CHOLESTEROL

Cholesterol
CHOD-POD. Enzymatic colorimetric

Quantitative determination of cholesterol 5. Read the absorbance (A) of the samples and Standard, against the
IVD Blank. The colour is stable for at least 60 minutes.

Store at 2-8ºC CALCULATIONS

PRINCIPLE OF THE METHOD (A) Sample - (A) Blank
x 200 (Standardconc.) = mg/dL cholesterol in the sample
The cholesterol present in the sample originates a coloured complex, (A) Standard - (A) Blank
according to the following reaction:
Cholesterol esters + H 2O CHE Cholesterol + fatty acids Conversion factor: mg/dL x 0,0258= mmol/L.

Cholesterol + O 2 CHOD 4-Cholestenona + H 2O2 QUALITY CONTROL

POD Control sera are recommended to monitor the performance of assay
2 H2O2+ Phenol + 4-Aminophenazone Quinonimine + 4H 2O
procedures: SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and
The intensity of the color formed is proportional to the cholesterol 1002210).
concentration in the sample1,2. If control values are found outside the defined range, check the instrument,
CLINICAL SIGNIFICANCE reagents and calibrator for problems.
Cholesterol is a fat-like substance that is found in all body cells. The Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and
liver makes all of the cholesterol the body needs to form cell corrective actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
membranes and to make certain hormones. REFERENCE VALUES
The determination of serum cholesterol is one of the important tools in Risk evaluation5,6:
the diagnosis and classification of lipemia. High blood cholesterol is Less than 200 mg/dL Normal
one of the major risk factors for heart disease5,6. 200-239 mg/dL Borderline
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it should 240 mg/dL High
integrate clinical and other laboratory data. These values are for orientation purpose; each laboratory should establish
REAGENTS its own reference range.
R1 PIPES pH 6,9 90 mmol/L PERFORMANCE CHARACTERISTICS
Buffer Phenol 26 mmol/L Measuring range: From detection limit of 0 mg/dL to linearity limit of 900
Cholesterol esterase (CHE) 300 U/L mg/DL.
R2 Cholesterol oxidase (CHOD) 300 U/L If the results obtained were greater than linearity limit, dilute the sample 1/2
Enzymes(Note 2) Peroxidase (POD) 1250 U/L with NaCI 9 g/L and multiply the result by 2.
4 Aminophenazone (4-AP) 0,4 mmol/L Precision:
Cholesterol aqueous primary standard 200 mg/dL Intra-assay (n=20) Inter-assay (n=20)
CHOLESTEROL CAL
Contains Triton X-114 10-15% Mean (mg/dL) 90,4 187 92,8 193
SD 1,15 1,01 1,98 2,39
PRECAUTIONS
CV (%) 1,27 0,54 2,14 1,24
CAL: H225- Highly flammable liquid and vapour. H318- Causes serious
eye damage. H412- Harmful to aquatic life with long lasting effects. Sensitivity: 1 mg/dL = 0,00152 A.
Follow the precautionary statements given in MSDS and label of Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not show
the product. systematic differences when compared with other commercial reagents (x).
PREPARATION The results obtained using 50 samples were the following:
Working reagent (WR): Dissolve ( ) the contents of one vial R 2 Correlation coefficient (r)2: 0,99541.
Enzymes in one bottle of R 1 Buffer. Regression equation: y= 0,95293x 3,020.
Cap and mix gently to dissolve contents. The results of the performance characteristics depend on the analyzer used.
(WR) is stable: 4 months at 2-8ºC or 40 days at 15-25ºC.
Avoid direct sunlight. INTERFERENCES
Hemoglobin up to 5 g/L and bilirubin up to 10 mg/dL, do not interfere1,2.
STORAGE AND STABILITY
A list of drugs and other interfering substances with cholesterol
All the components of the kit are stable until the expiration date on the
determination has been reported3,4.
label when stored tightly closed at 2-8ºC, protected from light and
contaminations prevented during their use. NOTES
Do not use reagents over the expiration date. 1. CHOLESTEROL CAL: Proceed carefully with this product because due
Signs of reagent deterioration: its nature it can get contaminated easily.
- Presence of particles and turbidity. 2. LCF (Lipid Clearing Factor) is integrated in the reagent.
- Blank absorbance (A) at 505 nm 0,1. 3. Calibration with the aqueous Standard may cause a systematic error in
ADDITIONAL EQUIPMENT automatic procedures. In these cases, it is recommended to use a
- Spectrophotometer or colorimeter measuring at 505 nm (500-550). serum Calibrator.
- Matched cuvettes 1,0 cm light path. 4. Use clean disposable pipette tips for its dispensation.
- General laboratory equipment. 5. SPINREACT has instruction sheets for several automatic
analyzers. Instructions for many of them are available on request.
SAMPLES
Serum or plasma1,2: Stability of the sample for 7 days at 2-8ºC or BIBLIOGRAPHY
freezing at 20ºC will keep samples stable for a 3 months. 1. Naito H.K. Cholesterol. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
Toronto. Princeton 1984; 1194-11206 and 437.
PROCEDURE 2. Meiattini F. et al. The 4-hydroxybenzoate/4-aminophenazone Chromogenic
1. Assay conditions: System. Clin Chem 1978; 24 (12): 2161-2165.
Wavelength:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 505 nm (500-550) 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . .1 cm light path 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Temperature:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37ºC /15-25ºC 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
2. Adjust the instrument to zero with distilled water. 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
3. Pipette into a cuvette (Note 4): PACKAGING
Blank Standard Sample Ref: 1001090 R1: 10 x 50 mL, R2: 10 50 mL, CAL: 1 x 5 mL
WR (mL) 1,0 1,0 1,0
Ref: 1001091 R1: 10 x 20 mL, R2: 10 20 mL, CAL: 1 x 5 mL
Standard(Note 1,3) (µL) -- 10 -- Cont.
Ref: 1001092 R1: 4 x 125 mL, R2: 4 125 mL, CAL: 1 x 5 mL
Sample (µL) -- -- 10
Ref: 1001093 R1: 4 x 250 mL, R2: 4 250 mL, CAL: 1 x 5 mL
4. Mix and incubate for 5 min. at 37ºC or 10 min. at room
temperature.
BSIS11-I 02/10/15 SPINREACT, S.A. / S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@spinreact.com
 CHOLESTEROL

