichblau ab. — Mit der folgenden Methode 

 läßt sich eine gute Doppelfärbung erzielen. Man läßt die mit Alkohol 

 vorbehandelten Schnitte 10 bis 20 Minuten in ziemlich stark ver- 

 dünnter Fuchsin-Methylgrünlösung liegen — eventuell noch länger — 

 und überträgt sie dann in Glyzerin: das Cytoplasma erscheint blaß- 

 rot, die Chloroplasten intensiv rot, die sie bedeckende Plasmahaut 

 blau. Minder vorteilhaft sind die mit Eosin -Methylenblau erzielten 

 Färbungen. — Verdünnte Kalilauge und Salzsäure bringen die Plasma- 

 haut zum Quellen, in Eau de Javelle löst sie sich. Bemerkenswert 

 ist die ü n V e r d a u 1 i c h k e i t der mit Alkohol vorbehandelten Plasma- 

 häute in Pepsinsalzsäure (bei 34" C). — Die feinere Struktur 

 der Plasmahäute wird an Material deutlich, das mit Chromosmium- 

 essigsäure oder Kaiser schem Sublimateisessig fixiert und nach Bendas 

 Eisenhämatoxylinmethode gefärbt wird. Die Plasmahaut erweist sich 

 dabei zusammengesetzt aus regelmäßig aneinandergereihten kleinen 

 Körnchen. Küster {Halle a. S.). 



Chamberlain , Ch. J. , Methods in IMant Ilistology. Se- 

 cond edition Chicago (Univ. of Chicago Press) 1905; 262 pp. 

 Das vorliegende Lehrbuch erscheint bereits in zweiter Auflage, 

 die gegen die erste mancherlei Bereicherungen erfahren hat. Der 

 erste Teil berichtet über das Technische im allgemeinen , über den 

 Gebrauch der nötigen Apparate , über Fixierimgs- und Färbungs- 

 methoden, Aufhellungs- und Einschlußmittel etc., der zweite über die 

 Behandlung besonderer Materialien. Algen, Pilze, Moose etc. werden 

 der Reihe nach durchgesprochen, die Gewinnung des geeigneten 

 Materials wird behandelt und neben vielem Bekannten mancher be- 




586 Referate. XXII, 4. 



achtenswerte neue Wink gegeben. Die Namen mancher bekannter 

 europäischer Autoren wiederholt Verf. konsequent in falscher Ortho- 

 graphie. Küster [Halle a. 8.). 



D. Mifiev alogisch - PetrographiscJies, 



Rosenbusch, H. , Mikroskopische Phy siographie der 

 Mineralien und Gesteine. Ein Hilfsbuch bei mikro- 

 skopischen Gesteinsstudien. 4. Aufl., Bd. I, 2. Hälfte ; VIII 

 -]- 402 pp. m. 20 Tfln., 206 Figg. und einem Anhang: Hilfs- 

 tabellen zur mikroskopischen Mineralbestimmung. Stuttgart 

 1905. 

 Ebenso wie der erste allgemeine Teil des Werkes (vgl. diese 

 Zeitschr. Bd. XXI, 1904, p. 540) hat auch der jetzt vorliegende 

 zweite Teil des ersten Bandes in der neuen Auflage eine völlige Um- 

 gestaltung erfahren. Entsprechend den vielfachen Anwendungen, welche 

 graphische Methoden während des letzten Jahrzehnts in der Petro- 

 graphie erlangt haben, treten dieselben auch in diesem Buch weit 

 mehr als früher hervor , so z. B. sind 7 neue Tafeln , welche in 

 stereographischer Projektion die zur mikroskopischen Bestimmung der 

 Feldspate dienenden Diagramme enthalten, besonders hervorzuheben. 

 Während die kristalloptischen und Struktureigenschaften der Minera- 

 lien natürlich den Hauptinhalt dieses Bandes bilden, sind doch auch 

 die mikrochemischen Eigenschaften eingehend berücksichtigt. In einem 

 Anhang sind die wichtigsten optischen und kristallographischen Kon- 

 stanten der gesteinsbildenden Mineralien tabellarisch zusammengestellt; 

 der Anhang ist im Vergleich zu den früheren Auflagen neu, und 

 war bisher nur separat in einer weniger vollständigen Form er- 

 schienen. Der zweite Band des umfangreichen und einzig dastehenden 

 Werks erst wird die Gesteine behandeln, obgleich auch in diesem 

 Teil schon viele für die Struktur der Gesteine wichtige Tatsachen 

 ausgeführt und in erschöpfendster Weise die Grundlagen für die 

 eigentliche Petrographie dargelegt werden. 



E. Sommerfeldt (Tübingen). 



Briiiinee , R. , Polarisation s- Mikroskoppoly meter (Zen- 



tralbl. f. Min., Geol. Paläont. 1905, p. 59.3—595 m. 1 Fig.). 



Das Instrument unterscheidet sich von einem gewöhnlichen 




XXII, 4. Referate. 587 



mineralogischen Mikroskop nur tlurcli die Art der Feineinstellung. 

 Es ist die Mikrometerschraube durch eine am Tubus angebrachte 

 Trommel ersetzt, in welcher sich ein kreisförmiger Keil mit schwacher 

 Steigung befindet. Die Feineinstellung des Objektivs erfolgt durch 

 Gleiten eines Schiebestückes , welches mit dem Objektiv verbunden 

 ist, längs dieses Keiles , so daß eine gleichzeitige Drehung des Ob- 

 jektivs um die Instrumentachse während der Feineinstellung erfolgt. 

 Dieser Mechanismus erleichtert zugleich eine Drehung des Innen- 

 nikols , die sowohl unabhängig vom Polarisator , als auch zugleich 

 mit diesem (mittels einer nicht neuen Zahnradübertragung) erfolgen 

 kann. Bedenklich scheint dem Ref. nur das vermutlich hohe Ge- 

 wicht der Vorrichtung, worüber sich Angaben nicht vorfinden. Nament- 

 lich bei dem oft notwendig werdenden Einsetzen weiterer Hilfsattribute 

 auf den Tubus würde die Triebbewegung, welche sich weit außer- 

 halb der Instrumentachse befindet, einer sehr starken Abnutzung 

 unterliegen , indem sowohl die Feineinstellungstrommel als auch son- 

 stige am Tubus befindliche Teile mit einem großen Hebelarm auf 

 die Zahn- und Triebbewegung drücken. 



E. Sommerfeldt {Tübingen). 



Weinsclieuk, E., Über die Skelettteile der Kalkschwämme 

 (Zentralbl. f. Min., Geol. u. Paläont. 1905, p. 581—588). 

 Angeregt durch zoologische Untersuchungen von 0. Maas über 

 die Skelettbildung der Kalkschwämme verfolgt der Verf. die hierbei 

 auftretenden physikalisch-chemischen Prozesse hinsichtlich ihrer Be- 

 deutung für die Geologie. Es zeigte sich, daß die Spongien den im 

 Meerwasser enthaltenen Kalk nur insofern zum Aufbau ihrer Nadeln 

 brauchen können, als er in der Form des Bikarbonats sich in Lö- 

 sung befindet, daß dagegen der Kalksulfatgehalt des Meerwassers 

 hierfür unverwertbar ist. Der Verf. untersucht nun die spezielle 

 Reaktion, welche zur Karbonatausscheidung führt und weist die An- 

 nahme BtJTSCHLis, daß ein Doppelsalz von Calcium- und Kalium- 

 karbonat existiere und bei diesen Vorgängen in Betracht komme, 

 zurück. Sodann wird aus der relativ leichten Angreifbarkeit der 

 Skelette durch Kalilauge , sowie aus einigen weniger wichtigen Ur- 

 sachen auf das Vorhandensein von submikroskopischen Einschlüssen 

 organischer Stoffe innerhalb der Kalksubstanz geschlossen. Schließ- 

 lich wird das gegenseitige Verhältnis der verschiedenen Modifikationen 

 des CaCOo — nämlich des Aragonit, Calcit und Conchit bei diesen 

 Vorgängen behandelt. E. Sommerfeldt {Tübingen). 




588 Referate. XXII, 4. 



Prytz, K., Mikroskopisclie Bestimmung der Lage einer 

 spiegelnden Fläche. Optischer Kontakt (Ann. 

 d. Phys. [IV] Bd. XVI, 1905, p. 735—746). 

 Um die Orientierung einer spiegelnden Fläche auf mikroskopi- 

 schem Wege zu ermitteln, benutzt der Verf. ein der Autokollimations- 

 metbode ähnliches Verfahren. An Stelle des sonst üblichen total- 

 reflektierenden Prismas oder schräge gestellten Spiegels wird jedoch 

 ein hakenförmiger Glasstab in den Tubus eingeführt, welcher sowohl 

 das zu reflektierende Signal trägt , als auch die Beleuchtung des- 

 selben vermittelt. Das Signal befindet sich au der sehr kurzen und 

 dem Objektiv zugekehrten Spitze des Glashakens ; dieser ist ver- 

 silbert und es wird das Licht einer seitwärts aufgestellten Licht- 

 quelle mittels dieses „Lichtleiters" in die Instrumeutachse abgelenkt, 

 um bei geeigneter Stellung des Mikroskopes senkrecht auf die spiegelnde 

 Fläche aufzufallen. Da das Signal aber durch die Krümmung des 

 Glashakens verdeckt wird , bedient sich der Verf. , um es dennoch 

 bei senkrechter Incidenz sichtbar zu macheu, zweier Prismen mit sehr 

 kleinem brechendem Winkel, welche das reflektierte Licht um einen 

 bekannten Betrag ablenken. Dem Ref. will scheinen, daß mittels 

 des gewöhnlichen Autokollimationsverfahrens , wie es für mikrosko- 

 pische Zwecke namentlich von Fedorow ausgearbeitet ist, der vom 

 Verf. erstrebte Zweck bequemer erreicht wird. 



. E. Sommer felclt {Tübingen). 



Bäckström, H., Ein K u g e 1 g r a n i t von Spitzbergen (Geol. 



Föreningens: Stockholm Förhandlinger Bd. XXVII, 1905, 



p. 254—259 m. 1 Taf.). 

 Während in den meisten Fällen die kugelige Absonderung bei 

 Eruptivgesteinen mit einer wesentlichen Änderung der chemischen 

 Zusammensetzung verbunden ist, ist der vom Verf. neuaufge- 

 fundene Granit aus Spitzbergen innerhalb und außerhalb der Kugeln 

 gleich konstituiert, was durch mikroskopische Miueralbestimmung an 

 den GesteinsschliftVn nachgewiesen wird. Hieraus werden einige 

 Folgerungen über die Aufeinanderfolge der einzelnen Mineralien bei 

 der Erstarrung des Gesteinsmagmas gezogen. 



E. Sommerfeldt {Tübingen). 




XXII, 4. Neue Liteiutur. 589 



Neue Literatur 



1. Lehr- und Handbücher. 



Abbe. E., Gesammelte Abhandlungen. Bd. IL (Wissenschaftliche Abhand- 

 lungen aus verschiedenen Gebieten, Patentschnften. Gedächtnisreden.) 

 Jena (Gust. Fischer) 1906; IV + 346 pp., 7 Tfln. u. 16 Figg. i. Text. 

 (Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 544.) geb. 9 M. 



Böhmer, C, Anleitung zur Untersuchung landwirtschaftlich wichtiger 

 Stoffe. Zum Gebrauch in landwirtschaftlichen und agrikulturchemischen 

 Laboratorien und für die Praxis zusammengestellt und bearbeitet. 

 Berlin (P. Parey) 1906. 135 pp. (Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, 

 p. 545.) 



Chamberlain, Ch. J,, Methods in Plant Histology. Second edition Chicago 

 (Univ. of Chicago Press) 1905 ; 262 pp. (Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 

 1905, p. 585.) 



Ehrmaun, S,, u. Fick, J., Einführung in das mikroskopische Studium der 

 normalen und kranken Haut. Ein Leitfaden für Ärzte und Studierende. 

 Wien (Holder) 1905; V, 104 pp., 1 Tfl. u. 21 Figg. 



2. Präparationsmethoden im allgemeinen. 



Degen, A., Untersuchungen über die kontraktile Vakuole und die Waben- 

 struktur des Protoplasmas (Botan. Zeitg. Bd. LXIII, 1905, p. 163; 

 vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 552). 



Halphen, G., et Eiche, A. , Contribution h I'etude des teintures histo- 

 logiques (C. R. Acad. Sc. Paris t. CXL, 1905, p. 1408—1410; vgl. 

 diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 546). 




