Dade® Actin® FS Activated PTT Reagent

[ACTIN__FS]
See shaded sections - updated information versus edition from June 2006. Note: Incubation times exceeding 5 minutes may cause loss of factors V and VIII and are not recom-
mended.
Intended Use Each laboratory should determine the optimal heating-activation time for its particular assay system.
Liquid purified soy phosphatides with plasma activator for use in the determination of the activated partial Monitoring of Unfractionated Heparin Therapy with APTT
thromboplastin time (APTT) and other coagulation procedures requiring an activated partial thrombo- When using the APTT for this purpose, the factors influencing the test should be kept in mind. General
plastin reagent. considerations are listed below.
Summary and Explanation A) Time of collection is important since the in-vivo half-life of unfractionated heparin is approximately
The activated partial thromboplastin time, a global screening procedure1,2 used primarily to evaluate co- 1.5 hours5. When it is administered, it has an immediate anticoagulant effect but the degree of this
agulation abnormalities in the intrinsic pathway, will also detect severe functional deficiencies in factors II, effect decreases rapidly with time. This is especially apparent with intermittent single intravenous
V, X, or fibrinogen. The APTT has also been widely advocated3-6 as a means to monitor the effectiveness injections.
of unfractionated heparin therapy where the clotting time is prolonged in proportion to the level of heparin. B) The anticoagulant used for sample collection can alter test results.
In patients receiving oral anticoagulants, the circulating levels of factors II, VII, IX, and X are depressed,
therefore the APTT can be expected to be prolonged. The presence of non-specific inhibitors, such as C) Platelet factor 4, a heparin neutralizing factor in platelet alpha-granules, can be released by platelet
the lupus-like anticoagulant1,7, may prolong the APTT but this effect is variable and generally recognized aggregation or damage. To prevent this occurrence in-vitro, the specimen should be collected with a
as being related more to the nature of the APTT reagent employed. In summary, the APTT is a clinically minimum of trauma. Cold temperatures are known to induce platelet aggregation and release platelet
important screening test with wide applicability for the diagnosis of coagulant disorders and therapeutic factor 4; therefore, centrifugation at room temperature is recommended for heparin studies.
monitoring of both hemorrhagic and thrombotic disease. D) Using APTT to monitor unfractionated heparin therapy is time-dependent. Delay in testing samples
will result in prolonged APTT determinations. Therefore, it is imperative that the testing on all samples
Principle of the Method be performed as soon as possible.
Factors of the intrinsic coagulation system are activated by incubating the plasma with the optimal E) Increased contact activation times may result in prolonged APTT in plasma containing heparin. It is
amount of phospholipids and a surface activator. The addition of calcium ions triggers the coagulation imperative that the optimal heating-activation time of the Dade® Actin® FS Reagent-plasma mixture
process, and the clotting time is then measured. be rigidly standardized9.
Reagents F) Different test systems (i.e., manual, photo-optical, etc.) will exhibit variable heparin sensitivity. Inter-
changing of test systems should be avoided.
Materials provided
G) Baseline data on the APTT of each patient before the start of therapy should be established where
[ACTIN__ FS], [REF] B4218-20 feasible to determine the respective patient APTT as it relates to the normal range established for the
10 x 2 mL, [ACTIN__ FS], Dade® Actin® FS Reagent test in that laboratory.
[ACTIN__ FS], [REF] B4218-100 H) Studies have shown variability in original estimates of the quality of unfractionated heparin from
different sources and different manufacturers. In-vivo reactivity varies with the type of heparin admin-
10 x 10 mL, [ACTIN__ FS], Dade® Actin® FS Reagent istered, the metabolism of the individual and other co-administrated medications5,6.
Composition I) Because the APTT can vary with technique, method, equipment, reagent lot and heparin used, each
Dade® Actin® FS Reagent for use in the determination of the APTT: purified soy phosphatides in laboratory must establish its own therapeutic ranges, or verify them whenever one or more of the
1.0 x 10-4 M ellagic acid with added buffer, stabilizers and preservative. No standard potency has been aforementioned variables is changed. This can be done by simultaneously determining the APTT
established and accepted for purified soy phosphatides. and the heparin concentration for samples from patients receiving heparin therapy. A dose-response
curve can be calculated from the data using regression analysis, and the APTT range corresponding
Warnings and Precautions to a heparin concentration of 0.3 - 0.7 U/mL (by a factor Xa inhibition assay) can be derived4-6.
For in-vitro diagnostic use only. Internal Quality Control
Reagent Preparation Normal range: Dade® Ci-Trol® Level 1, or Control Plasma N
Dade® Actin® FS Reagent must be mixed gently by inversion (5 to 8 times) before use. Pathological range: Dade® Ci-Trol® Level 2, or Dade® Ci-Trol® Level 3, or Control Plasma P
Heparin monitoring: Dade® Ci-Trol® Heparin Control, low and high
Storage and Stability
After use, store the closed container at +2 to +8 °C. Stored unopened at +2 to +8 °C, Dade® Actin® FS Two controls (one in the normal range and one in the pathological/therapeutical range) must be mea-
Reagent can be used by the labeled expiry date. Once opened, the reagent is stable for 7 days at sured at the start of the test run, after each change of reagent vial, and at least once during an 8-hour
+2 to +15 °C. Do not freeze. If the reagent is left to stand, a green deposit may form consisting of el- shift. The control material should be prepared and processed in the same manner as the patient samples.
lagic acid and lipids. Before use, mix by inverting. Avoid contamination with plasma. Information about Each laboratory should establish its own confidence intervals for the controls. This interval is generally
on-board stability is specified in the Reference Guides (Application Sheets) for the different coagulation ± 2 to ± 2.5 standard deviations (SD) from the mean control value. If the control values are outside of the
analyzers. confidence interval, the controls, reagents and instrument must be checked. Before reporting the patient
values, it is recommended that all steps should be documented that were taken to identify and rectify the
Signs of expiry: Deviations from the normal laboratory value in the determination of normal plasma or problem. New control ranges should be defined for each new lot of reagents or controls.
controls.
Results
Materials required but not provided Results of the activated partial thromboplastin time testing should be reported as the APTT in seconds.
Calcium Chloride (CaCl2) Solution 0.025 mol/L These results should be related to the normal range for APTT testing in each laboratory. It is suggested
Control Plasma N, or Dade® Ci-Trol® Level 1, as control for the normal range that the patient results be reported to the clinician in conjunction with the normal range. Control values
Control Plasma P, or Dade® Ci-Trol® Level 2, or Dade® Ci-Trol® Level 3, as control for the pathologi- for the reagent test system should never be used in place of a normal range. Furthermore, the reporting
cal/therapeutical range of APTT results in terms of an upper normal only may result in incorrect interpretation. Shortened APTT
results may also indicate some abnormal condition in the patient’s coagulation system.
Dade® Ci-Trol® Heparin Control, low
Dade® Ci-Trol® Heparin Control, high Limitations of the Procedure
For blood collection, use sodium citrate (0.11 or 0.13 mol/L / 3.2 or 3.8 %) or standard commercial blood APTT testing encompasses the entire clotting process from contact activation to fibrin formation and
collection systems is therefore more susceptible to variations than specific individual tests. The control and use of APTT
Distilled or deionized water without preservatives is therefore subject to inherent limitations. Control of plasma sample conditions is strictly emphasized.
Studies have shown that sample decomposition may occur more rapidly in stored samples that are not
Plastic tubes refrigerated. Extremely small plasma volumes (prior to testing) are to be avoided since pH changes in the
Pipettes for precise measurement of 0.1 mL plasma from physiological conditions may be encountered. Such changes may lead to the decomposition
Coagulation analyzer (see “Equipment”) of plasma components of the blood coagulation system.
Equipment It should be noted that APTT testing may be affected by a number of commonly administered drugs.
Decrease in time of APTT determination in conjugated estrogen therapy in males and oral contraceptive
Dade® Actin® FS Reagent can be used manually or on automated coagulation analyzers. Siemens administration in females has been reported10,11. Increase in the APTT has been seen in diphenylhydan-
Healthcare Diagnostics provides Reference Guides (Application Sheets) for several coagulation analyz- toin, heparin, warfarin, naloxone and radiographic agent administration12,13. Therapeutic doses of hirudin
ers. The Reference Guides (Application Sheets) contain analyzer/assay specific handling and perfor- or other direct thrombin inhibitors may prolong clotting times14. In addition, the choice of anticoagulant
mance information which may differ from that provided in these Instructions for Use. In such a case, the (i.e. citrate vs. oxalate) and the condition of the specimen (e.g. hemolyzed, lipemic, parenteral feeding,
information contained in the Reference Guides (Application Sheets) supersedes the information in these etc.) may affect results6,15,16.
Instructions for Use. Please also consult the instruction manual of the instrument manufacturer!
The latter is particularly true of optical instrumentation measurements of the APTT. Blood clotting factor
Specimen Collection and Preparation deficiencies which should produce prolonged clotting times may be compensated for or made to appear
normal by elevated levels of one or more different clotting factors. Similarly, the presence of active inter-
Mix nine parts of freshly collected patient blood with one part of 0.11 or 0.13 mol/L (3.2 or 3.8 %) mediates which would tend to reduce the clotting time may also mask conditions that would normally lead
sodium citrate. Evacuated tubes containing the desired anticoagulant are commercially available and to prolongation of the APTT. Mild or minor deficiencies in several factors may have an additive effect on
may be used with caution in blood coagulation studies. For special studies, syringe technique may be increasing the APTT. Dade® Actin® FS Reagent may provide variable APTT results in samples containing
preferred. the lupus-like anticoagulant. Unexpected abnormal APTT results should always be followed by additional
Centrifuge the blood specimen at 1500 x g for no less than 15 minutes at room temperature as soon as coagulation studies to determine the source of abnormal results.
possible after collection. Store in an unopened tube at room temperature.
If immediate testing is to be done, the plasma may remain on the packed cells. Otherwise plasma should Action of heparin as an anticoagulant is related to its ability in conjunction with a plasma cofactor to
be separated from the cells. To separate the plasma, use a plastic transfer pipette, remove plasma to interfere with several aspects of the coagulation mechanism, thus retarding the rate of fibrin formation
a plastic tube. Do not store on ice. Nonheparinized plasma should be tested within four (4) hours of (see Section “Monitoring of Unfractionated Heparin Therapy with APTT").
blood collection. Siemens has validated use of these reagents on various analyzers to optimize product performance and
Plasma containing unfractionated heparin should be centrifuged within one hour of blood collection, meet product specifications. User defined modifications are not supported by Siemens as they may affect
stored at room temperature and tested within four (4) hours. performance of the system and assay results. It is the responsibility of the user to validate modifications
Platelet-poor plasma may be frozen at ≤ -20 °C for up to two (2) weeks in a non frost-free freezer. Frozen to these instructions or use of the reagents on analyzers other than those included in Siemens Reference
plasma should be rapidly thawed at +37 °C, gently mixed and tested immediately. Samples should not Guides (Application Sheets) or these Instructions for Use.
stand at +37 °C for more than five minutes. Please refer to CLSI document H21–A58 for detailed informa-
tion on sample preparation and storage. Results of this test should always be interpreted in conjunction with the patient’s medical history, clinical
presentation and other findings.
Procedure Expected Values
Manual Testing: Reference intervals vary from laboratory to laboratory depending on the population served and the tech-
nique, method, equipment and reagent lot used. Therefore, each laboratory must establish its own refer-
Prewarm Calcium Chloride Solution at +37 °C ence intervals or verify them whenever one or more of the aforementioned variables are changed.
Prewarm 0.1 mL Dade® Actin® FS Reagent for one minute at +37 °C. (Mix before use) In a study of apparently healthy individuals using a specific lot of Dade® Actin® FS Reagent the following
values were obtained:
Pipet into coagulation tubes as follows:
Median (seconds) 90 % Reference Interval (seconds)
Test Sample Control Plasma
111 individuals 5th Percentile 95th Percentile
Dade® Actin® FS Reagent (prewarmed) 0.1 mL 0.1 mL Sysmex® CA-1500 25.1
Plasma 0.1 mL - 22.1 28.1
Control Plasma - 0.1 mL 111 individuals
BCS® System 26.8 23.0 31.9
Mix well. Incubate at +37 °C for 3 minutes.
0.1 mL 0.1 mL Reference ranges for other populations such as pediatric groups should also be established where war-
prewarmed Calcium Chloride Solution ranted.
Simultaneously with addition of CaCl2 start stopwatch, mix
well. After 20 seconds start to observe for clot formation.