Cholesterol
CHOD-POD. Phương pháp đo màu enzym

Định lượng cholesterol IVD 5. Đọc độ hấp thụ (A) của các mẫu và chất chuẩn, so với mẫu trắng. Màu
bền ít nhất 60 phút.

Bảo quản ở 2-8ºC TÍNH TOÁN

NGUYÊN LÝ CỦA PHƯƠNG PHÁP (A) Mẫu - (A) Trắng
x 200 (Nồng độ chuẩn) = mg / dL cholesterol trong mẫu
Cholesterol có trong mẫu tạo ra một phức chất có màu, theo phản (A) Chuẩn - (A) Trắng
ứng sau:
Este cholesterol + HO CHE Cholesterol + axit béo
Hệ số chuyển đổi: mg / dL x 0,0258 = mmol / L.
2

Cholesterol + O CHOD
4-Cholestenona + HO
2 22
KIỂM SOÁT CHẤT LƯỢNG
2 HO + Phenol + 4-Aminophenazone POD Quinonimine + 4H O Nên sử dụng huyết thanh đối chứng để giám sát việc thực hiện các quy trình xét
22 2 nghiệm: SPINTROL H Bình thường và Bệnh lý (Tham khảo 1002120 và 1002210).
Cường độ của màu sắc được hình thành tỷ lệ với nồng độ cholesterol Nếu các giá trị kiểm soát được tìm thấy nằm ngoài phạm vi xác định, hãy kiểm tra dụng
trong mẫu1,2. cụ, thuốc thử vàmẫu hiệu chuẩn xem có vấn đề gì không.
Mỗi phòng thí nghiệm phải thiết lập chương trình Kiểm soát Chất lượng của riêng mình
DẤU HIỆU LÂM SÀNG
Cholesterol là một chất giống như chất béo được tìm thấy trong tất cả các tế và các hành động khắcphục nếu các biện pháp kiểm soát không đáp ứng các dung sai có
bào của cơ thể. Gan tạo ra tất cả cholesterol mà cơ thể cần để tạo màng tế bào thể chấp nhận được.
và tạo ra một số hormone.
Việc xác định cholesterol huyết thanh là một trong những công cụ quantrọng
CÁC GIÁ TRỊ THAM KHẢO
trong chẩn đoán và phân loại bệnh mỡ máu. Cholesterol trong máu cao là một Đánh giá rủi ro5,6:
trong những yếu tố nguy cơ chính của bệnh tim5,6. Dưới 200 mg / dL Bình thường
200-239 mg / dL Đường biên giới
Chẩn đoán lâm sàng không nên được thực hiện trên một kết quả xét nghiệm
240 mg / dL Cao
duy nhất;nó nên tích hợp dữ liệu lâm sàng và phòng thí nghiệm khác.
Những giá trị này nhằm mục đích định hướng; mỗi phòng thí nghiệm nên thiết lập phạm vi
THUỐC THỬ tham chiếu của riêng mình.
R1 PIPES pH 6,9 90 mmol / L
ĐẶC ĐIỂM HIỆU SUẤT
Đệm Phenol 26 mmol / L Phạm vi đo:Từgiới hạn phát hiện từ 0 mg / dL đếngiới hạn tuyến tính 900 mg
Cholesterol esterase (CHE) 300 U / L /dL.
R2 Cholesterol oxidase (CHOD) 300 U / L Nếu kết quả thu được lớn hơn giới hạn tuyến tính, pha loãng 1/2 mẫu với
Enzyme(Lưu ý 2) Peroxidase (POD) 1250 U / L NaCI 9 g / L và nhân kết quả với 2.
4 Aminophenazone (4-AP) 0,4 mmol / L Độ chính xác :
Cholesterol dung dịch nước chuẩn chính 200 mg / dL Thử nghiệm nội bộ (n = 20) Thử nghiệm giữa các lần (n = 20)
CHOLESTEROL CAL
Chứa Triton X-114 10-15% Trung bình (mg / dL) 90,4 187 92,8 193
SD 1,15 1,01 1,98 2,39
CÁC BIỆN PHÁP PHÒNG NGỪA
CV (%) 1,27 0,54 2,14 1,24