590 Neue Literatur. XXII, 4. 



Mark, E. L., A paraffine bath heated by electricity (American Natural, 

 vol. XXXVn, 1903, no. 434, p. 115—119 w. 2 figg. ; vgl. diese Zeitschr. 

 Bd. XXII, 1905, p. 548). 



Nabias, B. de, Les anilines substituees et les composes phenoliques comme 

 agents de virage de l'or dans les tissus (Compt. Rend. Soc. Biol. 

 t. LVIII, 1905, no. 25, p. 152—154). 



Remlinger , P., Une cause d'erreur dans l'etude des organismes ultra- 

 microscopiques (C. R. .Soc. Biol. t. LVIII, 1905, no. 23, p. 1052—1053). 



Ruzicka, V., Über tinktorielle Differenzen zwischen lebendem und ab- 

 gestorbenem Protoplasma (Pflügers Arch. Bd. CVII, 1905, H. 10—12, 

 p. 497—534: vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 548). 



Schridde , H. , Beiträge zur Lehre von den Zellkörnelungen. Die Körne- 

 lungen der Plasmazellen (Anat. Hefte, H. 85, 8(3 [Bd. XXVIII, H. 2, 3], 

 1905, p. 691—768 m. 1 Tfl.-, vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 550). 



Stoeltzner, AV., Über Metallfärbungen verkalkter Gewebeteile (Virchows 

 Arch. Bd. CLXXX, 1905, H. 2, p. 362-365; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 

 1905, p. 545). 



Tartuferi, FeiTUCcio, Su di una terza nuova impregnazione metallica dei 

 tessuti e specialmente della Cornea (Ann. Ottalmol., Anno XXXIV, 

 Fase. 1, 2 , p. 74—78 u. Bull. Sc. med. , Anno LXXV, Ser. 8, vol. IV, 

 Fase. 12, p. 589—592). 



Wederhake, Zur mikroskopischen Schnelldiagnose (Zentralbl. f. Gynäkol. 

 Jahrg. XXIX, 1905, No. 25, p. 785—790). 



Wolfrum, Celloi'dintrockenmethode (Klin. Monatsbl. f. Augenheilk. Jahrg. 

 XLIII, 1905, H. 2, p. 61—64). 



3. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. 



a. Wirbeltiere. 



Bartel, J., u. Stein, R. , Lymphdrüsenbau und Tuberkulose (Arch. f. 

 (Anat. u. Physiol. 1905, Anat. Abt., H. 2, 3, p. 141 ; vgl. diese Zeitschr. 

 Bd. XXII, 1905, p. 568). 



Berliner, K. , Beiträge zur Histologie und Entwicklungsgeschichte des 

 Kleinhirns, nebst Bemerkungen über die Entwicklung der Funktions- 

 tüchtigkeit derselben (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXVI, 1905, p. 220 

 —269 m. 19 Figg. u. 1 TU.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, 

 p. 566). 



Blumstein-Jiulina, B., Die Pneumatisation des Markes der Vogelknochen 

 Anat. Hefte, H. 87 [Bd. XXIX], 1905, p. 1—52 m. 3 Tfln.; vgl. diese 

 Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 560). 




XXII, i. Neue Literatur. .-)91 



Bürker, K., Notiz über eine neue Form der Zählkammer (München, med, 



Wochenschr., Jahrg. LH, No. 19, p. 912 ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 



1905, p. 554). 

 Dogiel, A. S., Der fibrilläre Bau der Nervenendapparate in der Haut des 



Menschen und der Säugetiere und die Neuronentheorie (Anat. Anz. 



Bd. XXVII, 1905, No. 4,5, p. 97—118 m. 3 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. 



Bd. XXII, 1905, p. 565). 

 Donaggio, A., Colorazione positiva delle übre nervöse nella läse iniziale 



della degenerazione primaria e secondaria, sistematica or diffusa del 



sistema nervoso centrale (Riv. Sperim. di Freniatr, t. XXX, fasc. 1; 



vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 563). 

 Edens, Über Amyloidfärbung und Amyloiddegeneration (Viuchows Arch. 



Bd. CLXXX, 1905, H. 2, p. 346—359; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 



1905, p. 558). 

 Goldstein , K, , Untersuchungen über das Vorderhirn und Zwischenhirn 



einiger Knochenfische [nebst einigen Beiträgen über Mittelhirn und 



Kleinhirn derselben] (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXVI, 1905, p. 135 



—219 m, 23 Figg. u. 5 Tfln. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, 



p. 565). 



Haane, G., Über die Cardiadrüsen und Cardiadrüsenzone des Magens der 



Haussäugetiere (Arch. f. Anat. u. Physiol. 1905, Anat. Abt., H. 1, 



p. 1—32 m. 1 Tfl.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXH, 1905, p. 567). 

 Illing, G,, Über einen eigenartigen Befund in den Glandulae vesiculares 



und den Glandulae ductus deferentis des Rindes (Arch. f. mikrosk. 



Anat. Bd. LXVI, 1905, p. 121—127 m. 1 Tfl.; vgl. diese Zeitschr. 



Bd. XXII, 1905, p. 570). 

 Kraus, A. , Zur Färbung der Hyphomyceten im Horngewebe (Zentralbl. f. 



Bakteriol. Abt. 1, Orig. Bd. XXXVII, 1904, H. 1, p. 153—155; vgl. diese 



Zeitschr. Bd. XXH, 1905, p. 572). 

 Liebreich, O., Über Blutkörpevchenzählung mit dem Thoma-Zeiss sehen 



Apparat (Physiol. Ges. Berlin, Sitzung 24. Febr. 1905; vgl. Arch, f. 



Anat. u. Physiol. 1905, Physiol. Abt., H. 3, 4, p. 385—389 ; diese Zeitschr, 



Bd, XXII, 1905, p. 554). 

 Liigiato, L., Degenerazioni secondarie sperimentali [da strappo dello 



sciatico] studiate col metodo di Donaggio per le degenerazioni — 



prima e seconda note (Riv. Sperim. di Freniatr. t. XXX, p. 135; vgl. 



Neurol. Zentralbl. Jahrg. XXIV, 1905, No. 11, p. 522—523; diese 



Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 563). 

 Medea, E., L'applicazione del nuovo metodo di Ramön y Cajal allo studio 



del sistema nervoso periferico (Communicazione alla Soc. med.-chir. di 



Pavia, 14. gennaio 1905). 

 Meves, F., Über die Wirkung von Ammoniakdämpfen auf die roten Blut- 

 körperchen von Amphibien (Anat. Anz. Bd. XXVII, 1905, No. 8, 9, 



p. 177—186 m. 17 Abb.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 556). 

 Meyer, P. , Ein Verfahren zur Erzielung haltbarer Amyloidpräparate 



(ViRCHOws Arch. Bd. CLXXX, 1905, p. 359—361; vgl. diese Zeitschr. 



Bd. XXII, 1905, p. 571). 




592 Neue Literatur. XXII, 4. 



Myers, B. D., Fixation ot tissues by injection into tlie arteries (Johns 



Hopkins Hosp. Bull. vol. XVI, 1905, no. 167, 6 pp. w. 1 flg.; vgl. 



diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 55G). 

 Peter.sen, O. , Über sekretorische Änderungen im Epithel der ableitenden 



Harnwege bei einigen Säugetieren (Anat. Anz. Bd. XXVII, 1905, No. 8, 9, 



p. 187: vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 569). 

 Porta, A., Ricerche anatomiche suU'apparecchio velenifero di alcuni pesci 



(Anat. Anz. Bd. XXVI, 1905, No. 9, 10, p. 232—247 c. 2 tavv.; vgl. 



diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 567). 

 Ribadeau-Dumas, Application de la methode h l'argent de Ramön y Cajal 



ä letude de la rate (Bull, et mem. de la soc. anat. de Paris, Annee LXXX. 



Ser. 6, T. 7, 1905, no. 4, p. 281—282). 

 Scliaffer, K., Neurofibrillenpr.äparate nach der Bielschowsky sehen Methode 



(Psych.-neurok Sekt. d. kgl. Ärztevereins Budapest 1905; vgl. Neurol. 



Zentralbl. Bd. XXIV, 1905, No. 12, p. ,588; diese Zeitschr. Bd. XXH, 



1905, p. 564). 

 Sereni, S., SuU'uso della formalina come mezzo di conservazione dei sedi- 



menti dell'urine, dei liquidi ascitici, pleurici, ecc. (BoU. d. Soc. Lancisiana 



degli Ospedali di Roma, Anno XXV, 1905, fasc. 3, 11 pp., 2 figg.). 

 Stern, M., Histologische Beiträge zur Sekretion der Bürzeldrüse (Arch. f. 



mikrosk. Anat. Bd. LXVI, 1905, p. 299—311 m. 1 Tfl.; vgl. diese Zeitschr. 



Bd. XXII, 1905, p. 569). 

 Takayama, M., Beiträge zur Toxikologie und gerichtlichen Medizin, nebst 



einem Vorwort von Prof. Dr. R. Robert. 4 Tfln. Stuttgart (F. Enke) 



1905. (Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 557). 



b. Bakterien, 



Buerger, L., A new method for staining the capsules of bacteria (Proc. 



of the New York pathol. Soc. vol. IV, 1904, fasc. 7). 

 Fischel, R. , Bemerkungen zu den Methoden der Mikroorganismenfärbung 



von Waelsch und von Kkaus (Arch. f. Dermatol. u. Syph. Bd. LXXVI, 



1905, H. 3, p. 399—402). 

 Foä, Di un nuovo apparecchio per prelevare il campione nell'esame 



batteriologico dell'acqua (Atti della Soc. fiorent. d'Igiene 1904). 

 Gordon , M. H. , A read}' method of differentiating Streptococci and some 



results already obtained by its application (Lancet vol. II, 1905, no. 20, 



p. 1400—1403). 

 Horder, Tli. J. , Observations upon the importance of blood-cultures with 



an account of the technique recommended (Practitioner vol. LXXV, 



1905, no. 5, p. 611—622, 4 tavv.). 

 Kirstein, F., Ein Besteck für die Blutentnahme bei typhusverdächtigen 



Personen (Zeitschr. f. Medizinalbeamte, Jahrg. XVIII, 1905, No. 16, 



p. 510—511, 1 Fig.). 




XXII, 4. Neue Literatur. 593 



Kraft, E., Winke für die Ausführung chemisch-bakteriologischer Arbeiten 



auf dem Gebiete der Harn-, Sputum-, Fäces- etc. Untersuchungen. 



Berlin 1905; 35 pp. 8'^. 1 M. 



Levaditi, Sur la coloration du Öpirochaete pallida Schaudinn dans les 



coupes (C. R. Soc. Blol. t. LIX, 1905, no. 29, p. 326—327). 

 Schütze, A. , Über den Nachweis Eberth-Gaffky scher Bazillen in der 



Cerebrospinalflüssigkeit bei Typhus abdominalis (Berliner klin. Wochen- 



schr., Jahrg. XLII, 1905, No. 47, p. 1465—1468). 

 Seiter, Über Sporenbildung bei Milzbrand und andern sporenbildenden 



Bakterien (Zentralbl f. Bakteriol. Abt. 1, Orig. Bd. XXXVII, H. 2, p. 186; 



vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 573). 

 Smith, E. F., Bacteria in relation to plant diseases. Vol. 1. Mothods of 



work and general literature of bacteriology exclusive of plant diseases. 



Washington D. C, 1905. (Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 580.) 

 Tartuferi, F., Su di una terza nuova impregnazione metallica dei tessuti 



e specialmente della Cornea (Ann. Ottalmol. Anno XXXIV, 1904, 



fasc. 1, 2, p. 74—78; Rendic. Accad. Soc. med. -chir. Bologna 1904, 



p. 589—592; Bull. Sc. med. Anno LXXV, 1904). 

 Willson , H. S. , The isolation of B. typhosus from infected water, with 



notes on a new process (Journ. of Hyg. vol. V, 1905, no. 4, p. 429—443). 

 Winkler, H. v. , Über einige Hilfsmittel für bakteriologische Arbeiten 



(Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Orig. Bd. XXXIX, 1905, H. 4, p. 483—487, 



1 Fig.). 



c. Botanisches. 



Ferguson, M. C, Contributions to the knowledge of the life history of 

 Pinus with special reference to sporogenesis, the development of the 

 gametophytes and fertihzation (Proc. Washington Acad. Sei. vol. VI, 

 1904, p. 1—202, pls. 1—24; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 584). 