B4218 G20 E0501A (1137) L 1

Note: CLSI Document C28-A2 (cited in H47-A)17,18 states that a parametric approach (mean ± 2 SD) Haltbarkeit und Lagerungsbedingungen
can be applied. The assumption of this approach (Gaussian normal distribution) must however be Nach Gebrauch verschlossen bei +2 bis +8 °C lagern. Dade® Actin® FS Reagenz ist, ungeöffnet bei
checked. +2 bis +8 °C gelagert, bis zu dem auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatum verwendbar.
Stabilität nach Öffnen:
Specific Performance Characteristics 7 Tage bei +2 bis +15 °C.
Precision studies using the methodologies listed in this insert show that properly performed APTT tests Nicht einfrieren. Wird das Reagenz stehen gelassen, kann es zur Bildung eines grünen Niederschlags
should result in a standard deviation (SD) which corresponds to a coefficient of variation (CV) of less than aus Ellagsäure und Lipiden kommen. Vor der Anwendung durch Umdrehen mischen. Kontamination mit
4 % in the normal range. In additional clinical studies, duplicate determinations of an abnormal control Plasma vermeiden.
plasma (clotting times of approximately 50 seconds) were performed over a period of 22 days. Results
indicate that the APTT should agree within 4 % when performed properly. Die Angaben zur Stabilität auf dem Gerät sind in den Referenzhandbüchern (Applikationsvorschriften)
für die einzelnen Gerinnungsmessgeräte aufgeführt.
Hinweis auf Verfall: Abweichungen vom Labornormalwert bei der Bestimmung von Normalplasma oder
Bibliography Kontrollen.
1. Kamal AH, Tefferi A, Pruthi RK. How to interpret and pursue an abnormal prothrombin time, acti-
vated partial thromboplastin time, and bleeding time in adults. Mayo Clin Proc 2007; 82: 864-73. Zusätzlich benötigte Materialien
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gram 2006; 457-61. Kontroll-Plasma N oder Dade® Ci-Trol® Level 1 als Kontrolle für den Normalbereich
3. Eikelboom JW, Hirsh J. Monitoring unfractionated heparin with the aPTT: Time for a fresh look. Kontroll-Plasma P oder Dade® Ci-Trol® Level 2 oder Dade® Ci-Trol® Level 3 als Kontrolle für den patho-
Thromb Haemost 2006; 96: 547-52 logischen/therapeutischen Bereich
4. Bates SM, Johnston M, Hirsh J, Ginsberg JS. Use of a fixed activated partial thromboplastin time Dade® Ci-Trol® Heparin-Kontrolle, niedrig
ratio to establish a therapeutic range for unfractionated heparin. Arch Intern Med 2001; 161: 385-91. Dade® Ci-Trol® Heparin-Kontrolle, hoch
5. Hirsh J, Raschke R. Heparin and low-molecular-weight heparin. The seventh ACCP Conference on Zur Blutabnahme Natriumcitrat (0,11 oder 0,13 mol/l bzw. 3,2 oder 3,8 %ig) oder handelsübliche Blu-
Antithrombotic and Thrombolytic Therapy. Chest 2004; 126: 188S-203S. tentnahmesysteme verwenden
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tory monitoring of anticoagulant therapy: laboratory monitoring of unfractionated heparin therapy. Kunststoffröhrchen
Arch Pathol Lab Med. 1998; 122: 782-98.
Pipetten für das genaue Abmessen von 0,1 ml
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swered. Arch Pathol Lan Med. 2007; 131: 885-9. Gerinnungsmessgerät (siehe "Geräte")
8. CLSI. Collection, Transport, and Processing of Blood Specimens for Testing Plasma-Based Coagu- Geräte
lation Assays and Molecular Hemostasis Assays; Approved Guideline – Fifth Edition. CLSI docu- Dade® Actin® FS Reagenz kann für manuelle Methoden oder an automatischen Gerinnungsmessgerä-
ment H21-A5 (ISBN 1-56238-657-3). CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylva- ten verwendet werden. Siemens Healthcare Diagnostics stellt für verschiedene Gerinnungsmessgeräte
nia 1908781898 USA, 2008. Referenzhandbücher (Applikationsvorschriften) zur Verfügung. Diese enthalten geräte-/testspezifische
9. Hattersley PG, Hayse D. The effect of increased contact activation time on the activated partial Informationen zur Abarbeitung und Leistungsdaten, die von den Informationen in dieser Gebrauchsan-
thromboplastin time. Am J Clin Pathol 1976; 66: 479-82. weisung abweichen können. In diesem Fall ersetzen die Informationen in den Referenzhandbüchern
(Applikationsvorschriften) die Informationen in dieser Gebrauchsanweisung. Bitte auch die Bedienungs-
10. Ambrus JL, Schimert G, Lajos TZ, et al. Effect of antifibrinolytic agents and estrogens on blood loss anleitung des Geräteherstellers beachten!
and blood coagulation factors during open heart surgery. J Med 1971; 2: 65-81.
11. Prasad RN, Koh SC, Viegas OA, Ratnam SS. Effects on hemostasis after two-year use of low dose
combined oral contraceptives with gestodene or levonorgestrel. Clin Appl Thromb Hemost 1999; 51: Probenabnahme und -vorbereitung
60-70. Neun Teile frisch abgenommenes Patientenblut mit einem Teil Natriumcitrat (0,11 oder 0,13 mol/l bzw.
12. Solomon GE, Hilgartner MW, Kutt H. Coagulation defects caused by diphenylhydantoin. Neurology 3,2 oder 3,8 %ig) mischen. Handelsübliche Blutentnahmesysteme für Gerinnungstests mit dem ge-
1972; 22: 1165-71. wünschten Antikoagulans können verwendet werden. Für spezielle Studienreihen kann die Abnahme
in der Spritzentechnik vorteilhaft sein.
13. Young DS, ed. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, 5th ed. Washington: AACC Press, Die Blutprobe möglichst rasch nach der Abnahme bei 1500 x g für nicht weniger als 15 Minuten bei
2000. Raumtemperatur zentrifugieren. Im ungeöffneten Abnahmeröhrchen bei Raumtemperatur lagern.
14. Greinacher A, Warkentin TE. The direct thrombin inhibitor hirudin. Thromb Haemost 2008; 99: 819-29. Erfolgt die Analyse sofort, kann das Plasma auf dem Erythrozytensediment verbleiben. Anderenfalls
15. Soloway HB, Cox SP, Donahoo JV. Sensitivity of the activated partial thromboplastin time to heparin: muss es separiert werden. Zum Separieren das Plasma mit einer Kunststoffpipette in ein Kunststoffröhr-
effect of anticoagulant used for sample collection. Am J Clin Pathol 1973; 59: 760-2. chen geben. Nicht auf Eis lagern. Nicht heparinisiertes Plasma sollte innerhalb von vier (4) Stunden nach
16. Lippi G, Franchini M, Montagnana M et al. Quality and reliability of routine coagulation testing: can der Blutabnahme analysiert werden.
we trust that sample? Blood Coag Fibrinol 2006: 17: 513-9. Plasma, das unfraktioniertes Heparin enthällt, sollte innerhalb von einer (1) Stunde nach der Blutabnah-
me zentrifugiert, bei Raumtemperatur gelagert und innerhalb von vier (4) Stunden nach der Blutabnahme
17. CLSI. One-Stage Prothrombin Time (PT) Test and Activated Partial Thromboplastin Time (APTT) analysiert werden.
Test; Approved Guideline. CLSI document H47-A [ISBN 1-56238-301-9]. CLSI, 940 West Valley Plättchenarmes Plasma kann bei ≤ -20 °C bis zu zwei (2) Wochen eingefroren werden. Gefrorene Plas-
Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylvania 19087-1898, USA, 1996. men sollten bei + 37 °C schnellstmöglich aufgetaut, vorsichtig gemischt und sofort analysiert werden. Bei
18. CLSI. How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guide- +37 °C dürfen die Proben nicht länger als 5 Minuten stehen bleiben. Genaue Angaben zur Probenent-
line - Second Edition. CLSI document C28-A2 [ISBN 1-56238-406-6]. CLSI, 940 West Valley Road, nahme und -lagerung entnehmen Sie bitte dem CLSI-Dokument H21-A58.
Suite 1400, Wayne, Pennsylvania 19087-1898, USA, 2000.
BCS is a s a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics. (The values stated for the BCS® System do Testdurchführung
not take into account the correction factors used in the USA.) Manuelle Durchführung:
Actin, Ci-Trol and Dade are trademarks of Siemens Healthcare Diagnostics.
Sysmex is a registered trademark of SYSMEX CORPORATION. Calciumchlorid-Lösung auf +37 °C vorwärmen
0,1 ml Dade® Actin® FS Reagenz pro Teströhrchen auf +37 °C vorwärmen (vor Gebrauch mischen)
In Kunststoffröhrchen wie folgt pipettieren:
Zu untersuchende Probe Kontrollplasma
Dade® Actin® FS Reagenz (vorgewärmt) 0,1 ml 0,1 ml
Plasma 0,1 ml -
Edition June 2008 Kontrollplasma - 0,1ml
Gut mischen und 3 Minuten bei +37 °C inkubieren.

Dade® Actin® FS Reagenz vorgewärmte Calciumchlorid-Lösung 0,1 ml 0,1 ml

Bei Zugabe des CaCl2 die Stoppuhr starten, gut mischen.

zur Bestimmung der APTT Nach 20 Sekunden erstmals die Gerinnung überprüfen.

Hinweis: Eine Inkubationszeit von über 5 Minuten ist nicht zu empfehlen, da es sonst zu einem

[ACTIN__FS]
Faktor V- und Faktor VIII-Verlust kommen kann.
Die optimale Vorwärmzeit für die Aktivierung sollte von jedem Labor in Abhängigkeit vom verwendeten
Testsystem festgelegt werden.
Überwachung der Therapie mit unfraktioniertem Heparin mittels APTT
Bei der Überwachung der Heparintherapie mittels APTT-Bestimmung sind die Faktoren zu berücksich-
Schattierte Abschnitte - Aktualisierte Informationen gegenüber der Ausgabe Juni 2006. tigen, die Einfluss auf das Testergebnis haben können. Im Folgenden sind einige allgemeine Hinweise
zusammengefasst:
Anwendungsbereich A) Da die Halbwertszeit von unfraktioniertem Heparin in-vivo ca. 1,5 Stunden beträgt, ist der Zeitpunkt
Gereinigte Sojabohnen-Phospholipid-Lösung mit Plasmaaktivator zur Bestimmung der aktivierten partiel­ der Blutabnahme von entscheidender Bedeutung5. Verabreichtes Heparin besitzt eine sofort ein-
len Thromboplastinzeit (APTT) und für darauf basierende Gerinnungstests. setzende gerinnungs­hemmende Wirkung, die rasch wieder abnimmt. Dieser Effekt ist besonders
deutlich bei intermittierend verabreichten Einzelinjektionen i. v. zu beobachten.
Diagnostische Bedeutung B) Das zur Blutabnahme verwendete Antikoagulans kann die Testergebnisse beeinflussen.
Die Bestimmung der aktivierten partiellen Thromboplastinzeit ist ein globaler Screening-Test1,2, der C) Durch Aggregation bzw. Beschädigung der Plättchen kann der Heparin-neutralisierende Plättchen-
primär zur Beurteilung des endogenen Gerinnungssystems eingesetzt wird, der jedoch ebenso einen faktor 4 aus den Alpha-Granula der Plättchen freigesetzt werden. Um derartige Prozesse in-vitro
schweren funktionellen Mangel an Faktor II, V, X oder Fibrinogen anzeigt. Die Bestimmung der APTT zuvermeiden, sollten die Proben möglichst vorsichtig abgenommen werden. Da niedrige Temperatur
ist darüber hinaus ein allgemein anerkannter Test3-6 zur Überwachung der Therapie mit unfraktioniertem bekanntlich die Plättchenaggregation und damit die Freisetzung von Plättchenfaktor 4 auslöst, sollten
Heparin, wobei die Verlängerung der Gerinnungszeit proportional zum Heparinspiegel ist. Bei Patienten Proben für Heparintests bei Raumtemperatur zentrifugiert werden.
unter oraler Antikoagulation ist ebenfalls eine verlängerte APTT zu erwarten, da bei diesen Patienten die D) Die Überwachung der Therapie mit unfraktioniertem Heparin mittels APTT-Bestimmung ist zeitab-
zirkulierenden Faktoren II, VII, IX und X erniedrigt sind. Das Vorhandensein unspezifischer Hemmstoffe, hängig. Verzögerungen bei der Probenbearbeitung können eine Verlängerung der APTT bewirken.
wie Lupus Antikoagulans-ähnlicher Substanzen1,7, kann zwar eine Verlängerung der APTT bewirken, Die Proben müssen daher so bald wie möglich untersucht werden.
allerdings ist dieser Effekt variabel und wird in der Regel eher der Zusammensetzung des verwendeten
APTT-Reagenzes zugeschrieben. Zusammenfassend kann festgestellt werden, dass die APTT-Bestim- E) Eine verlängerte Kontaktaktivierung kann bei heparinhaltigem Plasma zur Verlängerung der APTT füh-
mung ein klinisch wertvoller Screening-Test mit breiten Anwendungsmöglichkeiten bei der Diagnose ren. Die optimale Inkubationszeit des Dade® Actin® FS Reagenz-Plasma-Gemischs ist daher einzu-
von Gerinnungsstörungen und bei der Therapieüberwachung von Patienten mit Blutungs- oder Throm- halten9.
boseneigung ist. F) Da verschiedene Testmethoden (z. B. manuell, photo-optisch) eine unterschiedliche
Heparin-Empfindlichkeit besitzen, sollte ein Wechsel der angewendeten Methode vermieden wer-
Prinzip der Methode den.
Inkubation von Plasma mit der optimalen Menge an Phospholipiden und einem Oberflächenaktivator G) Zur Ermittlung der patientenspezifischen APTT sollte der APTT-Basiswert des Patienten möglichst
führt zur Aktivierung von Faktoren des endogenen Gerinnungssystems. Durch Zugabe von Calcium- vor Therapiebeginn bestimmt und mit dem laboreigenen Normalbereich verglichen werden.
Ionen wird der Gerinnungsvorgang ausgelöst, gemessen wird die Zeit bis zur Bildung eines Fibringe- H) Untersuchungen ergaben, dass die Eigenschaften von unfraktioniertem Heparinen verschiedener
rinnsels. Hersteller bzw. aus unterschiedlichem Ausgangsmaterial von den ursprünglich angenommenen
Spezifikationen abwichen. In-vivo hängt die Reaktivität vom Typ des verabreichten Heparins vom
Reagenzien Stoffwechsel des Patienten und von anderen, gleichzeitig angewendeten Arzneimitteln ab5,6.
Inhalt der Handelspackung (I) Da die APTT in Abhängigkeit von den Arbeitstechniken, Methoden, Geräten, Reagenzchar-
[ACTIN__ FS], [REF] B4218-20 gen und dem eingesetzten Heparin variieren kann, muss jedes Labor seine eigenen the-
rapeutischen Bereiche ermitteln bzw. nach dem Wechsel von einem oder mehreren der
10 x 2 ml, [ACTIN__ FS], Dade® Actin® FS Reagenz aufgeführten Parameter verifizieren. Dies kann durch die gleichzeitige Bestimmung der
[ACTIN__ FS], [REF] B4218-100 APTT und der Heparinkonzentration in Proben von Patienten unter Heparintherapie er-
folgen. Durch Regressionsanalyse der Daten kann eine Dosis-Wirkungs-Beziehung auf-
10 x 10 ml, [ACTIN__ FS], Dade® Actin® FS Reagenz gestellt und der APTT-Bereich festgelegt werden, der einer Heparinkonzentration von
Zusammensetzung 0,3 - 0,7 U/ml (durch Faktor Xa-Hemmung bestimmt) entspricht4-6.
Dade® Actin® FS Reagenz zur Bestimmung der APTT: Gereinigte Sojabohnen-Phospholipide in Interne Qualitätskontrolle
1,0 x 10-4 M Ellagsäure, gepuffert, stabilisiert und konserviert. Standardwerte für die Aktivität von gerei- Normalbereich: Dade® Ci-Trol® Level 1 oder Kontroll-Plasma N
nigten Sojabohnen-Phospholipiden stehen nicht zur Verfügung.
Pathologischer Bereich: Dade® Ci-Trol® Level 2 oder Dade® Ci-Trol® Level 3 oder Kontroll-Plasma P
Warnungen und Vorsichtsmaßnahmen Heparinüberwachung: Dade® Ci-Trol® Heparin-Kontrolle, niedrig und hoch
Nur zur in-vitro-diagnostischen Anwendung. Zu Beginn eines Testlaufs, bei jedem Reagenzflaschenwechsel und mindestens einmal während einer
Vorbereitung der Reagenzien 8-Stunden-Schicht müssen zwei Kontrollen (eine im Normalbereich und eine im pathologischen/therapeutischen
Dade® Actin® FS Reagenz muss vor Gebrauch durch 5 - 8-maliges Überkopfddrehen resuspendiert werden. Bereich) gemessen werden. Das Kontrollmaterial sollte wie die Patientenplasmen behandelt werden.