CAL: H225- Chất lỏng và hơi rất dễ cháy. H318- Gây tổn thương mắt
nghiêm trọng. H412- Có hại cho đời sống thủy sinh và ảnh hưởng lâu Độ nhạy : 1 mg / dL = 0,00152 A.
dài.Thực hiện theo các lưu ý đề phòng trong MSDS và nhãn của sản
Độ chính xác: Kết quả thu được khi sử dụng thuốc thử SPINREACT (y) không cho
phẩm.
thấy sự khác biệt có hệ thống khi so sánh với các thuốc thử thương mại khác (x).
SỰ CHUẨN BỊ Kết quả thu được khi sử dụng 50 mẫu như sau:
Thuốc thử làm việc (WR): Hòa tan ( ) nội dung của một lọ R 2 Hệ số tương quan (r)2: 0,99541.
enzym trong một chai Đệm R 1. Phương trình hồi quy: y = 0,95293x 3,020.
Đậy nắp và trộn nhẹ để hòa tan thành phần. Kết quả của các đặc tính hiệu suất phụ thuộc vào máy phân tích được sử dụng.
(WR) ổn định: 4 tháng ở 2-8ºC hoặc 40 ngày ở 15-25ºC. Tránh
ánh nắng trực tiếp. GIÁ TRỊ THAM KHẢO
BẢO QUẢN VÀ ỔN ĐỊNH Hemoglobin lên đến 5 g / L và bilirubin lên đến 10 mg / dL, không gây cản trở1,2.
Tất cả các thành phần của bộ sản phẩm ổn định cho đến ngày hết hạn ghi Một danh sách các loại thuốc và các chất can thiệp khác vào việc xác định
trên nhãn khi được bảo quản đóng chặt ở 2-8ºC, tránh ánh sáng và ngăn cholesterol đã được báo cáo3,4.
ngừa ô nhiễm trong quá trình sử dụng. LƯU Ý
Không sử dụng thuốc thử đã quá hạn sử dụng. Dấu
1. CHOLESTEROL CAL: Tiếp tục cẩn thận với sản phẩm này vì do bản chất của nó,
hiệu của sự biến chất của thuốc thử: nó có thể bị nhiễm bẩn một cách dễ dàng.
- Sự hiện diện của các hạt và độ đục. 2. LCF (Hệ số bù trừ lipid) được tích hợp trong thuốc thử.
- Độ hấp thụ mẫu trắng (A) ở bước sóng 505 nm 0,1.
3. Việc hiệu chuẩn với Chất chuẩn nước có thể gây ra lỗi hệ thống trong các quy
THIẾT BỊ BỔ SUNG trình tự động. Trong những trường hợp này, nên sử dụng Máy hiệu chuẩn
- Máy quang phổ hoặc máy so màu đo ở bước sóng 505 nm (500-550). huyết thanh.
- Cuvet có đường dẫn ánh sáng 1,0 cm. 4. Sử dụng các đầu pipet sạch dùng một lần để phân phối.
- Dụng cụ thí nghiệm tổng hợp. 5. SPINREACT có các tờ hướng dẫn cho một số máy phân tích tự động.
Hướng dẫn cho nhiều người trong số họ có sẵn theo yêu cầu.
MẪU
Huyết thanh hoặc huyết tương1,2: Độ ổn định của mẫu trong 7 ngày ở 2-8ºC TÀI LIỆU THAM KHẢO
1. Naito HK Cholesterol. Kaplan A và cộng sự. Clin Chem CV Mosby Co., St Louis. Toronto. Princeton năm 1984;
hoặc đông lạnh ở 20ºC sẽ giữ mẫu ổn định trong 3 tháng. 1194-11206 và 437.
2. Meiattini F. và cộng sự. Hệ thống sinh sắc tố 4-hydroxybenzoate / 4-aminophenazone. Clin Chem 1978; 24 (12):
2161-2165.
THỦ TỤC 3. DS trẻ. Ảnh hưởng của thuốc đến Phòng thí nghiệm lâm sàng. Tests, AACC Press xuất bản lần thứ 4, 1995.
1. Điều kiện khảo nghiệm: 4. DS trẻ. Ảnh hưởng của bệnh đến Phòng thí nghiệm lâm sàng. Thử nghiệm, AACC xuất bản lần thứ 4 năm 2001.