Gräfe, V., Eine neue Reihe von Holzreaktionen (Österr. Botan. Zeitschr. 

 Bd. LV, 1905, p. 174 ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 581). 



Haberlaudt, G., Über die Plasmahaut der Chloroplasten in den Assiinila- 

 tionszellen von Selaginella Martensü Spring. (Ber. d. .deutsch, bot. Ges. 

 Bd. XXHI, 1905, H. 9, p. 441; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, 

 p. 584). 



Hus, H. T. A., Spindle Formation in the Pollen -Mother-Cells of Cassia 

 tomentosa B. (Proc. of the California Acad. of Sei. 3. Ser. Bot. vol. II, 

 1904, no. 11, p. 329—354; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 582). 



Thomson, R. B., The Megaspore-membrane of the Gymnosperms (University 

 of Toronto Studies, Biological Series, 1905, no. 4; vgl. diese Zeitschr, 

 Bd. XXII, 1905, p. 583). 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 4. 38 




594 Neue Literatur. XXII, 4. 



d. 3Iineralogisch - Petrograpbisches. 



Bäckströni , H. , Ein Kugelgranit von Spitzbergen (Geol. Föreningens : 

 Stockliolm Förhandlinger Bd. XXYII, 1905, p. 254—259 m. 1 Tfl.; vgl. 

 diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 588). 



Brunnee, R. , Polarisations- Mikroskoppolymeter (Zentralbl. f. Min., Geol. 

 u. Paläont. 1905, p. 593—595 m. 1 Fig.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 

 1905, p. 586). 



Prytz, K., Mikroskopische Bestimmung der Lage einer spiegelnden Fläche. 

 Optischer Kontakt (Ann. d. Phys. [IV] Bd. XVI, 1905, p. 735— 74G: 

 vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 588). 



Rosenbusch, H. , Mikroskopische Physiographie der Mineralien und Ge- 

 steine. Ein Hilfsbuch bei mikroskopischen Gesteinsstudien. 4. Aufl., 

 Bd. I, 2. Hälfte; VIII + 402 pp. m. 20 Tfln. , 206 Figg. und einem 

 Anhang: Hilfstabellen zur mikroskopischen Mineralbestimmung. Stutt- 

 gart 1905. (Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 1905, p. 586). 



AVeinschenk, E., Über die Skelettteile der Kalkschwämme (Zentralbl. f. 

 Min., Geol. u. Paläont. 1905, p. 581—588; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 

 1905, p. 587). 




Autoren - Register. 



Abbe, E., 544. 

 Abi-ikossütf, A. J., 439. 

 Albanese, N., 299. 

 Allen, Ch. E., 461. 

 Ambronn, H., .349. 

 Andre, Ch., 417. 

 Arbeit, E., 3G3. 

 Arndt, G., 104. 

 Arnold, J., 286. 



Bab, H., 272. 

 Backmund, K., 285. 

 Bäckström, H., 588. 

 Ballowitz, E., 160. 

 Bartel, J., .568. 

 Baudi, 579. 

 Beck V. Managetta, G., 



166. 

 Becks, F., 306, 464. 

 Behrens, H., 305. 

 Berliner, K., 566. 

 Björkenlieim, C. G., 



300. 

 Blumstein - Judina , B., 



560. 

 Bödecker, C. F., 190. 

 Böhmer, C, 545. 

 Bösenberg, H., 426. 

 Boit, H., 572. 

 Borchert, M., 153. 

 Bord et, J., 4.')4. 

 Brand, F., 458. 

 Braun, F., 302, 306. 

 Brauns, E., 304. 

 Bredig, G., 305. 

 Brunnee, R., 586. 

 Bürker, K., 554. 

 Bunting, P. L., 287. 



Cagnetta, G., 539. 

 Cajal, 8. R., siehe Ramön 



y Cajal. 

 Cameron, J., 290. 

 Cavalie, M., 278. 

 Charaberlain , Ch. J., 



585. 

 Claussen, P., 297. 

 Courmont, J., 417. 

 Cristina, Di, 99. 



Degen, A., 552. 

 Depdolla, Ph., 265. 

 Doelter, C, 463. 

 Doerr, R., 284. 

 Dogiel, A. S., 565. 

 Donaggio, A., 563. 

 Donaldson, H. H., 446. 

 Donau, 304. 

 Dreuw, 137. 

 Driessen, L. F., 422. 

 Dschunkowsky, E., 295. 

 Dubreuil, G., 418, 420. 

 Dworetzky, A., 450. 



Jlidens, 558. 

 Erdely, A., 427. 

 Ernst, A., 299. 



Ferguson, M. C, 583. 

 Fernandez, M., 142. 

 Fichera, G., 288. 

 Fischer, A. , 100, 421, 



455. 

 Fischer, H., 458. 



Fischler, F., 262. 

 Fleischer, B., 162. 

 Floyd, R., 143. 



G^adzikiewicz, W., 141. 

 Gaehtgens, W., 293. 

 Galli, G., 148. 

 Garcia, D. D., 443. 

 Giemsa, G., 449, 576, 



578. 

 Glas, E., 286, 427. 

 Goldstein, K., 565. 

 Grabower, 279. 

 Gräfe, V., 581. 

 Groot, J. G. de, 136. 



Oaane, G., 567. 

 Haberlandt, G., .584. 

 Halphen, G., 546. 

 Hansen, F. C. C, 45, 



433. 

 Hardesty, I., 157. 

 Hartl, F., ,305. 

 Harz, C. 0., 459. 

 Heidenhain, M., 321, 325, 



330, 337. 

 Heim, P., 266. 

 Heinemann, Ph., 424. 

 Helber, E., 150, 268. 

 Heller, 0., 292. 

 Henneberg, 125. 

 Herxheimer, K., 575. 

 Hinden, F., .303. 

 Hirschler, J., 265. 

 Hlawatsch, C, 302. 

 HoÖendahl, K., 144. 

 Hoke, G. W., 446. 



38* 




596 



Autoren - Register. 



Hübner, H., 575. 

 Hus, T. A., 582. 



lUing, G., 284, 436, 570. 

 Imhof, G., 283. 



JoUy, J., 148. 

 Joris, H., 279. 

 Just, J., 481. 



Jvamon, K., 161. 

 Karakacheft", K. Iv., 435. 

 Keinath, K. Tli., 145. 

 Koch, A., 448. 

 König, E., 413. 

 Koiransky, E., 288. 

 Konaschko, P., 179. 

 Kopsch, F., 268. 

 Kozowsky, A. D., 277. 

 Kral, F., 295, 296. 

 Kraus, A., 572. 

 Krebs, P., 280. 



L/ams, H., 166. 

 Laß, M., 425. 

 Leake, H. M, 461. 

 Lehmann, 0., 303. 

 Lenhossek, M. v., 264. 

 Lenziuann, R., 431. 

 Lesage, 140. 

 Leyen, E. von der, 435. 

 Liebreich, 0., 554. 

 Lindner, P., 135. 

 London, E. S., 447. 

 Luczizky, W., 464. 

 Lugiato, L., 563. 

 Luhs, S., 295. 



Mark, E. L., 548. 

 Melissinos, K., 130. 

 Merck, E., 413. 

 Metz, C, 114. 

 Meves, F., 291,430,556. 

 Meyburg, H., 153. 

 Meyer, P., 571. 

 Michaelis, L., 423. 

 Miclmiewicz, H. R., 300. 

 Miyake, K., 460. 

 Möller, J., 412. 

 Molisch, H., 459. 

 Mulon, P., 138. 

 Myers, B. D., 555. 



Nabias, B. de, 139. 

 Neumayer, L., 181. 



NicoUe, F., 454. 

 Noeggerath, 578. 

 Nowack, K., 453. 



ücker-BIom, M., 451. 

 Oppenheim, M., 579. 

 Overton, J. B., 460. 



Pauly, A., 344. 

 Pavlow, W., 186. 

 Pensa, A., 438. 

 Peter, K., 530. 

 Petersen, 0., 569. 

 Phillips, D. P. A., 168. 

 Pighini, G., 441. 

 Pinkus, F., 160. 

 Pötzsch, 0., 161. 

 Porcile, V., 164. 

 Porta, A., 567. 

 Preisich, K., 266. 

 Prytz, K., 588. 



viuincke, G., 301. 



Kamön y Cajal, S., 155, 



273, 443. 

 Regaud, Gl., 418. 

 Reitmann, K., 577. 

 Richards, Th. W., 304. 

 Riche, A., 546. 

 Richter, 0., 194, 369. 

 Rosenbusch, H., .586. 

 Rossi, E., 273. 

 Rubaschkin, W., 158. 

 Ruffini, A., 447. 

 RuUmann, W., 292. 

 Rüzicka, V., 91, 548. 



oachs, 0., 579. 

 Sala, G., 291. 

 Schaffer, K., 564. 

 Schmidt, J. E., 439. 

 Schmorl, G., 134. 

 Schneider, J., 481. 

 Scholz, F., 415. 

 Schonten, S. L., 10. 

 Schridde, H., 550. 

 Schröder, 0., 424. 

 Schüller, M., 451. 

 Schukowski, G. v., 305. 

 Schwarz, G., 434. 

 Seddig, M., 465. 

 Seiter, 573. 



Senft, E., 298, 412. 

 Shattuck, Ch. H., 463. 

 Shoemaker, D N., 462. 

 Siding, A., 177. 

 Signer, M., 187. 

 Simonelli, 579. 

 Skrobansky, 138. 

 Smidt, E. F., 580. 

 Sommerfeldt. E., 356. 

 Srdinko, 0. V., 437. 

 Staehelin, 578. 

 Stark, M., ,307. 

 Stead, J. E., 465, 467. 

 Stein, R., 568. 

 Stern, M., 569. 

 Sternberg, K., 416. 

 Stoeltzner, W., 545. 

 Strasburger, E., 460. 

 Strehl, K., 1, 192. 

 Stroß, 0., 294. 



iakayama, M., 557. 

 Tellyesniczky , K. v., 



137. 

 Thesing, C., 578. 

 Thlroux, 140. 

 Thomson, R. B., 583. 

 Thugutt, St. J., 303. 

 Tiberti, N., 164, 165. 

 Triepel, H., 118. 

 Triollet, M., 454. 

 Turban, 574. 



Valedinsky, I. A., 442. 

 Vanino, S., 305. 

 Varela de la Iglesia, R., 

 445. 



\\ eidenreich. F., 146. 

 Weinschenk, E., 587. 

 Wells, R. GL, 304. 

 Winslow, Ch.-E.A., 135. 

 Woycicki, Z., 300. 

 Wuttig, H., 436. 



York, H. H., 462. 



Zacharias, E., 297. 

 Ziegler, K., 145. 

 Zietzschmann, 0., 429. 

 Zlatogoroff, S. J., 450, 

 452. 




Sacli- Register. 



Abbes Theorie, Allgemeines 1. 

 Abrikossoifs Methode, tuberkulöses 



Lungengewebe zu untersuchen 



439. 

 Absorptionsbild, Allgemeines 1. 

 Aceton- Celloidineinbettung, nach 



Scholz 415. 

 Achsenwinkelbestimmung bei kleinen 



Kristallpräparaten 356. 

 Achsenzyhnder , Untersuchung nach 



Ramön y Cajal 272 if. 

 Ackermannit, optisches Verhalten 



302. 

 Acridinrot-Pikroblau 420. 

 Apfelsäure , mikrochemischer Nach- 

 weis 213. 

 Agar-Agar, zum Einschließen vor 



der Paraffinbehandlung 462. 

 Agglutination, Beurteilung nach Ni- 



colle 454. 

 Alaunkarmin, Färbung von Ascidien- 



larven 425. 

 — , — — Schneckenembryonen 162. 

 Aldehyde, mikrochemischer Nach- 

 weis 214. 

 Aleuronkörner, Mikrochemisches 244. 

 Algen, Isoheren nach Schonten 11 ff. 

 — , Membran 374. 

 Alkahen, Wirkung auf das Plasma 



552. 

 Alkaloide, Mikrochemisches 240. 

 Alkohol , Fixierung von Ascidien- 



larven 425. 

 — , mikroskopischer Nachweis 212. 

 Alkohol-Pikrinsäure nach Imhof 283. 

 Alnus, Wurzelanschwellungen 300. 



Ambronns Methode, mikroskopische 

 pleochroitische Silberkristalle zu 

 erzielen 349 flf. 