B4218 G20 E0501A (1137) L 2

Jedes Labor sollte seinen eigenen Vertrauensbereich für die Kontrollen ermitteln. Dieser beträgt in der
Regel ± 2 bis ± 2,5 Standardabweichungen (SD) vom mittleren Kontrollwert. Liegen die Kontrollwerte au-
Intérêt diagnostique
La détermination du Temps de Céphaline Activée est un test de dépistage global1,2, qui permet en pre-
ßerhalb des Vertrauensbereichs, sind die Kontrollen, Reagenzien und das Gerät zu überprüfen. Es wird mier lieu d’évaluer le système intrinsèque de la coagulation, et qui permet également de révéler un déficit
empfohlen, vor der Ausgabe von Patientenwerten alle Maßnahmen zu dokumentieren, die zur Feststel- fonctionnel grave en Facteur II, Facteur V, Facteur X ou en fibrinogène. Par ailleurs, le TCA est un test
lung und Behebung des Problems ergriffen wurden. Bei jeder neuen Reagenzien- oder Kontrollencharge largement reconnu3-6 pour la surveillance des traitements à l’héparine non fractionnée, l’allongement du
sollten neue Kontrollbereiche definiert werden. temps de coagulation étant proportionnel au taux d’héparine. On observe également des TCA allongés
Ergebnisse chez les patients sous anticoagulants oraux dans la mesure où ils présentent des facteurs circulants
II, VII, IX et X diminués. La présence de facteurs inhibiteurs non spécifiques, comme les substances
Das Testergebnis sollte als APTT in Sekunden angegeben werden und mit dem laboreigenen Nor- apparentées au lupus anticoagulant1,7, peut certes entraîner un allongement du TCA, mais cet effet est
malbereich für APTT-Bestimmungen verglichen werden. Es wird empfohlen, dem behandelnden Arzt variable et généralement plutôt attribué à la composition du réactif TCA utilisé. En résumé, on peut dire
die APTT zusammen mit dem Normalbereich zu übermitteln. Für das Reagenzientestsystem ermittelte que le TCA est un test de dépistage important pour la clinique, qui présente de nombreuses possibilités
Kontrollwerte dürfen nicht als Normalbereich für Patientenproben verwendet werden. Darüber hinaus d’utilisation pour l’exploration des troubles de la coagulation et pour le suivi thérapeutique des patients
sind Fehlinter­pretationen möglich, wenn lediglich erhöhte APTT-Werte als auffällig ausgegeben werden, souffrant de saignement ou de thrombose.
da auch eine zu kurze APTT auf Anomalien im Gerinnungssystem hinweisen kann.
Principe de la méthode
L’incubation d’un plasma avec une quantité optimale de phospholipides et un activateur de surface
Einschränkungen der Testdurchführung entraîne l’activation des facteurs du système intrinsèque de la coagulation. L’addition d’ions calcium
Die Bestimmung der APTT umfasst den gesamten Gerinnungsprozess von der Kontaktaktivierung bis déclenche le processus de coagulation, et on mesure ensuite le temps écoulé jusqu’à la formation d’un
hin zur Fibrinbildung und ist daher gegenüber modifizierten Arbeitstechniken empfindlicher als spezi- caillot de fibrine.
fische Einzeltests, weshalb die Kontrolle und Bestimmung der APTT speziellen Einschränkungen unter-
liegt. Von besonderer Bedeutung sind die Lagerungsbedingungen der Plasmaproben. Untersuchungen Réactifs
ergaben, dass ungekühlte Proben einer rascheren Zersetzung unterliegen. Da es bei extrem geringen Contenu des conditionnements
Plasmavolumina zu physiologisch bedingten Veränderungen des pH-Wertes und infolge dessen zur Zer-
setzung der Plasmabestandteile des Blutgerinnungssystems kommen kann, ist von einer Portionierung [ACTIN__ FS], [REF] B4218-20
in sehr kleine Volumina vor der Testung abzuraten. 10 x 2 ml, [ACTIN__ FS], Dade® Actin® FS Réactif
Zu beachten ist, dass das APTT-Testergebnis durch eine Reihe häufig verordneter Medikamente beein- [ACTIN__ FS], [REF] B4218-100
flusst werden kann. Laut Veröffentlichungen führen die Therapie mit konjugiertem Östrogen bei Männern
und die Einnahme oraler Kontrazeptiva bei Frauen zu einer Verkürzung der APTT10,11. Eine Verlängerung 10 x 10 ml, [ACTIN__ FS], Dade® Actin® FS Réactif
der APTT wurde bei der Verabreichung von Diphenylhydantoin, Heparin, Warfarin, Naloxon und Rönt- Composition
genkontrastmitteln beobachtet12,13. Therapeutische Dosen von Hirudin oder anderen direkten Throm- Dade® Actin® FS Réactif pour Temps de Céphaline Activée : phospholipides de soja purifiés dans
bininhibitoren können zu verlängerten Gerinnungszeiten führen14. Die Ergebnisse können außerdem 1,0 x 10-4 M d’acide ellagique, tamponnés, stabilisés et additionnés de conservateur. Il n’existe pas de
durch das gewählte Antikoagulans (z. B. Oxalat anstelle von Citrat) beeinflusst werden sowie durch die valeurs standard pour l’activité de phospholipides de soja purifié.
Beschaffenheit der Probe (z. B. hämolytisch, lipämisch, künstliche Ernährung, usw.), welche insbeson-
dere bei der optischen Bestimmung der APTT von Bedeutung ist6,15,16. Mises en garde et précautions d'emploi
Ein Mangel an Blutgerinnungsfaktoren, der eine Verlängerung der Gerinnungszeit bewirken würde, Réservé au diagnostic in-vitro.
kann durch einen erhöhten Spiegel eines oder mehrerer anderer Gerinnungsfaktoren teilweise oder
sogar vollständig überlagert werden, so dass u. U. normale Werte gemessen werden. Ebenso können Préparation du réactif
durch das Vorliegen aktiver Intermediate, welche tendenziell die Gerinnungszeit verkürzen, Zustände Avant le premier emploi, remettre Dade® Actin® FS Réactif en suspension en retournant le flacon 5 à
überlagert werden, die sonst zu einer Verlängerung der APTT führen würden. Ein leichter oder mä- 8 fois.
ßiggradiger Mangel verschiedener Faktoren kann additiv eine Verlängerung der APTT bewirken. Das Stabilités et conditions de conservation
Vorliegen Lupus Antikoagulans-ähnlicher Substanzen kann möglicherweise die APTT-Bestimmung mit Après utilisation, conserver le flacon fermé à +2/+8 °C. Avant ouverture, Dade® Actin® FS Réactif
Dade® Actin® FS Reagenz beeinflussen. Bei fragwürdigen APTT-Werten sollten diese stets durch weitere se conserve à +2/+8 °C jusqu’à la date indiquée sur l’étiquette. Stabilité après ouverture : 7 jours à
Gerinnungstests überprüft und die Ursache hierfür ermittelt werden. +2/+15 °C. Ne pas le congeler. Si le réactif est resté immobile, il peut se former un précipité vert consti-
Die Wirkung von Heparin als Antikoagulans hängt mit dessen Eigenschaft zusammen, in Verbindung mit tué d’acide ellagique et de lipides. Homogénéiser la solution en imprimant au flacon un mouvement de
Plasmakofaktoren auf verschiedene Teilbereiche des Gerinnungssystems einzuwirken, was letztlich zu rotation avant utilisation. Eviter toute contamination avec du plasma. Les données relatives à la stabilité
einer verzögerten Fibrinbildung führt (siehe Abschnitt "Überwachung der Therapie mit unfraktioniertem sur appareil sont indiquées dans les guides de référence (protocoles d’application) des différents ana-
Heparin mittels APTT“). lyseurs de coagulation.
Siemens hat den Einsatz der Reagenzien auf verschiedenen Analysengeräten auf optimale Produktlei- Lorsque le réactif est périmé, il est possible que les résultats obtenus lors de la détermination d’un
stung und Einhaltung der Produktspezifikationen überprüft. Vom Benutzer vorgenommene Änderungen plasma normal ou d’un contrôle dévient de façon significative de la valeur normale du laboratoire.
werden von Siemens nicht unterstützt, da sie die Leistung des Systems und die Testergebnisse beein-
flussen können. Es liegt in der Verantwortung des Benutzers, Änderungen an diesen Anleitungen oder Matériel et autres réactifs nécessaires
die Verwendung dieser Reagenzien auf anderen als in den Applikationsvorschriften von Siemens oder Solution de chlorure de calcium (CaCl2) 0,025 mol/l
diesen Gebrauchsanweisungen genannten Analysengeräten zu validieren. Plasma de contrôle N ou Dade® Ci-Trol® niveau 1 comme contrôle dans le domaine normal
Resultate dieses Tests sollten stets in Verbindung mit der Vorgeschichte des Patienten, dem klinischen Plasma de contrôle P ou Dade® Ci-Trol® niveau 2 ou Dade® Ci-Trol® niveau 3 comme contrôle dans le
Bild und anderen Untersuchungsergebnissen interpretiert werden. domaine pathologique/thérapeutique
Referenzbereiche Dade® Ci-Trol® Contrôle Héparine bas
Referenzintervalle variieren von Labor zu Labor in Abhängigkeit von der zu untersuchenden Population und Dade® Ci-Trol® Contrôle Héparine élevé
den angewendeten Arbeitstechniken, Methoden, Geräten und Reagenzchargen. Daher sollte jedes Labor Pour le prélèvement des échantillons : citrate de sodium (soit 0,11 ou 0,13 mol/l, soit 3,2 ou 3,8 %) ou
auf der Grundlage der jeweils angewendeten Arbeitstechniken, Methoden, Geräte und Reagenzchargen système de prélèvement sanguin du commerce
eigene Referenzbereiche ermitteln, bzw. die Referenzbereiche nach einem Wechsel der aufgeführten Eau distillée ou désionisée sans conservateur
Parameter verifizieren.
Tubes en plastique
In einer Studie an offensichtlich gesunden Probanden wurden mit einer spezifischen Charge Dade® Pipettes pour une distribution exacte de 0,1 ml
Actin® FS Reagenz folgende Werte erhalten:
Analyseur de coagulation (cf. "Analyseurs")
Median 90 % Referenzintervall Analyseurs
(Sekunden) (Sekunden) Dade® Actin® FS Réactif peut être utilisé en méthodes manuelles ou sur des analyseurs de coagulation.
Siemens Healthcare Diagnostic met à la disposition de ses clients des guides de référence (protocoles
5. Perzentile 95. Perzentile d’adaptation) pour différents analyseurs de coagulation. Ces manuels contiennent des informations spé-
cifiques à chaque analyseur et aux tests, dont les données de travail et de performance peuvent être
111 Probanden 25,1 22,1 28,1 différentes de celles indiquées dans cette notice d’utilisation. Dans ce cas-là, utiliser les données du
Sysmex® CA-1500 guide de référence (protocole d’adaptation) et non celles de cette notice d’utilisation. En outre, respecter
les instructions d’utilisation du fabricant de l’automate utilisé !
111 Probanden 26,8 23,0 31,9
BCS® System Prélèvement et préparation des échantillons à tester
Mélanger neuf volumes de sang de patient fraîchement prélevé avec un volume de citrate de sodium soit
Für andere Kollektive, wie z. B. pädiatrische Patienten, sollten gegebenenfalls eigene Referenzbereiche 0,11 ou 0,13 M (soit 3,2 ou 3,8 %). On peut également utiliser des tubes de prélèvement du commerce
ermittelt werden. prévus pour les tests de coagulation et contenant l’anticoagulant désiré. Pour des séries spéciales dans
Hinweis: Nach dem CLSI Dokument C28-A2 (zitiert in H47-A)17,18 kann ein parametrischer Ansatz (Mittel- le cadre d’études, il peut être préférable d’effectuer les prélèvements à l’aiguille.
wert ± 2 SD) verwendet werden. Die Annahme dieses Ansatzes (Gauß’sche Normalverteilung) Centrifuger l’échantillon à 1 500 x g pendant au moins 15 minutes à température ambiante dès que
muss jedoch überprüft werden. possible après le prélèvement. Conserver à température ambiante dans le tube fermé.
Si le test doit être immédiatement réalisé, le plasma peut rester sur les culots globulaires. Sinon, le
Leistungsmerkmale des Tests plasma doit être séparé des culots. Pour séparer le plasma, utiliser une pipette de transfert en plastique,
retirer le plasma dans un tube en plastique. Ne pas conserver sur de la glace. Le plasma non hépariné
Untersuchungen der Präzision mit den aufgeführten Methoden ergaben im Normalbereich eine Stan- doit être testé dans les quatre (4) heures suivant le prélèvement.
dardabweichung (SD), die einem Variationskoeffizienten (VK) von weniger als 4 % entspricht. In wei- Le plasma contenant de l'héparine non fractionnée doit être centrifugé dans l'heure suivant le prélève-
teren klini­schen Studien wurden Doppelbestimmungen eines abnormalen Kontrollplasmas (mit einer ment, conservé à température ambiante et analysé dans les quatre (4) heures.
Gerinnungszeit von etwa 50 Sekunden) über einen Zeitraum von 22 Tagen durchgeführt. Aus den dabei
Le plasma pauvre en plaquettes peut être congelé à ≤ -20 °C pendant un maximum de deux (2) semaines
ermittelten Werten geht hervor, dass die APTT-Werte bei korrekter Testdurchführung um weniger als dans un congélateur sans givre. Le plasma congelé doit être rapidement décongelé à +37 °C, soigneu-
4 % differieren. sement mélangé et immédiatement analysé. Ne pas conserver les échantillons à +37 °C pendant plus
de cinq minutes. Consulter le document CLSI H21-A58 pour connaître le détail de la préparation et de
Literatur la conservation des échantillons.
Siehe englische Gebrauchsanweisung.
Réalisation du test
BCS ist ein Warenzeichen von Siemens Healthcare Diagnostics. (Die für das BCS® System angegebenen Réalisation manuelle :
Werte berücksichtigen nicht die in den USA verwendeten Korrekturfaktoren.)
Actin, Ci-Trol und Dade sind Warenzeichen von Siemens Healthcare Diagnostics. Préchauffer la solution de chlorure de calcium à +37 °C
Sysmex ist eine eingetragene Marke der SYSMEX CORPORATION.
Préchauffer 0,1 ml de Dade® Actin® FS Réactif par tube à essai (mélanger avant emploi) à +37 °C.
Distribuer dans les tubes à essai :
Échantillon à tester Plasma de contrôle
Ausgabe Juni 2008 Dade® Actin® FS Réactif (préchauffé) 0,1 ml 0,1 ml
Plasma 0,1 ml -
Plasma de contrôle - 0,1 ml