Bước sóng:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 505 nm (500-550) 5. Burtis A và cộng sự. Tietz Giáo trình Hóa học Lâm sàng, AACC xuất bản lần thứ 3 năm 1999.

Cuvet :. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ... . . . . . . . . . . Đường sáng 1 cm 6. Tietz NW và cộng sự. Hướng dẫn lâm sàng cho các xét nghiệm trong phòng thí nghiệm, AACC xuất bản lần thứ 3 năm 1995.
Nhiệt độ:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37ºC / 15-25ºC
2. Điều chỉnh thiết bị về 0 bằng nước cất. ĐÓNG GÓI
3. Dùng pipet cho vào cuvet(Ghi chú 4):
Trắng Tiêu chuẩn Vật mẫu Tham khảo: 1001090 R1: 10 x 50 mL, R2: 10 50 mL, CAL: 1 x 5 mL
WR (mL) 1,0 1,0 1,0
Tham khảo: 1001091 R1: 10 x 20 mL, R2: 10 20 mL, CAL: 1 x 5 mL
Tiêu chuẩn(Chú thích 1,3)(µL) -- 10 -- Cont.
Tham khảo: 1001092 R1: 4 x 125 mL, R2: 4 125 mL, CAL: 1 x 5 mL
Mẫu (µL) -- -- 10
Tham khảo: 1001093 R1: 4 x 250 mL, R2: 4 250 mL, CAL: 1 x 5 mL
4. Trộn và ủ trong 5 phút. ở 37ºC hoặc 10 phút. ở nhiệt độ phòng.

BSIS11-I 02/10/15 SPINREACT, SA / SAUCtra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) TÂY BAN NHA
Điện thoại. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail:spinreact@spinreact.com