Ameisensäure, mikrochemischer Nach- 

 weis 212. 



Amidoazokörper , Verhalten zu Jod 

 338. 



Amöben, Isolieren nach Scheuten 

 11 ff. 



— , Kultur nach Lesage 140. 



Ammoniak, Wirkung auf rote Blut- 

 körperchen 556. 



Ammoniakalkohol , Fixierung von 

 Nervengewebe 273. 



— , — — Retina nach Ramön y 

 Cajal 156. 



Ammonium, Nachweis und Vorkom- 

 men bei Pflanzen 296. 



Amphibien, Blutkörperchen, rote 291. 



— , Leberzellen 288. 



— , Nebennieren 164. 



— , Retina 290. 



Amylinkörner, Mikrochemisches 225. 



Amylodextrin,Behandlung mit Chrom- 

 säure 459. 



Amyloid, Mikrochemisches 226. 



— , Präparation nach Meyer 571. 



Amyloiddegeneration, Untersuchung 

 nach Edens 558. 



Ajuylum, siehe Stärke. 



Anabaenin 457. 



Anaerobe, Kultur nach Bürdet 454. 



Analyse, quantitative in der Mikro- 

 chemie 398. 



Anilin. Differenzierung der Kern- 

 färbungen nach Nabias 139. 




598 



Sach- Register. 



Anilinblau-Orange G-Oxalsäure, Fär- 

 bung von Bindegewebe 5G8. 



Ankleben von Schnitten nach Shat- 

 tuck 463. 



Anthokyan, amorphes und kristalli- 

 siertes 459. 



— , Mikrochemisches 236. 



Apäthys Stellung zu Abbes Theorie 1. 



Arachnoiden, Spermatozoen 426. 



Arndts mikroskopische Doppelsäge 

 104. 



Arnolds Methode, Drüsen der Frosch- 

 haut zu untersuchen 286. 



Arrigo-Stampachias Methode, Lungen- 

 gewebe zu fixieren 440. 



Arsen, mikrochemischer Nachweis 

 204. 



Ascidien, Larven 424. 



Askomyceten , Untersuchung nach 

 Claussen 297. 



Asparagin, Mikrochemisches 227. 



Aufkleben von Celloidinschnitten 

 nach Di Cristina 99. 



— — — — V. Tellyesniczky 137. 



Aufrechts Methode , Lungengewebe 

 zu fixieren 440. 



Augenmuskeln, Neurofibrillen in den 

 Nervenendigungen nachweisen 

 nach Ramön y Cajal 157. 



Aurantia-Eosin-Nigrosin, Färbung der 

 Leukocyten 273. 



Ausbreitungspräparate , Tunikaten 

 143. 



Azokarmin, Anwendung nach Heiden- 

 hain 339. 



Jjabs Methoden , Leukocyten zu 



färben 272. 

 Backmunds Methode , Haare und 



Schweißdrüse der Katze zu unter- 

 suchen 285. 

 Badeplatten, Sensibilisierung 413. 

 Bakterien, alte, Färbung nach Cluiraud 



und Gautie 449. 

 — , Farbstolfe 293. 

 — , Fixierung am Deckglas 448. 

 — , Geißeln, siehe diese. 

 — , Isolieren nach Schouten 11 if. 

 — , Membran 376, 391. 

 — , Pleomorphie S3ff. 

 — , Vitalfärbung nach Kral 296. 

 Ballowitz' Methode, Riechzellen von 



Petromyzon zu untersuchen 160. 

 Bartel-Steins Methode, Bindegewebe 



der Lymphdrüsen zu untersuchen 



568. 



Barj'umsulfat, zur Erkennung von. 

 kolloidalen Lösungen 305. 



Basidiobolus, Färbung, Fixierung 300. 



Bauchaugen, Eunice 424. 



Bauchsinnesorgane, Eunice 424. 



Becks Methode, Zellkerne mit Persio- 

 Essigsäure zu färben 167. 



Beckes Methoden zur mikroskopi- 

 schen Bestimmung von Mineralien 

 306. 



— mikrokonoskopischeMethode 464. 



— Skiodrome 307. 



Behrens' Methoden, organische Basen 

 nachzuweisen 305. 



Beizen, Cj^anophyceen 169. 



Bendas Methode zur Neurogliaunter- 

 suchung 157, 158. 



Benzopurpurin, alkoholische Lösun- 

 gen, Benutzung nach Heidenhain 

 .-> .■> -- 



Berliners Methode , Eosinzellen zu 

 färben 566. 



Beugungsbild, Allgemeines 1. 



Beugungstheorie, Allgemeines 1. 



Bindegewebe, Färbung nach Mallorv- 

 Woolley 568. 



— , Fibrillen, Färbung mit Pikroblau 

 421. 



Björkenheims Methode, Wurzelknoten 

 der Erle zu untersuchen 300. 



Blausäure, Mikrochemisches 227. 



Blei, Affinität zu verkalktem Gewebe 

 545. 



Bleu de Lyon - Pikrinsäure nach 

 Skrobansky 138. 



Blumstein -Judinas Methode, Pneu- 

 matisation des Vogelknochen- 

 marks zu untersuchen 560. 



Blut, Entnahme, nach Dschunkowsky- 

 Luhs 295. 



— , Farbstoff, Chemie 557. 



— , Trockenpräparate, Färbung nach 

 Lenzmann 431. 



Blutgefäßsystem, Allgemeines 142. 



— , Tunikaten 142. 



Blutkörperchen für Gonokokken- 

 nährboden 294. 



— , Fixierung und Färbung nach 

 Jolly 150. 



— , Kernteilung 150. 



— , Regeneration, Triton 148 ff. 



— , rote , Behandlung mit Jodsäure 

 430. 



— von Amphibien, Behandlung mit 

 Ammoniakdämpfen 556. 



— — — , — — Säuren 291. 



— , Zählung, Mischer nach Galli 148. 




Sach- Register, 



599 



Blutkörperchon, Zählung mit Bürkers 

 Apparat 554. 



— , — — Thoma-Zeiß 554. 



Blutlymphdrüsen des Schafes 14(). 



— , Färbung, Fixierung nach Weiden- 

 reich 147. 



— , Injektion nach Weidenreich 147. 



Blutplättchen, Abstammung 26(}. 



— , Färbung nach Helber '2G8. 



— , — — Preisich-Heim 2G6. 



— , — — Romanowsky '2G6. 



— \ Zählung nach Helber 150. 



Bödeckers Methode, Zahnschmelz zu 

 entkalken 190. 



Bösenbergs Methode, Spermatozoen 

 der Arachnoiden zu untersuchen 

 426. 



Boits Methode, Typhusbacillus zu 

 identifizieren 572. 



Boraxkarmin, Färbung von Knochen- 

 schnitten 327. 



Boraxperle, Nachweis von Edel- 

 metallen nach Donau 304. 



Borcherts Methode , Markscheiden 

 mit Osmiumsäure zu färben 

 153. 



Bordets Methode, Anaeroben zu kul- 

 tivieren 454. 



Bornsches Tischchen , Modifikation 

 nach Heidenhain 333. 



Bouins Fixierungsflüssigkeit, Nerven- 

 system von Foeten 279. 



Brands „Schnellfärbung" 458. 



Brasilin, Oxyderivate 83. 



Brauns Methode, künstliche Doppel- 

 brechung zu erzielen 302. 



braune Stärke , Mikrochemisches 

 226. 



Brechungsexponent von Flüssigkeiten 

 bei sehr kleinen Mengen zu be- 

 stimmen nach Pauly 344. 



Bredig-Schukowskys Methode, flüs- 

 sige Kristalle zu untersuchen 

 305. 



Brillantschwarz - Toluidinblau - Safra- 

 nin, Färbung der Sekretgranula 

 nach Fleischer 163. 



Brunnees Polarisations - Mikroskop- 

 polymeter 586. 



Bürkers Methode, Thrombocyten zu 

 gewinnen 269. 



— Zählkammer für Blutkörperchen 

 554. 



Bürzeldrüse, Fixierung und Färbung 

 nach Stern 569. 



Buntings Methoden , Lymphdrüsen 

 zu untersuchen 287. 



(vagnettos Methode, Hypophysis zu 

 färben 539. 



Cajals Methoden, siehe Ramön y 

 Cajal. 



Calcium, Nachweis 206. 



Camerons Methode, Retina von Am- 

 phibien zu untersuchen 290. 



Cardiadrüsen des Magens , Unter- 

 suchung nach Haanc 567. 



Carnoysche Flüssigkeit, Leber von 

 Amphibien 288. 



Cavalies Methoden, elektrisches Or- 

 gan der Torpedo zu untersuchen 

 278. 



Celloi'din, Einbettung beim Entkalken 

 190. 



— , — mit Aceton 415. 



— , Schnitte, Ankleben nach Di Cri- 

 stina 99. 



— , — , — — V. Tellyesniczky 137. 



Chitin, Mikrochemisches 391. 



Chlor , mikrochemischer Nachweis 

 199. 



Chlorophyll, Mikrochemisches 232. 



Chloroplasten, siehe Chromatophoren 

 585. 



Chromalaun, Herstellung von Chrom- 

 hämateinen 67. 



Chromalauncochenille , Herstellung 

 und Anwendung nach Hansen 

 87 tf. 



Chromalaundioxyhämatein nach F. C. 

 C. Hansen, Herstellung, Zusam- 

 mensetzung 70 ff., 74. 



— -Hämatein, Kernfärbung 69. 



— — -Schwefelsäure, Kernfärbung 

 69. 



Chromalaunpentaoxyhämatei'n 70 ff. 



Chromalauntetraoxyhämatein 70 ff. 



Chromalauntrioxyhämatein 70 ff. 



Chromatophoren, Selaginella 585. 



— , Untersuchung mit Flußsäure nach 

 Fischer 455. 



Chrom, Fixierung zur Hämatoxylin- 

 färbung, Chemie 66. 



Chromhämateine, Chemie 64. 



— , Herstellung nach F. C. C. Han- 

 sen 67. 



— , färberische Eigenschaften 69 ff'. 



— , Herstellung der Lösungen 70. 



Chromhämatoxylin nachApäthy, Fär- 

 bung von Malakostraken 142. 



Chromosmiumessigsäure , Fixierung 

 von Blutkörperchen 150. 



— nach Ferguson 584. 

 Chromotrope, Anwendung nach Hei- 

 denhain 340. 




600 



Sach- Register. 



Chromsilbermethode nach Oppel, Fär- 

 bung- des Bindegewebes in Blut- 

 lymphdrüsen 147. 



Cilien, Cyanophyceen 1(39. 



— , siehe auch Geißeln. 



Citronensäure, mikrochemischerNach- 

 weis 213. 



Claussens Methode, Askomyceten zu 

 untersuchen 298. 



Colostrum , Babs Untersuchungen 

 272. 



Courmont- Andres Methode, Harn- 

 säure nachzuweisen 417. 



Cristinas Methode , Celloidinschnitte 

 anzukleben 99. 



Cyanophyceen, Allgemeines 297. 



— , Anabaenin 457. 



— , Beizung, Färbung nach Philips 

 168. 



— , Chromatophoren 455. 



— , Cilien 169. 



— , Gas Vakuolen 457, 458. 



— , Mikrochemisches 252. 



— , Pseudomitosen 456. 



— . Schnelliärbung 458. 



^, Spitzenzellen 458. 



— , Untersuchung nach A. Fischer 

 455. 



— , — — Kohl 457. 



— , Zellinhalt 169. 



— , Zentralkörper 456. 



Cyanophycinkörner , Nachweis 169, 

 297. 



JJarmepithel, Schleimzone, Färbung 

 435. 



Darmkanal, Schleimhaut 439. 



Detinierlinie, Herstellung nach Peter 

 530. 



Degens Methode, Wabenstruktur im 

 Plasma hervorzurufen und zu 

 fixieren 552. 



Derbesia, Eiweißkristalle 299. 



Dioxyhämatein 59 ff. 



— -Eisenlack 59 ff". 



Doelters Heizvorrichtung für sehr 

 hohe Temperaturen 463. 



Dogiel-Bethes Färbung der Haar- 

 scheiben 160. 



Dolomit, Unterscheidung von Kalk- 

 spat 303. 



Donaggios Methode , degenerierende 

 Nervenfasern zu untersuchen 563. 



Donaus Methode, Metalle durch kol- 

 loidale Färbung der Boraxperle 

 nachzuweisen 304. 