Dade® Actin® FS Réactif pour Bien mélanger et laisser incuber 3 minutes à +37 °C.

Temps de Céphaline Activée

Solution de chlorure de calcium pré- 0,1 ml 0,1 ml
chauffée
Ajouter le CaCl2, déclencher le chronomètre et bien mé-
langer. Vérifier une première fois la coagulation au bout

[ACTIN__FS]
de 20 secondes.

Remarque : un temps d’incubation de plus de 5 minutes n’est pas recommandé, car il peut entraîner la
perte d’activité des Facteurs V et VIII.
Le temps de préchauffage optimum pour l’activation doit être déterminé par chaque laboratoire en fonc-
Paragraphes surlignés - informations mises à jour par rapport à l’édition de juin 2006. tion du système utilisé.
Surveillance d’un traitement à l’héparine non fractionnée par le TCA
Domaines d'utilisation Dans le cadre d’une surveillance d’un traitement à l’héparine par le TCA, il faut tenir compte des facteurs
Solution de phospholipides de soja purifiés, additionnée d’un activateur plasmatique, pour la qui peuvent influencer le test. Quelques remarques générales sont résumées ci-dessous :
détermination du Temps de Céphaline Activée (TCA) et des tests de coagulation basés sur ce test. A) Dans la mesure où le temps de demi-vie de l’héparine est d’env. 1,5 heure5 in-vivo, le moment du
prélèvement est primordial. L’héparine administrée a un effet inhibiteur de la coagulation immédiat,
qui décroît ensuite rapidement. Ceci est particulièrement visible en cas d’injections intraveineuses
intermittentes.
B) L’anticoagulant utilisé pour le prélèvement peut influencer le résultat du test.
B4218 G20 E0501A (1137) L 3
C) L’agrégation ou l’endommagement des plaquettes peut libérer le facteur plaquettaire 4 des alpha- BCS est une marque commerciale de Siemens Healthcare Diagnostics (les valeurs indiquées pour le
granules des plaquettes, facteur qui neutralise l’héparine. Pour éviter ce phénomène in-vitro, préle- BCS® System ne tiennent pas compte des facteurs de correction utilisés aux USA).
ver les échantillons avec le plus grand soin. Dans la mesure où on sait qu’une basse température Actin, Ci-Trol et Dade sont des marques commerciales de Siemens Healthcare Diagnostics.
favorise l’agrégation des plaquettes et déclenche ainsi la libération du facteur plaquettaire 4, il est Sysmex est une marque déposée de SYSMEX CORPORATION.
recommandé de centrifuger les échantillons devant être testés pour une surveillance d’héparine à la
température ambiante.
D) La surveillance d’un traitement à l’héparine non fractionnée par un TCA est variable dans le temps.
Si un échantillon n’est pas testé immédiatement, le TCA peut être allongé. Il est donc recommandé
de tester les échantillons le plus rapidement possible après leur prélèvement.
E) Une activation de la phase contact plus longue peut entraîner un allongement du TCA pour les Édition Juin 2008
plasmas contenant de l’héparine. Le temps optimal d’incubation du mélange plasma-Dade® Actin®

Dade® Actin® FS per

FS Réactif doit donc être respecté9.
F) Les différentes méthodes (manuelle, photo-optique, etc.) ayant une sensibilité à l’héparine différente,
éviter de changer de méthode.

Reagente PTT attivata

G) Pour déterminer un TCA spécifique au patient, il est recommandé de déterminer une valeur de base
de TCA pour le patient avant le début du traitement et de la comparer au domaine normal défini par
le laboratoire.
H) Des études ont montré que les propriétés des héparines non fractionnées des différents fabricants ou

[ACTIN__FS]
provenant de différentes préparations variaient par rapport aux spécifications initialement indiquées.
La réactivité in-vivo du type d’héparine administrée varie en fonction du métabolisme du patient et
des autres médicaments simultanément administrés5,6.
I) Le TCA pouvant varier selon les techniques de travail, les méthodes, les analyseurs, les lots de réactif
et l’héparine utilisés, chaque laboratoire doit déterminer ses propres domaines thérapeutiques, et les Vedere sezioni ombreggiate - informazioni aggiornate rispetto all’edizione attuale da giugno 2006.
vérifier après chaque changement d’un ou de plusieurs de ces paramètres. Pour ce faire, mesurer
simultanément un TCA et une concentration d’héparine sur des échantillons de patients sous traite-
ment à l’héparine. Une analyse de régression permet de déterminer un rapport dose-effet ainsi que
Settore d'impiego
Fosfatidi di soia liquidi purificati con attivatore plasmatico da utilizzare nella determinazione del tempo
le domaine de TCA correspondant à une concentration d’héparine comprise entre 0,3 et 0,7 U/ml di tromboplastina parziale attivata (APTT) e in altre procedure coagulative che richiedono come reagente
(obtenue par l’inhibition du facteur Xa)4-6. la tromboplastina parziale attivata.
Contrôle de qualité interne
Domaine normale : Dade® Ci-Trol® Niveau 1 ou Plasma de contrôle N Significato diagnostico
Il tempo di tromboplastina parziale attivata, una procedura di screening globale1,2 impiegato principal-
Domaine pathologique : Dade® Ci-Trol® Niveau 2 ou Dade® Ci-Trol® Niveau 3 ou Plasma de mente per valutare le anomalie coagulative nella via intrinseca, rileva anche gravi carenze funzionali
contrôle P dei fattori II, V, X o del fibrinogeno. L'APTT è stato anche ampiamente suggerito3-6 come strumento di
Surveillance de l'héparine : Dade® Ci-Trol® Contrôles Héparine, bas et élevé monitoraggio dell'efficacia della terapia con eparina non frazionata, quando il tempo di coagulazione ri-
Introduire deux contrôles (un dans le domaine normal et un dans le domaine pathologique/thérapeutique) sulta prolungato proporzionalmente al livello di eparina. In pazienti trattati con anticoagulanti orali, i livelli
au début de chaque série d’analyses, à chaque changement de flacon réactif et au moins une fois toutes dei fattori II, VII, IX e X nel circolo sono depressi, quindi si può prevedere un prolungamento dell'APTT.
les 8 heures de travail. Traiter les contrôles comme des plasmas de patients. Chaque laboratoire doit La presenza di inibitori non specifici, come gli anticoagulanti tipo lupus1,7, può prolungare l'APTT, ma
déterminer ses propres domaines de confiance pour les contrôles. Ceux-ci correspondent généralement questo effetto è variabile ed è generalmente riconosciuto essere maggiormente correlato alla natura del
à ± 2 à ± 2,5 déviations standard (DS) par rapport à la valeur moyenne de chaque contrôle. Si les valeurs reagente APTT impiegato. In sintesi, l'APTT è un test clinicamente rilevante con ampia applicazione
nella diagnosi di disordini coagulativi e per il monitoraggio terapeutico di patologie sia emorragiche che
des contrôles sortent de leur domaine de confiance, vérifier les contrôles, les réactifs ainsi que l’appareil trombotiche.
utilisés. Il est recommandé de documenter toutes les mesures qui ont été prises pour identifier puis
résoudre le problème, avant de rendre les résultats des patients. Déterminer de nouveaux domaines Principio del metodo
pour les contrôles à chaque changement de lot de réactif ou de contrôle. I fattori del sistema intrinseco della coagulazione sono attivati incubando il plasma con la quantità ottima-
Calcul des résultats d'analyse le di fosfolipidi e con un attivatore di superficie. L'aggiunta di ioni calcio innesca il processo coagulativo,
Le résultat du test TCA doit être rendu en secondes ; le comparer au domaine normal déterminé par le successivamente al quale viene misurato il tempo di coagulazione.
laboratoire pour le TCA. Il est recommandé de transmettre au médecin traitant le résultat de TCA accom-
pagné du domaine normal. Les valeurs des contrôles obtenues pour le test ne doivent pas être utilisées Reagenti
comme domaine normal pour les échantillons de patients. Par ailleurs, des erreurs d’interprétation sont Contenuto della confezione
possibles si seuls les TCA allongés sont indiqués, dans la mesure où des TCA diminués peuvent égale- [ACTIN__ FS], [REF] B4218-20
ment correspondre à des troubles du système de la coagulation.
10 x 2 mL, [ACTIN__ FS], Dade® Actin® Reagente FS
Limites du test [ACTIN__ FS], [REF] B4218-100
Le TCA englobe tout le processus de coagulation, depuis l’activation de la phase contact jusqu’à la for- 10 x 10 mL, [ACTIN__ FS], Dade® Actin® Reagente FS
mation de fibrine, et est donc, par rapport aux techniques de travail modifiées, plus sensible que les tests
spécifiques à chaque facteur ; aussi le contrôle et la détermination du TCA sont-ils soumis à des contrain- Composizione
tes particulières. Les conditions de conservation des échantillons plasmatiques sont particulièrement im- Dade® Actin® Reagente FS da utilizzarsi per la determinazione dell'APTT: fosfatidi di soia purificati in
portantes. Des études ont montré que des échantillons non refroidis se dégradent plus rapidement. Dans 1,0 x 10-4 M di acido ellagico, con aggiunta di tampone, stabilizzanti e conservante. Non sono stati definiti
la mesure où on observe sur les très petits volumes de plasma des modifications physiologiques du pH e accettati standard di potenza per i fosfatidi di soia purificati.
entraînant une dégradation des éléments plasmatiques du système de la coagulation, il est déconseillé
de fractionner le plasma en très petites parties aliquotes avant le test. Avvertenze e precauzioni
Il faut noter que le résultat du TCA peut être influencé par une série de médicaments fréquemment Solo per uso diagnostico in vitro.
prescrits. Selon la littérature, les traitements à l’oestrogène conjugué chez l’homme ainsi que la prise Preparazione dei reagenti
de contraceptifs oraux chez la femme entraînent une diminution du TCA10,11. Un allongement du TCA Dade® Actin® Reagente FS deve essere miscelato delicatamente per inversione (5 - 8 volte) prima del l'uso.
a été observé en cas d’administration de diphénylhydantoine, d’héparine, de warfarine, de naloxone et
de produits de contraste pour radiologie12,13. Des doses thérapeutiques d’Hirudin ou d’autres inhibiteurs Conservazione e validità
directs de la thrombine peuvent entraîner des temps de coagulation allongés14. Les résultats peuvent Dopo l'uso, conservare il contenitore chiuso a +2/+8 °C. Se conservato chiuso a +2/+8 °C, Dade® Actin®
également être influencés par l’anticoagulant choisi (par ex. de l’oxalate au lieu du citrate), ainsi que par Reagente FS può essere utilizzato entro la data di scadenza indicata sull'etichetta. Una volta aper-
l’état de l’échantillon (par ex. hémolytique, lipémique, alimentation artificielle, etc.), tout particulièrement to, il reagente è stabile per 7 giorni a +2/+15 °C. Non congelare. Se il reagente viene lasciato fermo,
en cas de détermination optique du TCA6,15,16. può formarsi un deposito di colore verde costituito da acido ellagico e lipidi. Miscelare per inversione
Un déficit en facteurs de la coagulation, qui devrait entraîner un allongement du temps de la coagula- prima dell'uso. Evitare la contaminazione con plasma. Le informazioni relative alla stabilità on board sono
tion, peut être partiellement ou même totalement masqué par un taux élevé d’un ou de plusieurs autres specificate nelle Guide di riferimento (Protocolli Applicativi) per i vari analizzatori per coagulazione.
facteurs, de sorte que des valeurs normales peuvent être alors mesurées. De même, la présence d’in- Indici di scadenza: deviazioni dai normali valori di laboratorio nella determinazione del plasma
termédiaires actifs qui ont tendance à réduire le temps de coagulation, peut compenser une situation normale o dei controlli.
qui devrait normalement provoquer un allongement du TCA. Un déficit léger ou modéré en différents
facteurs de la coagulation peut avoir un effet additif d’allongement du TCA. La présence de substances Materiale necessario ma non fornito
apparentées au Lupus anticoagulant peut influencer le TCA effectué avec Dade® Actin® FS Réactif. Cloruro di calcio (CaCl2) soluzione da 0,025 mol/L
Un résultat de TCA inattendu doit toujours être vérifié par d’autres tests de la coagulation afin d’en Plasma di controllo N o Dade® Ci-Trol® Livello 1 come controllo per l'intervallo di normalità
déterminer la cause. Plasma di controllo P o Dade® Ci-Trol® Livello 2 o Dade® Ci-Trol® Livello 3 come controllo per l'intervallo
L’action de l’héparine comme anticoagulant dépend de sa capacité, en liaison avec les cofacteurs du patologico/terapeutico
plasma, à interférer avec différentes parties du système de la coagulation, retardant ainsi la formation de Dade® Ci-Trol® Controllo eparina, basso
fibrine (cf. paragraphe "Surveillance d’un traitement à l’héparine non fractionnée par le TCA").
Dade® Ci-Trol® Controllo eparina, alto
Siemens a validé l’utilisation de ces réactifs sur plusieurs analyseurs afin d’optimiser les performances
du produit et répondre à ses spécifications. Les modifications apportées par l’utilisateur ne sont pas sous Per il prelievo di sangue, usare sodio citrato (0,11 o 0,13 mol/L / 3,2 o 3,8 %) oppure sistemi per il prelievo
la responsabilité de Siemens dans la mesure où elles peuvent affecter les performances du système di sangue disponibili in commercio.
et les résultats des dosages. Il est de la responsabilité de l’utilisateur de valider toutes modifications Acqua distillata o deionizzata senza conservanti
apportées à ces instructions ou à l’utilisation des réactifs sur les analyseurs autres que ceux mentionnés Provette di plastica
dans les protocoles d’application Siemens ou dans la présente notice d’utilisation. Pipette di precisione da 0,1 mL
Les résultats de ce test doivent toujours être interprétés en rapport avec les antécédents médicaux du Analizzatore per coagulazione (vedere la sezione "Strumentazione")
patient, les signes cliniques et autres constatations.
Strumentazione
Valeurs normales Dade® Actin® Reagente FS può essere utilizzato manualmente o su analizzatori per coagulazione auto-
Les domaines de référence varient d’un laboratoire à l’autre selon la population à étudier, ainsi que selon matici. Siemens Healthcare Diagnostics fornisce Guide di riferimento (Protocolli Applicativi) per diversi
les techniques de travail, les méthodes, les analyseurs et les réactifs utilisés. Aussi chaque laboratoire analizzatori per coagulazione. Le Guide di riferimento (Protocolli Applicativi) contengono informazioni
doit-il déterminer ses propres domaines de référence en fonction des techniques de travail et des mé- sulla manipolazione e sulle prestazioni specifiche per i diversi analizzatori/test che possono essere di-
thodes qu’il applique, ainsi que des analyseurs et des lots de réactifs qu’il utilise, et vérifier ses domaines verse da quelle fornite nelle presenti Istruzioni per l'uso. In tal caso, le informazioni contenute nelle
de référence après tout changement d’un des paramètres. Guide di riferimento (Protocolli Applicativi) sostituiscono le informazioni delle presenti Istruzioni per l’uso.
Dans le cadre d’une étude effectuée sur des sujets apparemment sains, les valeurs suivantes ont été Consultare anche il manuale di istruzioni del produttore dello strumento!
obtenues avec un lot spécifique de Dade® Actin® FS Réactif :
Raccolta e preparazione dei campioni
médiane 90 % du domaine de référence (secondes) Mescolare 9 parti di sangue fresco del paziente con 1 parte di soluzione di citrato di sodio da 0,11 o 0,13 mol/L
(secondes) (3,2 % o 3,8 %). In commercio sono disponibili provette sottovuoto contenenti l'anticoagulante desiderato,
che possono essere utilizzate con la dovuta attenzione negli studi sulla coagulazione del sangue. Per studi
111 échantillons sur 5ème percentile 95ème percentile speciali, può essere preferibile la tecnica di prelievo mediante siringa.
Sysmex® CA-1500 25,1 Centrifugare il campione di sangue a 1500 x g per almeno 15 minuti a temperatura ambiente non appe-
22,1 28,1
na possibile dopo il prelievo. Conservare in una provetta sigillata a temperatura ambiente.
111 échantillons sur Se occorre eseguire il test immediatamente, il plasma può rimanere sopra la frazione corpuscolata.
BCS® System 26,8 23,0 31,9 Diversamente, il plasma deve essere separato dalla frazione corpuscolata. Separare il plasma trasfe-
rendolo in una provetta di plastica per mezzo di una pipetta di plastica. Non conservare in ghiaccio. Il
Pour d’autres collectifs de patients, par ex. pédiatriques, il peut être nécessaire de déterminer un domaine plasma non eparinato deve essere testato entro 4 ore dalla raccolta del campione.
de référence spécifique. Il plasma contenente eparina non frazionata deve essere centrifugato entro 1 ora dal prelievo del
Remarque : selon le document CLSI C28-A2 (cité dans H 47-A)17,18, il est possible d’utiliser une appro- campione, conservato a temperatura ambiente e testato entro 4 ore.
che paramétrique (valeur moyenne ± 2 DS). La possibilité de cette approche (distribution Il plasma povero di piastrine può essere congelato a ≤ -20 °C per un periodo massimo di 2 settimane in un
gaussienne normale) doit cependant être vérifiée. congelatore senza sistema di sbrinamento. Il plasma congelato deve essere scongelato rapidamente
a +37 °C, miscelato delicatamente e testato immediatamente. I campioni non devono restare a una
Caractéristiques du test temperatura di +37 °C per più di 5 minuti. Per maggiori informazioni sulla preparazione e conservazione
del campione, consultare il documento CLSI H21-A58.
Des études de précision effectuées avec les méthodes indiquées ont donné dans le domaine normal
une déviation standard (DS) correspondant à une coefficient de variation (CV) inférieur à 4 %. D’autres
études cliniques ont porté sur des mesures en double d’un plasma de contrôle anormal (avec un temps
de coagulation d’env. 50 secondes) sur une période de 22 jours. Les valeurs obtenues ont montré que les
valeurs de TCA variaient de moins de 4 % dans des conditions de réalisation du test correctes.

Littérature B4218 G20 E0501A (1137)

Voir la notice d’utilisation en anglais.

B4218 G20 E0501A (1137) L 4

Esecuzione del test In uno studio su individui apparentemente sani, utilizzando un lotto specifico di Dade® Actin® Reagente
FS sono stati ottenuti i seguenti dati:
Esecuzione manuale:
Mediana (secondi) Intervallo di riferimento del 90 % (secondi)
Preriscaldare la soluzione di cloruro di calcio a + 37 °C
111 individui 5° percentile 95° percentile
Preriscaldare 0,1 mL di Dade® Actin® Reagente FS per 1 minuto a +37 °C (mescolando prima dell'uso)
Sysmex® CA-1500 25,1 22,1 28,1
Dispensare nelle provette come segue:
111 individui
Campione in esame Plasma di controllo
Sistema BCS® 26,8 23,0 31,9
Dade® Actin® Reagente FS (preriscaldato) 0,1 mL 0,1 mL
Plasma 0,1 mL - Definire, ove richiesto, anche gli intervalli di riferimento per altre popolazioni, come i gruppi pediatrici.
Plasma di controllo - 0,1 mL Nota: il documento CLSI C28-A2 (citato in H47-A)17,18 stabilisce che è possibile applicare un approccio
parametrico (media ± 2 DS). L'assunzione di tale approccio (distribuzione gaussiana normale)
Miscelare bene. Incubare per 3 minuti a +37 °C. deve tuttavia essere verificata.