Doppelbrechung für verschiedene 



Farben 302. 

 — , künstliche 302. 



— von Gallerte 301. 

 Doppelsäge nach G. Arndt 104. 

 Doppelultramikroskop Zeiß 484. 

 Dreuws Exstirpations- und Opera- 

 tionsfeder 137. 



Driessens ^Methode der Glykogenfär- 



bung 422. 

 Dschunkowsky-Luhs' Apparat zur 



Blutentnahme 295. 

 Dubreuils Methoden mit Pikroblau 



zu färben 420. 

 Duckwalls Geißelfärbung 588. 

 Dunkelfeldbeleuchtung von Leitz 114. 

 Dysenterie, Amöben, Kultur 140. 

 — , Bakterien 294. 



-cLdens Methode, Amyloiddegenera- 



tionen zu untersuchen 558. 

 Eier, Osmerus 166. 

 Einbetten in Pflanzenwachs 445. 



— nach Pavlow 186. 

 Einschließen in Glyzeringelatine 329. 

 Eisen, Affinität zu verkalkten Ge- 

 weben 546. 



— , mikrochemischer Nachweis 209. 



Eisenalaun für Hämatoxylinfärbung, 

 Chemisches 49 ff. 



Eisenchlorid , Unterscheidung von 

 Kalkspat and Dolomit 309. 



Eisenhämatoxylin , Darstellung der 

 Sekretgranula 163. 



— , Färbung von Blutkörperchen 150. 



— , Malakostraken 141, 142. 



— , — — Schneckenembryonen 162. 



— , Tunikaten 143. 



Eisenhämatoxylin-Erythrosin, Leber- 

 zellen der Amphibien 288. 



— -Pikrorubin, Leberzellen der Am- 

 phibien 288. 



Eisenlacke der Hämatoxylinoxyda- 

 tionsprodukte 60 ff. 



Eiweiß, Kristalle, Derbesia, Färbung 

 299. 



— , Lösung, Mikrochemisches 242. 



— , — , Ultramikroskopisches 423. 



Elaioplasten, Färbung, Nachweis 396. 



elektrisches Organ, Torjjedo, Nerven- 

 fasern 278. 



Endotropismus des Pollenschlauches 

 299. 



Entkalkung nach Bödecker 190. 



— — Rousseau 567. 



— von Zahnschmelz 190. 




Sach- Register. 



Gül 



entmilzto Tiere, Pankreas 165. 

 Entwässern, Verfahren Pavlows 186. 

 Eosin, Färbung, Allgemeines 337. 



— -Hämatoxylin, Färbung von Leu- 

 kocyten 272. 



— -Methylenblau, Färbung von Blut- 

 trockenpräparaten 431. 



— — , polychromes, Färbung der 

 Eosinzellen 566. 



eosinsaures Methylenblau - Methyl- 

 alkohol, Färbung von Mastzellen 

 273. 



Eosinzellen, Färbung 566. 



Ernsts Methode, Eiweißkristalle von 

 Derbesia zu färben 299. 



Erythrodextrin , Behandlung mit 

 Chromsäure 459. 



Essigsäure, Untersuchung von Throm- 

 bocyten 269. 



— , Wirkung auf Antliocyan 459. 



Eunice, Bauchsinnesorgane 424. 



Exstirpationsfeder nach Dreuw 137. 



-T ärbetrog nach Melissinos 130. 



Färbung, Theoretisches 546. 



Farben, Lösungen, Ultramikroskopi- 

 sches 423. 



Fermente, Mikrochemisches 250. 



Fernandez' Methoden, Tunikaten zu 

 untersuchen 142. 



Ferricochenillelösung , Herstellung 

 und Anwendung nach F. C. C. Han- 

 sen 86 ft'. 



Ferrodioxyhämatein,Herstellungnach 

 F. C. C. Hansen 61. 



FerrohämateVn , Herstellung nach F. 

 ('. C. Hansen 60. 



Ferrolacke des Hämatoxylin und der 

 Hämatei'ne 60 ff. 



Fett, Färbung durch Osmiumsäure, 

 Theoretisches 138. 



— , Nachweis im normalen Muskel 

 145, 146. 



— , — nach Keinath 145, 146. 



— , Verhalten bei Aceton -Celloidin- 

 behandlung 416. 



Fettsäuren , mikroskopischer Nach- 

 weis nach Fischler 262. 



Fickers Methode, Körnchen der Bak- 

 terien zu färben 449. 



Filter, gehärtete 433. 



Fiorentini-Signers Methode, Harnsedi- 

 mente zu färben 187. 



Fischers Glykogenfärbung 421. 



— Methode, Chromatophoren zu 

 untersuchen 455. 



Fischers Jletliode, Cyanophyceen zu 

 untersuchen 455. 



— Sperrvorrichtung für Einstellung 

 am Mikroskop 100. 



Fischlers Methoden, Fettsäuren und 

 Seifen im Gewebe nachzuweisen 

 262. 



Fixierungsflüssigkeit für Neuroglia 

 nach Rubaschkin 158. 



— , Wirkung auf Sekrete der Frosch- 

 haut 287. 



Fleischers Methode , Tränendrüsen 

 und Sekretgranuhi zu unter- 

 suchen 162 



Florencesche Kristalle , Erzeugung 

 nach Takayama 558. 



Florideenstärke,Mikrochemisches224. 



Floyds Methode , Nerven von Peri- 

 planeta zu untersuchen 143. 



flüssige Kristalle 303. 



Flußsäure, Untersuchung der Chro- 

 matophoren 455. 



Foetus, Nervensystem, Untersuchung 

 nach Joris 279. 



Formaldehyd, Wirkung auf Blut 

 557. 



Formolpikrinsäure nach Imhof 283. 



Frosch, Hautdrüsen 286. 



Fuchsin, Färbung der Hypophysis 

 541. 



— , Ultramikroskopisches 423. 



— -Resorzin , Färbung von elasti- 

 schen Fasern 567. 



(jadkiewicz' Methoden, Malakostra- 

 ken zu untersuchen 141. 



Galeotti, Färbung für Nebenniere 

 und Pankreas 165, 166. 



Gallerte, Doppelbrechung 301. 



— , Mikrochemisches 389. 



Gallis Älischer für Blutkörperchen- 

 zählung 148. 



Ganglienzellen, Färbung nach Roraa- 

 nowskischer Methode 427. 



Gasvakuolen , sogen. , der Cyano- 

 phyceen 457, 458. 



Gehlenit, optisches Verhalten 302. 



Geißeln , Färbung nach Duckwall 

 581. 



— , — — Hugh Williams 580. 



— , Kral 295. 



— , — — Moore 580. 



— , siehe auch Cilien. 



Gerbstoffe, Mikrochemisches 237. 



— , Vorkommen 239. 



Geruchknospen, Fische 161. 




602 



Sach- Register. 



Giemsas Modifikation der Romä- 

 nowski- Noclitschen Cliromatin- 

 fiirbung 449. 



Gitterpoliirisation 30(i. 



Glas, Brechungsexponent 307. 



— , chemische Zusamiuensetzung 307. 



Glas' Methode, Nasenschleimhaut zu 

 untersuclien 28(j. 



— — , Sarkolyten zu fiirben 427. 



Glimmerplatten für Massenfiirbung 

 von Mikrotomschnitten 330. 



Glykogen, Färbung nacli Driessen 

 ' 422. 



— , — — Fischer 421. 



— ■, — , vergleichende Untersuchun- 

 gen 288. 



— , Mikrochemisches 220. 



Glykoside, Mikrochemisches 230. 



Glykosurie, Glykogen 288. 



Glyzeringelatine, Wirkung auf Kar- 

 minfärbungen 327. 



Goldchlorid, Färbung des Nerven- 

 systems nach Nabias 139. 



Gonokokken, Kultur nach Stroß 294. 



Grabowers Methoden, Nervenfasern 

 in Kehlkopfmuskeln zu unter- 

 suchen 279. 



Gräfes Methoden, verholzte Mem- 

 branen zu färben 581. 



Granulationen, Fixierung mit Formol- 

 Miiller 550. 



— ■, Theoretisches 552. 



— , Untersuchung nach Altmann 550. 



— , — — Schridde 550. 



Grenzscheiden der Knochenkanäl- 

 chen, Färbung mit Hämatoxvlin 

 326. 



Groots Gelatine-Zinkweißkitt für Prä- 

 paratengläser 136. 



Guiraud-Gauties Methode, altes Bak- 

 terienmaterial zu färben 449. 



Gummi, Mikrochemisches 289. 



Guttapercha, Mikrochemisches 330. 



Gymnospermen , Makrosporenmem- 

 bran 583. 



fiaanes Methode, Cardiadrüsen des 

 Magens zu untersuchen 567. 



Haare, Katze 285. 



Haarscheiben , Untersuchung nach 

 Dogiel-Bethe 160. 



— , — — Pinkus 160. 



Ilämalaun - Bismarckbraun , Speichel- 

 drüse 285. 



— -Mucikarmin , Nasenschleimhaut 

 286. 



Hämalaun-Mucikarmin, Speicheldrüse 

 285. 



— -Orange - Rubin S, Färbung 



von 



Blutlymphdrüsen 147. 

 Hämatein, Chemie 45, 46 ff. 

 — , Herstellung von Lösungen nach 



F. C. C. Hansen 81 ff. 

 — , Oxydationsstufen 59 ff". 

 Hämatein - Bismarckbraun , Färbung 



von Mucin 567. 



— -Ferrolack 60. 



— -Mucikarmin. Färbung von Mucin 

 567. 



— -Säurefuchsin -Pikrinsäure, Fär- 

 bung von elastischen Fasern 

 567. 



Hämatoxylin, Anwendung nach Fisch- 

 ler beim Fettsäurenuchweis 263, 

 264. 



— , Chemie 45 ft'. 



— , Färbung von Bindegewebe in 

 Blutlymphdrüsen nach Mallorv 

 147. 



— , — — Cyanophyceen 168. 



— , — — Knoclienschnitten 326 ff. 



— , — — Muskeldegeneration 266. 



— , — — Nebenniere nach Srdinko 



löi. 



Nervenfasern nach K( 



zowsky 277. 

 — , — pflanzlicher Zellkerne 460. 

 — , — von Pollenschläuchen 299. 

 — , — — Spermatozoon 426. 

 — , — des Synapsisstadiums 460. 

 — , Oxydation und Oxydationsstufen 



48 ff. 

 Hämatoxylin- Alaunkarmin , Färben 



von Ascidienlarven 425. 



— -Eisenalaun nach F. C. C. Hansen 

 55 ff'. 



— — , Regeneration alter Lösungen 

 nach F. C. C. Hansen 56. 



— -Eosin, Färbung von Mucin 567. 



— — , Speicheldrüse 285. 



— -Erj'throsin, Färbung von Sekret- 

 kapillaren und Kittleisten 567. 



— -Kongorot, Speicheldrüse 285. 



— -Rubin nach Head 145. 

 Hämatoxyline, methylierte 84. 

 Hansens Methode, Cochenille-Lösun- 

 gen herzustellen 84 ff'. 



— — der Hämateingewinnung und 

 -Verwendung 45 tW 



— — , Hyalinknorpol zu untersuclien 

 433. 



Hardestys Methode , Neuroglia zu 

 untersuchen 157. 




Sach- Register. 



GO: 



Harn, Seiliuiente zu färben nach 

 Fiorentini-Signer 187. 



Harnsäure, Nachweis nach Courmont- 

 Andre 417. 



Harze, Mikrochemisches 229. 



Hautsinnesorgane , Untersuchung 

 nach Pinkus IGO. 



Hayems Sublimatlösung , Fixierung 

 von Lungengewebe 440. 



Heads Methode , Solenogastres zu 

 untersuclien 144. 



Heidenhains Methode, Knochenknor- 

 pel zu färben 325. 



— — , Mikrotomschnitte zu färben 

 auf GHmmerplatten 330. 



— — , — zu strecken 333. 



— — , mit Azokarmin zu färben 

 339. 



— — , — Chromotropen zu färben 

 340. 



— — , — Trichloressigsäure zu fixie- 

 ren 321. 



Heinemanns Methoden, Ascidien- 



larven zu untersuchen 424. 

 Heizvorrichtung nach Doelter (1400^) 



4ti3. 

 Helbers Methode, Blutplättchen zu 



untersuchen und zu zählen 150, 



268. 

 Hellers Neutralrotgelatine 292. 

 Henlesche Scheide, Färbung nach 



Ruffini 447. 

 Henneberg-Leitzsches Mikrotom 125. 

 Hermannsche Flüssigkeit , Fixieren 



von Arachnoiden - Spermatozoon 



426. 

 Hertzsches Gitter 306. 

 Herz, Malakostraken 141. 

 — , Tunikaten 142. 

 — , Ventrikel, Nervenknoten 442. 

 Hexaoxyhämatein, Färbkraft iio. 

 Hilfsscheide der Nerven, Färbung 



nach Ruffini 447. 

 Hindens Methode, Dolomit und Kalk- 

 spat zu unterscheiden 303. 

 Hirschlers Methoden, Lepidopteren- 



puppen zu untersuchen 265. 

 Holz, Gräfes Reaktionen 581. 

 Horngewebe, Färbung von Hyphomy- 



ceten 572. 

 Hugh Williams' Geißelfärbung 580. 

 Hundswut, Veränderungen in den 



Nervenzellen 443. 

 Hyalinknorpel, Färbung 433. 

 Hydrochinon , Untersuchung von 



Nervengewebe 274. 



Hyphomyceten, Färbung im Horn- 

 gewebe 572. 

 Hvpophysis, Färbung nach Cagnetto 

 ' 539. 



lUings Methode , Kugelzellen der 

 Glandulae vesiculares zu unter- 

 suchen 570. 



— — , Leber zu untersuchen 436. 



— — , submaxillare Speicheldrüse zu 

 untersuchen 284. 



Imhofs Methoden, Lumbaimark der 

 Vögel zu untersuchen 283. 



Indigo, Nachweis nach Leake 461. 



Indikan, Mikrochemisches 231. 



Indol, Mikrochemisches 251. 



Indulin-Eosin-Aurantia, Färbung von 

 Leukocytengranulationen 429. 



Injektion nach Konaschko 179. 



— — McFarland 555. 



— — Myers 555. 

 Interferenzfarben, Abhängigkeit von 



der Dispersion 302. 



— , flüssige Kristalle 303. 



Inulin, Mikrochemisches 219. 



intravitale Färbung, siehe vitale F. 



Isobutylalkohol - Schwefelsäure , Fär- 

 bung verholzter Membranen 582. 



Isolieren von Mikroorganismen 10 ff. 



J od, mikrochemischer Nachweis 199. 



Jodgummimethode Ehrlichs , Gly- 

 kogennachweis 273. 



Jodsäure-Methylviolett, Wirkung auf 

 rote Blutkörperchen 430. 



— -Neuviktoriagrün, Wirkung auf 

 rote Blutkörperchen 430. 



JoUys Methoden, Blut zu unter- 

 suchen 148. 



Joris' Methoden , Nervensystem von 

 Foeten zu untersuchen 279. 



Ivalilauge, Untersuchung von Thruiii- 



bocyten 269. 

 Kalium, mikrochemischer Nachweis 



205. 

 Kaliumbichromat zur Oxydation der 



Hämateine 72 if. 

 Kaliumchromat zur Oxydation der 



Hämateme 72 ff. 

 Kaliumkarbonat , Unterscheidung 



seiner Modifikationen 587. 

 Kalkschwämme, Skelett 587. 




604 



Sach- Register. 



Kalkspat, Unterscheidung von Dolo- 

 mit 303. 



Kallose, Mikrochemisches 392. 



Kamons Methode, Genichknospen zu 

 untersuchen 1(51. 



Kapselfärbung nach Richard Muir 

 581. 



Karakacheffs Methode, Pankreas zu 

 untersuchen 435. 



Karbdi, Lösung, Fixierung des Her- 

 zens 442. 



Karbolfuchsin , Färbung von Alnus- 

 wurzelknoten 300. 



Karbonsäuren, aliphatische, mikro- 

 chemischer Nachweis 212. 



Karotin, Mikrochemisches 233. 



Karzinom, Parasit 451. 



Kataphorese, zur Untersuchung kol- 

 loidaler Lösungen 305. 



Katgut, Sterilisieren 454. 



Kathämoglobin 557. 



Kautschuk, Mikrochemisches 230. 



Kehlkopfmuskeln, Untersuchung nach 

 Grabower 279. 



Keinaths Methoden, Fett nachzu- 

 weisen 145, 146. 



Kern, Cyanophyceen 169. 



— , Färbung mit Chromhämatein nach 

 F. C. C. Hansen 69, 76 ff. 



— , — — Hämatoxylin nach F. C. 

 C. Hansen 57 ff. 



— , — — Persioessigsäure nach 

 Beck 167. 



— , Mikrochemisches 247. 



Kieselsäure , mikroskopischer Nach- 

 weis 204. 



Kitt für Präparatengläser nach de 

 Groot 136. 



Kittleisten, Färbung 285, 287. 



— , — mit Hämatoxylin- Ery throsin 

 567. 



Knochen, Einbettung und Schneiden 

 nach Blumstein- Judina 561. 



— , Untersuchung nach Meyburg 

 153. 



Knochenfische , Hirn , Nervenfasern 

 565. 



Knochenknorpel, Färbung nach Hei- 

 denhain 325. 



Knochenlamellen, Färbung nach Hei- 

 denhain 326, 327. 



Knorpelgewebe, Färbung 433. 



Kobalt, Affinität zu verkalkten Ge- 

 weben 546. 



Kohle , mikrochemischer Nachweis 

 204. 



Kohlehydrate, Mikrochemisches 218. 



kohlensaure Salze, mikrochemischer 

 Nachweis 204. 



Koiranskys Methoden, Leberzellen 

 der Amphibien zu untersuchen 

 288. 



kolloidale Lösungen von Edelmetal- 

 len 304. 



— — , Erkennung nach Vanino- 

 Hartl 305. 



— — , Untersuchung mittels elek- 

 trischer Kataphorese 305. 



— Natur der Stärkekörner 458. 



Konaschkos Injektionsmethode 179. 



Kongofarbstofte, alkoholische Lösun- 

 gen, Benutzung nach Heidenhain 

 337. 



Kongokorinth, Färbung der Tränen- 

 drüse 163. 



Kopsch" Methoden, Thrombocyten zu 

 untersuchen 268. 



Korallin-Pikroblau 421. 



Kozowskys Methode, Nervenfasern 

 zu färben 277. 



Krals Methoden der Bakterienfärbung 

 296. 



— — — Geißelfärbung 295. 



— Hefefärbung 296. 



Kraus' Methode, Hyphomyceten zu 



färben 572. 



Krebs' Modifikationen der Vergol- 

 dungsmethoden 282. 



— , siehe Karzinom. 



Kreosot zum Einbetten 186. 



Küvette, heizbare, Zeiß 484. 



Kugeigranit 588. 



Kugelzellen in den Glandulae vesi- 

 culares 570. 



Kultur von Amöben nach Lesage 140. 



— — Mikroorganismen nach Schon- 

 ten 10 ff. 



— — Trypanosoma Paddae nach 

 Thiroux 140. 



Kupfer, Affinität zu verkalkten Ge- 

 weben 546. 

 Kupferacetat zum Fettsäurenachweis 



262. 

 Kutikula, Mikrochemisches 387. 



L/acke des Ilämatoxylins , Chemie 

 50 ff. 



Lams' Methode, Teleostierei zu unter- 

 suchen 166. 



Langerhanssche Inseln, Untersuchung 

 nach Karakacheft' 435. 



— — , Färbung mit Thionin-Karbol 

 438. 




Sach- Register. 



605 



Laß' Methode, Piilex zu üxieren 

 425. 



Leakes Methode, Indigo nachzuwei- 

 sen 461. 



Leber, Fixierung 436, 437. 



— , Plasinazellen 1(j4. 



Leberzellen. Ampliibien 288. 



Lecithine, Färbung durch Osraium- 

 säure 138. 



Leinöl, Injektion von Pankreasge- 

 fäßen 439. 



Leitfähigkeit, elektrische, Bestim- 

 mung nach Ocker-Blom 451. 



Leitzsche Dunkelfeldbeleuchtung bei 

 Verwendung von Ölimmersion 

 114. 



Lenhossek-Bakays Modifikation der 

 Cajalschen Versilberungsmethode 

 264. 



Lenzmanns Methode, Bluttrockenprä- 

 parate zu färben 431. 



Lepidopteren, Puppen -Regeneration 

 265. 



Leptomin, Mikrochemisches 254. 



Lesages Methode, Dysenterieamöben 

 zu kultivieren 140. 



Leucin, Mikrochemisches 227. 



Leukocyten, Färbung 272, 395. 



— , Granula, Färbung 429. 



— , — acidophilc 429. 



Leyens Methode, Schleimzone des 

 Magen- und Darmepithels zu fär- 

 ben 435. 



lipoide Körnchen, Untersuchung nach 

 Stern 570. 



Londons Methode, Nervenfibrillen zu 

 versilbern 448. 



Lumbricus, Spermatogenese 265. 



Lunge, Fixierung nach Abrikossoif 

 440. 



Lungenphthise, Anatomie 439. 



Lupinus, Plasmodesmen 300. 



Lymphdrüsen, Färbung nach Bartel- 

 Stein 568. 



— , Bunting 287. 



Lymphocyten, Färbung nach Bartel- 

 Stein 568. 



— von der Ratte 427. 



-Alagen, Cardiadrüsen 567. 



— , Epithel, Schleimzone, Färbung 

 4.35. 



Magnesium, mikrochemischer Nach- 

 weis 208. 



Malachitgrünagar, Nachweis von Ty- 

 phus 453. 



Malakostraken, Herz, Struktur 141. 



Malariaplasmodien, Nachweis in Ge- 

 hirnschnitten 417. 



Mangan , mikrochemischer Nachweis 

 211. 



Manganhämatein, Herstellung nach 

 F. C. C. Hansen 79. 



]\Iarchis Methode, Vergleich mit der 

 Donaggioschen 564. 



Marks Paraffinwasserbad 548. 



Markscheiden, Färbung mit Osmium- 

 säure nach Bor eher t 154. 



— , — nach Ruffini 447. 



— von niederen Wirbeltieren, Unter- 

 suchung nach Borchert 153. 



Masern, Bakteriologisches 450. 



Massenfärbung auf Glimmerplatten 

 330. 



Mastzellen, Färbung nach Bab 272. 



Meißnersche Körperchen , Versilbe- 

 rung der Neurofibrillenenden 

 565. 



Melangeur nach GalH 148. 



Melilith, optisches Verhalten 302. 



Melissinos' Färbetrog 130. 



Membran, pflanzliche, Gitterstruktur 

 306. 



— , siehe auch Zellmembran. 



metachromatische Körner, Mikro- 

 chemisches 249. 



Metalle, Nachweis durch kolloidale 

 Färbung der Boraxperle 304. 



Metailfärbungen pflanzlicher Häute, 

 Pleochroismus 349 fl". 



— — — , verkalkter Gewebsteile 

 545. 



Methylenazur, Färbung von Hyplio- 

 myceten 572. 



— -Methylenblau-Eosin , Chromatin- 

 färbung nach Giemsa 449. 



Methylenblau, Färbung von Mast- 

 zellen 273. 



— , pt)lychromes, Färbung von Pan- 

 kreas 435. 



— , — , Metachromasie 286. 



— . — , Untersuchung von Hantödem 

 nach Ziegler 145. 



— , — -Eisenhämatoxylin vanGieson, 

 Färbung von Hautödem 145. 



— -Eosin, Färbung des Thrombo- 

 cytenkerns 271. 



— -Hämatoxylin, Färben von Asci- 

 dienlarven 425. 



— -Milchsäure, Färbung von Bakte- 

 riengranula 449. 



— -Neutralrot , vitale Färbungen 

 nach Ruzicka 548. 




606 



Sach - Register. 



Methylp3"ronin, Färbung der Plasma- 

 zellen der Leber 1(34. 



Methylviolett, Färbung von Amyloid 

 558. 



— , — — Thrombocyten 270, 



Meyburgs Methode , Knochenschliffe 

 zu untersuchen 153. 



Meyers Methode, Amyloid haltbar zu 

 färben 571. 



Michniewicz' Methode, Plasmodesmen 

 zu untersuchen 300. 



Mikrochemie, botanische 194 ft'. 



Mikrometerschraube , Sperrvorrich- 

 tung nach A. Fischer 100. 



Mikroorganismen , Isolieren nach 

 Schonten 10 ff. 



Mikrotom nach Henneberg von Leitz 

 125. 



Milchsäure , mikrochemischer Nach- 

 weis 214. 