Soluzione di cloruro di calcio 0,1 mL 0,1 mL Caratteristiche del test

preriscaldata Studi di precisione con l'impiego delle metodologie indicate nel presente foglietto mostrano che i test
Contemporaneamente all'aggiunta di CaCl2 avviare il APTT eseguiti correttamente devono produrre una deviazione standard (DS) che corrisponde a un coef-
cronometro e mescolare bene. Dopo 20 secondi iniziare ficiente di variazione (CV) di meno del 4 % nell'intervallo di normalità. In altri studi clinici, sono state
l'osservazione della formazione del coagulo. eseguite determinazioni in duplicato di un plasma di controllo con valori anormali (tempi di coagulazione
di circa 50 secondi) su un periodo di 22 giorni. I risultati indicano che l'APTT dovrebbe concordare entro
Nota: tempi di incubazione superiori a 5 minuti possono causare perdita dei fattori V e VIII e non sono il 4 %, se il test è eseguito correttamente.
consigliabili.
Ogni laboratorio deve determinare il tempo di incubazione-attivazione ideale per il proprio sistema di Bibliografia
analisi. Vedere le istruzioni per l’uso in lingua inglese.
Monitoraggio della terapia con eparina non frazionata mediante APTT
Quando si utilizza l'APTT per questo scopo, occorre tenere in considerazione i fattori che influenzano il BCS è un marchio di Siemens Healthcare Diagnostics. (I valori dichiarati per il sistema BCS® non consi-
test. Le considerazioni generali sono elencate qui di seguito. derano i fattori di correzione utilizzati negli Stati Uniti.)
A) L'orario del prelievo è importante poiché l'emivita in-vivo dell'eparina non frazionata è di circa 1,5 ore5. Actin, Ci-Trol e Dade sono marchi di Siemens Healthcare Diagnostics.
Quando viene somministrata, ha un immediato effetto anticoagulante, ma il grado di tale effetto dimi- Sysmex è un marchio registrato di SYSMEX CORPORATION.
nuisce rapidamente nel tempo. Ciò è particolarmente evidente per singole somministrazioni venose
intervallate.
B) L'anticoagulante utilizzato nella raccolta del campione può alterare i risultati del test.
C) Il fattore piastrinico 4, un fattore di neutralizzazione dell'eparina rilasciato dagli alfa-granuli piastrinici,
viene rilasciato a seguito di aggregazione o danno piastrinico. Per prevenire tale fenomeno in-vitro, Edizione Giugno 2008
il campione deve essere raccolto riducendo al minimo il trauma. È noto che le basse temperature in-
ducono aggregazione piastrinica e rilasciano il fattore piastrinico 4; pertanto, per gli studi sull'eparina,
si raccomanda di centrifugare il campione a temperatura ambiente.
D) L'utilizzo dell'APTT per monitorare la terapia con eparina non frazionata dipende dal tempo. Un
ritardo nell'analisi dei campioni produce risultati di APTT prolungati. Quindi è basilare che le analisi
Reactivo Dade® Actin® FS para
la determinación del aPTT
su tutti i campioni siano eseguite il più presto possibile.
E) Aumentati tempi di attivazione da contatto possono produrre APTT prolungati nel plasma contenente
eparina. È basilare che il tempo di incubazione-attivazione della miscela di Dade® Actin® Reagente
FS/plasma sia rigidamente standardizzato9.
F) Sistemi analitici diversi (manuale, foto-ottico, ecc.) mostrano sensibilità variabile all'eparina. Evitare
quindi di scambiare sistemi analitici diversi.
G) Ove possibile, è consigliabile determinare il valore basale dell'APTT di ogni paziente prima di avviare
[ACTIN__FS]
la terapia, per determinare l'APTT di ogni paziente rispetto all'intervallo di normalità definito per il test
nel laboratorio in uso.
Observe las secciones resaltadas - Es información actualizada de la edición anterior desde el
H) Degli studi hanno mostrato una variabilità nelle stime originali circa la qualità dell'eparina non fra- junio 2006.
zionata proveniente da fonti e da produttori diversi. La reattività in-vivo varia in funzione del tipo
di eparina somministrata, del metabolismo del soggetto e della somministrazione concomitante di
farmaci5,6. Campos de aplicación
I) Poiché il valore di APTT può variare secondo la tecnica, il metodo, la strumentazione, il lotto di rea- Solución purificada de fosfátidos de soja con activador plasmático para la determinación del tiempo
de tromboplastina parcial activada (aPTT) y otros procesos de coagulación basados en un reactivo
gente e l'eparina utilizzati, ogni laboratorio deve stabilire i propri intervalli terapeutici, oppure verificare de tromboplastina parcial activada.
tali intervalli al variare di una o più delle condizioni citate. Ciò può essere ottenuto determinando
simultaneamente l'APTT e la concentrazione di eparina su campioni di pazienti in terapia eparinica. Significado diagnóstico
È possibile estrapolare dai dati una curva dose-risposta applicando l'analisi della regressione e de- La determinación del tiempo de tromboplastina parcial activada (aPTT) es una prueba de chequeo
terminare l'intervallo di APTT corrispondente a una concentrazione di eparina pari a 0,3 - 0,7 U/mL global1,2 la cual se utiliza básicamente para la evaluación de anormalidades del sistema intrínseco de
(tramite un test di inibizione del fattore Xa)4-6. coagulación, pero que igualmente indica una deficiencia funcional grave de los factores II, V, X o del fibri-
Controllo di qualità interno nógeno. La determinación del aPTT es además una prueba reconocida3-6 para controlar la eficacia de la
Intervallo normale: Dade® Ci-Trol® Livello 1 o Plasma di controllo N terapia con heparina no fraccionada, en donde la prolongación del tiempo de coagulación es proporcio-
nal al nivel de heparina. En pacientes bajo una terapia con anticoagulantes orales se espera igualmente
Intervallo patologico: Dade® Ci-Trol® Livello 2 o Dade® Ci-Trol® Livello 3 o Plasma di controllo P una prolongación del aPTT, ya que en estos pacientes los niveles circulantes de los factores II, VII, IX y
Monitoraggio dell'eparina: Dade® Ci-Trol® Controllo eparina, basso e alto X están disminuidos. La existencia de sustancias inhibidoras no específicas, como sustancias similares
Eseguire due controlli (uno nell'intervallo di normalità e uno nell'intervallo patologico/terapeutico) all'inizio al anticoagulante lúpico1,7, pueden ocasionar una prolongación del aPTT; sin embargo, este efecto es
del ciclo di analisi, dopo ogni cambio di flacone di reagente e almeno una volta ogni 8 ore. Il materiale variable y por lo general se va a atribuir, ante todo, a la composición del reactivo de aPTT utilizado.
del controllo deve essere preparato e analizzato allo stesso modo dei campioni dei pazienti. Ogni labo- Resumiendo, se puede decir que la determinación del aPTT es una prueba de chequeo de gran valor
ratorio deve stabilire i propri intervalli di confidenza per i controlli. Questo intervallo è generalmente da clínico, con grandes posibilidades de aplicación para el diagnóstico de alteraciones de la coagulación y
para el control de las terapias de pacientes con tendencia a las hemorragias o a la trombosis.
± 2 a ± 2,5 deviazioni standard (DS) dalla media del valore di controllo. Se i valori di controllo sono al di
fuori dell'intervallo di confidenza, occorre verificare i controlli, i reagenti e lo strumento. Prima di refertare Principio del método
i valori dei pazienti, si raccomanda di documentare tutte le azioni intraprese per identificare e correggere La incubación del plasma con una cantidad óptima de fosfolípidos y un activador de superficie conduce
il problema. Definire dei nuovi intervalli di controllo per ogni nuovo lotto di reagenti o di controlli. a la activación de los factores del sistema endógeno de la coagulación. Al añadir los iones de calcio
Calculo dei risultati se desencadena el proceso de coagulación. A continuación, se mide el tiempo transcurrido hasta la
I risultati del test del tempo di tromboplastina parziale attivata devono essere refertati come APTT in formación del coágulo.
secondi. Tali risultati devono essere messi in relazione con l'intervallo di normalità dell'APTT in ogni labo-
ratorio. Si consiglia di refertare i risultati dei pazienti per il clinico insieme all'intervallo di normalità. I valori Reactivos
di controllo del sistema di analisi del reagente non devono mai essere utilizzati al posto dell'intervallo di Contenido del envase comercial
normalità. Inoltre, refertare i risultati di APTT solo in termini di limite superiore normale potrebbe portare [ACTIN__ FS], [REF] B4218-20
a un’interpretazione non corretta. Risultati di APTT accorciati possono indicare anche una condizione
anormale nel sistema coagulativo del paziente. 10 x 2 ml, [ACTIN__ FS], Reactivo Dade® Actin® FS
[ACTIN__ FS], [REF] B4218-100
Limitazioni della esecuzione del test
Il test APTT comprende l'intero processo coagulativo dall'attivazione da contatto alla formazione della 10 x 10 ml, [ACTIN__ FS], Reactivo Dade® Actin® FS
fibrina ed è quindi più suscettibile alle variazioni rispetto ai singoli test specifici. Il controllo e l'utilizzo Composición
dell'APTT sono quindi soggetti a limitazioni intrinseche. Si raccomanda in particolare il controllo delle Reactivo Dade® Actin® FS para la determinación del aPTT: fosfátidos de soja purificados en 1,0 x 10-4 M
condizioni del campione di plasma. Studi hanno dimostrato che la decomposizione del campione può ve- de ácido elágico, con tampón, estabilizadores y agentes de conservación añadidos. No existen valores
rificarsi più rapidamente in campioni non conservati in frigorifero. Evitare volumi di plasma estremamente estándar disponibles para la actividad de los fosfátidos de soja purificados.
bassi (prima dell'analisi) poiché si possono verificare delle variazioni nel pH del plasma rispetto alle
condizioni fisiologiche. Tali variazioni possono condurre alla decomposizione dei componenti plasmatici Advertencias y medidas de seguridad
deputati alla coagulazione del sangue. Sólo para uso diagnóstico in-vitro.
Si noti che il test dell'APTT può essere influenzato da diversi farmaci di uso comune. È stata riportata una
diminuzione del tempo della determinazione di APTT nei maschi in terapia con estrogeni coniugati e nelle Preparación del reactivo
donne in terapia contraccettiva orale10,11. È stato notato un aumento dell'APTT nella somministrazione El reactivo Dade® Actin® FS debe mezclarse con cuidado invirtiendo el frasco (de 5 a 8 veces) antes de
di difenilidantoina, eparina, warfarina, naloxone e mezzi di contrasto radiografici12,13. Dosi terapeutiche usarlo por primera vez.
di irudina o di altri inibitori diretti della trombina possono prolungare i tempi di coagulazione14. Inoltre, la Estabilidad y almacenaje
scelta dell'anticoagulante (ad es. citrato rispetto a ossalato) e la condizione del campione (ad es. emo- Una vez utilizado, el reactivo se ha de almacenar con el frasco cerrado entre +2 y +8 °C. Si se guarda
lizzato, lipemico, nutrizione parenterale, ecc.) possono influenzare i risultati6,15,16. sin abrir entre +2 y +8 °C, el reactivo Dade® Actin® FS podrá usarse hasta la fecha de caducidad
Quest'ultimo è particolarmente importante per le misurazioni di APTT con strumenti ottici. Le carenze di indicada en la etiqueta. Una vez utilizado se ha de almacenar con el frasco tapado entre +2 y +15 °C
fattori coagulativi che potrebbero produrre tempi di coagulazione prolungati possono essere compen- y su estabilidad es de 7 días. No congelar. Si el reactivo se deja en reposo, puede llegarse a producir
sate o rese apparentemente normali da elevati livelli di uno o più diversi fattori della coagulazione. Allo un precipitado verde de ácido elágico y de lípidos. Antes de usarlo se debe mezclar por inversión. Evite
stesso modo, la presenza di intermedi attivi che tenderebbero a ridurre il tempo di coagulazione può la contaminación del plasma. Encontrará información sobre la estabilidad dentro del equipo para los
mascherare anche condizioni che normalmente condurrebbero a un prolungamento dell'APTT. Carenze distintos analizadores de coagulación en las Guías de Referencia (Hojas de Aplicación).
lievi o minime di fattori diversi possono avere un effetto aggiuntivo nell'allungamento dell'APTT. Dade® Indicios de deterioro: Desviación de los valores normales del laboratorio para la determinación
Actin® Reagente FS potrebbe fornire risultati di APTT variabili in campioni contenente il coagulante tipo del plasma normal o de los controles.
lupus. Risultati di APTT inaspettatamente anormali devono essere sempre seguiti da ulteriori studi sulla
coagulazione per determinare l'origine di tali risultati anormali. Materiales adicionales necesarios
L'azione dell'eparina come anticoagulante è legata alla sua capacità di interferire, unitamente a un cofat- Solución de cloruro de calcio (CaCl2) 0,025 mol/l
tore plasmatico, con diversi aspetti del meccanismo coagulativo, ritardando quindi la formazione di fibrina Plasma Control N o Dade® Ci-Trol® nivel 1 como control para el intervalo normal
(vedere la sezione "Monitoraggio della terapia con eparina non frazionata mediante APTT"). Plasma Control P o Dade® Ci-Trol® nivel 2 o Dade® Ci-Trol® nivel 3 como control para el intervalo pa-
Siemens ha validato l’uso di questi reagenti su vari analizzatori per ottimizzare le prestazioni e rispettare tológico/terapéutico
le specifiche dei prodotti. Le modifiche definite dall’utente non sono supportate da Siemens poiché Dade® Ci-Trol® Heparina control bajo
possono influire sulle prestazioni del sistema e sui risultati del test. Pertanto è responsabilità dell’utente
validare tutte le modifiche apportate a queste istruzioni, l’uso dei reagenti su analizzatori diversi da quelli Dade® Ci-Trol® Heparina control alto
inclusi nei fogli di istruzioni o nelle istruzioni d’uso fornite da Siemens. Para la extracción de sangre, usar citrato sódico (0,11 o 0,13 mol/l o bien al 3,2 o al 3,8 %) o un sistema
I risultati di questo test devono essere sempre interpretati alla luce della anamnesi del paziente, della de extracción de sangre existente en el mercado.
presentazione clinica e valutando contestualmente l’esito di altri accertamenti. Agua destilada o desionizada sin agentes de conservación
Tubos de plástico
Valori attesi Pipetas para la medida exacta de 0,1 ml
Gli intervalli di riferimento variano da un laboratorio all’altro, in funzione della popolazione servita e della
tecnica, del metodo, dell’apparecchiatura e del lotto di reagente utilizzato. Ogni laboratorio deve, quindi, Analizadores de coagulación (véase “Analizadores”)
stabilire i propri intervalli di riferimento o verificarli nel caso in cui una o più variabili precedentemente
menzionate siano cambiate.