Mingazzinische Flüssigkeit, Fixierung 

 von Lymphzellen 427. 



Mischbild 7. 



Mischer für Blutkörperchenzählung 

 nach Galli 148. 



Mitochondrien, Färbung nach Benda 

 265. 



Moores Geißelfärbung 580. 



Moose, Membran 377. 



Muchämatei'n- Erythrosin , Färbung 

 von Mucin 567. 



— — , — — Speicheldrüse 285. 



Mucin, Färbemittel 567. 



Müllersche Flüssigkeit, Nachwirkung 

 bei gefärbten Präparaten 324. 



Muirs Kapselfärbung 581. 



Musculus stapedius, Nervenendigun- 

 gen, Präparation 280. 



Muskel, Gehalt an Fett 145, 146. 



Muskeldegeneration , Lepidopteren- 

 Färbung 266. 



Myers' Injektionsmethode 555. 



Myriophj'ilin, Mikrochemisches 253. 



JN ablas' Methode , Nervenfasern zu 



untersuchen 139, 278. 

 Nährböden, elektrische Leitfähigkeit 



451. 

 Nasenschleimhaut , Drüsen , Leuko- 



cyten 286. 

 Natrium, mikrochemischer Nachweis 



206. 

 Nebennieren, Amphibien 164. 

 — , Färbung nach Srdinko 437. 

 Nephelometer von Richards- Wells 



304. 



Nerven, Periplaneta 143. 



— , Solenogastres 144. 



Nervenfasern, degenerierende, Fär- 

 bung nach Donaggio 563. 



— , Kehlkopfmuskeln 279. 



Nervenknotendes Herzventrikels 442. 



Nervensystem, Färbung mit Gold- 

 chlorid nach Nabias 139. 



Nervenzellen , Veränderungen bei 

 Hundswut 443. 



— , Vergoldung nach Rossi 273. 



— , Versilberung nach Ramön y Cajal 

 443. 



Netz, Präparation und Untersuchung 

 nach Schwarz 434. 



Netzhaut, Untersuchung nach Came- 

 ron 290. 



— , Versilberung 291. 



Neumayers Objektträgergestell 181. 



N'eurofibrillen , Färbung nach Ko- 

 zowsky 277. 



Vergolden nach Ramön y Cajal 

 445. 



Versilberung nach Bielschowsky 

 564. 



— — Ramön y Cajal 273, 448, 

 565. 



— von Endigungen bei Tast- 

 körperchen etc. 565. 



— -Vergoldung nach Lenhos- 

 sek-Bakay 264. 



— von Lumbricus 444. 

 Neurotibrillennetz, Retina 155. 

 Neuroglia , Färbung nach Benda- 



Huber 157. 

 — , — — Rubaschkin 158. 

 — , Vergoldung nach Ramön y Cajal 



444. 

 — , — von Lumbricus 444. 



279. 

 nach Rothber^er 



292. 



Neutralrotgelatine nach Heller 292. 

 Nicolies Methode , Agglutination 



der Bakterien zu untersuchen 



454. 

 Niederschläge, feinste, Konstatierung 



nach Richards- Wells 304. 

 nigrosinophile Granulationen , Fär- 

 bung nach Bab 273. 

 Nilblau, Färbung von Mastzellen 273. 

 Nißl-Substanz , chromophile Körner 



144. 



— — , von Periplaneta 144. 

 Nubian Waterproof Blacking, Her- 

 stellung von Richtlinien .532 ff". 



Nuklein, Mikrochemisches 247. 



Neuron, Histogenese 

 Neutralrotagar 




Sach- Register. 



607 



Objektträgergestell nach Neumayer 

 181. 



Ocker -Bloms Methode, elektrische 

 Leitfähigkeit von Nährböden zu 

 bestimmen 451. 



Ödem der Haut, Untersuchung nach 

 Ziegler 145. 



Öle, ätherische '214. 



— , fette,Nach\veis inPflanzen 214,21G. 



— , Reinheit, Prüfung mit dem Ultra- 

 mikroskop 487 If. 



■;— , Umwandlung in Oleosole 485 fi". 



Ölkörper, Lebermoose, Mikrochemi- 

 sches 215. 



Öffnungsbeugung 3. 



Oldekops Nährboden , Neutralrot- 

 färbung 292. 



Oleinsäure, Färbung durch Osmium- 

 säure 138. 



Oleosole, Ultraraikroskopisches 481. 



opaleszierende Niederschläge, Unter- 

 suchung nach Richards- Wells 304. 



Operationsfeder nach Dreuw 137. 



optische Achsen, Dispersion 464. 



— — , Winkelmessung 4()4. 



organische Basen, Mikrochemisches 

 305. 



Osmerus, Eier 166. 



Osmiumessigsäure, Fixieren vonKehl- 

 kopfrauskeln 279. 



Osmiumsäure, Färbung von Fett, 

 Theoretisches 138. 



— , — — Markscheiden nach Bor- 

 chert 153. 



— , Fixierung von Ascidienlarven425. 



— , — desNervensy.stemsvonFoeten 

 280. 



— , — von Plasmastrukturen 553. 



Oxalsäure, Nachweis und Vorkommen 

 im Pflanzenreich 213. 



r alladiumchlorür , Fixierung von 

 Haut nach Pinkus 160. 



Pankreas entmilzter Tiere 165. 



— , Färbung nach Karakacheff 435. 



— , Injektion und Untersuchung nach 

 Pensa 438. 



Paraffinwasserbad nach Mark 548. 



Paulys MetlKjde, Brechungsexpo- 

 nenten von Flüssigkeiten zu be- 

 stimmen 344. 



Pavlows Einbettungsverfahren 186. 



Pektinstoffe, Mikrochemisches 392. 



Pensas Methoden, Pankreas zu unter- 

 suchen 438. 



Pentaoxyhämatein, Färbkraft 63. 



Periplaneta, Nerven 143. 

 Persio, Farbstoff 166. 

 Persio- Essigsäure, Färbung von 

 Prianzenkernen 167. 



— — -Gentianaviolett 168. 



— — -Kernscliwarz 167. 



— — -Methylgrünessigsäure 167. 



— — -Nigrosin 167. 

 Pest, Mikroben 452. 



Peters Methode, Richtebene zu mar- 

 kieren 530. 



Petromyzon, Riechzellen 160. 



Pflanzenwachs , zum Einbetten 445. 



Phäophyceenstärke, Mikrochemisches 

 225. 



Phenole, Mikrochemisches 227. 



Phenylhydrazin , mikrochemischer 

 Zuckernachweis 298. 



Phillips' Methoden, Cyanophyceen 

 zu untersuchen 169. 



Phloroglucin, Mikrochemisches 227. 



Phosphorsäure , mikrochemischer 

 Nachweis 201. 



— , Vorkommen im Pflanzenreich 203. 



Physoden, Mikrochemisches 253. 



Pighinis Methode, Selachierembryo- 

 nen zu untersuchen 441. 



Pigmente von Bakterien, Pilzen, 

 höheren Pflanzen, Mikrochemi- 

 sches 234. 



Pikrinsäure, Fixierung der Sekret- 

 granula 163. 



Pikrinsäure -Säurefuchsin , Differen- 

 zierung von Bindegewebs- und 

 Muskelfasern 142. 



— -Sublimat nach ludiof 283. 

 Pikroblau nach Dubreuil 420. 

 Pilze, Membran 376, 391. 



Pinkus' Methode, Hautsinnesorgane 

 zu untersuchen 160. 



Planorbis, Niere, Herz, Perikard 161. 



Plasma, Mikroclieiuisches 395. 



— , Vitalfärbung 399. 



— , Wabenstruktur 552. 



Plasmazellen, Körnelungen 550. 



— , Leber 164. 



Plasmodesmen , Präparation nacii 

 Michniewicz 300. 



Platinchlorid, Fixierung von Plasma- 

 strukturen 553. 



Platinnitrat, Fixierung von Nerven- 

 gewebe nach Rossi 273. 



Pleochroismus bei Silberkristallen 349. 



— , Erklärung von Braun 30(). 



— nach Metallfärbungen 349 ff. 

 Poecilasma, Untersuchung, Färbung 



144. 




608 



Sach- Register. 



Pötzsch' Methode, Schneckenembryo- 

 nen zu untersuchen 161. 



Polarisations - Mikroskoppolymeter 

 nach Brunnee 586. 



Pollenschläuche, Endotropismus 299. 



— , Färbung 299, 463. 



Porciles Methoden, Plasmazellen der 

 Leber zu untersuchen 164. 



Präzisionssäge nach G. Arndt 104. 



Preisich-Heims Methoden, Blutplätt- 

 chen zu untersuchen 266. 



Projektionsapparat Leitz 362. 



Protargol zur Versilberung nach 

 Regaud-Dubreuil 418. 



Proteosomen, Färbung, Nachweis 

 397. 



Protoplasma, siehe Plasma. 



Prytz' Methode, Lage einer spiegeln- 

 den Fläche mikroskopisch zu 

 bestimmen 588. 



Pseudomitosen der Cyanophyceen 

 456. 



Pulex, Fixierung 425. 



Pyrenoide, Nachweis 246, 



'Quantitative Analyse in der Mikro- 

 chemie 398. 



Quecksilbertropfen , Wachstums- 

 erscheinungen 465. 



Quinckes Theorie der Tropfen- und 

 Schaumbildung 301. 



xvaggi, Pilzkulturen davon 41. 

 Ramön y Cajals Vergoldungsmethode 

 445. 



— — Versilberungsmethode 155, 

 273, 443, 448. 



— — — , modifiziert nach Lenhos- 

 sek-Bakay 264. 



Raths Gemisch, Fixierung von Ner- 

 vengewebe 145. 



Reagentien, Prüfung auf Reinheit 

 413. 



Refraktionsbild 5. 



Regaud - Dubreuil's, Versilberungs- 

 methüde 418. 



Resorcin, Differenzierung der Kern- 

 färbungen nach Nabias 139. 



— -Fuchsin , Färbung elastischer 

 Fasern in Bhitlymphdrüsen 147. 



Retina, Neurofibrillennetz 155. 

 Riiizopus Oryzae, Mutation 41. 

 Richards-Wells' Nephelometer 304. 

 Richtebene, Markierung nach Peter 

 530. 



Riechzellen, Petromyzon 160. 



Rohrzucker, Mikrochemisches 218. 



Romanowskische Methode, Schnitt- 

 färbung nach Sternberg 416. 



Romanowski - Nochtsche Chromatin- 

 färbung, modifiziert von Giemsa 

 449. 



Rossis Methoden, Nervenzellen zu 

 vergolden 273. 



rote Stärke, Mikrochemisches 225. 



Rubaschkins Methode, Neuroglia zu 

 untersuchen 158. 



— Fixierungsflüssigkeit 158. 

 Rückenmark , Untersuchung nach 



Varela de la Iglesia 445. 

 Ruffinis Methode, Nervenscheiden zu 



färben 447. 

 Rüzickas Methode der vitalen Färbunir 



548. 



— Theorie der vitalen Färbung 91. 



bafranin, Färbung von Glykogen 

 421. 



Safranin-Bendasche Mischung, Fär- 

 bung von Blutkörperchen 150. 



— -Pikroblau 421. 

 salizylsaures Calcium zum Seifen- 

 nachweis 263. 



Salpetersäure, mikrochemischer Nach- 

 weis 200. 



salpetrige Säure , mikrochemischer 

 Nachweis 200. 



Saponarin, Mikrochemisches 232. 



Sarkolyte, Färbung 427. 



Sarkom, Parasit 451. 



Sauerstoff', Nachweis 197. 



Scharlachrot-Hämatoxylin , Färbung 

 von Leukocyten 272. 



— -Osmiumsäure, Färbung der Bür- 

 zeldrüsen 569. 



Schleim, Färbung mit Hämatei'nen 64. 



— , Mikrochemisches 389. 



Schleimhaut des Darmkanals 439. 



Schleimkugeln, Cyanophyceen 169. 



Schleimzone des Magen- und Darm- 

 epithels, Färbung 435. 



Schmelzlamellen 191. 



Schneider- Justs Methode, Oleosole 

 herzustellen und zu untersuchen 

 481 ff. 



Schnellfärbung nach Brand 458. 



Schnitte, Färbung mit der Roma- 

 nowskischen Methode 416. 



Schnittstrecken nach Siding 177. 



Scholz' Methode der Aceton-Celloidin- 

 einbettung 415. 