B4218 G20 E0501A (1137) L 5

Analizadores Limitaciones del Procedimiento
El reactivo Dade® Actin® FS puede utilizarse con métodos manuales o en analizadores de coagulación La determinación del aPTT comprende el proceso completo de la coagulación, desde la activación
automáticos. Siemens Healthcare Diagnostics pone a disposición Guías de Referencia (Hojas de Aplica- por contacto hasta la formación de fibrina y es, por tanto, más susceptible a las variaciones que otras
ción) para varios analizadores de coagulación. Las Guías de Referencia (Hojas de Aplicación) contienen pruebas individuales específicas. Por esta razón, el control y el uso del aPTT están sometidos a limita-
información específica sobre el manejo y el rendimiento correspondientes a los analizadores/ensayos ciones especiales. El control de las condiciones de las muestras de plasma es de gran importancia. Hay
que puede diferir de la ofrecida en estas instrucciones de utilización. En ese caso, la información con- experimentos que demuestran que las muestras sin congelar sufren una descomposición más rápida.
tenida en las Guías de Referencia (Hojas de Aplicación) reemplaza la información de las presentes Se deben evitar volúmenes de plasma muy pequeños (antes de realizar la determinación) ya que se
instrucciones de utilización. Le recomendamos que consulte también el manual de instrucciones del pueden presentar cambios fisiológicos dependientes del valor del pH y dichos cambios pueden provocar
fabricante del analizador. la descomposición de los componentes plasmáticos del sistema de coagulación de la sangre.
Es importante observar que los resultados del aPTT pueden estar influenciados por una serie de medi-
Extracción y preparación de la muestra camentos de prescripción frecuente. De acuerdo con estudios realizados, un tratamiento con estróge-
Mezclar nueve partes de una muestra de sangre del paciente recién extraída con una parte de citrato nos conjugados en hombres y la toma de anticonceptivos orales en mujeres llevan a un descenso del
sódico (0,11 o 0,13 mol/l o bien al 3,2 o al 3,8 %). En el mercado pueden adquirirse tubos con vacío que aPTT10,11. Se ha observado que la aplicación de difenilhidantoina, heparina, warfarina, naloxona y medio
contienen el anticoagulante deseado y pueden usarse con precaución en los estudios de coagulación. de contraste de radiografías puede producir una prolongación del aPTT12,13. Las dosis terapéuticas de
Para estudios especiales se recomienda la extracción con jeringuilla. hirudina y de otros inhibidores directos de la trombina pueden producir tiempos prolongados de coagu-
Centrifugar las muestra de sangre lo antes posible una vez realizada la extracción durante un mínimo lación14. Además, la elección del anticoagulante (p. ej., oxalato en lugar de citrato) y la condición de la
de 15 minutos a 1500 x g y a temperatura ambiente. Almacenar en un tubo cerrado a temperatura muestra (p. ej. hemolítica, lipémica, alimentación parenteral, etc.) pueden afectar a los resultados6,15,16.
ambiente. El último caso se da especialmente en las mediciones del aPTT con equipos ópticos. Una deficiencia
Si el análisis se efectúa inmediatamente, el plasma se puede dejar con el sedimento de eritrocitos. De no en los factores de la coagulación, que ocasionaría una prolongación del tiempo de coagulación, puede
ser así, se deberá separar el plasma. Separar el plasma con una pipeta de plástico y pasarlo a un tubo quedar enmascarada debido a la existencia de un nivel elevado de algunos de los factores de la coagu-
de plástico. No conservar en hielo. El plasma no heparinizado debe analizarse en un plazo de cuatro lación. Igualmente, debido a la existencia de intermediarios activos que tienen la tendencia a acortar el
(4) horas a partir de la extracción. tiempo de coagulación, se pueden enmascarar estados que en otro caso podrían ocasionar una prolon-
El plasma que contiene heparina no fraccionada debe centrifugarse en un plazo de una hora a partir de gación del aPTT. Una deficiencia de grado ligero o moderado de diferentes factores puede sumarse y
la extracción, conservarse a temperatura ambiente y analizarse en un plazo máximo de (4) horas. ocasionar una prolongación del aPTT. El reactivo Dade® Actin® FS puede generar resultados de aPTT
El plasma pobre en plaquetas puede congelarse a ≤ -20 °C durante un máximo de (2) semanas en un variables en el caso de muestras que contengan un anticoagulante similar al anticoagulante lúpico. Si
congelador que no cree escarcha. El plasma congelado debe descongelarse rápidamente a +37 °C, se obtienen resultados anormales imprevistos, deberán realizarse otros estudios de coagulación adicio-
mezclarse con cuidado y analizarse de forma inmediata. Las muestras no deben permanecer a +37 °C nales para determinar el origen de la anormalidad.
más de cinco minutos. Consulte el documento H21-A5 del CLSI8 para obtener información detallada La acción de la heparina como anticoagulante está relacionada con su habilidad de actuar en unión con
sobre la preparación y el almacenamiento de las muestras. cofactores del plasma sobre distintos aspectos del sistema de la coagulación, lo que finalmente conduce
a un retraso de la formación de fibrina (véase apartado “Monitorización de la terapia con heparina no
Procedimiento fraccionada mediante la determinación del aPTT").
Siemens ha validado el uso de los reactivos en varios analizadores para optimizar el rendimiento del
Prueba manual: producto y cumplir con las especificaciones del mismo. Las modificaciones definidas por el usuario no
están garantizadas por Siemens dado que pueden afectar al rendimiento del sistema y a los resultados
Precalentar la solución de cloruro de calcio a +37 °C del ensayo. Es responsabilidad del usuario validar las modificaciones realizadas a estas instrucciones o
Precalentar a +37 °C 0,1 ml de reactivo Dade® Actin® FS durante un minuto (mezclar antes de usar). el uso de los reactivos en analizadores distintos a los incluidos en las hojas de aplicaciones de Siemens
o en estas instrucciones de uso.
Pipetear en tubos de coagulación de la siguiente manera: Los resultados de esta prueba deberán interpretarse siempre de acuerdo con la historia clínica del
paciente, la sintomatologia clínica y otras observaciones.
Muestra Plasma control
Reactivo Dade® Actin® FS (precalentado) 0,1 ml 0,1 ml Valores esperados
Los intervalos de referencia varían de un laboratorio a otro, dependiendo de la población atendida y de la
Plasma 0,1 ml - técnica, el método, el equipo y el lote de reactivos utilizados. Por ello, cada laboratorio debe establecer
Plasma control - 0,1 ml sus propios intervalos de referencia o verificarlos cada vez que alguna de las variables mencionadas
cambie.
Mezclar bien. Incubar a +37 °C durante 3 minutos.
En un estudio de sujetos aparentemente sanos utilizando un lote específico de reactivo Dade® Actin® FS
Solución de cloruro de calcio 0,1 ml 0,1 ml se obtuvieron los siguientes valores:
precalentada
A la vez que se agrega el CaCl2, accionar cronómetro, Mediana 90 % intervalo de referencia (segundos)
mezclar bien. Comprobar la coagulación a partir de los (segundos)
20 segundos.
111 sujetos Percentil 5 Percentil 95
Nota: No se recomienda un tiempo de incubación de más de 5 minutos, pues se puede producir una Sysmex® CA-1500 25,1 22,1 28,1
pérdida de los factores V y VIII.
El tiempo óptimo de precalentamiento para la activación debe ser fijado por cada laboratorio dependien- 111 sujetos
do del sistema de ensayo utilizado. Sistema BCS® 26,8 23,0 31,9
Monitorización de la terapia con heparina no fraccionada mediante la determinación del aPTT
Para el control de la terapia con heparina por medio de la determinación del aPTT se deben tener en Para otros colectivos, como por ej., pacientes pediátricos, se debe determinar, en cada caso, su propio
cuenta los factores que pueden influir en el resultado de la prueba. A continuación, están resumidas intervalo de referencia.
algunas advertencias generales importantes. Nota: Según los documentos C28-A2 del CLSI (citado en H47-A)17,18 se puede aplicar una estimación
A) El tiempo de la extracción es importante, puesto que el tiempo in-vivo media de la heparina no paramétrica (media ± 2 DE). La aceptación de esta estimación (Distribución normal de Gauss)
fraccionada es de aproximadamente 1,5 horas5. La heparina aplicada posee una acción inhibidora debe, sin embargo, comprobarse.
inmediata de la coagulación, la cual disminuye también rápidamente. Este efecto se observa clara-
mente en cuanto se aplican inyecciones intravenosas aisladas. Características del test
Los estudios de precisión realizados con los métodos enumerados dieron en el intervalo normal una
B) El anticoagulante utilizado para la extracción de la sangre puede alterar los resultados de la prue- desviación estándar (DE), que corresponde a un coeficiente de variación (CV) menor del 4 %. En otros
ba. estudios clínicos se realizaron determinaciones por duplicado de un plasma control patológico (con un
C) Por agregación o por daño de las plaquetas puede ser liberado el factor 4 de los gránulos alfa plaque- tiempo de coagulación aproximado de 50 segundos) durante un período de 22 días. De los valores
tarios, que neutraliza la heparina. Para evitar este tipo de procesos in-vitro, las muestras deben ser obtenidos se deduce que la diferencia de los valores del aPTT, con un desarrollo correcto de la prueba,
extraídas cuidadosamente. Dado que se conoce que la baja temperatura desencadena la agregación no supera el 4 %.
de las plaquetas y la liberación del factor 4 plaquetario, las muestras para el estudio con heparina
deben ser centrifugadas a temperatura ambiente.
D) El control de la terapia con heparina no fraccionada mediante la determinación del aPTT depende
Bibliografía
del tiempo de análisis. Los retrasos en el procesamiento de la muestra pueden ocasionar prolonga- Ver instrucciones de utilización en inglés.
ciones en la determinación del aPTT, razón por la cual las muestras deben ser procesadas lo antes BCS es una marca comercial de Siemens Healthcare Diagnostics. (Los valores referidos al sistema
posible. BCS® no incluyen los factores de corrección aplicados en los USA.)
E) En plasmas que contienen heparina puede producirse una prolongación del aPTT debido a un alar- Actin, Ci-Trol y Dade son marcas comerciales de Siemens Healthcare Diagnostics.
gamiento del tiempo de la activación de contacto. razón por la cual es necesario establecer una nor-
malización estricta en cuanto al tiempo óptimo de activación del calentamiento dado para la mezcla Sysmex es una marca registrada de SYSMEX CORPORATION.
de reactivo Dade® Actin® FS y plasma9.
F) Ya que las diferentes metodologías (p. ej., manual, foto-óptica, etc.) poseen una sensibilidad a la
heparina diferente, se debe evitar el cambio del método utilizado.
G) Para encontrar los valores del aPTT específicos del paciente, se debe determinar en la medida de
lo posible el valor básico del paciente antes de empezar el tratamiento y compararse con el intervalo Edición Junio 2008
normal propio del laboratorio.

Dade® Actin® FS Reagente

H) Diversos estudios han demostrado que la calidad de la heparina no fraccionada obtenida de diversos
orígenes o fabricantes se desvía de las especificaciones estimadas inicialmente. La reactividad in-vivo
varía en función de la heparina aplicada, del metabolismo del paciente y de otros medicamentos utili-
zados al mismo tiempo5,6.
I) Ya que el aPTT puede variar dependiendo de las técnicas de trabajo, métodos, instrumentos, lotes
de reactivo y de la heparina utilizados, cada laboratorio debe determinar su propio intervalo terapéu-
tico o verificarlo cada vez que se modifique alguno de los parámetros mencionados anteriormente.
para a determinação do APTT
Esto se puede llevar a cabo mediante la determinación simultánea de aPTT y de la concentración
de heparina en muestras de pacientes sometidos a un tratamiento con heparina. Por medio de un
análisis de regresión de los datos se puede establecer una curva de dosis-respuesta y el intervalo
de aPTT correspondiente a una concentración de heparina de 0,3 a 0,7 U/ml (determinada por una
prueba de inhibición del factor Xa)4-6.
[ACTIN__FS]
Control de calidad interno
Secções sombreadas - Informações actualizadas versus a edição de junho de 2006.
Rango normal: Dade® Ci-Trol® nivel 1 o Plasma control N
Rango patológico: Dade® Ci-Trol® nivel 2 o Dade® Ci-Trol® nivel 3 o Plasma control P Campo de aplicação
Monitorización de heparina: Dade® Ci-Trol® Heparina, control bajo y alto Solução de fosfolípidos de soja purificada com activador de plasma para a determinação do tempo
Se deben medir dos controles (uno en el intervalo normal y otro en el intervalo patológico/terapéutico) parcial activado de Tromboplastina (APTT) e outros procedimentos de coagulação que requeiram um
al comienzo de cada serie de pruebas, con cada cambio del frasco de reactivo y por lo menos una vez reagente de tromboplastina parcial activado.
durante una jornada de trabajo de 8 horas. El material de control debe prepararse y procesarse del
mismo modo que las muestras de pacientes. Cada laboratorio debe establecer sus propios intervalos Significado diagnóstico
de confianza para los controles. Este intervalo se basa normalmente en ± 2 a ± 2,5 desviaciones O tempo parcial de Tromboplastina activado (APTT), um procedimento de triagem global1,2, usado prio-
estándar (DE) del valor medio del control. Si los valores de los controles se encuentran fuera del inter- ritariamente para avaliar anomalias do sistema de coagulação endógeno no percurso intrínseco detecta,
valo de confianza, se deben comprobar los controles, los reactivos y el analizador. Antes de informar igualmente, deficiências funcionais graves de factores II, V, X ou de fibrinogénio. Além disso, a determi-
de los resultados de los pacientes, se recomienda documentar todos los pasos seguidos con el fin de nação do APTT consiste num teste3-6 reconhecido universalmente para a monitorização da terapia da
identificar y eliminar el problema. Para cada nuevo lote de reactivos o de controles se deben definir heparina não fraccionada, sendo que o prolongamento do tempo de coagulação é proporcional ao nível
nuevos intervalos de control. de heparina. Nos pacientes sujeitos a uma anticoagulação oral é de esperar, igualmente, um prolonga-
mento do APTT, uma vez que, nestes pacientes, os factores circulantes II, VII, IX e X estão diminuídos.
Resultados Efectivamente, a existência de substâncias supressoras não específicas tais como as substâncias se-
Los resultados de las pruebas del tiempo de tromboplastina parcial activada deben darse como aPTT melhantes de anticoagulação do Lúpus1,7 pode provocar um prolongamento do APTT, mas esse efeito
en segundos y se deben comparar con el intervalo normal propio del laboratorio para la determinación é variável e é, geralmente, atribuído antes à composição do reagente de APTT utilizado. Resumindo,
del aPTT. Se recomienda informar de los resultados del paciente junto con el intervalo de normalidad pode afirmar-se que a determinação do APTT constitui um valioso teste clínico de triagem com largas
del laboratorio. Los valores de los controles del sistema de pruebas no se deben utilizar en lugar de un possibilidades de utilização no diagnóstico das perturbações de coagulação e na monitorização da
intervalo de normalidad. Además de esto, cuando solamente se informan valores elevados del aPTT, terapia de pacientes com propensão para hemorragias ou tromboses.
son posibles interpretaciones erróneas, ya que un valor bajo del aPTT también puede estar indicando
anomalías en el sistema de coagulación del paciente. Princípio do método
A incubação de plasma com a quantidade optimizada de fosfolípidos e um activador superficial provoca
a activação dos factores do sistema de coagulação endógeno. O processo de coagulação é desenca-
deado com a adição de iões de cálcio e é medido o tempo que decorre até à formação do coágulo de
fibrina.