Sacli- Register, 



G09 



Öchoutens Methode, Mikroorganismen 

 zu isolieren lOflF. 



Schröders Methode , Bauchsinnes- 

 organe von Eunice zu unter- 

 suchen 424. 



Schüllersclie Parasiten 45"2. 



Schwämme, Entlvalkung 191. 



Schwarz' Methode , Netz des Kanin- 

 cliens zu untersuchen 434. 



Schwefel, mikrochemischer Nachweis 

 198. 



Seh wefelkohlenstofit". Mikrochemisches 

 2'2G. 



Schweißdrüse, Katze 285. 



Sediment des Harns , Färben nach 

 Fiorentini-Signer 187. 



Seifen, mikrochemischer Nachweis 

 263. 



Sekretgranula, Fixierung mit Pikrin- 

 säure 103. 



Sekretkapillare , Darstellung mit 

 Sublimat 162. 



— , Färbung mit Hämatoxyhn-Ery- 

 throsin 567. 



— , Speicheldrüse 284. 



Selacliier, Embryonen, Untersuchung 

 nach Pighini 441. 



Selaginella, Plasmahaut der Chloro- 

 plasten 585. 



Senfts Methode,Zucker mikrochemisch 

 nachzuweisen 298. 



Shattucks Methode, Mikrotomschnitte 

 aufzukleben 463. 



Sidings Metliode des Paraftinsclinei- 

 dens und Schnittstreckens 177. 



Silber, Aftinität zu, verkalktem Ge- 

 webe 545. 



— , Kristalle 349. 



Silikatschmelzen, mikroskopische Un- 

 tersuchung 463. 



Skiodrome nach Becke 3u7. 



Skrobanskys Methode der Bleu tle 

 Lyon - Pikrinsäurefärbung 138. 



Solenogastres, Fixierung 144. 



Sommerfeldts Methode, Achsenwinkel 

 bei kleinen Kristallpräparaten zu 

 bestimmen 35(j. 



Speicheldrüse, submaxiUare 284. 



Spenglers Formalinmethode zur Rein- 

 züchtung von Tuberkelbakterien 

 450. 



Spermareaktion nach Takayama 558. 



Sperrvorrichtung für die Einstellung 

 am Mikroskop nach A. Fischer 

 100. 



spiegelnde Fläche , mikroskopische 

 Lagebestimmung 588. 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXII, 4. 



Spirochaete pallida, Färbung 575 ff. 



— — , — nach Baudi-Simonelli 579. 



— — , — — Giemsa 576. 



— — , — — Oppenheim -Sachs 579. 



— — , — — Reitmann 577. 



— — , — mit Kapriblau 576. 



— — . — — Karbolfuchsin 576,579. 



— — , — — Karbolgentianaviolett 

 579. 



— — . — — Methylenazur 576. 



— — , Nilblau BR 576. 



— — , Nachweis nach Noeggerath- 

 Staehelin 578. 



Spitzenzellen der Cyanophyceen 458. 



Sporen, Bakterien 573. 



— , Lsolieren nach Scliouten Ulf. 



Srdinkos Methode, Nebenniere zu 

 untersuchen 437. 



Stärke, Färbung, Mikrochemisches 

 221. 



Stärkekörner, Behandlung mit Chrom- 

 säure 459. 



— , Färbung nach Fischer 458. 



— , kolloidale Natur 458. 



Stahl, phusphorreicher, Erkennung 

 465. 



Sterns Methode. Bürzeldrüse zu un- 

 tersuchen 569. 



Sternbergs Methode, 



Schnittfiirbung 



mit Romanowskis Verfahren zu 

 erzielen 416. 



Stoeltzners Methode, verkalkte Ge- 

 webe zu fiirben 545. 



Strecken der Mikrotoraschnitte nach 

 lleidenhain 333. 



Stroß' ^lethode, Gonokokken zu kul- 

 tivieren 294. 



Stückfärbung mitChromhämatein 69 ft'. 



— — lläuiateinen 64. 



Sublimat. Darstellung von Sekret- 

 kapillaren 162. 



— , Fixierung von Geruchsknospen 

 161. 



— , — — Lymphzellen 427. 



— , — — Selacliierembryonen 441. 



Sublimat-Ameisensäure,Fixierungvon 

 Nervengewebe 447. 



Sublimateisessig, Fixieren des Ner- 

 vensystems von Foeten 280. 



submaxiUare Speicheldrüsen 284. 



1 akayamas V^erbesserung der Me- 

 thode , Florencesche Kristalle 

 nachzuweisen 558. 



l'anninsafraninfärbung des Glyko- 

 gens 421, 456. 



39 




610 



Sach-Reffister. 



Tastscheiben, Versilberung der Neu- 



rolibrillenenden 565. 

 Teleostier, Ei 1(5G. 

 Tetrajotlfluorescin, Färbung von 



Thrombocj^ten 270. 

 Tetraüxyliämatein-Eisenbick G3, G4. 

 — , Färbkraft 63. 

 — , Herstellung etc. 59 ff. 

 Tliionin, Färbung von Blutkörper- 

 chen 150. 



— . Mastzellen 273. 



— , — der Schleimzone des Darm- 

 epithels 435. 

 — , Metachroraasie 286, 287. 

 Thionin-Karbol, Färbung der Langer- 



hansschen Inseln 438. 

 — -Fikrinsäure,Färbungder Langer- 



hansschen Inseln 438. 

 Thiroux' Methode, Trypanosomen zu 



kultivieren 14o. 

 Thoma-Zeiß, Zählapparat für Blut- 

 körperchen 554. 

 Thrombocvten, Färbung nach Ehr- 

 lich 270. 

 — , Konservierung nach Kopsch 269. 

 — , — — Kopsch 268. 

 — . Untersuchung nach Bürker 269. 

 — , Verdauung nach Kopsch 271. 

 Tibertis Methoden, Nebennieren und 

 Pankreas zu untersuchen 164, 

 165. 

 Toluidinblau , Färl.)ung von Leber- 

 zellen der Amphibien 288.' 

 — . — — Mucin 567. 

 — , — der Schleimzone des Darm- 

 epithels 435. 

 — , Metacliromasie 285 ff. 

 Toluidinblau - Ammoniumnjolybdat, 

 Nervensystem von Foeten 280. 



— -Thionin, Speicheldrüse 285. 

 Tonerde, mikroskopischer Nachweis 



212. 

 Tonerdehämatei'n , Herstellung nach 



F. C. C. Hansen 79. 

 Torpedo, elektrisches Organ 278. 

 Tränendrüse, Mazeration 163. 

 — , Untersuchung nach Fleischer 



162. 

 Traubenzucker , Mikrochemisches 



218. 

 Triacid nach Ehrlich, F'ärbung von 



Harnsedimenten 187. 



— — — , — — Leukocyten 272. 



— — — , — — Lymphzellen 428. 

 Trichloressigsäure, Darstellung von 



Sekretkapillaren 163. 

 — , Fixierungsmittel 321. 



Triepels Zylinderrotationsmikrot( »m 

 118. 



Trioxj^hämatein 59 ff. 



— . Eisenlack 63, 64. 



— , Herstellung von F. C. C. Han- 

 sen 62. 



Triton, Blutkörperchen 150. 



Trypanosoma paddae, Färbung 141. 



— — , Kultur 140. 



Tr jq3anosomen, Nachweis in Schnitten 

 417. 



Tuberkelbazillen , Färbung nach 

 Abrikossoff 439. 



— , Reinzüchtung 450. 



Tunikaten , Ausbreitungspräparate 

 142, 143. 



— , Blutgefäßsystem 142. 



Typhus, Bakterien, auf Humusnähr- 

 boden 293. 



— , — , Identifizierung nach Boit 

 572. 



— , — , Sporen 574. 



— , — , A^erhalten in Erde 292. 



Tyrosin, Mikrochemisches 228. 



U niversalprojektionsapparat Leitz 

 362. 



> aledinskys Methode, Nervenknoten 



der Herzventrikel zu untersuchen 



442. 

 Vanillin, Mikrochemisches 229. 

 Vanino-Hartls Methode, kolloidale 



Lösungen zu erkennen 305. 

 Varela de la Iglesias Methode, 



Rückenmark zu untersuchen 



445. 

 Vater- Pacinische Körperchen, A^er- 



silberung der Neurofibrillenenden 



565. 

 Verdauung von Thrombocyten 271. 

 Vergoldung nach Krebs 282. 



— — Rossi 273. 



verholzte Membranen , Mikrochemi- 

 sches 378. 



— — , Nachweis durch aliphatische 

 Reagentien 581. 



verkalkte (lewebe, Metallfärbungen 

 545. 



verkorkte Membranen, Mikrochemi- 

 sches 378. 



Versilberung mit Protargol nach 

 Regaud-Dubreuil 418. 



— nach Ramon y Cajal siehe diesen. 

 — , Theoretisches 265. 




Sach- Register. 



011 



Versilberung- verkalkter Gewebe nach 



Stoeltzner 545. 

 Vcrtikalilluminiitor von Zeiß 30G. 

 Vitaltarbung, Allgemeines 548. 

 — , Bakterien 297. 



— mit Methylenblau 549. 



— — Methylgrün 548. 



— — Neutralrot 549. 



— , Theorie nach Rüzicka 91. 

 Vögel, Knochenmark 5G0. 

 — , Lumbalraark 2^;!. 

 — , Neuroglia 284. 

 Volutin, Mikrochemisches 249. 



Wabenbiklner 552. 



Wabenstruktur, Fixierung 553. 



— , Zustandekommen 552. 



Wachs, Mikrochemisches 21 <. 



Wachstumserscheinungen an Queck- 

 silbertropfen 4(35. 



Weidenreichs Methoden, Blutlymph- 

 drüsen zu untersuchen 14G. 



Weigerts Neurogliafärbung , modi- 

 fiziert von Rubaschkin 159. 



Wendts Methode, Bakterien am Deck- 

 glas zu fixieren 448. 



Wuttigs Methode, Leber auf Fett- 

 gehalt zu untersuchen 436. 



Yorks Methode, pflanzliche Objekte 

 in Agar einzubetten 462. 



Zählkanimern für Blutplättchen 152. 

 Zahnschmelz, Entkalkung 190. 



Zellgrenzen, Darstelhing nach Fer- 



nandez 143. 

 ZeHmembran, Chitingeiialt, Naciiweis 



391 ft". 

 — . Mikrochemisches 369. 

 — , PektinstoÖe, Nachweis 392. 

 — . verholzte, Mikrochemisches 378, 



581. 

 — , verkorkte, Mikrochemisches 387. 



— von Algen, Mikrochemisches 

 374. 



— — Bakterien , ^likrochemisches 

 376. 



— — Moosen , Mikrochemisches 

 377. 



— — Pilzen, Mikrochemisches 376. 

 Zellsaft, Mikrochemisches 395. 

 Zellulose, Mikrochemisches 369. 

 Zenkersche Flüssigkeit , Fixierung 



von Blutlymph(lrüsen 147. 



— — , — vom Netz 435, 

 Zentralkörper der Cyanophyceen 



456. 

 Zieglers Methode, Odem der Haut zu 



untersuchen 145. 

 Ziemannsche Lösung, Färbung von 



Bluttrockenpräparaten 431. 

 Zietzschmanns Methoden, Leuko- 



cytengraniüa zu färben 429. 

 Zinkweiß-Gelatinekitt nach de (iroot 



136. 

 Zucker, Mikrochemisches 218. 

 — , Nachweis nach Senft 298. 

 Zwergrasse von Rhizopus 41. 

 Zylinderrotationsraikrotom nach Trie- 



pel 118. 



Druck von Fischer & Wittig in Leipzig. 





Zeitsclir. f. wiss.Mikrosk. Bd.XXH. 



Taf . I . 



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P. Fiorentini 



lüh Ar^t JufcBmöardt Je^ns- 



Verlag von S.Hirzel, Leipzig. 





Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XXII. 



Taf. II. 



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Verlag von S. Hirzel. Leipzig. 



Lichtdruck v. Sinsel & Co., (i. ni. b. H., Oetzsch-Leipzig. 





Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XXII. 



Taf. III. 



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Verlag von S. Hirzel in Leipzig. 



Lichtdruck v. Sinsel & Co., G. m. b. H., Oetzsch-Leipzig. 





Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XXII. 



Taf. IV. 



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Verlag von S. Hirzel in Leipzig. 



Lichtdruck v. Sinsel & Co., G. m. b. H., Oetzsch-Leipzig. 










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