B4218 G20 E0501A (1137) L 6

Reagentes G) Para a determinação do APTT específico do paciente, o valor básico APTT do paciente deverá ser
determinado e comparado com o intervalo normal próprio do laboratório, de preferência antes do
Conteúdo da embalagem início da terapia.
[ACTIN__ FS], [REF] B4218-20 H) Estudos demonstraram que as características da heparina não fraccionada proveniente de diferentes
10 x 2 ml, [ACTIN__ FS], Dade® Actin® FS Reagente fabricantes e fontes divergem das especificações admitidas originalmente. A reactividade In-Vivo
depende do tipo da heparina administrada, do metabolismo do paciente e dos outros medicamentos
[ACTIN__ FS], [REF] B4218-100 utilizados simultaneamente5,6.
10 x 10 ml, [ACTIN__ FS], Dade® Actin® FS Reagente I) Como o APTT pode variar consoante a técnica, método, equipamento, lote de reagentes e heparina
utilizados, cada laboratório deve estabelecer os seus próprios intervalos terapêuticos ou verificá-los
Composição sempre que uma ou mais das variáveis acima mencionadas for alterada. Isto pode ser feito determi-
Dade® Actin® FS Reagente para a determinação do APTT: fosfolípidos de soja purificada em ácido nando simultaneamente o APTT e a concentração de heparina em amostras de pacientes em trata-
elágico 1,0 x 10-4 M, tamponado, estabilizado e conservado. Os valores standard para a actividade dos mento com heparina. A curva de resposta à dose pode ser calculada a partir dos dados que utilizam
fosfolípidos de soja purificada não estão disponíveis. a análise de regressão e o intervalo de APTT correspondente a uma concentração de heparina de
Advertências e medidas de precaução 0,3 – 0,7 U/ml (por um teste de inibição do factor Xa) pode ser calculado4-6.
Apenas para utilização em diagnóstico in-vitro. Controlo interno de qualidade
Intervalo normal: Dade® Ci-Trol® Level 1, ou Plasma de Controlo N
Preparação dos reagentes
Intervalo patológico: Dade® Ci-Trol® Level 2, ou Dade® Ci-Trol® Level 3, ou Plasma de
Dade® Actin® FS Reagente deve ser misturado cuidadosamente por inversão (5 a 8 vezes) antes de Controlo P
utilizar.
Monitorização da heparina: Dade® Ci-Trol® Controlo de Heparina, baixa e alta
Estabilidade e condições de armazenagem No início de uma série de teste, em cada mudança de frasco de reagente e uma vez, no mínimo, durante
Depois de utilizar, conservar fechado entre +2 e +8 °C. Não aberto e conservado entre +2 e +8 °C, o um turno de 8 horas, deverão ser medidos dois controlos (um no intervalo normal e um no intervalo
Dade® Actin® FS Reagente pode ser utilizado até à data indicada no rótulo. Depois de aberto, o patológico/terapêutico). O material de controlo deverá ser tratado como as amostras do paciente. Cada
reagente mantém-se estável durante 7 dias entre +2 e +15 °C. Não congelar. Se se deixar o reagente laboratório deverá determinar o seu intervalo de confiança próprio para controlos. Normalmente, este
em repouso, pode ocorrer a formação de uma precipitação verde de ácido elágico e lípidos. Antes de apresenta desvios standard (SD) de ± 2 a ± 2,5 em relação ao valor de controlo médio. Se os valores
utilizar, misturar invertendo. Evitar a contaminação com plasma. A informação acerca da estabilidade de controlo se situarem fora do intervalo de confiança, é necessário controlar os controlos, os reagentes
no equipamento está especificada nos guias de consulta (folhas de instruções de aplicação) para os e o aparelho. É aconselhável documentar todas as medidas que foram tomadas para a constatação e
diferentes analisadores. eliminação do problema antes da divulgação dos valores de pacientes. Para cada lote de reagente ou
Indício de caducidade: Desvios do valor laboratorial normal na determinação de plasma normal controlo novo deverão ser definidos intervalos de controlo novos.
ou controlos. Resultados
Materiais necessários mas não fornecidos O resultado do teste APTT deverá ser emitido em segundos e comparado com o intervalo normal do
Solução de cloreto de cálcio (CaCl2) 0,025 mol/l próprio laboratório para as determinações do APTT. Recomenda-se ao médico que faz o tratamento que
comunique o APTT juntamente com o intervalo normal. Os valores de controlo obtidos para o sistema de
Plasma de Controlo N ou Dade® Ci-Trol® Level 1 como controlo para o intervalo normal teste de reagentes não devem ser utilizados como intervalo normal para as amostras de pacientes. Além
Plasma de Controlo P ou Dade® Ci-Trol® Level 2 ou Dade® Ci-Trol® Level 3, como controlo para o disso, se na emissão de resultados só sobressaírem valores elevados de APTT, tal poderá provocar
intervalo patológico/terapêutico interpretações incorrectas, uma vez que um APTT curto também pode indiciar anomalias no sistema
Dade® Ci-Trol® Controlo de heparina, baixa de coagulação.
Dade® Ci-Trol® Controlo de heparina, alta
Utilizar citrato de sódio (0,11 ou 0,13 mol/l / 3,2 ou 3,8 %) para a colheita de sangue ou sistemas de
Limitações do procedimento
colheita de sangue comerciais. A determinação de APTT abrange o processo de coagulação global desde a activação de contacto,
até à formação de fibrina e é, por essa razão, mais sensível em relação às técnicas de trabalho modifi-
Água destilada ou desionizada sem conservantes cadas, do que os testes individuais específicos, pelo que, o controlo e a determinação de APTT estão
Tubos de plástico sujeitos a restrições especiais. As condições de conservação das amostras de plasma revestem-se de
Pipetas para a medição exacta de 0,1 ml uma importância especial. Estudos demonstraram que as amostras não refrigeradas estão sujeitas a
Analisador de coagulação (ver "Equipamento") uma decomposição mais rápida. Uma vez que os volumes de plasma extremamente diminutos podem
provocar alterações fisiológicas do valor do pH e a subsequente decomposição dos componentes de
Equipamento plasma do sistema de coagulação do sangue, não é aconselhável proceder ao doseamento de volumes
Dade® Actin® FS Reagente pode ser utilizado manualmente ou em analisadores de coagulação automa- muito pequenos antes do teste.
tizados. A Siemens Healthcare Diagnostics fornece guias de consulta (folhas de instruções de aplica- Deverá ser tomado em consideração que o resultado do teste APTT pode ser influenciado por uma
ção) para vários analisadores de coagulação. Os guias de consulta (folhas de instruções de aplicação) multiplicidade de medicamentos prescritos frequentemente. De acordo com publicações efectuadas as
contêm informações específicas sobre o manuseamento e desempenho do analisador/teste que podem terapias com estrogénio conjugado nos homens e a toma de contraceptivos orais nas mulheres, provo-
diferir das fornecidas nestas instruções. Numa situação destas, as informações contidas nos guias de cam uma redução do APTT10,11. Foi observado um prolongamento do APTT com a administração de di-
consulta (folhas de instruções de aplicação) substituem as informações nestas instruções. Consulte fenildiantoína, heparina, varfarina, naloxona e produtos de contraste radiológico12,13. Doses terapêuticas
ainda o manual de instruções do fabricante do aparelho! de hirudina ou de outros inibidores directos da trombina podem prolongar os tempos de coagulação14.
Além disso, os resultados6,15,16 podem ser influenciados pelo anticoagulante seleccionado (p. ex., oxalato
Colheita e preparação de amostras em vez de citrato), assim como pelas características de amostra (p.ex. hemolítica, lipémica, alimenta-
ção parenteral, etc.) que têm particular significado na determinação óptica do APTT. A deficiência de
Misturar nove partes de sangue do paciente de uma colheita fresca com uma parte de citrato de sódio factores de coagulação do sangue, que provoca um prolongamento do tempo de coagulação, pode ser
(de 0,11 ou 0,13 mol/l, a 3,2 % ou 3,8 % respectivamente). Podem ser utilizados os sistemas correntes compensada parcial ou integralmente através de níveis elevados de um ou vários outros factores de
de colheita de sangue para testes de coagulação com o anticoagulante pretendido. Para as séries de coagulação, de forma que, em determinadas circunstâncias, são medidos valores normais. Do mesmo
estudos especiais, pode ser vantajosa a técnica de colheita com seringa. modo, a presença de intermediários activos que encurtam, tendencialmente, o tempo de coagulação,
Centrifugar a amostra de sangue a 1500 x g durante nunca menos de 15 minutos, à temperatura ambien- pode compensar situações que provocariam, caso contrário, um prolongamento do APTT. A deficiência
te logo que possível a seguir à colheita. Conservar num tubo não aberto à temperatura ambiente. leve ou moderada de vários factores pode ter um efeito aditivo no prolongamento do APTT. Eventual-
Se a análise for efectuada imediatamente, o plasma pode ficar no sedimento de eritrócitos. Caso con- mente, a presença de substâncias anticoagulantes semelhantes ao Lúpus pode influenciar a determina-
trário poderá ser separado das células. Para separar o plasma, utilize uma pipeta de transferência de ção com o Dade® Actin® FS Reagente. No caso de os resultados de APTT serem duvidosos, deverão os
plástico e retire o plasma para um tubo de plástico. Não conservar em gelo. O plasma não heparinizado mesmos ser controlados com mais testes de coagulação e a causa ser detectada.
deve ser testado nas quatro (4) horas seguintes à colheita de sangue. A eficácia da heparina como anticoagulante está relacionada com as suas características que lhe per-
O plasma contendo heparina não fraccionada deve ser centrifugado no espaço de uma hora a seguir à mitem actuar sobre diversas áreas parciais do sistema de coagulação, em conexão com os factores
colheita de sangue, conservado à temperatura ambiente e testado no espaço de quatro (4) horas. plasmáticos, o que, em última análise, provoca um retardamento da formação de fibrina (ver secção
O plasma pobre em plaquetas pode ser congelado a ≤ -20 °C durante um máximo de duas (2) semanas "Monitorização da terapia da heparina não fraccionada com APTT").
num congelador não frost-free. O plasma congelado deve ser rapidamente descongelado a +37 °C, A Siemens validou a utilização destes reagentes em vários analisadores, com o intuito de optimizar o
misturado cuidadosamente e analisado imediatamente. As amostras não devem ficar a uma tempera- desempenho do produto e satisfazer as especificações do produto. As modificações definidas pelo utili-
tura de +37 °C durante mais de cinco minutos. Consulte o documento CLSI H21-A58 para obter mais zador não são suportadas pela Siemens, na medida em que podem afectar o desempenho do sistema
informações sobre a preparação e conservação das amostras.
e os resultados do ensaio. Constitui responsabilidade do utilizador validar as modificações efectuadas
nestas instruções ou em relação ao uso dos reagentes noutros analisadores que não os incluídos nas
Procedimento folhas de instruções de aplicação da Siemens ou nestas instruções de utilização.
Teste manual: Os resultados deste teste devem sempre ser interpretados em conjunto com o histórico médico do
doente, estado clínico e outros dados de interesse.
Aquecer previamente a solução de cloreto de cálcio a +37 °C
Valores esperados
Aquecer previamente 0,1 ml do Dade® Actin® FS Reagente durante um minuto a +37 °C. Os intervalos de referência variam de laboratório para laboratório, dependendo da população servida, da
(Misturar antes de utilizar) técnica, do método, do equipamento e do lote de reagentes utilizados. Por conseguinte, cada laboratório
tem que estabelecer os seus próprios intervalos de referência ou verificá-los sempre que uma ou mais
Pipetar para tubos de coagulação da seguinte maneira: das variáveis acima mencionadas sejam alteradas.
Amostra a examinar Plasma de Controlo Num estudo em indivíduos aparentemente saudáveis, com um lote específico de Dade® Actin® FS Rea-
gente foram encontrados os seguintes valores:
Dade® Actin® FS Reagente (pré-aquecido) 0,1 ml 0,1 ml
Plasma 0,1 ml - Mediana Intervalo de referência de 90 % (segundos)
Plasma de Controlo - 0,1 ml (segundos)
Misturar bem. Incubar a +37 °C durante 3 minutos. 111 indivíduos Percentil 5 Percentil 95
Sysmex® CA-1500 25,1 22,1 28,1
Solução de cloreto de cálcio 0,1 ml 0,1 ml
pré-aquecida 111 indivíduos
Ao adicionar CaCl2 ligar o cronómetro; misturar bem. Após
20 segundos, comece a observar a formação de coágulos. Sistema BCS® 26,8 23,0 31,9
Se for necessário, para os outros grupos de pacientes, tais como, p. ex., os pacientes pediátricos, deverão
Nota: Não é aconselhável um tempo de incubação superior a 5 minutos, caso contrário pode verificar-se ser determinados intervalos de referência próprios.
a perda dos factores V e VIII. Nota: De acordo com o documento C28-A2 do CLSI (citado em H47-A)17,18 pode ser usado o princípio
O tempo optimizado de pré-aquecimento para a activação deverá ser definido por cada laboratório em paramétrico (valor médio ± 2 SD). Todavia, é necessário verificar o pressuposto deste princípio
função do sistema de teste utilizado. (distribuição gaussiana normal).
Monitorização da terapia da heparina não fraccionada com APTT
Para a monitorização da terapia de heparina através da determinação de APTT, é necessário tomar em
Características do teste
consideração os factores que podem ter influência no resultado do teste. Seguidamente, apresenta-se Os estudos de precisão com os métodos descritos demonstram um desvio do standard (s) no intervalo
o resumo de algumas indicações gerais: normal que corresponde a um coeficiente de variação (CV) inferior a 4 %. Em outros estudos clínicos,
foram executadas determinações duplas de um plasma de controlo anormal (com um tempo de coagu-
A) Uma vez que o valor de semi-vida da heparina não fraccionada In-Vivo é de aprox. 1,5 horas, o lação de aprox. 50 segundos) durante um período de tempo de 22 dias. Dos valores obtidos conclui-se
momento da colheita de sangue tem uma importância decisiva5. A heparina administrada possui que os valores do APTT no intervalo normal produzem um CV inferior a 4 % no caso do teste ser
um efeito que provoca imediatamente a supressão da coagulação, efeito esse que diminui outra executado correctamente.
vez, rapidamente. Este efeito pode ser observado com especial evidência nas injecções individuais
intravenosas administradas intermitentemente.
B) O anticoagulante usado para a colheita da amostra pode influenciar os resultados do teste.
Bibliografia
C) Com a agregação ou deterioração das plaquetas, o factor de plaqueta 4, um factor neutralizador de Ver Instruções em inglês.
heparina, pode ser libertado dos grânulos alfa das plaquetas. Para evitar estes processos In-Vitro, BCS é uma marca comercial da Siemens Healthcare Diagnostics. (Os valores indicados para o sistema
é necessário colher as amostras com o máximo cuidado. Uma vez que, como é sabido, as baixas BCS® não tomam em consideração os factores de correcção utilizados nos EUA).
temperaturas desencadeiam a agregação de plaquetas e, por conseguinte, a libertação do Factor
de plaqueta 4, as amostras para os testes de heparina devem ser centrifugadas à temperatura am- Actin, Ci-Trol e Dade são marcas comerciais da Siemens Healthcare Diagnostics.
biente. Sysmex é uma marca registada da SYSMEX CORPORATION.
D) A monitorização da terapia com heparina não fraccionada através da determinação APTT depende
do tempo. Os atrasos no processamento das amostras podem provocar um prolongamento do APTT.
Por conseguinte, as amostras têm de ser analisadas o mais cedo possível.
E) O prolongamento da activação do contacto no plasma que contém heparina pode provocar o prolon-
gamento do APTT. Por isso, é preciso respeitar o tempo de incubação optimizado da mistura Dade®
Actin® FS Reagente-plasma9. Edição Junho 2008
F) Uma vez que os diferentes métodos de teste (p. ex., manual, foto-óptico) possuem sensibilidades à
heparina diferentes, deverá evitar-se a mudança do método utilizado.

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